Name: platelet-rich plasma lysate for treatment of eye surface diseases
Uploaded: 2022-08-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Platelet-Rich Plasma Lysate for Treatment of Eye Surface Diseases at JoVE.com

Os autores agradecem à "Casa del Dono di Reggio Emilia" por fornecer concentrados de plaquetas derivados de doadores.

O PRP-L utilizado para a avaliação quantitativa dos fatores de crescimento foi coletado dentro de um estudo mais amplo sobre a caracterização de produtos PRP para fins regenerativos, realizado na AUSL-IRCCS di Reggio Emilia e aprovado pelo Comitê de Ética da Área Vasta Emilia Nord em 10 de janeiro de 2019 (número de protocolo 2019/0003319). Os doadores deram o seu consentimento esclarecido de acordo com a Declaração de Helsínquia. Nenhuma aprovação ética foi necessária para coletar os dados agregados e an?...

<ol>
	<li>Everts, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-rich+plasma+and+platelet+gel:+A+review.">Platelet-rich plasma and platelet gel: A review.</a> The Journal of Extra-Corporeal Technology. 38 (2), 174 (2006).</li><li>Giannaccare, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+derived+eye+drops+for+the+treatment+of+cornea+and+ocular+surface+diseases.">Blood derived eye drops for the treatment of cornea and ocular surface diseases.</a> Transfusion and Apheresis Science. 56 (4), 595-604 (2017).</li><li>Bernabei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood-based+treatments+for+severe+dry+eye+disease:+The+need+of+a+consensus.">Blood-based treatments for severe dry eye disease: The need of a consensus.</a> Journal of Clinical Medicine. 8 (9), 1478 (2019).</li><li>Findlay, Q., Reid, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+eye+disease:+When+to+treat+and+when+to+refer.">Dry eye disease: When to treat and when to refer.</a> Australian Prescriber. 41 (5), 160-163 (2018).</li><li>Clayton, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+eye.">Dry eye.</a> New England Journal of Medicine. 378 (23), 2212-2223 (2018).</li><li>Jones, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TFOS+DEWS+II+management+and+therapy+report.">TFOS DEWS II management and therapy report.</a> The Ocular Surface. 15 (3), 575-628 (2017).</li><li>Holland, E. J., Darvish, M., Nichols, K. K., Jones, L., Karpecki, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+topical+ophthalmic+drugs+in+the+treatment+of+dry+eye+disease:+A+systematic+literature+review.">Efficacy of topical ophthalmic drugs in the treatment of dry eye disease: A systematic literature review.</a> The Ocular Surface. 17 (3), 412-423 (2019).</li><li>Shih, K. C., Lun, C. N., Jhanji, V., Thong, B. Y. H., Tong, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+review+of+randomized+controlled+trials+in+the+treatment+of+dry+eye+disease+in+Sjogren+syndrome.">Systematic review of randomized controlled trials in the treatment of dry eye disease in Sjogren syndrome.</a> Journal of Inflammation. 14, 26 (2017).</li><li>Rusciano, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+dry+eye+lactoferrin+and+lactobionic+acid.">Age-related dry eye lactoferrin and lactobionic acid.</a> Ophthalmic Research. 60 (2), 94-99 (2018).</li><li>Craig, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TFOS+DEWS+II+definition+and+classification+report.">TFOS DEWS II definition and classification report.</a> The Ocular Surface. 15 (3), 276-283 (2017).</li><li>Drew, V. J., Tseng, C. L., Seghatchian, J., Burnouf, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflections+on+dry+eye+syndrome+treatment:+Therapeutic+role+of+blood+products.">Reflections on dry eye syndrome treatment: Therapeutic role of blood products.</a> Frontiers in Medicine. 5, 33 (2018).</li><li>Giannaccare, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+derived+eye+drops+for+the+treatment+of+cornea+and+ocular+surface+diseases.">Blood derived eye drops for the treatment of cornea and ocular surface diseases.</a> Transfusion and Apheresis Science. 56 (4), 595-604 (2017).</li><li>Acebes-Huerta, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-derived+bio-products:+Classification+update,+applications,+concerns+and+new+perspectives.">Platelet-derived bio-products: Classification update, applications, concerns and new perspectives.</a> Transfusion and Apheresis Science. 59 (1), 102716 (2020).</li><li>Quartieri, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolomics+comparison+of+cord+and+peripheral+blood-derived+serum+eye+drops+for+the+treatment+of+dry+eye+disease.">Metabolomics comparison of cord and peripheral blood-derived serum eye drops for the treatment of dry eye disease.</a> Transfusion and Apheresis Science. 60 (4), 103155 (2021).</li><li>Badami, K. G., McKellar, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allogeneic+serum+eye+drops:+Time+these+became+the+norm.">Allogeneic serum eye drops: Time these became the norm.</a> British Journal of Ophthalmology. 96 (8), 1151-1152 (2012).</li><li>Hwang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+clinical+efficacies+of+autologous+serum+eye+drops+in+patients+with+primary+and+secondary+Sj&#246;gren+syndrome.">Comparison of clinical efficacies of autologous serum eye drops in patients with primary and secondary Sj&#246;gren syndrome.</a> Cornea. 33 (7), 663-667 (2014).</li><li>Chiang, C. C., Lin, J. M., Chen, W. L., Tsai, Y. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allogeneic+serum+eye+drops+for+the+treatment+of+severe+dry+eye+in+patients+with+chronic+graft-versus-host+disease.">Allogeneic serum eye drops for the treatment of severe dry eye in patients with chronic graft-versus-host disease.</a> Cornea. 26 (7), 861-863 (2007).</li><li>Jonsdottir-Buch, S. M., Lieder, R., Sigurjonsson, O. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+lysates+produced+from+expired+platelet+concentrates+support+growth+and+osteogenic+differentiation+of+mesenchymal+stem+cells.">Platelet lysates produced from expired platelet concentrates support growth and osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells.</a> PLoS One. 8 (7), 68984 (2013).</li><li>Altaie, A., Owston, H., Jones, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+platelet+lysate+for+bone+regeneration+-+Are+we+ready+for+clinical+translation.">Use of platelet lysate for bone regeneration - Are we ready for clinical translation.</a> World Journal of Stem Cells. 8 (2), 47-55 (2016).</li><li>Vesaluoma, M., Teppo, A. M., Gr&#246;nhagen-Riska, C., Tervo, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-derived+growth+factor-BB+(PDGF-BB)+in+tear+fluid:+A+potential+modulator+of+corneal+wound+healing+following+photorefractive+keratectomy.">Platelet-derived growth factor-BB (PDGF-BB) in tear fluid: A potential modulator of corneal wound healing following photorefractive keratectomy.</a> Current Eye Research. 16 (8), 825-831 (1997).</li><li>Zheng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+the+transforming+growth+factor+&#946;+activity+in+normal+and+dry+eye+human+tears+by+CCL-185+cell+bioassay.">Evaluation of the transforming growth factor &#946; activity in normal and dry eye human tears by CCL-185 cell bioassay.</a> Cornea. 29 (9), 1048 (2010).</li><li>Zamani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+therapeutic+approaches+in+utilizing+platelet+lysate+in+regenerative+medicine:+Are+we+ready+for+clinical+use.">Novel therapeutic approaches in utilizing platelet lysate in regenerative medicine: Are we ready for clinical use.</a> Journal of Cellular Physiology. 234 (10), 17172-17186 (2019).</li><li>Ministro della Salute. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disposizioni+relative+ai+requisiti+di+qualit&#224;+e+sicurezza+del+sangue+e+degli+emocomponenti.">Disposizioni relative ai requisiti di qualit&#224; e sicurezza del sangue e degli emocomponenti.</a> Italian Ministry of Health. , (2015).</li><li>Aprili, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Raccomandazioni+SIMTI+sugli+emocomponenti+per+uso+non+trasfusionale.">Raccomandazioni SIMTI sugli emocomponenti per uso non trasfusionale.</a> Societ&#224; Italiana di Medicina Trasfusionale e Immunoematologia. , (2012).</li><li>Schiroli, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+two+alternative+procedures+to+obtain+packed+red+blood+cells+for+&#946;-thalassemia+major+transfusion+therapy.">Comparison of two alternative procedures to obtain packed red blood cells for &#946;-thalassemia major transfusion therapy.</a> Biomolecules. 11 (11), 1638 (2021).</li><li>Pulcini, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apheresis+platelet+rich-plasma+for+regenerative+medicine:+An+in+vitro+study+on+osteogenic+potential.">Apheresis platelet rich-plasma for regenerative medicine: An in vitro study on osteogenic potential.</a> International Journal of Molecular Science. 22 (16), 8764 (2021).</li><li>Ohashi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Presence+of+epidermal+growth+factor+in+human+tears.">Presence of epidermal growth factor in human tears.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 30 (8), 1879-1882 (1989).</li><li>Vitale, S., Goodman, L. A., Reed, G. F., Smith, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+the+NEI-VFQ+and+OSDI+questionnaires+in+patients+with+Sj&#246;gren's+syndrome-related+dry+eye.">Comparison of the NEI-VFQ and OSDI questionnaires in patients with Sj&#246;gren's syndrome-related dry eye.</a> Health Quality of Life Outcomes. 2, 44 (2004).</li><li>Schiffman, R. M., Christianson, M. D., Jacobsen, G., Hirsch, J. D., Reis, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reliability+and+validity+of+the+Ocular+Surface+Disease+Index.">Reliability and validity of the Ocular Surface Disease Index.</a> Archives of Ophthalmology. 118 (5), 615-621 (2000).</li><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristics+of+platelet+lysate+compared+to+autologous+and+allogeneic+serum+eye+drops.">Characteristics of platelet lysate compared to autologous and allogeneic serum eye drops.</a> Translational Vision Science and Technology. 9 (4), 24 (2020).</li><li>Henschler, R., Gabriel, C., Schallmoser, K., Burnouf, T., Koh, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+platelet+lysate+current+standards+and+future+developments.">Human platelet lysate current standards and future developments.</a> Transfusion. 59 (4), 1407-1413 (2019).</li><li>Samarkanova, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+evaluation+of+allogeneic+eye+drops+from+cord+blood+platelet+lysate.">Clinical evaluation of allogeneic eye drops from cord blood platelet lysate.</a> Blood Transfusion. 19 (4), 347-356 (2021).</li><li>Strunk, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=International+Forum+on+GMP-grade+human+platelet+lysate+for+cell+propagation:+Summary.">International Forum on GMP-grade human platelet lysate for cell propagation: Summary.</a> Vox Sanguinis. 113 (1), 80-87 (2018).</li><li>Schiroli, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+COVID-19+outbreak+on+the+Transfusion+Medicine+Unit+of+a+Northern+Italy+Hospital+and+Cancer+Centre.">The impact of COVID-19 outbreak on the Transfusion Medicine Unit of a Northern Italy Hospital and Cancer Centre.</a> Vox Sanguinis. 117 (2), 235-242 (2021).</li><li>Klatte-Schulz, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+analysis+of+different+platelet+lysates+and+platelet+rich+preparations+to+stimulate+tendon+cell+biology:+An+in+vitro+study.">Comparative analysis of different platelet lysates and platelet rich preparations to stimulate tendon cell biology: An in vitro study.</a> International Journal of Molecular Science. 19 (1), 212 (2018).</li><li>Fea, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+autologous+platelet+lysate+eye+drops:+An+in+vivo+confocal+microscopy+study.">The effect of autologous platelet lysate eye drops: An in vivo confocal microscopy study.</a> BioMed Research International. 2016, 8406832 (2016).</li><li>Abu-Ameerh, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+lysate+promotes+re-epithelialization+of+persistent+epithelial+defects:+A+pilot+study.">Platelet lysate promotes re-epithelialization of persistent epithelial defects: A pilot study.</a> International Ophthalmology. 39 (7), 1483-1490 (2019).</li><li>Geremicca, W., Fonte, C., Vecchio, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+components+for+topical+use+in+tissue+regeneration:+evaluation+of+corneal+lesions+treated+with+platelet+lysate+and+considerations+on+repair+mechanisms.">Blood components for topical use in tissue regeneration: evaluation of corneal lesions treated with platelet lysate and considerations on repair mechanisms.</a> Blood Transfusion. 8 (2), 107-112 (2010).</li><li>De Paiva, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+TGF-&#946;+signaling+improves+ocular+surface+epithelial+disease+in+experimental+autoimmune+keratoconjunctivitis+sicca.">Disruption of TGF-&#946; signaling improves ocular surface epithelial disease in experimental autoimmune keratoconjunctivitis sicca.</a> PLoS One. 6 (12), 29017 (2011).</li></ol>

Nos últimos anos, o uso clínico de produtos à base de plaquetas para patologias da superfície ocular tem aumentado, mas sua difusão é dificultada pela falta de robustez científica. Isso é causado principalmente pela ampla heterogeneidade nas fontes de doadores e nos protocolos de preparação, que muitas vezes não são totalmente divulgados ou não são projetados especificamente para o propósito para o qual são dispensados. Particularmente, ainda faltam informações sobre produtos à base de plaquetas coleta...

Os produtos derivados do sangue são amplamente utilizados no cuidado de feridas1, cirurgia maxilofacial e ortopédica e para o tratamento de diferentes doenças da superfície ocular2, como a doença do olho seco (DED)3. Na DED, a homeostase do filme lacrimal é prejudicada como consequência do funcionamento anormal de diferentes fatores envolvidos na produção de lágrimas e na integridade da superfície ocular 4,5.
A DED é caracterizada por heterogeneidade de causas e gravidade 6,7,8 e pode ser consequência de diferentes fatores como envelhecimento, sexo9, lentes de contato, medicamentos tópicos ou sistêmicos 10 ou condições pré-existentes como a síndrome de Sjögren 10. Apesar de apresentar sintomas leves, a DED acomete milhões de pessoas em todo o mundo, impactando sua qualidade de vida e também o sistema de saúde6.
Muitos tratamentos têm sido relatados para essa patologia, mas ainda não há consenso sobre a solução mais eficaz12. Até o momento, as lágrimas artificiais são a primeira linha de terapia voltada para restaurar a composição aquosa do filme lacrimal, embora esses substitutos não contenham os principais solutos biologicamente ativos das lágrimas naturais 6,11. Os produtos à base de plaquetas são considerados uma alternativa válida12,13 às lágrimas artificiais, embora sua eficácia clínica, recomendações de uso e métodos de preparação ainda sejam motivo de debate3.
Os produtos à base de sangue compartilham com as lágrimas uma composição semelhante em termos de metabólitos14, proteínas, lipídios, vitaminas, íons, fatores de crescimento (GFs), compostos antioxidantes 11 e osmolaridade (300 mOsm/L)11. Por meio da atividade sinérgica de seus componentes, promovem a regeneração do epitélio corneano, inibem a liberação de citocinas inflamatórias e aumentam o número de células caliciformes e a expressão de mucinas na conjuntiva 2,3.
Até o momento, a heterogeneidade em produtos oftálmicos à base de sangue tem sido documentada na literatura; esses produtos podem ser classificados de acordo com a origem do doador de sangue, ou seja, autólogo ou alogênico, bem como a fonte sanguínea, ou seja, sangue periférico, sangue do cordão umbilical, soro ou plaquetas.
Embora os produtos autólogos tenham sido os mais difundidos3, os alogênicos estão se tornando a escolha preferida, uma vez que garantem maiores padrões de eficácia e segurança 15, juntamente com uma redução significativa nos custos16,17. Estudos prévios, de fato, comprovaram que produtos à base de sangue obtidos de pacientes com doenças autoimunes e/ou sistêmicas podem apresentar qualidade e funcionalidade alteradas 6,16,17. Apesar de os colírios à base de soro serem os mais difundidos, os produtos à base de plaquetas estão se firmando recentemente como uma alternativa válida, pois podem ser facilmente preparados mantendo níveis significativos de eficácia 3,11. Os produtos à base de plaquetas atualmente disponíveis podem ser divididos em plasma rico em plaquetas (PRP), lisado plasmático rico em plaquetas (PRP-L) e plasma rico em fatores de crescimento (PRGF)3.
Entre eles, o PRP-L tem a vantagem de ser um produto congelado de longa duração. O PRP-L pode ser preparado a partir de aférese, buffy-coats, ou mesmo de plaquetas expirantes (PLTs)18,19, reduzindo preciosamente seu desperdício. As alíquotas podem ser armazenadas por meses nos centros de transfusões de sangue a -80 °C ou mesmo nas casas dos pacientes a -15 °C por períodos mais curtos.
Os PRP-L são altamente enriquecidos em FGs, que comprovadamente estimulam a regeneração da superfície ocular 12,20,21. No entanto, são poucos os estudos clínicos relatados nessa área, e todos utilizaram fontes autólogas 3,22. O PRP-L ainda necessita de validação e caracterização adicionais antes de poder ser utilizado rotineiramente para o tratamento de doenças da superfície ocular, uma vez que não existem diretrizes padronizadas para sua preparação, dispensação e armazenamento3.
Neste documento, um protocolo detalhado é compartilhado para a produção de PRP-L usado na Unidade de Medicina Transfusional em AUSL-IRCCS di Reggio Emilia, Itália, e dispensação a pacientes com DED. Nosso objetivo é ajudar a comunidade científica a desenvolver métodos padrão de preparação, que possam aumentar a homogeneidade e a consistência em estudos e abordagens clínicas em todo o mundo.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Equipments</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CompoSeal Mobilea II</td>
			<td>Fresenius Kabi, Germany</td>
			<td></td>
			<td>bag sealer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HeraSafe hood</td>
			<td>Heraeus Instruments, Germany</td>
			<td></td>
			<td>Class II biohazard hood</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MCS+ 9000 Mobile Platelet Collection System</td>
			<td>Haemonetics, Italy</td>
			<td></td>
			<td>automated plasma and multicomponent collection equipment for donating platelet, red cell, plasma, or combination blood components</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platelet shaker, PF396i</td>
			<td>Helmer, USA</td>
			<td></td>
			<td>Platelet shaker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Raycell X-ray Blood Irradiator</td>
			<td>MDS Nordion, Canada</td>
			<td></td>
			<td>X-ray Blood Irradiator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ROTIXA 50RS</td>
			<td>Hettich Zentrifugen, Germany</td>
			<td></td>
			<td>High speed entrifuge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sysmex XS-1000i</td>
			<td>Sysmex Europe GMBH, Germany</td>
			<td></td>
			<td>haemocytometer for platelet count</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Warm bath, WB-M15</td>
			<td>Falc Instruments, Italy</td>
			<td></td>
			<td>Warm bath</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Materials</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACD-A anticoagulant solution A</td>
			<td>Fenwal Inc., USA</td>
			<td>DIN 00788139</td>
			<td>anticoagulant solution for platelet apheresis (1000 ml)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD BACTEC Peds Plus/F Culture vials</td>
			<td>BD Biosciences, USA</td>
			<td>BD 442020</td>
			<td>Sterility assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD BACTEC Peds Plus/F Culture vials</td>
			<td>BD Biosciences, USA</td>
			<td>442020</td>
			<td>At least 2 vials for sterility assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Luer Lok Syringe</td>
			<td>BD Plastipack, USA</td>
			<td>300865</td>
			<td>At least 4 sterile syringes (50 ml)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio-Plex Human Cancer Panel 1</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>171AC500M</td>
			<td>Standard panel for PDGF isoforms assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio-Plex Human Cancer Panel 2</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>171AC600M</td>
			<td>Standard panel for EGF assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio-Plex MAGPIX Multiplex Reader</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>Magpix</td>
			<td>This instrument allows multiple immunoassays using functionalized magnetic beads.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio-Plex Pro TGF-b Assay</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>10024984</td>
			<td>Set and standards for TGFb isoforms assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BioRet</td>
			<td>ARIES s.r.l., Italy</td>
			<td>A2DH0020</td>
			<td>At least 4 piercing spike for blood bags</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood collection tube</td>
			<td>BD Vacutainer, USA</td>
			<td>367835</td>
			<td>1 tube, necessary to perform platelet counts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye drops kit. COL Medical Device for the application and preservation of eye drops from haemocomponents</td>
			<td>Biomed Device s.r.l., Italy</td>
			<td>COLC50</td>
			<td>Eye drops kit. At least 2 kits for each PRP unit collected</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Cancer PDGF-AB/BB Set 1x96well</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>171BC511</td>
			<td>Set for PDGF isoforms assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Cancer2 EGF Set 1x96well</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>171BC603M</td>
			<td>Set for EGF assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl 0.9% sterile solution</td>
			<td>Baxter S.p.A., Italy</td>
			<td>B05BB01</td>
			<td>1000 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OSDI Questionnaire</td>
			<td>Allergan Inc., USA</td>
			<td>OSDI</td>
			<td>Ocular Surface Disease Index Questionnaire</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Piercing spike</td>
			<td>BioRet ARIES s.r.l., Italy</td>
			<td>BS051004</td>
			<td>Spike</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platelet Additive Solution A+ T-PAS+</td>
			<td>TERUMO BCT Inc., Italy</td>
			<td>40842</td>
			<td>preservative solution for platelet concentrates (1000 ml)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software Excel</td>
			<td>Microsoft, USA</td>
			<td>Excel</td>
			<td>Data analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Teruflex Transfer bag 1000 ml</td>
			<td>TERUMO BCT Inc., Italy</td>
			<td>BB*T100BM</td>
			<td>1 for PRP dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Teruflex Transfer bag 300 ml</td>
			<td>TERUMO BCT Inc., Italy</td>
			<td>BB*030CM</td>
			<td>At least 6 for each PRP unit collected</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

platelet-rich plasma lysate for treatment of eye surface diseases

Várias doenças da superfície ocular são tratadas com colírios derivados do sangue. Seu uso foi introduzido na prática clínica por causa de seu conteúdo de metabólito e fator de crescimento, o que promove a regeneração da superfície ocular. Os colírios à base de sangue podem ser preparados a partir de diferentes fontes (ou seja, doação de sangue total ou aférese plaquetária), bem como com diferentes protocolos (por exemplo, diferentes diluições e ciclos de congelamento/descongelamento). Essa variabilidade dificulta a padronização dos protocolos clínicos e, consequentemente, a avaliação de sua eficácia clínica. O pormenor e a partilha dos procedimentos metodológicos podem contribuir para a definição de orientações comuns. Nos últimos anos, os produtos alogênicos vêm se difundindo como alternativa aos tratamentos autólogos, uma vez que garantem maiores padrões de eficácia; entre eles, os colírios de lisado plasmático rico em plaquetas (PRP-L) são preparados com procedimentos de fabricação simples. Na unidade de medicina transfusional da AUSL-IRCCS di Reggio Emilia, Itália, o PRP-L é obtido a partir da doação de aférese plaquetária. Este produto é inicialmente diluído a 0,3 x 10 9 plaquetas/mL (a partir de uma concentração média de 1 x 10 9 plaquetas/mL) em NaCl a0,9%. As plaquetas diluídas são congeladas/descongeladas e, posteriormente, centrifugadas para eliminar detritos. O volume final é dividido em alíquotas de 1,45 mL e armazenado a -80 °C. Antes de serem dispensados aos pacientes, os colírios são testados quanto à esterilidade. Os pacientes podem armazenar lisados plaquetários a -15 °C por até 1 mês. A composição do fator de crescimento também é avaliada a partir de alíquotas selecionadas aleatoriamente, e os valores médios são relatados aqui.

A justificativa para o uso de colírios derivados do soro (que é o produto à base de sangue mais frequentemente usado para o tratamento de doenças da superfície ocular) reside em seu conteúdo de GFs, que são quase completamente derivados de plaquetas circulantes. O PRP contém um número significativamente maior de plaquetas (e, consequentemente, de GFs derivados de plaquetas) em comparação com o soro do sangue periférico, variando entre 0,15 x 10 9-0,45 x 109 PLTs/mL. De acordo com as leis...

Watch this Scientific Journal Video about Platelet-Rich Plasma Lysate for Treatment of Eye Surface Diseases at JoVE.com

Platelet-Rich Plasma Lysate for Treatment of Eye Surface Diseases

Os lisados plaquetários representam uma ferramenta emergente para o tratamento de doenças da superfície ocular. Aqui, propomos um método para o preparo, dispensação, armazenamento e caracterização do lisado plaquetário coletado de doadores de plaquetas.

Lisado Plasmático Rico em Plaquetas para Tratamento de Doenças da Superfície Ocular

Various ocular surface diseases are treated with blood-derived eye drops. Their use has been introduced in clinical practice because of their metabolite ...

PRP Lysate é um produto emergente à base de plaquetas para o tratamento de doenças da superfície ocular. Aqui queremos compartilhar e detalhar nosso protocolo de produção para cobrir o desenvolvimento de diretrizes metodológicas comuns. Os produtos halogênicos têm se difundido como uma alternativa aos tratamentos autólogos.Uma vez que garantem padrões de eficácia mais elevados. PRP Lisado contém uma alta concentração de fatores de crescimento. Sua produção é barata e simples e pode ser armazenada por um longo período de tempo.O uso de hemoderivados para o tratamento de doenças oculares ou faciais está amplamente documentado na literatura. No entanto, as suas candidaturas ainda não encontraram um consenso. Uma das razões é a variabilidade dos métodos utilizados para a sua produção.Nosso objetivo é compartilhar nosso protocolo para desenvolver metodologias comuns. Para começar, realize uma contagem de plaquetas com um hemocistômetro usando a amostra coletada da bolsa principal através de um espigão perfurante. Diluir o plasma rico em plaquetas com uma quantidade adequada de cloreto de sódio estéril a 0,9%.Divida o plasma diluído rico em plaquetas em sacos coletores vazios de 300 mililitros para atingir um volume líquido de 190 mililitros por saco. Use uma alíquota de plasma residual diluído rico em plaquetas para realizar controles de qualidade, avaliando possível contaminação microbiana. Prepare um ensaio de esterilidade seguindo as instruções do fabricante para ser testado em um laboratório de microbiologia.Armazenar sacos de plasma diluídos ricos em plaquetas a menos 80 graus Celsius por um período máximo de dois meses antes do descongelamento. Certifique-se de que um banho quente é definido a 37 graus Celsius. Coloque os sacos de plasma ricos em plaquetas no banho quente e espere até descongelar completamente.Centrifugar os sacos de plasma ricos em plaquetas a 3000 vezes G durante 30 minutos à temperatura ambiente. Explorando o pico perfurante do saco de transferência, conecte o saco centrifugado com um saco de transferência estéril de 300 mililitros vazio. Transfira cuidadosamente o sobrenadante PRP Lysate, evitando detritos para o novo saco.Sele o tubo de conexão da unidade PRP Lysate com um selador de saco. Recolha 30 a 60 mililitros de lisado PRP com uma seringa estéril e ligue a seringa à ligação Luer Lock na linha de enchimento. De acordo com as instruções do fabricante, gire a torneira pela metade de uma volta para abrir a linha entre a seringa contendo lisado PRP e a seringa pré-conectada.Encha a seringa pré-ligada com PRP Lysate. Desligue a seringa PRP Lysate. Feche a tampa do tubo da conexão Luer Lock e gire a torneira para a posição original.Utilize a seringa do kit de colírios para encher os frascos para injetáveis com PRP Lysate. Certifique-se de que cada aplicador está devidamente preenchido. Em seguida, selá-los individualmente com um selador de sacos.Repita o procedimento com um novo kit de colírios. Use uma pequena alíquota de lisado de PRP diluído residual para avaliar a possível contaminação microbiana. Rotule corretamente cada aplicador e coloque-os em um saco plástico.Rotule o saco plástico também. Tomando o cuidado de destacar o grupo sanguíneo do doador. Armazenar a menos 80 graus Celsius por um máximo de 24 meses antes da designação do paciente, de acordo com a Lei e Diretrizes italianas.Uma avaliação quantitativa do fator de crescimento epidérmico, do fator de crescimento derivado de plaquetas e da isoforma Beta do fator de crescimento transformador no lisado PRP de dois doadores diferentes mostra que os resultados de 0,3 vezes 10 a nona plaquetas por mililitro de diluição revelaram-se mais semelhantes à composição da lágrima. Após uma terapia de seis meses com PRP Lisado escores de doença de superfície ocular diminuiu de 56 mais menos 21 para 45 mais menos 21. Indicando melhora na qualidade de vida do paciente.As diferenças metodológicas entre os diferentes métodos de preparação do lisado alogênico de PRP não se mostraram prejudiciais à capacidade regenerativa do lisado de PRP testado nos demais tecidos. A diluição do plasma com cloreto de sódio e o armazenamento de plasma rico em plaquetas precisam ser realizados com cuidado. Como isso pode alterar a composição do PRP Lisado.A análise comparativa é necessária para investigar as variações nessas etapas.

Research

JoVE Journal

Medicine

High Content Screening in Neurodegenerative Diseases

Screening alto teor em Doenças Neurodegenerativas

The functional annotation of genomes, construction of molecular networks and novel drug target identification, are important challenges that need to be ...

Medicina

Quantitative Fundus Autofluorescence for the Evaluation of Retinal Diseases

Quantitativa de autofluorescência de Avaliação de Doenças da retina

The retinal pigment epithelium (RPE) is juxtaposed to the overlying sensory retina, and supports the function of the visual system. Among the tasks ...

Network Analysis of Foramen Ovale Electrode Recordings in Drug-resistant Temporal Lobe Epilepsy Patients

Análise de Redes de forame oval Eletrodo Recordings na epilepsia do lobo temporal Os pacientes resistentes a drogas

Approximately 30% of epilepsy patients are refractory to antiepileptic drugs. In these cases, surgery is the only alternative to eliminate/control ...

Effects of Allogeneic Platelet-Rich Plasma (PRP) on the Healing Process of Sectioned Achilles Tendons of Rats: A Methodological Description

Effects of Allogeneic Platelet-Rich Plasma PRP on the Healing Process of Sectioned Achilles Tendons of Rats: A Methodological Description

Efeitos de alogênico Plasma rico em plaquetas (PRP) sobre o processo de cicatrização dos tendões de Aquiles seccionados de ratos: uma descrição metodológica

This article describes the experimental procedures used to observe if PRP can positively affect tendon healing. There are 4 main steps to follow: induce a ...

Preparation, Procedures and Evaluation of Platelet-Rich Plasma Injection in the Treatment of Knee Osteoarthritis

Preparação, procedimentos e avaliação da injeção de Plasma rico em plaquetas no tratamento da osteoartrose do joelho

Knee osteoarthritis (KOA) is one of the most frequently encountered diseases in the orthopedic department. Existing non-surgical treatments have a limited ...

Intense Pulsed Light for the Treatment of Dry Eye Owing to Meibomian Gland Dysfunction

Intensa luz pulsada para o tratamento de olho seco devido à disfunção da glândula meibomiana

Dry eye disease (DED) is an increasingly common condition and one of the most common complaints of patients. The vast majority of DED is caused by the ...

Customizing a Cryolite Glass Prosthetic Eye

Personalizando um olho protético de vidro criolite

In Germany, Austria, and Switzerland, over 90% of ocularists still manufacture customized prostheses using cryolite glass from Thuringia. The present ...

Oxygen-Induced Retinopathy Model for Ischemic Retinal Diseases in Rodents

Modelo de Retinopatia Induzida por Oxigênio para Doenças Isquêmicas da Retina em Roedores

One of the commonly used models for ischemic retinopathies is the oxygen-induced retinopathy (OIR) model. Here we describe detailed protocols for the OIR ...

Basophil Activation Test for Allergy Diagnosis

Teste de ativação basófila para diagnóstico de alergia

The basophil activation test (BAT) is a complementary in vitro diagnostic test that can be used in addition to clinical history, skin test (ST), and ...

Retinal Pigment Epithelium Transplantation in a Non-human Primate Model for Degenerative Retinal Diseases

Transplante de Epitélio de Pigmento De Retina em um modelo de primata não humano para doenças degenerativas da retina

Retinal pigment epithelial (RPE) transplantation holds great promise for the treatment of inherited and acquired retinal degenerative diseases. These ...