Name: dynamic light scattering analysis for the determination of the particle size of iron-carbohydrate complexes
Uploaded: 2023-07-07T12:30:00
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1. Utilizzo della macchina
<ol><li>Avviamento della macchina e del software NOTA: la figura supplementare S1A-D descrive i passaggi per l'avvio della macchina e del software.<ol><li>Accendere lo strumento almeno 30 minuti prima di iniziare le misurazioni, quindi avviare il PC.</li>
		<li>Fare doppio clic sull'icona del software dello strumento per avviare il programma.</li>
		<li>Inserisci il nome utente e la password nella finestra di login. Assicurati che ogni ute...

<ol>
	<li>Auerbach, M., Gafter-Gvili, A., Macdougall, I. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravenous+iron:+A+framework+for+changing+the+management+of+iron+deficiency.">Intravenous iron: A framework for changing the management of iron deficiency.</a> Lancet Haematology. 7 (4), e342-e350 (2020).</li><li>Generic drugs: FDA should make public its plans to issue and revise guidance on nonbiological complex drugs. US Government Accountability Office Available from: <a target="_blank" href="https://www.gao.gov/products/gao-18-80">https://www.gao.gov/products/gao-18-80</a> (2017)</li><li>Klein, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+EU+regulatory+landscape+of+non-biological+complex+drugs+(NBCDs)+follow-on+products:+Observations+and+recommendations.">The EU regulatory landscape of non-biological complex drugs (NBCDs) follow-on products: Observations and recommendations.</a> European Journal of Pharmaceutical Sciences. 133, 228-235 (2019).</li><li>Astier, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+select+a+nanosimilar.">How to select a nanosimilar.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1407 (1), 50-62 (2017).</li><li>Rottembourg, J., Kadri, A., Leonard, E., Dansaert, A., Lafuma, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Do+two+intravenous+iron+sucrose+preparations+have+the+same+efficacy.">Do two intravenous iron sucrose preparations have the same efficacy.</a> Nephrology Dialysis Transplantation. 26 (10), 3262-3267 (2011).</li><li>Aguera, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficiency+of+original+versus+generic+intravenous+iron+formulations+in+patients+on+haemodialysis.">Efficiency of original versus generic intravenous iron formulations in patients on haemodialysis.</a> PLoS One. 10 (8), e0135967 (2015).</li><li>Alphandery, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Iron+oxide+nanoparticles+for+therapeutic+applications.">Iron oxide nanoparticles for therapeutic applications.</a> Drug Discovery Today. 25 (1), 141-149 (2020).</li><li>Arami, H., Khandhar, A., Liggitt, D., Krishnan, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+delivery,+pharmacokinetics,+biodistribution+and+toxicity+of+iron+oxide+nanoparticles.">In vivo delivery, pharmacokinetics, biodistribution and toxicity of iron oxide nanoparticles.</a> Chemical Society Reviews. 44 (23), 8576-8607 (2015).</li><li>Nikravesh, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+influencing+safety+and+efficacy+of+intravenous+iron-carbohydrate+nanomedicines:+From+production+to+clinical+practice.">Factors influencing safety and efficacy of intravenous iron-carbohydrate nanomedicines: From production to clinical practice.</a> Nanomedicine. 26, 102178 (2020).</li><li>Pai, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+and+in+vivo+DFO-chelatable+labile+iron+release+profiles+among+commercially+available+intravenous+iron+nanoparticle+formulations.">In vitro and in vivo DFO-chelatable labile iron release profiles among commercially available intravenous iron nanoparticle formulations.</a> Regulatory Toxicology and Pharmacology. 97, 17-23 (2018).</li><li>Brandis, J. E. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+the+physicochemical+properties+of+the+iron+nanoparticle+drug+products:+Brand+and+generic+sodium+ferric+gluconate.">Evaluation of the physicochemical properties of the iron nanoparticle drug products: Brand and generic sodium ferric gluconate.</a> Molecular Pharmaceutics. 18 (4), 1544-1557 (2021).</li><li>Di Francesco, T., Sublet, E., Borchard, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanomedicines+in+clinical+practice:+Are+colloidal+iron+sucrose+ready-to-use+intravenous+solutions+interchangeable.">Nanomedicines in clinical practice: Are colloidal iron sucrose ready-to-use intravenous solutions interchangeable.</a> European Journal of Pharmaceutical Sciences. 131, 69-74 (2019).</li><li>Di Francesco, T., Borchard, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+robust+and+easily+reproducible+protocol+for+the+determination+of+size+and+size+distribution+of+iron+sucrose+using+dynamic+light+scattering.">A robust and easily reproducible protocol for the determination of size and size distribution of iron sucrose using dynamic light scattering.</a> Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 152, 89-93 (2018).</li><li>The Center for Research on Complex Generics. US Food and Drug Administration Available from: <a target="_blank" href="https://www.fda.gov/drugs/guidance-compliance-regulatory-information/center-research-complex-generics">https://www.fda.gov/drugs/guidance-compliance-regulatory-information/center-research-complex-generics</a> (2021)</li><li>Drug products, including biological products, that contain nanomaterials - Guidance for industry. Center for Drug Evaluation and Research. FDA-2017-D-0759. US Food and Drug Administration Available from: <a target="_blank" href="https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/drug-products-including-biological-products-contain-nanomaterials-guidance-industry">https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/drug-products-including-biological-products-contain-nanomaterials-guidance-industry</a> (2022)</li><li>US Food and Drug Administration. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Draft+guidance+on+ferric+oxyhydroxide.">Draft guidance on ferric oxyhydroxide.</a> US Food and Drug Administration. , (2021).</li><li>Zou, P., Tyner, K., Raw, A., Lee, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physicochemical+characterization+of+iron+carbohydrate+colloid+drug+products.">Physicochemical characterization of iron carbohydrate colloid drug products.</a> The AAPS Journal. 19 (5), 1359-1376 (2017).</li><li>D'Mello, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+evolving+landscape+of+drug+products+containing+nanomaterials+in+the+United+States.">The evolving landscape of drug products containing nanomaterials in the United States.</a> Nature Nanotechnology. 12 (6), 523-529 (2017).</li><li>Q2 (R1) Validation of analytical procedures: Text and methodology guidance for industry. FDA-2017-D-6821. US Food and Drug Administration Available from: <a target="_blank" href="https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/q2r1-validation-analytical-procedures-text-and-methodology-guidance-industry">https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/q2r1-validation-analytical-procedures-text-and-methodology-guidance-industry</a> (2005)</li><li>Reflection paper on the data requirements for intravenous iron-based nano-colloidal products developed with reference to an innovator medicinal product. European Medicines Agency Available from: <a target="_blank" href="https://www.ema.europe.eu/en/documents/scientific-guideline/reflection-paper-data-requirements-intravenous-iron-based-nano-colloidal-products-developed_en.pdf">https://www.ema.europe.eu/en/documents/scientific-guideline/reflection-paper-data-requirements-intravenous-iron-based-nano-colloidal-products-developed_en.pdf</a> (2015)</li><li>Fischer, K., Schmidt, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pitfalls+and+novel+applications+of+particle+sizing+by+dynamic+light+scattering.">Pitfalls and novel applications of particle sizing by dynamic light scattering.</a> Biomaterials. 98, 79-91 (2016).</li><li>Caputo, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymmetric-flow+field-flow+fractionation+for+measuring+particle+size,+drug+loading+and+(in)stability+of+nanopharmaceuticals.+The+joint+view+of+European+Union+Nanomedicine+Characterization+Laboratory+and+National+Cancer+Institute+-+Nanotechnology+Characterization+Laboratory.">Asymmetric-flow field-flow fractionation for measuring particle size, drug loading and (in)stability of nanopharmaceuticals. The joint view of European Union Nanomedicine Characterization Laboratory and National Cancer Institute - Nanotechnology Characterization Laboratory.</a> Journal of Chromatography A. 1635, 461767 (2021).</li><li>Yusa, S., Narain, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+6+-+Polymer+characterization.">Chapter 6 - Polymer characterization.</a> Polymer Science and Nanotechnology. , 105-124 (2020).</li></ol>

Il DLS è diventato un test fondamentale per la determinazione delle dimensioni e della distribuzione dimensionale delle nanoparticelle per applicazioni nello sviluppo di farmaci e nella valutazione normativa. Nonostante i progressi nelle tecniche DLS, esistono ancora sfide metodologiche per quanto riguarda la selezione del diluente e la preparazione del campione, che sono particolarmente rilevanti per i complessi ferro-carboidrati nelle soluzioni colloidali. È importante sottolineare che i metodi DLS per i nanofarmaci ...

Il saccarosio di ferro (IS) è una soluzione colloidale composta da nanoparticelle costituite da un complesso di un nucleo polinucleare di ferro-ossiidrossido e saccarosio. L'IS è ampiamente impiegato per trattare la carenza di ferro tra i pazienti con un'ampia varietà di stati patologici di base che non tollerano l'integrazione orale di ferro o per i quali il ferro orale non è efficace1. L'IS appartiene alla classe di farmaci complessi come definita dalla Food and Drug Administration (FDA), che è una classe di farmaci con chimica complessa commisurata ai biologici2. La valutazione regolatoria di farmaci complessi può richiedere ulteriori metodi fisico-chimici ortogonali e/o studi preclinici o clinici per confrontare accuratamente i farmaci complessi di follow-on 3,4. Questo è importante perché diversi studi hanno riportato che l'uso di IS rispetto a un prodotto IS di follow-on non produce gli stessi risultati clinici. Ciò sottolinea la criticità dell'uso di tecniche di caratterizzazione nuove e ortogonali che sono adatte a rilevare differenze nelle proprietà fisico-chimiche tra i prodotti IS 5,6.
La spiegazione accurata delle dimensioni e della distribuzione dimensionale dell'IS è di importanza clinica, poiché la dimensione delle particelle è un importante fattore influente nel tasso e nell'estensione dell'opsonizzazione - il primo passo critico nella biodistribuzione di questi farmaci complessi 7,8. Anche lievi variazioni nella dimensione delle particelle e nella distribuzione granulometrica sono state correlate a cambiamenti nel profilo farmacocinetico dei complessi di nanoparticelle ferro-ossido 9,10. Un recente studio di Brandis et al. ha mostrato che la dimensione delle particelle misurata dal DLS era significativamente diversa (14,9 nm ± 0,1 nm vs 10,1 nm ± 0,1 nm, p < 0,001) quando si confrontava un farmaco elencato di riferimento e un generico gluconato ferrico di sodio, rispettivamente11. La qualità, la sicurezza e l'efficacia costanti da lotto a lotto dei prodotti a base di carboidrati di ferro dipendono interamente dallo scale-up del processo di produzione e la potenziale deriva della produzione deve essere attentamente considerata9. Il processo di fabbricazione può causare saccarosio residuo e questo varierà in base al produttore12. Qualsiasi modifica nelle variabili del processo di fabbricazione può portare a cambiamenti significativi nel prodotto farmaceutico complesso finale per quanto riguarda la struttura, la stabilità complessa e la disposizione in vivo 9.
Per valutare la coerenza del farmaco e prevedere il comportamento in vivo del farmaco, sono necessarie metodologie analitiche ortogonali contemporanee per determinare le proprietà fisico-chimiche di nanofarmaci complessi. Tuttavia, vi è una mancanza di standardizzazione delle metodologie, che può comportare un elevato grado di variazione interlaboratorio nella comunicazione dei risultati13. Nonostante il riconoscimento di queste sfide da parte delle autorità di regolamentazione globali e della comunità scientifica14, la maggior parte delle caratteristiche fisico-chimiche dell'IS rimane scarsamente definita e non è stata definita la piena gamma di attributi critici di qualità nel contesto dei documenti di orientamento normativi disponibili15. La bozza di documenti guida specifici del prodotto emessi dalla FDA per i complessi ferro-carboidrato suggerisce DLS come procedura per valutare le dimensioni e la distribuzione delle dimensioni dei prodotti di follow-on16,17.
Diverse pubblicazioni hanno dettagliato i protocolli DLS stabiliti per determinare le dimensioni delle nanoparticelle IS13,18. Tuttavia, poiché la preparazione del campione, le condizioni della procedura, la strumentazione e i parametri di impostazione della strumentazione sono diversi tra i metodi pubblicati, i risultati DLS non possono essere confrontati direttamente in assenza di un metodo standardizzato per interpretare i risultati13,18. La diversità delle metodologie e degli approcci di comunicazione dei dati limita la valutazione appropriata di tali caratteristiche a fini comparativi19. È importante sottolineare che molti dei protocolli DLS precedentemente pubblicati per valutare l'IS non tengono conto dell'effetto della diffusione del saccarosio nella sospensione a causa della presenza di saccarosio libero, che ha dimostrato di elevare spuriamente i raggi idrodinamici calcolati in media Z delle nanoparticelle nelle soluzioni colloidali13,18. Il presente protocollo mira a standardizzare la metodologia per la misurazione della dimensione delle particelle e della distribuzione di IS. Il metodo è stato sviluppato e convalidato a tale scopo.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zetasizer Nano ZS</td>
			<td>Malvern</td>
			<td>NA</td>
			<td>equipped with Zetasizer software 7.12, Helium Neon laser (633 nm, max. 4 mW) and 173&#176; backscattering geometry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Materials</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable plastic cuvettes&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LLG-Disposable plastic cells</td>
			<td>LLG labware</td>
			<td>LLG-K&#252;vetten, Makro, PS; Order number 9.406011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>low-particle water</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>&#160;(The use of freshly deionized and filtered (pore size 0.2 &#956;m) water is recommended).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microlitre pipette</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Venofer 100 mg/5 mL</td>
			<td>Vifor Pharma</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Volumetric flask 25 mL</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanosphere</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>3020A</td>
			<td>Particle Standard</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Origin Pro v.8.5&#160;</td>
			<td>Origin Lab Corporation</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

dynamic light scattering analysis for the determination of the particle size of iron-carbohydrate complexes

I complessi di nanoparticelle ferro-carboidrati somministrati per via endovenosa sono ampiamente usati per trattare la carenza di ferro. Questa classe comprende diversi complessi di nanoparticelle strutturalmente eterogenei, che mostrano una sensibilità variabile alle condizioni richieste per le metodologie disponibili per caratterizzare fisicamente questi agenti. Attualmente, gli attributi critici di qualità dei complessi ferro-carboidrati non sono stati completamente stabiliti. La diffusione dinamica della luce (DLS) è emersa come un metodo fondamentale per determinare la dimensione e la distribuzione delle particelle intatte. Tuttavia, rimangono ancora sfide per quanto riguarda la standardizzazione delle metodologie tra i laboratori, le modifiche specifiche richieste per i singoli prodotti a base di carboidrati di ferro e il modo migliore per descrivere la distribuzione delle dimensioni. È importante sottolineare che le diluizioni diluente e seriali utilizzate devono essere standardizzate. L'ampia varianza negli approcci per la preparazione dei campioni e la segnalazione dei dati limita l'uso del DLS per il confronto degli agenti ferro-carboidrati. Qui, descriviamo in dettaglio un protocollo robusto e facilmente riproducibile per misurare le dimensioni e la distribuzione dimensionale del complesso ferro-carboidrati, il saccarosio di ferro, utilizzando la media Z e l'indice di polidispersità.

Il metodo descritto è stato convalidato secondo ICH Q2(R1)20, che ha comportato la misurazione di soluzioni di prova in condizioni variabili. La precisione era solo dello 0,5% RSD per la dimensione media Z, mentre un massimo del 3,5% RSD è stato calcolato per il PDI. I risultati medi di diversi analisti e giorni differivano solo dello 0,4% per la dimensione media Z e dell'1,5% per il PDI. Le statistiche sono state calcolate da 12 misurazioni eseguite da due analisti in giorni diversi. Né le var...

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Dynamic Light Scattering Analysis for the Determination of the Particle Size of Iron-Carbohydrate Complexes

La diffusione dinamica della luce (DLS) è emersa come un test adatto per valutare la dimensione delle particelle e la distribuzione dei complessi ferro-carboidrati somministrati per via endovenosa. Tuttavia, i protocolli mancano di standardizzazione e devono essere modificati per ogni complesso ferro-carboidrati analizzato. Il presente protocollo descrive l'applicazione e le considerazioni speciali per l'analisi del saccarosio di ferro.

Analisi dinamica della diffusione della luce per la determinazione della dimensione delle particelle dei complessi ferro-carboidrati

Intravenously administered iron-carbohydrate nanoparticle complexes are widely used to treat iron deficiency. This class includes several structurally ...

La diffusione dinamica della luce, o DLS, è un metodo fondamentale per valutare la dimensione e la distribuzione delle particelle intatte. Tuttavia, l'analisi delle nanoparticelle di carboidrati di ferro pone alcune sfide. Un vantaggio del DLS include un'ampia strumentazione disponibile, facile da eseguire l'analisi e stabilire protocolli per l'analisi dei nanomateriali.Uno degli obiettivi del DLS è quello di valutare il profilo di polidispersione delle nanoparticelle, che può in definitiva influenzare l'interazione con l'ambiente biologico. Per la dimostrazione della procedura, sarà Cintia Batista Marques, dottoranda dell'Università di Ginevra. Dopo aver avviato la macchina nel software dello strumento, selezionare la posizione di memorizzazione nella finestra aperta, assegnare un nome al file di misurazione e confermare i dettagli facendo clic su Salva.Selezionare la procedura operativa standard richiesta dall'elenco a discesa nell'interfaccia dello strumento. Se è necessaria una SOP precedente, selezionare Cerca SOP dall'elenco e confermare la selezione facendo clic sulla freccia verde. Per iniziare il processo di misurazione, fare clic sul pulsante verde di avvio nella parte inferiore della schermata dell'interfaccia dello strumento.Quindi, riempire un millilitro dello standard di particelle non diluite in una cuvetta di polistirolo e chiuderlo con il coperchio. Una volta riempito, assicurarsi che non ci siano bolle d'aria. Se sono presenti bolle d'aria, rimuoverle picchiettando leggermente sulla cuvetta.Posizionare la cuvetta nel supporto della cella dello strumento con il segno della freccia rivolto in avanti e chiudere il coperchio della camera di misura. Caricare il parametro SOP dell'unità e immettere il nome del campione SST 20 nanometer particle standard nella finestra iniziale. Inoltre, aggiungere una nota che includa un numero identificativo e la data di scadenza dello standard.Per misurare la soluzione di saccarosio di ferro, pipettare 0,5 millilitri di una soluzione di saccarosio di ferro con contenuto di ferro al 2% in massa in volume in un matraccio tarato da 25 millilitri e riempire fino al segno con acqua a basso contenuto di particelle, ottenendo una soluzione contenente 0,4 milligrammi di ferro per millilitro. Ora posizionare la cuvetta di plastica contenente la soluzione di misurazione nel dispositivo con il segno di freccia rivolto in avanti e chiudere il coperchio. Caricare nuovamente la SOP dei parametri e immettere il numero di batch del nome del campione nella finestra iniziale.Avviare la misurazione e al termine, indicata da un segnale acustico, chiudere la finestra di misurazione. Calcola il valore medio di sei singole misurazioni. Contrassegnare le singole misurazioni nella visualizzazione dei record del file di misurazione e fare clic con il pulsante destro del mouse su Crea risultato medio.Aggiungere il nome del valore medio in Nome campione. Quindi confermare facendo clic su OK. Attendi che il software crei un nuovo record alla fine dell'elenco e cerca un nome inserito e il risultato medio in quel record.Vengono visualizzati i grafici di distribuzione delle dimensioni per intensità, volume e numero. La distribuzione delle dimensioni per intensità influenzata da un secondo picco è fornita come esempio di un risultato negativo. Dati di scarsa qualità hanno mostrato un segnale aggiuntivo a 5.000 nanometri.La distribuzione dimensionale per numero differiva fino a un fattore due dalla media Z basata sull'intensità proposta. Solo valori leggermente inferiori sono stati calcolati dalla distribuzione dimensionale per volume. Quando si utilizza DLS per caratterizzare le nanoparticelle di carboidrati di ferro, è importante garantire la corretta SOP, la diluizione del campione e anche il riempimento della cuvetta.Il frazionamento asimmetrico del flusso del campo di flusso e la cromatografia di esclusione dimensionale e la diffusione a raggi X a piccolo angolo possono essere eseguiti come metodi fisico-chimici ortogonali aggiuntivi. I protocolli validati per DLS migliorano notevolmente la robustezza della caratterizzazione iniziale e comparativa delle nanoparticelle di carboidrati di ferro. Tuttavia, la preparazione del campione e la propensione della tecnica verso grandi dimensioni delle particelle devono essere considerate nel contesto delle metodologie ortogonali.

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