Name: platelet-rich plasma lysate for treatment of eye surface diseases
Uploaded: 2022-08-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Platelet-Rich Plasma Lysate for Treatment of Eye Surface Diseases at JoVE.com

Författarna vill tacka "Casa del Dono di Reggio Emilia" för att ha tillhandahållit donatorbaserade trombocytkoncentrat.

PRP-L som används för kvantitativ bedömning av tillväxtfaktorer samlades in i en bredare studie om karakterisering av PRP-produkter för regenerativa ändamål, utförd vid AUSL-IRCCS di Reggio Emilia och godkänd av Area Vasta Emilia Nord Ethical Committee den 10 januari 2019 (protokollnummer 2019/0003319). Givarna gav sitt informerade samtycke enligt Helsingforsdeklarationen. Inget etiskt godkännande var nödvändigt för att samla in aggregerade, anonyma data från frågeformuläret Ocular Surface Disease Index (...

<ol>
	<li>Everts, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-rich+plasma+and+platelet+gel:+A+review.">Platelet-rich plasma and platelet gel: A review.</a> The Journal of Extra-Corporeal Technology. 38 (2), 174 (2006).</li><li>Giannaccare, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+derived+eye+drops+for+the+treatment+of+cornea+and+ocular+surface+diseases.">Blood derived eye drops for the treatment of cornea and ocular surface diseases.</a> Transfusion and Apheresis Science. 56 (4), 595-604 (2017).</li><li>Bernabei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood-based+treatments+for+severe+dry+eye+disease:+The+need+of+a+consensus.">Blood-based treatments for severe dry eye disease: The need of a consensus.</a> Journal of Clinical Medicine. 8 (9), 1478 (2019).</li><li>Findlay, Q., Reid, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+eye+disease:+When+to+treat+and+when+to+refer.">Dry eye disease: When to treat and when to refer.</a> Australian Prescriber. 41 (5), 160-163 (2018).</li><li>Clayton, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+eye.">Dry eye.</a> New England Journal of Medicine. 378 (23), 2212-2223 (2018).</li><li>Jones, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TFOS+DEWS+II+management+and+therapy+report.">TFOS DEWS II management and therapy report.</a> The Ocular Surface. 15 (3), 575-628 (2017).</li><li>Holland, E. J., Darvish, M., Nichols, K. K., Jones, L., Karpecki, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+topical+ophthalmic+drugs+in+the+treatment+of+dry+eye+disease:+A+systematic+literature+review.">Efficacy of topical ophthalmic drugs in the treatment of dry eye disease: A systematic literature review.</a> The Ocular Surface. 17 (3), 412-423 (2019).</li><li>Shih, K. C., Lun, C. N., Jhanji, V., Thong, B. Y. H., Tong, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+review+of+randomized+controlled+trials+in+the+treatment+of+dry+eye+disease+in+Sjogren+syndrome.">Systematic review of randomized controlled trials in the treatment of dry eye disease in Sjogren syndrome.</a> Journal of Inflammation. 14, 26 (2017).</li><li>Rusciano, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+dry+eye+lactoferrin+and+lactobionic+acid.">Age-related dry eye lactoferrin and lactobionic acid.</a> Ophthalmic Research. 60 (2), 94-99 (2018).</li><li>Craig, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TFOS+DEWS+II+definition+and+classification+report.">TFOS DEWS II definition and classification report.</a> The Ocular Surface. 15 (3), 276-283 (2017).</li><li>Drew, V. J., Tseng, C. L., Seghatchian, J., Burnouf, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflections+on+dry+eye+syndrome+treatment:+Therapeutic+role+of+blood+products.">Reflections on dry eye syndrome treatment: Therapeutic role of blood products.</a> Frontiers in Medicine. 5, 33 (2018).</li><li>Giannaccare, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+derived+eye+drops+for+the+treatment+of+cornea+and+ocular+surface+diseases.">Blood derived eye drops for the treatment of cornea and ocular surface diseases.</a> Transfusion and Apheresis Science. 56 (4), 595-604 (2017).</li><li>Acebes-Huerta, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-derived+bio-products:+Classification+update,+applications,+concerns+and+new+perspectives.">Platelet-derived bio-products: Classification update, applications, concerns and new perspectives.</a> Transfusion and Apheresis Science. 59 (1), 102716 (2020).</li><li>Quartieri, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolomics+comparison+of+cord+and+peripheral+blood-derived+serum+eye+drops+for+the+treatment+of+dry+eye+disease.">Metabolomics comparison of cord and peripheral blood-derived serum eye drops for the treatment of dry eye disease.</a> Transfusion and Apheresis Science. 60 (4), 103155 (2021).</li><li>Badami, K. G., McKellar, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allogeneic+serum+eye+drops:+Time+these+became+the+norm.">Allogeneic serum eye drops: Time these became the norm.</a> British Journal of Ophthalmology. 96 (8), 1151-1152 (2012).</li><li>Hwang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+clinical+efficacies+of+autologous+serum+eye+drops+in+patients+with+primary+and+secondary+Sj&#246;gren+syndrome.">Comparison of clinical efficacies of autologous serum eye drops in patients with primary and secondary Sj&#246;gren syndrome.</a> Cornea. 33 (7), 663-667 (2014).</li><li>Chiang, C. C., Lin, J. M., Chen, W. L., Tsai, Y. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allogeneic+serum+eye+drops+for+the+treatment+of+severe+dry+eye+in+patients+with+chronic+graft-versus-host+disease.">Allogeneic serum eye drops for the treatment of severe dry eye in patients with chronic graft-versus-host disease.</a> Cornea. 26 (7), 861-863 (2007).</li><li>Jonsdottir-Buch, S. M., Lieder, R., Sigurjonsson, O. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+lysates+produced+from+expired+platelet+concentrates+support+growth+and+osteogenic+differentiation+of+mesenchymal+stem+cells.">Platelet lysates produced from expired platelet concentrates support growth and osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells.</a> PLoS One. 8 (7), 68984 (2013).</li><li>Altaie, A., Owston, H., Jones, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+platelet+lysate+for+bone+regeneration+-+Are+we+ready+for+clinical+translation.">Use of platelet lysate for bone regeneration - Are we ready for clinical translation.</a> World Journal of Stem Cells. 8 (2), 47-55 (2016).</li><li>Vesaluoma, M., Teppo, A. M., Gr&#246;nhagen-Riska, C., Tervo, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-derived+growth+factor-BB+(PDGF-BB)+in+tear+fluid:+A+potential+modulator+of+corneal+wound+healing+following+photorefractive+keratectomy.">Platelet-derived growth factor-BB (PDGF-BB) in tear fluid: A potential modulator of corneal wound healing following photorefractive keratectomy.</a> Current Eye Research. 16 (8), 825-831 (1997).</li><li>Zheng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+the+transforming+growth+factor+&#946;+activity+in+normal+and+dry+eye+human+tears+by+CCL-185+cell+bioassay.">Evaluation of the transforming growth factor &#946; activity in normal and dry eye human tears by CCL-185 cell bioassay.</a> Cornea. 29 (9), 1048 (2010).</li><li>Zamani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+therapeutic+approaches+in+utilizing+platelet+lysate+in+regenerative+medicine:+Are+we+ready+for+clinical+use.">Novel therapeutic approaches in utilizing platelet lysate in regenerative medicine: Are we ready for clinical use.</a> Journal of Cellular Physiology. 234 (10), 17172-17186 (2019).</li><li>Ministro della Salute. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disposizioni+relative+ai+requisiti+di+qualit&#224;+e+sicurezza+del+sangue+e+degli+emocomponenti.">Disposizioni relative ai requisiti di qualit&#224; e sicurezza del sangue e degli emocomponenti.</a> Italian Ministry of Health. , (2015).</li><li>Aprili, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Raccomandazioni+SIMTI+sugli+emocomponenti+per+uso+non+trasfusionale.">Raccomandazioni SIMTI sugli emocomponenti per uso non trasfusionale.</a> Societ&#224; Italiana di Medicina Trasfusionale e Immunoematologia. , (2012).</li><li>Schiroli, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+two+alternative+procedures+to+obtain+packed+red+blood+cells+for+&#946;-thalassemia+major+transfusion+therapy.">Comparison of two alternative procedures to obtain packed red blood cells for &#946;-thalassemia major transfusion therapy.</a> Biomolecules. 11 (11), 1638 (2021).</li><li>Pulcini, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apheresis+platelet+rich-plasma+for+regenerative+medicine:+An+in+vitro+study+on+osteogenic+potential.">Apheresis platelet rich-plasma for regenerative medicine: An in vitro study on osteogenic potential.</a> International Journal of Molecular Science. 22 (16), 8764 (2021).</li><li>Ohashi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Presence+of+epidermal+growth+factor+in+human+tears.">Presence of epidermal growth factor in human tears.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 30 (8), 1879-1882 (1989).</li><li>Vitale, S., Goodman, L. A., Reed, G. F., Smith, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+the+NEI-VFQ+and+OSDI+questionnaires+in+patients+with+Sj&#246;gren's+syndrome-related+dry+eye.">Comparison of the NEI-VFQ and OSDI questionnaires in patients with Sj&#246;gren's syndrome-related dry eye.</a> Health Quality of Life Outcomes. 2, 44 (2004).</li><li>Schiffman, R. M., Christianson, M. D., Jacobsen, G., Hirsch, J. D., Reis, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reliability+and+validity+of+the+Ocular+Surface+Disease+Index.">Reliability and validity of the Ocular Surface Disease Index.</a> Archives of Ophthalmology. 118 (5), 615-621 (2000).</li><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristics+of+platelet+lysate+compared+to+autologous+and+allogeneic+serum+eye+drops.">Characteristics of platelet lysate compared to autologous and allogeneic serum eye drops.</a> Translational Vision Science and Technology. 9 (4), 24 (2020).</li><li>Henschler, R., Gabriel, C., Schallmoser, K., Burnouf, T., Koh, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+platelet+lysate+current+standards+and+future+developments.">Human platelet lysate current standards and future developments.</a> Transfusion. 59 (4), 1407-1413 (2019).</li><li>Samarkanova, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+evaluation+of+allogeneic+eye+drops+from+cord+blood+platelet+lysate.">Clinical evaluation of allogeneic eye drops from cord blood platelet lysate.</a> Blood Transfusion. 19 (4), 347-356 (2021).</li><li>Strunk, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=International+Forum+on+GMP-grade+human+platelet+lysate+for+cell+propagation:+Summary.">International Forum on GMP-grade human platelet lysate for cell propagation: Summary.</a> Vox Sanguinis. 113 (1), 80-87 (2018).</li><li>Schiroli, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+COVID-19+outbreak+on+the+Transfusion+Medicine+Unit+of+a+Northern+Italy+Hospital+and+Cancer+Centre.">The impact of COVID-19 outbreak on the Transfusion Medicine Unit of a Northern Italy Hospital and Cancer Centre.</a> Vox Sanguinis. 117 (2), 235-242 (2021).</li><li>Klatte-Schulz, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+analysis+of+different+platelet+lysates+and+platelet+rich+preparations+to+stimulate+tendon+cell+biology:+An+in+vitro+study.">Comparative analysis of different platelet lysates and platelet rich preparations to stimulate tendon cell biology: An in vitro study.</a> International Journal of Molecular Science. 19 (1), 212 (2018).</li><li>Fea, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+autologous+platelet+lysate+eye+drops:+An+in+vivo+confocal+microscopy+study.">The effect of autologous platelet lysate eye drops: An in vivo confocal microscopy study.</a> BioMed Research International. 2016, 8406832 (2016).</li><li>Abu-Ameerh, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+lysate+promotes+re-epithelialization+of+persistent+epithelial+defects:+A+pilot+study.">Platelet lysate promotes re-epithelialization of persistent epithelial defects: A pilot study.</a> International Ophthalmology. 39 (7), 1483-1490 (2019).</li><li>Geremicca, W., Fonte, C., Vecchio, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+components+for+topical+use+in+tissue+regeneration:+evaluation+of+corneal+lesions+treated+with+platelet+lysate+and+considerations+on+repair+mechanisms.">Blood components for topical use in tissue regeneration: evaluation of corneal lesions treated with platelet lysate and considerations on repair mechanisms.</a> Blood Transfusion. 8 (2), 107-112 (2010).</li><li>De Paiva, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+TGF-&#946;+signaling+improves+ocular+surface+epithelial+disease+in+experimental+autoimmune+keratoconjunctivitis+sicca.">Disruption of TGF-&#946; signaling improves ocular surface epithelial disease in experimental autoimmune keratoconjunctivitis sicca.</a> PLoS One. 6 (12), 29017 (2011).</li></ol>

Under de senaste åren har den kliniska användningen av trombocytbaserade produkter för okulära ytpatologier ökat, men deras diffusion hindras av bristen på vetenskaplig robusthet. Detta orsakas främst av stor heterogenitet i givarkällor och beredningsprotokoll, som ofta inte är fullständigt avslöjade eller inte specifikt utformade för det syfte för vilket de dispenseras. Särskilt saknas fortfarande information om trombocytbaserade produkter som samlats in av aferes. Syftet med detta arbete var därför att ...

Blodderivat används ofta i sårvård1, maxillofacial och ortopedisk kirurgi och för behandling av olika okulära ytsjukdomar2 såsom torra ögonsjukdomar (DED)3. Vid DED försämras tårfilmens homeostas som en följd av onormal funktion hos olika faktorer som är involverade i tårproduktion och okulär ytintegritet 4,5.
DED kännetecknas av heterogenitet i orsaker och svårighetsgrad 6,7,8 och kan vara en följd av olika faktorer som åldrande, kön9, kontaktlinser, aktuella eller systemiska läkemedel 10 eller redan existerande tillstånd som Sjögrens syndrom 10. Trots att de har milda symtom påverkar DED miljontals människor över hela världen, vilket påverkar deras livskvalitet och hälso- och sjukvårdssystemet också6.
Många behandlingar har rapporterats för denna patologi, men det finns fortfarande ingen överenskommelse om den mest effektiva lösningen12. Hittills är konstgjorda tårar den första behandlingslinjen som syftar till att återställa tårfilmens vattenhaltiga sammansättning, om än dessa substitut inte innehåller de viktigaste biologiskt aktiva lösta ämnena av naturliga tårar 6,11. Trombocytbaserade produkter anses vara ett giltigt alternativ12,13 till konstgjorda tårar, även om deras kliniska effekt, rekommendationer för användning och beredningsmetoder fortfarande är föremål för debatt3.
Blodbaserade produkter delar med tårar en liknande sammansättning när det gäller metaboliter14, proteiner, lipider, vitaminer, joner, tillväxtfaktorer (GF), antioxidantföreningar 11 och osmolaritet (300 mOsm / L)11. Genom den synergistiska aktiviteten hos deras komponenter främjar de regenerering av hornhinneepitelet, hämmar frisättningen av inflammatoriska cytokiner och ökar antalet bägareceller och uttrycket av muciner i konjunktiva 2,3.
Hittills har heterogenitet i oftalmiska blodbaserade produkter dokumenterats i litteraturen; Dessa produkter kan klassificeras enligt blodgivarnas ursprung, dvs. autologa eller allogena, liksom blodkällan, dvs. perifert blod, navelsträngsblod, serum eller blodplättar.
Även om autologa produkter var de mest utbredda3, blir allogena produkter nu det föredragna valet, eftersom de säkerställer högre effektivitets- och säkerhetsstandarder 15, tillsammans med en betydande minskning av kostnaderna16,17. Tidigare studier visade faktiskt att blodbaserade produkter som erhållits från patienter med autoimmuna och/eller systemiska sjukdomar kan uppvisa förändrad kvalitet och funktionalitet 6,16,17. Trots det faktum att serumbaserade ögondroppar är de mest utbredda, blir trombocytbaserade produkter nyligen bekräftade som ett giltigt alternativ, eftersom de lätt kan förberedas samtidigt som de bibehåller signifikanta effektnivåer 3,11. För närvarande tillgängliga trombocytbaserade produkter kan delas in i trombocytrik plasma (PRP), trombocytrikt plasmalysat (PRP-L) och plasmarikt på tillväxtfaktorer (PRGF)3.
Bland dem har PRP-L fördelen att vara en fryst produkt med lång livslängd. PRP-L kan framställas av aferes, buffy-coats eller till och med från utgående blodplättar (PLTs)18,19, vilket på ett värdefullt sätt minskar deras slöseri. Alikvoterna kan lagras i månader i blodtransfusionscentra vid −80 °C eller till och med hemma hos patienter vid −15 °C under kortare perioder.
PRP-L är mycket berikade i GFs, som har visat sig stimulera ögonytans regenerering 12,20,21. Ändå finns det bara ett fåtal rapporterade kliniska studier på detta område, och alla använde autologa källor 3,22. PRP-L behöver fortfarande ytterligare validering och karakterisering innan den rutinmässigt kan användas för behandling av ögonytesjukdomar, eftersom det inte finns några standardiserade riktlinjer för dess beredning, dispensering och lagring3.
Häri delas ett detaljerat protokoll för produktion av PRP-L som används vid transfusionsmedicinenheten i AUSL-IRCCS di Reggio Emilia, Italien, och dispensering till patienter med DED. Vi strävar efter att hjälpa det vetenskapliga samfundet att utveckla standardmetoder för beredning, vilket kan öka homogeniteten och konsistensen i världsomspännande studier och kliniska tillvägagångssätt.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Equipments</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CompoSeal Mobilea II</td>
			<td>Fresenius Kabi, Germany</td>
			<td></td>
			<td>bag sealer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HeraSafe hood</td>
			<td>Heraeus Instruments, Germany</td>
			<td></td>
			<td>Class II biohazard hood</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MCS+ 9000 Mobile Platelet Collection System</td>
			<td>Haemonetics, Italy</td>
			<td></td>
			<td>automated plasma and multicomponent collection equipment for donating platelet, red cell, plasma, or combination blood components</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platelet shaker, PF396i</td>
			<td>Helmer, USA</td>
			<td></td>
			<td>Platelet shaker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Raycell X-ray Blood Irradiator</td>
			<td>MDS Nordion, Canada</td>
			<td></td>
			<td>X-ray Blood Irradiator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ROTIXA 50RS</td>
			<td>Hettich Zentrifugen, Germany</td>
			<td></td>
			<td>High speed entrifuge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sysmex XS-1000i</td>
			<td>Sysmex Europe GMBH, Germany</td>
			<td></td>
			<td>haemocytometer for platelet count</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Warm bath, WB-M15</td>
			<td>Falc Instruments, Italy</td>
			<td></td>
			<td>Warm bath</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Materials</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACD-A anticoagulant solution A</td>
			<td>Fenwal Inc., USA</td>
			<td>DIN 00788139</td>
			<td>anticoagulant solution for platelet apheresis (1000 ml)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD BACTEC Peds Plus/F Culture vials</td>
			<td>BD Biosciences, USA</td>
			<td>BD 442020</td>
			<td>Sterility assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD BACTEC Peds Plus/F Culture vials</td>
			<td>BD Biosciences, USA</td>
			<td>442020</td>
			<td>At least 2 vials for sterility assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Luer Lok Syringe</td>
			<td>BD Plastipack, USA</td>
			<td>300865</td>
			<td>At least 4 sterile syringes (50 ml)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio-Plex Human Cancer Panel 1</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>171AC500M</td>
			<td>Standard panel for PDGF isoforms assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio-Plex Human Cancer Panel 2</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>171AC600M</td>
			<td>Standard panel for EGF assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio-Plex MAGPIX Multiplex Reader</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>Magpix</td>
			<td>This instrument allows multiple immunoassays using functionalized magnetic beads.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio-Plex Pro TGF-b Assay</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>10024984</td>
			<td>Set and standards for TGFb isoforms assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BioRet</td>
			<td>ARIES s.r.l., Italy</td>
			<td>A2DH0020</td>
			<td>At least 4 piercing spike for blood bags</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood collection tube</td>
			<td>BD Vacutainer, USA</td>
			<td>367835</td>
			<td>1 tube, necessary to perform platelet counts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye drops kit. COL Medical Device for the application and preservation of eye drops from haemocomponents</td>
			<td>Biomed Device s.r.l., Italy</td>
			<td>COLC50</td>
			<td>Eye drops kit. At least 2 kits for each PRP unit collected</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Cancer PDGF-AB/BB Set 1x96well</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>171BC511</td>
			<td>Set for PDGF isoforms assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Cancer2 EGF Set 1x96well</td>
			<td>BioRad Laboratories, USA</td>
			<td>171BC603M</td>
			<td>Set for EGF assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl 0.9% sterile solution</td>
			<td>Baxter S.p.A., Italy</td>
			<td>B05BB01</td>
			<td>1000 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OSDI Questionnaire</td>
			<td>Allergan Inc., USA</td>
			<td>OSDI</td>
			<td>Ocular Surface Disease Index Questionnaire</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Piercing spike</td>
			<td>BioRet ARIES s.r.l., Italy</td>
			<td>BS051004</td>
			<td>Spike</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platelet Additive Solution A+ T-PAS+</td>
			<td>TERUMO BCT Inc., Italy</td>
			<td>40842</td>
			<td>preservative solution for platelet concentrates (1000 ml)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software Excel</td>
			<td>Microsoft, USA</td>
			<td>Excel</td>
			<td>Data analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Teruflex Transfer bag 1000 ml</td>
			<td>TERUMO BCT Inc., Italy</td>
			<td>BB*T100BM</td>
			<td>1 for PRP dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Teruflex Transfer bag 300 ml</td>
			<td>TERUMO BCT Inc., Italy</td>
			<td>BB*030CM</td>
			<td>At least 6 for each PRP unit collected</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

platelet-rich plasma lysate for treatment of eye surface diseases

Olika okulära ytsjukdomar behandlas med blod-härledda ögondroppar. Deras användning har introducerats i klinisk praxis på grund av deras metabolit- och tillväxtfaktorinnehåll, vilket främjar regenerering av ögonytan. Blodbaserade ögondroppar kan framställas från olika källor (dvs. helblods- eller trombocytaferesdonation), liksom med olika protokoll (t.ex. olika utspädningar och frys-/upptiningscykler). Denna variabilitet hindrar standardiseringen av kliniska protokoll och följaktligen utvärderingen av deras kliniska effekt. Detaljerade och delade metodförfaranden kan bidra till att fastställa gemensamma riktlinjer. Under de senaste åren har allogena produkter spridit sig som ett alternativ till de autologa behandlingarna eftersom de garanterar högre effektstandarder; bland dem framställs de blodplättrika plasmalysatet (PRP-L) ögondropparna med enkla tillverkningsförfaranden. Vid enheten för transfusionsmedicin vid AUSL-IRCCS di Reggio Emilia, Italien, erhålls PRP-L från blodplätt-aferesdonation. Denna produkt späds initialt till 0,3 x 10 9 blodplättar/ml (med en genomsnittlig koncentration på 1 x 10 9 blodplättar/ml) i0,9 % NaCl. Utspädda blodplättar fryses/tinas och centrifugeras därefter för att eliminera skräp. Den slutliga volymen delas upp i alikvoter på 1,45 ml och lagras vid −80 °C. Innan de dispenseras till patienter testas ögondroppar för sterilitet. Patienter kan lagra trombocytlysater vid −15 °C i upp till 1 månad. Tillväxtfaktorsammansättningen bedöms också utifrån slumpmässigt utvalda alikvoter, och medelvärdena rapporteras här.

Motivet för användningen av serumbaserade ögondroppar (som är den blodbaserade produkt som oftast används för behandling av ögonytesjukdomar) ligger i deras innehåll av GF, som nästan helt härrör från cirkulerande blodplättar. PRP innehåller ett signifikant högre antal blodplättar (och följaktligen av trombocyt-härledda GFs) jämfört med serum från perifert blod, mellan 0,15 x 10 9-0,45 x 109 PLTs/ml. Enligt italienska lagar bör antalet blodplättar i PRP-enheter vara minst 0,9 ...

Watch this Scientific Journal Video about Platelet-Rich Plasma Lysate for Treatment of Eye Surface Diseases at JoVE.com

Platelet-Rich Plasma Lysate for Treatment of Eye Surface Diseases

Trombocytlysater representerar ett framväxande verktyg för behandling av okulära ytsjukdomar. Här föreslår vi en metod för beredning, dispensering, lagring och karakterisering av trombocytlysat som samlats in från blodplättsdonatorer.

Trombocytrikt plasmalysat för behandling av ögonsjukdomar

Various ocular surface diseases are treated with blood-derived eye drops. Their use has been introduced in clinical practice because of their metabolite ...

PRP Lysate är en framväxande trombocytbaserad produkt för behandling av okulära ytsjukdomar. Här vill vi dela och detaljera vårt produktionsprotokoll för att täcka utvecklingen av gemensamma metodologiska riktlinjer. Halo-genprodukter har spridit sig som ett alternativ till autologa behandlingar.Eftersom de garanterar högre effektivitetsstandarder. PRP Lysate innehåller en hög koncentration av tillväxtfaktorer. Dess produktion är billig och enkel och den kan lagras under en lång tid.Användningen av blodprodukter för behandling av ögon- eller ansiktssjukdomar är till stor del dokumenterad i litteraturen. Ändå har deras ansökningar fortfarande inte funnit någon enighet. En av anledningarna är variationen i de metoder som används för deras produktion.Vårt mål är att dela vårt protokoll för att utveckla gemensamma metoder. För att börja, utför ett trombocytantal med en hemocystometer med hjälp av provet som samlats in från huvudpåsen genom en piercingspik. Späd blodplättrik plasma med en tillräcklig mängd steril 0,9% natriumklorid.Dela den utspädda trombocytrika plasman i 300 ml tomma uppsamlingspåsar för att nå en nettovolym på 190 ml per påse. Använd en alikvot av kvarvarande utspädd trombocytrik plasma för att utföra kvalitetskontroller och bedöma eventuell mikrobiell kontaminering. Förbered en sterilitetsanalys enligt tillverkarens instruktioner som ska testas i ett mikrobiologiskt laboratorium.Förvara utspädda blodplättrika plasmapåsar vid minus 80 grader Celsius i högst två månader före upptining. Se till att ett varmt bad är inställt på 37 grader Celsius. Lägg de blodplättrika plasmapåsarna i det varma badet och vänta tills de är helt tinade.Centrifugera de trombocytrika plasmapåsarna vid 3000 gånger G i 30 minuter vid rumstemperatur. Utnyttja överföringspåsens piercingspik, anslut den centrifugerade påsen med en tom steril 300 ml överföringspåse. Överför försiktigt PRP Lysate-supernatanten samtidigt som du undviker skräp i den nya påsen.Försegla anslutningsröret på PRP Lysate-enheten med en påsförseglare. Samla 30 till 60 ml PRP Lysate med en steril spruta och länka sprutan till Luer Lock-anslutningen på påfyllningslinjen. Enligt tillverkarens instruktioner, vrid stoppkranen med en halv varv för att öppna linjen mellan PRP Lysate innehållande spruta och den föranslutna sprutan.Fyll den föranslutna sprutan med PRP Lysate. Koppla bort PRP Lysate-sprutan. Stäng rörlocket på Luer Lock-anslutningen och vrid stoppkranen till originalläget.Använd pipettets kitspruta för att fylla injektionsflaskorna med PRP Lysate. Se till att varje applikator är korrekt fylld. Försegla dem sedan individuellt med en påsförseglare.Upprepa proceduren med ett nytt ögonlockssats. Använd en liten alikvot av kvarvarande utspädd PRP Lysat för att bedöma eventuell mikrobiell kontaminering. Märk varje applikator ordentligt och lägg dem i en plastpåse.Märk plastpåsen också. Var noga med att lyfta fram givarens blodgrupp. Förvara vid minus 80 grader Celsius i högst 24 månader före patienttilldelning, enligt italiensk lag och riktlinjer.En kvantitativ bedömning av epidermal tillväxtfaktor, trombocythärledd tillväxtfaktor och transformerande tillväxtfaktor Beta-isoform i PRP Lysate från två olika givare visar att resultaten av 0,3 gånger 10 till nionde blodplättar per milliliter utspädning visade sig vara mest lika tårkompositionen. Efter en sex månaders behandling med PRP Lysate okulär ytsjukdom index poäng minskade från 56 plus minus 21 till 45 plus minus 21. Indikerar förbättring av patientens livskvalitet.De metodologiska skillnaderna mellan olika metoder för beredning av allogen PRP Lysate visade sig inte vara skadliga för den regenerativa kapaciteten hos PRP Lysate som testats på de andra vävnaderna. Utspädning av plasma med natriumklorid och lagring av trombocytrik plasma måste utföras med försiktighet. Eftersom detta kan förändra sammansättningen av PRP Lysate.Jämförande analys är nödvändig för att undersöka variationer i dessa steg.

Research

JoVE Journal

Medicine

High Content Screening in Neurodegenerative Diseases

Hög halt Screening vid neurodegenerativa sjukdomar

The functional annotation of genomes, construction of molecular networks and novel drug target identification, are important challenges that need to be ...

Quantitative Fundus Autofluorescence for the Evaluation of Retinal Diseases

Kvantitativ Fundus autofluorescens för utvärdering av retinala sjukdomar

The retinal pigment epithelium (RPE) is juxtaposed to the overlying sensory retina, and supports the function of the visual system. Among the tasks ...

Network Analysis of Foramen Ovale Electrode Recordings in Drug-resistant Temporal Lobe Epilepsy Patients

Network Analys av foramen ovale Elektrodrecordings i Läkemedelsresistenta Temporallobsepilepsi Patienter

Approximately 30% of epilepsy patients are refractory to antiepileptic drugs. In these cases, surgery is the only alternative to eliminate/control ...

Effects of Allogeneic Platelet-Rich Plasma (PRP) on the Healing Process of Sectioned Achilles Tendons of Rats: A Methodological Description

Effects of Allogeneic Platelet-Rich Plasma PRP on the Healing Process of Sectioned Achilles Tendons of Rats: A Methodological Description

Effekter av allogena Platelet-Rich Plasma (PRP) på läkningsprocessen av sektionerad Akilles senor av råttor: en metodbeskrivning

This article describes the experimental procedures used to observe if PRP can positively affect tendon healing. There are 4 main steps to follow: induce a ...

Preparation, Procedures and Evaluation of Platelet-Rich Plasma Injection in the Treatment of Knee Osteoarthritis

Förberedelse, förfaranden och utvärdering av Platelet-Rich Plasma injektion vid behandling av knä artros

Knee osteoarthritis (KOA) is one of the most frequently encountered diseases in the orthopedic department. Existing non-surgical treatments have a limited ...

Intense Pulsed Light for the Treatment of Dry Eye Owing to Meibomian Gland Dysfunction

Intensivt pulserande ljus för behandling av torra ögon på grund av Meibomian körtel dysfunktion

Dry eye disease (DED) is an increasingly common condition and one of the most common complaints of patients. The vast majority of DED is caused by the ...

Customizing a Cryolite Glass Prosthetic Eye

Anpassa en Cryolite glass protetiska öga

In Germany, Austria, and Switzerland, over 90% of ocularists still manufacture customized prostheses using cryolite glass from Thuringia. The present ...

Oxygen-Induced Retinopathy Model for Ischemic Retinal Diseases in Rodents

Syreinducerad retinopatimodell för ischemiska näthinnesjukdomar hos gnagare

One of the commonly used models for ischemic retinopathies is the oxygen-induced retinopathy (OIR) model. Here we describe detailed protocols for the OIR ...

Basophil Activation Test for Allergy Diagnosis

Basofilaktiveringstest för allergidiagnos

The basophil activation test (BAT) is a complementary in vitro diagnostic test that can be used in addition to clinical history, skin test (ST), and ...

Retinal Pigment Epithelium Transplantation in a Non-human Primate Model for Degenerative Retinal Diseases

Retinal Pigment Epithelium Transplantation i en icke-mänsklig primatmodell för degenerativa retinala sjukdomar

Retinal pigment epithelial (RPE) transplantation holds great promise for the treatment of inherited and acquired retinal degenerative diseases. These ...