Name: establishment and evaluation of a porcine vein graft disease model
Uploaded: 2022-07-25T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Establishment and Evaluation of a Porcine Vein Graft Disease Model at JoVE.com

המחברים מודים למכון גואנגדונג לניטור חיות מעבדה על התמיכה הטכנית, הטיפול בבעלי חיים ואיסוף הדגימות. הם גם מודים שנג'ן Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd, על התמיכה הטכנית בבדיקה קולית. עבודה זו נתמכה על ידי תוכנית המדע והטכנולוגיה של גואנגדונג, סין, ופרויקט הוצאות עסקיות בסיסיות של מחקר מדעי בסיסי של אוניברסיטת ג'ינאן (2017A020215076, 2008A08003 ו- 21621409).

הנהלים לטיפול ולשימוש בחיות מעבדה אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של המכון לניטור חיות מעבדה בגואנגדונג. כל הניסויים נערכו בהתאם למדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה (מהדורה 8, 2011, המועצה הלאומית למחקר, ארה"ב). ההליך הכירורגי מוצג באיור 1.
...

<ol>
	<li>Lloyd-Jones, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Executive+summary:+Heart+disease+and+stroke+statistics--2010+update:+A+report+from+the+American+Heart+Association.">Executive summary: Heart disease and stroke statistics--2010 update: A report from the American Heart Association.</a> Circulation. 121 (7), 948-954 (2010).</li><li>Taggart, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contemporary+coronary+artery+bypass+grafting.">Contemporary coronary artery bypass grafting.</a> Frontiers of Medicine. 8, 395-398 (2014).</li><li>Wolny, R., Mintz, G. S., Pregowski, J., Witkowski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms,+prevention+and+treatment+of+saphenous+vein+graft+disease.">Mechanisms, prevention and treatment of saphenous vein graft disease.</a> The American Journal of Cardiology. 154, 41-47 (2021).</li><li>Schachner, T., Laufer, G., Bonatti, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+(animal)+models+of+vein+graft+disease.">In vivo (animal) models of vein graft disease.</a> European Journal of Cardio-thoracic Surgery: Official Journal of the European Association for Cardio-thoracic Surgery. 30 (3), 451-463 (2006).</li><li>Suggs, W. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antisense+oligonucleotides+to+c-fos+and+c-jun+inhibit+intimal+thickening+in+a+rat+vein+graft+model.">Antisense oligonucleotides to c-fos and c-jun inhibit intimal thickening in a rat vein graft model.</a> Surgery. 126 (2), 443-449 (1999).</li><li>Jiang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+vein+graft+model:+Adaptation+to+differential+flow+environments.">A novel vein graft model: Adaptation to differential flow environments.</a> American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 286 (1), H240-H245 (2004).</li><li>O'Brien, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+injury+to+the+media+after+saphenous+vein+grafting.">Early injury to the media after saphenous vein grafting.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 65 (5), 1273-1278 (1998).</li><li>Zou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+venous+bypass+graft+arteriosclerosis.">Mouse model of venous bypass graft arteriosclerosis.</a> The American Journal of Pathology. 153 (4), 1301-1310 (1998).</li><li>Klyachkin, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postoperative+reduction+of+high+serum+cholesterol+concentrations+and+experimental+vein+bypass+grafts.+Effect+on+the+development+of+intimal+hyperplasia+and+abnormal+vasomotor+function.">Postoperative reduction of high serum cholesterol concentrations and experimental vein bypass grafts. Effect on the development of intimal hyperplasia and abnormal vasomotor function.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 108 (3), 556-566 (1994).</li><li>Tan, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+porcine+model+of+heart+failure+with+preserved+ejection+fraction+induced+by+chronic+pressure+overload+characterized+by+cardiac+fibrosis+and+remodeling.">A porcine model of heart failure with preserved ejection fraction induced by chronic pressure overload characterized by cardiac fibrosis and remodeling.</a> Frontiers in Cardiovascular Medicine. 8, 677727 (2021).</li><li>Hocum Stone, ., L, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+resonance+imaging+assessment+of+cardiac+function+in+a+swine+model+of+hibernating+myocardium+3+months+following+bypass+surgery.">Magnetic resonance imaging assessment of cardiac function in a swine model of hibernating myocardium 3 months following bypass surgery.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 153 (3), 582-590 (2017).</li><li>Gedik, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proteomics/phosphoproteomics+of+left+ventricular+biopsies+from+patients+with+surgical+coronary+revascularization+and+pigs+with+coronary+occlusion/reperfusion:+Remote+ischemic+preconditioning.">Proteomics/phosphoproteomics of left ventricular biopsies from patients with surgical coronary revascularization and pigs with coronary occlusion/reperfusion: Remote ischemic preconditioning.</a> Scientific Reports. 7 (1), 7629 (2017).</li><li>Tsirikos Karapanos, ., N, , et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+competitive+flow+on+distal+coronary+flow+and+on+graft+flow+during+coronary+artery+bypass+surgery.">The impact of competitive flow on distal coronary flow and on graft flow during coronary artery bypass surgery.</a> Interactive Cardiovascular and Thoracic Surgery. 12 (6), 993-997 (2011).</li><li>Meng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Competitive+flow+arising+from+varying+degrees+of+coronary+artery+stenosis+affects+the+blood+flow+and+the+production+of+nitric+oxide+and+endothelin+in+the+internal+mammary+artery+graft.">Competitive flow arising from varying degrees of coronary artery stenosis affects the blood flow and the production of nitric oxide and endothelin in the internal mammary artery graft.</a> European Journal of Cardio-thoracic Surgery: Official Journal of the. 43 (5), 1022-1027 (2013).</li><li>Thankam, F. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+hypoxia+and+mitochondrial+damage+associated+molecular+patterns+in+the+pathogenesis+of+vein+graft+failure:+A+pilot+study.">Association of hypoxia and mitochondrial damage associated molecular patterns in the pathogenesis of vein graft failure: A pilot study.</a> Translational Research: The Journal of Laboratory and Clinical. , 38-52 (2021).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+surgical+model+of+heart+failure+with+preserved+ejection+fraction+in+Tibetan+minipigs.">A surgical model of heart failure with preserved ejection fraction in Tibetan minipigs.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. 180 (180), 63526 (2022).</li><li>Rueda, A. l. c. a. l. &. #. 2. 2. 5. ;., I, , et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+live+porcine+model+for+surgical+training+in+tracheostomy,+neck+dissection,+and+total+laryngectomy.">A live porcine model for surgical training in tracheostomy, neck dissection, and total laryngectomy.</a> European Archives of Oto-Rhino-Laryngology: Official Journal of the European Federation of Oto-Rhino-Laryngological Societies (EUFOS): Affiliated with the German Society for Oto-Rhino-Laryngology - Head and Neck Surgery. 278 (8), 3081-3090 (2021).</li><li>Proudfit, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+value+of+coronary+arteriography.">Prognostic value of coronary arteriography.</a> Cardiovascular Clinics. 12 (2), 1-8 (1981).</li><li>Clark, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+fibroplasia+in+cutaneous+wound+repair.">Regulation of fibroplasia in cutaneous wound repair.</a> TheAmerican Journal of the Medical Sciences. 306 (1), 42-48 (1993).</li><li>Darby, I., Skalli, O., Gabbiani, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alpha-smooth+muscle+actin+is+transiently+expressed+by+myofibroblasts+during+experimental+wound+healing.">Alpha-smooth muscle actin is transiently expressed by myofibroblasts during experimental wound healing.</a> Laboratory Investigation. 63 (1), 21-29 (1990).</li><li>Sterpetti, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+myointimal+hyperplasia+and+cytokine+production+in+experimental+vein+grafts.">Formation of myointimal hyperplasia and cytokine production in experimental vein grafts.</a> Surgery. 123 (4), 461-469 (1998).</li><li>Shannon, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Porcine+model+of+infrarenal+abdominal+aortic+aneurysm.">Porcine model of infrarenal abdominal aortic aneurysm.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. 153 (153), (2019).</li><li>Langille, B. L., O'Donnell, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reductions+in+arterial+diameter+produced+by+chronic+decreases+in+blood+flow+are+endothelium-dependent.">Reductions in arterial diameter produced by chronic decreases in blood flow are endothelium-dependent.</a> Science. 231 (4736), 405-407 (1986).</li><li>Zwolak, R. M., Adams, M. C., Clowes, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kinetics+of+vein+graft+hyperplasia:+Association+with+tangential+stress.">Kinetics of vein graft hyperplasia: Association with tangential stress.</a> Journal of Vascular Surgery. 5 (1), 126-136 (1987).</li><li>Kotani, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+subacute+hypoxic+model+using+a+pig.">A subacute hypoxic model using a pig.</a> Surgery Today. 35 (11), 951-954 (2005).</li><li>Liu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+ketamine-pentobarbital+anesthesia+and+fentanyl-pentobarbital+anesthesia+for+open-heart+surgery+in+minipigs.">Comparison of ketamine-pentobarbital anesthesia and fentanyl-pentobarbital anesthesia for open-heart surgery in minipigs.</a> Lab Animal. 38 (7), 234-240 (2009).</li><li>Geovanini, G. R., Pinna, F. R., Prado, F. A., Tamaki, W. T., Marques, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardization+of+anesthesia+in+swine+for+experimental+cardiovascular+surgeries.">Standardization of anesthesia in swine for experimental cardiovascular surgeries.</a> Revista Brasileira de Anestesiologia. 58 (4), 363-370 (2008).</li><li>Alhomary, M., Ramadan, E., Curran, E., Walsh, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Videolaryngoscopy+vs.+fibreoptic+bronchoscopy+for+awake+tracheal+intubation:+A+systematic+review+and+meta-analysis.">Videolaryngoscopy vs. fibreoptic bronchoscopy for awake tracheal intubation: A systematic review and meta-analysis.</a> Anaesthesia. 73 (9), 1151-1161 (2018).</li><li>Parang, P., Arora, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+vein+graft+disease:+Pathogenesis+and+prevention.">Coronary vein graft disease: Pathogenesis and prevention.</a> Canadian Journal of Cardiology. 25 (2), e57-e62 (2009).</li><li>Egan, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fentanyl+pharmacokinetics+in+hemorrhagic+shock:+a+porcine+model.">Fentanyl pharmacokinetics in hemorrhagic shock: a porcine model.</a> Anesthesiology. 91 (1), 156-166 (1999).</li></ol>

במחקר זה, תיארנו בפירוט את הפרוטוקול לבחירת בעלי חיים, הכנת מכשירים, הליכים כירורגיים והערכה לאחר ניתוח בעת פיתוח מודל VGD המושרה על ידי CABG. ביצענו בדיקה אולטראסונית של השתל הוורידי לפני ואחרי ניתוח CABG ובדיקה היסטולוגית של השתל 30 יום לאחר הניתוח. זרימת הדם בווריד החלב הפנימי הייתה תקינה לפנ?...

למרות שהתמותה ממחלות לב כליליות ירדה באופן משמעותי בשנים האחרונות, מחצית מהמבוגרים בגיל העמידה בארצות הברית מפתחים תסמינים איסכמיים הקשורים ללב מדי שנה, ושליש מהמבוגרים מתים ממחלת לב כלילית1. השתלת מעקף עורקים כליליים (CABG) היא שיטה כירורגית יעילה לשיפור איסכמיה של שריר הלב, וחשוב מכך, זוהי שיטה כירורגית שאין לה תחליף לטיפול במחלת עורקים כליליים רב-כליליים2. עם הזמן, עם זאת, שתלים וסקולריים מפתחים דלקת, היפרפלזיה אינטימית וטרשת עורקים מתקדמת, אשר ידועה כמובילה לכשל השתלת ורידים או מחלת השתלת ורידים (VGD)3. בחולים לאחר CABG, אם רסטנוזיס מתרחשת, רק כלי הדם החולה יכול להיות מוחלף במקרים מסוימים2. חולים מבוגרים יותר ותחלואה נלווית נוספת הופכים את ביצוע מחדש של השתלת מעקפים כליליים למאתגרת למדי. עיכוב או שליטה בבעיות הפתולוגיות הקשורות לכלי דם מושתלים היא בעיה דחופה שיש לפתור. מודלים גדולים של בעלי חיים של CABG-VGD נדרשים לחקירת מנגנוני מחלה ופיתוח אסטרטגיות טיפוליות. חוקרים ביססו בהצלחה מודלים של VGD בבעלי חיים קטנים וגדולים כגון עכברים4, חולדות5, ארנבים6 וחזירים7. בהשוואה לבעלי חיים קטנים, לבעלי חיים גדולים כמו חזירים יש מבנים אנטומיים ומאפיינים פיזיולוגיים דומים לבני אדם ויש להם תוחלת חיים ארוכה יותר 8,9. לפיכך, בעלי חיים גדולים מתאימים יותר לחקר שינויים פתולוגיים ארוכי טווח במחלת השתל הוורידי ולבדיקות פרה-קליניות של תרופות או מכשירים. אנו והצוות המשותף שלנו יישמנו בהצלחה טכניקות כירורגיות כדי לבסס מודל אי ספיקת לב חזירית ותיארנו את השינויים הפתולוגיים הלבביים במודל זה10.
ניתוח CABG עבר סטנדרטיזציה בפרקטיקה הקלינית, אך כאשר הוא מיושם בהקמת מודלים של בעלי חיים VGD, ההבדלים בין המינים, רכישת ציוד ומתקנים לבעלי חיים, פעולות כירורגיות לבעלי חיים והאכלה וסיעוד של בעלי חיים הם אתגרים עצומים לחוקרים. כמו בפרקטיקה הקלינית, הגישות לניתוח CABG המשמשות להקמת מודלים של בעלי חיים VGD כוללות סטרנטומיה בקו האמצע11 ובית החזה השמאלי הצידי12. סטרנטומיה בקו האמצע נפוצה יותר13,14. עם זאת, גישה זו טומנת בחובה סיכונים גבוהים הן לבני אדם והן לבעלי חיים. במחקר שדווח על ידי Thankam et al., שניים מתוך ששת החזירים ששימשו לדוגמנות מתו במהלך ניתוח15. תמותה במודל גבוה מגדילה את עלויות המחקר ומשפיעה על דיוק התוצאות. מחקר הראה מוקדם יותר כי חתך בדופן בית החזה השמאלי היה אפשרי כדי לבסס VGD המושרה על ידי CABG בחזירים11. כאן, מחקר זה נועד לתאר פרוטוקול שלב אחר שלב לביסוס ניתוח הניתן לשחזור עבור מודל VGD המושרה על ידי CABG במיני-חזירים ולהעריך את הפנוטיפ של מודל זה. פרוטוקול הניסוי תוכנן במשותף על ידי צוותי ניתוחי הלב וההרדמה. הגישה הניתוחית לחלל הבין-קוסטלי השלישי השמאלי נקבעה על פי גופות של מיני-חזירים אחרים במעבדה לפני הניתוח, ושיטת ההרדמה בוצעה על פי השיטה הנהוגה במרכז16. בדיקות ביוכימיות בדם, בדיקה קולית ובדיקה היסטולוגית נערכו כדי להעריך מודלים של בעלי חיים.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Aortic Punch</td>
			<td>Medtronic Inc. , America</td>
			<td>3.0mm, 3.5mm, 4.0mm</td>
			<td>Used for proximal coronary bridge anastomosis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automatic biochemical analyzer</td>
			<td>IDEXX Laboratories, Inc. America</td>
			<td>Catalyst One</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cardiac coronary artery bypass grafting instrument kit</td>
			<td>LANDANGER, France</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cardiogram monitor</td>
			<td>Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co, Ltd</td>
			<td>MEC-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coronary Shunt</td>
			<td>AXIUS&#160;</td>
			<td>OF-1500, OF-2500, OF-3000</td>
			<td>The product temporarily blocks the coronary artery during arteriotomy to reduce the amount of bleeding in the surgical field and provide blood flow to the distal end during anastomosis.&#160; The Axius shunt plug is not an implant and should be removed prior to completion of the anastomosis.&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Defibrillator</td>
			<td>MEDIANA</td>
			<td>Mediana D500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diazepam</td>
			<td>Nanguo pharmaceutical Co. LTD, Guangdong, China</td>
			<td>H37023039&#160;</td>
			<td>Narcotic inducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable manual electric knife</td>
			<td>Covidien, America</td>
			<td>E2516H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric negative pressure suction machine</td>
			<td>Shanghai Baojia Medical Instrument Co, Ltd</td>
			<td>YX932D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Esmolol</td>
			<td>Guangzhou Wanzheng Pharmaceutical Co. LTD</td>
			<td>H20055990</td>
			<td>Emergency drugs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ice machine&#160;</td>
			<td>Local suppliers, Guangzhou, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine&#160;</td>
			<td>Chengdu First Pharmaceutical Co. LTD</td>
			<td>H51021662</td>
			<td>Emergency drugs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luxtec headlight system</td>
			<td>Luxtec, America</td>
			<td>AX-1375-BIF</td>
			<td>Used for lighting fine parts during operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical operation magnifier (glasses)</td>
			<td>Germany Lista co, LTD</td>
			<td>SuperVu Galilean 3.5&#215;</td>
			<td>Used for fine site operation during operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi-function high-frequency electrotome</td>
			<td>Shanghai Hutong Electronics Co, Ltd</td>
			<td>GD350-B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitrogen canister</td>
			<td>Local suppliers, Guangzhou, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nonabsorbable surgical suture (polypropylene suture)</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson, America</td>
			<td>6-0, 7-0</td>
			<td>Used to suture blood vessels.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nonabsorbable suture (cotton thread)</td>
			<td>Covidien, America</td>
			<td>1-0</td>
			<td>Used for skin and muscle tissue tugging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Open heart surgery instrument kit</td>
			<td>Shanghai Medical Instrument (Group) Co., LTD</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propofol injection</td>
			<td>Xi &#39;an Libang Pharmaceutical Co. LTD</td>
			<td>H19990282</td>
			<td>Anesthetic sedative</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refrigerator</td>
			<td>Local suppliers, Guangzhou, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Respiratory anesthesia machine for animal</td>
			<td>Shenzhen Reward Life Technology Co, Ltd, China</td>
			<td>R620-S1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-occlusion clamp</td>
			<td>Xinhua Surgical Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>ZL1701RB</td>
			<td>Temporarily cut off the aortic flow</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>vecuronium bromide</td>
			<td>Richter, Hungary&#160;</td>
			<td>JX20090127</td>
			<td>Muscle relaxant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary ultrasound system&#160;</td>
			<td>Royal Philips, Netherlands</td>
			<td>CX50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zoletil</td>
			<td>Virbac, France</td>
			<td>Zoletil 50&#160;</td>
			<td>Animal narcotic</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

establishment and evaluation of a porcine vein graft disease model

מחלת השתל הוורידי (VGD) היא הגורם המוביל לכשל בהשתלת מעקפים כליליים (CABG). מודלים גדולים של בעלי חיים של CABG-VGD נדרשים לחקירת מנגנוני מחלה ופיתוח אסטרטגיות טיפוליות. 
כדי לבצע את הניתוח, אנו נכנסים לחדר הלב דרך החלל הבין-קוסטלי השלישי ומנתחים בזהירות את וריד החלב הפנימי וטובלים אותו במי מלח רגילים. העורק הכלילי הראשי הימני מטופל לאחר מכן באיסכמיה. כלי המטרה נחתך, תקע שאנט ממוקם, והקצה הדיסטלי של וריד השתל הוא anastomosed. אבי העורקים העולה חסום חלקית, והקצה הפרוקסימלי של וריד השתל הוא אנסטומוזה לאחר ניקוב. וריד השתל נבדק עבור פטנט, ואת העורק הכלילי הימני פרוקסימלי הוא קשור. 
ניתוח CABG מבוצע במיני-חזירים כדי לקצור את וריד החלב הפנימי השמאלי לשימושו כשתל כלי דם. בדיקות ביוכימיות בסרום משמשות להערכת המצב הפיזיולוגי של בעלי החיים לאחר הניתוח. בדיקת אולטרסאונד מראה כי הקצה הפרוקסימלי, האמצעי והדיסטלי של כלי השתל אינם חסומים. במודל הניתוחי, זרימת דם סוערת בשתל נצפית בבדיקה היסטולוגית לאחר ניתוח CABG, והיצרות שתל ורידי הקשורה להיפרפלזיה אינטימית נצפית בשתל. המחקר כאן מספק הליכים כירורגיים מפורטים להקמת מודל VGD המושרה על ידי CABG הניתן לחזרה.

מדדי BMI וסרום ביוכימיים ה-BMI בין קבוצות הדמה וה-VGD לא היה שונה באופן משמעותי (sham לעומת VGD, 22.05 ק"ג/ס"מ 2 ± 0.46 ק"ג/ס"מ 2 לעומת 21.14 ק"ג/ס"מ 2 ± 0.39 ק"ג/ס"מ 2, p = 0.46). התוצאות הביוכימיות של הסרום מפורטות בטבלה 1. שינויים מובהקים סטטיסטית בין הקבוצות נמצאו בארבע?...

Watch this Scientific Journal Video about Establishment and Evaluation of a Porcine Vein Graft Disease Model at JoVE.com

Establishment and Evaluation of a Porcine Vein Graft Disease Model

בפרוטוקול זה, השתלת מעקף ורידים חזיר חדשה בוצעה דרך חתך קטן בדופן החזה השמאלית ללא מעקף לב-ריאה. נעשה מחקר פתולוגי לאחר הניתוח, שהראה עיבוי אינטימי.

הקמה והערכה של מודל מחלת השתלת ורידים חזיריים

Venous graft disease (VGD) is the leading cause of coronary artery bypass graft (CABG) failure. Large animal models of CABG-VGD are needed for the ...

מודל זה מספק פרוטוקול סטנדרטי לביסוס מודלים של בעלי חיים של מחלת השתל הכלילי. הנוהל של מודל בעלי חיים שנקבע בשיטה זו הוא סטנדרטי, והתוצאה יציבה. בתור התחלה, חלקו מיני-חזירים זכרים בני שלושה חודשים במשקל 30 עד 35 ק"ג לקבוצות של מחלות דמה ומחלות שתל ורידי של חמישה בעלי חיים כל אחת.לאחר הרדמת החיה, יש ליצור גישה לאוזן על ידי החדרת קטטר ורידי לווריד האוזן השולי. כעת, העבירו את החזיר לשולחן הניתוחים במצב שכיבה. בצע אינטובציה בקנה הנשימה עם צינור מד צרפתי 7.0 עד 7.5, וחבר אותו למעגל הנשימה של ההרדמה.לשתק את הגפיים עם תחבושות, ולהרים את הראש עם drape סטרילי. לאחר הזרקת וקורוניום ברומיד לווריד להרפיית שרירים, יש לעקוב אחר קצב הלב, רמות החמצן בדם וטמפרטורת הגוף באמצעות אלקטרוקרדיוגרמה. לאחר גילוח ועיקור אזור הניתוח, הניחו סביבו וילון כירורגי סטרילי.לאחר ביצוע החתך וחשיפת וריד החלב הפנימי כמתואר בטקסט, יש לאתר את וריד החלב הפנימי ואת עורק החלב הפנימי השמאלי בצד שמאל של עצם החזה, ולבצע דיסקציה קהה של וריד החלב הפנימי באמצעות מלקחיים וסקולריים. בצע hemostasis על ידי electrocoagulation של ענפי וריד החלב הפנימי השמאלי עם סכין חשמלית. אם המוסטאזיס אינו שלם, באמצעות חוט כותנה, לקשור ולסמן את שני הקצוות של הווריד בזמן שהוא נקצר.לאחר הסרת הווריד, יש להזריק הפרין, מי מלח רגילים לתוך הווריד לצורך טיפול מקדים. לאחר מכן, לשים את הווריד לתוך מלוחים רגיל, לשמור אותו לגיבוי, בדומה לחתוך את וריד החלב הפנימי של קבוצת דמה. לאחר מכן, פתח את קרום הלב, סגור את קיר החזה והשתמש בווריד החלב הפנימי לשליטה פתולוגית ללא השתלת מעקף עורקים כליליים.בצע חתך של כשבעה סנטימטרים עם סכין חשמלית על קרום הלב כדי לחשוף את תא המטען של העורק הכלילי הימני. להשעות את קרום הלב, ולתפור את העור בצד ipsilateral עם 1-0 תפרים כירורגיים. כעת, יש להפריד את גזע העורק הכלילי הימני מהרקמות הסובבות אותו.לאחר מכן, באמצעות וו תיל, לעקוף את הרצועה החוסמת מתחת לקצה הפרוקסימלי של העורק הכלילי הימני המבודד ליד אבי העורקים. לאחר מכן, לטפל בשריר הלב עם שלושה מחזורים של שתי דקות איסכמיה וחמש דקות reperfusion על ידי הידוק והרפיה של הרצועה חוסמת. כמו כן, לפקח על הפעילות החשמלית של הלב עם אלקטרוקרדיוגרמה במהלך איסכמיה reperfusion pre-condition.לאחר מכן, לחתוך את אפיקרדיום המכסה את כלי הדם לאחר הידוק הרצועה כדי לחסום את זרימת הדם הכלילי הימני. חשיפת דופן העורק הכלילי, חתך אורכי עם קצה להב כירורגי כנגד מרכז הקיר הקדמי של כלי הדם. לאחר חיתוך הלומן והגדלת החתך והנחת שאנט כלילי, הכנס קצה אחד של השאנט עם סליל לעורק הכלילי הדיסטלי דרך הקרע.כעת, יש להזרים את הדם בעורקים הכליליים לתוך השאנט הכלילי החלול כדי להבטיח שדה ניתוחי ברור, ולבצע תפר רציף מקצה לצד בין וריד החלב הפנימי לדופן אבי העורקים עם תפר פוליפרופילן 6-0. באמצע אבי העורקים העולה, חוסמים את הקיר האנטרולטרלי השמאלי של אבי העורקים העולה עם מהדק חצי חסימה. לאחר ביצוע חתך קטן עם להב הניתוח בדופן אבי העורקים שבו נחתך האדוונטיטיה, הכנס את קצה הראש של פיר ההזזה בקצה הראש של האגרוף לתוך חלל אבי העורקים דרך חתך זה.לאחר מכן, כווצו את מוט ההזזה החוצה והסכין העגולה חותכת חתיכה מדופן העורק. לאחר הוצאת השאנט, יש לבצע תפר רציף מקצה לקצה בין וריד החלב הפנימי לעורק הכלילי הימני עם תפר פוליפרופילן 6-0. לאחר פתיחת מהדק החסימה למחצה, רשום את זרימת המעקף של גזע העורק הכלילי הימני פרוקסימלי לאתר האנסטומוזה באמצעות אולטרסאונד.הכינו את בעל החיים לניתוח כפי שהודגם קודם לכן. ועם סכין חשמלית, לבצע חתך עצם החזה החציוני של 10 ס"מ כדי לפצל את עצם החזה ולקצור את הווריד 30 יום לאחר הניתוח. בזמן ההפרדה, הימנעו מכלי הדם הראשיים, הלב, והפרידו את כלי הדם המושתלים שכבה אחר שכבה.חתכו במהירות את כלי הדם הגדולים המתחברים ללב, והניחו את הלב ואבי העורקים העולה על שבבי קרח. לאחר הסרת גשר כלי הדם של השתל, אבי העורקים המחובר והעורק הכלילי הימני, יש לשטוף את כל הדגימות במי מלח רגילים בארבע מעלות צלזיוס. לאחר לקיחת כל כלי השתל של כשלושה עד ארבעה סנטימטרים וחלוקתו לארבעה עד חמישה חלקים שווים, להעביר אותו CryoTubes במהירות הבזק להקפיא חנקן נוזלי.לניתוח, תקן את השתל הקר כקרח, שטוף במי מלח בתמיסת 4% paraformaldehyde. לאחר 12 שעות של קיבוע רקמות, מכתימים את הקטעים ב 50 מיליליטר של תמיסה מימית של hematoxylin במשך שלוש דקות. לאחר מכן, להפריד את החלקים על ידי שטיפה עם 50 מיליליטר של 0.5% חומצה הידרוכלורית-אתנול ו 0.2% אמוניה מים במשך 10 שניות כל אחד.לאחר ששוטפים את החלקים במשך שעה במים זורמים, נקו אותם על ידי השרייתם במים מזוקקים למשך שלוש דקות. לאחר ייבוש החלקים ב-70% ו-90% אתנול למשך 10 דקות, הכניסו אותם ל-50 מיליליטר של תמיסת צביעת אאוזין 0.5% אלכוהול למשך שתיים עד שלוש דקות. לאחר שהחלקים המוכתמים מיובשים באתנול טהור, השרו את הדגימות בקסילן טהור למשך 10 דקות כדי להפוך אותן לשקופות.לבסוף, טפטפו את החלקים השקופים בדבק נייטרלי לפני שתכסו אותם בחלקת כיסוי. צפו בקטעים פתולוגיים תחת מיקרוסקופ אור בהגדלה של פי 40. בדיקה אולטראסונית הראתה כי כיוון זרימת הדם הכללי היה תקין בקצה הפרוקסימלי, חלל כלי הדם והקצה הדיסטלי של כלי השתל.עם זאת, הקצוות הפרוקסימליים והדיסטליים של כלי השתל הראו זרימה מסוימת של דם לאחור. הניתוח ההיסטולוגי של וריד החלב הפנימי גילה כי בקבוצת הדמה הטוניקה אינטימה, הטוניקה מדיה, והדופן הוורידית של השתל הוורידי נראו תקינים. עם זאת, 30 יום לאחר השתלת עורקים כליליים, האינטימה של כלי הדם התעבתה והלומן הצטמצם.בקרב קבוצות מחלות דמה ומחלות שתל ורידי, ארבעה מדדים ביוכימיים, אמינוטרנספראז אספרטט, בילירובין בסרום, בילירובין כולל וקראטינין, הראו שינויים מובהקים סטטיסטית. המנתח צריך לחשוף לחלוטין את וריד החלב הפנימי ולוודא שהוא אינו מחובר לרקמה שמסביב. הטכניקה מספקת תהליך מידול סטנדרטי לחקר מחלות שתלים ורידיים במודלים של בעלי חיים.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Multicenter MRI Protocol for the Evaluation and Quantification of Deep Vein Thrombosis

MRI פרוטוקול Multicenter להערכה וכימות של פקקת וריד העמוק

We evaluated a magnetic resonance venography (MRV) approach with gadofosveset to quantify total thrombus volume changes as the principal criterion for ...

Establishment and Characterization of UTI and CAUTI in a Mouse Model

ההקמה ואפיון של UTI וCAUTI במודל עכבר

Urinary tract infections (UTI) are highly prevalent, a significant cause of morbidity and are increasingly resistant to treatment with antibiotics. ...

Vein Interposition Model: A Suitable Model to Study Bypass Graft Patency

וריד ביון דגם: מודל מתאים ללמוד patency מעקף

Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Contractility איזומטרי מדידה של עורק מצע המעי העליון העכבר באמצעות חוט Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Establishment of a Mouse Severe Acute Pancreatitis Model using Retrograde Injection of Sodium Taurocholate into the Biliopancreatic Duct

הקמת מודל דלקת לבלב חריפה חמורה עכבר באמצעות הזרקה מדרדרת של נתרן Taurocholate לתוך צינור ביליופנקראטי

The prevalence of acute pancreatitis (AP), especially severe acute pancreatitis (SAP), is increasing in younger age groups annually. However, there is a ...

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

דגימת דם חוזרת מהווריד הסובקלבי של חולדה מודעת

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...

Modified Arteriovenous Fistula Surgery to Establish the RV Volume Overload Mouse Model

Establishment and Confirmation of a Postnatal Right Ventricular Volume Overload Mouse Model

Establishment and Confirmation of a Postnatal Right Ventricular Volume Overload Mouse Model (Video) | JoVE 

הקמה ואישור של מודל עכבר עומס יתר על נפח החדר הימני לאחר הלידה

Right ventricular (RV) volume overload (VO) is common in children with congenital heart disease. In view of distinct developmental stages,the RV ...

Comparative Study of Blood Collection Techniques in Rats

Modified Tail Vein and Penile Vein Puncture for Blood Sampling in the Rat Model

Context Dependent Blood Collection Methods in Rats (Video) | JoVE

וריד זנב שונה וניקוב ורידים פין לדגימת דם במודל החולדה

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood ...

Adjunctive Exosome Therapy: Enhancing Myocardial Recovery Post-CABG Surgery

Surgical Porcine Model of Chronic Myocardial Ischemia Treated by Exosome-laden Collagen Patch and Off-pump Coronary Artery Bypass Graft

Author Spotlight: Enhancing Coronary Artery Revascularization

Chronic myocardial ischemia resulting from progressive coronary artery stenosis leads to hibernating myocardium (HIB), defined as myocardium that adapts ...

Development of an Effective Mice Model for Studying Oronasal Fistulas

Establishment of an Oronasal Fistula Mice Model

Investigating Wound Healing in Mice Models of Oronasal Fistulas (Video) | JoVE

הקמת מודל עכברי פיסטולה אורונזלית

This study presents a method utilizing heated ophthalmologic cautery to develop a viable model for investigating oronasal fistulas. C57BL/6 mice were used ...