Name: platelet-rich plasma lysate for treatment of eye surface diseases
Uploaded: 2022-08-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Platelet-Rich Plasma Lysate for Treatment of Eye Surface Diseases at JoVE.com

Forfatterne ønsker at takke "Casa del Dono di Reggio Emilia" for at levere donorafledte blodpladekoncentrater.

PRP-L, der blev anvendt til kvantitativ vurdering af vækstfaktorer, blev indsamlet i en bredere undersøgelse af karakterisering af PRP-produkter til regenerative formål, udført på AUSL-IRCCS di Reggio Emilia og godkendt af Area Vasta Emilia Nord Ethical Committee den 10. januar 2019 (protokolnummer 2019/0003319). Donorerne gav deres informerede samtykke i henhold til Helsingforserklæringen. Ingen etisk godkendelse var nødvendig for at indsamle de aggregerede, anonyme data fra Ocular Surface Disease Index (OSDI) sp...

<ol>
	<li>Everts, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-rich+plasma+and+platelet+gel:+A+review.">Platelet-rich plasma and platelet gel: A review.</a> The Journal of Extra-Corporeal Technology. 38 (2), 174 (2006).</li><li>Giannaccare, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+derived+eye+drops+for+the+treatment+of+cornea+and+ocular+surface+diseases.">Blood derived eye drops for the treatment of cornea and ocular surface diseases.</a> Transfusion and Apheresis Science. 56 (4), 595-604 (2017).</li><li>Bernabei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood-based+treatments+for+severe+dry+eye+disease:+The+need+of+a+consensus.">Blood-based treatments for severe dry eye disease: The need of a consensus.</a> Journal of Clinical Medicine. 8 (9), 1478 (2019).</li><li>Findlay, Q., Reid, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+eye+disease:+When+to+treat+and+when+to+refer.">Dry eye disease: When to treat and when to refer.</a> Australian Prescriber. 41 (5), 160-163 (2018).</li><li>Clayton, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+eye.">Dry eye.</a> New England Journal of Medicine. 378 (23), 2212-2223 (2018).</li><li>Jones, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TFOS+DEWS+II+management+and+therapy+report.">TFOS DEWS II management and therapy report.</a> The Ocular Surface. 15 (3), 575-628 (2017).</li><li>Holland, E. J., Darvish, M., Nichols, K. K., Jones, L., Karpecki, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+topical+ophthalmic+drugs+in+the+treatment+of+dry+eye+disease:+A+systematic+literature+review.">Efficacy of topical ophthalmic drugs in the treatment of dry eye disease: A systematic literature review.</a> The Ocular Surface. 17 (3), 412-423 (2019).</li><li>Shih, K. C., Lun, C. N., Jhanji, V., Thong, B. Y. H., Tong, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+review+of+randomized+controlled+trials+in+the+treatment+of+dry+eye+disease+in+Sjogren+syndrome.">Systematic review of randomized controlled trials in the treatment of dry eye disease in Sjogren syndrome.</a> Journal of Inflammation. 14, 26 (2017).</li><li>Rusciano, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+dry+eye+lactoferrin+and+lactobionic+acid.">Age-related dry eye lactoferrin and lactobionic acid.</a> Ophthalmic Research. 60 (2), 94-99 (2018).</li><li>Craig, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TFOS+DEWS+II+definition+and+classification+report.">TFOS DEWS II definition and classification report.</a> The Ocular Surface. 15 (3), 276-283 (2017).</li><li>Drew, V. J., Tseng, C. L., Seghatchian, J., Burnouf, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflections+on+dry+eye+syndrome+treatment:+Therapeutic+role+of+blood+products.">Reflections on dry eye syndrome treatment: Therapeutic role of blood products.</a> Frontiers in Medicine. 5, 33 (2018).</li><li>Giannaccare, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+derived+eye+drops+for+the+treatment+of+cornea+and+ocular+surface+diseases.">Blood derived eye drops for the treatment of cornea and ocular surface diseases.</a> Transfusion and Apheresis Science. 56 (4), 595-604 (2017).</li><li>Acebes-Huerta, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-derived+bio-products:+Classification+update,+applications,+concerns+and+new+perspectives.">Platelet-derived bio-products: Classification update, applications, concerns and new perspectives.</a> Transfusion and Apheresis Science. 59 (1), 102716 (2020).</li><li>Quartieri, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolomics+comparison+of+cord+and+peripheral+blood-derived+serum+eye+drops+for+the+treatment+of+dry+eye+disease.">Metabolomics comparison of cord and peripheral blood-derived serum eye drops for the treatment of dry eye disease.</a> Transfusion and Apheresis Science. 60 (4), 103155 (2021).</li><li>Badami, K. G., McKellar, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allogeneic+serum+eye+drops:+Time+these+became+the+norm.">Allogeneic serum eye drops: Time these became the norm.</a> British Journal of Ophthalmology. 96 (8), 1151-1152 (2012).</li><li>Hwang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+clinical+efficacies+of+autologous+serum+eye+drops+in+patients+with+primary+and+secondary+Sj&#246;gren+syndrome.">Comparison of clinical efficacies of autologous serum eye drops in patients with primary and secondary Sj&#246;gren syndrome.</a> Cornea. 33 (7), 663-667 (2014).</li><li>Chiang, C. C., Lin, J. M., Chen, W. L., Tsai, Y. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allogeneic+serum+eye+drops+for+the+treatment+of+severe+dry+eye+in+patients+with+chronic+graft-versus-host+disease.">Allogeneic serum eye drops for the treatment of severe dry eye in patients with chronic graft-versus-host disease.</a> Cornea. 26 (7), 861-863 (2007).</li><li>Jonsdottir-Buch, S. M., Lieder, R., Sigurjonsson, O. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+lysates+produced+from+expired+platelet+concentrates+support+growth+and+osteogenic+differentiation+of+mesenchymal+stem+cells.">Platelet lysates produced from expired platelet concentrates support growth and osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells.</a> PLoS One. 8 (7), 68984 (2013).</li><li>Altaie, A., Owston, H., Jones, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+platelet+lysate+for+bone+regeneration+-+Are+we+ready+for+clinical+translation.">Use of platelet lysate for bone regeneration - Are we ready for clinical translation.</a> World Journal of Stem Cells. 8 (2), 47-55 (2016).</li><li>Vesaluoma, M., Teppo, A. M., Gr&#246;nhagen-Riska, C., Tervo, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-derived+growth+factor-BB+(PDGF-BB)+in+tear+fluid:+A+potential+modulator+of+corneal+wound+healing+following+photorefractive+keratectomy.">Platelet-derived growth factor-BB (PDGF-BB) in tear fluid: A potential modulator of corneal wound healing following photorefractive keratectomy.</a> Current Eye Research. 16 (8), 825-831 (1997).</li><li>Zheng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+the+transforming+growth+factor+&#946;+activity+in+normal+and+dry+eye+human+tears+by+CCL-185+cell+bioassay.">Evaluation of the transforming growth factor &#946; activity in normal and dry eye human tears by CCL-185 cell bioassay.</a> Cornea. 29 (9), 1048 (2010).</li><li>Zamani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+therapeutic+approaches+in+utilizing+platelet+lysate+in+regenerative+medicine:+Are+we+ready+for+clinical+use.">Novel therapeutic approaches in utilizing platelet lysate in regenerative medicine: Are we ready for clinical use.</a> Journal of Cellular Physiology. 234 (10), 17172-17186 (2019).</li><li>Ministro della Salute. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disposizioni+relative+ai+requisiti+di+qualit&#224;+e+sicurezza+del+sangue+e+degli+emocomponenti.">Disposizioni relative ai requisiti di qualit&#224; e sicurezza del sangue e degli emocomponenti.</a> Italian Ministry of Health. , (2015).</li><li>Aprili, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Raccomandazioni+SIMTI+sugli+emocomponenti+per+uso+non+trasfusionale.">Raccomandazioni SIMTI sugli emocomponenti per uso non trasfusionale.</a> Societ&#224; Italiana di Medicina Trasfusionale e Immunoematologia. , (2012).</li><li>Schiroli, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+two+alternative+procedures+to+obtain+packed+red+blood+cells+for+&#946;-thalassemia+major+transfusion+therapy.">Comparison of two alternative procedures to obtain packed red blood cells for &#946;-thalassemia major transfusion therapy.</a> Biomolecules. 11 (11), 1638 (2021).</li><li>Pulcini, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apheresis+platelet+rich-plasma+for+regenerative+medicine:+An+in+vitro+study+on+osteogenic+potential.">Apheresis platelet rich-plasma for regenerative medicine: An in vitro study on osteogenic potential.</a> International Journal of Molecular Science. 22 (16), 8764 (2021).</li><li>Ohashi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Presence+of+epidermal+growth+factor+in+human+tears.">Presence of epidermal growth factor in human tears.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 30 (8), 1879-1882 (1989).</li><li>Vitale, S., Goodman, L. A., Reed, G. F., Smith, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+the+NEI-VFQ+and+OSDI+questionnaires+in+patients+with+Sj&#246;gren's+syndrome-related+dry+eye.">Comparison of the NEI-VFQ and OSDI questionnaires in patients with Sj&#246;gren's syndrome-related dry eye.</a> Health Quality of Life Outcomes. 2, 44 (2004).</li><li>Schiffman, R. M., Christianson, M. D., Jacobsen, G., Hirsch, J. D., Reis, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reliability+and+validity+of+the+Ocular+Surface+Disease+Index.">Reliability and validity of the Ocular Surface Disease Index.</a> Archives of Ophthalmology. 118 (5), 615-621 (2000).</li><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristics+of+platelet+lysate+compared+to+autologous+and+allogeneic+serum+eye+drops.">Characteristics of platelet lysate compared to autologous and allogeneic serum eye drops.</a> Translational Vision Science and Technology. 9 (4), 24 (2020).</li><li>Henschler, R., Gabriel, C., Schallmoser, K., Burnouf, T., Koh, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+platelet+lysate+current+standards+and+future+developments.">Human platelet lysate current standards and future developments.</a> Transfusion. 59 (4), 1407-1413 (2019).</li><li>Samarkanova, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+evaluation+of+allogeneic+eye+drops+from+cord+blood+platelet+lysate.">Clinical evaluation of allogeneic eye drops from cord blood platelet lysate.</a> Blood Transfusion. 19 (4), 347-356 (2021).</li><li>Strunk, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=International+Forum+on+GMP-grade+human+platelet+lysate+for+cell+propagation:+Summary.">International Forum on GMP-grade human platelet lysate for cell propagation: Summary.</a> Vox Sanguinis. 113 (1), 80-87 (2018).</li><li>Schiroli, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+COVID-19+outbreak+on+the+Transfusion+Medicine+Unit+of+a+Northern+Italy+Hospital+and+Cancer+Centre.">The impact of COVID-19 outbreak on the Transfusion Medicine Unit of a Northern Italy Hospital and Cancer Centre.</a> Vox Sanguinis. 117 (2), 235-242 (2021).</li><li>Klatte-Schulz, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+analysis+of+different+platelet+lysates+and+platelet+rich+preparations+to+stimulate+tendon+cell+biology:+An+in+vitro+study.">Comparative analysis of different platelet lysates and platelet rich preparations to stimulate tendon cell biology: An in vitro study.</a> International Journal of Molecular Science. 19 (1), 212 (2018).</li><li>Fea, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+autologous+platelet+lysate+eye+drops:+An+in+vivo+confocal+microscopy+study.">The effect of autologous platelet lysate eye drops: An in vivo confocal microscopy study.</a> BioMed Research International. 2016, 8406832 (2016).</li><li>Abu-Ameerh, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+lysate+promotes+re-epithelialization+of+persistent+epithelial+defects:+A+pilot+study.">Platelet lysate promotes re-epithelialization of persistent epithelial defects: A pilot study.</a> International Ophthalmology. 39 (7), 1483-1490 (2019).</li><li>Geremicca, W., Fonte, C., Vecchio, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+components+for+topical+use+in+tissue+regeneration:+evaluation+of+corneal+lesions+treated+with+platelet+lysate+and+considerations+on+repair+mechanisms.">Blood components for topical use in tissue regeneration: evaluation of corneal lesions treated with platelet lysate and considerations on repair mechanisms.</a> Blood Transfusion. 8 (2), 107-112 (2010).</li><li>De Paiva, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+TGF-&#946;+signaling+improves+ocular+surface+epithelial+disease+in+experimental+autoimmune+keratoconjunctivitis+sicca.">Disruption of TGF-&#946; signaling improves ocular surface epithelial disease in experimental autoimmune keratoconjunctivitis sicca.</a> PLoS One. 6 (12), 29017 (2011).</li></ol>

I de senere år er den kliniske anvendelse af blodpladebaserede produkter til okulære overfladepatologier steget, men deres diffusion hæmmes af manglen på videnskabelig robusthed. Dette skyldes hovedsagelig stor heterogenitet i donorkilder og forberedelsesprotokoller, som ofte ikke er fuldt ud offentliggjort eller ikke specifikt designet til det formål, som de udleveres til. Især mangler der stadig oplysninger om blodpladebaserede produkter indsamlet ved aferese. Formålet med dette arbejde var derfor at beskrive de...

Blodafledte produkter anvendes i vid udstrækning i sårpleje1, maxillofacial og ortopædkirurgi og til behandling af forskellige okulære overfladesygdomme2 såsom tør øjensygdom (DED)3. I DED er tårefilmhomeostase nedsat som følge af den unormale funktion af forskellige faktorer, der er involveret i tåreproduktion og okulær overfladeintegritet 4,5.
DED er karakteriseret ved heterogenitet i årsager og sværhedsgrad 6,7,8 og kan være en konsekvens af forskellige faktorer som aldring, køn9, kontaktlinser, topiske eller systemiske lægemidler 10 eller allerede eksisterende tilstande som Sjögrens syndrom 10. På trods af milde symptomer påvirker DED millioner af mennesker over hele verden og påvirker også deres livskvalitet og sundhedssystemet6.
Mange behandlinger er blevet rapporteret for denne patologi, men der er stadig ingen konsensus om den mest effektive løsning12. Til dato er kunstige tårer den første terapilinje, der sigter mod at genoprette tårefilmens vandige sammensætning, omend disse substitutter ikke indeholder de vigtigste biologisk aktive opløste stoffer af naturlige tårer 6,11. Trombocytbaserede produkter betragtes som et gyldigt alternativ12,13 til kunstige tårer, selvom deres kliniske effektivitet, anbefalinger til brug og fremstillingsmetoder stadig er et spørgsmål om debat3.
Blodbaserede produkter deler med tårer en lignende sammensætning med hensyn til metabolitter14, proteiner, lipider, vitaminer, ioner, vækstfaktorer (GF'er), antioxidantforbindelser 11 og osmolaritet (300 mOsm / L)11. Gennem den synergistiske aktivitet af deres komponenter fremmer de regenerering af hornhindeepitelet, hæmmer frigivelsen af inflammatoriske cytokiner og øger antallet af bægerceller og ekspressionen af muciner i bindehinden 2,3.
Indtil videre er heterogenitet i oftalmiske blodbaserede produkter blevet dokumenteret i litteraturen; Disse produkter kan klassificeres efter bloddonorernes oprindelse, dvs. autolog eller allogen, samt blodkilden, dvs. perifert blod, navlestrengsblod, serum eller blodplader.
Selvom autologe produkter var de mest udbredte3, bliver allogene nu det foretrukne valg, da de sikrer højere effektivitet og sikkerhedsstandarder 15 sammen med en betydelig reduktion i omkostninger16,17. Tidligere undersøgelser har faktisk vist, at blodbaserede produkter fra patienter med autoimmune og/eller systemiske sygdomme kan vise ændret kvalitet og funktionalitet 6,16,17. På trods af at serumbaserede øjendråber er de mest udbredte, er blodpladebaserede produkter for nylig blevet bekræftet som et gyldigt alternativ, da de let kan tilberedes, samtidig med at der opretholdes betydelige effektivitetsniveauer 3,11. Aktuelt tilgængelige blodpladebaserede produkter kan opdeles i blodpladerig plasma (PRP), blodpladerig plasmalysats (PRP-L) og plasma rig på vækstfaktorer (PRGF)3.
Blandt dem har PRP-L den fordel, at det er et frossent produkt med lang levetid. PRP-L kan fremstilles af aferese, buffy-coats eller endda fra udløbende blodplader (PLT'er)18,19, hvilket dyrebart reducerer deres spild. Aliquoterne kan opbevares i månedsvis i blodtransfusionscentrene ved -80 °C eller endda i patienternes hjem ved -15 °C i kortere perioder.
PRP-L er meget beriget i GF'er, som har vist sig at stimulere øjenoverfladeregenerering 12,20,21. Ikke desto mindre er der kun få rapporterede kliniske undersøgelser på dette område, og alle brugte autologe kilder 3,22. PRP-L har stadig brug for yderligere validering og karakterisering, før den rutinemæssigt kan bruges til behandling af øjenoverfladesygdomme, da der ikke er nogen standardiserede retningslinjer for forberedelse, dispensation og opbevaring3.
Heri deles en detaljeret protokol for produktion af PRP-L, der anvendes på Transfusion Medicine Unit i AUSL-IRCCS di Reggio Emilia, Italien, og dispensation til patienter med DED. Vi sigter mod at hjælpe det videnskabelige samfund med at udvikle standardmetoder til forberedelse, som kan øge homogeniteten og konsistensen i verdensomspændende undersøgelser og kliniske tilgange.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Equipments</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CompoSeal Mobilea II</td>
			<td>Fresenius Kabi, Germany</td>
			<td></td>
			<td>bag sealer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HeraSafe hood</td>
			<td>Heraeus Instruments, Germany</td>
			<td></td>
			<td>Class II biohazard hood</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MCS+ 9000 Mobile Platelet Collection System</td>
			<td>Haemonetics, Italy</td>
			<td></td>
			<td>automated plasma and multicomponent collection equipment for donating platelet, red cell, plasma, or combination blood components</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platelet shaker, PF396i</td>
			<td>Helmer, USA</td>
			<td></td>
			<td>Platelet shaker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Raycell X-ray Blood Irradiator</td>
			<td>MDS Nordion, Canada</td>
			<td></td>
			<td>X-ray Blood Irradiator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ROTIXA 50RS</td>
			<td>Hettich Zentrifugen, Germany</td>
			<td></td>
			<td>High speed entrifuge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sysmex XS-1000i</td>
			<td>Sysmex Europe GMBH, Germany</td>
			<td></td>
			<td>haemocytometer for platelet count</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Warm bath, WB-M15</td>
			<td>Falc Instruments, Italy</td>
			<td></td>
			<td>Warm bath</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Materials</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACD-A anticoagulant solution A</td>
			<td>Fenwal Inc., USA</td>
			<td>DIN 00788139</td>
			<td>anticoagulant solution for platelet apheresis (1000 ml)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD BACTEC Peds Plus/F Culture vials</td>
			<td>BD Biosciences, USA</td>
			<td>BD 442020</td>
			<td>Sterility assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD BACTEC Peds Plus/F Culture vials</td>
			<td>BD Biosciences, USA</td>
			<td>442020</td>
			<td>At least 2 vials for sterility assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Luer Lok Syringe</td>
			<td>BD Plastipack, USA</td>
			<td>300865</td>
			<td>At least 4 sterile syringes (50 ml)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio-Plex Human Cancer Panel 1</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>171AC500M</td>
			<td>Standard panel for PDGF isoforms assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio-Plex Human Cancer Panel 2</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>171AC600M</td>
			<td>Standard panel for EGF assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio-Plex MAGPIX Multiplex Reader</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>Magpix</td>
			<td>This instrument allows multiple immunoassays using functionalized magnetic beads.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio-Plex Pro TGF-b Assay</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>10024984</td>
			<td>Set and standards for TGFb isoforms assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BioRet</td>
			<td>ARIES s.r.l., Italy</td>
			<td>A2DH0020</td>
			<td>At least 4 piercing spike for blood bags</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood collection tube</td>
			<td>BD Vacutainer, USA</td>
			<td>367835</td>
			<td>1 tube, necessary to perform platelet counts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye drops kit. COL Medical Device for the application and preservation of eye drops from haemocomponents</td>
			<td>Biomed Device s.r.l., Italy</td>
			<td>COLC50</td>
			<td>Eye drops kit. At least 2 kits for each PRP unit collected</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Cancer PDGF-AB/BB Set 1x96well</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>171BC511</td>
			<td>Set for PDGF isoforms assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Cancer2 EGF Set 1x96well</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>171BC603M</td>
			<td>Set for EGF assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl 0.9% sterile solution</td>
			<td>Baxter S.p.A., Italy</td>
			<td>B05BB01</td>
			<td>1000 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OSDI Questionnaire</td>
			<td>Allergan Inc., USA</td>
			<td>OSDI</td>
			<td>Ocular Surface Disease Index Questionnaire</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Piercing spike</td>
			<td>BioRet ARIES s.r.l., Italy</td>
			<td>BS051004</td>
			<td>Spike</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platelet Additive Solution A+ T-PAS+</td>
			<td>TERUMO BCT Inc., Italy</td>
			<td>40842</td>
			<td>preservative solution for platelet concentrates (1000 ml)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software Excel</td>
			<td>Microsoft, USA</td>
			<td>Excel</td>
			<td>Data analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Teruflex Transfer bag 1000 ml</td>
			<td>TERUMO BCT Inc., Italy</td>
			<td>BB*T100BM</td>
			<td>1 for PRP dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Teruflex Transfer bag 300 ml</td>
			<td>TERUMO BCT Inc., Italy</td>
			<td>BB*030CM</td>
			<td>At least 6 for each PRP unit collected</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

platelet-rich plasma lysate for treatment of eye surface diseases

Forskellige okulære overfladesygdomme behandles med blodafledte øjendråber. Deres anvendelse er blevet introduceret i klinisk praksis på grund af deres metabolit og vækstfaktorindhold, som fremmer øjenoverfladeregenerering. Blodbaserede øjendråber kan fremstilles fra forskellige kilder (dvs. fuldblods- eller blodpladeaferesedonation) samt med forskellige protokoller (f.eks. Forskellige fortyndinger og fryse-/optøningscyklusser). Denne variation hæmmer standardiseringen af kliniske protokoller og dermed evalueringen af deres kliniske virkning. Detaljering og deling af de metodologiske procedurer kan bidrage til at fastlægge fælles retningslinjer. I løbet af de sidste år har allogene produkter været diffuse som et alternativ til de autologe behandlinger, da de garanterer højere effektivitetsstandarder; blandt dem fremstilles det blodpladerige plasmalysat(PRP-L) øjendråber med enkle fremstillingsprocedurer. I transfusionsmedicinsk enhed på AUSL-IRCCS di Reggio Emilia, Italien, opnås PRP-L ved blodplade-aferese donation. Dette produkt fortyndes oprindeligt til 0,3 x 10 9 blodplader/ml (startende fra en gennemsnitlig koncentration på 1 x 10 9 blodplader/ml) i0,9% NaCl. Fortyndede blodplader fryses / optøes og centrifugeres derefter for at fjerne snavs. Det endelige volumen opdeles i 1,45 ml alikvoter og opbevares ved -80 °C. Før de udleveres til patienter, testes øjendråber for sterilitet. Patienter kan opbevare blodpladelysater ved -15 °C i op til 1 måned. Vækstfaktorsammensætningen vurderes også ud fra tilfældigt udvalgte alikvoter, og middelværdierne er rapporteret her.

Begrundelsen for brugen af serumafledte øjendråber (som er det blodbaserede produkt, der oftest anvendes til behandling af øjenoverfladesygdomme) ligger i deres indhold af GF'er, som næsten fuldstændigt stammer fra cirkulerende blodplader. PRP indeholder et signifikant højere antal blodplader (og følgelig af blodpladeafledte GF'er) sammenlignet med perifert blodserum, der spænder mellem 0,15 x 10 9-0,45 x 109 PLT'er / ml. I henhold til italiensk lovgivning skal blodpladetallet i PRP-enheder ...

Watch this Scientific Journal Video about Platelet-Rich Plasma Lysate for Treatment of Eye Surface Diseases at JoVE.com

Platelet-Rich Plasma Lysate for Treatment of Eye Surface Diseases

Trombocytlysater repræsenterer et nyt værktøj til behandling af okulære overfladesygdomme. Her foreslår vi en metode til fremstilling, dispensation, opbevaring og karakterisering af blodpladelysat indsamlet fra blodpladedonorer.

Blodpladerig plasmalysats til behandling af øjenoverfladesygdomme

Various ocular surface diseases are treated with blood-derived eye drops. Their use has been introduced in clinical practice because of their metabolite ...

PRP Lysate er et fremspirende blodpladebaseret produkt til behandling af okulære overfladesygdomme. Her ønsker vi at dele og detaljere vores produktionsprotokol for at dække udviklingen af fælles metodologiske retningslinjer. Halogeniske produkter har været diffuse som et alternativ til autologe behandlinger.Da de garanterer højere effektivitetsstandarder. PRP Lysat indeholder en høj koncentration af vækstfaktorer. Dens produktion er billig og enkel, og den kan opbevares i lang tid.Brugen af blodprodukter til behandling af øjen- eller ansigtssygdomme er stort set dokumenteret i litteraturen. Ikke desto mindre har deres ansøgninger stadig ikke fundet enighed. En af grundene er variabiliteten af de metoder, der anvendes til deres produktion.Vores mål er at dele vores protokol for at udvikle fælles metoder. Til at begynde med skal du udføre et blodpladetal med et hæmocystometer ved hjælp af prøven indsamlet fra hovedposen gennem en gennemborende spids. Fortynd blodpladerig plasma med en tilstrækkelig mængde sterilt 0,9% natriumchlorid.Opdel det fortyndede blodpladerige plasma i 300 ml tomme opsamlingsposer for at nå et nettovolumen på 190 ml pr. Pose. Brug en aliquot af resterende fortyndet blodpladerig plasma til at udføre kvalitetskontrol og vurdere mulig mikrobiel kontaminering. Forbered et sterilitetsassay efter producentens anvisninger, der skal testes i et mikrobiologisk laboratorium.Opbevar fortyndede blodpladerige plasmaposer ved minus 80 grader Celsius i højst to måneder før optøning. Sørg for, at et varmt bad er indstillet til 37 grader Celsius. Sæt de blodpladerige plasmaposer i det varme bad og vent, indtil de er helt optøet.Centrifuger de blodpladerige plasmaposer ved 3000 gange G i 30 minutter ved stuetemperatur. Ved at udnytte overføringsposens gennemtrængende spids skal du forbinde den centrifugerede pose med en tom steril 300 ml overførselspose. Overfør forsigtigt PRP Lysate supernatanten, mens du undgår snavs i den nye taske.Forsegl forbindelsesrøret på PRP Lysate-enheden med en poseforsegler. Saml 30 til 60 ml PRP Lysat med en steril sprøjte, og tilslut sprøjten til Luer Lock-forbindelsen på påfyldningsledningen. I henhold til producentens anvisninger skal du dreje stophanen med halvdelen af en omgang for at åbne linjen mellem PRP Lysate indeholdende sprøjte og den forudtilsluttede sprøjte.Fyld den forudtilsluttede sprøjte med PRP Lysate. Frakobl PRP Lysate-sprøjten. Luk rørhætten på Luer Lock-forbindelsen, og drej stophanen til den oprindelige position.Brug kit sprøjten med øjendråber til at fylde hætteglassene med PRP Lysate. Sørg for, at hver applikator er korrekt udfyldt. Forsegl dem derefter individuelt med en poseforsegler.Gentag proceduren med et nyt øjendråber kit. Brug en lille aliquot af resterende fortyndet PRP-lysat til at vurdere mulig mikrobiel kontaminering. Mærk hver applikator korrekt og læg dem i en plastikpose.Mærk også plastikposen. Sørg for at fremhæve donorens blodgruppe. Opbevares ved minus 80 grader Celsius i højst 24 måneder før patienttildeling i henhold til den italienske lov og retningslinjer.En kvantitativ vurdering af den epidermale vækstfaktor, blodpladeafledt vækstfaktor og transformerende vækstfaktor Beta-isoform i PRP-lysat fra to forskellige donorer viser, at resultaterne af 0,3 gange 10 til niende blodplader pr. milliliter fortynding viste sig at være mest lig tåresammensætning. Efter seks måneders behandling med PRP Lysate faldt indekset for okulær overfladesygdom fra 56 plus minus 21 til 45 plus minus 21. Indikerer forbedring af patientens livskvalitet.De metodologiske forskelle mellem forskellige metoder til fremstilling af allogen PRP-lysat viste sig ikke at være skadelige for den regenerative kapacitet af PRP-lysat, der blev testet på de andre væv. Fortynding af plasma med natriumchlorid og opbevaring af blodpladerigt plasma skal udføres med omhu. Da dette kan ændre sammensætningen af PRP Lysate.Sammenlignende analyse er nødvendig for at undersøge variationer i disse trin.

Research

JoVE Journal

Medicine

High Content Screening in Neurodegenerative Diseases

Højt indhold Screening i neurodegenerative sygdomme

The functional annotation of genomes, construction of molecular networks and novel drug target identification, are important challenges that need to be ...

Quantitative Fundus Autofluorescence for the Evaluation of Retinal Diseases

Kvantitativ Fundus Autofluorescens for Vurdering af retinale sygdomme

The retinal pigment epithelium (RPE) is juxtaposed to the overlying sensory retina, and supports the function of the visual system. Among the tasks ...

Network Analysis of Foramen Ovale Electrode Recordings in Drug-resistant Temporal Lobe Epilepsy Patients

Netværk Analyse af foramen ovale elektrode Optagelser i Drug-resistent TLE Patienter

Approximately 30% of epilepsy patients are refractory to antiepileptic drugs. In these cases, surgery is the only alternative to eliminate/control ...

Effects of Allogeneic Platelet-Rich Plasma (PRP) on the Healing Process of Sectioned Achilles Tendons of Rats: A Methodological Description

Effects of Allogeneic Platelet-Rich Plasma PRP on the Healing Process of Sectioned Achilles Tendons of Rats: A Methodological Description

Virkningerne af allogene trombocyt-Rich Plasma (PRP) på den helbredende proces af sektioneret Achilles sener af rotter: en metodologisk beskrivelse

This article describes the experimental procedures used to observe if PRP can positively affect tendon healing. There are 4 main steps to follow: induce a ...

Preparation, Procedures and Evaluation of Platelet-Rich Plasma Injection in the Treatment of Knee Osteoarthritis

Forberedelse, procedurer og vurdering af trombocyt-Rich Plasma injektion til behandling af knæet Osteoarthritis

Knee osteoarthritis (KOA) is one of the most frequently encountered diseases in the orthopedic department. Existing non-surgical treatments have a limited ...

Intense Pulsed Light for the Treatment of Dry Eye Owing to Meibomian Gland Dysfunction

Intenst pulserende lys til behandling af tørre øjne som følge af meibomske kirtel dysfunktion

Dry eye disease (DED) is an increasingly common condition and one of the most common complaints of patients. The vast majority of DED is caused by the ...

Customizing a Cryolite Glass Prosthetic Eye

Tilpasning af et kryolit glas proteser

In Germany, Austria, and Switzerland, over 90% of ocularists still manufacture customized prostheses using cryolite glass from Thuringia. The present ...

Oxygen-Induced Retinopathy Model for Ischemic Retinal Diseases in Rodents

Oxygen-induceret retinopati Model for iskæmiske retinale sygdomme hos gnavere

One of the commonly used models for ischemic retinopathies is the oxygen-induced retinopathy (OIR) model. Here we describe detailed protocols for the OIR ...

Basophil Activation Test for Allergy Diagnosis

Basophil aktiveringstest til allergidiagnose

The basophil activation test (BAT) is a complementary in vitro diagnostic test that can be used in addition to clinical history, skin test (ST), and ...

Retinal Pigment Epithelium Transplantation in a Non-human Primate Model for Degenerative Retinal Diseases

Retinal Pigment Epitel Transplantation i en ikke-human primat model for degenerative retinale sygdomme

Retinal pigment epithelial (RPE) transplantation holds great promise for the treatment of inherited and acquired retinal degenerative diseases. These ...