Name: methods for rearing the parasitoid ganaspis brasiliensis, a promising biological control agent for the invasive drosophila suzukii
Uploaded: 2022-06-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Methods for Rearing the Parasitoid Ganaspis brasiliensis, a Promising Biological Control Agent for the Invasive Drosophila suzukii at JoVE.com

Gli autori ringraziano Lukas Seehausen e Marc Kenis (CABI, Svizzera) per aver gentilmente fornito G1 G. brasiliensis. I finanziamenti in Italia sono stati forniti dalla Provincia Autonoma di Trento, Trento, Italia, e negli Stati Uniti dal National Institute of Food and Agriculture, dal premio USDA Specialty Crops Research Initiative (# 2020-5118-32140), dall'USDA Animal and Plant Health Inspection Service (Farm Bill, fondo 14-8130-0463) e dai fondi di base USDA ARS CRIS (progetto 8010-22000-033-00D). L'USDA è un fornitore di pari opportunità e datore di lavoro e non approva i prodotti menzionati in questa pubblicazione.

1. Metodi per l'allevamento in laboratorio su piccola scala di G3 Ganaspis brasiliensis
<ol><li>Prepara la dieta dell'ospite.<ol>
<li>Aggiungere 600 ml di acqua distillata in un contenitore di vetro da 1.500 ml e riscaldare l'acqua su una piastra calda.</li>
		<li>Aggiungere 88,6 g di dieta secca disponibile in commercio (a base di agar, lievito di birra, farina di mais, metil parabene e saccarosio) o preparare la dieta utilizzando la formula pubblicata da Dalton et al.28</su...

<ol>
	<li>Asplen, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasion+biology+of+spotted+wing+drosophila+(Drosophila+suzukii):+a+global+perspective+and+future+priorities.">Invasion biology of spotted wing drosophila (Drosophila suzukii): a global perspective and future priorities.</a> Journal of Pest Science. 88 (3), 469-494 (2015).</li><li>Tait, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+suzukii+(Diptera:+Drosophilidae):+A+decade+of+research+towards+a+sustainable+integrated+pest+management+program.">Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae): A decade of research towards a sustainable integrated pest management program.</a> Journal of Economic Entomology. 114 (5), 1950-1974 (2021).</li><li>Kirschbaum, D. S., Funes, C. F., Buonocore-Biancheri, M. J., Su&#225;rez, L., Ovruski, S. M., Garcia, F. R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biology+and+ecology+of+Drosophila+suzukii+(Diptera:+Drosophilidae).">The biology and ecology of Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae).</a> Drosophila suzukii management. , 41-92 (2020).</li><li>Wang, X. G., Lee, J. C., Daane, K. M., Buffington, M. L., Hoelmer, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Biological control of Drosophila suzukii.</a> CAB Reviews. 15, 054 (2020).</li><li>Lee, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+control+of+spotted-wing+drosophila+(Diptera:+Drosophilidae):+Current+and+pending+tactics.">Biological control of spotted-wing drosophila (Diptera: Drosophilidae): Current and pending tactics.</a> Journal of Integreated Pest Management. 10 (1), 13 (2019).</li><li>Wang, X. G., Lee, J. C., Daane, K. M., Hoelmer, K. A., Garcia, F. R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+control+of+spotted-wing+drosophila:+An+update+on+promising+agents.">Biological control of spotted-wing drosophila: An update on promising agents.</a> Drosophilia suzukii management. , 143-167 (2020).</li><li>Daane, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+exploration+of+parasitoids+of+Drosophila+suzukii+in+South+Korea+as+potential+classical+biological+agents.">First exploration of parasitoids of Drosophila suzukii in South Korea as potential classical biological agents.</a> Journal of Pest Science. 89 (3), 823-835 (2016).</li><li>Giorgini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploration+for+native+parasitoids+of+Drosophila+suzukii+in+China+reveals+a+diversity+of+parasitoid+species+and+narrow+host+range+of+the+dominant+parasitoid.">Exploration for native parasitoids of Drosophila suzukii in China reveals a diversity of parasitoid species and narrow host range of the dominant parasitoid.</a> Journal of Pest Science. 92 (2), 509-522 (2019).</li><li>Girod, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+parasitoid+complex+of+D.+suzukii+and+other+fruit+feeding+Drosophila+species+in+Asia.">The parasitoid complex of D. suzukii and other fruit feeding Drosophila species in Asia.</a> Scientific Reports. 8 (1), 11839 (2018).</li><li>Kacsoh, B. Z., Schlenke, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+hemocyte+load+is+associated+with+increased+resistance+against+parasitoids+in+Drosophila+suzukii,+a+relative+of+D.+melanogaster.">High hemocyte load is associated with increased resistance against parasitoids in Drosophila suzukii, a relative of D. melanogaster.</a> PLoS ONE. 7 (4), 34721 (2012).</li><li>Buffington, M. L., Forshage, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Redescription+of+Ganaspis+brasiliensis+(Ihering,+1905),+new+combination+(Hymenoptera:+Figitidae),+a+natural+enemy+of+the+invasive+Drosophila+suzukii+(Matsumura,+1931)(Diptera:+Drosophilidae).">Redescription of Ganaspis brasiliensis (Ihering, 1905), new combination (Hymenoptera: Figitidae), a natural enemy of the invasive Drosophila suzukii (Matsumura, 1931)(Diptera: Drosophilidae).</a> Procedings of the Entomoogical Society of Washington. 118 (1), 1-13 (2016).</li><li>Biondi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innate+olfactory+responses+of+Asobara+japonica+(Hymenoptera:+Braconidae)towards+fruits+infested+by+the+invasive+spotted+wing+drosophila.">Innate olfactory responses of Asobara japonica (Hymenoptera: Braconidae)towards fruits infested by the invasive spotted wing drosophila.</a> Journal of Insect Behavior. 30 (5), 495-506 (2017).</li><li>Biondi, A., Wang, X. G., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+preference+of+three+Asian+larval+parasitoids+to+closely+related+Drosophila+species:+implications+for+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Host preference of three Asian larval parasitoids to closely related Drosophila species: implications for biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 94 (2), 273-283 (2021).</li><li>Girod, P., Rossignaud, L., Haye, T., Turlings, T. C. J., Kenis, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+Asian+parasitoids+in+larvae+of+Drosophila+suzukii+feeding+on+blueberry+and+artificial+diet.">Development of Asian parasitoids in larvae of Drosophila suzukii feeding on blueberry and artificial diet.</a> Journal of Applied Entomology. 142 (5), 483-494 (2018).</li><li>Wang, X. G., Nance, A. H., Jones, J. M. L., Hoelmer, K. A., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aspects+of+the+biology+and+reproductive+strategy+of+two+Asian+larval+parasitoids+evaluated+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Aspects of the biology and reproductive strategy of two Asian larval parasitoids evaluated for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 121, 58-65 (2018).</li><li>Wang, X. G., Biondi, A., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+responses+of+three+candidate+Asian+larval+parasitoids+evaluated+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Functional responses of three candidate Asian larval parasitoids evaluated for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Economic Entomology. 113 (1), 73-80 (2020).</li><li>Wang, X. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+Asobara+japonica+as+a+potential+biological+control+agent+for+the+spotted+wing+drosophila,+Drosophila+suzukii.">Assessment of Asobara japonica as a potential biological control agent for the spotted wing drosophila, Drosophila suzukii.</a> Entomologia Generalis. 41, 1-12 (2021).</li><li>Hougardy, E., Hogg, B. N., Wang, X. G., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+thermal+performances+of+two+Asian+larval+parasitoids+of+Drosophila+suzukii.">Comparison of thermal performances of two Asian larval parasitoids of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 136, 104000 (2019).</li><li>Wang, X. G., Hogg, B. N., Hougardy, E., Nance, A. H., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+competitive+outcomes+among+three+solitary+larval+endoparasitoids+as+candidate+agents+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Potential competitive outcomes among three solitary larval endoparasitoids as candidate agents for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 130, 18-26 (2019).</li><li>Daane, K. M., Biondi, A., Wang, X. G., Hogg, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+host+ranges+of+three+Asian+larval+parasitoids+of+Drosophila+suzukii.">Potential host ranges of three Asian larval parasitoids of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 94 (4), 1171-1182 (2021).</li><li>Girod, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+specificity+of+Asian+parasitoids+for+potential+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Host specificity of Asian parasitoids for potential classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 91 (4), 1241-1250 (2018).</li><li>Seehausen, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+a+cryptic+parasitoid+species+reveals+its+suitability+as+a+biological+control+agent.">Evidence for a cryptic parasitoid species reveals its suitability as a biological control agent.</a> Scientific Reports. 10 (1), 19096 (2020).</li><li>Nomano, F. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+differentiation+of+Ganaspis+brasiliensis+(Hymenoptera:+Figitidae)+from+East+and+Southeast+Asia.">Genetic differentiation of Ganaspis brasiliensis (Hymenoptera: Figitidae) from East and Southeast Asia.</a> Applied Entomology and Zoology. 52 (3), 429-437 (2017).</li><li>Kasuya, N., Mitsui, H., Ideo, S., Watada, M., Kimura, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ecological,+morphological+and+molecular+studies+on+Ganaspis+individuals+(Hymenoptera:+Figitidae)+attacking+Drosophila+suzukii+(Diptera:+Drosophilidae).">Ecological, morphological and molecular studies on Ganaspis individuals (Hymenoptera: Figitidae) attacking Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae).</a> Applied Entomology and Zoology. 48 (1), 87-92 (2013).</li><li>Matsuura, A., Mitsui, H., Kimura, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+preliminary+study+on+distributions+and+oviposition+sites+of+Drosophila+suzukii+(Diptera:+Drosophilidae)+and+its+parasitoids+on+wild+cherry+tree+in+Tokyo,+central+Japan.">A preliminary study on distributions and oviposition sites of Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae) and its parasitoids on wild cherry tree in Tokyo, central Japan.</a> Applied Entomology and Zoology. 53 (1), 47-53 (2018).</li><li>Abram, P. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+records+of+Leptopilina,+Ganaspis,+and+Asobara+species+associated+with+Drosophila+suzukii+in+North+America,+including+detections+of+L.+japonica+and+G.+brasiliensis.">New records of Leptopilina, Ganaspis, and Asobara species associated with Drosophila suzukii in North America, including detections of L. japonica and G. brasiliensis.</a> Journal of Hymenoptera Research. 78, 1-17 (2020).</li><li>Puppato, S., Grassi, A., Pedrazzoli, F., De Cristofaro, A., Ioriatti, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+report+of+Leptopilina+japonica+in+Europe.">First report of Leptopilina japonica in Europe.</a> Insects. 11 (9), 611 (2020).</li><li>Dalton, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+survival+of+Drosophila+suzukii+under+simulated+winter+conditions+of+the+Pacific+Northwest+and+seasonal+field+trapping+in+five+primary+regions+of+small+and+stone+fruit+production+in+the+United+States.">Laboratory survival of Drosophila suzukii under simulated winter conditions of the Pacific Northwest and seasonal field trapping in five primary regions of small and stone fruit production in the United States.</a> Pest Managagement Science. 67 (11), 1368-1374 (2011).</li></ol>

La ricerca a lungo termine e le successive emissioni sul campo di un agente di controllo biologico dipendono dalla disponibilità di tecniche di allevamento efficaci ed economiche. I metodi descritti in questo studio hanno dimostrato di essere protocolli efficienti sia per l'allevamento su piccola scala che su larga scala di Ganaspis brasiliensis. Il protocollo di allevamento su piccola scala è stato sviluppato nel corso di diversi anni per ottimizzare la quantità di manodopera e ridurre le attrezzature specia...

Originaria dell'Asia orientale, la drosophila ad ala maculata, Drosophila suzukii (Matsumura) (Ditteri: Drosophilidae), si è diffusa nelle Americhe, in Europa e in alcune parti dell'Africa 1,2. La mosca è estremamente polifaga, essendo in grado di utilizzare vari frutti coltivati e selvatici con pelli morbide e sottili nelle sue regioni native e invase 1,2,3. Le attuali strategie di gestione per questo parassita si basano fortemente sull'uso frequente di insetticidi che colpiscono le mosche adulte nei campi coltivati quando i frutti sensibili stanno maturando. Vengono spesso utilizzati spray ripetuti, probabilmente a causa della costante ricaduta di popolazioni di mosche da giacimento provenienti da habitat non coltivati e della mancanza di nemici naturali efficaci residenti nelle regioni invase 1,4. Il controllo biologico, in particolare per mezzo di parassitoidi specializzati che si auto-perpetuano, può aiutare a sopprimere le popolazioni di mosche a livello paesaggistico e svolgere un ruolo fondamentale per la gestione sostenibile a livello di area di questo parassita altamente mobile e polifago 4,5,6.
Negli ultimi dieci anni, i ricercatori hanno concentrato gli sforzi per scoprire parassitoidi co-evoluti di Drosophila suzukii negli areali nativi della mosca in Asia orientale 7,8,9, così come parassitoidi efficaci ma recentemente associati nelle regioni invase della mosca nelle Americhe e in Europa 4,5,6. Nelle regioni appena invase della mosca, i parassitoidi larvali Drosophila comunemente presenti, come Asobara c.f. tabida (Nees) (Hymenoptera: Braconidae), Leptopilina boulardi (Barbotin et al.), e L. heterotoma (Thompson) (Hymenoptera: Figitidae), non sono in grado di svilupparsi o avere bassi livelli di parassitismo su D. suzukii a causa della forte resistenza immunitaria della mosca10. Solo alcuni parassitoidi pupali cosmopoliti e generalisti come Pachycrepoideus vindemiae (Rondani) (Hymenoptera: Pteromalidae) e Trichopria drosophilae (Perkins) (Hymenoptera: Diapriidae) in Nord America e in Europa, e Trichopria anastrephae Lima in Sud America possono facilmente svilupparsi da questa mosca4. Al contrario, le esplorazioni in Asia orientale hanno scoperto un certo numero di parassitoidi larvali da D. suzukii 4,5,6. Tra questi, Asobara japonica Belokobylskij, Ganaspis brasiliensis Ihering e Leptopilina japonica Novković & Kimura sono i parassitoidi larvali dominanti 7,8,9,11. In particolare, i due figitidi (L. japonica e G. brasiliensis) erano i principali parassitoidi presenti prevalentemente nella frutta fresca infestata da D. suzukii e/o altri drosofilidi strettamente imparentati nella vegetazione naturale 7,8,9. Questi tre parassitoidi larvali asiatici sono stati importati in strutture di quarantena negli Stati Uniti e in Europa e valutati per la loro efficienza relativa 12,13,14,15,16,17, adattabilità climatica18, potenziali interazioni competitive interspecifiche 19 e, soprattutto, specificità dell'ospite 8,20,21 ,22.
Le valutazioni di quarantena hanno mostrato che Ganaspis brasiliensis era più specifico per l'ospite di Drosophila suzukii rispetto ad altri parassitoidi larvali asiatici testati, sebbene probabilmente consiste di diversi biotipi o specie criptiche con specificità dell'ospite variabile 8,21,22,23,24. Nomano et al.22 hanno raggruppato individui Ganaspis provenienti da diverse regioni geografiche in cinque gruppi genetici (denominati G1-G5) sulla base di analisi molecolari del frammento del gene della citocromo ossidasi I mitocondriale. I gruppi G2 e G4 sono segnalati solo da alcune località tropicali dell'Asia meridionale, e il gruppo G5 è stato segnalato dall'Asia e da altre regioni (ad esempio, Argentina, Brasile, Hawaii e Messico) da ospiti sconosciuti (Buffington, osservazione personale). Collezioni sul campo di frutti selvatici infestati da D. suzukii in Corea del Sud7, Cina8 e Giappone 9,23,25 hanno trovato G1 da solo o una miscela di esemplari che rappresentano i gruppi G1 e G3. I due gruppi sembrano essere simpatrici e coesistono sulle stesse piante ospiti abitate da D. suzukii e altre mosche ospiti strettamente correlate. Tuttavia, sono state osservate alcune differenze tra i due gruppi, con G1 che sembra avere un grado più elevato di specificità dell'habitat ospite o ospite rispetto a G3, sebbene entrambi attacchino un certo numero di specie strettamente correlate nei test di quarantena21,22. Ulteriori analisi molecolari dettagliate possono aiutare a determinare lo stato delle specie, in particolare per i gruppi G1 e G3. Questo studio si riferisce a loro come G1 G. brasiliensis e G3 G. brasiliensis. Alcuni primi studi hanno anche chiamato il G1 G. brasiliensis come G. cf. brasiliensis 14,21,22. Il G1 G. brasiliensis è stato recentemente approvato per il rilascio sul campo contro D. suzukii negli Stati Uniti e in Italia (diversi altri paesi europei stanno attualmente considerando la sua introduzione), mentre il G3 G. brasiliensis potrebbe essere considerato per il rilascio sul campo nel prossimo futuro. Recenti indagini hanno anche trovato popolazioni avventive di L. japonica e G1 G. brasiliensis nella Columbia Britannica, Canada26, e nello Stato di Washington, USA (Beers et al., dati non pubblicati), e popolazioni avventive di L. japonica nella provincia di Trento, Italia27.
Dato il significativo interesse per lo sviluppo di programmi di controllo biologico per la gestione della Drosophila suzukii e il sostanziale potenziale di controllo biologico delle introduzioni avventive e deliberate di Ganaspis brasiliensis, vi è la necessità di sviluppare metodi di allevamento efficienti per questo parassitoide larvale per future ricerche a lungo termine e / o rilascio sul campo. Questo protocollo e l'articolo video associato descrivono due serie di metodi di allevamento per questo parassitoide: (1) allevamento di laboratorio su piccola scala in palloni utilizzando una miscela di frutta ospite (mirtillo) e dieta artificiale per la coltura di D. suzukii. I metodi sono stati sviluppati utilizzando materiale G3 originariamente raccolto da Kunming, Cina8. (2) Allevamento di massa per il rilascio in campo in grandi gabbie utilizzando frutta ospite (mirtillo) per la coltura di D. suzukii. Il gruppo genetico utilizzato per l'allevamento su larga scala era lo stock G1 originario di Tokyo, in Giappone 9,22. Altre scale di metodi di allevamento, come l'uso di fiale o piccoli contenitori per entrambi i gruppi, sono anche brevemente discusse.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Active dry yeast</td>
			<td>Fleischmanns Yeast, Cincinatti, OH, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to cover fruit to reduce mold growth and enhance the frui attraction to the flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bacteriological agar</td>
			<td>Merk Life Science S.r.l., Milan, Italy</td>
			<td>A1296 - 5KG</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bleach solution</td>
			<td>Clorox Company, Oakland, CA, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to disinfect flesh fruit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blue stopper</td>
			<td>Azer Scientific, Morgantown, PA, USA</td>
			<td>ES3837</td>
			<td>Used for sealing the tube while allowing ventilation for insects</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blueberries</td>
			<td>Grocery Store, Newark, DE, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Provided as host fruit for the flies (various other fruit can also be used)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BugDorm insect rearing cage (W24.5 x D24.5 x H63.0 cm)</td>
			<td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan</td>
			<td>4E3030</td>
			<td>Used for rearing parasitoids (parasitism cage)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BugDorm insect rearing cage (W32.5 x D32.5 x H32.5 cm)</td>
			<td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan</td>
			<td>4E4590</td>
			<td>Used for rearing flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BugDorm insect rearing cage (W32.5 x D32.5 x H32.5 cm)</td>
			<td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan</td>
			<td>4E4545</td>
			<td>Used for rearing parasitoids (eclosion cage)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chicken wire (0.64 cm, 19 gauge)</td>
			<td>Everbilt, OH, USA</td>
			<td>308231EB</td>
			<td>Used to lift up the fruit to allow maximum parasitoid oviposition</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cornmeal</td>
			<td>Grocery Store, Trento, TN, Italy</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dental cotton roll (1 x 3.8 cm)</td>
			<td>Gima S.p.A., Gessate, MI, Italy</td>
			<td>35000</td>
			<td>Used for providing water to the parasitoids within the storage container</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila diet</td>
			<td>Frontier Scientific, Newark, DE, USA</td>
			<td>TF1003</td>
			<td>Custom diet used to rear flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila vial narrow, Polystirene (2.5 x 9.5 cm)</td>
			<td>VWR International, LLC., Radnor, PA, US</td>
			<td>75813-160</td>
			<td>Used for providing water to the parasitoids within the cage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila vial plugs, Cellulose acetate (2.5 cm)</td>
			<td>VWR International, LLC., Radnor, PA, US</td>
			<td>89168-886</td>
			<td>Used for providing water to the parasitoids within the cage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Erlenmeyer flask (250 mL)</td>
			<td>Carolina Biological, Burlington, NC, USA</td>
			<td>731029</td>
			<td>Used for rearing flies and parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon-style centrifuge tube (50 mL)</td>
			<td>VWR International, LLC., Radnor, PA, US</td>
			<td>VWRI525-0611</td>
			<td>Modified to ship adult parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foam stopper</td>
			<td>Jaece Industries, North Tanawanda, NY, USA</td>
			<td>L800-C</td>
			<td>Used for sealing the flasks while allowing ventilation for insects</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Honey</td>
			<td>Grocery Store, Newark, DE, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Provided as food for parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Identi-Plug plastic foam stopper</td>
			<td>Fisher Scientific Company, L.L.C., Pittsburg, PA, US</td>
			<td>14-127-40E</td>
			<td>Used as feeder for parasitoids and to seal the storage container</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Industrial paper towel</td>
			<td>Grocery Store, Newark, DE, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Provided as a pupation substrate for pupae and mitigated moisture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micron mesh fabric (250 mL)</td>
			<td>Industrial Netting, Maple Grove, MN, USA</td>
			<td>WN0250-72</td>
			<td>Used to make ventilation lid for insects</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nutritional yeast (flakes)</td>
			<td>Grocery Store, Trento, TN, Italy</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paper coaster (10.2 cm)</td>
			<td>Hoffmaster, WI, USA</td>
			<td>35NG26</td>
			<td>Porvided as pupation substrate for flies and parsitized pupae</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic cup (&#216; 13.3 cm, 800 mL)</td>
			<td>Berry Superfos, Taastrup, Denmark</td>
			<td>Unipak 5134</td>
			<td>Modified to store adult parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic lid (&#216; 13.3 cm)</td>
			<td>Berry Superfos, Taastrup, Denmark</td>
			<td>PP 2830</td>
			<td>Modified to store adult parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propionic acid</td>
			<td>Merk Life Science S.r.l., Milan, Italy</td>
			<td>P1386 - 1L</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saccharose</td>
			<td>Grocery Store, Trento, TN, Italy</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soup cup with lid (475 mL)</td>
			<td>StackMan, Vietnam</td>
			<td>DC1648</td>
			<td>Used for parasitized larvae to pupate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soybean flour</td>
			<td>Grocery Store, Trento, TN, Italy</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>White felt washer (0.64 cm thick, 5 mm ID x 20 mm OD)</td>
			<td>Quiklok, Lincoln, NH, US</td>
			<td>WFW/.25 x 5 x 20 mm</td>
			<td>Used as feeding ring for parasitoids</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

methods for rearing the parasitoid ganaspis brasiliensis, a promising biological control agent for the invasive drosophila suzukii

Originaria dell'Asia orientale, la drosophila ad ala maculata, Drosophila suzukii (Matsumura) (Ditteri: Drosophilidae), si è diffusa nelle Americhe, in Europa e in alcune parti dell'Africa nell'ultimo decennio, diventando un devastante parassita di vari frutti dalla pelle morbida nelle sue regioni invase. Il controllo biologico, in particolare per mezzo di parassitoidi auto-perpetuanti e specializzati, dovrebbe essere un'opzione praticabile per una gestione sostenibile a livello di area di questo parassita altamente mobile e polifago. Ganaspis brasiliensis Ihering (Hymenoptera: Figitidae) è un parassitoide larvale ampiamente distribuito in Asia orientale, ed è stato trovato per essere uno dei parassitoidi più efficaci di D. suzukii.
A seguito di rigorose valutazioni pre-introduzione della sua efficacia e dei potenziali rischi non bersaglio, uno dei gruppi genetici più specifici dell'ospite di questa specie (G1 G. brasiliensis) è stato recentemente approvato per l'introduzione e il rilascio sul campo negli Stati Uniti e in Italia. Un altro gruppo genetico (G3 G. brasiliensis), che è stato anche comunemente trovato per attaccare D. suzukii in Asia orientale, potrebbe essere considerato per l'introduzione nel prossimo futuro. Attualmente c'è un enorme interesse nell'allevamento di G. brasiliensis per la ricerca o nella produzione di massa per il rilascio sul campo contro D. suzukii. Questo protocollo e l'articolo video associato descrivono metodi di allevamento efficaci per questo parassitoide, sia su piccola scala per la ricerca che su larga scala per la produzione di massa e il rilascio sul campo. Questi metodi possono beneficiare di ulteriori ricerche a lungo termine e l'uso di questo parassitoide nativo asiatico come promettente agente di controllo biologico per questo parassita invasivo globale.

La Figura 4 mostra i risultati rappresentativi dell'allevamento in laboratorio su piccola scala di G3 Ganaspis brasiliensis utilizzando due diverse densità parassitoidi (sei o 10 coppie) e due diversi tempi di esposizione (5 o 10 giorni) presso la struttura di quarantena dell'USDA-ARS Beneficial Insects Introduction Unit (Newark, Delaware). Ci sono state 14 repliche per ogni combinazione di densità parassitoide e tempo di esposizione. In totale, i 64 palloni hanno prodotto 4.018 v...

Watch this Scientific Journal Video about Methods for Rearing the Parasitoid Ganaspis brasiliensis, a Promising Biological Control Agent for the Invasive Drosophila suzukii at JoVE.com

Methods for Rearing the Parasitoid Ganaspis brasiliensis, a Promising Biological Control Agent for the Invasive Drosophila suzukii

Ganaspis brasiliensis- un parassitoide larvale di Drosophila suzukii (un parassita invasivo globale delle colture da frutto) - è stato approvato o è considerato per l'introduzione in Europa e negli Stati Uniti per il controllo biologico di questo parassita. Questo articolo fornisce protocolli per l'allevamento su piccola scala e su larga scala di questo parassitoide.

Metodi per l'allevamento del parassitoide Ganaspis brasiliensis, un promettente agente di controllo biologico per la Drosophila suzukii invasiva

Native to East Asia, the spotted-wing drosophila, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), has established widely in the Americas, Europe, ...

La ricerca a lungo termine e l'uso di un agente di biocontrollo dipendono dalla disponibilità di tecniche di allevamento efficaci ed economiche, e questo protocollo si è dimostrato efficiente per l'allevamento di questo parassitoide. Attualmente c'è un enorme interesse nell'allevamento di questo parassitoide per la ricerca o il rilascio sul campo, e il protocollo andrà a beneficio della futura ricerca a lungo termine e dell'uso di questo promettente agente di biocontrollo. I primi utenti potrebbero aver bisogno di comprendere alcune biologie di base degli insetti coinvolti attraverso la lettura dei riferimenti pertinenti forniti nell'articolo e alcune pratiche dei metodi.Per fare la dieta ospite, in primo luogo, preparare la parte liquida della dieta come descritto nel manoscritto. Quindi, aggiungere da 25 a 30 grammi di purè di mirtilli in un pallone vuoto da 250 millilitri. Quindi, versare il liquido nel pallone con il liquido che copre solo la parte superiore del purè di mirtilli.Successivamente, per allevare l'ospite Drosophila suzuki, prima tagliare un pezzo di tovagliolo di carta assorbente e ruotarlo al centro. Quindi, posizionare la sezione centrale contorta del tovagliolo di carta nel pallone dietetico. Per trattenere l'umidità, utilizzare acqua distillata per bagnare il tovagliolo di carta e la dieta.Quindi, per trasferire mosche adulte sessualmente mature, rimuovere con cura il tappo di una fiaschetta della colonia di mosche e invertirlo nel pallone dietetico. Dopo una settimana di questa esposizione, tenere le mosche in una camera ambientale per tre settimane per l'emergenza della mosca. Per esporre la larva ospite ai parassitoidi, rimuovere prima le mosche adulte e il tovagliolo di carta dal pallone, lasciando le uova e le larve della mosca.Per fungere da substrato di pupa per le larve, piegare un nuovo tovagliolo di carta assorbente e inserirlo nel pallone. Quindi aspirare sei coppie femminili e maschili del parassitoide G3 Ganaspis brasiliensis nel pallone e strisciare un sottile strato di miele sul fondo del tappo di schiuma. Per raccogliere e conservare i parassitoidi, rimuovere gli adulti dopo cinque giorni.Quindi conservare il pallone nella camera ambientale per 35 giorni nelle condizioni menzionate in precedenza. Con l'emergere di vespe adulte, aspirarle tre volte a settimana. Per tenere le vespe, prima posizionare un tovagliolo di carta inumidito ma non saturo di acqua distillata sul fondo di una fiala di Drosophila di 2,5 per 9,5 centimetri quadrati.Quindi, trasferire circa 60 vespe alla fiala e segnare la data di emergenza. Conservare il flaconcino nella camera ambientale. Due volte a settimana, strisciare un sottile strato di miele sul fondo del tappo di schiuma delle fiale.In primo luogo, organizzare l'allevamento su larga scala di Drosophila suzuki posizionando da 1.500 a 2.000 mosche adulte sessualmente mature con un rapporto sessuale 50: 50 in una grande gabbia a maglia coperta di rete. Quindi, posizionare un piatto con cotone imbevuto d'acqua e da quattro a sei piastre di Petri con mezzo Standard Drosophila nella gabbia. Due volte alla settimana, sostituire le piastre di Petri esposte con quelle fresche.Metti ogni capsula di Petri infestata senza coperchio in un bicchiere di plastica da 800 millilitri e copri la tazza con una rete sottile. Quindi, incubare le tazze a 23 gradi Celsius e 75% di umidità relativa per 12-15 giorni. Dopo l'incubazione, trasferire Drosophila suzuki adulta appena schiusa in una gabbia di allevamento.Quindi, iniziare a preparare le larve ospiti risciacquando i mirtilli in acqua fredda per un minuto e immergere i frutti in una bacinella piena di una soluzione di candeggina, diluita al 5% per tre minuti. Quindi, riempire le piastre di Petri di nove centimetri con i mirtilli lavati. Nelle ore del tardo pomeriggio, metti le piastre di Petri nella gabbia di allevamento e lasciale durante la notte.La mattina dopo, picchietta delicatamente le piastre di Petri per rimuovere le mosche dai frutti e rimuovere i frutti dalla gabbia di allevamento. Nel frattempo, prepara una gabbia per parassitismo e una gabbia di emergenza per vespa per il parassitoide G1 Ganaspis brasiliensis. Entrambe le gabbie dovrebbero avere una corda sottile sotto il soffitto per sospendere uno o più alimentatori.In ogni gabbia, sospendere una fiala di Drosophila contenente acqua e sigillare con un tappo di acetato di cellulosa capovolto dal soffitto ogni cinque-sette giorni, a seconda dell'umidità relativa. Subito dopo aver estratto i mirtilli infestati dalla gabbia di Drosophila suzuki, mettili nella gabbia del parassitismo con 1.500-2.000 vespe Ganaspis brasiliensis per due o tre giorni. Quindi, raccogliere i frutti in un bicchiere di plastica da 800 millilitri con carta assorbente sul fondo.Incubare la tazza aperta nella gabbia di emergenza o di eclosione a 21 gradi Celsius e 65% di umidità relativa per almeno 28 giorni. Durante la seconda e la terza settimana di incubazione, controllare settimanalmente la gabbia per l'eclosione precoce dell'ospite. Per facilitare la successiva raccolta di parassitoidi, rimuovere le mosche adulte.Alla fine della quarta settimana di incubazione, fornire un alimentatore e una fonte d'acqua alla gabbia. Raccogli circa il 10-15% delle vespe adulte e trasferiscile nella gabbia del parassitismo per sostituire le vespe vecchie e improduttive. Dalle vespe rimanenti della gabbia di eclosion, conservare fino a 700 adulti con un rapporto di 50:50 tra i sessi con un bicchiere di plastica da 800 millilitri contenente un tubo da due millilitri riempito d'acqua e sigillato con un rotolo di cotone dentale sul fondo della tazza.Conservare la tazza con un marcato stato di emergenza in una camera ambientale per un massimo di un mese. Per la spedizione di parassitoidi, posizionare circa 200 adulti in un tubo conico da 50 millilitri. Quindi, metti tutti i tubi in un contenitore di spedizione isolante insieme a impacchi di ghiaccio.Questo protocollo ha portato al successo dell'allevamento su piccola scala di G3 Ganaspis brasiliensis, un agente parassitoide, contro il parassita agricolo Drosophila suzuki in laboratorio. La produzione di prole non è stata influenzata dalle differenze nella densità dei parassitoidi e nel tempo di esposizione. È stato inoltre possibile ottenere la generazione su larga scala di G1 Ganaspis brasiliensis, con la produzione che inizia cinque settimane dopo l'esposizione iniziale all'ospite Drosophila suzuki.Dalla settimana 8 alla settimana 22, la produzione di parassitoidi è diventata proporzionale alla quantità di frutta esposta a loro. È di fondamentale importanza mantenere una temperatura di allevamento adeguata, controllare l'umidità e fornire sempre cibo per gli insetti adulti. I metodi potrebbero essere ulteriormente migliorati ottimizzando le densità di allevamento di ospiti e parassitoidi per massimizzare la riproduzione delle vespe ed esplorando la possibilità di allevare questo parassitoide su ospiti alternativi.

Research

JoVE Journal

Biology

Methods for Rearing the Parasitoid Ganaspis brasiliensis, a Promising Biological Control Agent for the Invasive Drosophila suzukii

Protocol for Mosquito Rearing (A. gambiae)

Protocol for Mosquito Rearing A. gambiae

Protocollo per la cura dei Mosquito (A. gambiae)

This protocol describes mosquito rearing in the insectary. The insectary rooms are maintained at 28&deg;C and ~80% humidity, with a 12 hr. day/night ...

Ricerca

Biologia

Labeling hESCs and hMSCs with Iron Oxide Nanoparticles for Non-Invasive in vivo Tracking with MR Imaging

Etichettatura hESC e hMSCs con nanoparticelle di ossido di ferro per i non-invasiva in vivo inseguimento con la RM

In recent years, stem cell research has led to a better understanding of developmental biology, various diseases and its potential impact on regenerative ...

Labeling Stem Cells with Fluorescent Dyes for non-invasive Detection with Optical Imaging

Etichettatura Cellule staminali con le tinture fluorescenti per la rilevazione non invasiva con Optical Imaging

Optical imaging (OI) is an easy, fast and inexpensive tool for in vivo monitoring of new stem cell based therapies. The technique is based on ex vivo ...

Electrophysiological Methods for Recording Synaptic Potentials from the NMJ of Drosophila Larvae

Metodi elettrofisiologici per la registrazione Potenziali Synaptic dal NMJ Larve di Drosophila

In this video, we describe the electrophysiological methods for recording synaptic transmission at the neuromuscular junction (NMJ) of Drosophila larva. ...

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Registrazione elettrofisiologiche in Drosophila Embryo

Drosophila is a premier genetic model for the study of both embryonic development and functional neuroscience. Traditionally, these fields are quite ...

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

Visualizzare il cuore pulsante di Drosophila</em

The Drosophila heart has recently emerged as a good model system for examining the genetic, cellular, and molecular mechanisms underlying function in ...

Methods for the Study of the Zebrafish Maxillary Barbel

Metodi per lo studio del mascellare Zebrafish Barbel

Barbels are skin sensory appendages found in fishes, reptiles and amphibians.  The zebrafish, Danio rerio, develops two pairs of barbels- a short nasal ...

An Optimized Protocol for Rearing Fopius arisanus, a Parasitoid of Tephritid Fruit Flies

An Optimized Protocol for Rearing Fopius arisanus, a Parasitoid of Tephritid Fruit Flies

Un protocollo ottimizzato per la cura dei Fopius arisanus, Un parassitoide di frutta Tephritid mosche

Fopius arisanus (Sonan) is an important parasitoid of Tephritid fruit flies for at least two reasons. First, it is the one of only three opiine ...

Blastomere Explants to Test for Cell Fate Commitment During Embryonic Development

Espianti blastomero al test per l&#39;Impegno cellulare Fate durante lo sviluppo embrionale

Fate maps, constructed from lineage tracing all of the cells of an embryo, reveal  which tissues descend from each cell of the embryo.  Although fate maps ...

Autonomously Bioluminescent Mammalian Cells for Continuous and Real-time Monitoring of Cytotoxicity

Autonomamente bioluminescenti cellule di mammifero per la continua e monitoraggio in tempo reale di citotossicità

Mammalian  cell-based in vitro assays have been  widely employed as alternatives to animal testing for toxicological studies but  have been limited due to ...