Name: establishment and evaluation of a porcine vein graft disease model
Uploaded: 2022-07-25T14:00:00
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Los autores agradecen al Instituto de Monitoreo de Animales de Laboratorio de Guangdong por el apoyo técnico, el cuidado de los animales y la recolección de muestras. También agradecen a Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd, por el apoyo técnico en el examen ultrasónico. Este trabajo fue apoyado por el Programa de Ciencia y Tecnología de Guangdong, China, y el Proyecto de Gastos Comerciales de Investigación Científica Básica de las Universidades Centrales de la Universidad de Jinan (2017A020215076, 2008A08003 y 21621409).

Los procedimientos para el cuidado y uso de animales de laboratorio fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales del Instituto de Monitoreo de Animales de Laboratorio de Guangdong. Todos los experimentos se realizaron de acuerdo con la Guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio (8th Ed., 2011, National Research Council, EE. El procedimiento quirúrgico se muestra en la Figura 1.
1. Preparación preoperatoria de los a...

<ol>
	<li>Lloyd-Jones, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Executive+summary:+Heart+disease+and+stroke+statistics--2010+update:+A+report+from+the+American+Heart+Association.">Executive summary: Heart disease and stroke statistics--2010 update: A report from the American Heart Association.</a> Circulation. 121 (7), 948-954 (2010).</li><li>Taggart, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contemporary+coronary+artery+bypass+grafting.">Contemporary coronary artery bypass grafting.</a> Frontiers of Medicine. 8, 395-398 (2014).</li><li>Wolny, R., Mintz, G. S., Pregowski, J., Witkowski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms,+prevention+and+treatment+of+saphenous+vein+graft+disease.">Mechanisms, prevention and treatment of saphenous vein graft disease.</a> The American Journal of Cardiology. 154, 41-47 (2021).</li><li>Schachner, T., Laufer, G., Bonatti, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+(animal)+models+of+vein+graft+disease.">In vivo (animal) models of vein graft disease.</a> European Journal of Cardio-thoracic Surgery: Official Journal of the European Association for Cardio-thoracic Surgery. 30 (3), 451-463 (2006).</li><li>Suggs, W. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antisense+oligonucleotides+to+c-fos+and+c-jun+inhibit+intimal+thickening+in+a+rat+vein+graft+model.">Antisense oligonucleotides to c-fos and c-jun inhibit intimal thickening in a rat vein graft model.</a> Surgery. 126 (2), 443-449 (1999).</li><li>Jiang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+vein+graft+model:+Adaptation+to+differential+flow+environments.">A novel vein graft model: Adaptation to differential flow environments.</a> American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 286 (1), H240-H245 (2004).</li><li>O'Brien, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+injury+to+the+media+after+saphenous+vein+grafting.">Early injury to the media after saphenous vein grafting.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 65 (5), 1273-1278 (1998).</li><li>Zou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+venous+bypass+graft+arteriosclerosis.">Mouse model of venous bypass graft arteriosclerosis.</a> The American Journal of Pathology. 153 (4), 1301-1310 (1998).</li><li>Klyachkin, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postoperative+reduction+of+high+serum+cholesterol+concentrations+and+experimental+vein+bypass+grafts.+Effect+on+the+development+of+intimal+hyperplasia+and+abnormal+vasomotor+function.">Postoperative reduction of high serum cholesterol concentrations and experimental vein bypass grafts. Effect on the development of intimal hyperplasia and abnormal vasomotor function.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 108 (3), 556-566 (1994).</li><li>Tan, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+porcine+model+of+heart+failure+with+preserved+ejection+fraction+induced+by+chronic+pressure+overload+characterized+by+cardiac+fibrosis+and+remodeling.">A porcine model of heart failure with preserved ejection fraction induced by chronic pressure overload characterized by cardiac fibrosis and remodeling.</a> Frontiers in Cardiovascular Medicine. 8, 677727 (2021).</li><li>Hocum Stone, ., L, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+resonance+imaging+assessment+of+cardiac+function+in+a+swine+model+of+hibernating+myocardium+3+months+following+bypass+surgery.">Magnetic resonance imaging assessment of cardiac function in a swine model of hibernating myocardium 3 months following bypass surgery.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 153 (3), 582-590 (2017).</li><li>Gedik, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proteomics/phosphoproteomics+of+left+ventricular+biopsies+from+patients+with+surgical+coronary+revascularization+and+pigs+with+coronary+occlusion/reperfusion:+Remote+ischemic+preconditioning.">Proteomics/phosphoproteomics of left ventricular biopsies from patients with surgical coronary revascularization and pigs with coronary occlusion/reperfusion: Remote ischemic preconditioning.</a> Scientific Reports. 7 (1), 7629 (2017).</li><li>Tsirikos Karapanos, ., N, , et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+competitive+flow+on+distal+coronary+flow+and+on+graft+flow+during+coronary+artery+bypass+surgery.">The impact of competitive flow on distal coronary flow and on graft flow during coronary artery bypass surgery.</a> Interactive Cardiovascular and Thoracic Surgery. 12 (6), 993-997 (2011).</li><li>Meng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Competitive+flow+arising+from+varying+degrees+of+coronary+artery+stenosis+affects+the+blood+flow+and+the+production+of+nitric+oxide+and+endothelin+in+the+internal+mammary+artery+graft.">Competitive flow arising from varying degrees of coronary artery stenosis affects the blood flow and the production of nitric oxide and endothelin in the internal mammary artery graft.</a> European Journal of Cardio-thoracic Surgery: Official Journal of the. 43 (5), 1022-1027 (2013).</li><li>Thankam, F. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+hypoxia+and+mitochondrial+damage+associated+molecular+patterns+in+the+pathogenesis+of+vein+graft+failure:+A+pilot+study.">Association of hypoxia and mitochondrial damage associated molecular patterns in the pathogenesis of vein graft failure: A pilot study.</a> Translational Research: The Journal of Laboratory and Clinical. , 38-52 (2021).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+surgical+model+of+heart+failure+with+preserved+ejection+fraction+in+Tibetan+minipigs.">A surgical model of heart failure with preserved ejection fraction in Tibetan minipigs.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. 180 (180), 63526 (2022).</li><li>Rueda, A. l. c. a. l. &. #. 2. 2. 5. ;., I, , et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+live+porcine+model+for+surgical+training+in+tracheostomy,+neck+dissection,+and+total+laryngectomy.">A live porcine model for surgical training in tracheostomy, neck dissection, and total laryngectomy.</a> European Archives of Oto-Rhino-Laryngology: Official Journal of the European Federation of Oto-Rhino-Laryngological Societies (EUFOS): Affiliated with the German Society for Oto-Rhino-Laryngology - Head and Neck Surgery. 278 (8), 3081-3090 (2021).</li><li>Proudfit, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+value+of+coronary+arteriography.">Prognostic value of coronary arteriography.</a> Cardiovascular Clinics. 12 (2), 1-8 (1981).</li><li>Clark, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+fibroplasia+in+cutaneous+wound+repair.">Regulation of fibroplasia in cutaneous wound repair.</a> TheAmerican Journal of the Medical Sciences. 306 (1), 42-48 (1993).</li><li>Darby, I., Skalli, O., Gabbiani, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alpha-smooth+muscle+actin+is+transiently+expressed+by+myofibroblasts+during+experimental+wound+healing.">Alpha-smooth muscle actin is transiently expressed by myofibroblasts during experimental wound healing.</a> Laboratory Investigation. 63 (1), 21-29 (1990).</li><li>Sterpetti, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+myointimal+hyperplasia+and+cytokine+production+in+experimental+vein+grafts.">Formation of myointimal hyperplasia and cytokine production in experimental vein grafts.</a> Surgery. 123 (4), 461-469 (1998).</li><li>Shannon, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Porcine+model+of+infrarenal+abdominal+aortic+aneurysm.">Porcine model of infrarenal abdominal aortic aneurysm.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. 153 (153), (2019).</li><li>Langille, B. L., O'Donnell, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reductions+in+arterial+diameter+produced+by+chronic+decreases+in+blood+flow+are+endothelium-dependent.">Reductions in arterial diameter produced by chronic decreases in blood flow are endothelium-dependent.</a> Science. 231 (4736), 405-407 (1986).</li><li>Zwolak, R. M., Adams, M. C., Clowes, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kinetics+of+vein+graft+hyperplasia:+Association+with+tangential+stress.">Kinetics of vein graft hyperplasia: Association with tangential stress.</a> Journal of Vascular Surgery. 5 (1), 126-136 (1987).</li><li>Kotani, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+subacute+hypoxic+model+using+a+pig.">A subacute hypoxic model using a pig.</a> Surgery Today. 35 (11), 951-954 (2005).</li><li>Liu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+ketamine-pentobarbital+anesthesia+and+fentanyl-pentobarbital+anesthesia+for+open-heart+surgery+in+minipigs.">Comparison of ketamine-pentobarbital anesthesia and fentanyl-pentobarbital anesthesia for open-heart surgery in minipigs.</a> Lab Animal. 38 (7), 234-240 (2009).</li><li>Geovanini, G. R., Pinna, F. R., Prado, F. A., Tamaki, W. T., Marques, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardization+of+anesthesia+in+swine+for+experimental+cardiovascular+surgeries.">Standardization of anesthesia in swine for experimental cardiovascular surgeries.</a> Revista Brasileira de Anestesiologia. 58 (4), 363-370 (2008).</li><li>Alhomary, M., Ramadan, E., Curran, E., Walsh, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Videolaryngoscopy+vs.+fibreoptic+bronchoscopy+for+awake+tracheal+intubation:+A+systematic+review+and+meta-analysis.">Videolaryngoscopy vs. fibreoptic bronchoscopy for awake tracheal intubation: A systematic review and meta-analysis.</a> Anaesthesia. 73 (9), 1151-1161 (2018).</li><li>Parang, P., Arora, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+vein+graft+disease:+Pathogenesis+and+prevention.">Coronary vein graft disease: Pathogenesis and prevention.</a> Canadian Journal of Cardiology. 25 (2), e57-e62 (2009).</li><li>Egan, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fentanyl+pharmacokinetics+in+hemorrhagic+shock:+a+porcine+model.">Fentanyl pharmacokinetics in hemorrhagic shock: a porcine model.</a> Anesthesiology. 91 (1), 156-166 (1999).</li></ol>

En este estudio, describimos en detalle el protocolo para la selección de animales, la preparación de instrumentos, los procedimientos quirúrgicos y la evaluación postoperatoria al desarrollar un modelo de VGD inducido por CABG. Se realizó un examen ultrasónico del injerto venoso antes y después de la cirugía de CABG y un examen histológico del injerto 30 días después de la cirugía. El flujo sanguíneo en la vena mamaria interna era normal antes de la cirugía de CABG, mientras que el flujo retrógrado se obs...

Aunque la mortalidad por enfermedad coronaria ha disminuido significativamente en los últimos años, la mitad de los adultos de mediana edad en los Estados Unidos desarrollan síntomas isquémicos relacionados con el corazón cada año, y un tercio de los adultos mayores mueren de enfermedad coronaria1. El injerto de derivación de la arteria coronaria (CABG) es una modalidad quirúrgica eficaz para mejorar la isquemia miocárdica y, lo que es más importante, es una modalidad quirúrgica insustituible para el tratamiento de la enfermedad arterial coronaria multivaso2. Con el tiempo, sin embargo, los injertos vasculares desarrollan inflamación, hiperplasia de la íntima y aterosclerosis progresiva, que se sabe que conduce a la insuficiencia del injerto venoso o enfermedad del injerto venoso (VGD)3. En pacientes después de la CABG, si ocurre reestenosis, solo el vaso sanguíneo enfermo puede ser reemplazado en algunos casos2. Los pacientes mayores y las comorbilidades añadidas hacen que rehacer el injerto de derivación de la arteria coronaria sea bastante difícil. Retrasar o controlar los problemas patológicos asociados con los vasos sanguíneos injertados es un problema urgente a resolver. Se necesitan modelos animales grandes de CABG-VGD para la investigación de los mecanismos de la enfermedad y el desarrollo de estrategias terapéuticas. Los investigadores han establecido con éxito modelos animales de VGD en animales pequeños y grandes como ratones4, ratas5, conejos6 y cerdos7. En comparación con los animales pequeños, los animales grandes, como los cerdos, tienen estructuras anatómicas y características fisiológicas similares a las de los humanos y tienen una vida útil más larga 8,9. Por lo tanto, los animales grandes son más adecuados para explorar cambios patológicos a largo plazo en la enfermedad del injerto venoso y para pruebas preclínicas de medicamentos o dispositivos. Nosotros y nuestro equipo colaborador hemos aplicado con éxito técnicas quirúrgicas para establecer un modelo de insuficiencia cardíaca porcina y hemos descrito los cambios patológicos cardíacos en este modelo10.
La cirugía de CABG se ha estandarizado en la práctica clínica, pero cuando se aplica al establecimiento de modelos animales VGD, las diferencias entre especies, la adquisición de equipos e instalaciones para animales, las operaciones quirúrgicas con animales y la alimentación y enfermería de animales son enormes desafíos para los investigadores. Al igual que en la práctica clínica, los enfoques para la cirugía de CABG utilizados para establecer modelos animales de VGD incluyen la esternotomía de la línea media11 y la toracotomía lateral izquierda12. La esternotomía de la línea media se usa más comúnmente13,14. Sin embargo, este enfoque tiene altos riesgos tanto para los seres humanos como para los animales. En el estudio relatado por Thankam et al., dos de los seis cerdos utilizados para modelar murieron durante la cirugía15. La mortalidad alta del modelo aumenta los costos del estudio y afecta la precisión de los resultados. Un estudio mostró anteriormente que una incisión en la pared torácica izquierda era factible para establecer VGD inducida por CABG en cerdos11. Aquí, este estudio tiene como objetivo describir un protocolo paso a paso para establecer una cirugía reproducible para un modelo VGD inducido por CABG en minicerdos y evaluar el fenotipo de este modelo. El protocolo experimental fue diseñado conjuntamente por los equipos de cirugía cardíaca y anestesia. El abordaje quirúrgico para el tercer espacio intercostal izquierdo fue determinado de acuerdo con los cadáveres de otros minipigs en el laboratorio antes de la cirugía, y el método de anestesia fue realizado de acuerdo con el método utilizado en el centro16. Se realizaron pruebas bioquímicas de sangre, examen ultrasónico y examen histológico para evaluar modelos animales.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Aortic Punch</td>
			<td>Medtronic Inc. , America</td>
			<td>3.0mm, 3.5mm, 4.0mm</td>
			<td>Used for proximal coronary bridge anastomosis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automatic biochemical analyzer</td>
			<td>IDEXX Laboratories, Inc. America</td>
			<td>Catalyst One</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cardiac coronary artery bypass grafting instrument kit</td>
			<td>LANDANGER, France</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cardiogram monitor</td>
			<td>Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co, Ltd</td>
			<td>MEC-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coronary Shunt</td>
			<td>AXIUS&#160;</td>
			<td>OF-1500, OF-2500, OF-3000</td>
			<td>The product temporarily blocks the coronary artery during arteriotomy to reduce the amount of bleeding in the surgical field and provide blood flow to the distal end during anastomosis.&#160; The Axius shunt plug is not an implant and should be removed prior to completion of the anastomosis.&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Defibrillator</td>
			<td>MEDIANA</td>
			<td>Mediana D500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diazepam</td>
			<td>Nanguo pharmaceutical Co. LTD, Guangdong, China</td>
			<td>H37023039&#160;</td>
			<td>Narcotic inducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable manual electric knife</td>
			<td>Covidien, America</td>
			<td>E2516H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric negative pressure suction machine</td>
			<td>Shanghai Baojia Medical Instrument Co, Ltd</td>
			<td>YX932D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Esmolol</td>
			<td>Guangzhou Wanzheng Pharmaceutical Co. LTD</td>
			<td>H20055990</td>
			<td>Emergency drugs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ice machine&#160;</td>
			<td>Local suppliers, Guangzhou, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine&#160;</td>
			<td>Chengdu First Pharmaceutical Co. LTD</td>
			<td>H51021662</td>
			<td>Emergency drugs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luxtec headlight system</td>
			<td>Luxtec, America</td>
			<td>AX-1375-BIF</td>
			<td>Used for lighting fine parts during operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical operation magnifier (glasses)</td>
			<td>Germany Lista co, LTD</td>
			<td>SuperVu Galilean 3.5&#215;</td>
			<td>Used for fine site operation during operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi-function high-frequency electrotome</td>
			<td>Shanghai Hutong Electronics Co, Ltd</td>
			<td>GD350-B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitrogen canister</td>
			<td>Local suppliers, Guangzhou, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nonabsorbable surgical suture (polypropylene suture)</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson, America</td>
			<td>6-0, 7-0</td>
			<td>Used to suture blood vessels.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nonabsorbable suture (cotton thread)</td>
			<td>Covidien, America</td>
			<td>1-0</td>
			<td>Used for skin and muscle tissue tugging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Open heart surgery instrument kit</td>
			<td>Shanghai Medical Instrument (Group) Co., LTD</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propofol injection</td>
			<td>Xi &#39;an Libang Pharmaceutical Co. LTD</td>
			<td>H19990282</td>
			<td>Anesthetic sedative</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refrigerator</td>
			<td>Local suppliers, Guangzhou, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Respiratory anesthesia machine for animal</td>
			<td>Shenzhen Reward Life Technology Co, Ltd, China</td>
			<td>R620-S1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-occlusion clamp</td>
			<td>Xinhua Surgical Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>ZL1701RB</td>
			<td>Temporarily cut off the aortic flow</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>vecuronium bromide</td>
			<td>Richter, Hungary&#160;</td>
			<td>JX20090127</td>
			<td>Muscle relaxant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary ultrasound system&#160;</td>
			<td>Royal Philips, Netherlands</td>
			<td>CX50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zoletil</td>
			<td>Virbac, France</td>
			<td>Zoletil 50&#160;</td>
			<td>Animal narcotic</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

establishment and evaluation of a porcine vein graft disease model

La enfermedad del injerto venoso (VGD) es la principal causa de insuficiencia del injerto de derivación de la arteria coronaria (CABG). Se necesitan modelos animales grandes de CABG-VGD para la investigación de los mecanismos de la enfermedad y el desarrollo de estrategias terapéuticas. 
Para realizar la cirugía, entramos en la cámara cardíaca a través del tercer espacio intercostal y diseccionamos cuidadosamente la vena mamaria interna y la sumergimos en solución salina normal. La arteria coronaria principal derecha se trata entonces para la isquemia. Se incide el vaso objetivo, se coloca un tapón de derivación y se anastomosa el extremo distal de la vena del injerto. La aorta ascendente está parcialmente bloqueada y el extremo proximal de la vena del injerto se anastomosa después de la perforación. Se revisa la vena del injerto para detectar permeabilidad y se liga la arteria coronaria derecha proximal. 
La cirugía de CABG se realiza en minicerdos para cosechar la vena mamaria interna izquierda para su uso como injerto vascular. Las pruebas bioquímicas séricas se utilizan para evaluar el estado fisiológico de los animales después de la cirugía. El examen de ultrasonido muestra que el extremo proximal, medio y distal del vaso del injerto no están obstruidos. En el modelo quirúrgico, se observa un flujo sanguíneo turbulento en el injerto tras el examen histológico después de la cirugía de CABG, y se observa estenosis del injerto venoso asociada con hiperplasia de la íntima en el injerto. El estudio aquí proporciona procedimientos quirúrgicos detallados para el establecimiento de un modelo repetible de VGD inducido por CABG.

IMC e índices bioquímicos séricos El IMC entre los grupos simulado y VGD no fue significativamente diferente (simulado vs. VGD, 22,05 kg/cm 2 ± 0,46 kg/cm 2 vs. 21,14 kg/cm 2 ± 0,39 kg/cm 2, p = 0,46). Los resultados bioquímicos séricos se enumeran en la Tabla 1. Se encontraron cambios estadísticamente significativos entre los grupos en cuatro índices bioquímicos, incluyendo aspartato aminotransferasa (AST, simulada vs. VG...

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Establishment and Evaluation of a Porcine Vein Graft Disease Model

En este protocolo, el nuevo injerto de derivación de la vena porcina se realizó a través de una pequeña incisión en la pared torácica izquierda sin bypass cardiopulmonar. Se realizó un estudio patológico postoperatorio, que mostró engrosamiento de la íntima.

Establecimiento y evaluación de un modelo de enfermedad por injerto de vena porcina

Venous graft disease (VGD) is the leading cause of coronary artery bypass graft (CABG) failure. Large animal models of CABG-VGD are needed for the ...

Este modelo proporciona un protocolo estándar para establecer modelos animales de enfermedad coronaria del injerto. El procedimiento de modelo animal establecido por este método es estándar y el resultado es estable. Para comenzar, divida los minicerdos machos de tres meses de edad que pesen de 30 a 35 kilogramos en los grupos de enfermedad de injerto venoso y simulado de cinco animales cada uno.Después de anestesiar al animal, establezca el acceso al oído insertando un catéter venoso permanente en la vena marginal del oído. Ahora, transfiera el cerdo a la mesa de operaciones en posición supina. Realice la intubación traqueal con un tubo de calibre francés de 7.0 a 7.5 y conéctelo al circuito de respiración de anestesia.Inmovilice las extremidades con vendajes y eleve la cabeza con una cortina estéril. Después de inyectar bromuro de vecuronio por vía intravenosa para la relajación muscular, controle la frecuencia cardíaca, los niveles de oxígeno en la sangre y la temperatura corporal mediante un electrocardiograma. Después de afeitarse y esterilizar el área quirúrgica, coloque una cortina quirúrgica estéril a su alrededor.Después de hacer la incisión y exponer la vena mamaria interna como se describe en el texto, localice la vena mamaria interna y la arteria mamaria interna izquierda en el lado izquierdo del esternón, y realice una disección roma de la vena mamaria interna con fórceps vasculares. Realizar hemostasia por electrocoagulación de las ramas de la vena mamaria interna izquierda con un cuchillo eléctrico. Si la hemostasia es incompleta, usando hilo de algodón, ligar y marcar los dos extremos de la vena mientras se cosecha.Una vez que se retira la vena, inyecte heparina, solución salina normal en la vena para el tratamiento previo. Luego, coloque la vena en la solución salina normal, guárdela como respaldo y, de manera similar, incise la vena mamaria interna del grupo simulado. Luego, abra el pericardio, cierre la pared torácica y use la vena mamaria interna para el control patológico sin injerto de derivación de la arteria coronaria.Haga una incisión de aproximadamente siete centímetros con un cuchillo eléctrico en el pericardio para exponer el tronco de la arteria coronaria derecha. Suspenda el pericardio y cose la piel del lado ipsilateral con suturas quirúrgicas 1-0. Ahora, separe el tronco de la arteria coronaria derecha de los tejidos circundantes.Luego, usando un gancho de alambre, evite la banda de bloqueo debajo del extremo proximal de la arteria coronaria derecha aislada cerca de la aorta. Luego, trate el miocardio con tres ciclos de isquemia de dos minutos y cinco minutos de reperfusión apretando y relajando la banda de bloqueo. Además, controle la actividad eléctrica del corazón con el electrocardiograma durante el preacondicionamiento de la isquemia de reperfusión.Luego, corte el epicardio que cubre los vasos sanguíneos después de apretar la banda para bloquear el flujo sanguíneo coronario derecho. Exponer la pared de la arteria coronaria, cortada longitudinalmente con la punta de una cuchilla quirúrgica contra el centro de la pared anterior de los vasos sanguíneos. Después de cortar la luz y agrandar la incisión y colocar una derivación coronaria, inserte un extremo de la derivación con una bobina en la arteria coronaria distal a través del desgarro.Ahora, desvíe la sangre en las arterias coronarias hacia la derivación coronaria hueca para garantizar un campo quirúrgico despejado, y realice una sutura continua de extremo a lado entre la vena mamaria interna y la pared aórtica con la sutura de polipropileno 6-0. En el centro de la aorta ascendente, ocluya la pared anterolateral izquierda de la aorta ascendente con una pinza de semioclusión. Después de hacer una pequeña incisión con la cuchilla quirúrgica en la pared aórtica donde se ha cortado la adventicia, inserte el extremo de la cabeza del eje deslizante en el extremo de la cabeza del punzón en la cavidad aórtica a través de esta incisión.Luego, contrae el eje deslizante hacia afuera y el cuchillo circular corta un pedazo de la pared arterial. Una vez que se extrae la derivación, realice una sutura continua de extremo a lado entre la vena mamaria interna y la arteria coronaria derecha con la sutura de polipropileno 6-0. Después de abrir la pinza de semioclusión, registre el flujo de derivación del tronco de la arteria coronaria derecha proximal al sitio de anastomosis mediante ultrasonido.Prepare al animal para la cirugía como se demostró anteriormente. Y con un cuchillo eléctrico, haga una incisión esternal mediana de 10 centímetros para dividir el esternón y cosechar la vena 30 días después de la cirugía. Durante la separación, evite los vasos sanguíneos principales, el corazón y separe los vasos sanguíneos injertados capa por capa.Corte rápidamente los vasos sanguíneos grandes que se conectan al corazón y coloque el corazón y la aorta ascendente en trozos de hielo. Una vez que se eliminan el puente vascular del injerto, la aorta conectada y la arteria coronaria derecha, enjuague todas las muestras con solución salina normal a cuatro grados centígrados. Después de tomar todo el recipiente de injerto de aproximadamente tres a cuatro centímetros y dividirlo en cuatro o cinco partes iguales, transfiéralo a CryoTubes para congelarlo rápidamente en nitrógeno líquido.Para el análisis, fije el injerto helado y enjuagado con solución salina en solución de paraformaldehído al 4%. Después de 12 horas de fijación del tejido, tiñe las secciones en 50 mililitros de una solución acuosa de hematoxilina durante tres minutos. Luego, separe las secciones lavando con 50 mililitros de ácido clorhídrico-etanol al 0,5% y agua con 0,2% de amoníaco durante 10 segundos cada una.Una vez que las secciones se enjuagen durante una hora con agua corriente, límpielas remojándolas en agua destilada durante tres minutos. Después de deshidratar las secciones en etanol al 70% y 90% durante 10 minutos, colóquelas en 50 mililitros de solución de tinción de eosina al 0,5% de alcohol durante dos o tres minutos. Una vez que las secciones teñidas estén deshidratadas en etanol puro, remoje las muestras en xileno puro durante 10 minutos para hacerlas transparentes.Finalmente, gotee las secciones transparentes con pegamento neutro antes de cubrirlas con un cubreobjetos. Observe secciones patológicas bajo un microscopio óptico a 40 veces el aumento. El examen ultrasónico mostró que la dirección general del flujo sanguíneo era normal en el extremo proximal, la cavidad vascular y el extremo distal del vaso del injerto.Sin embargo, los extremos proximal y distal del vaso del injerto mostraron algún flujo retrógrado de sangre. El análisis histológico de la vena mamaria interna reveló que en el grupo simulado la túnica íntima, la túnica media y la pared venosa del injerto venoso parecían normales. Sin embargo, 30 días después del trasplante de arteria coronaria, la íntima del vaso se engrosó y la luz se estrechó.Entre los grupos de enfermedad de injerto simulado y venoso, cuatro índices bioquímicos, aspartato aminotransferasa, bilirrubina sérica, bilirrubina total y creatinina, mostraron cambios estadísticamente significativos. El cirujano debe exponer completamente la vena mamaria interna y asegurarse de que no esté unida al tejido circundante. La técnica proporciona un proceso de modelado estandarizado para estudiar enfermedades de injertos venosos en modelos animales.

Research

JoVE Journal

Medicine

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Medicina

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