Name: inducing polyp bail-out in coral colonies to obtain individualized micropropagates for laboratory experimental use
Uploaded: 2022-04-28T14:00:00
Duration: 7 min 23 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Inducing Polyp Bail-out in Coral Colonies to Obtain Individualized Micropropagates for Laboratory Experimental Use at JoVE.com

हम प्रवाल पॉलीप्स के प्रयोगों और निगरानी में उनके समर्थन के लिए एडम बार्नो और फ्रांसिस्का गार्सिया को धन्यवाद देते हैं। हम मछलीघर रखरखाव और बुनियादी ढांचे के बारे में उनकी सहायता के लिए केएयूएसटी तटीय और समुद्री संसाधन कोर लैब को भी धन्यवाद देते हैं। अध्ययन को केएयूएसटी अनुदान संख्या बीएएस / 1/ 1095-01-01 द्वारा वित्त पोषित किया गया था।

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है।

बेल-आउट प्रक्रियाओं में प्रस्तुत किए जाने के बाद पॉलीप्स जीवित रहने की दर और प्रक्रिया को पूरा करने के लिए आवश्यक समय पहले से रिपोर्ट किए गए शोध 25,33,41 के बीच भिन्न होता है, जिसे संभवतः प्रत्येक अध्ययन में लागू विभिन्न प्रयोगात्मक दृष्टिकोणों द्वारा समझाया गया है। उदाहरण के लिए, विभिन्न प्रवाल प्रजातियां, या यहां तक कि एक ही प्रजाति के कोरल, लेकिन विभिन्न पर्यावरणीय परिस्थितियों (जैसे, लाल सागर से कोरल) के आदी, लवणता के स्तर के लिए अलग-अलग थ्रेसहोल्ड प्रस्तुत करते हैं। चयनित बेल-आउट की विधि और प्रयोगशाला / मछलीघर की स्थिति भी परिणामों में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है। कुछ मामलों में, प्रयोगशाला स्थितियों के तहत कोरल माइक्रोप्रोपेगेट्स के रखरखाव ने एज़ोक्सैंथेलेट 3 3,41 और ज़ोक्सैंथेलेट25 कोरल में जीवित रहने के महीनों तक पहुंचकर कोरल सेल संस्कृतियों के अस्तित्व के समय को पार कर लिया है। पॉलीप बेल-आउट प्रक्रिया को पूरा करने का समय भी विभिन्न अध्ययनों में भिन्न होता है, कुछघंटों 2 5,2 7,30 से लेकर सप्ताह3 5 तक इनक्यूबेशन बेल-आउट पैदा करने के लिए जिम्मेदार तनाव के संपर्क में आते हैं। पॉलीप बेल-आउट का अध्ययन करते समय ध्यान में रखा जाने वाला एक और चर तीव्र तनाव के संपर्क में आने के बाद पॉलीप्स की वसूली है जिसने उनकी रिहाई को ट्रिगर किया। यह अभी भी बहस का विषय है कि क्या बेल-आउट के बाद पॉलीप्स कोरल जीव विज्ञान का अध्ययन करने के लिए मॉडल के रूप में उपयोग किए जाने के लिए पर्याप्त स्थिति में हैं। इन माइक्रोप्रोपेगेट्स का उपयोग करते समय कोनोसार्क के क्षरण के बाद उनके ऊतकों की वसूली चिंता का विषय है। हालांकि, वर्तमान सहित कई अध्ययनों में पॉलीप्स, अपने ऊतकों और बाहरी आकृति विज्ञान के अंदर ज़ोक्सांथेला कोशिकाओं को बरकरार मौखिक-अबोरल ध्रुवीकरण और 25,27,32,36 के बाद टेंटकल्स के साथ पेश करने में सक्षम रहे हैं। पिछले अध्ययनों में यह भी पाया गया है कि, तीव्र तनाव से राहत मिलने के बाद, अत्यधिक खारा या गर्म समुद्री जल के संपर्क में आने वाले प्रवाल पॉलीप्स एपोप्टोसिस, प्रोटियोलिसिस और कोशिका विभाजन जैसी प्रक्रियाओं से संबंधित जीन की अभिव्यक्ति को पुनर्प्राप्त करने में सक्षम हैं, जो बेल-आउट32,36 से पहले पाए गए स्तरों के समान हैं और यहां तक कि ऊतक उपचार 36 से संबंधित जीन की अभिव्यक्ति को बढ़ाने के लिए भी।
विधियों के बीच अस्तित्व में अंतर के संबंध में, यह उजागर करना महत्वपूर्ण है कि यह समय विभिन्न प्रयोगों के बीच भिन्न हो सकता है, भले ही एक ही तकनीक का उपयोग किया जाता है, और यह उपयोग किए गए टुकड़ों के स्वास्थ्य और बेल-आउट प्रक्रिया के बाद पॉलीप्स के उचित रखरखाव से संबंधित हो सकता है। कैल्शियम मुक्त समुद्री जल इनक्यूबेशन के माध्यम से बेल-आउट के मामले में, पॉलीप अस्तित्व 1 दिन तक सीमित था। इस प्रकार, यह निष्कर्ष निकाला जा सकता है कि विधि अध्ययन की गई प्रजातियों के दीर्घकालिक अस्तित्व के लिए अच्छी तरह से अनुकूल नहीं है, या लाल सागर से पी वेरुकोसा कोरल के लिए तकनीक का बेहतर अनुकूलन किया जाना चाहिए। रिपोर्ट किए गए परिणामों से पता चला कि लवणता में क्रमिक वृद्धि के आधार पर विधियों के साथ लंबे समय तक जीवित रहने का समय प्राप्त किया गया था, जब पॉलीप्स को उच्च लवणता वाले पानी के टपकने के अधीन किया गया था। यह विधि वाष्पीकरण विधि की तुलना में लवणता में अधिक नियंत्रित वृद्धि प्रदान कर सकती है, साथ ही मूंगा के चयापचय अपशिष्ट सहित समुद्री जल में पाए जाने वाले अन्य पदार्थों की एकाग्रता में वृद्धि के लिए जिम्मेदार नहीं है, जो जीव के लिए संभावित रूप से विषाक्त है। इन सभी कारणों से, इस पद्धति को स्वस्थ पॉलीप्स27 को बनाए रखने के लिए एक सुरक्षित विकल्प के रूप में सुझाया गया है। यद्यपि इस पद्धति को पॉलीप स्वास्थ्य के लिए सुरक्षित होने की परिकल्पना की गई है और लंबे समय तक रहने वाले पॉलीप्स का उत्पादन करने में सक्षम है, एक तथ्य जो इस वर्तमान प्रकाशन में पुष्टि की गई थी, इसकी पुष्टि करने के लिए अतिरिक्त सर्वेक्षणों की आवश्यकता है। दोनों उच्च लवणता-प्रेरित बेल-आउट प्रयोगों ने 24 घंटे में लवणता 59 पीएसयू तक पहुंचने के बाद पॉलीप्स की एक पूरी टुकड़ी का प्रदर्शन किया। यदि लवणता उस स्तर से आगे बढ़ जाती है जिस पर बेल-आउट पूरा हो जाता है, तो पॉलीप्स को और तनाव होगा, जिससे तीव्र तनाव उपचार से बचने और ठीक होने की संभावना कम हो जाएगी। इसलिए, इस तरह के लवणता के स्तर में पॉलीप्स को लंबे समय तक बनाए रखने की सिफारिश नहीं की जाती है। कैल्शियम मुक्त समुद्री जल के संपर्क में आकर बेल-आउट प्रेरण विधि का प्रदर्शन करते समय, कैल्शियम मुक्त कृत्रिम समुद्री जल में 3 घंटे के इनक्यूबेशन से एक पूर्ण टुकड़ी प्राप्त की गई थी, जिसका अर्थ है कि इस माध्यम के आगे के संपर्क की भी सिफारिश नहीं की जाती है।
इन विट्रो सर्वेक्षणों में कोरल पॉलीप्स के अध्ययन के लिए अधिक पर्याप्त तरीकों को संबोधित करने के लिए, इस अध्ययन ने केवल तीन प्रक्रियाओं पर ध्यान केंद्रित किया, जिन्हें बेल-आउट प्रक्रिया को पूरा होने में लगभग 24 घंटे लगे और उन अध्ययनों में उपयोग किया गया जिनमें स्क्लेरैक्टिनियन कोरल से कोरल पॉलीप्स का दीर्घकालिक रखरखाव शामिल था। इस समय की तुलना में काफी अधिक समय लेने के लिए रिपोर्ट किए गए अन्य तरीकों को व्यस्त नहीं किया गया था। इस अध्ययन में एक सब्सट्रेट के लिए पॉलीप्स के निपटान का प्रयास नहीं किया गया था, जो पॉलीप्स के उत्पादन पर केंद्रित था जिसे विभिन्न वातावरणों में स्थानांतरित किया जा सकता था या डिस्पोजेबल पिपेट का उपयोग करके विश्लेषण के लिए आसानी से एकत्र किया जा सकता था। परिणाम बताते हैं कि कोरल प्रजातियों से पॉलीप्स पी वेरुकोसा को जीवित रखा गया था, संबंधित ज़ोक्सांथेला कोशिकाओं, स्वस्थ दृश्य स्थिति और एक संरक्षित सकल बाहरी शारीरिक संरचना के साथ, 8 सप्ताह तक, यहां तक कि सब्सट्रेट से लगाव के बिना भी। इन परिणामों से संकेत मिलता है कि इस अध्ययन में प्रदर्शित कुछ तकनीकों का उपयोग करके एकल मूंगा टुकड़ों से अधिक जैविक प्रतिकृतियां उत्पन्न की जा सकती हैं। इस तरह के जैविक प्रतिकृतियों को नियंत्रित वातावरण (जैसे पेट्री डिश और सेल फ्लास्क) में रखा जा सकता है और महीने भर के प्रयोगों के लिए प्रयोगशाला स्थितियों में बनाए रखा जा सकता है और कई उद्देश्यों के लिए उपयोग किया जा सकता है।
पॉलीप बेल-आउट42,43 के पहले आकस्मिक विवरणों के बाद से, पॉलीप रिलीज को प्रेरित करने और ऐसे पॉलीप्स को जीवित रखने के लिए अधिक मानकीकृत तरीकों को खोजने के लिए नए प्रोटोकॉल स्थापित किए गए हैं, जिनका उपयोग भविष्य के अनुसंधान अनुप्रयोगों के लिए किया जा सकता है। इनमें कोरल होलोबियंट फिजियोलॉजी44 और होस्ट-माइक्रोबायोम इंटरैक्शन45 से जुड़े विभिन्न पहलुओं की जांच करना, कोरल ब्लीचिंग5,25 में शामिल आणविक तंत्र, और कोरल होलोबियंट 12,13,46,47 के स्वास्थ्य, लचीलापन और सुरक्षा शामिल हैं। . इसके अलावा, जारी किए गए कोरल पॉलीप्स का उपयोग अनुसंधान के दायरे के बाहर अनुप्रयोगों के लिए किया जा सकता है और प्रोपेग्यूल बनाने के लिए उपयोगी होने का सुझाव दिया गया है जो एक सब्सट्रेट से जुड़ सकते हैं और बढ़ सकते हैं, संभावित रूप से कई कोरल व्यक्तियों का निर्माण कर सकते हैं जिनका उपयोग बहाली उद्देश्यों के लिए किया जा सकता है एक बार बेल-आउट के लिए मानकीकृत प्रोटोकॉल व्यापक हो जाते हैं28 . कुल मिलाकर, हालांकि पद्धति को मानकीकृत करने के लिए बेल-आउट पॉलीप्स का उपयोग करके अधिक गहराई से प्रयोग किए जाने चाहिए, यह दिखाया गया है कि पॉलीप बेल-आउट एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य दृष्टिकोण है जिसे कई उद्देश्यों के लिए मूंगा अनुसंधान में एक उपकरण के रूप में लागू किया जा सकता है।

स्क्लेरैक्टिनियन या रीफ-बिल्डिंग कोरल कार्बोनेट कंकाल बनाने, चट्टानों को बनाने और संरचनात्मक रूप से जटिल पारिस्थितिक तंत्र बनाने में सक्षम हैं जो गहरे से उथले पानी के वातावरण तक पाए जा सकते हैं1. उष्णकटिबंधीय प्रवाल भित्तियां उच्च जैव विविधता की मेजबानी करती हैं और आवश्यक पारिस्थितिकी तंत्र सेवाएं प्रदान करती हैं, जैसे कि तटीय संरक्षण और मत्स्य पालन रखरखाव2. अधिकांश उथले-पानी की चट्टान-निर्माण कोरल परिवार के शैवाल के साथ पारस्परिक संबंध पर भरोसा करते हैं सिम्बायोडिनियासी, जो ऊर्जा प्रदान करते हैं जो कोरल को अपने कंकाल बनाने के लिए आवश्यक है। मूंगा और शैवाल के बीच सहजीवन पर्यावरणीय तनाव से टूट सकता है, जिससे मूंगा विरंजन 3,4,5,6 हो सकता है। हाल के तापमान विसंगतियों ने दुनिया भर में प्रमुख प्रवाल विरंजन घटनाओं का कारण बना है, जिससे बड़े पैमाने पर प्रवाल मृत्यु दर और स्थायी चट्टान गिरावट 7,8,9,10,11 हो गई है। चूंकि यह घटना पोस्ट हीट स्ट्रेस-जुड़े सेलुलर तंत्र, जैसे एपोप्टोसिस, ऑटोफैगी और एक्सोसाइटोसिस द्वारा सहजीवन के निष्कासन पर आधारित है, कोरल विरंजन को एक सेलुलर प्रक्रिया के रूप में वर्णित किया जा सकता है जिसमें पारिस्थितिकी तंत्र-पैमाने के परिणाम 5,6,12 होते हैं, जिसका अर्थ है कि कोरल कोशिकाओं या ऊतकों की इन विट्रो संस्कृतियों में होना इस घटना का बारीकी से अध्ययन करने के लिए लागू होगा।
प्रवाल भित्तियों के महत्व और प्रमुख खतरों के कारण वे सामना कर रहे हैं, विशेष रूप से पिछले दो दशकों में2, कोरल दुनिया भर में सुरक्षा और बहाली उद्देश्यों के लिए अनुसंधान का केंद्र बन गए हैं13. हालांकि, दृष्टिकोण और प्रयोगात्मक प्रणालियों का विकास जो विश्वसनीय, प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य हैं, और कोरल का अध्ययन करने के लिए न्यूनतम पर्यावरणीय प्रभाव प्रदान करते हैं, इस क्षेत्र में एक बड़ा संघर्ष है।
माइक्रोप्रोपेगेशन को नियंत्रित जहाजों14,15 में अपनी जैविक सामग्री को संवर्धन करके एक जीव के जीनोटाइप के इन विट्रो प्रसार के रूप में परिभाषित किया गया है। हाल के दशकों में पौधे और पशु जीव विज्ञान के लिए कोशिकाओं, ऊतकों और अंगों की संवर्धन महत्वपूर्ण रही है। यह प्रयोगशालाओं में जीवों के बड़े पैमाने पर प्रजनन, विभिन्न उपचारों (जैसे दवाओं और फार्मास्यूटिकल्स) के तेजी से मूल्यांकन और सेल फ़ंक्शन 14,15,16,17 के प्रत्यक्ष अध्ययन की अनुमति देता है। सामान्य तौर पर, इन विट्रो मॉडल बेहतर नियंत्रित भौतिक और रासायनिक स्थितियों के तहत विभिन्न जीवों के अध्ययन को पूरक और गहरा करने के लिए उपयोगी रहे हैं। इन विट्रो संवर्धन तकनीकों के फायदों के कारण, विभिन्न पशु कोशिका और ऊतक संस्कृति प्रौद्योगिकियों को कई अनुसंधान क्षेत्रों में महत्वपूर्ण उपकरणों के रूप में विकसित, अनुकूलित और उपयोग किया गया है, जहां कई सेल लाइनों का अध्ययन और व्यावसायीकरण कई अनुप्रयोगों के लिए किया गया है 16,17,18।
सेल और टिशू कल्चर के ज्ञान में कई प्रगति 188217 में पहली पशु ऊतक संस्कृति के बाद से की गई है, जैसे कि प्राकृतिक और सिंथेटिक मीडिया का उपयोग, स्थापित सेल लाइनों का आविष्कार, और बेहतर तरीके से सेल प्रकारों की भीड़ की खेती करने के लिए 3 डी मीडिया का विकास16,17, 18,19. हालांकि, कोशिका जीव विज्ञान के क्षेत्र ने ज्यादातर मॉडल जीवों के एक चुनिंदा समूह पर ध्यान केंद्रित किया है, जबकि कई कर अभी भी कोशिकाओं, ऊतकों या अंगों की इन विट्रो संस्कृतियों में अच्छी तरह से स्थापित नहीं हैं20. उदाहरण के लिए, कोरल अनुसंधान में, अनुसंधान के लिए बड़े पैमाने पर कोई अमर सेल लाइनों का उपयोग नहीं किया गया है, जो प्राथमिक सेल संस्कृतियों के उपयोग के लिए कोरल सेल अनुसंधान को बाधित करता है। इन संस्कृतियों की व्यवहार्यता कुछ हफ्तों 21 तक सीमित है,जिसमें 2021 22 की शुरुआत तक 13 दिनों से अधिक समय तक सभी प्रवाल ऊतकों से व्यक्तिगत कोशिकाओं के अस्तित्व को रिकॉर्ड करने वाला कोई अध्ययन नहींहै। प्रकाशित होने वाली टिकाऊ मूंगा सेल लाइनों की पहली रिपोर्ट एक्रोपोरा टेनुइस कोशिकाओं के साथ थी जो 6 महीने तक जीवित रहती थीं, और भविष्य के अनुसंधान के लिए इन कोशिकाओं की उपयोगिता का पता लगाया जाना बाकी है।
मूंगा कोशिका संस्कृतियों की संवर्धन में सीमाओं को दूर करने और एक प्रयोगशाला संस्कृति को बनाए रखने के लिए जो कोरल के समग्र ऊतक संगठन को संरक्षित करता है, पृथक पॉलीप्स का उपयोग हाल ही में कोरल जीव विज्ञान अनुसंधान24,25 के लिए एक मॉडल के रूप में प्रस्तावित किया गया है। पॉलीप्स कोरल की शारीरिक इकाइयाँ हैं, और उनमें से प्रत्येक का मुंह उनकी मौखिक डिस्क के केंद्र में स्थित है और अपने एबोरल क्षेत्र26 में कोनोसार्क द्वारा अन्य पॉलीप्स से जुड़ा हुआ है। लाइव पॉलीप्स का पृथक्करण पॉलीप बेल-आउट की प्रक्रिया से स्वाभाविक रूप से होता है, जिसमें तीव्र तनाव पॉलीप्स के बीच कोनोसार्क के पाचन का कारण बनता है, जो तब कॉलोनी के कंकाल25,27,28 से अलग हो सकता है। इस घटना को विभिन्न प्रकार के करों में होने की सूचना मिली है, जिसमें ऑक्टोकोरल29,30,31, काले कोरल32, और स्क्लेरैक्टिनियन कोरल 25,27,28,32,33 शामिल हैं, और कई पर्यावरणीय तनावों से जुड़ा हुआ है, जैसे कि पानी में कैल्शियम की कमी 24,34, अम्लतामें वृद्धि 35, हाइपरोस्मोटिक स्थितियां 25,27,32,36, उच्च तापमान36,37, भुखमरी33, वायु जोखिम25,30 और कीटनाशक संदूषण28,38। पॉलीप बेल-आउट, उदाहरण के लिए, पोसिलोपोरिड कोरल19 में रिपोर्ट किया गया है, जो दुनिया भर में व्यापक रूप से वितरित किए जाते हैं और आमतौर पर कोरल अनुसंधान में मॉडल के रूप में उपयोग किए जाते हैं। इस समूह से संबंधित प्रजातियां, जैसे कि पोसिलोपोरा डेमिकॉर्निस और स्टाइलोफोरा पिस्टिलाटा, ने 5 मिमी टुकड़े25 से लगभग 30-40 माइक्रोप्रोपेगेट उत्पन्न किए हैं। यह संख्या कोरल माइक्रोप्रोपेगेशन के लिए एक विधि के रूप में पॉलीप बेल-आउट का उपयोग करने के लाभ पर जोर देती है, क्योंकि यह मूंगा के एक छोटे से टुकड़े से कई आनुवंशिक रूप से समान व्यक्तियों को उत्पन्न करने की संभावना पैदा करती है। अनुसंधान के लिए पृथक पॉलीप्स के उपयोग में नियंत्रित प्रयोगशाला वातावरण, जैसे फ्लास्क और पेट्री व्यंजनों में सुसंस्कृत होने की संभावना के बारे में सेल संस्कृतियों के समान फायदे हैं। इसके अतिरिक्त, लाइव पॉलीप्स को बनाए रखने के लिए माइक्रोफ्लुइडिक प्लेटफार्मों ने प्रदर्शित किया है कि इन माइक्रोप्रोपेगेट्स को नियंत्रित जल प्रवाह, सतह और तापमान24,25 के साथ अपेक्षाकृत सस्ते और आसानी से पुन: उत्पन्न वातावरण में रखा जा सकता है। इन माइक्रोफ्लुइडिक्स प्लेटफार्मों का उपयोग माइक्रोस्कोप के तहत सीधे24,25 के तहत जीवित प्रवाल संरचनाओं की कल्पना करने के लिए भी किया जा सकता है।
वर्तमान लेख में, हम उन तकनीकों को संक्षेप में प्रस्तुत और प्रदर्शित करते हैं जिन्हें उनकी कॉलोनियों से व्यक्तिगत प्रवाल पॉलीप्स को अलग करने के लिए विकसित किया गया है, यह दिखाते हुए कि उन्हें दीर्घकालिक संस्कृति के लिए प्रयोगशाला स्थितियों में कैसे बनाए रखा जाए। चर्चा की गई विधियों में वाष्पीकरण और उच्च लवणता वाले समुद्री जल को पंप करके हाइपरोस्मोटिक स्थितियों के माध्यम से पॉलीप बेल-आउट और कैल्शियम मुक्त समुद्री जल में इनक्यूबेशन शामिल हैं।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5560 Conductivity/Temperature Probe</td>
			<td>YSI</td>
			<td>5560</td>
			<td>Conductivity probe used with the ProQuatro Multiparameter meter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ace 5 in. Alloy Steel Diagonal Pliers</td>
			<td>Ace Hardware</td>
			<td>2004083</td>
			<td>Used to cut coral fragments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ampicillin sodium salt</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A9518</td>
			<td>Used in DMEM medium.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM (1x) Dulbecco&#39;s Modified Eagle Medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>41965-039</td>
			<td>Used for incubating coral fragments in the calcium-free polyp bail-out method</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisherbrand Petri Dish, Stackable Lid 60 mm x 15 mm Sterile, Polystyrene</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>FB0875713A</td>
			<td>Petri dish used for bail-out by evaporstion and for keeping polyps inside an aquarium.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heizer Titanrohr Heizstab SW MW 600 Watt</td>
			<td>Schego</td>
			<td>548</td>
			<td>Heaters used in aquarium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica Application Suite Version 4.2</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>NA</td>
			<td>Software used for image capture in demonstrative results</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica IC80 HD</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>12730216</td>
			<td>Camera used to take demonstrative results pictures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica MDG33</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>10 450 123</td>
			<td>Stereoscope stand used to take demonstrative results pictures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica Z6 APO</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>NA</td>
			<td>Macroscope used to take demonstrative results pictures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Chloride</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>7487-88-9</td>
			<td>Used for preparing calcium-free artificial seawater.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Sulfate Anhydrous</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>7791-18-6</td>
			<td>Used for preparing calcium-free artificial seawater.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masterflex I/P Easy-Load Pump Head for Precision Tubing, White PPS Housing, SS Rotor</td>
			<td>Masterflex</td>
			<td>HV-77602-10</td>
			<td>Peristaltic pump head.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masterflex L/S Precision Modular Drives with Benchtop Controller</td>
			<td>Masterflex</td>
			<td>EW-07557-00</td>
			<td>Peristaltic pump drive used for pumping high salinity seawater. Can be substituted for any peristaltic pump capable of mainaining water flow as described in protocol.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masterflex L/S Precision Pump Tubing, Platinum-Cured Silicone, L/S 16; 25 ft</td>
			<td>Masterflex</td>
			<td>HV-96410-16</td>
			<td>Tubing for peristaltic pump.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millex 33 mm PVDF 0.22 &#181;m Sterile RUO</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>SLGVR33RS</td>
			<td>Used to filter artificial sea water.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nunc EasYFlask 75 cm2 Nunclon Delta Surface</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>156499</td>
			<td>Flask usually used for cell culture used for polyp culture.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orbital shaker, Advanced 5000, VWR</td>
			<td>VWR</td>
			<td>444-2916</td>
			<td>Shaker used inside incubator.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Percival Incubator - I-22VL</td>
			<td>Percival</td>
			<td>NA</td>
			<td>Incubator used for maintaing corals kept in cell flasks.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plankton net 200 &#181;m mesh size</td>
			<td>KC Denmark</td>
			<td>NA</td>
			<td>Used for covering petri dishes containing coral polyps.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Chloride</td>
			<td>VWR Chemicals</td>
			<td>7447-40-7</td>
			<td>Used for preparing calcium-free artificial seawater.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ProQuatro Multiparameter Meter</td>
			<td>YSI</td>
			<td>606950</td>
			<td>Used for measuring salinity thoughout the protocol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RADION XR15 G5 PRO</td>
			<td>Ecotech</td>
			<td>NA</td>
			<td>Lights used in aquarium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red Sea Salt 
			Premium grade, moderate Alkalinity</td>
			<td>Red Sea</td>
			<td>NA</td>
			<td>Used to prepare 40 PSU artifical sea water.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>144-55-8</td>
			<td>Used for preparing calcium-free artificial seawater.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S3014</td>
			<td>Used for preparing calcium-free artificial seawater.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Sulfate Anhydrous</td>
			<td>VWR Chemicals</td>
			<td>7757-82-6</td>
			<td>Used for preparing calcium-free artificial seawater.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRD 112 thermostat</td>
			<td>Schego</td>
			<td>NA</td>
			<td>Thermostat used in aquarium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Turbelle Nanostream 6025</td>
			<td>Tunze</td>
			<td>6025 000</td>
			<td>Pumps used in aquarium</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

inducing polyp bail-out in coral colonies to obtain individualized micropropagates for laboratory experimental use

कोरल औपनिवेशिक जानवर हैं जो मॉड्यूलर इकाइयों द्वारा गठित होते हैं जिन्हें पॉलीप्स कहा जाता है। कोरल पॉलीप्स शारीरिक रूप से जुड़े होते हैं और ऊतक से जुड़े होते हैं। पॉलीप बेल-आउट की घटना तीव्र तनाव से प्रेरित एक प्रक्रिया है, जिसमें कोरल पॉलीप्स ऊतक को कॉलोनी के बाकी हिस्सों से जोड़ते हैं और अंततः अलग-अलग व्यक्तियों के रूप में रहने के लिए कंकाल से अलग हो जाते हैं। कोरल जीवविज्ञानियों ने वर्षों से पॉलीप बेल-आउट की प्रक्रिया को स्वीकार किया है, लेकिन हाल ही में इस प्रक्रिया द्वारा उत्पन्न माइक्रोप्रोपेगेट्स को कोरल जीव विज्ञान अध्ययन के लिए एक मॉडल प्रणाली के रूप में मान्यता दी गई है। पॉलीप बेल-आउट का उपयोग एक एकल मूंगा टुकड़े से उच्च संख्या में क्लोनल इकाइयां बना सकता है। एक और लाभ यह है कि पॉलीप्स के एकल पॉलीप्स या पैच को माइक्रोस्कोप के तहत आसानी से देखा जा सकता है और पेट्री डिश, फ्लास्क और माइक्रोफ्लुइडिक चिप्स जैसे अत्यधिक मानकीकृत कम लागत वाले वातावरण में बनाए रखा जा सकता है। वर्तमान प्रोटोकॉल लंबे समय तक जीवित एकल पॉलीप्स को बनाए रखने के लिए कोरल माइक्रोप्रोपेगेशन और विभिन्न दृष्टिकोणों को प्रेरित करने में सक्षम प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य तरीकों को प्रदर्शित करता है। यह पद्धति बेल-आउट के बाद 8 सप्ताह तक कोरल प्रजातियों पोसिलोपोरा वेरुकोसा के पॉलीप्स की सफलतापूर्वक खेती करने में सक्षम थी, जो कोरल अनुसंधान के लिए व्यक्तिगत कोरल पॉलीप्स का उपयोग करने की व्यावहारिकता का प्रदर्शन करती है।

पॉलीप बेल-आउट को तीन अलग-अलग तरीकों (चित्रा 1) का पालन करते हुए प्रजातियों पी वेरुकोसा की एक कॉलोनी से संबंधित मूंगा टुकड़ों में प्रेरित किया गया था। पानी वाष्पीकरण के बाद उच्च लवणता से प्रेरित बेल-आउट परिवेश के तापमान पर पेट्री व्यंजनों में मूंगा टुकड़ों के इनक्यूबेशन के 24 घंटे के बाद पूरा हो गया था, जो शुरू में 40 पीएसयू में पानी से भरा हुआ था, जो तब प्रक्रिया समाप्त होने के बाद 59 पीएसयू की अंतिम लवणता तक पहुंच गया था (चित्रा 2 ए-सी, आई)। खारे पानी की आपूर्ति द्वारा बेल-आउट भी 40 पीएसयू में शुरू में पानी में इनक्यूबेशन के 24 घंटे के बाद पहुंच गया था जो 12 घंटे के बाद 52 पीएसयू और प्रक्रिया के अंत में 59 पीएसयू की लवणता तक पहुंच गया था, 24 घंटे के बाद (चित्रा 2 डी-एफ, आई)। दोनों प्रयोगों में, लवणता में वृद्धि पॉलीप्स द्वारा ऊतक पाचन के प्रेरण के लिए जिम्मेदार थी। 12 घंटे के बाद, उच्च लवणता की स्थिति ने कोनोसार्क के क्रमिक पतले होने के साथ संयोजन के रूप में पॉलीप्स के संकुचन का कारण बना, अंततः 24 घंटे के बाद पॉलीप्स की अंतिम टुकड़ी का कारण बना। कैल्शियम मुक्त समुद्री जल में इनक्यूबेशन के माध्यम से बेल-आउट प्रेरण सीएएफएसडब्ल्यू में 3 एच इनक्यूबेशन के बाद पूरा हो गया था, इसके बाद 20% डीएमईएम मीडिया (चित्रा 2 जी-एच) में 20 एच इनक्यूबेशन था। ऊतक व्यक्तिगत मूंगा जंतु (चित्रा 3 ए-सी) और "ऊतक गेंदों" उत्पन्न होने तक एक पिपेट के साथ दूर धक्का देने के बाद सभी तीन तरीकों से कंकाल से अलग हो गया था।
टुकड़ी के बाद, सभी तीन तरीकों से पॉलीप्स एकत्र किए गए थे और जाल या सेल फ्लास्क के साथ कवर पेट्री व्यंजनों को आवंटित करने से पहले समुद्री जल में ठीक होने की अनुमति दी गई थी। वाष्पीकरण और पानी की आपूर्ति विधियों से प्राप्त पॉलीप्स को एक्वैरियम के अंदर पेट्री व्यंजनों में बनाए रखा गया था और क्रमशः 6 सप्ताह और 8 सप्ताह तक जीवित रहा (चित्रा 3 डी और चित्रा 3 एफ)। इन माइक्रोप्रोपेगेट्स ने पॉलीप्स की सामान्य शारीरिक रचना को बनाए रखा, तम्बू, बेसल डिस्क और मुंह पेश किया1. कैल्शियम मुक्त समुद्री जल में इनक्यूबेशन के माध्यम से प्राप्त पॉलीप्स का जीवनकाल कम था, जो 1 दिन तक जीवित रहता था, जिसके बाद उनके ऊतक अलग हो जाते थे। इनक्यूबेटरों के अंदर सेल संस्कृति फ्लास्क में रखे समुद्री जल वाष्पीकरण विधि से प्राप्त पॉलीप्स ऊतकों के पृथक्करण (चित्रा 3 एफ) के बिना 3 सप्ताह तक जीवित रहे। सभी मामलों में, भले ही पॉलीप्स सब्सट्रेट से संलग्न नहीं हो सकते थे, वे नेत्रहीन स्वस्थ थे और अपने रंग को बनाए रखते थे, ज़ोक्सांथेला कोशिकाएं अभी भी अपने ऊतकों के अंदर दिखाई दे रही थीं1.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63840/63840fig01v2.jpg"> चित्रा 1: प्रयोगशाला स्थितियों (दाएं) में अधिग्रहित पॉलीप्स को बनाए रखने के लिए दो तरीकों के चित्रण के बाद पॉलीप बेल-आउट प्रेरण (बाएं) के लिए तीन अलग-अलग परीक्षण पद्धतियों का योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व। (ए) पानी के वाष्पीकरण द्वारा पॉलीप बेल-आउट के लिए पद्धति का प्रतिनिधित्व। (बी) उच्च लवणता समुद्री जल आपूर्ति द्वारा पॉलीप बेल-आउट के लिए पद्धति का प्रतिनिधित्व। (सी) कैल्शियम मुक्त समुद्री जल इनक्यूबेशन द्वारा पॉलीप बेल-आउट के लिए पद्धति का प्रतिनिधित्व। <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63840/63840fig01largev2.jpg" target="_blank">कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63840/63840fig02.jpg"> चित्रा 2: कोरल प्रजातियों के टुकड़ों का उपयोग करके तीन अलग-अलग तरीकों से प्रेरित पॉलीप बेल-आउट प्रक्रिया की छवियां पी। (ए-सी) पानी वाष्पीकरण विधि का उपयोग करके पेट्री डिश में क्रमशः इनक्यूबेशन के बाद 0 घंटे, 12 घंटे और 24 घंटे पर एक मूंगा टुकड़ा। (डी-एफ) उच्च लवणता समुद्री जल आपूर्ति विधि का उपयोग करके क्रमशः इनक्यूबेशन के बाद 0 घंटे, 12 घंटे और 24 घंटे पर एक मूंगा टुकड़ा। (जी, एच) कैल्शियम मुक्त समुद्री जल के संपर्क में आने वाले मूंगा के टुकड़े क्रमशः पहले और बाद में विधि इनक्यूबेशन हैं। कैल्शियम मुक्त कृत्रिम समुद्री जल में ऊष्मायन 3 घंटे के लिए और 20% डीएमईएम में 21 घंटे के लिए थे (I) पानी के वाष्पीकरण और उच्च लवणता समुद्री जल आपूर्ति बेल-आउट प्रेरण विधियों के दौरान समय के साथ समुद्री जल के पीएसयू में लवणता मूल्यों का चित्रमय प्रतिनिधित्व। <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63840/63840fig02large.jpg" target="_blank">कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63840/63840fig03.jpg"> चित्रा 3: तीन प्रदर्शित बेल-आउट प्रेरण प्रक्रियाओं से प्राप्त पी वेरुकोसा पॉलीप्स की छवियां( ए-सी) क्रमशः वाष्पीकरण, खारे पानी की आपूर्ति और कैल्शियम मुक्त समुद्री जल विधियों से प्राप्त पॉलीप्स की छवियों को कंकाल से अलग होने के तुरंत बाद कब्जा कर लिया गया था। (डी) पेट्री डिश में 6 सप्ताह तक जीवित रहने के बाद वाष्पीकरण विधि से प्राप्त एक मूंगा पॉलीप की छवि। (ई) पेट्री डिश में 8 सप्ताह तक जीवित रहने के बाद खारे पानी की आपूर्ति विधि से प्राप्त एक मूंगा पॉलीप की छवि। (एफ) सेल संस्कृति फ्लास्क में 3 सप्ताह जीवित रहने के बाद वाष्पीकरण विधि से प्राप्त एक मूंगा पॉलीप की छवि। <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63840/63840fig03large.jpg" target="_blank">कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।</a>

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Inducing Polyp Bail-out in Coral Colonies to Obtain Individualized Micropropagates for Laboratory Experimental Use

पॉलीप बेल-आउट तीव्र तनाव से प्रेरित एक प्रक्रिया है, जिसमें कोरल पॉलीप्स ऊतक को अपनी कॉलोनी से जोड़ते हैं और व्यक्तियों के रूप में रहने के लिए इससे अलग हो जाते हैं। वर्तमान प्रोटोकॉल बताता है कि हाइपरसेलिन या कैल्शियम मुक्त समुद्री जल उपचार का उपयोग करके बेल-आउट द्वारा कोरल माइक्रोप्रोपेगेशन को कैसे प्रेरित किया जाए।

प्रयोगशाला प्रायोगिक उपयोग के लिए व्यक्तिगत माइक्रोप्रोपेगेट प्राप्त करने के लिए कोरल कॉलोनियों में पॉलीप बेल-आउट को प्रेरित करना

Corals are colonial animals formed by modular units called polyps. Coral polyps are physiologically linked and connected by tissue. The phenomenon of ...

कोरल माइक्रोप्रोपेगेशन अभी भी अपनी प्रारंभिक अवस्था में है। पॉलीप बेल-आउट के लिए प्रोटोकॉल का अनुकूलन इस अंतर को भरने के लिए महत्वपूर्ण है जिससे वैज्ञानिकों को प्रयोगशाला वातावरण में कोरल का अध्ययन करने के लिए मॉडल के रूप में पॉलीप्स का उपयोग करने की अनुमति मिलती है। पॉलीप बेल-आउट छोटे मूंगा टुकड़ों से कई प्रचार बनाना संभव बनाता है।उदाहरण के लिए, कोरल में सूक्ष्म प्रक्रियाओं के अवलोकन को सुविधाजनक बनाने वाले विभिन्न प्रयोगों में पॉलीप्स का उपयोग किया जा सकता है। प्रवाल भित्तियों को खतरा है। हमारा लक्ष्य कोरल को विरंजन और अन्य पर्यावरणीय खतरों से बचाने के लिए रणनीतियों को विकसित करने के लिए इस प्रतिकृति मॉडल का उपयोग कुशल और गैर-आक्रामक तरीके से करना है।यह विधि कोरल फिजियोलॉजी, मेजबान माइक्रोबायोम इंटरैक्शन और विरंजन में शामिल तंत्र की जांच में सहायता कर सकती है। इस तरह के निष्कर्ष प्रवाल प्रोबायोटिक्स के अनुकूलन में योगदान कर सकते हैं, उदाहरण के लिए। पर्याप्त लवणता के साथ समुद्री जल का उपयोग करना महत्वपूर्ण है।लवणता मूंगा के प्राकृतिक वातावरण के स्तर पर शुरू होनी चाहिए और धीरे-धीरे बढ़नी चाहिए ताकि तनाव अत्यधिक हानिकारक न हो। सही समय पर पॉलीप्स इकट्ठा करना और उन लोगों को चुनना जो सबसे अधिक बरकरार हैं, उनके अस्तित्व के लिए महत्वपूर्ण है। इन संकेतों को समझने के लिए एक दृश्य प्रदर्शन महत्वपूर्ण हो सकता है।सबसे पहले, कोरल कॉलोनी से छोटे टुकड़ों को काटने के लिए विकर्ण काटने वाले सरौता का उपयोग करें, फिर उन्हें 12 मिलीलीटर समुद्री जल से भरे छोटे पेट्री व्यंजनों में रखें, जिसमें कोरल कॉलोनी को अनुकूलित किया गया है। परिवेश के तापमान पर प्लेट को लगभग 24 घंटे के लिए खुला छोड़ दें ताकि पानी वाष्पित हो जाए और इसकी लवणता धीरे-धीरे बढ़े। जब ऊतक पाचन पॉलीप्स के बीच अवलोकन योग्य होता है, तो कोरल ऊतक के करीब एक कोमल प्रवाह बनाने के लिए 1-मिलीलीटर ट्रांसफर पिपेट का उपयोग करें।प्रवाह धीरे-धीरे पॉलीप्स की टुकड़ी को पूरा करने में मदद करेगा जो पहले से ही कंकाल से उनके चारों ओर ऊतक को पचा चुके हैं, फिर पिपेट के साथ, धीरे-धीरे आइसोस्मोटिक पानी के साथ पेट्री डिश में पानी का आदान-प्रदान करें। उच्च लवणता वाले समुद्री जल को तैयार करने के लिए, सामान्य समुद्री जल लें और तीन लीटर उच्च लवणता वाले समुद्री जल को तैयार करने के लिए समुद्री जल में सोडियम क्लोराइड जोड़ें जब तक कि लवणता 85% तक न बढ़ जाए, पहले दिखाए गए मूंगा के छोटे टुकड़ों को काटने के बाद, उन्हें एक पेरिस्टाल्टिक पंप से जुड़े तीन लीटर आइसोस्मोटिक समुद्री जल के साथ 10 लीटर कंटेनर में रखें। लगभग 40% तक लवणता बढ़ाने के लिए 126 मिलीलीटर प्रति घंटे की दर से 24 घंटे के लिए पहले से तैयार उच्च लवणता समुद्री जल के तीन लीटर के साथ इस कंटेनर को भरें एक पिपेट का उपयोग करके, कंकाल से पॉलीप्स को छोड़ने के लिए पानी का एक कोमल प्रवाह बनाएं।धीरे-धीरे आइसोस्मोटिक समुद्री जल के साथ कंटेनर में पानी का आदान-प्रदान करें। कैल्शियम मुक्त समुद्री जल तैयार करने के लिए एक लीटर विआयनीकृत पानी में 26.29 ग्राम सोडियम क्लोराइड, 0.872 ग्राम पोटेशियम क्लोराइड, 2.16 ग्राम मैग्नीशियम सल्फेट, 11.94 ग्राम मैग्नीशियम क्लोराइड, 3.42 ग्राम सोडियम सल्फेट और 0.26 ग्राम सोडियम बाइकार्बोनेट जोड़ें, फिर इस कैल्शियम मुक्त समुद्री जल के साथ पेट्री व्यंजन भरें। छोटे मूंगा टुकड़ों को काटने के बाद, उन्हें पेट्री डिश में कैल्शियम मुक्त समुद्री जल में डुबो दें।80 आरपीएम की रोटेशन गति पर तीन घंटे के लिए एक कक्षीय इनक्यूबेटर में व्यंजनों को रखें, फिर टुकड़ों को 40 व्यावहारिक लवणता इकाइयों के कृत्रिम समुद्री जल के साथ तैयार 20% डीएमईएम से भरे पेट्री व्यंजनों में स्थानांतरित करें और 100 मिलीग्राम प्रति लीटर एम्पीसिलीन युक्त हों। टुकड़ों को 26 डिग्री सेल्सियस और 80 आरपीएम पर सेते हैं। हर दिन मीडिया का आदान-प्रदान करें जब तक कि पॉलीप्स के बीच ऊतक पाचन अवलोकन योग्य न हो और व्यक्तिगत पॉलीप्स कंकाल से अलग होने लगते हैं, फिर पॉलीप्स को निष्फल समुद्री जल में स्थानांतरित करें और एक घंटे के लिए सेते हैं।एक बार जब पॉलीप्स गैर-तनावपूर्ण लवणता के साथ फ़िल्टर किए गए समुद्री जल में वापस आ जाते हैं, तो स्टीरियो माइक्रोस्कोप के तहत सिलिअरी प्रवाह के कारण ऊतक अखंडता और आंदोलन को देखकर व्यवहार्य पॉलीप्स का चयन करें। चयनित पॉलीप्स को पेट्री डिश में रखें और पेट्री डिश को 200-माइक्रोमीटर मेष आकार के प्लवक नेट के साथ कवर करें ताकि पॉलीप्स डिश से दूर न तैरें। उपयोग की जाने वाली मूंगा प्रजातियों के लिए उपयुक्त परिस्थितियों के साथ एक मछलीघर के अंदर पेट्री डिश रखें।शैवाल अतिवृद्धि को रोकने के लिए, पानी को नवीनीकृत करने और पकवान को साफ करने के लिए सप्ताह में कम से कम एक बार पेट्री डिश खोलें। पहले दिखाए गए पॉलीप्स का चयन करने के बाद, एक स्थानांतरण पिपेट का उपयोग करके, उन्हें 50 मिलीलीटर आइसोस्मोटिक समुद्री जल से भरे 75 वर्ग सेंटीमीटर सतह सेल फ्लास्क में रखें, फिर फ्लास्क को बंद करें और उन्हें 12 घंटे के प्रकाश चक्र, 26 डिग्री सेल्सियस और 40 आरपीएम पर सेट इनक्यूबेटर में रखें। यदि फ्लास्क शैवाल या बायोफिल्म्स से भर जाता है, तो सामग्री को एक साफ फ्लास्क में स्थानांतरित करें।इस अध्ययन में, पॉलीप बेल-आउट को तीन अलग-अलग तरीकों से प्रेरित किया गया था। पानी के वाष्पीकरण विधि के परिणामस्वरूप इनक्यूबेशन के 24 घंटों के भीतर पूरी तरह से बेल-आउट हुआ, और 24 घंटों के बाद लवणता 40 से 59 व्यावहारिक लवणता इकाइयों तक बढ़ गई। खारे पानी की आपूर्ति विधि के परिणामस्वरूप 24 घंटे के इनक्यूबेशन के बाद पॉलीप बेल-आउट भी हुआ।यहां, लवणता 12 घंटे के इनक्यूबेशन के बाद 40 से 52 व्यावहारिक लवणता इकाइयों तक बढ़ गई, और फिर 24 घंटों के बाद 59 व्यावहारिक लवणता इकाइयों तक। कैल्शियम मुक्त समुद्री जल में इनक्यूबेशन के माध्यम से बेल-आउट प्रेरण इसमें पॉलीप्स के इनक्यूबेशन के तीन घंटे बाद पूरा हो गया था, इसके बाद 20% डीएमईएम मीडिया में 20 घंटे का इनक्यूबेशन, सभी तीन तरीकों में, व्यक्तिगत मूंगा पॉलीप्स उत्पन्न किया जा सकता था। वाष्पीकरण विधि द्वारा उत्पन्न कोरल पॉलीप्स छह सप्ताह तक जीवित रह सकते हैं, जबकि उच्च लवणता वाले समुद्री जल आपूर्ति विधि द्वारा उत्पादित लोग मछलीघर के अंदर पेट्री व्यंजनों में आठ सप्ताह तक जीवित रह सकते हैं।इनक्यूबेटरों के अंदर सेल कल्चर फ्लास्क में रखे गए समुद्री जल वाष्पीकरण विधि से प्राप्त पॉलीप्स अपने ऊतकों के पूर्ण पृथक्करण के बिना तीन सप्ताह तक जीवित रहे। कंकाल से पॉलीप्स को अलग करते समय, कोमल होना महत्वपूर्ण है। यदि वे पूरी तरह से अलग नहीं होते हैं, तो दृढ़ता से पाइपिंग पानी द्वारा टुकड़ी को मजबूर करने से नुकसान होगा और जीवित रहने की दर कम होगी।इन विधियों का उपयोग करके, पॉलीप्स के निपटान को प्रेरित किया जा सकता है। पॉलीप्स निपटान इसके कैल्सीफिकेशन और विकास प्रक्रियाओं के बारे में सवालों के जवाब दे सकता है। पॉलीप बेल-आउट प्रेरण के विकास के बाद, शोधकर्ता कोरल कंकाल के प्रारंभिक गठन का अध्ययन करने में सक्षम थे और सीधे पॉलीप्स स्केल में कोरल विरंजन की कल्पना करते थे।

Research

JoVE Journal

Biology

Cortical Neurogenesis: Transitioning from Advances in the Laboratory to Cell-Based Therapies

Cortical Neurogenesis: प्रयोगशाला में अग्रिम से सेल आधारित चिकित्सा में संक्रमण

Experimental Approaches to Tissue Engineering

ऊतक इंजीनियरिंग के लिए प्रायोगिक दृष्टिकोण

Using Micro-Electro-Mechanical Systems (MEMS) to Develop Diagnostic Tools

Using Micro-Electro-Mechanical Systems MEMS to Develop Diagnostic Tools

माइक्रो इलेक्ट्रो मैकेनिकल सिस्टम्स (MEMS) का उपयोग करने के लिए नैदानिक ​​उपकरण का विकास

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स्वचालित hydrophobic प्रोटीन शुद्धीकरण में प्रयोग के लिए सहभागिता क्रोमैटोग्राफी स्तंभ चयन

In contrast to other chromatographic methods for purifying proteins (e.g. gel filtration, affinity, and ion exchange), hydrophobic interaction ...

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