Name: experimental viral infection in adult mosquitoes by oral feeding and microinjection
Uploaded: 2022-07-28T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Experimental Viral Infection in Adult Mosquitoes by Oral Feeding and Microinjection at JoVE.com

Este trabalho foi apoiado pelo Wuhan Science and Technology Plan Project (2018201261638501).

1. Preparação de vírus e mosquitos
<ol><li>Preparação de vírus OBS: Todos os processos foram realizados em laboratório de nível de biossegurança 2 (BSL-2). O nível de contenção de biossegurança utilizado deve ser determinado pela avaliação de risco do patógeno e regulamentos específicos para nações e regiões. O processo deve ser realizado em um gabinete de biossegurança.<ol><li>Inocular 1 x 106 células C6/36 num balão de cultura T75. Encher o frasco com 10 mL de mei...

<ol>
	<li>Yu, X., Zhu, Y., Xiao, X., Wang, P., Cheng, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+towards+Understanding+the+Mosquito-Borne+Virus+Life+Cycle.">Progress towards Understanding the Mosquito-Borne Virus Life Cycle.</a> Trends in Parasitology. 35 (12), 1009-1017 (2019).</li><li>Sukhralia, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+dengue+to+Zika:+the+wide+spread+of+mosquito-borne+arboviruses.">From dengue to Zika: the wide spread of mosquito-borne arboviruses.</a> European Journal of Clinical Microbiology &amp; Infectious Diseases. 38 (1), 3-14 (2019).</li><li>Kuhn, J. 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W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Globe-Trotting+Aedes+aegypti+and+Aedes+albopictus:+Risk+Factors+for+Arbovirus+Pandemics.">Globe-Trotting Aedes aegypti and Aedes albopictus: Risk Factors for Arbovirus Pandemics.</a> Vector-Borne and Zoonotic Diseases. 20 (2), 71-81 (2020).</li><li>Liu-Helmersson, J., Brannstrom, A., Sewe, M. O., Semenza, J. 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O objetivo deste método foi fornecer uma avaliação de risco abrangente de um vírus transmitido por mosquitos, avaliando a competência do vetor por meio de alimentação oral e inoculação intratorácica.
No experimento de alimentação oral, os mosquitos ingurgitados precisam ser colhidos e transferidos para um novo recipiente, representando um sério risco para os operadores. Isso porque qualquer mosquito, inclusive mosquitos não infectados, pode ser fonte de infecção<sup class="xref...

Os vírus transmitidos por mosquitos (MBVs), um grupo heterogêneo de vírus de RNA, podem persistir em mosquitos vetores e subsequentemente se espalhar para hospedeiros vertebrados1. Os MBVs clinicamente importantes estão distribuídos majoritariamente em quatro famílias de vírus: Flaviviridae, Togaviridae, Reoviridae e Peribunyavividae 2,3. Nas últimas décadas, esses vírus têm sido relatados em todo o mundo, causando problemas de saúde pública. Como um dos MBVs mais conhecidos, o vírus da dengue (DENV) tornou-se o arbovírus emergente ou reemergente mais prevalente em mais de 100 países durante os últimos 20 anos4. Desde a descoberta do vírus Zika (ZIKV) no interior, quase todos os países e territórios tropicais e subtropicais do continente relataram infecções humanas pelo VZIK5. Com o objetivo de avaliar o risco de transmissão do vírus, inúmeros estudos nos últimos anos têm focado na competência do mosquito vetor para esses vírus 6,7. Como resultado, é fundamental prevenir e controlar eficazmente as doenças transmitidas por vetores.
O Aedes aegypti (Ae. aegypti), um dos mosquitos mais facilmente criados em laboratório, é um importante vetor do DENV, ZIKV, Chikungunya virus (CHIKV) e vírus da febre amarela (YFV)8. Durante muito tempo, o Aedes aegypti foi encontrado apenas no continente africano e no sudeste asiático, mas nos últimos anos colonizou quase todos oscontinentes9. Além disso, a abundância global de Aedes aegypti vem crescendo continuamente, com um aumento estimado de 20% até o final do século10. De 2004 a 2009, na China, foi evidente o aumento da competência do vetor Aedes aegypti para o DENV devido às temperaturas mais elevadas no dia-a-dia11. O status do Aedes aegypti como vetor patogênico aumentou significativamente na China. Consequentemente, para enfrentar esses desafios, é necessário investigar a competência vetorial do Aedes aegypti para transmitir vírus.
Como um artrópode hematófago, a fêmea do mosquito perfura a pele de um hospedeiro vertebrado e se alimenta do sangue. Os mosquitos ocasionalmente adquirem vírus de hospedeiros infectados por vírus e, em seguida, transferem os vírus para um novo hospedeiro. Assim, para determinar a competência vetorial, os mosquitos são alimentados com uma farinha de sangue artificial contendo arboviroses por meio de um sistema de alimentação em ambiente de laboratório12. Os mosquitos individuais são separados em cabeças, corpos e secreções de saliva vários dias após a infecção. Para medir a infecção, disseminação e taxas de transmissão do vírus, os títulos virais foram detectados por PCR quantitativo de transcrição reversa (qRT-PCR) ou ensaio de placa. No entanto, nem todos os mosquitos desenvolvem infecções do intestino médio e a capacidade de transferir um vírus para o próximo hospedeiro após a alimentação sanguínea. Está ligada às barreiras fisiológicas dos mosquitos, que impedem a penetração de patógenos no organismo e desempenham papel vital em sua imunidade inata13. As barreiras do intestino médio, particularmente a barreira de infecção do intestino médio (MIB) e a barreira de escape do intestino médio (MEB), influenciam se o vírus poderia infectar o vetor sistemicamente e a eficiência com que ele se espalha. Dificulta a análise da infecção de outros tecidos, como as glândulas salivares, que também apresentam infecção das glândulas salivares e barreiras de escape13,14. Para melhor caracterizar a infecção do intestino médio e glândulas salivares no vetor, um protocolo detalhado para alimentação oral e inoculação intratorácica de arbovírus em Aedes aegypti é apresentado. Este protocolo pode ser aplicado a arboviroses adicionais em uma variedade de mosquitos vetores, como a infecção por DENV e ZIKV em Aedes spp., e pode ser um procedimento praticável.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Aedes aegypti&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Rockefeller strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated nucleic acid extraction system&#160;</td>
			<td>NanoMagBio</td>
			<td>S-48</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BHK-21 cells</td>
			<td>National Virus Resource Center, Wuhan Institute of Virology</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buckets</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C6/36 cells&#160;</td>
			<td>National Virus Resource Center, Wuhan Institute of Virology</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon dioxide spray gun&#160;</td>
			<td>wuhan Yihong</td>
			<td>YHDFPCO2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifugal machine</td>
			<td>Himac&#160;</td>
			<td>CF16RN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CFX96 Touch Real-Time PCR Detection System&#160;</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>CFX96 Touch</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ebinur Lake virus</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Cu20-XJ isolation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formaldehyde&#160;</td>
			<td>Wuhan Baiqiandu</td>
			<td>B0003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glove box&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Hushi</td>
			<td>10010518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Immersion oil&#160;</td>
			<td>Cargille</td>
			<td>16908-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insect incubator</td>
			<td>Memmert</td>
			<td>HPP750T7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low Temperature Tissue Homogenizer Grinding Machine&#160;</td>
			<td>Servicebio</td>
			<td>KZ-III-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic Virus Genome Extraction Kit</td>
			<td>NanoMagBio</td>
			<td>NMG0966-16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mesh cages (30 x 30 x 30 cm)</td>
			<td>Huayu</td>
			<td>HY-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>methylcellulose</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>17851</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mice feedstuff powder&#160;</td>
			<td>BESSN</td>
			<td>BS018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microelectrode Puller</td>
			<td>WPI</td>
			<td>PUL-1000</td>
			<td>PUL-1000&#160;is a microprocessor controlled horizontal puller for making glass micropipettes or microelectrodes used in intracellular recording, patch clamp studies, microperfusion or microinjection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mosquito net meshes&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanoject III Programmable Nanoliter Injector</td>
			<td>Drummond</td>
			<td>3-000-207</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>One Step TB Green PrimeScript PLUS RT-PCR Kit&#160;</td>
			<td>Takara</td>
			<td>RR096A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS, pH 7.4</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>C10010500BT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>151140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic cupes (7 oz)&#160;</td>
			<td>Hubei Duoanduo</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic cups (24 oz)&#160;</td>
			<td>Anhui shangji</td>
			<td>PET32-Tub-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic disposable droppers</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BS-XG-O3L-NS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refrigerator (-80 &#176;C)</td>
			<td>sanyo</td>
			<td>MDF-U54V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Replacement Glass Capillaries</td>
			<td>Drummond</td>
			<td>3-000-203-G/X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI medium 1640&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>C11875500BT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Screw cap storage tubes (2 mL )</td>
			<td>biofil</td>
			<td>&#160;FCT010005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shallow dishes&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sponge</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile defibrillated horse blood</td>
			<td>Wuhan Purity Biotechnology</td>
			<td>CDHXB413</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T75 culture flask</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430829</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>The artificial mosquito feeding system&#160;</td>
			<td>Hemotek</td>
			<td>Hemotek PS6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>The dissecting microscope&#160;</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>&#160;stemi508</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>The ice plates</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>The mosquito absorbing machine&#160;</td>
			<td>Ningbo Bangning</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>The pipette tips&#160;</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>TF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA (0.25%)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25200056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>Dumont</td>
			<td>0203-5-PO</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

experimental viral infection in adult mosquitoes by oral feeding and microinjection

Os vírus transmitidos por mosquitos (MBVs), que são patógenos infecciosos para vertebrados, são transmitidos por muitas espécies de mosquitos, representando uma grave ameaça à saúde pública. Uma vez ingeridos, os vírus devem ultrapassar a barreira do intestino médio do mosquito para chegar à hemolinfa, de onde podem potencialmente se espalhar para as glândulas salivares. Quando um mosquito pica, esses vírus são espalhados para novos hospedeiros vertebrados. Da mesma forma, o mosquito pode pegar vírus diferentes. Em geral, apenas uma pequena porção de vírus pode entrar nas glândulas salivares através do intestino. A eficiência de transmissão desses vírus para as glândulas é afetada pelas duas barreiras físicas encontradas em diferentes espécies de mosquitos: as barreiras do intestino médio e as barreiras das glândulas salivares. Este protocolo apresenta um método para detecção de vírus em glândulas salivares de Aedes aegypti após alimentação oral e infecção por injeção intratorácica. Além disso, determinar se o intestino e/ou as glândulas salivares impedem a disseminação viral pode auxiliar na avaliação de risco de MBVs transmitidos pelo Aedes aegypti.

Para examinar a distribuição de EBIV nos mosquitos infectados via alimentação sanguínea artificial (o título final viral foi de 6,4 x 106 UFP/mL) e injeção intratorácica (a dose viral foi de 340 UFP), RNAs virais na saliva, cabeças e intestinos dos mosquitos aos 10 dias pós-infecção (dpi) foram determinados.
Para o Aedes aegypti, o título viral de EBIV no intestino, cabeça e saliva das fêmeas inoculadas intratoracicamente foi muito maior do que nas ...

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Experimental Viral Infection in Adult Mosquitoes by Oral Feeding and Microinjection

Essa metodologia, que incluiu alimentação por via oral e infecção por injeção intratorácica, foi capaz de avaliar efetivamente a influência das barreiras do intestino médio e/ou glândulas salivares na infecção por arbovírus.

Infecção viral experimental em mosquitos adultos por alimentação oral e microinjeção

Mosquito-borne viruses (MBVs), which are infectious pathogens to vertebrates, are spread by many mosquito species, posing a severe threat to public ...

Esse protocolo pode determinar se o intestino e as glândulas tireoides impedem a disseminação viral e pode auxiliar nas avaliações de risco de vírus transmitidos por mosquitos transmitidos pelo Aedes aegypti. Nosso protocolo incluiu dois métodos de infecção, a alimentação por via oral e a injeção intratorácica, que puderam avaliar efetivamente a competência vetorial das arboviroses. Este protocolo pode ser aplicado a infecções adicionais por arbovírus em uma variedade de mosquitos vetores, como a infecção pelo vírus da dengue e pelo vírus Zika no Aedes, e pode ser um procedimento viável.Quem demonstrará o procedimento será Fei Wang, assistente de pesquisa do meu laboratório. Para realizar a alimentação artificial usando o sistema de alimentação artificial do mosquito, corte as membranas de colágeno no tamanho adequado e fixe-as aos reservatórios com os anéis O. Adicione três mililitros da mistura vírus-sangue aos reservatórios e sele os reservatórios usando tampões plásticos para evitar vazamentos.Coloque os copos plásticos contendo mosquitos no porta-luvas. Rosqueie os reservatórios selados no alimentador FU1 e coloque um reservatório em um copo. Ligue a unidade de energia e alimente os mosquitos por uma hora.Após a alimentação, anestesiar os mosquitos com gelo por vários segundos até que desmaiem. Despeje os mosquitos anestesiados em uma placa de Petri colocada no gelo e cubra a tampa rapidamente. Pegue mosquitos fêmeas ingurgitados com fórceps e transfira-os para novos copos plásticos a 50 mosquitos fêmeas por xícara.Embrulhe o copo com uma malha mosquiteira cortada e cubra com uma tampa com um buraco no meio. Corte a esponja em pedaços pequenos e coloque-os sobre as xícaras. Adicione solução de glicose a 8% na esponja usando um conta-gotas descartável de plástico.Coloque os copos contendo fêmeas de mosquitos na incubadora a 27 graus Celsius a 80% de umidade por 10 dias. Substitua uma nova esponja saturada de glicose a cada 72 horas. Para a inoculação intratorácica, preparar fêmeas de mosquitos conforme descrito no manuscrito do texto.Para preparar a diluição do vírus infeccioso, remova o estoque de vírus do freezer de 80 graus Celsius e descongele-os no gelo. Diluir o estoque de vírus em uma diluição de vírus de 100 nanolitros contendo 100 a 500 unidades formadoras de placas de vírus com meio RPMI 1640 contendo 10% de FBS e 1% de penicilina-estreptomicina. Coloque a diluição do vírus no gelo.Em seguida, prepare as agulhas de microinjeção usando um extrator 1000 com os parâmetros no programa extrator da agulha definidos como índice de calor para 450, força em g para 110, distância em milímetro para um, e atraso em segundos para zero. Cortar a ponta de uma agulha puxada com uma pinça sob um microscópio dissecante em aumento de 16x. Encha novamente a agulha com óleo mineral através de uma seringa estéril descartável.Conecte a agulha no injetor seguindo as instruções da máquina. Introduza cuidadosamente a agulha num tubo contendo uma diluição de vírus infeccioso. Em seguida, pressione o botão Fill para encher aproximadamente quatro microlitros de diluição de vírus na agulha.Uma vez que a agulha esteja cheia, não toque ou danifique a agulha. Pegue aproximadamente 50 fêmeas de mosquitos anestesiados com pinças e coloque-os em uma placa de gelo. Coloque a placa sob o injetor e insira a agulha na cavidade torácica do mosquito sob um microscópio dissecante.Ajuste o volume de injeção para 100 nanolitros e a taxa para 50 nanolitros por segundo. Pressione o botão Injetar para deixar a solução do vírus fluir para o mosquito. Após a injeção bem-sucedida, o abdômen se projeta ligeiramente.Coloque o mosquito infectado em um novo copo plástico colocado no gelo. Quando o número de mosquitos infectados for suficiente, envolva o copo com uma malha mosquiteira cortada e cubra-o com a tampa. Para coletar saliva dos mosquitos fêmeas infectados, despeje os mosquitos anestesiados em uma placa de Petri colocada no gelo e feche a tampa rapidamente.Coloque as pontas da pipeta de 10 microlitros cheias de óleo de imersão lado a lado sobre a lama de borracha. Pegue as fêmeas de mosquitos com uma pinça e coloque-as em uma placa de gelo. Retire as pernas e asas com uma pinça.Coloque a parte bucal de um mosquito em cada ponta da pipeta para coletar a saliva conforme secretada no óleo pelos mosquitos em temperatura ambiente. Após 45 a 60 minutos, coloque as pontas da pipeta em tubos de 1,5 mililitro contendo 200 microlitros de meio diluente viral. Centrifugar os tubos a 5.000 g durante cinco minutos a quatro graus Celsius para expelir saliva para os tubos.Armazenar os tubos contendo saliva a 80 graus Celsius para posterior determinação das taxas de transmissão. Após a coleta de saliva, dissecar as fêmeas de mosquitos infectadas. Usando pinças, corte as cabeças dos mosquitos e coloque cada cabeça em um tubo individual contendo 200 microlitros de meio RPMI 1640.Pegue o tórax com um tweezer. Em seguida, pegue o penúltimo segmento do abdômen com outro tweezer e puxe o intestino para fora. Limpe o intestino para qualquer tecido e órgãos perdidos.Lave o intestino com PBS e coloque cada intestino em um tubo individual contendo 200 microlitros de meio RPMI 1640. Armazenar estes tubos a 80 graus Celsius para posterior determinação da disseminação do vírus e taxa de infecção. Nesta análise representativa, RNAs virais no intestino, cabeça e saliva das fêmeas de mosquitos aos 10 dias pós-infecção foram determinados.O título viral do vírus Ebinur Lake no intestino, cabeça e saliva dos mosquitos inoculados intratoracicamente foi maior do que nos mosquitos infectados oralmente. A taxa de infecção e disseminação para os mosquitos inoculados intratoracicamente foi de 100% e para os mosquitos infectados por via oral foi de 70% e 38,1%, respectivamente. A taxa de transmissão para os mosquitos inoculados intratoracicamente atingiu até 90%, mas para os mosquitos infectados por via oral foi de apenas 4,8%As fêmeas ingurgitadas foram colhidas para manter a consistência, pois a quantidade de alimentação afeta o conteúdo viral.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

An Analytical Tool-box for Comprehensive Biochemical, Structural and Transcriptome Evaluation of Oral Biofilms Mediated by Mutans Streptococci

Uma ferramenta analítica-box para avaliação bioquímica, estrutural e Transcriptoma abrangente de Biofilmes Oral Mediada por estreptococos do grupo mutans

Biofilms are highly dynamic, organized and structured communities of microbial cells enmeshed in an extracellular matrix of variable density and ...

Imunologia e Infecção

Detection of Infectious Virus from Field-collected Mosquitoes by Vero Cell Culture Assay

Detecção de vírus infecciosos de Campo mosquitos coletados por Vero Ensaio Cultura de Células

Mosquitoes transmit a number of distinct viruses including important human pathogens such as West Nile virus, dengue virus, and chickungunya virus. Many ...

Culturing Microglia from the Neonatal and Adult Central Nervous System

Microglia cultura do Sistema Nervoso Central Neonatal e Adulto

Microglia are the resident macrophage-like cells of the central nervous system (CNS) and, as such, have critically important roles in physiological and ...

2D and 3D Chromosome Painting in Malaria Mosquitoes

Pintura de cromossomo 2D e 3D em mosquitos da malária

Fluorescent in situ hybridization (FISH) of whole arm chromosome probes is a robust technique for mapping genomic regions of interest, detecting ...

The Development of Lyophilized Loop-mediated Isothermal Amplification Reagents for the Detection of Coxiella burnetii

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O Desenvolvimento da liofilizado Loop-mediadas isotérmicas de amplificação Reagentes para a detecção de<em&gt; Burnetii Coxiella</em

Coxiella burnetii, the agent causing Q fever, is an obligate intracellular bacterium. PCR based diagnostic assays have been developed for detecting C. ...

Measuring Influenza Neuraminidase Inhibition Antibody Titers by Enzyme-linked Lectin Assay

Medição de Inibição da Neuraminidase Influenza títulos de anticorpos por Enzyme-linked Lectina Ensaio

Antibodies to neuraminidase (NA), the second most abundant surface protein on influenza virus, contribute toward protection against influenza. Traditional ...

Detection of Low Copy Number Integrated Viral DNA Formed by In Vitro Hepatitis B Infection

Detection of Low Copy Number Integrated Viral DNA Formed by In Vitro Hepatitis B Infection

Deteção de cópia baixa número de DNA Viral integrado formado por In Vitro infecção de hepatite B

Hepatitis B Virus (HBV) is a common blood-borne pathogen causing liver cancer and liver cirrhosis resulting from chronic infection. The virus generally ...

Modeling Tuberculosis in Mycobacterium marinum Infected Adult Zebrafish

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Modelagem de tuberculose no Zebrafish adulto infectado de Mycobacterium marinum

Mycobacterium tuberculosis is currently the deadliest human pathogen causing 1.7 million deaths and 10.4 million infections every year. Exposure to this ...