Dette er den eneste dyremodellen som er tilgjengelig for å studere mekanismene som er ansvarlige for dialysetilgangsrelatert håndiskemi. Modellen gir en robust plattform for å undersøke det komplekse samspillet mellom uremi og nevromuskulære forstyrrelser som skyldes hemodynamiske forandringer som følge av arteriell venøs fistelkirurgi. Tilgangsrelatert hånddysfunksjon påvirker opptil 60% av hemodialysepasienter og kan påvirke pasientens livskvalitet alvorlig.
Denne modellen hjelper oss å forstå funksjonshemmingen og teste nye terapier. Demonstrere prosedyren vil være Dr.Raymond Kim, en postdoktor forsker fra vårt laboratorium. For å begynne, plasser den bedøvede musen i den bakre posisjonen på et operasjonsbord dekket av en steril drapering, og bruk det okulære smøremiddelet for å beskytte øynene mot tørking under operasjonen.
Bruk en penntrimmer til å barbere magehåret for operasjonen og benhåret for de postoperative perfusjonsmålingene, og fjern deretter håret fra operasjonsfeltet. Deretter fikseres øvre og nedre ekstremiteter med gummibånd og stifter. Kontroller dybden av anestesi ved å overvåke tåklemmerefleksen og titrere anestesi etter behov.
Utfør respiratorisk mønsterevaluering hvert tredje til femte minutt gjennom hele den kirurgiske prosedyren for å kalibrere anestesinivået. Lag en midtlinje laparotomi fra nedre kant av sternal margin til pubis symfysen, og dissekere ut pubis fett pad for å oppnå et bredere operativt felt. Åpne celiotomi for å få tilgang til peritoneal innhold og dekke tarmene med en saltvann gjennomvåt, ikke-vevd svamp.
Deretter dissekerer du forsiktig ut perivaskulær fascie og fettvev fra omtrent en centimeter proksimalt til aortabifurkamentet, som strekker seg til nivået av venstre iliac bifurkasjon ved hjelp av rette Dumont-tang og små dobbeltendede harde skarpspisse bomullspinner. Før deretter spissen av de vinklede tangene under venstre vaskulære bunt av iliaca communis og spred forsiktig flere ganger for å mobilisere karene fra den underliggende retroperitoneale muskulaturen. Plasser to 4-0 silkesuturer rundt den isolerte venstre vanlige iliac arterio venøse bunten og bruk dem som ligaturer til vaskulær bunt.
Lag deretter en enkelt knute med hvert 4-0 silkeslips og påfør dem sekvensielt, proksimalt og deretter distalt. Deretter bruker du 4-0 silkesuturstrengene som håndtak, roterer venstre iliac arteriell venøs vaskulær bunt med klokken, og finjusterer posisjonen for midlertidig å lokalisere venen foran arterien. Lag en langsgående venotomi på omtrent en millimeter med en rett Vannas-fjærsaks, og skyll forsiktig ut gjenværende blod fra det venøse lumen med 0,9% saltvann.
Deretter plasserer du en impliserende 10-0 nylonsutur gjennom den bakre veggen av venen. Etterpå, ta tak i de impliserte suturendene og legg dem under mild spenning for å forskyve den fremre veggen fra den bakre veggen av iliac arterien. Deretter lager du et elliptisk snitt med en størrelse på omtrent 1,0 x 0,3 millimeter ved hjelp av buede Vannas-fjærsaks, og fjerner de vedheftende veggene i både iliac-arterien og venen.
Skyll forsiktig ut gjenværende blod av det eksponerte arterielle lumen med 0,9% saltvann og heparinisert saltvann. Etter opprettelsen av arteriell venøs fistel, reparer den første fremre veggvenotomien ved å bruke to til tre 10-0 nylonsuturer på en avbrutt måte. Etterpå, gjenopprett den vaskulære bunten til sin opprinnelige anatomiske orientering og legg et lite stykke saltvann gjennomvåt absorberbar gelatinsvamp ved siden av den reparerte venotomien for å lette hemostase.
Deretter løsner du 4-0 enkeltknute kryssklemmeligaturer sekvensielt fra distalt til proksimalt, mens du overvåker venotomistedet nøye for overdreven blødning. Gni forsiktig den vaskulære bunten med små dobbeltendede, harde, skarpe spisse bomullspinner, noe som ytterligere letter restaureringen av blodstrømmen. Bekreft deretter den tekniske suksessen til operasjonen ved hjelp av visualisering av pulsatilt rødt oksygenert blod som kommer inn i iliacvenen og blander med mørkt venøst blod som kommer tilbake fra bakbenet.
Injiser heparinisert saltvann i den dårligere vena cava for systemisk antikoagulasjon for å forbedre arterielle venøse fistelpatencyutfall, og inspiser operasjonsstedet for hemostase etter injeksjon av heparinisert saltvann. Hvis det ikke er noen blødningsproblemer, lukk midtlinjefascien og deretter hudsnittet med absorberbare 5-0 PGA-suturer på løpende måte. Dopplerultralyd ble brukt for å validere patenen til arteriell venøs fistel.
Fargedoppler viste turbulent strømning på stedet for fistelen, og pulsatil spektral utvidelse ble visualisert ved pulsbølgedopplervurdering. Hvis fistelen er åpen, har aorta forhøyet topp systolisk og avsluttende diastolisk hastighet, mens den nedre vena cava utvikler pulsatilitet med forhøyet topphastighet. Karutvidelsen i både aorta og vena cava inferior er tydelig med serielle pre- og postoperative målinger.
B-modus og pulsbølgedoppler-ultralydmålinger etter operasjon avslørte innstrømnings- og utstrømningskardilatasjon og økning i maksimal systolisk hastighet sammenlignet med humbugdyrene. Laserdopplervurdering av baklemmene viste at venstre POD-perfusjonsutfall var ca. 20 % av kontralaterale ekstremiteter etter operasjon, med gradvis restitusjon over tid. Perfusjonsutfallet i tibialis fremre muskel var ca. 60 % etter operasjonen, med tilsvarende restitusjon.
Hindlimb nevromotorisk funksjon ble kvantifisert via testing av gripestyrke og analyse av tredemøllemønster, som ble utført sekvensielt gjennom restitusjonsperioden. Forventet ensidig gripestyrke er ca. 50 % av kontralateral ekstremitet på postoperativ dag fire med gradvis restitusjon. Hvert mikrokirurgisk trinn bør utføres med ekstra forsiktighet for å unngå potensielle nerve- eller vaskulære traumer som kan forårsake betydelige endringer i både hemodynamikk og lempatologi.
Etter modellkarakterisering kunne man utforske en rekke studier som undersøkte biologiske drivere for nevromuskulær dysfunksjon som følge av plassering av arteriovenøs fistel.