Name: improved renal denervation mitigated hypertension induced by angiotensin ii infusion
Uploaded: 2022-05-26T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Improved Renal Denervation Mitigated Hypertension Induced by Angiotensin II Infusion at JoVE.com

Detta arbete stöddes av National Natural Science Foundation of China (81770420), Science and Technology Commission of Shanghai Municipality (20140900600), Shanghai Key Laboratory of Clinical Geriatric Medicine (13dz2260700), Shanghai Municipal Key Clinical Specialty (shslczdzk02801) och Center of geriatric coronary artery disease, Huadong Hospital Affiliated to Fudan University.

Alla djurförsöksförfaranden överensstämde med den relevanta etiska guiden för vård och användning av försöksdjur (NIH-publikation nr 85-23, reviderad 2011) och godkändes av kommittéerna för djurforskning vid Huadong Hospital anslutna till Fudan University. Fjorton veckor gamla manliga C57BL/6-möss (28-30 g) delades slumpmässigt in i fyra grupper: Sham-grupp, Sham+Ang II-grupp, RDN-grupp, RDN+Ang II-grupp, n = 6 i varje grupp. Alla djur hölls under specifika slutna patogenfria förhållanden i ett temperat...

<ol>
	<li>Messerli, F. H., Rimoldi, S. F., Bangalore, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+transition+from+hypertension+to+heart+failure:+Contemporary+update.">The transition from hypertension to heart failure: Contemporary update.</a> JACC Heart Failure. 5 (8), 543-551 (2017).</li><li>Lackland, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implications+of+recent+clinical+trials+and+hypertension+guidelines+on+stroke+and+future+cerebrovascular+research.">Implications of recent clinical trials and hypertension guidelines on stroke and future cerebrovascular research.</a> Stroke. 49 (3), 772-779 (2018).</li><li>Rossignol, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+double+challenge+of+resistant+hypertension+and+chronic+kidney+disease.">The double challenge of resistant hypertension and chronic kidney disease.</a> The Lancet. 386 (10003), 1588-1598 (2015).</li><li>Du, X., Patel, A., Anderson, C. S., Dong, J., Ma, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+cardiovascular+disease+in+China+and+opportunities+for+improvement.">Epidemiology of cardiovascular disease in China and opportunities for improvement.</a> JACC International. Journal of the American College of Cardiology. 73 (24), 3135-3147 (2019).</li><li>Valenzuela, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lifestyle+interventions+for+the+prevention+and+treatment+of+hypertension.">Lifestyle interventions for the prevention and treatment of hypertension.</a> Nature Review Cardiology. 18 (4), 251-275 (2021).</li><li>Krum, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheter-based+renal+sympathetic+denervation+for+resistant+hypertension:+a+multicentre+safety+and+proof-of-principle+cohort+study.">Catheter-based renal sympathetic denervation for resistant hypertension: a multicentre safety and proof-of-principle cohort study.</a> The Lancet. 373 (9671), 1275-1281 (2009).</li><li>Bhatt, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+controlled+trial+of+renal+denervation+for+resistant+hypertension.">A controlled trial of renal denervation for resistant hypertension.</a> The New England Journal of Medicine. 370 (15), 1393-1401 (2014).</li><li>Kjeldsen, S. E., Narkiewicz, K., Burnier, M., Oparil, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+achieved+by+endovascular+delivery+of+ultrasound+in+RADIANCE-HTN+SOLO+or+by+radiofrequency+energy+in+SPYRAL+HTN-OFF+and+SPYRAL-ON+lowers+blood+pressure.">Renal denervation achieved by endovascular delivery of ultrasound in RADIANCE-HTN SOLO or by radiofrequency energy in SPYRAL HTN-OFF and SPYRAL-ON lowers blood pressure.</a> Blood Press. 27 (4), 185-187 (2018).</li><li>B&#246;hm, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+catheter-based+renal+denervation+in+the+absence+of+antihypertensive+medications+(SPYRAL+HTN-OFF+MED+Pivotal):+a+multicentre,+randomised,+sham-controlled+trial.">Efficacy of catheter-based renal denervation in the absence of antihypertensive medications (SPYRAL HTN-OFF MED Pivotal): a multicentre, randomised, sham-controlled trial.</a> The Lancet. 395 (10234), 1444-1451 (2020).</li><li>Azizi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+ultrasound+renal+denervation+to+treat+hypertension+(RADIANCE-HTN+SOLO):+a+multicentre,+international,+single-blind,+randomised,+sham-controlled+trial.">Endovascular ultrasound renal denervation to treat hypertension (RADIANCE-HTN SOLO): a multicentre, international, single-blind, randomised, sham-controlled trial.</a> The Lancet. 391 (10137), 2335-2345 (2018).</li><li>Kandzari, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+renal+denervation+on+blood+pressure+in+the+presence+of+antihypertensive+drugs:+6-month+efficacy+and+safety+results+from+the+SPYRAL+HTN-ON+MED+proof-of-concept+randomised+trial.">Effect of renal denervation on blood pressure in the presence of antihypertensive drugs: 6-month efficacy and safety results from the SPYRAL HTN-ON MED proof-of-concept randomised trial.</a> The Lancet. 391 (10137), 2346-2355 (2018).</li><li>Townsend, R. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheter-based+renal+denervation+in+patients+with+uncontrolled+hypertension+in+the+absence+of+antihypertensive+medications+(SPYRAL+HTN-OFF+MED):+a+randomised,+sham-controlled,+proof-of-concept+trial.">Catheter-based renal denervation in patients with uncontrolled hypertension in the absence of antihypertensive medications (SPYRAL HTN-OFF MED): a randomised, sham-controlled, proof-of-concept trial.</a> The Lancet. 390 (10108), 2160-2170 (2017).</li><li>Sun, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+restrains+the+inflammatory+response+in+myocardial+ischemia-reperfusion+injury.">Renal denervation restrains the inflammatory response in myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Basic Research in Cardiology. 115 (2), 15 (2020).</li><li>Sharp, T. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+prevents+heart+failure+progression+via+inhibition+of+the+renin-angiotensin+system.">Renal denervation prevents heart failure progression via inhibition of the renin-angiotensin system.</a> Journal of the American College of Cardiology. 72 (21), 2609-2621 (2018).</li><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+attenuates+progression+of+atherosclerosis+in+apolipoprotein+E-deficient+mice+independent+of+blood+pressure+lowering.">Renal denervation attenuates progression of atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice independent of blood pressure lowering.</a> Hypertension. 65 (4), 758-765 (2015).</li><li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+mitigates+atherosclerosis+in+ApoE-/-+mice+via+the+suppression+of+inflammation.">Renal denervation mitigates atherosclerosis in ApoE-/- mice via the suppression of inflammation.</a> American Journal of Translational Research. 12 (9), 5362-5380 (2020).</li><li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+promotes+atherosclerosis+in+hypertensive+apolipoprotein+E-deficient+mice+infused+with+Angiotensin+II.">Renal denervation promotes atherosclerosis in hypertensive apolipoprotein E-deficient mice infused with Angiotensin II.</a> Frontiers in Physiology. 8, 215 (2017).</li><li>Eriguchi, M., Tsuruya, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+sympathetic+denervation+in+rats.">Renal sympathetic denervation in rats.</a> Methods in Molecular Biology. 1397, 45-52 (2016).</li><li>Thukkani, A. K., Bhatt, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+therapy+for+hypertension.">Renal denervation therapy for hypertension.</a> Circulation. 128 (20), 2251-2254 (2013).</li><li>Zhang, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NAD(+)+administration+decreases+microvascular+damage+following+cardiac+ischemia/reperfusion+by+restoring+autophagic+flux.">NAD(+) administration decreases microvascular damage following cardiac ischemia/reperfusion by restoring autophagic flux.</a> Basic Research in Cardiology. 115 (5), 57 (2020).</li><li>Wang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+renal+sympathetic+denervation+ameliorates+renal+fibrosis+and+delays+the+onset+of+hypertension+in+spontaneously+hypertensive+rats.">Long-term renal sympathetic denervation ameliorates renal fibrosis and delays the onset of hypertension in spontaneously hypertensive rats.</a> American Journal of Translational Research. 10 (12), 4042-4053 (2018).</li><li>Lu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subcutaneous+Angiotensin+II+infusion+using+osmotic+pumps+induces+aortic+aneurysms+in+mice.">Subcutaneous Angiotensin II infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (103), e53191 (2015).</li><li>Wilde, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tail-cuff+technique+and+its+influence+on+central+blood+pressure+in+the+mouse.">Tail-cuff technique and its influence on central blood pressure in the mouse.</a> Journal of the American Heart Association. 6 (6), 005204 (2017).</li><li>Daugherty, A., Rateri, D., Hong, L., Balakrishnan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+blood+pressure+in+mice+using+volume+pressure+recording,+a+tail-cuff+method.">Measuring blood pressure in mice using volume pressure recording, a tail-cuff method.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (27), e1291 (2009).</li><li>Esler, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Illusions+of+truths+in+the+Symplicity+HTN-3+trial:+generic+design+strengths+but+neuroscience+failings.">Illusions of truths in the Symplicity HTN-3 trial: generic design strengths but neuroscience failings.</a> Journal of the American Society of Hypertension. 8 (8), 593-598 (2014).</li><li>Han, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-dose+sustained-release+deoxycorticosterone+acetate-induced+hypertension+in+Bama+miniature+pigs+for+renal+sympathetic+nerve+denervation.">Low-dose sustained-release deoxycorticosterone acetate-induced hypertension in Bama miniature pigs for renal sympathetic nerve denervation.</a> Journal of the American Society of Hypertension. 11 (5), 314-320 (2017).</li><li>Han, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+safety+of+renal+denervation+as+assessed+by+optical+coherence+tomography:+pre-+and+post-procedure+comparison+with+multi-electrode+ablation+catheter+in+animal+experiment.">The safety of renal denervation as assessed by optical coherence tomography: pre- and post-procedure comparison with multi-electrode ablation catheter in animal experiment.</a> Hellenic Journal of Cardiology. 61 (3), 190-196 (2020).</li><li>Cai, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+stereotactic+radiotherapy+for+renal+denervation+in+a+swine+model.">Noninvasive stereotactic radiotherapy for renal denervation in a swine model.</a> Journal of the American College of Cardiology. 74 (13), 1697-1709 (2019).</li></ol>

Huruvida RDN kunde sänka blodtrycket har blivit kontroversiellt sedan publiceringen av det negativa resultatet av Symplicity HTN-3-studien 7,25. De flera kliniska prövningarna och djurförsöken har dock visat positiva och effektiva resultat av RDN på hypertensiva människor och djur 9,10,11,12,13,14,15,16,17.<sup class="x...

Hypertoni är en stor kronisk hjärt-kärlsjukdom runt om i världen. Okontrollerad hypertoni kan skada målorgan och bidra till hjärtsvikt, stroke och kroniska njursjukdomar 1,2,3. Förekomsten av högt blodtryck har ökat från 20% till 31% mellan 1991 och 2007 i Kina. Antalet vuxna med högt blodtryck i Kina kan fördubblas efter en nyligen genomförd översyn av de diagnostiska kriterierna för högt blodtryck (130/80 mmHg)4. Hypertoni kan kontrolleras av medicin, men cirka 20% av patienterna kan inte kontrollera sin hypertoni, även när de får minst tre antihypertensiva läkemedel (inklusive ett diuretikum) vid maximalt tolererad dos, vilket kan leda till utveckling av läkemedelsresistent hypertoni5.
Renal sympatisk denervation (RDN) har visat sig vara en potentiell behandling för högt blodtryck. År 2009 rapporterade Krum och kollegor resistent hypertonibehandling med RDN för första gången. Det visade sig att perkutan njurartärablation effektivt kan orsaka ihållande blodtryckssänkning hos patienter6. Misslyckandet med Symplicity Hypertension 3 (HTN-3) -studien hindrade dock tillämpningen av RDN7, vilket gjorde RDN till en kontroversiell terapi. Ändå har utsikterna till RDN ännu inte uteslutits. Nyligen genomförda kliniska prövningar, inklusive RADIANCE-HTN SOLO, SPYRAL HTN-OFF MED/ON MED och SPYRAL HTN-OFF MED Pivotal har bekräftat effekten av RDN på hypertoni 8,9,10,11,12. Således måste mer detaljerad mekanistisk forskning utföras för att utforska effekterna av RDN.
Det övergripande syftet med denna studie är att visa hur RDN hos möss kan modifieras för att ge en enklare och stabilare operation. Ett stort antal experiment har studerat olika tillvägagångssätt för RDN, såsom intravaskulär kryoablation, extrakorporealt ultraljud och lokal tillämpning av en kemikalie eller neurotoxin i olika djurmodeller 13,14,15,16,17. RDN-modellen som genereras med kemisk ablation med fenol är en väletablerad experimentell modell för att studera patogenesen av sympatisk aktivering vid högt blodtryck. Denna modell genereras av kemisk korrosion av njurens sympatiska nerver med 10% fenol / etanollösning med användning av en bomullspinne18. Å ena sidan hämmar den konventionella RDN potentiellt njursympatisk aktivitet, vilket sedan minskar reninsekretion och natriumreabsorption och ökar njurblodflödet. Å andra sidan undertrycker det renin-angiotensin-aldosteronsystem19. Därmed har RDN en positiv effekt på högt blodtryck. Den kemiska ablationsgenererade RDN-modellen saknar dock ablationskriterier och ablationstid och detaljerna i det experimentella förfarandet är ännu oklara. Det finns inte heller några tekniska rapporter tillgängliga. I denna rapport beskriver vi ett kirurgiskt protokoll för generering av RDN-modell med fenol med hjälp av vägpapper i Angiotensin II (Ang II) inducerad hypertoni hos C57BL/6-möss. Vi lindar njurartären med vägningspapper som innehåller fenol och förenar ablationstiden, vilket hjälper till att skapa en mer reproducerbar, pålitlig RDN-modell. Denna experimentella modell syftar till att utvärdera effekten av RDN på högt blodtryck.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Angiotensin II</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>CAS:4474-91-3</td>
			<td>To make a hypertensive animol model</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Tyrosine Hydroxylase antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab137869</td>
			<td>To evaluate the expression of TH of renal nerves</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Pressure Analysis</td>
			<td>Visitech Systems</td>
			<td>BP-2000</td>
			<td>Measure the blood pressure of mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini-osmotic pump</td>
			<td>DURECT Corporation</td>
			<td>CA 95014</td>
			<td>To fill with Angiotensin II</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Norepinephrine ELISA Kit</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab287789</td>
			<td>to measure renal norepinephrine levels</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenol</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>CAS:108-95-2</td>
			<td>Damage the renal sympathetic nerve</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weighing paper</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>F512112</td>
			<td>To destroy renal nerve with weighing paper immersed with phenol; https://www.sangon.com/productDetail?productInfo.code=F512112.&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

improved renal denervation mitigated hypertension induced by angiotensin ii infusion

Fördelarna med renal sympatisk denervation (RDN) på blodtrycket har bevisats i ett stort antal kliniska prövningar de senaste åren. Regleringsmekanismen för RDN vid högt blodtryck är dock fortfarande svårfångad. Därför är det viktigt att etablera en enklare RDN-modell hos möss. I denna studie implanterades osmotiska minipumpar fyllda med Angiotensin II i 14 veckor gamla C57BL / 6-möss. En vecka efter implantationen av den mini-osmotiska pumpen utfördes ett modifierat RDN-förfarande på bilaterala njurartärer hos mössen med användning av fenol. Ålderskönsmatchade möss fick saltlösning och fungerade som bluffgrupp. Blodtrycket mättes vid baslinjen och varje vecka därefter i 21 dagar. Därefter samlades njurartär, bukaorta och hjärta för histologisk undersökning med H&E och Massonfärgning. I denna studie presenterar vi en enkel, praktisk, repeterbar och standardiserad RDN-modell, som kan kontrollera högt blodtryck och lindra hjärthypertrofi. Tekniken kan denervera perifera njursympatiska nerver utan njurartärskador. Jämfört med tidigare modeller underlättar den modifierade RDN studien av patobiologi och patofysiologi av högt blodtryck.

Statistik Alla data uttrycks som medelvärde ± standardavvikelse. Envägs ANOVA användes för experiment med tre eller flera tillstånd följt av Bonferroni posthoc-tester för jämförelser mellan enskilda grupper. Betrakta ett p-värde som är lika med eller mindre än 0,05 som signifikant. En kommersiell programvara användes för att utföra all statistisk analys.
Ökning av blodtrycket inducerat av Ang II dämpades efter RDN Signifikant ökning av...

Watch this Scientific Journal Video about Improved Renal Denervation Mitigated Hypertension Induced by Angiotensin II Infusion at JoVE.com

Improved Renal Denervation Mitigated Hypertension Induced by Angiotensin II Infusion

Här presenterar vi ett protokoll för renal sympatisk denervation (RDN) hos möss med högt blodtryck inducerad av Angiotensin II-infusion. Förfarandet är repeterbart, bekvämt och gör det möjligt att studera regleringsmekanismerna för RDN vid högt blodtryck och hjärthypertrofi.

Förbättrad renal denervation mildrad hypertoni inducerad av Angiotensin II-infusion

The benefits of renal sympathetic denervation (RDN) on blood pressure have been proved in a large number of clinical trials in recent years. However, the ...

Renal sympatisk denervation är en potentiell behandling för högt blodtryck, vilket har bevisats av många kliniska prövningar. Denna teknik denerverar fria flöde njurnerver utan njurartärskada. Dessutom är det en enkel, kritisk, repeterbar och standardiserad modell.Demonstrerar proceduren kommer att vara Ming Wang, en laboratorieassistent från mitt laboratorium. Börja med att desinficera operationsbordet med 70% etanol och justera sedan värmedynans temperatur till 37 grader Celsius. Före operationen, sterilisera alla kirurgiska instrument, inklusive mikrokirurgiska saxar, fina raka pincett, fina böjda pincett, hemostatiska pincett, sterila gasbindor och vägpapper vid 121 grader Celsius i 30 minuter.Efter att ha bedövat en 14 veckor gammal manlig C57BKL/6-mus, ta bort håret på baksidan med en rakapparat och applicera sedan veterinärsalva på ögonen för att förhindra torrhet. Placera musen på ett operationsbord i ryggläge. Svep och torka av det rakade området med povidon-jod, följt av tre våtservetter med 70% etanol.Använd ett sterilt skalpellblad och gör ett snitt på en centimeter vinkelrätt mot svansen bakom örat över frambenets axelblad. Använd sedan en steril hemostat för att göra en subkutan tunnel under huden och skapa en ficka för pumpen. Sätt försiktigt in en osmotisk pump fylld med angiotensin II i fickan, vilket säkerställer tillräckligt med ledigt utrymme för att suturera såret utan att sträcka huden.Suturera muskeln med avbrutna 6-0 Vicryl suturer och stäng huden med avbrutna 4-0 nylon suturer. Svabba sedan och torka av sårplatsen med povidon-jod. Placera alla kirurgiska instrument i en sterilisator i 10 sekunder och byt ut de sterila handskarna mellan operationerna.Övervaka musen tills den har återhämtat sig helt. Noggrant övervaka och observera sårläkning minst två gånger om dagen under den första veckan och en gång varje dag därefter, inklusive rodnad, svullnad och infektion. Utför dissektion omedelbart om musen dör under infusion med angiotensin II.Mät blodtrycket vid baslinjen och varje vecka efter infusion med angiotensin II med pletysmografimetoden med svansmanschetten hos medvetna möss. En vecka efter infusion med angiotensin II, välj mössen med förhöjt blodtryck och registrera deras vikt. Välj djur med en minsta vikt på 24 gram för njurdenervationskirurgi.Ta sedan bort hårstrån på buken på en bedövad mus med en rakapparat och placera sedan musen på operationsbordet. Håll buken uppe och fixa lemmarna med tejp. Desinficera bukhuden med povidon-jod, följt av tre våtservetter med 70% etanol.Efter att ha gjort ett två centimeter ventralt mittlinje buksnitt, dra tillbaka tarmen med gasväv som blötläggs i 37 grader Celsius saltlösning för att exponera vänster njurartär. Försiktigt, men trubbigt, dissekera fettet bort från njurartären med hjälp av böjd pincett. Skär vägningspapperet med steril skarp sax i en rektangel av samma storlek som njurartären.Skär flera bitar av vägningspapperet åt gången för att hålla formen densamma. Doppa vägningspapperet i 10% fenoletanollösning i minst 30 sekunder. Täck ytan på vänster njurartär och linda kärlet med vägningspapperet i två minuter.Använd gasväv för att skydda de omgivande vävnaderna för att undvika att vägningspapperet rör vid njuren och tarmen. Upprepa samma procedur för rätt njurartär. Efter operationen, placera musklerna i sin ursprungliga position och stäng bukhinnan med 6-0 Vicryl suturer i ett avbrutet suturmönster och stäng sedan huden med avbrutna 4-0 nylonsuturer.Övervaka alla möss tills de är helt återställda. En signifikant ökning av systoliskt blodtryck observerades vid en vecka efter infusion med angiotensin II. Den renala sympatiska denervationen, eller RDN, angiotensin II-gruppen visade en signifikant minskning av systoliskt blodtryck jämfört med skenangiotensin II-gruppen 21 dagar efter RDN-proceduren.Ingen signifikant skillnad observerades mellan bluff- och RDN-grupper vid två veckor efter RDN-proceduren. Hematoxylin och eosinfärgning av njursympatisk nerv och njurartär visas här. Ingen förtjockning av intimskiktet i njurartären observerades i de fyra grupperna.Jämfört med shams-gruppen, fragmenterade och pyknotiska kärnor observerades matsmältning och svullnad av endoneurial vävnad i båda RDN-grupperna. Immunohistokemi i nervbuntarna avslöjade att uttrycket av tyrosinhydroxylas minskade signifikant i RDN- och RDN-angiotensin II-gruppen jämfört med båda shams-gruppen. Renal kortikal noradrenalinhalt i de denerverade njurarna i både normotensiv och hypertensiv grupp minskade signifikant jämfört med den innerverade njuren.Massonfärgning visade ingen anmärkningsvärd ökning av intima medier i bukaortan bland grupperna. Representativa bilder av myokardiet i olika grupper visas här. Angiotensin II infusionsinducerad hjärthypertrofi förbättrades genom RDN-behandling genom minskningen av interstitiell fibros och kardiomyocytstorlek.Under proceduren, rör inte fenolen till den omgivande vävnaden utom till njurartären eftersom det kan orsaka tarmobstruktion, bukinfektion och njurartärstenos. Denna metod kan skapa en standardiserad RDN-modell för att studera mekanismerna som styr högt blodtryck. Framtida tillämpningar av denna teknik kan bidra till att utöka de vägar som understryker processen med högt blodtryck och hjärthypertrofi.

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Pharmacology

Medicine

Unit 1

Cardiovascular Drugs: Antihypertensive Drugs

SCIENTISTS IN ACTION

A Laser-induced Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension to Characterize Visual Defects

En Laser-inducerad musmodell av kronisk okulär hypertension för att karaktärisera synfel

Glaucoma, frequently associated with elevated intraocular pressure (IOP), is one of the leading causes of blindness. We sought to establish a mouse model ...

Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

Tibialnerven transection - en standardiserad modell för Denervation-inducerad skelettmuskelatrofi hos möss

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

Assessment of Vascular Function in Patients With Chronic Kidney Disease

Bedömning av kärlfunktionen hos patienter med kronisk njursjukdom

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this ...

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

Tidig upptäckt av läkemedelsinducerad njur hemodynamisk dysfunktion Använda sonografisk teknik i råttor

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

Murine Kidney Transplant Technique

Murin njurtransplantation Teknik

The first mouse kidney transplant technique was published in 19731 by the Russell laboratory. Although it took some years for other labs to become ...

Subcutaneous Angiotensin II Infusion using Osmotic Pumps Induces Aortic Aneurysms in Mice

Subkutan Angiotensin II Infusion med hjälp av osmotiska pumpar inducerar aortaaneurysm hos möss

Osmotic pumps continuously deliver compounds at a constant rate into small animals.  This article introduces a standard protocol used to induce aortic ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Ny metod för samtidig inspelning av nedsatt sympatisk nervaktivitet och blodtryck med intravenös Infusion i medveten, ohämmad möss.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

Shunt Kirurgi, Höger hjärtkateterisering, och Vascular morfometri i en råttmodell för Flow-inducerad pulmonell arteriell hypertension

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Improved Registration of 3D CT Angiography with X-ray Fluoroscopy for Image Fusion During Transcatheter Aortic Valve Implantation

Förbättrad registrering av 3D CT angiografi med röntgen fluoroskopi för Image Fusion under Transcatheter aortaklaffen Implantation

The fusion of 3D anatomical models derived from high-fidelity pre-interventional computed tomography angiography (CTA), and x-ray (XR) fluoroscopy to ...

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

Vänster förmak stenos inducerad pulmonell venös Arterialization och grupp 2 Pulmonell Hypertension hos råtta

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...