Name: preparation of rat sciatic nerve for ex vivo neurophysiology
Uploaded: 2022-07-12T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Rat Sciatic Nerve for Ex Vivo Neurophysiology at JoVE.com

يعترف المؤلفون بالدكتور جيرالد هونسبيرجر من شركة جلاكسو سميث كلاين للأدوية ، ملك بروسيا ، بنسلفانيا ، الولايات المتحدة الأمريكية ، وغالفاني للإلكترونيات الحيوية (ستيفناج ، المملكة المتحدة) لمشاركة تقنية تحضير الأعصاب الأصلية معنا. يعترف المؤلفون روبرت توث بتصميم حمام الأعصاب ثنائي الغرفة. يعترف المؤلفون بالتمويل المقدم من منحة جوائز تحدي تقنيات الرعاية الصحية (HTCA) من مجلس أبحاث الهندسة والعلوم الفيزيائية (EPSRC). يعترف المؤلفون بمركز الأنظمة المدمجة والموزعة عالية الأداء للتدريب على الدكتوراه (HiPEDS CDT) التابع لإمبريال كوليدج لندن لتمويل أدريان رابو (EP / L016796/1 ). يتم تمويل Adrien Rapeaux حاليا من قبل معهد أبحاث الخرف في المملكة المتحدة ومركز أبحاث الرعاية والتكنولوجيا. يعترف المؤلفون بامتنان بزاك بيلي من إمبريال كوليدج ، في قسم الهندسة الحيوية ، للمساعدة في التجارب والوصول إلى الأنسجة الحيوانية أثناء إنتاج مقال فيديو JoVE.

تم تنفيذ جميع رعاية الحيوانات وإجراءاتها بموجب التراخيص المناسبة الصادرة عن وزارة الداخلية في المملكة المتحدة بموجب قانون الحيوانات (الإجراءات العلمية) (1986) وتمت الموافقة عليها من قبل مجلس رعاية الحيوان والمراجعة الأخلاقية في إمبريال كوليدج لندن.
1. إعداد المخازن المؤق...

<ol>
	<li>McIntyre, C. C., Richardson, A. G., Grill, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+the+excitability+of+mammalian+nerve+fibers:+Influence+of+afterpotentials+on+the+recovery+cycle.">Modeling the excitability of mammalian nerve fibers: Influence of afterpotentials on the recovery cycle.</a> Journal of Neurophysiology. 87 (2), 995-1006 (2002).</li><li>Pelot, N. A., Grill, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+quantification+of+excitation+and+kilohertz+frequency+block+of+the+rat+vagus+nerve.">In vivo quantification of excitation and kilohertz frequency block of the rat vagus nerve.</a> Journal of Neural Engineering. 17 (2), 026005 (2020).</li><li>Patel, Y. A., Kim, B. S., Rountree, W. S., Butera, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kilohertz+electrical+stimulation+nerve+conduction+block:+Effects+of+electrode+surface+area.">Kilohertz electrical stimulation nerve conduction block: Effects of electrode surface area.</a> IEEE Transactions on Neural Systems and Rehabilitation Engineering. 25 (10), 1906-1916 (2017).</li><li>Kortelainen, J., Al-Nashash, H., Vipin, A., Thow, X. Y., All, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+anaesthesia+on+somatosensory+evoked+potential+measurement+in+a+rat+model.">The effect of anaesthesia on somatosensory evoked potential measurement in a rat model.</a> Laboratory Animals. 50 (1), 63-66 (2016).</li><li>Oh, S. S., Hayes, J. M., Sims-Robinson, C., Sullivan, K. A., Feldman, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+anesthesia+on+measures+of+nerve+conduction+velocity+in+male+C57Bl6/J+mice.">The effects of anesthesia on measures of nerve conduction velocity in male C57Bl6/J mice.</a> Neuroscience Letters. 483 (2), 127-131 (2010).</li><li>Kuffler, S. W., Williams, E. M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small-nerve+junctional+potentials.+The+distribution+of+small+motor+nerves+to+frog+skeletal+muscle,+and+the+membrane+characteristics+of+the+fibres+they+innervate.">Small-nerve junctional potentials. The distribution of small motor nerves to frog skeletal muscle, and the membrane characteristics of the fibres they innervate.</a> The Journal of Physiology. 121 (2), 289-317 (1953).</li><li>Brunton, E., Blau, C. W., Nazarpour, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Separability+of+neural+responses+to+standardised+mechanical+stimulation+of+limbs.">Separability of neural responses to standardised mechanical stimulation of limbs.</a> Scientific Reports. 7 (1), 11138 (2017).</li><li>Schmalbruch, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fiber+composition+of+the+rat+sciatic+nerve.">Fiber composition of the rat sciatic nerve.</a> The Anatomical Record. 215 (1), 71-81 (1986).</li><li>Kagiava, A., Theophilidis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+the+permeability+of+the+rat+sciatic+nerve+epineural+sheath+against+compounds+with+local+anesthetic+activity:+an+ex+vivo+electrophysiological+study.">Assessing the permeability of the rat sciatic nerve epineural sheath against compounds with local anesthetic activity: an ex vivo electrophysiological study.</a> Toxicology Mechanisms and Methods. 23 (8), 634-640 (2013).</li><li>Motori, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+metabolic+rewiring+promotes+resilience+to+neurodegeneration+caused+by+mitochondrial+dysfunction.">Neuronal metabolic rewiring promotes resilience to neurodegeneration caused by mitochondrial dysfunction.</a> Science Advances. 6 (35), 8271 (2020).</li><li>Schwarz, J. R., Eikhof, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Na+currents+and+action+potentials+in+rat+myelinated+nerve+fibres+at+20+and+37&#176;+C.">Na currents and action potentials in rat myelinated nerve fibres at 20 and 37&#176; C.</a> Pfl&#252;gers Archiv. 409 (6), 569-577 (1987).</li><li>Cranefield, P. F., Brink, F., Bronk, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+oxygen+uptake+of+the+peripheral+nerve+of+the+rat.">The oxygen uptake of the peripheral nerve of the rat.</a> Journal of Neurochemistry. 1 (3), 245-249 (1957).</li><li>Lehmann, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+changes+in+pH+on+the+action+of+mammalian+A+nerve+fibers.">The effect of changes in pH on the action of mammalian A nerve fibers.</a> American Journal of Physiology-Legacy Content. 118 (3), 600-612 (1937).</li><li>Hamm, L. L., Nakhoul, N., Hering-Smith, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acid-base+homeostasis.">Acid-base homeostasis.</a> Clinical Journal of the American Society of Nephrology: CJASN. 10 (12), 2232-2242 (2015).</li><li>Minasian, S. M., Galagudza, M. M., Dmitriev, Y. V., Kurapeev, D. I., Vlasov, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+protection+against+global+ischemia+with+Krebs-Henseleit+buffer-based+cardioplegic+solution.">Myocardial protection against global ischemia with Krebs-Henseleit buffer-based cardioplegic solution.</a> Journal of Cardiothoracic Surgery. 8, 60 (2013).</li><li>Bailey, L. E., Ong, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Krebs-Henseleit+solution+as+a+physiological+buffer+in+perfused+and+superfused+preparations.">Krebs-Henseleit solution as a physiological buffer in perfused and superfused preparations.</a> Journal of Pharmacological Methods. 1 (2), 171-175 (1978).</li><li>Miller, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sydney+Ringer:+physiological+saline,+calcium+and+the+contraction+of+the+heart.">Sydney Ringer: physiological saline, calcium and the contraction of the heart.</a> The Journal of Physiology. 555, 585-587 (2004).</li><li>Yamamoto, D., Suzuki, N., Miledi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blockage+of+chloride+channels+by+HEPES+buffer).">Blockage of chloride channels by HEPES buffer).</a> Proceedings of the Royal Society of London. Series B. Biological Sciences. 230 (1258), 93-100 (1987).</li><li>Janz, G. J., Taniguchi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+silver-silver+halide+electrodes.+Preparation,+stability,+and+standard+potentials+in+aqueous+and+non-aqueous+media.">The silver-silver halide electrodes. Preparation, stability, and standard potentials in aqueous and non-aqueous media.</a> Chemical Reviews. 53 (3), 397-437 (1953).</li><li>Rapeaux, A., Constandinou, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+HFAC+block-capable+and+module-extendable+4-channel+stimulator+for+acute+neurophysiology.">An HFAC block-capable and module-extendable 4-channel stimulator for acute neurophysiology.</a> Journal of Neural Engineering. 17 (4), 046013 (2020).</li><li>Next-Generation-Neural-Interfaces/HFAC_Stimulator_4ch. Next Generation Neural Interfaces Available from: <a target="_blank" href="https://github.com/Next-Generation-Neural-Interfaces/HFAC_Stimulator_4ch&gt">https://github.com/Next-Generation-Neural-Interfaces/HFAC_Stimulator_4ch&gt</a> (2021)</li><li>Cuttaz, E. A., Chapman, C. A. R., Syed, O., Goding, J. A., Stretchable Green, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=fully+polymeric+electrode+arrays+for+peripheral+nerve+stimulation.">fully polymeric electrode arrays for peripheral nerve stimulation.</a> Advanced Science. 8 (8), 2004033 (2021).</li><li>Lossi, L., Merighi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+ex+vivo+rodent+platforms+in+neuroscience+translational+research+with+attention+to+the+3Rs+philosophy.">The use of ex vivo rodent platforms in neuroscience translational research with attention to the 3Rs philosophy.</a> Frontiers in Veterinary Science. 5, 164 (2018).</li></ol>

في هذا العمل ، وصفنا بروتوكولا لإعداد الأعصاب الوركية للفئران للفسيولوجيا العصبية خارج الجسم الحي. يستغرق استخراج الأنسجة حوالي 30 دقيقة ، بما في ذلك التعامل مع الحيوانات والتخدير والإعدام والتشريح ، في حين يجب أن يتطلب تنظيف الأعصاب ووضعها في الحمام وزرع القطب الكهربائي 30 دقيقة إضا?...

إن الفهم الحالي لوظيفة الأعصاب الأساسية كما هو موضح في silico يفتقر إلى عدة جوانب ، لا سيما فيما يتعلق بآثار تفتيت الأنسجة العصبية خارج السوما والمحور العصبي والتشعبات. لا تزال التفاعلات بين المحور العصبي والمايلين غير مفهومة بشكل جيد كما يتضح من حقيقة أنه حتى نماذج الأعصاب الحسابية التفصيلية مثل MRG1 (لأعصاب الثدييات) التي تلتقط بشكل كاف استجابة التحفيز الكهربائي التقليدية ، لا تلتقط السلوكيات الأخرى المرصودة تجريبيا مثل ترحيل الكتلة عالية التردد2 أو استجابة البداية الثانوية3.
يوفر هذا البروتوكول طريقة للتحقيق بكفاءة في العمليات الفسيولوجية العصبية على مستوى الأعصاب في نموذج حيواني مختبري صغير حاد ، باستخدام بروتوكول إعداد موحد لعزل العصب ، والتحكم في بيئته ، وإزالته من سياق في الجسم الحي إلى سياق خارج الجسم الحي. هذا سيمنع عمليات الجسم الأخرى أو التخدير المستخدم من قبل بروتوكولات تحفيز الأعصاب في الجسم الحي لتغيير سلوك الأعصاب وإرباك النتائج المقاسة أو تفسيرها 4,5. وهذا يمكن من تطوير نماذج أكثر واقعية تركز فقط على التأثيرات الخاصة بالأنسجة العصبية غير المفهومة بشكل جيد. هذا البروتوكول مفيد أيضا كمنصة اختبار لتحفيز الأعصاب الجديدة وتسجيل مواد القطب الكهربائي وهندسته ، بالإضافة إلى نماذج التحفيز الجديدة مثل الكتلة عالية التردد 2,3. تم استخدام اختلافات في هذه التقنية سابقا لدراسة فسيولوجيا الأعصاب في ظروف خاضعة لرقابة مشددة6 ، على سبيل المثال ، لقياس ديناميكيات وخصائص القناة الأيونية أو آثار التخدير الموضعي7.
توفر هذه التقنية العديد من المزايا مقارنة بالبدائل مثل التجارب الحادة في الجسم الحي على الحيوانات الصغيرة8. تغني هذه التقنية عن الحاجة إلى الحفاظ على عمق التخدير حيث تم استخراج الأنسجة من الجسم ، مما يقلل من كمية المعدات المطلوبة مثل ناشر مخدر ، ومكثف الأكسجين ، ووسادة التدفئة. هذا يبسط البروتوكول التجريبي ، مما يقلل من خطر الأخطاء. نظرا لأن التخدير يمكن أن يغير وظيفة الأعصاب4 ، فإن هذه التقنية تضمن عدم الخلط بين التدابير بسبب الآثار الجانبية لهذه المركبات المخدرة. وأخيرا ، هذه التقنية أكثر ملاءمة من التجارب الحادة في الجسم الحي عند دراسة آثار المركبات السامة للأعصاب مثل التيترودوتوكسين ، والتي من شأنها أن تقتل حيوانا مخدرا عن طريق الشلل.
أقسام الأعصاب المحيطية هي نظام فريد من نوعه خارج الجسم الحي لأن هناك فرصة كبيرة لأن الألياف المسؤولة عن الإشارات العصبية المسجلة لا تحتوي على أي سوما. وبما أن هذه الخلايا عادة ما تكون موجودة ، بالنسبة للخلايا العصبية الحركية ، في العمود الفقري ، وللخلايا العصبية الحسية في العقد الجذرية الظهرية بجوار العمود الفقري ، يمكن نمذجة إعداد جزء من عصب الثدييات تقريبا كمجموعة من الأغشية الأنبوبية ذات القنوات الأيونية ، المفتوحة في كلا الطرفين9. يتم الحفاظ على التمثيل الغذائي بواسطة الميتوكوندريا الموجودة في المحور العصبي في وقت تشريح الأنسجة10. يتم تشجيع خياطة الأطراف المفتوحة للمحور بعد الاستخراج لإغلاقها وبالتالي المساعدة في الحفاظ على التدرجات الأيونية الموجودة عبر الغشاء ، والتي تعتبر ضرورية لوظيفة الأعصاب الطبيعية.
للحفاظ على توازن الأنسجة خارج الجسم ، يجب التحكم في العديد من المتغيرات البيئية بإحكام. هذه هي درجة الحرارة11 ، الأوكسجين 12 ، الأسمولية ، الرقم الهيدروجيني13,14 ، والوصول إلى الجلوكوز للحفاظ على التمثيل الغذائي. بالنسبة لهذا البروتوكول ، يتمثل النهج في استخدام مخزن مؤقت معدل Krebs-Henseleit15,16 (mKHB) يتم تهويته باستمرار بمزيج من الأكسجين وثاني أكسيد الكربون. يقع mKHB في عائلة المخازن المؤقتة القلبية 6,17 المستخدمة للحفاظ على الأنسجة المشرطة خارج الجسم ، على سبيل المثال ، في التجارب خارج الجسم الحي. لا تحتوي هذه المخازن المؤقتة على أي هيموغلوبين أو مضادات حيوية أو مضادات للفطريات ، وبالتالي فهي مناسبة فقط للمستحضرات التي تنطوي على كميات صغيرة من الأنسجة لفترة محدودة. تم تحقيق التحكم في الأس الهيدروجيني باستخدام زوج الأكسدة والاختزال الكربوني وثاني أكسيد الكربون ، مما يتطلب تهوية مستمرة للمخزن المؤقت مع ثاني أكسيد الكربون للحفاظ على توازن الأس الهيدروجيني. هذا لتجنب استخدام عوامل التخزين المؤقت الشائعة الأخرى مثل HEPES ، والتي يمكن أن تعدل وظيفة الخلايا العصبية18. لأكسجة المخزن المؤقت وتوفير التحكم في درجة الحموضة ، تم استخدام خليط من 5٪ من ثاني أكسيد الكربون في الأكسجين يسمى carbogen (95٪ O 2 ، 5٪ CO2). تم استخدام محرك تسخين للتحكم في درجة حرارة حاوية عازلة ، وتم تشغيل المخزن المؤقت من خلال حمام عصبي ، ثم أعيد تدويره إلى حاوية البداية. تستمر التجربة النموذجية من 6 إلى 8 ساعات قبل أن يفقد العصب قدرته على البقاء ولم يعد يستجيب بما فيه الكفاية للتحفيز لاتخاذ تدابير تمثل الأنسجة السليمة.
لتحسين نسبة الإشارة إلى الضوضاء ، تم استخدام أقطاب كلوريد الفضة للتسجيل ، والتي تم إعدادها وفقا للطرق الموصوفة سابقا19. للتحفيز ، يمكن استخدام مزيج من أقطاب الكفة البلاتينية التجارية الجاهزة وأقطاب الكفة البوليمرية الموصلة حسب الطلب. تتمتع أقطاب الكفة البوليمرية الموصلة بقدرات شحن أعلى بشكل ملحوظ ، وهي مفيدة عند تحفيز العصب باستخدام الأشكال الموجية عالية السعة20.
تم وصف المحفز المستخدم في هذا البروتوكول سابقا20. الوثائق وملفات التصميم والبرامج النصية لاستخدامها متاحة للجمهور21. يمكن استخدام محفزات أخرى لتنفيذ هذا البروتوكول. ومع ذلك ، فإن المحفز المخصص قادر أيضا على كتلة التيار البديل عالي التردد (HFAC) 2,20 ، والتي تمكن مجموعة واسعة من تجارب الفيزيولوجيا العصبية. لاستخدام كتلة HFAC ، يوصى باستخدام أساور مطاطية موصلة لتجنب تلف العصب. الأصفاد العصبية المطاطية الموصلة هي صفائف قطب كهربائية ناعمة وبوليمرية بالكامل يتم إنتاجها من اللدائن الموصلة كمكون موصل و polydimethylsiloxane كعازل22. تم تصنيع الأجهزة في تكوين ثنائي القطب باستخدام تقنيات التصنيع الدقيق بالليزر التقليدية.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 L Glass bottle</td>
			<td>VWR International Ltd</td>
			<td>215-1595</td>
			<td>Borosilicate glass</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 L Glass graduated flask</td>
			<td>VWR International Ltd</td>
			<td>612-3626</td>
			<td>Borosilicate glass</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 L Glass bottle</td>
			<td>VWR International Ltd</td>
			<td>215-1596</td>
			<td>Borosilicate glass</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 L Glass graduated flask</td>
			<td>VWR International Ltd</td>
			<td>BRND937254</td>
			<td>Borosilicate glass</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adaptor, pneumatic, 8 mm to 1/4 NPT</td>
			<td>RS UK</td>
			<td>536-2599</td>
			<td>push-to-fit straight adaptor between oxygen hose and gas dispersion tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alkoxy conformal coating</td>
			<td>Farnell</td>
			<td>1971829</td>
			<td>ACC15 Alkoxy conformal coating for dissection petri dish preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthetic</td>
			<td>Chanelle</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Isoflurane inhalation anesthetic, 250 mL bottle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beaker, 2 L</td>
			<td>VWR International Ltd</td>
			<td>213-0469</td>
			<td>Borosilicate glass</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar nerve cuff</td>
			<td>Cortec GMBH</td>
			<td>N/A</td>
			<td>800 micron inner diameter, perpendicular lead out, no connector termination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bossheads</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Standard wet laboratory bossheads for attaching grippers to rods</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride dihydrate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>C7902-500g</td>
			<td>500 g in plastic bottle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbogen canister</td>
			<td>BOC</td>
			<td>N/A</td>
			<td>F-size canister</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge Tubes, 15 mL volume</td>
			<td>VWR International Ltd</td>
			<td>734-0451</td>
			<td>Falcon tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conductive elastomer nerve cuff</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>high charge capacity nerve cuff for stimulation, see protocol for fabrication reference</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Connector, Termimate</td>
			<td>Mouser UK</td>
			<td>538-505073-1100-LP</td>
			<td>These should be soldered to wire terminated with crocodile clips (see entry 11)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crocodile clip connectors</td>
			<td>RS UK</td>
			<td>212-1203</td>
			<td>These should be soldered to wire terminated with TermiMate connectors (see entry 10)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deionized Water</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Obtained from deionized water dispenser</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps angled 45 degrees</td>
			<td>InterFocus Ltd</td>
			<td>91110-10</td>
			<td>Fine forceps, student range</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps standard Dumont #7</td>
			<td>InterFocus Ltd</td>
			<td>91197-00</td>
			<td>Student range forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas Disperson Tube, Porosity 3</td>
			<td>Merck</td>
			<td>12547866</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose anhydrous, powder</td>
			<td>VWR International Ltd</td>
			<td>101174Y</td>
			<td>500 g in plastic bottle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Grippers</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Standard wet laboratory rod-mounted grippers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Stirrer</td>
			<td>RS UK</td>
			<td>768-9672</td>
			<td>Stuart US152</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostats</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Any hemostat &#62;12 cm in length is suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insect Pins, stainless steel, size 2</td>
			<td>InterFocus Ltd</td>
			<td>26001-45</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laptop computer</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Any laboratory-safe portable computer with at least 2 unused USB ports is suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Line Noise Filter</td>
			<td>Digitimer</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Humbug noise eliminator (50 Hz line noise filter)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low-Noise Preamplifier, SR560</td>
			<td>Stanford Research Systems</td>
			<td>SR560</td>
			<td>Low-noise voltage preamplifier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Sulphate salt</td>
			<td>VWR International Ltd</td>
			<td>291184P</td>
			<td>500g in plastic bottle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB scripts</td>
			<td>Github</td>
			<td>https://github.com/Next-Generation-Neural-Interfaces/HFAC_Stimulator_4ch</td>
			<td>Initialization, calibration and stimulation scripts for the custom stimulator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB software</td>
			<td>Mathworks</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Standard package</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope Light, PL-2000</td>
			<td>Photonic</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Light source with swan necks. Product may be obtained from third party supplier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope, SMZ 745</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SM745</td>
			<td>Stereoscopic Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil, non-toxic</td>
			<td>VWR International Ltd</td>
			<td>31911.A1</td>
			<td>Oil for nerve bath</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nerve Bath</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Plexiglas machined nerve bath, see protocol for details.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oscilloscope</td>
			<td>LeCroy</td>
			<td>N/A</td>
			<td>434 Wavesurfer. Product may be obtained from 3rd party suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen Hose, 1 meter</td>
			<td>BOC</td>
			<td>N/A</td>
			<td>1/4&#34; NPT terminations</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen Regulator</td>
			<td>BOC</td>
			<td>C106X/2B:3.5BAR-BS3-1/4&#34;NPTF 230Bar</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peristaltic Pump P-1</td>
			<td>Pharmacia Biotech</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Product may be obtained from third party supplier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri Dish, Glass</td>
			<td>VWR International Ltd</td>
			<td>391-0580&#160;</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Chloride salt</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P5405-250g</td>
			<td>250 g in plastic bottle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Dihydrogen Sulphate salt</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1.04873.0250</td>
			<td>250 g in plastic bottle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat</td>
			<td>Charles River Laboratories</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Sprague Dawley, 250-330 grams, female</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reference electrode, ET072</td>
			<td>eDaQ (Australia)</td>
			<td>ET072-1</td>
			<td>Silver silver-chloride reference electrode</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rod</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Standard wet laboratory rods with fittings for stands</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>Sartorius</td>
			<td>N/A</td>
			<td>M-Power scale, for weighing powders. Product may be obtained from third-party suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors straight 12 cm edge</td>
			<td>InterFocus Ltd</td>
			<td>91400-12</td>
			<td>blunt-blunt termination, student range</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Signal Acquisition Device</td>
			<td>Cambridge Electronic Design</td>
			<td>Micro3-1401</td>
			<td>Micro3-1401 Multichannel ADC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone grease, non-toxic</td>
			<td>Farnell</td>
			<td>3821559</td>
			<td>for sealing of bath partition</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone tubing, 2 mm inner diameter</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone tubing, 5 mm inner diameter</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silver wire</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>41390</td>
			<td>0.5 mm, annealed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate salt</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S5761-500g</td>
			<td>500 g in plastic bottle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride salt</td>
			<td>VWR International Ltd</td>
			<td>27810.295</td>
			<td>1 kg in plastic bottle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spring scissors angled 2 mm edge</td>
			<td>InterFocus Ltd</td>
			<td>15010-09</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stand</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Standard wet laboratory stands with sockets for rods</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stimulator</td>
			<td>Digitimer</td>
			<td>DS3</td>
			<td>DS3 or Custom Stimulator (see references)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stirring flea</td>
			<td>VWR International Ltd</td>
			<td>442-0270</td>
			<td>For use with the heating stirrer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe tip, blunt, 1 mm diameter</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe tip, blunt, 2 mm diameter</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, plastic, 10 mL volume</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>syringe should have luer lock fitting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape, water-resistant</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For securing tubing and wiring to workbench</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermometer</td>
			<td>VWR International Ltd</td>
			<td>620-0806</td>
			<td>glass thermometer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>USB Power Bank</td>
			<td>RS UK</td>
			<td>135-1000</td>
			<td>Custom Stimulator power supply, fully charge before experiment. Not needed if using DS3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Valve, Leuer Lock, 3-Way</td>
			<td>VWR International Ltd</td>
			<td>229-7440</td>
			<td>For attaching syringe to bath feed tube and priming siphon</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of rat sciatic nerve for ex vivo neurophysiology

تمكن المستحضرات خارج الجسم الحي من دراسة العديد من العمليات العصبية الفسيولوجية بمعزل عن بقية الجسم مع الحفاظ على بنية الأنسجة المحلية. يصف هذا العمل تحضير الأعصاب الوركية للفئران للفسيولوجيا العصبية خارج الجسم الحي ، بما في ذلك إعداد المخزن المؤقت ، والإجراءات الحيوانية ، وإعداد المعدات ، والتسجيل الفسيولوجي العصبي. يقدم هذا العمل نظرة عامة على الأنواع المختلفة من التجارب الممكنة باستخدام هذه الطريقة. تهدف الطريقة المحددة إلى توفير 6 ساعات من التحفيز والتسجيل على الأنسجة العصبية الطرفية المستخرجة في ظروف خاضعة لرقابة مشددة لتحقيق الاتساق الأمثل في النتائج. النتائج التي تم الحصول عليها باستخدام هذه الطريقة هي إمكانات العمل المركب من الألياف A (CAP) مع سعات من الذروة إلى الذروة في نطاق المللي فولت طوال مدة التجربة. إن سعات وأشكال CAP متسقة وموثوقة ، مما يجعلها مفيدة لاختبار ومقارنة الأقطاب الكهربائية الجديدة بالنماذج الحالية ، أو آثار التدخلات على الأنسجة ، مثل استخدام المواد الكيميائية أو التعديلات الجراحية أو تقنيات التحفيز العصبي. تم اختبار كل من أقطاب الكفة التقليدية المتاحة تجاريا مع ملامسات البلاتين والإيريديوم وأقطاب المطاط الصناعي الموصلة حسب الطلب وأعطت نتائج مماثلة من حيث الاستجابة لقوة التحفيز العصبي ومدة المدة.

النتائج التمثيلية التي يمكن الحصول عليها باستخدام هذا البروتوكول هي إمكانات العمل المركب المتسقة من الألياف العصبية من النوع A داخل العصب الوركي. عادة ما يكون لإمكانات الفعل هذه سعة من الذروة إلى الذروة تبلغ حوالي 1 مللي فولت في القطب الكهربائي وبالتالي 100 مللي فولت بمجرد تضخيمها (<strong class="...

Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Rat Sciatic Nerve for Ex Vivo Neurophysiology at JoVE.com

Preparation of Rat Sciatic Nerve for Ex Vivo Neurophysiology

يصف هذا البروتوكول تحضير الأنسجة العصبية الوركية الكاملة للفئران للتحفيز الكهروفسيولوجي خارج الجسم الحي وتسجيلها في حمام ملحي منظم بيئيا ومكون من مقصورتين.

تحضير العصب الوركي للفئران للفسيولوجيا العصبية خارج الجسم الحي

Ex vivo preparations enable the study of many neurophysiological processes in isolation from the rest of the body while preserving local tissue structure. ...

يتيح هذا البروتوكول ملاحظة العديد من الظواهر العصبية الفسيولوجية غير المفهومة جيدا ، مثل ترحيل كتلة الأعصاب بعد حقن التيار عالي التردد / عالي السعة ، مع منع التداخل من العمليات الأخرى في الجسم الحي. هذه التقنية تعطي نتائج قوية وقابلة للتكرار للغاية وهي أكثر عملية من الفيزيولوجيا الكهربية في الجسم الحي ، لأن المتغيرات المعقدة مثل عمق التخدير لا يجب التحكم فيها وبالتالي لا يمكن أن تؤثر على القياسات. بعد إجراء القتل الرحيم تحت التخدير ، ضع أنثى الفئران على طاولة التشريح ، وأمسك الكاحل بإحكام بين الإبهام والسبابة والإصبع الأوسط ، واقطع الوتر العقبي باستخدام مقص حاد مستقيم طوله 12 سم.باستخدام ملقط ومقص ناعم ، قم بعمل شقوق دقيقة عبر طبقات العضلات بالقرب من منتصف الجزء الخلفي من الساق حتى يتعرض العصب الوركي. بمجرد أن يصبح العصب مرئيا ، قم بترطيب التجويف باستخدام المخزن المؤقت Krebs-Henseleit المعدل على الجليد ، أو MKHB ، لمنع العصب من الجفاف. باستخدام مرقئ الدم ، اسحب لوحات الجلد على كل جانب وحافظ على الشق مفتوحا لتشريح أدق.بدءا من موقع شق الوتر العقبي ، باستخدام مقص دقيق ، قاطع العضلات على الجانب الإنسي من الساق لتحرير العصب. استمر في الحفاظ على مستويات الرطوبة في المنطقة باستخدام MKHB البارد المثلج. عندما يتعرض العصب أثناء التحرك لأعلى الساق ، قم بتشريح الأنسجة العضلية الفوقية.حرر العصب الأقرب إلى العمود الفقري من الأنسجة الضامة حتى الوصول إلى الشق الشوكي ، وعند هذه النقطة يكون هناك خلل في العصب. لا تقم بتنظيف العصب بعد ، لأن السرعة ضرورية في هذه المرحلة. لتسهيل التشريح ، باستخدام الملقط ، اسحب بلطف نهاية العصب بالقرب من الكاحل.ثم ، باستخدام مقص دقيق ، قم بتشديد العصب بالقرب من العمود الفقري. ضع العصب التشريحي في أنبوب طرد مركزي سعة 15 ملليلتر مملوء ب MKHB وضع الأنبوب مرة أخرى على الجليد حتى بدء إجراء التنظيف. املأ طبق بتري المطلي في منتصف الطريق ب MKHB المؤكسج المبرد ، ثم ضع عصبا وركيا تشريحيا واحدا في الطبق وقم بتثبيت طرفي العصب على الطبق بحيث يكون العصب مستقيما دون مكامن الخلل أو الالتواء أو الالتواء.باستخدام 6-0 خيوط حريرية أو خيط رفيع ، اربط عقدة مزدوجة حول كل طرف من أطراف العصب لمنع تسرب السيتوسول إلى المخزن المؤقت. ضع العقدة بجوار دبابيس الحشرات على الجانب بالقرب من مركز العصب لمنع التسرب من الأنسجة العصبية إلى المخزن المؤقت. تحت المجهر ، باستخدام مقص زنبركي بزاوية مليمترين وملقط ناعم ، قم بإزالة الدهون والأوعية الدموية والأنسجة العضلية من العصب.تقليم أي فروع عصبية لن تستخدم في التحفيز والتسجيل. بعد كل خمس دقائق من التنظيف ، استبدل المخزن المؤقت ب MKHB طازج ومبرد ومؤكسج. بعد التنظيف ، ضع العصب مرة أخرى في أنبوب النقل المملوء بالمخزن المؤقت وأرح الأنبوب على الجليد.قم بإعداد حمام أعصاب نظيف ثنائي الغرفة. باستخدام رؤوس ومقابض المختبر القياسية ، ضع حمام الأعصاب تحت مستوى الزجاجة سعة لترين الموضوعة على مقلب التسخين. قم بتوصيل تصريف الحمام بمدخل المضخة التمعجية.قم بتوصيل مخرج المضخة التمعجية بأنبوب يؤدي إلى الزجاجة العازلة. قم بتوصيل مدخل الحمام بأنبوب باستخدام صمام تدفق قابل للتعديل ووضع الأنبوب داخل الزجاجة. استخدم صماما ثلاثي الاتجاهات مع حقنة متصلة بالمخرج الأوسط للمساعدة في تحضير الأنبوب كسفون للتدفق العازل بمساعدة الجاذبية.قم بتعبئة السيفون عن طريق رسم المحقنة حتى يتدفق المخزن المؤقت إليها. قم بتكوين الصمام بحيث يكون معدل تدفق المخزن المؤقت إلى الحمام من خمسة إلى ستة ملليمترات في الدقيقة. يمكن زيادة معدل التدفق في البداية لملء الحمام.بمجرد وصول مستوى المخزن المؤقت للحمام إلى البالوعة ، ضع الأعصاب في الحمام. باستخدام دبوس الحشرات ، قم بتأمين نهاية العصب في زاوية غرفة الحمام المملوءة بالمخزن المؤقت. باستخدام ملقط ناعم بزاوية 45 درجة وقرص العصب فقط في النهايات ، قم بربط العصب بعناية ليتم تحفيزه من خلال الفتحة الموجودة في القسم بين غرفتي الحمام.باستخدام دبوس الحشرات ، قم بتأمين الطرف الآخر من العصب في غرفة الزيت في الحمام ، مما يضمن أن العصب مستقيم دون أن يتم تمديده وخاليا من مكامن الخلل والالتواءات. باستخدام شحوم السيليكون ، قم بعمل ختم لمنع تسرب المخزن المؤقت من الغرفة العازلة إلى غرفة الزيت املأ غرفة الزيت بالسيليكون أو الزيت المعدني. ضع خطافات قطب تسجيل كلوريد الفضة / الفضة في غرفة حمام الزيت وقم بتأمينها باستخدام رؤوس الرؤساء والقبضات.ثم ، قم بلف جزء العصب في حمام الزيت فوق السنانير دون سحب العصب المشدود. اضبط أو أصلح ختم شحوم السيليكون إذا لوحظ أي تسرب بعد تحريك العصب. قم بتوصيل قطب كلوريد الفضة / الفضة المرجعي بأرض مكبر الصوت ووضع القطب الكهربائي في غرفة الحمام المملوءة بالمخزن المؤقت عن طريق تثبيته باستخدام مقبض مختبري.بعد إعداد قطب الكفة العصبية النظيف للتحفيز ، ضع القطب الكهربائي في غرفة الحمام المملوءة بالمخزن المؤقت. باستخدام ملقط أو ملاقط دقيقة ذات أطراف حادة أو زاوية، افتح القطب الكهربائي في الحمام لتبلل الجزء الداخلي من الكفة. إذا بقيت الفقاعات، استخدم حقنة دقيقة لسحب المخزن المؤقت من الحمام وإجبار الفقاعات على الخروج من الكفة.باستخدام الملقط ، افتح الكفة بلطف وحركها تحت العصب. أغلق الكفة حول العصب ، وتجنب أي خلل أو التواء في العصب. قم بتوصيل قطب التحفيز وقطب العودة الحالي بالمحفز.إذا كنت تستخدم ورقة بلاتينية مربعة كقطب العودة الحالي ، فضع الورقة بعيدا عن العصب في الحمام. قم بتأمين كل من الأقطاب الكهربائية بالشريط. قم بتوصيل خرج إشارة TTL المحفز بالقناة الرابعة من منظار الذبذبات.على شاشة منظار الذبذبات، اضغط على علامة التبويب قناة المشغل وحدد القناة الرابعة كقناة التشغيل. اضبط مستوى الزناد على فولت واحد باستخدام مقبض المستوى. على الذبذبات، اضبط دقة الوقت على مللي ثانية واحدة لكل قسمة ودقة الجهد على 10 مللي فولت لكل قسمة.قم بتوسيط مرجع الزناد في الوقت المناسب واضبط مستوى المشغل على فولت واحد. بعد توصيل المحفز بالكمبيوتر ، قم بتشغيل المحفز عن طريق توصيل مصدر طاقة البطارية بمدخل الطاقة. ثم قم بتشغيل برنامج MATLAB على الكمبيوتر.تنفيذ البرنامج النصي MATLAB المخصص. ثم افتح البرنامج النصي MATLAB المشار إليه. قم بتحرير البرنامج النصي واضبط سعة نبضة محفز المعلمات على ناقص 300 ميكروأمبير ، وعرض نبضة المحفز إلى 300 ميكروثانية ، وعدد نبضات المحفز إلى 10 ، ووقت المحفز بين النبضات إلى ثانية واحدة.ابدأ تشغيل بروتوكول التحفيز بالنقر فوق تشغيل في البرنامج. كان لجهد العمل المركب ، أو CAP ، سعة من الذروة إلى الذروة تبلغ مللي فولت واحد عند القطب الكهربائي و 100 مللي فولت عند تضخيمها. يتم عرض استثارة الأعصاب النموذجية للأصفاد العصبية البلاتينية القياسية والأصفاد العصبية الموصلة المصنوعة خصيصا هنا.يتم عرض CAP الذي تم الحصول عليه خارج الجسم الحي على مدار يوم من التجارب باستخدام كل من الأعصاب الوركية هنا. لوحظ الحد الأدنى من انخفاض سعة CAP مع العصب الوركي الأيمن. في المقابل، كانت سعة CAP للعصب الوركي الأيسر عند حوالي ثلاثة مللي فولت مشابهة لسعة العصب الوركي الأيمن في بداية التجربة بعد أكثر من ست ساعات من استخراج العصب.التأكيد على الدقة والتكرار في تقنية التشريح والتنظيف والتنفيذ. انتبه إلى ما يحدث في الحمام. إذا فقدت الإشارة العصبية ، فقد يكون الأمر ببساطة أن الأقطاب الكهربائية ليست على اتصال جيد أو أن هناك محلول ملحي في قسم زيت الحمام ، وليس أن العصب قد مات.قد يميل المستخدمون لأول مرة إلى التسرع ، خاصة خلال مرحلة التشريح. هذا من المرجح أن يؤدي إلى أخطاء وتلف العصب. الدقة والاتساق هما المفتاح هنا وسيؤديان إلى نتائج عالية الجودة.وينبغي أيضا إيلاء اهتمام خاص للاتساق في إعداد المخزن المؤقت.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Preparation of Rat Sciatic Nerve for Ex Vivo Neurophysiology

Axoplasm Isolation from Rat Sciatic Nerve

جبلة المحوار من عزل العصب الوركي الجرذ

Isolation of pure axonal cytoplasm (axoplasm) from peripheral nerve is crucial for biochemical studies of many biological processes. In this article, we ...

Reproducible Mouse Sciatic Nerve Crush and Subsequent Assessment of Regeneration by Whole Mount Muscle Analysis

استنساخه سحق الفأر العصب الوركي وتقييم لاحق للتجديد من قبل الجامعة جبل تحليل العضلات

Regeneration in the peripheral nervous system (PNS) is widely studied both for its relevance to human disease and to understand the robust regenerative ...

In Vivo Electrophysiological Measurements on Mouse Sciatic Nerves

In Vivo Electrophysiological Measurements on Mouse Sciatic Nerves

في القياسات الكهربية فيفو على الأعصاب ماوس الوركي

Electrophysiological studies allow a rational classification of various neuromuscular diseases and are of help, together with neuropathological ...

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

في نقل فيفو جين لخلايا شوان في العصب القوارض وركي من Electroporation لل

The formation of the myelin sheath by Schwann cells (SCs) is essential for rapid conduction of nerve impulses along axons in the peripheral nervous ...

In Vivo Electrophysiological Measurement of the Rat Ulnar Nerve with Axonal Excitability Testing

In Vivo Electrophysiological Measurement of the Rat Ulnar Nerve with Axonal Excitability Testing

في فيفو القياس الكهربية للعصب الزندي الفئران مع اختبار استثارة محواري

Electrophysiology enables the objective assessment of peripheral nerve function in vivo. Traditional nerve conduction measures such as amplitude and ...

Use of In Vivo Single-fiber Recording and Intact Dorsal Root Ganglion with Attached Sciatic Nerve to Examine the Mechanism of Conduction Failure

استخدام في فيفو تسجيل واحد من الألياف والعقدة الجذر الرحالة سليمة مع العصب الوركي المرفقة لدراسة آلية فشل التوصيل

Single-fiber recording has been a classical and effective electrophysiological technique over the last few decades because of its specific application for ...

Preparation of Newborn Rat Brain Tissue for Ultrastructural Morphometric Analysis of Synaptic Vesicle Distribution at Nerve Terminals

اعداد انسجه الدماغ الفئران حديثي الولادة للتحليل البنيوي الهيكلي للتوزيع الحويصلة المتشابكة في المحطات العصبية

Our laboratory and many others have exploited the high resolving power of transmission electron microscopy to study the morphology and spatial ...

Ex Vivo Oculomotor Slice Culture from Embryonic GFP-Expressing Mice for Time-Lapse Imaging of Oculomotor Nerve Outgrowth

السابق فيفو أوكولوموتور شريحة الثقافة من الفئران الجنينية GFP التعبير عن التصوير الفاصل الزمني من نمو الأعصاب أوكولوموتور

Accurate eye movements are crucial for vision, but the development of the ocular motor system, especially the molecular pathways controlling axon ...

3D Kinematic Analysis for the Functional Evaluation in the Rat Model of Sciatic Nerve Crush Injury

3D تحليل الحركية للتقييم الوظيفي في نموذج الفئران من عرق النسا الأعصاب سحق الإصابة

Compared to the Sciatic Functional Index (SFI), kinematic analysis is a more reliable and sensitive method for performing functional evaluations of ...

Ex Vivo Pressurized Hippocampal Capillary-Parenchymal Arteriole Preparation for Functional Study

السابق فيفو هيبوكامبال الضغط الشعرية-Pareniole الشرايين التحضير للدراسة الوظيفية

From subtle behavioral alterations to late-stage dementia, vascular cognitive impairment typically develops following cerebral ischemia. Stroke and ...