Name: in vivo vascular injury readouts in mouse retina to promote reproducibility
Uploaded: 2022-04-21T13:50:00
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इस काम को नेशनल साइंस फाउंडेशन ग्रेजुएट रिसर्च फैलोशिप प्रोग्राम (एनएसएफ-जीआरएफपी) अनुदान डीजीई - 1644869 (सीकेसीओ को), नेशनल आई इंस्टीट्यूट (एनईआई) 5टी 32 ईवाई013933 (एएमपी के लिए), नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ न्यूरोलॉजिकल डिसऑर्डर एंड स्ट्रोक (आरओ 1 एनएस 081333, सीएमटी को आर03 एनएस 099920), और रक्षा सेना / वायु सेना विभाग (डीयूआरआईपी से सीएमटी) द्वारा समर्थित किया गया था।

यह प्रोटोकॉल नेत्र और दृष्टि अनुसंधान में जानवरों के उपयोग के लिए एसोसिएशन फॉर रिसर्च इन विजन एंड ओप्थाल्मोलॉजी (एआरवीओ) बयान का पालन करता है। कृंतक प्रयोगों को कोलंबिया विश्वविद्यालय के संस्थागत पश...

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	<li>Tong, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+burden+of+cerebrovascular+disease+in+the+united+states.">The burden of cerebrovascular disease in the united states.</a> Preventing Chronic Disease. 16, 180411 (2019).</li><li>Nakahara, T., Mori, A., Kurauchi, Y., Sakamoto, K., Ishii, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurovascular+interactions+in+the+retina:+physiological+and+pathological+roles.">Neurovascular interactions in the retina: physiological and pathological roles.</a> Journal of Pharmacological Sciences. 123 (2), 79-84 (2013).</li><li>Jaulim, A., Ahmed, B., Khanam, T., Chatziralli, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Branch+retinal+vein+occlusion:+epidemiology,+pathogenesis,+risk+factors,+clinical+features,+diagnosis,+and+complications.+An+update+of+the+literature.">Branch retinal vein occlusion: epidemiology, pathogenesis, risk factors, clinical features, diagnosis, and complications. An update of the literature.</a> Retina. 33 (5), 901-910 (2013).</li><li>Ho, M., Liu, D. T. L., Lam, D. S. C., Jonas, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinal+vein+occlusions,+from+basics+to+the+latest+treatment.">Retinal vein occlusions, from basics to the latest treatment.</a> Retina. 36 (3), 432-448 (2016).</li><li>Zhang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+new+mouse+model+of+branch+retinal+vein+occlusion+and+retinal+neovascularization.">Development of a new mouse model of branch retinal vein occlusion and retinal neovascularization.</a> Japanese Journal of Ophthalmology. 51 (4), 251-257 (2007).</li><li>Ebneter, A., Agca, C., Dysli, C., Zinkernagel, M. 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(174), e62980 (2021).</li><li>Schmidt-Erfurth, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+the+management+of+retinal+vein+occlusion+by+the+European+society+of+retina+specialists+(EURETINA).">Guidelines for the management of retinal vein occlusion by the European society of retina specialists (EURETINA).</a> Ophthalmologica. 242 (3), 123-162 (2019).</li><li>Yoshimura, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+analysis+of+inflammatory+immune+mediators+in+vitreoretinal+diseases.">Comprehensive analysis of inflammatory immune mediators in vitreoretinal diseases.</a> PLoS One. 4 (12), 8158 (2009).</li><li>Mezu-Ndubuisi, O. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+angiography+quantifies+oxygen-induced+retinopathy+vascular+recovery.">In vivo angiography quantifies oxygen-induced retinopathy vascular recovery.</a> Optometry and Vision Science. 93 (10), 1268-1279 (2016).</li><li>Hui, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+spatial+and+temporal+analysis+of+fluorescein+angiography+dynamics+in+the+eye.">Quantitative spatial and temporal analysis of fluorescein angiography dynamics in the eye.</a> PLoS One. 9 (11), 111330 (2014).</li><li>Berry, D., Thomas, A. S., Fekrat, S., Grewal, D. 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Retina. 2 (11), 1125-1132 (2018).</li><li>Nicholson, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+accuracy+of+disorganization+of+the+retinal+inner+layers+in+detecting+macular+capillary+non-perfusion+in+diabetic+retinopathy.">Diagnostic accuracy of disorganization of the retinal inner layers in detecting macular capillary non-perfusion in diabetic retinopathy.</a> Clinical &amp; Experimental Ophthalmology. 43 (8), 735-741 (2015).</li><li>Obrosova, I., Chung, S., Kador, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diabetic+cataracts:+mechanisms+and+management.">Diabetic cataracts: mechanisms and management.</a> Diabetes/Metabolism Research and Reviews. 26 (3), 172-180 (2010).</li><li>Hegde, K., Henein, M., Varma, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+the+mouse+as+a+model+animal+for+the+study+of+diabetic+cataracts.">Establishment of the mouse as a model animal for the study of diabetic cataracts.</a> Ophthalmic Research. 35 (1), 12-18 (2003).</li><li>Takahashi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+of+collateral+vessel+formation+after+retinal+vein+occlusion+visualized+by+OCTA+and+elucidation+of+factors+in+their+formation.">Time course of collateral vessel formation after retinal vein occlusion visualized by OCTA and elucidation of factors in their formation.</a> Heliyon. 7 (1), 05902 (2021).</li><li>Haj Najeeb, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescein+angiography+in+diabetic+macular+edema:+A+new+approach+to+its+etiology.">Fluorescein angiography in diabetic macular edema: A new approach to its etiology.</a> Investigation Ophthalmology &amp; Visual Science. 58 (10), 3986-3990 (2017).</li><li>Alam, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+optical+coherence+tomography+angiography+features+for+objective+classification+and+staging+of+diabetic+retinopathy.">Quantitative optical coherence tomography angiography features for objective classification and staging of diabetic retinopathy.</a> Retina. 40 (2), 322-332 (2020).</li><li>Uddin, M., Jayagopal, A., McCollum, G., Yang, R., Penn, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+retinal+hypoxia+using+HYPOX-4-dependent+fluorescence+in+a+mouse+model+of+laser-induced+retinal+vein+occlusion+(RVO).">In vivo imaging of retinal hypoxia using HYPOX-4-dependent fluorescence in a mouse model of laser-induced retinal vein occlusion (RVO).</a> Investigation Ophthalmology &amp; Visual Science. 58 (9), 3818-3824 (2017).</li><li>Qiang, W., Wei, R., Chen, Y., Chen, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+pathological+features+and+current+animal+models+of+type+3+macular+neovascularization.">Clinical pathological features and current animal models of type 3 macular neovascularization.</a> Frontiers in Neuroscience. 15, 734860 (2021).</li><li>Park, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+laser-induced+choroidal+neovascularization+in+the+rodent+retina+using+optical+coherence+tomography+angiography.">Imaging laser-induced choroidal neovascularization in the rodent retina using optical coherence tomography angiography.</a> Investigation Ophthalmology &amp; Visual Science. 57 (9), 331 (2016).</li><li>Chen, J., Qian, H., Horai, R., Chan, C., Caspi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+optical+coherence+tomography+and+electroretinography+to+evaluate+retinal+pathology+in+a+mouse+model+of+autoimmune+uveitis.">Use of optical coherence tomography and electroretinography to evaluate retinal pathology in a mouse model of autoimmune uveitis.</a> PLoS One. 8 (5), 63904 (2013).</li></ol>

नॉनविनसिव कृंतक रेटिना इमेजिंग पैथोलॉजी का अध्ययन करने और हस्तक्षेप विकसित करने के लिए एक एवेन्यू प्रस्तुत करता है। पिछले अध्ययनों ने आरवीओ के एक माउस मॉडल को विकसित और अनुकूलित किया है, परिवर्तनशील...

न्यूरोवास्कुलर रोग इस्केमिक स्ट्रोक के लिए जिम्मेदार एक प्रमुख स्वास्थ्य देखभाल समस्या है, जो मृत्यु दर और रुग्णता का एक प्रमुख कारण है, और रेटिना संवहनी रोग जो दृष्टि हानि 1,2 का कारण बनते हैं। न्यूरोवास्कुलर रोग को मॉडल करने के लिए, हम रेटिना नस रोड़ा (आरवीओ) के एक माउस मॉडल को नियोजित करते हैं। यह मॉडल नॉनइनवेसिव है और नैदानिक सेटिंग में रेटिना संवहनी रोग वाले लोगों की जांच करने के लिए उपयोग किए जाने वाले विवो इमेजिंग तकनीकों में समान उपयोग करता है। इस मॉडल का उपयोग इस प्रकार इस मॉडल का उपयोग करने वाले अध्ययनों की अनुवाद क्षमता को बढ़ाता है। सभी माउस मॉडल के साथ, मॉडल की प्रजनन क्षमता को अधिकतम करना महत्वपूर्ण है।
रेटिना संवहनी रोग 70 वर्ष से कम उम्र के लोगों में दृष्टि हानि का एक प्रमुख कारण है। मधुमेह रेटिनोपैथी3 के बाद आरवीओ दूसरा सबसे आम रेटिना संवहनी रोग है। आरवीओ की नैदानिक विशेषताओं में न्यूरोनल हानि 3,4 के परिणामस्वरूप इस्केमिक चोट, रेटिना एडिमा और दृष्टि हानि शामिल हैं। प्रमुख जहाजों के लेजर फोटोकोग्यूलेशन का उपयोग करके आरवीओ के माउस मॉडल विकसित किए गए हैं और मानव आरवीओ 5,6,7 में देखे गए प्रमुख नैदानिक विकृति को दोहराने के लिए परिष्कृत किए गए हैं। नेत्र इमेजिंग में प्रगति भी मनुष्यों में उपयोग किए जाने वाले गैर-आक्रामक नैदानिक उपकरणों की प्रतिकृति की अनुमति देती है, अर्थात्, फ्लोरेसिन एंजियोग्राफी (एफए) और ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी (ओसीटी)6। फ्लोरेसिन एंजियोग्राफी रक्त-रेटिना बैरियर (बीआरबी) के टूटने के साथ-साथ रेटिना में रक्त प्रवाह की गतिशीलता के कारण रिसाव के अवलोकन की अनुमति देती है, जिसमें रोड़ा की साइटें शामिल हैं, फ्लोरेसिन के इंजेक्शन का उपयोग करके, एक छोटा फ्लोरोसेंट डाई 8,9। ओसीटी इमेजिंग रेटिना की उच्च-रिज़ॉल्यूशन क्रॉस-अनुभागीय छवियों के अधिग्रहण और रेटिना परतों की मोटाई और संगठन के अध्ययन की अनुमतिदेता है। एफए छवियों का विश्लेषण ऐतिहासिक रूप से काफी हद तक गुणात्मक रहा है, जो अध्ययनों के बीच प्रत्यक्ष और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य तुलना की क्षमता को सीमित करता है। हाल ही में, ओसीटी इमेजिंग में परत मोटाई की मात्रा का परिमाणीकरण करने के लिए कई तरीके विकसित किए गए हैं, हालांकि वर्तमान में कोई मानकीकृत विश्लेषण प्रोटोकॉल नहीं है और ओसीटी छवि अधिग्रहण की साइट11 भिन्न होती है। इन उपकरणों का ठीक से लाभ उठाने के लिए, मानकीकृत, मात्रात्मक और प्रतिकृति डेटा विश्लेषण पद्धति की आवश्यकता होती है। इस पेपर में, हम आरवीओ-फ्लोरेसिन रिसाव, ओसीटी परत मोटाई और रेटिना परतों के विघटन के माउस मॉडल में पैथोलॉजिकल क्षति का मूल्यांकन करने के लिए उपयोग किए जाने वाले तीन ऐसे संवहनी रीडआउट प्रस्तुत करते हैं।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>AK-Fluor 10%</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>NDC: 17478-253-10</td>
			<td>light-sensitive</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Rimadyl</td>
			<td>NADA #141-199</td>
			<td>keep at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GenTeal</td>
			<td>Alcon</td>
			<td>00658 06401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image J</td>
			<td>NIH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>InSight 2D</td>
			<td>Phoenix Technology Group</td>
			<td></td>
			<td>OCT analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine Hydrochloride</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>NDC: 11695-0702-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenylephrine</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>NDCL174478-201-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phoenix Micron IV</td>
			<td>Phoenix Technology Group</td>
			<td></td>
			<td>Retinal imaging microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phoenix Micron Meridian Module</td>
			<td>Phoenix Technology Group</td>
			<td></td>
			<td>Laser photocoagulator software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phoenix Micron Optical Coherence Tomography Module</td>
			<td>Phoenix Technology Group</td>
			<td></td>
			<td>OCT imaging software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phoenix Micron StreamPix Module</td>
			<td>Phoenix Technology Group</td>
			<td></td>
			<td>Fundus imaging and acquisition targeting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Photoshop</td>
			<td>Adobe</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refresh</td>
			<td>Allergan</td>
			<td>94170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>NDC: 174478-102-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>NDCL 59399-110-20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo vascular injury readouts in mouse retina to promote reproducibility

नेत्र इमेजिंग उपकरणों में प्रगति न्यूरोवास्कुलर चोट के पशु मॉडल के साथ काम करने वाले शोधकर्ताओं तक पहुंच का एक अभूतपूर्व स्तर प्रदान करती है। इस अधिक से अधिक हस्तांतरणीयता का उचित लाभ उठाने के लिए, इन छवियों से मात्रात्मक डेटा खींचने के प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य तरीकों को तैयार करने की आवश्यकता है। ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी (ओसीटी) इमेजिंग माइक्रोमीटर रिज़ॉल्यूशन पर रेटिना हिस्टोलॉजी को हल कर सकती है और संवहनी रक्त प्रवाह में कार्यात्मक अंतर प्रकट कर सकती है। यहां, हम नॉनइनवेसिव संवहनी रीडआउट को चित्रित करते हैं जिसका उपयोग हम रेटिना नस रोड़ा (आरवीओ) के अनुकूलित माउस मॉडल में संवहनी अपमान के बाद पैथोलॉजिकल क्षति को चिह्नित करने के लिए करते हैं। इन रीडआउट में रेटिना आकृति विज्ञान का लाइव इमेजिंग विश्लेषण, केशिका इस्किमिया के रेटिना आंतरिक परतों (डीआरआईएल) माप का विघटन, और रेटिना एडिमा और संवहनी घनत्व के फ्लोरेसिन एंजियोग्राफी उपाय शामिल हैं। ये तकनीकें क्लिनिक में रेटिना रोग वाले रोगियों की जांच के लिए उपयोग किए जाने वाले लोगों के सीधे अनुरूप हैं। इन विधियों को मानकीकृत करने से नेत्र रोग के नैदानिक फेनोटाइप के साथ पशु मॉडल की प्रत्यक्ष और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य तुलना सक्षम होती है, जिससे संवहनी चोट मॉडल की अनुवाद शक्ति बढ़ जाती है।

ये विश्लेषण विधियां एफए और ओसीटी इमेजिंग द्वारा कैप्चर किए गए रेटिना पैथोलॉजी की मात्रा का ठहराव करने की अनुमति देती हैं। जिन प्रयोगों से प्रतिनिधि डेटा निकाला जाता है, उनमें C57BL/6J नर चूहों का उपयोग किय?...

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In Vivo Vascular Injury Readouts in Mouse Retina to Promote Reproducibility

यहां, हम रेटिना वेन रोड़ा (आरवीओ) के अध्ययन में फ्लोरेसिन एंजियोग्राफी (एफए) और ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी (ओसीटी) छवियों के लिए तीन डेटा विश्लेषण प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं।

विवो में प्रजनन क्षमता को बढ़ावा देने के लिए माउस रेटिना में संवहनी चोट रीडआउट

Advancements in ophthalmic imaging tools offer an unprecedented level of access to researchers working with animal models of neurovascular injury. To ...

यह प्रोटोकॉल उपयोगकर्ता को माउस रेटिना इमेजिंग में क्षति के नैदानिक रूप से अनुरूप मार्करों को मात्रात्मक रूप से मापने की अनुमति देता है, जो बाद के निष्कर्षों की ट्रांसलैटेबिलिटी को बढ़ाता है। ये विधियां हमें विश्लेषण को सुव्यवस्थित करने की अनुमति देती हैं और हमें प्रयोगात्मक जानवरों के बीच इमेजिंग की विश्वसनीय रूप से तुलना करने की क्षमता देती हैं। जबकि इन विधियों को माउस मॉडल अवलोकन का अध्ययन करने के लिए विकसित किया गया था, वे आसानी से किसी भी रेटिना रोगों पर शोध के लिए विस्तार कर सकते हैं जो एक ही इमेजिंग तकनीकों का उपयोग करते हैं।रेटिना इमेजिंग माइक्रोस्कोप लाइट बॉक्स, ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी मशीन और गर्म माउस प्लेटफॉर्म को चालू करें। कंप्यूटर चालू करें और इमेजिंग प्रोग्राम खोलें। प्रत्येक आंख में फेनिलफ्राइन और ट्रॉपिकामाइड की एक बूंद जोड़ें।1% फ्लोरेसिन इंट्रापरिटोनियल के 100 माइक्रोलीटर इंजेक्ट करें। प्लेटफ़ॉर्म पर माउस समायोजित करें। प्लेटफ़ॉर्म की ऊंचाई और कोण को समायोजित करें जब तक कि रेटिना फंडस का दृश्य स्पष्ट और केंद्रित न हो।फंडस की एक तस्वीर लें। इमेजिंग और ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी सॉफ्टवेयर खोलें। ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी कार्यक्रम में 10 तक नज को समायोजित करें।एक ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी छवि लें, जलने से 75 माइक्रोमीटर डिस्टल जोड़ें। रेटिना के अन्य तीन चतुर्थांशों के लिए दोहराएं। कैमरे को 488 नैनोमीटर फिल्टर पर स्विच करें।कैमरा लाभ को 5 तक बढ़ाएं। फ्लोरेसिन इंजेक्शन के ठीक 5 मिनट बाद फंडस की एक तस्वीर लें। छवि प्रसंस्करण सॉफ्टवेयर पर फ्लोरेसिन छवि खोलें।छवि की प्रतिलिपि बनाएँ. एक चयन उपकरण का उपयोग करके, प्रमुख जहाजों का सावधानीपूर्वक पता लगाएं। इन जहाजों से बाहर निकलने वाले किसी भी जहाज को अनदेखा करें।पहली छवि में, केवल पोत को छोड़कर चयन को हटा दें। इस नकाबपोश छवि को सहेजें. चयन को दूसरी छवि में ले जाएं, चयन को उलट दें और पृष्ठभूमि को अलग करते हुए हटा दें।इस नकाबपोश छवि को सहेजें. पृष्ठभूमि छवि खोलें और एकीकृत घनत्व को मापें। जहाजों की छवि खोलें, जहाजों की रूपरेखा का चयन करें, और फिर औसत तीव्रता को मापें।पृष्ठभूमि के एकीकृत घनत्व को वाहिकाओं की औसत तीव्रता से विभाजित करें, जिससे आंख के लिए रिसाव अनुपात उत्पन्न होता है। एक प्रयोगात्मक समूह में प्रत्येक आंख के लिए इस रिसाव अनुपात को रिकॉर्ड करें। पृष्ठभूमि के लिए और नियंत्रण के लिए, प्रयोगात्मक आंखों को अघायल नियंत्रण आंखों के औसत रिसाव अनुपात में सामान्य करें।छवि प्रसंस्करण सॉफ्टवेयर में ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी छवि खोलें। गैंग्लियन सेल परत, आंतरिक प्लेक्सीफॉर्म परत, आंतरिक परमाणु परत, बाहरी प्लेक्सीफॉर्म परत, फोटोरिसेप्टर परत और आरपीई परत की सीमाओं का पता लगाएं। फ़ाइलों को CSV के रूप में निर्यात करें।प्रत्येक परत की औसत मोटाई को मापें और प्रयोगात्मक समूह में प्रत्येक आंख के लिए दोहराएं। लाइन टूल का उपयोग करके, उस दूरी को मापें जहां बाहरी प्लेक्सीफॉर्म परत की ऊपरी सीमा अस्पष्ट है। क्षैतिज रूप से मापें, अक्षांश को बनाए रखें जहां विघटन शुरू होता है।छवि में अव्यवस्थित दूरियों के योग की गणना करें। विघटन के अनुपात को प्राप्त करने के लिए रेटिना की कुल लंबाई से विघटन की लंबाई को विभाजित करें। रेटिना के अन्य तीन चतुर्थांशों से ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी छवियों के लिए माप और गणना दोहराएं।चार ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी छवियों से विघटन के अनुपात का औसत लें। यह संख्या पूरे रेटिना के लिए औसत विघटन का प्रतिनिधित्व करती है। प्रयोगात्मक समूह में प्रत्येक आंख के लिए दोहराएं।प्रत्येक रेटिना छवि के लिए रिसाव के अनुपात की गणना के लिए उपयोग की जाने वाली नकाबपोश छवियों की तुलना दूसरों से की जा सकती है और विश्लेषण किया जा सकता है, जो रेटिना के अन्य क्षेत्रों से प्रमुख वाहिका को अलग करता है। फ्लोरेसिन परिमाणीकरण चोट की गंभीरता और उपचार प्रभावकारिता की तुलना के साथ-साथ चोट के समय पाठ्यक्रम में रिसाव में परिवर्तन के अध्ययन की अनुमति देता है। एक ओसीटी छवि में रेटिना की परतों का चित्रण देखा जाता है।प्रत्येक रेटिना परत के लिए मोटाई का परिमाणीकरण दर्शाता है कि प्रारंभिक एडेमेटस प्रतिक्रिया का आंतरिक रेटिना परतों पर अधिक गहरा प्रभाव पड़ता है। रेटिना नस रोड़ा क्षति के समय पाठ्यक्रम के विश्लेषण से, रेटिना परतों की प्रारंभिक भड़काऊ सूजन, और अंततः अपक्षयी पतलापन देखा जा सकता है। आंतरिक परमाणु परत प्रारंभिक चोट के लिए बहुत अधिक प्रतिक्रिया का अनुभव करती है, लेकिन प्रारंभिक एडिमा को स्थिर करने और बेसलाइन पर लौटने के बाद आंतरिक प्लेक्सीफॉर्म परत अधिक गंभीर पतलीपन प्रदर्शित करती है।आंतरिक रेटिना परत का विघटन बाहरी प्लेक्सीफॉर्म परत की ऊपरी सीमा के गायब होने के रूप में प्रकट होता है, जो बाहरी प्लेक्सीफॉर्म और आंतरिक परमाणु परतों को एक साथ मिश्रित करता है। रेटिना क्षति को कम करने में एक अवरोधक की प्रभावकारिता की जांच करने के लिए दो प्रयोगात्मक समूहों के रेटिना विघटन की तुलना की गई थी। छवि की गुणवत्ता विश्लेषण गुणवत्ता के लिए महत्वपूर्ण है।रेटिना छवियों को प्राप्त करते समय, यह सुनिश्चित करने के लिए समय निकालें कि फंडस और रेटिना परतें यथासंभव स्पष्ट और केंद्रित हैं। इन गैर-इनवेसिव विधियों का उपयोग अनुदैर्ध्य रूप से और ऊतक के जैव रासायनिक और इम्यूनोहिस्टोकेमिकल अध्ययन के साथ मिलकर किया जा सकता है ताकि रोग के अधिक बहुमुखी और विस्तृत प्रोफाइल बनाए जा सकें। यह तकनीक न्यूरोवास्कुलर रोग के मॉडल में विवो रेटिना इमेजिंग डेटा की विश्वसनीय मात्रा का ठहराव करने में सक्षम बनाती है ताकि डेटा को मानव रोग में अधिक आसानी से अनुवादित किया जा सके।

Research

JoVE Journal

Neuroscience

In Vivo Vascular Injury Readouts in Mouse Retina to Promote Reproducibility

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

माउस रेटिनल नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं के द्वारा अभिकर्मक Vivo में Electroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

In vivo Electroporation of Developing Mouse Retina

In vivo Electroporation of Developing Mouse Retina

विकास माउस रेटिना के vivo electroporation में

The functional characterization of genes expressed during mammalian retinal development remains a significant challenge.  Gene targeting to generate ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

कार्यात्मक न्यूरोइमेजिंग अल्ट्रासोनिक रक्त मस्तिष्क बाधा विघटन और मैंगनीज बढ़ाकर एमआरआई का उपयोग

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Whole Mount Immunofluorescent Staining of the Neonatal Mouse Retina to Investigate Angiogenesis In vivo

Whole Mount Immunofluorescent Staining of the Neonatal Mouse Retina to Investigate Angiogenesis In vivo

एंजियोजिनेसिस जांच नवजात माउस रेटिना का पूरा पर्वत immunofluorescent धुंधला<em&gt; विवो में</em

Angiogenesis  is the complex process of new blood vessel formation defined by the sprouting  of new blood vessels from a pre-existing vessel network. ...

Assessment of Vascular Regeneration in the CNS Using the Mouse Retina

माउस रेटिना का प्रयोग सीएनएस में संवहनी उत्थान के आकलन

The rodent retina is perhaps the most accessible mammalian system in which to investigate neurovascular interplay within the central nervous system (CNS). ...

Vibratome Sectioning Mouse Retina to Prepare Photoreceptor Cultures

Vibratome सेक्शनिंग माउस रेटिना फोटोरिसेप्टर संस्कृति तैयार करने के लिए

The retina is a part of the central nervous system that has organized architecture, with neurons in layers from the photoreceptors, both rods and cones in ...

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

एक<em&gt; पूर्व vivo</em&gt; लेजर प्रेरित स्पाइनल कॉर्ड चोट मॉडल वास्तविक समय में axonal अध: पतन के तंत्र का आकलन करने के लिए

Injured CNS axons fail to regenerate and often retract away from the injury site. Axons spared from the initial injury may later undergo secondary axonal ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

समकालिक<em&gt; पूर्व vivo</emदो Retinas की&gt; कार्यात्मक परीक्षण से<em&gt; Vivo</em&gt; Electroretinogram सिस्टम

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...

An In Vivo Duo-color Method for Imaging Vascular Dynamics Following Contusive Spinal Cord Injury

An In Vivo Duo-color Method for Imaging Vascular Dynamics Following Contusive Spinal Cord Injury

Vivo में एक डुओ-रंग विधि इमेजिंग संवहनी गतिशीलता के लिए निंनलिखित Contusive रीढ़ की हड्डी में चोट

Spinal cord injury (SCI) causes significant vascular disruption at the site of injury. Vascular pathology occurs immediately after SCI and continues ...

Transpupillary Two-Photon In Vivo Imaging of the Mouse Retina

माउस रेटिना के विवो इमेजिंग में ट्रांसप्युपिलरी टू-फोटॉन

The retina transforms light signals from the environment into electrical signals that are propagated to the brain. Diseases of the retina are prevalent ...