Name: ensemble force spectroscopy by shear forces
Uploaded: 2022-07-26T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ensemble Force Spectroscopy by Shear Forces at JoVE.com

تم دعم هذا العمل البحثي من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم [CBET-1904921] والمعاهد الوطنية للصحة [NIH R01CA236350] إلى H. M.

ملاحظة: يتم سرد جميع المخازن المؤقتة والكواشف الكيميائية المستخدمة في هذا البروتوكول في مواد الجدول.
1. إعداد مجهر قوة القص
ملاحظة: يحتوي مجهر قوة القص على جزأين، وحدة تفاعل (مجانس) ووحدة كشف (مجهر فلوري). تكبير العدسة هو 10x ، وتكبير العدسة المو...

<ol>
	<li>Neuman, K. C., Nagy, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-molecule+force+spectroscopy:+Optical+tweezers,+magnetic+tweezers+and+atomic+force+microscopy.">Single-molecule force spectroscopy: Optical tweezers, magnetic tweezers and atomic force microscopy.</a> Nature Methods. 5 (6), 491-505 (2008).</li><li>Woodside, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanomechanical+measurements+of+the+sequence-dependent+folding+landscapes+of+single+nucleic+acid+hairpins.">Nanomechanical measurements of the sequence-dependent folding landscapes of single nucleic acid hairpins.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 103 (16), 6190-6195 (2006).</li><li>Grandbois, M., Beyer, M., Rief, M., Clausen-Schaumann, H., Gaub, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+strong+is+a+covalent+bond.">How strong is a covalent bond.</a> Science. 283 (5408), 1727-1730 (1999).</li><li>Strick, T. R., Allemand, J. F., Bensimon, D., Croquette, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavior+of+supercoiled+DNA.">Behavior of supercoiled DNA.</a> Biophysical Journal. 74 (4), 2016-2028 (1998).</li><li>Yang, D., Ward, A., Halvorsen, K., Wong, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiplexed+single-molecule+force+spectroscopy+using+a+centrifuge.">Multiplexed single-molecule force spectroscopy using a centrifuge.</a> Nature Communications. 7, 11026 (2016).</li><li>Su, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light-responsive+polymer+particles+as+force+clamps+for+the+mechanical+unfolding+of+target+molecules.">Light-responsive polymer particles as force clamps for the mechanical unfolding of target molecules.</a> Nano Letters. 18 (4), 2630-2636 (2018).</li><li>Kirkness, M. W. H., Forde, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-molecule+assay+for+proteolytic+susceptibility:+Force-induced+collagen+destabilization.">Single-molecule assay for proteolytic susceptibility: Force-induced collagen destabilization.</a> Biophysical Journal. 114 (3), 570-576 (2018).</li><li>Astumian, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermodynamics+and+kinetics+of+molecular+motors.">Thermodynamics and kinetics of molecular motors.</a> Biophysical Journal. 98 (11), 2401-2409 (2010).</li><li>Bekard, I. B., Asimakis, P., Bertolini, J., Dunstan, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+shear+flow+on+protein+structure+and+function.">The effects of shear flow on protein structure and function.</a> Biopolymers. 95 (11), 733-745 (2011).</li><li>Chistiakov, D. A., Orekhov, A. N., Bobryshev, Y. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+shear+stress+on+endothelial+cells:+go+with+the+flow.">Effects of shear stress on endothelial cells: go with the flow.</a> Acta Physiologica. 219 (2), 382-408 (2017).</li><li>Hu, C., Jonchhe, S., Pokhrel, P., Karna, D., Mao, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+unfolding+of+ensemble+biomolecular+structures+by+shear+force.">Mechanical unfolding of ensemble biomolecular structures by shear force.</a> Chemical Science. 12 (30), 10159-10164 (2021).</li><li>Sedghi Masoud, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+interactions+between+telomeric+i-motif+DNA+and+a+cyclic+tetraoxazole+compound.">Analysis of interactions between telomeric i-motif DNA and a cyclic tetraoxazole compound.</a> ChemBioChem. 19 (21), 2268-2272 (2018).</li><li>Abraham Punnoose, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adaptive+and+specific+recognition+of+telomeric+G-quadruplexes+via+polyvalency+induced+unstacking+of+binding+units.">Adaptive and specific recognition of telomeric G-quadruplexes via polyvalency induced unstacking of binding units.</a> Journal of the American Chemical Society. 139 (22), 7476-7484 (2017).</li><li>Dhakal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coexistence+of+an+ILPR+i-motif+and+a+partially+folded+structure+with+comparable+mechanical+stability+revealed+at+the+single-molecule+level.">Coexistence of an ILPR i-motif and a partially folded structure with comparable mechanical stability revealed at the single-molecule level.</a> Journal of the American Chemical Society. 132 (26), 8991-8997 (2010).</li><li>Hu, C., Tahir, R., Mao, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-molecule+mechanochemical+sensing.">Single-molecule mechanochemical sensing.</a> Accounts of Chemical Research. 55 (9), 1214-1225 (2022).</li></ol>

يسمح البروتوكول الموصوف في هذه المخطوطة بالتحقيق في الوقت الفعلي في تكشف مجموعة من الهياكل الجزيئية الحيوية بواسطة قوة القص. تؤكد النتائج المعروضة هنا أن هياكل الحمض النووي i-motif يمكن أن تتكشف بواسطة قوة القص. كان الكشف عن i-motif المرتبط بالرباط وتفاعلات النقر التي تحركها قوة القص تطبيقات إث...

في التحليل الطيفي لقوة الجزيء الواحد1 (SMFS) ، تمت دراسة الخواص الميكانيكية للهياكل الجزيئية الفردية بواسطة أدوات متطورة مثل مجهر القوة الذرية والملقط البصري والملقط المغناطيسي2،3،4. مقيدة بنفس متطلبات الاتجاه للجزيئات في إعدادات توليد / اكتشاف القوة أو مجال الرؤية الصغير في الملقط المغناطيسي ومجهر قوة الطرد المركزي المصغر (MCF) 5،6،7،8 ، يمكن التحقيق في عدد محدود فقط من الجزيئات في وقت واحد باستخدام SMFS. تمنع الإنتاجية المنخفضة ل SMFS تطبيقه على نطاق واسع في مجال التعرف الجزيئي ، مما يتطلب مشاركة مجموعة كبيرة من الجزيئات.
يوفر تدفق القص حلا محتملا لتطبيق القوى على مجموعة ضخمة من الجزيئات9. في تدفق السائل داخل القناة ، كلما اقتربت من سطح القناة ، كلما كان معدل التدفق أبطأ10. يسبب تدرج سرعة التدفق هذا إجهاد قص مواز لسطح الحدود. عندما يتم وضع جزيء في تدفق القص هذا ، يعيد الجزيء توجيه نفسه بحيث يتوافق محوره الطويل مع اتجاه التدفق ، حيث يتم تطبيق قوة القص على المحور الطويل11. نتيجة لإعادة التوجيه هذه ، من المتوقع أن تتماشى جميع الجزيئات من نفس النوع (حجم وطول المقابض) في نفس الاتجاه بينما تواجه نفس قوة القص.
يصف هذا العمل بروتوكولا لاستخدام تدفق القص هذا لممارسة قوة القص على مجموعة ضخمة من الهياكل الجزيئية ، كما يتضح من الحمض النووي i-motif. في هذا البروتوكول ، يتم إنشاء تدفق قص بين الدوار والجزء الثابت في طرف مجانس. وجدت هذه الدراسة أن بنية الحمض النووي المطوية i-motif يمكن أن تتكشف من خلال معدلات القص 9724-97245 s−1. إلى جانب ذلك ، تم العثور على ثابت تفكك يبلغ 36 ميكرومتر بين الرباط L2H2-4OTD و i-motif. وتتفق هذه القيمة مع قيمة 31 ميكرومتر المقاسة بمقايسة إزاحة الهلام12. علاوة على ذلك ، يتم استخدام التقنية الحالية لكشف شكل i-motif ، والذي يمكن أن يعرض النحاس المخلبي (I) لتحفيز تفاعل النقر. وبالتالي يسمح هذا البروتوكول للمرء بالكشف عن مجموعة كبيرة من هياكل i-motif مع أدوات منخفضة التكلفة في وقت معقول (أقصر من 30 دقيقة). بالنظر إلى أن تقنية قوة القص تزيد بشكل كبير من إنتاجية التحليل الطيفي للقوة ، فإننا نسمي هذه التقنية التحليل الطيفي لقوة مجموعة (EFS). يهدف هذا البروتوكول إلى توفير مبادئ توجيهية تجريبية لتسهيل تطبيق نظام EFS القائم على قوة القص.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3K MWCO Amicon</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>ufc900324</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ascorbic acid</td>
			<td>VWR</td>
			<td>VWRC0143-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calfluor 488 azide</td>
			<td>Click Chemistry Tools</td>
			<td>1369-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CuCl</td>
			<td>Thermo&#160;</td>
			<td>ACRO270525000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispersion tip</td>
			<td>Switzerland</td>
			<td>PT-DA07/2EC-B101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNA oligos</td>
			<td>IDT</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dye</td>
			<td>IDT</td>
			<td>/5Cy5/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence microscope</td>
			<td>Janpan</td>
			<td>Nikon TE2000-U</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homogenizer</td>
			<td>Switzerland</td>
			<td>PT 3100D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HPG</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>cs-295271</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>VWR</td>
			<td>VWRC26760.295</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MES</td>
			<td>VWR</td>
			<td>VWRCE169-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quencher</td>
			<td>IDT</td>
			<td>/3IAbRQSp/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TBTA</td>
			<td>Tokyo Chemical Industry</td>
			<td>T2993</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris</td>
			<td>VWR</td>
			<td>VWRCE133-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ensemble force spectroscopy by shear forces

توفر تقنيات الجزيء الواحد القائمة على مبادئ التألق والميكانوكيميائية حساسية فائقة في الاستشعار البيولوجي. ومع ذلك ، نظرا لعدم وجود قدرات إنتاجية عالية ، فإن تطبيق هذه التقنيات محدود في الفيزياء الحيوية. أظهر التحليل الطيفي لقوة المجموعة (EFS) إنتاجية عالية في التحقيق في مجموعة ضخمة من الهياكل الجزيئية عن طريق تحويل الدراسات الميكانيكية الكيميائية للجزيئات الفردية إلى دراسات المجموعات الجزيئية. في هذا البروتوكول ، تم الكشف عن الهياكل الثانوية للحمض النووي (i-motifs) في تدفق القص بين الدوار والجزء الثابت لطرف مجانس بمعدلات قص تصل إلى 77796 / ثانية. تم توضيح آثار معدلات التدفق والأحجام الجزيئية على قوى القص التي تعاني منها i-motif. كشفت تقنية EFS أيضا عن تقارب الارتباط بين زخارف الحمض النووي i-motifs والأربطة. علاوة على ذلك ، أظهرنا تفاعل كيمياء النقر الذي يمكن تشغيله بواسطة قوة القص (أي كيمياء النقر الميكانيكي). تثبت هذه النتائج فعالية استخدام قوة القص للتحكم في تشكيل الهياكل الجزيئية.

يوضح الشكل 1 التكشف الميكانيكي والاستشعار في الوقت الفعلي لجزيئات المجموعة في EFS. في الشكل 1B، لوحظ أن شدة التألق للحمض النووي i-motif تزداد مع معدل القص الذي يتراوح من 9,724 s−1 إلى 97,245 s−1 في مخزن مؤقت للأس الهيدروجيني 5.5 MES. كعنصر تحكم ، لم يتم...

Watch this Scientific Journal Video about Ensemble Force Spectroscopy by Shear Forces at JoVE.com

Ensemble Force Spectroscopy by Shear Forces

التحليل الطيفي لقوة المجموعة (EFS) هو تقنية قوية للتكشف الميكانيكي والاستشعار في الوقت الفعلي لمجموعة من الهياكل الجزيئية الحيوية في المجالات الفيزيائية الحيوية والاستشعار الحيوي.

التحليل الطيفي لقوة المجموعة بواسطة قوى القص

Single-molecule techniques based on fluorescence and mechanochemical principles provide superior sensitivity in biological sensing. However, due to the ...

يوفر هذا البروتوكول تقنية إنتاجية عالية لدراسة الارتباط بين الجزيئات بين الحمض النووي والأربطة. وقد أظهرت هذه التقنية إنتاجية عالية في التحقيق في مجموعة ضخمة من الهياكل الجزيئية الحيوية. وهو يفعل ذلك عن طريق تحويل الخواص الكيميائية الميكانيكية للجزيئات الفردية إلى تلك الخاصة بالمجموعات الجزيئية.أعتقد أنها تجربة خطوة إلى الأمام ولكن هناك القليل من الخطوات الحاسمة. على سبيل المثال ، محاذاة المجهر ، المجانس ، وأنبوب التفاعل. يجب محاذاة هذه الأشياء الثلاثة تماما من أجل تتبع التغيير في التألق بدقة.ابدأ بتجميع المجانس والمجهر على طاولة تركيب. بعد ارتداء نظارات واقية ، قم بتشغيل المجهر الفلوري ثم اضبط المجانس للتأكد من أن شعاع ضوء الإثارة يمر عبر مركز الطرف المشتت للمجانس. ثم قم بإعداد غرفة تفاعل مسطحة القاع يبلغ ارتفاعها خمسة سنتيمترات و 1.5 × 1.5 سم مربع في المقطع العرضي ، مما يضمن عدم تألق مادة الغرفة المحددة لتقليل الخلفية.بعد ذلك ، قم بتثبيت غرفة التفاعل على مرحلة العينة من المجهر الفلوري ثم اضبط الغرفة لعقد طرف التشتت للمجانس ، مما يضمن أن الطرف أعلى قليلا من السطح السفلي لغرفة التفاعل. بعد ذلك ، اضبط الوضع الرأسي للمجانس والغرفة معا لضمان تركيز المجهر على سطح طرف التشتت. ثم اضبط الوضع الأفقي لطرف التشتت للتأكد من ضبط منطقة الكشف بين الدوار والدولتر.قم بتشغيل قنوات الفلورسنت ، وفقا لصبغة الفلورسنت المستخدمة في التجربة. قبل تجربة القص عالية السرعة ، استخدم الماء منزوع الأيونات لاختبار القص بسرعة قص منخفضة. أولا، قم بإعداد الحمض النووي البشري للتيلوميريك i-motif المسمى بصبغة ومبرد في طرفيه على التوالي في الماء منزوع الأيونات كما هو موضح في المخطوطة.بعد ذلك ، قم بتخفيف الحمض النووي إلى خمسة ميكرومولير في مخزن MES مؤقت 30 ملليمولار عند درجة الحموضة 5.5 أو درجة الحموضة 7.4. إلى محلول الحمض النووي ، أضف الليجند L2H24OTD"في نطاق تركيز من صفر إلى 60 ميكرومولار واخلط المحلول بلطف لمدة 10 دقائق لطي هياكل i-motif بدون ضوء. تحقق من شدة التألق الخلفية لغرفة التفاعل المملوءة بالماء منزوع الأيونات وقلل منها باستخدام المجهر الفلوري دون قص.ثم قم بتعيين معلمات كاميرا CCD باستخدام البرنامج مع وقت التعرض على أنه 0.5 ثانية ، وحساسية CCD من 1،600 ، ووقت التسجيل يساوي 20 دقيقة. باستخدام ماصة طويلة ، أضف محلول الحمض النووي إلى غرفة التفاعل الفارغة والنظيفة وقم بتغطية غرفة التفاعل بصندوق أسود. ثم ابدأ تشغيل المجانس لإجراء القص بمعدل قص محدد يتراوح من 9،724 في الثانية إلى 97،245 في الثانية لمدة 20 دقيقة ، مع تشغيل كاميرا CCD لتسجيل البيانات.بعد التجربة ، قم بإزالة الغرفة واغسلها بالماء منزوع الأيونات. تحضير الحمض النووي i-motif والماء منزوع الأيونات. بعد ذلك ، احتضن 10 ميكرومولار i-motif DNA و 300 ميكرولتر من 30 ملليمولار تريس العازلة مع استكمال 150 كلوريد كوبريك ميكرومولار و 300 حمض الأسكوربيك ميكرومولار لمدة 10 دقائق لطي هياكل i-motif.بعد ذلك ، قم بترشيح المحلول باستخدام جهاز ترشيح فائق بقوة طرد مركزي تبلغ 14،300 مرة G.قم بتجديد المحلول إلى ما يقرب من 500 ميكرولتر مع مخازن ترايس ثلاثية 30 ملليمولار مكملة ب 300 من حمض الأسكوربيك المولي الدقيق بعد كل ترشيح. بعد جمع المحلول المتبقي ، قم بعمل حجم نهائي قدره 300 ميكرولتر عن طريق إضافة 30 ملليمولار تريس مكمل ب 300 من حمض الأسكوربيك المولي إلى جانب 20 ميكرومولار CalFluor 488 Azide و 20 micromolar HPG و 10 micromolar TBTA. بمجرد إضافة الكواشف ، انقل المحلول إلى الغرفة المظلمة.ثم تحقق من شدة التألق الخلفية لغرفة التفاعل المملوءة بالماء منزوع الأيونات وقم بتقليلها باستخدام المجهر قبل تجارب القص. بعد ذلك ، أضف محلول الحمض النووي إلى غرفة التفاعل الفارغة باستخدام ماصة طويلة ، ثم ابدأ قص المجانس بمعدل قص 63،209 في الثانية لمدة 20 دقيقة مع تشغيل كاميرا CCD. بعد التجربة ، قم بإزالة الغرفة واغسلها بالماء منزوع الأيونات.وقد لوحظ أن كثافة التألق في الحمض النووي i-motif تزداد مع المعدل الهائل الذي يتراوح من 9،724 في الثانية إلى 97،245 في الثانية في مخزن مؤقت للأس الهيدروجيني 5.5 MES. ومع ذلك ، لم يتم زيادة شدة التألق عندما تم قص نفس الحمض النووي i-motif بمعدل 63،209 في الثانية ، لأنه لا يطوى عند درجة الحموضة 7.4 في المخزن المؤقت MES. تم تقييم ارتباط الليغاند بجزيئات الحمض النووي i-motif المعرضة للتدفق الهائل الذي أظهر أن زيادة شدة التألق أصبحت أقل وضوحا مع زيادة تركيز الليغاند.تم تحديد ثابت التفكك للتفاعل بين الليغاند و i-motif ووجد أنه 34 ميكرومول. تم الكشف عن شكل i-motif المخلبي للنحاس بمعدل 63،209 في الثانية ، وأثار النحاس الذي تم إطلاقه تفاعل النقر الفلورجيني ، مما أدى إلى زيادة شدة التألق بمرور الوقت. أولا ، تأكد من تعيين منطقة الكشف بين الدوار و stater.ثانيا ، تحقق من خلفية التألق وقللها. وأخيرا ، تأكد من تصفية التفاعل قبل إجراء تفاعل النقر. تفتح هذه الطريقة بوابة لاستكشاف القوة الميكانيكية ، قابلة للطي وتتكشف عن جميع أنواع البوليمرات.يمكن أن يكون هياكل الحمض النووي الأخرى ، والبروتينات ، أو البوليمرات الأخرى ، وتفاعلها مع أنواع أخرى من الجزيئات. كما قيل ، يمكن دراسة العديد من الجزيئات الكبيرة الأخرى باستخدام هذا النهج.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Thermodynamics of Membrane Protein Folding Measured by Fluorescence Spectroscopy

الديناميكا الحرارية من البروتين للطي غشاء المقاسة بواسطة التحليل الطيفي الإسفار

Membrane protein folding is an emerging topic with both fundamental and health-related significance.  The abundance of membrane proteins in cells ...

Bacterial Immobilization for Imaging by Atomic Force Microscopy

الشلل البكتيرية للتصوير بواسطة الفحص المجهري القوة الذرية

AFM is a high-resolution (nm scale) imaging tool that mechanically probes a surface.  It has the ability to image cells and biomolecules, in a liquid ...

Biosensor for Detection of Antibiotic Resistant Staphylococcus Bacteria

جهاز الاستشعار البيولوجي للكشف عن المضادات الحيوية البكتيريا العنقودية الذهبية المقاومة لل

A structurally transformed lytic bacteriophage having a broad host range of Staphylococcus aureus strains and a penicillin-binding protein (PBP 2a) ...

Investigating Receptor-ligand Systems of the Cellulosome with AFM-based Single-molecule Force Spectroscopy

Cellulosomes are discrete multienzyme complexes used by a subset of anaerobic bacteria and fungi to digest lignocellulosic substrates. Assembly of the ...

Manufacture of Concentrated, Lipid-based Oxygen Microbubble Emulsions by High Shear Homogenization and Serial Concentration

تصنيع المركزة، الأوكسجين القائم على الدهون Microbubble المستحلبات بواسطة High القص التجانس والتركيز المسلسل

Gas-filled microbubbles have been developed as ultrasound contrast and drug delivery agents. Microbubbles can be produced by processing surfactants using ...

Measurement of Maximum Isometric Force Generated by Permeabilized Skeletal Muscle Fibers

قياس أقصى قوة متساوي القياس منشأ بواسطة ألياف العضلات Permeabilized الهيكل العظمي

Analysis of the contractile properties of chemically skinned, or permeabilized, skeletal muscle fibers offers a powerful means by which to assess muscle ...

Atomic Force Microscopy Imaging and Force Spectroscopy of Supported Lipid Bilayers

قوة الذرية المجهر التصوير وقوة التحليل الطيفي لدعم الدهن طبقات ثنائية

Atomic force microscopy (AFM) is a versatile, high-resolution imaging technique that allows visualization of biological membranes. It has sufficient ...

A Protocol for Using F&#246;rster Resonance Energy Transfer (FRET)-force Biosensors to Measure Mechanical Forces across the Nuclear LINC Complex

A Protocol for Using FÃƒÆ’Ã†'Ãƒâ€šÃ‚Â¶rster Resonance Energy Transfer FRET-force Biosensors to Measure Mechanical Forces across the Nuclear LINC Complex

بروتوكول لعن طريق نقل فورستر الرنين الطاقة (الحنق) أجهزة الاستشعار لقياس -Force القوات الميكانيكية عبر مجمع ينك النووية

The LINC complex has been hypothesized to be the critical structure that mediates the transfer of mechanical forces from the cytoskeleton to the nucleus. ...

Detection of Endotoxin in Nano-formulations Using Limulus Amoebocyte Lysate (LAL) Assays

Detection of Endotoxin in Nano-formulations Using Limulus Amoebocyte Lysate LAL Assays

كشف الذيفان في تركيبات النانو باستخدام فحوصات ليستي (ال) أموبوسيتي ليمولوس

When present in pharmaceutical products, a Gram-negative bacterial cell wall component endotoxin (often also called lipopolysaccharide) can cause ...

3D Printing of In Vitro Hydrogel Microcarriers by Alternating Viscous-Inertial Force Jetting

3D Printing of In Vitro Hydrogel Microcarriers by Alternating Viscous-Inertial Force Jetting

الطباعة 3D من الناقلات الدقيقة هيدروجيل في المختبر عن طريق تناوب القوة اللزجة بالقصور الذاتي النفث

Microcarriers are beads with a diameter of 60-250 &#181;m and a large specific surface area, which are commonly used as carriers for large-scale cell ...