Name: methods for rearing the parasitoid ganaspis brasiliensis, a promising biological control agent for the invasive drosophila suzukii
Uploaded: 2022-06-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Methods for Rearing the Parasitoid Ganaspis brasiliensis, a Promising Biological Control Agent for the Invasive Drosophila suzukii at JoVE.com

Les auteurs remercient Lukas Seehausen et Marc Kenis (CABI, Suisse) d’avoir aimablement fourni G1 G. brasiliensis. Le financement en Italie a été fourni par provincia autonoma di Trento, Trento, Italie, et aux États-Unis par l’Institut national de l’alimentation et de l’agriculture, le prix USDA Specialty Crops Research Initiative (#2020-5118-32140), le service d’inspection de la santé animale et végétale de l’USDA (Farm Bill, fonds 14-8130-0463) et les fonds de base USDA ARS CRIS (projet 8010-22000-033-00D). L’USDA est un fournisseur et un employeur d’égalité des chances et ne cautionne pas les produits mentionnés dans cette publication.

1. Méthodes d’élevage en laboratoire à petite échelle de G3 Ganaspis brasiliensis
<ol><li>Préparez le régime alimentaire de l’hôte.<ol>
<li>Ajouter 600 mL d’eau distillée dans un récipient en verre de 1 500 mL et chauffer l’eau sur une plaque chauffante.</li>
		<li>Ajouter 88,6 g de régime sec disponible dans le commerce (à base d’agar, de levure de bière, de farine de maïs, de méthylparabène et de saccharose) ou préparer un régime alimentaire en utilisant la formule...

<ol>
	<li>Asplen, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasion+biology+of+spotted+wing+drosophila+(Drosophila+suzukii):+a+global+perspective+and+future+priorities.">Invasion biology of spotted wing drosophila (Drosophila suzukii): a global perspective and future priorities.</a> Journal of Pest Science. 88 (3), 469-494 (2015).</li><li>Tait, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+suzukii+(Diptera:+Drosophilidae):+A+decade+of+research+towards+a+sustainable+integrated+pest+management+program.">Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae): A decade of research towards a sustainable integrated pest management program.</a> Journal of Economic Entomology. 114 (5), 1950-1974 (2021).</li><li>Kirschbaum, D. S., Funes, C. F., Buonocore-Biancheri, M. J., Su&#225;rez, L., Ovruski, S. M., Garcia, F. R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biology+and+ecology+of+Drosophila+suzukii+(Diptera:+Drosophilidae).">The biology and ecology of Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae).</a> Drosophila suzukii management. , 41-92 (2020).</li><li>Wang, X. G., Lee, J. C., Daane, K. M., Buffington, M. L., Hoelmer, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Biological control of Drosophila suzukii.</a> CAB Reviews. 15, 054 (2020).</li><li>Lee, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+control+of+spotted-wing+drosophila+(Diptera:+Drosophilidae):+Current+and+pending+tactics.">Biological control of spotted-wing drosophila (Diptera: Drosophilidae): Current and pending tactics.</a> Journal of Integreated Pest Management. 10 (1), 13 (2019).</li><li>Wang, X. G., Lee, J. C., Daane, K. M., Hoelmer, K. A., Garcia, F. R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+control+of+spotted-wing+drosophila:+An+update+on+promising+agents.">Biological control of spotted-wing drosophila: An update on promising agents.</a> Drosophilia suzukii management. , 143-167 (2020).</li><li>Daane, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+exploration+of+parasitoids+of+Drosophila+suzukii+in+South+Korea+as+potential+classical+biological+agents.">First exploration of parasitoids of Drosophila suzukii in South Korea as potential classical biological agents.</a> Journal of Pest Science. 89 (3), 823-835 (2016).</li><li>Giorgini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploration+for+native+parasitoids+of+Drosophila+suzukii+in+China+reveals+a+diversity+of+parasitoid+species+and+narrow+host+range+of+the+dominant+parasitoid.">Exploration for native parasitoids of Drosophila suzukii in China reveals a diversity of parasitoid species and narrow host range of the dominant parasitoid.</a> Journal of Pest Science. 92 (2), 509-522 (2019).</li><li>Girod, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+parasitoid+complex+of+D.+suzukii+and+other+fruit+feeding+Drosophila+species+in+Asia.">The parasitoid complex of D. suzukii and other fruit feeding Drosophila species in Asia.</a> Scientific Reports. 8 (1), 11839 (2018).</li><li>Kacsoh, B. Z., Schlenke, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+hemocyte+load+is+associated+with+increased+resistance+against+parasitoids+in+Drosophila+suzukii,+a+relative+of+D.+melanogaster.">High hemocyte load is associated with increased resistance against parasitoids in Drosophila suzukii, a relative of D. melanogaster.</a> PLoS ONE. 7 (4), 34721 (2012).</li><li>Buffington, M. L., Forshage, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Redescription+of+Ganaspis+brasiliensis+(Ihering,+1905),+new+combination+(Hymenoptera:+Figitidae),+a+natural+enemy+of+the+invasive+Drosophila+suzukii+(Matsumura,+1931)(Diptera:+Drosophilidae).">Redescription of Ganaspis brasiliensis (Ihering, 1905), new combination (Hymenoptera: Figitidae), a natural enemy of the invasive Drosophila suzukii (Matsumura, 1931)(Diptera: Drosophilidae).</a> Procedings of the Entomoogical Society of Washington. 118 (1), 1-13 (2016).</li><li>Biondi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innate+olfactory+responses+of+Asobara+japonica+(Hymenoptera:+Braconidae)towards+fruits+infested+by+the+invasive+spotted+wing+drosophila.">Innate olfactory responses of Asobara japonica (Hymenoptera: Braconidae)towards fruits infested by the invasive spotted wing drosophila.</a> Journal of Insect Behavior. 30 (5), 495-506 (2017).</li><li>Biondi, A., Wang, X. G., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+preference+of+three+Asian+larval+parasitoids+to+closely+related+Drosophila+species:+implications+for+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Host preference of three Asian larval parasitoids to closely related Drosophila species: implications for biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 94 (2), 273-283 (2021).</li><li>Girod, P., Rossignaud, L., Haye, T., Turlings, T. C. J., Kenis, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+Asian+parasitoids+in+larvae+of+Drosophila+suzukii+feeding+on+blueberry+and+artificial+diet.">Development of Asian parasitoids in larvae of Drosophila suzukii feeding on blueberry and artificial diet.</a> Journal of Applied Entomology. 142 (5), 483-494 (2018).</li><li>Wang, X. G., Nance, A. H., Jones, J. M. L., Hoelmer, K. A., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aspects+of+the+biology+and+reproductive+strategy+of+two+Asian+larval+parasitoids+evaluated+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Aspects of the biology and reproductive strategy of two Asian larval parasitoids evaluated for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 121, 58-65 (2018).</li><li>Wang, X. G., Biondi, A., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+responses+of+three+candidate+Asian+larval+parasitoids+evaluated+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Functional responses of three candidate Asian larval parasitoids evaluated for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Economic Entomology. 113 (1), 73-80 (2020).</li><li>Wang, X. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+Asobara+japonica+as+a+potential+biological+control+agent+for+the+spotted+wing+drosophila,+Drosophila+suzukii.">Assessment of Asobara japonica as a potential biological control agent for the spotted wing drosophila, Drosophila suzukii.</a> Entomologia Generalis. 41, 1-12 (2021).</li><li>Hougardy, E., Hogg, B. N., Wang, X. G., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+thermal+performances+of+two+Asian+larval+parasitoids+of+Drosophila+suzukii.">Comparison of thermal performances of two Asian larval parasitoids of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 136, 104000 (2019).</li><li>Wang, X. G., Hogg, B. N., Hougardy, E., Nance, A. H., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+competitive+outcomes+among+three+solitary+larval+endoparasitoids+as+candidate+agents+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Potential competitive outcomes among three solitary larval endoparasitoids as candidate agents for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 130, 18-26 (2019).</li><li>Daane, K. M., Biondi, A., Wang, X. G., Hogg, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+host+ranges+of+three+Asian+larval+parasitoids+of+Drosophila+suzukii.">Potential host ranges of three Asian larval parasitoids of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 94 (4), 1171-1182 (2021).</li><li>Girod, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+specificity+of+Asian+parasitoids+for+potential+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Host specificity of Asian parasitoids for potential classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 91 (4), 1241-1250 (2018).</li><li>Seehausen, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+a+cryptic+parasitoid+species+reveals+its+suitability+as+a+biological+control+agent.">Evidence for a cryptic parasitoid species reveals its suitability as a biological control agent.</a> Scientific Reports. 10 (1), 19096 (2020).</li><li>Nomano, F. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+differentiation+of+Ganaspis+brasiliensis+(Hymenoptera:+Figitidae)+from+East+and+Southeast+Asia.">Genetic differentiation of Ganaspis brasiliensis (Hymenoptera: Figitidae) from East and Southeast Asia.</a> Applied Entomology and Zoology. 52 (3), 429-437 (2017).</li><li>Kasuya, N., Mitsui, H., Ideo, S., Watada, M., Kimura, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ecological,+morphological+and+molecular+studies+on+Ganaspis+individuals+(Hymenoptera:+Figitidae)+attacking+Drosophila+suzukii+(Diptera:+Drosophilidae).">Ecological, morphological and molecular studies on Ganaspis individuals (Hymenoptera: Figitidae) attacking Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae).</a> Applied Entomology and Zoology. 48 (1), 87-92 (2013).</li><li>Matsuura, A., Mitsui, H., Kimura, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+preliminary+study+on+distributions+and+oviposition+sites+of+Drosophila+suzukii+(Diptera:+Drosophilidae)+and+its+parasitoids+on+wild+cherry+tree+in+Tokyo,+central+Japan.">A preliminary study on distributions and oviposition sites of Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae) and its parasitoids on wild cherry tree in Tokyo, central Japan.</a> Applied Entomology and Zoology. 53 (1), 47-53 (2018).</li><li>Abram, P. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+records+of+Leptopilina,+Ganaspis,+and+Asobara+species+associated+with+Drosophila+suzukii+in+North+America,+including+detections+of+L.+japonica+and+G.+brasiliensis.">New records of Leptopilina, Ganaspis, and Asobara species associated with Drosophila suzukii in North America, including detections of L. japonica and G. brasiliensis.</a> Journal of Hymenoptera Research. 78, 1-17 (2020).</li><li>Puppato, S., Grassi, A., Pedrazzoli, F., De Cristofaro, A., Ioriatti, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+report+of+Leptopilina+japonica+in+Europe.">First report of Leptopilina japonica in Europe.</a> Insects. 11 (9), 611 (2020).</li><li>Dalton, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+survival+of+Drosophila+suzukii+under+simulated+winter+conditions+of+the+Pacific+Northwest+and+seasonal+field+trapping+in+five+primary+regions+of+small+and+stone+fruit+production+in+the+United+States.">Laboratory survival of Drosophila suzukii under simulated winter conditions of the Pacific Northwest and seasonal field trapping in five primary regions of small and stone fruit production in the United States.</a> Pest Managagement Science. 67 (11), 1368-1374 (2011).</li></ol>

La recherche à long terme et les rejets ultérieurs sur le terrain d’un agent de lutte biologique dépendent de la disponibilité de techniques d’élevage efficaces et économiques. Les méthodes décrites dans cette étude se sont avérées être des protocoles efficaces pour l’élevage à petite et à grande échelle de Ganaspis brasiliensis. Le protocole d’élevage à petite échelle a été développé sur plusieurs années pour optimiser la quantité de main-d’œuvre et réduire l’équipement s...

Originaire d’Asie de l’Est, la drosophile à ailes tachetées, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), s’est largement établie dans les Amériques, en Europe et dans certaines parties de l’Afrique 1,2. La mouche est extrêmement polyphage, étant capable d’utiliser divers fruits cultivés et sauvages à la peau douce et fine dans ses régions indigènes et envahies 1,2,3. Les stratégies actuelles de lutte contre ce ravageur reposent fortement sur l’utilisation fréquente d’insecticides qui ciblent les mouches adultes dans les champs de culture lorsque les fruits sensibles mûrissent. Des pulvérisations répétées sont souvent utilisées, peut-être en raison du débordement constant des populations de mouches des réservoirs provenant d’habitats non cultivés et du manque d’ennemis naturels efficaces résidant dans les régions envahies 1,4. La lutte biologique, en particulier au moyen de parasitoïdes spécialisés auto-entretenus, peut aider à supprimer les populations de mouches au niveau du paysage et jouer un rôle essentiel pour la gestion durable à l’échelle de la zone de ce ravageur hautement mobile et polyphage 4,5,6.
Au cours de la dernière décennie, les chercheurs ont concentré leurs efforts pour découvrir des parasitoïdes co-évolués de Drosophila suzukii dans les aires de répartition indigènes de la mouche en Asie de l’Est 7,8,9, ainsi que des parasitoïdes efficaces mais nouvellement associés dans les régions envahies par la mouche en Amérique et en Europe 4,5,6. Dans les régions nouvellement envahies de la mouche, les larves parasitoïdes drosophiles courantes, telles que Asobara c.f. tabida (Nees) (Hymenoptera: Braconidae), Leptopilina boulardi (Barbotin et al.) et L. heterotoma (Thompson) (Hymenoptera: Figitidae), sont incapables de se développer ou ont de faibles niveaux de parasitisme sur D. suzukii en raison de la forte résistance immunitaire de la mouche10. Seuls quelques parasitoïdes nymphaux cosmopolites et généralistes tels que Pachycrepoideus vindemiae (Rondani) (Hyménoptères: Pteromalidae) et Trichopria drosophilae (Perkins) (Hyménoptères: Diapriidae) en Amérique du Nord et en Europe, et Trichopria anastrephae Lima en Amérique du Sud peuvent facilement se développer à partir de cette mouche4. En revanche, des explorations en Asie de l’Est ont découvert un certain nombre de parasitoïdes larvaires de D. suzukii 4,5,6. Parmi eux, Asobara japonica Belokobylskij, Ganaspis brasiliensis Ihering et Leptopilina japonica Novković & Kimura sont les parasitoïdes larvaires dominants 7,8,9,11. En particulier, les deux figitidés (L. japonica et G. brasiliensis) étaient les principaux parasitoïdes que l’on trouve principalement dans les fruits frais infestés par D. suzukii et/ou d’autres drosophiles étroitement apparentés dans la végétation naturelle 7,8,9. Ces trois parasitoïdes larvaires asiatiques ont été importés dans des installations de quarantaine aux États-Unis et en Europe, et évalués pour leur efficacité relative 12,13,14,15,16,17, leur adaptabilité climatique 18, leurs interactions concurrentielles interspécifiques potentielles19 et, surtout, leur spécificité de l’hôte 8,20,21 ,22.
Les évaluations de quarantaine ont montré que Ganaspis brasiliensis était plus spécifique à l’hôte de Drosophila suzukii que d’autres parasitoïdes larvaires asiatiques testés, bien qu’il se compose probablement de différents biotypes ou espèces cryptiques avec une spécificité d’hôte variable 8,21,22,23,24. Nomano et al.22 ont regroupé des individus Ganaspis de différentes régions géographiques en cinq groupes génétiques (nommés G1-G5) sur la base d’analyses moléculaires du fragment du gène de la cytochrome oxydase I mitochondriale. Les groupes G2 et G4 ne sont signalés que dans quelques endroits tropicaux d’Asie du Sud, et le groupe G5 a été signalé en Asie et dans d’autres régions (p. ex., Argentine, Brésil, Hawaï et Mexique) à partir d’hôtes inconnus (Buffington, observation personnelle). Des collections sur le terrain de fruits sauvages infestés par D. suzukii en Corée du Sud7, en Chine8 et au Japon 9,23,25 ont trouvé G1 seul ou un mélange de spécimens représentant les groupes G1 et G3. Les deux groupes semblent sympatriques et coexistent sur les mêmes plantes hôtes habitées par D. suzukii et d’autres mouches hôtes étroitement apparentées. Néanmoins, certaines différences ont été observées entre les deux groupes, G1 ayant apparemment un degré plus élevé de spécificité de l’hôte ou de l’habitat de l’hôte à D. suzukii que G3, bien qu’ils attaquent tous deux un certain nombre d’espèces étroitement apparentées dans les tests de quarantaine21,22. D’autres analyses moléculaires détaillées peuvent aider à déterminer le statut de l’espèce, en particulier pour les groupes G1 et G3. Cette étude les désigne sous le nom de G1 G. brasiliensis et G3 G. brasiliensis. Certaines des premières études ont également nommé le G1 G. brasiliensis G. cf. brasiliensis 14,21,22. Le G1 G. brasiliensis a récemment été approuvé pour la libération sur le terrain contre D. suzukii aux États-Unis et en Italie (plusieurs autres pays européens envisagent également son introduction), tandis que le G3 G. brasiliensis pourrait être envisagé pour une libération sur le terrain dans un proche avenir. Des enquêtes récentes ont également révélé des populations adventives de L. japonica et de G1 G. brasiliensis en Colombie-Britannique, Canada26, et dans l’État de Washington, États-Unis (Beers et al., données non publiées), et des populations adventives de L. japonica dans la province de Trento, en Italie27.
Compte tenu de l’intérêt considérable suscité par l’élaboration de programmes de lutte biologique pour la prise en charge de Drosophila suzukii et du potentiel considérable de lutte biologique des introductions adventives et délibérées de Ganaspis brasiliensis, il est nécessaire de mettre au point des méthodes d’élevage efficaces pour ce parasitoïde larvaire en vue de futures recherches à long terme et/ou d’une libération sur le terrain. Ce protocole et l’article vidéo associé décrivent deux ensembles de méthodes d’élevage pour ce parasitoïde: (1) l’élevage en laboratoire à petite échelle dans des flacons en utilisant un mélange de fruits hôtes (myrtille) et un régime artificiel pour la culture de D. suzukii. Les méthodes ont été développées à l’aide de matériel G3 collecté à l’origine à Kunming, en Chine8. (2) Élevage en masse pour la libération en plein champ dans de grandes cages utilisant des fruits hôtes (myrtille) pour la culture de D. suzukii. Le groupe génétique utilisé pour l’élevage à grande échelle était le stock G1 originaire de Tokyo, au Japon 9,22. D’autres échelles de méthodes d’élevage, telles que l’utilisation de flacons ou de petits conteneurs pour les deux groupes, sont également brièvement discutées.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Active dry yeast</td>
			<td>Fleischmanns Yeast, Cincinatti, OH, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to cover fruit to reduce mold growth and enhance the frui attraction to the flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bacteriological agar</td>
			<td>Merk Life Science S.r.l., Milan, Italy</td>
			<td>A1296 - 5KG</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bleach solution</td>
			<td>Clorox Company, Oakland, CA, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to disinfect flesh fruit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blue stopper</td>
			<td>Azer Scientific, Morgantown, PA, USA</td>
			<td>ES3837</td>
			<td>Used for sealing the tube while allowing ventilation for insects</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blueberries</td>
			<td>Grocery Store, Newark, DE, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Provided as host fruit for the flies (various other fruit can also be used)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BugDorm insect rearing cage (W24.5 x D24.5 x H63.0 cm)</td>
			<td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan</td>
			<td>4E3030</td>
			<td>Used for rearing parasitoids (parasitism cage)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BugDorm insect rearing cage (W32.5 x D32.5 x H32.5 cm)</td>
			<td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan</td>
			<td>4E4590</td>
			<td>Used for rearing flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BugDorm insect rearing cage (W32.5 x D32.5 x H32.5 cm)</td>
			<td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan</td>
			<td>4E4545</td>
			<td>Used for rearing parasitoids (eclosion cage)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chicken wire (0.64 cm, 19 gauge)</td>
			<td>Everbilt, OH, USA</td>
			<td>308231EB</td>
			<td>Used to lift up the fruit to allow maximum parasitoid oviposition</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cornmeal</td>
			<td>Grocery Store, Trento, TN, Italy</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dental cotton roll (1 x 3.8 cm)</td>
			<td>Gima S.p.A., Gessate, MI, Italy</td>
			<td>35000</td>
			<td>Used for providing water to the parasitoids within the storage container</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila diet</td>
			<td>Frontier Scientific, Newark, DE, USA</td>
			<td>TF1003</td>
			<td>Custom diet used to rear flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila vial narrow, Polystirene (2.5 x 9.5 cm)</td>
			<td>VWR International, LLC., Radnor, PA, US</td>
			<td>75813-160</td>
			<td>Used for providing water to the parasitoids within the cage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila vial plugs, Cellulose acetate (2.5 cm)</td>
			<td>VWR International, LLC., Radnor, PA, US</td>
			<td>89168-886</td>
			<td>Used for providing water to the parasitoids within the cage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Erlenmeyer flask (250 mL)</td>
			<td>Carolina Biological, Burlington, NC, USA</td>
			<td>731029</td>
			<td>Used for rearing flies and parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon-style centrifuge tube (50 mL)</td>
			<td>VWR International, LLC., Radnor, PA, US</td>
			<td>VWRI525-0611</td>
			<td>Modified to ship adult parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foam stopper</td>
			<td>Jaece Industries, North Tanawanda, NY, USA</td>
			<td>L800-C</td>
			<td>Used for sealing the flasks while allowing ventilation for insects</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Honey</td>
			<td>Grocery Store, Newark, DE, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Provided as food for parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Identi-Plug plastic foam stopper</td>
			<td>Fisher Scientific Company, L.L.C., Pittsburg, PA, US</td>
			<td>14-127-40E</td>
			<td>Used as feeder for parasitoids and to seal the storage container</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Industrial paper towel</td>
			<td>Grocery Store, Newark, DE, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Provided as a pupation substrate for pupae and mitigated moisture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micron mesh fabric (250 mL)</td>
			<td>Industrial Netting, Maple Grove, MN, USA</td>
			<td>WN0250-72</td>
			<td>Used to make ventilation lid for insects</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nutritional yeast (flakes)</td>
			<td>Grocery Store, Trento, TN, Italy</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paper coaster (10.2 cm)</td>
			<td>Hoffmaster, WI, USA</td>
			<td>35NG26</td>
			<td>Porvided as pupation substrate for flies and parsitized pupae</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic cup (&#216; 13.3 cm, 800 mL)</td>
			<td>Berry Superfos, Taastrup, Denmark</td>
			<td>Unipak 5134</td>
			<td>Modified to store adult parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic lid (&#216; 13.3 cm)</td>
			<td>Berry Superfos, Taastrup, Denmark</td>
			<td>PP 2830</td>
			<td>Modified to store adult parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propionic acid</td>
			<td>Merk Life Science S.r.l., Milan, Italy</td>
			<td>P1386 - 1L</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saccharose</td>
			<td>Grocery Store, Trento, TN, Italy</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soup cup with lid (475 mL)</td>
			<td>StackMan, Vietnam</td>
			<td>DC1648</td>
			<td>Used for parasitized larvae to pupate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soybean flour</td>
			<td>Grocery Store, Trento, TN, Italy</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>White felt washer (0.64 cm thick, 5 mm ID x 20 mm OD)</td>
			<td>Quiklok, Lincoln, NH, US</td>
			<td>WFW/.25 x 5 x 20 mm</td>
			<td>Used as feeding ring for parasitoids</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

methods for rearing the parasitoid ganaspis brasiliensis, a promising biological control agent for the invasive drosophila suzukii

Originaire d’Asie de l’Est, la drosophile à ailes tachetées, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), s’est largement établie dans les Amériques, en Europe et dans certaines parties de l’Afrique au cours de la dernière décennie, devenant un ravageur dévastateur de divers fruits à peau douce dans ses régions envahies. La lutte biologique, en particulier au moyen de parasitoïdes auto-entretenus et spécialisés, devrait être une option viable pour la gestion durable à l’échelle de la zone de ce ravageur hautement mobile et polyphage. Ganaspis brasiliensis Ihering (Hymenoptera: Figitidae) est un parasitoïde larvaire qui est largement distribué en Asie de l’Est, et s’est avéré être l’un des parasitoïdes les plus efficaces de D. suzukii.
Après des évaluations rigoureuses avant l’introduction de son efficacité et des risques potentiels non ciblés, l’un des groupes génétiques les plus spécifiques à l’hôte de cette espèce (G1 G. brasiliensis) a récemment été approuvé pour l’introduction et la libération sur le terrain aux États-Unis et en Italie. Un autre groupe génétique (G3 G. brasiliensis), qui a également été couramment trouvé pour attaquer D. suzukii en Asie de l’Est, pourrait être envisagé pour l’introduction dans un proche avenir. Il y a actuellement un énorme intérêt pour l’élevage de G. brasiliensis à des fins de recherche ou de production de masse pour la libération sur le terrain contre D. suzukii. Ce protocole et l’article vidéo associé décrivent des méthodes d’élevage efficaces pour ce parasitoïde, à la fois à petite échelle pour la recherche et à grande échelle pour la production de masse et la libération sur le terrain. Ces méthodes pourraient bénéficier à d’autres recherches à long terme et à l’utilisation de ce parasitoïde originaire d’Asie comme agent de lutte biologique prometteur pour ce ravageur envahissant mondial.

La figure 4 montre les résultats représentatifs de l’élevage en laboratoire à petite échelle de G3 Ganaspis brasiliensis en utilisant deux densités parasitoïdes différentes (six ou 10 paires) et deux temps d’exposition différents (5 ou 10 jours) à l’installation de quarantaine de l’USDA-ARS Beneficial Insects Introduction Unit (Newark, Delaware). Il y avait 14 répétitions pour chaque combinaison de densité parasitoïde et de temps d’exposition. Au total, les 6...

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Methods for Rearing the Parasitoid Ganaspis brasiliensis, a Promising Biological Control Agent for the Invasive Drosophila suzukii

Ganaspis brasiliensis - un parasitoïde larvaire de Drosophila suzukii (un ravageur envahissant mondial des cultures fruitières) - a été approuvé ou est envisagé pour l’introduction en Europe et aux États-Unis pour la lutte biologique contre ce ravageur. Cet article fournit des protocoles pour l’élevage à petite et à grande échelle de ce parasitoïde.

Méthodes d’élevage du parasitoïde Ganaspis brasiliensis, un agent de lutte biologique prometteur pour la drosophile suzukii envahissante

Native to East Asia, the spotted-wing drosophila, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), has established widely in the Americas, Europe, ...

La recherche à long terme et l’utilisation d’un agent de biocontrôle dépendent de la disponibilité de techniques d’élevage efficaces et économiques, et ce protocole s’est avéré efficace pour l’élevage de ce parasitoïde. Il existe actuellement un énorme intérêt pour l’élevage de ce parasitoïde pour la recherche ou la libération sur le terrain, et le protocole bénéficiera à la recherche et à l’utilisation futures à long terme de cet agent de biocontrôle prometteur. Les premiers utilisateurs peuvent avoir besoin de comprendre une certaine biologie de base des insectes impliqués en lisant les références pertinentes fournies dans l’article et certaines pratiques des méthodes.Pour faire le régime de l’hôte, préparez d’abord la partie liquide du régime comme décrit dans le manuscrit. Ensuite, ajoutez 25 à 30 grammes de purée de bleuets dans une fiole vide de 250 millilitres. Ensuite, versez le liquide dans la fiole avec le liquide recouvrant simplement le dessus de la purée de bleuets.Ensuite, pour élever l’hôte Drosophila suzuki, coupez d’abord un morceau d’essuie-tout absorbant et tordez-le au centre. Ensuite, placez la section centrale tordue de l’essuie-tout dans la fiole de régime. Pour retenir l’humidité, utilisez de l’eau distillée pour mouiller l’essuie-tout et le régime alimentaire.Ensuite, pour transférer des mouches adultes sexuellement matures, retirez soigneusement le bouchon d’une fiole de colonie de mouches et inversez-la dans la fiole de régime. Après une semaine de cette exposition, maintenez les mouches dans une chambre environnementale pendant trois semaines pour l’émergence des mouches. Pour exposer la larve hôte à des parasitoïdes, retirez d’abord les mouches adultes et l’essuie-tout de la fiole, en laissant les œufs et les larves de mouches.Pour servir de substrat de nymphose pour les larves, pliez une nouvelle serviette en papier absorbante et insérez-la dans la fiole. Ensuite, aspirez six paires femelles et mâles du parasitoïde G3 Ganaspis brasiliensis dans la fiole et tracez une fine couche de miel au fond du bouchon de mousse. Pour collecter et stocker les parasitoïdes, retirez les adultes après cinq jours.Ensuite, conservez la fiole dans la chambre environnementale pendant 35 jours dans les conditions mentionnées précédemment. Avec l’émergence de guêpes adultes, aspirez-les trois fois par semaine. Pour tenir les guêpes, placez d’abord une serviette en papier humidifiée mais non saturée d’eau distillée au fond d’un flacon de drosophile de 2,5 x 9,5 centimètres carrés.Ensuite, transférez environ 60 guêpes dans le flacon et marquez la date d’émergence. Conservez le flacon dans la chambre environnementale. Deux fois par semaine, stroyez une fine couche de miel sur le fond du bouchon en mousse des flacons.Tout d’abord, organisez l’élevage à grande échelle de Drosophila suzuki en plaçant 1 500 à 2 000 mouches adultes sexuellement matures à un rapport de masculinité de 50:50 dans une grande cage tricotée recouverte de mailles. Ensuite, placez une assiette avec du coton imbibé d’eau et quatre à six boîtes de Petri avec un milieu standard de drosophile dans la cage. Deux fois par semaine, remplacez les boîtes de Petri exposées par des boîtes fraîches.Placez chaque boîte de Petri infestée sans le couvercle dans un gobelet en plastique de 800 millilitres et couvrez le gobelet d’une maille fine. Ensuite, incubez les tasses à 23 degrés Celsius et 75% d’humidité relative pendant 12 à 15 jours. Après l’incubation, transférer La drosophile suzuki adulte nouvellement éclose dans une cage d’élevage.Ensuite, commencez à préparer les larves hôtes en rinçant les bleuets dans de l’eau froide pendant une minute et faites tremper les fruits dans une bassine remplie d’une solution d’eau de Javel, diluée à 5% pendant trois minutes. Ensuite, remplissez les boîtes de Petri de neuf centimètres avec les bleuets lavés. En fin d’après-midi, mettez les boîtes de Petri dans la cage d’élevage et laissez-les toute la nuit.Le lendemain matin, tapotez doucement sur les boîtes de Pétri pour déloger les mouches des fruits et retirer les fruits de la cage d’élevage. Pendant ce temps, préparez une cage de parasitisme et une cage d’émergence de guêpes pour le parasitoïde G1 Ganaspis brasiliensis. Les deux cages doivent avoir une fine ficelle sous le plafond pour suspendre une ou plusieurs mangeoires.Dans chaque cage, suspendez un flacon de drosophile contenant de l’eau et scellez avec un bouchon d’acétate de cellulose à l’envers du plafond tous les cinq à sept jours, selon l’humidité relative. Immédiatement après avoir sorti les bleuets infestés de la cage de Drosophila suzuki, mettez-les dans la cage de parasitisme avec 1 500 à 2 000 guêpes Ganaspis brasiliensis pendant deux à trois jours. Ensuite, collectez les fruits dans un gobelet en plastique de 800 millilitres avec du papier absorbant au fond.Incuber la coupe ouverte dans la cage d’émergence ou d’éclosion à 21 degrés Celsius et 65% d’humidité relative pendant au moins 28 jours. Au cours des deuxième et troisième semaines d’incubation, vérifiez chaque semaine l’eclosion précoce de l’hôte dans la cage. Pour faciliter la collecte successive de parasitoïdes, retirez les mouches adultes.À la fin de la quatrième semaine d’incubation, fournissez une mangeoire et une source d’eau à la cage. Recueillir environ 10 à 15% des guêpes adultes et les transférer dans la cage de parasitisme pour remplacer les guêpes âgées et improductives. Parmi les guêpes restantes de la cage d’éclosion, stockez jusqu’à 700 adultes à un rapport de masculinité de 50:50 avec un gobelet en plastique de 800 millilitres contenant un tube de deux millilitres rempli d’eau et scellé avec un rouleau de coton dentaire au fond de la tasse.Conservez la tasse avec un état d’émergence marqué dans une chambre environnementale jusqu’à un mois. Pour l’expédition de parasitoïdes, placez environ 200 adultes dans un tube conique de 50 millilitres. Ensuite, mettez tous les tubes dans un conteneur d’expédition isolant avec des sacs de glace.Ce protocole a permis de réussir l’élevage à petite échelle de G3 Ganaspis brasiliensis, un agent parasitoïde, contre le ravageur agricole Drosophila suzuki en laboratoire. La production de progéniture n’a pas été affectée par les différences de densité parasitoïde et de temps d’exposition. La génération à grande échelle de G1 Ganaspis brasiliensis a également pu être réalisée, la production commençant cinq semaines après l’exposition initiale à l’hôte Drosophila suzuki.De la semaine 8 à la semaine 22, la production de parasitoïdes est devenue proportionnelle à la quantité de fruits qui y sont exposés. Il est extrêmement important de maintenir une température d’élevage appropriée, de contrôler l’humidité et de toujours fournir de la nourriture aux insectes adultes. Les méthodes pourraient être encore améliorées en optimisant les densités d’élevage de l’hôte et du parasitoïde afin de maximiser la reproduction des guêpes et en explorant la possibilité d’élever ce parasitoïde sur d’autres hôtes.

Research

JoVE Journal

Biology

Methods for Rearing the Parasitoid Ganaspis brasiliensis, a Promising Biological Control Agent for the Invasive Drosophila suzukii

Protocol for Mosquito Rearing (A. gambiae)

Protocol for Mosquito Rearing A. gambiae

Protocole pour l&#39;élevage des moustiques (A. gambiae)

This protocol describes mosquito rearing in the insectary. The insectary rooms are maintained at 28&deg;C and ~80% humidity, with a 12 hr. day/night ...

Recherche

Biologie

Labeling hESCs and hMSCs with Iron Oxide Nanoparticles for Non-Invasive in vivo Tracking with MR Imaging

Étiquetage CSEh et hMSCs d&#39;oxyde de fer nanoparticules pour les non-invasives dans le suivi in ​​vivo avec IRM

In recent years, stem cell research has led to a better understanding of developmental biology, various diseases and its potential impact on regenerative ...

Labeling Stem Cells with Fluorescent Dyes for non-invasive Detection with Optical Imaging

Étiquetage des cellules souches avec des colorants fluorescents pour les non-invasive de détection avec l&#39;imagerie optique

Optical imaging (OI) is an easy, fast and inexpensive tool for in vivo monitoring of new stem cell based therapies. The technique is based on ex vivo ...

Electrophysiological Methods for Recording Synaptic Potentials from the NMJ of Drosophila Larvae

Méthodes électrophysiologiques pour l&#39;enregistrement du potentiel synaptique de la JNM des larves de drosophile

In this video, we describe the electrophysiological methods for recording synaptic transmission at the neuromuscular junction (NMJ) of Drosophila larva. ...

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Enregistrement électrophysiologique dans le Drosophile Embryon

Drosophila is a premier genetic model for the study of both embryonic development and functional neuroscience. Traditionally, these fields are quite ...

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

Visualiser le cœur battant Drosophile</em

The Drosophila heart has recently emerged as a good model system for examining the genetic, cellular, and molecular mechanisms underlying function in ...

Methods for the Study of the Zebrafish Maxillary Barbel

Méthodes pour l&#39;étude de l&#39;Barbel Zebrafish maxillaire

Barbels are skin sensory appendages found in fishes, reptiles and amphibians.  The zebrafish, Danio rerio, develops two pairs of barbels- a short nasal ...

An Optimized Protocol for Rearing Fopius arisanus, a Parasitoid of Tephritid Fruit Flies

An Optimized Protocol for Rearing Fopius arisanus, a Parasitoid of Tephritid Fruit Flies

Un protocole optimisé pour l&#39;élevage Fopius arisanus, Un parasitoïde des mouches des fruits Tephritidae

Fopius arisanus (Sonan) is an important parasitoid of Tephritid fruit flies for at least two reasons. First, it is the one of only three opiine ...

Blastomere Explants to Test for Cell Fate Commitment During Embryonic Development

Les explants blastomères à l&#39;essai pour l&#39;engagement du destin cellulaire au cours du développement embryonnaire

Fate maps, constructed from lineage tracing all of the cells of an embryo, reveal  which tissues descend from each cell of the embryo.  Although fate maps ...

Autonomously Bioluminescent Mammalian Cells for Continuous and Real-time Monitoring of Cytotoxicity

Cellules de mammifères autonome bioluminescentes pour la surveillance continue et en temps réel de la cytotoxicité

Mammalian  cell-based in vitro assays have been  widely employed as alternatives to animal testing for toxicological studies but  have been limited due to ...