Name: methods for rearing the parasitoid ganaspis brasiliensis, a promising biological control agent for the invasive drosophila suzukii
Uploaded: 2022-06-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Methods for Rearing the Parasitoid Ganaspis brasiliensis, a Promising Biological Control Agent for the Invasive Drosophila suzukii at JoVE.com

저자는 G1 G. brasiliensis를 친절하게 제공 한 Lukas Seehausen과 Marc Kenis (CABI, Switzerland)에게 감사드립니다. 이탈리아의 기금은 Provincia Autonoma di Trento, Trento, Italy, 그리고 미국에서는 National Institute of Food and Agriculture, USDA Specialty Crops Research Initiative Award (#2020-5118-32140), USDA Animal and Plant Health Inspection Service (Farm Bill, fund 14-8130-0463) 및 USDA ARS CRIS 기본 기금 (프로젝트 8010-22000-033-00D)에 의해 제공되었습니다. USDA는 기회 균등 제공자 및 고용주이며이 간행물에 언급 된 제품을 보증하지 않습니다.

1. G3 Ganaspis brasiliensis의 소규모 실험실 사육 방법
<ol><li>숙주 식단을 준비하십시오.<ol>
<li>1,500 mL 유리 용기에 증류수 600 mL를 넣고 핫 플레이트에서 물을 가열하십시오.</li>
		<li>시판되는 건조 식단 88.6g(한천, 브루어스 효모, 옥수수가루, 메틸 파라벤 및 수크로오스로 제조됨)을 추가하거나 Dalton et al.28 에 의해 공개된 화학식을 사용하여 식단을 준비한다(단계 ...

<ol>
	<li>Asplen, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasion+biology+of+spotted+wing+drosophila+(Drosophila+suzukii):+a+global+perspective+and+future+priorities.">Invasion biology of spotted wing drosophila (Drosophila suzukii): a global perspective and future priorities.</a> Journal of Pest Science. 88 (3), 469-494 (2015).</li><li>Tait, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+suzukii+(Diptera:+Drosophilidae):+A+decade+of+research+towards+a+sustainable+integrated+pest+management+program.">Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae): A decade of research towards a sustainable integrated pest management program.</a> Journal of Economic Entomology. 114 (5), 1950-1974 (2021).</li><li>Kirschbaum, D. S., Funes, C. F., Buonocore-Biancheri, M. J., Su&#225;rez, L., Ovruski, S. M., Garcia, F. R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biology+and+ecology+of+Drosophila+suzukii+(Diptera:+Drosophilidae).">The biology and ecology of Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae).</a> Drosophila suzukii management. , 41-92 (2020).</li><li>Wang, X. G., Lee, J. C., Daane, K. M., Buffington, M. L., Hoelmer, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Biological control of Drosophila suzukii.</a> CAB Reviews. 15, 054 (2020).</li><li>Lee, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+control+of+spotted-wing+drosophila+(Diptera:+Drosophilidae):+Current+and+pending+tactics.">Biological control of spotted-wing drosophila (Diptera: Drosophilidae): Current and pending tactics.</a> Journal of Integreated Pest Management. 10 (1), 13 (2019).</li><li>Wang, X. G., Lee, J. C., Daane, K. M., Hoelmer, K. A., Garcia, F. R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+control+of+spotted-wing+drosophila:+An+update+on+promising+agents.">Biological control of spotted-wing drosophila: An update on promising agents.</a> Drosophilia suzukii management. , 143-167 (2020).</li><li>Daane, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+exploration+of+parasitoids+of+Drosophila+suzukii+in+South+Korea+as+potential+classical+biological+agents.">First exploration of parasitoids of Drosophila suzukii in South Korea as potential classical biological agents.</a> Journal of Pest Science. 89 (3), 823-835 (2016).</li><li>Giorgini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploration+for+native+parasitoids+of+Drosophila+suzukii+in+China+reveals+a+diversity+of+parasitoid+species+and+narrow+host+range+of+the+dominant+parasitoid.">Exploration for native parasitoids of Drosophila suzukii in China reveals a diversity of parasitoid species and narrow host range of the dominant parasitoid.</a> Journal of Pest Science. 92 (2), 509-522 (2019).</li><li>Girod, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+parasitoid+complex+of+D.+suzukii+and+other+fruit+feeding+Drosophila+species+in+Asia.">The parasitoid complex of D. suzukii and other fruit feeding Drosophila species in Asia.</a> Scientific Reports. 8 (1), 11839 (2018).</li><li>Kacsoh, B. Z., Schlenke, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+hemocyte+load+is+associated+with+increased+resistance+against+parasitoids+in+Drosophila+suzukii,+a+relative+of+D.+melanogaster.">High hemocyte load is associated with increased resistance against parasitoids in Drosophila suzukii, a relative of D. melanogaster.</a> PLoS ONE. 7 (4), 34721 (2012).</li><li>Buffington, M. L., Forshage, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Redescription+of+Ganaspis+brasiliensis+(Ihering,+1905),+new+combination+(Hymenoptera:+Figitidae),+a+natural+enemy+of+the+invasive+Drosophila+suzukii+(Matsumura,+1931)(Diptera:+Drosophilidae).">Redescription of Ganaspis brasiliensis (Ihering, 1905), new combination (Hymenoptera: Figitidae), a natural enemy of the invasive Drosophila suzukii (Matsumura, 1931)(Diptera: Drosophilidae).</a> Procedings of the Entomoogical Society of Washington. 118 (1), 1-13 (2016).</li><li>Biondi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innate+olfactory+responses+of+Asobara+japonica+(Hymenoptera:+Braconidae)towards+fruits+infested+by+the+invasive+spotted+wing+drosophila.">Innate olfactory responses of Asobara japonica (Hymenoptera: Braconidae)towards fruits infested by the invasive spotted wing drosophila.</a> Journal of Insect Behavior. 30 (5), 495-506 (2017).</li><li>Biondi, A., Wang, X. G., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+preference+of+three+Asian+larval+parasitoids+to+closely+related+Drosophila+species:+implications+for+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Host preference of three Asian larval parasitoids to closely related Drosophila species: implications for biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 94 (2), 273-283 (2021).</li><li>Girod, P., Rossignaud, L., Haye, T., Turlings, T. C. J., Kenis, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+Asian+parasitoids+in+larvae+of+Drosophila+suzukii+feeding+on+blueberry+and+artificial+diet.">Development of Asian parasitoids in larvae of Drosophila suzukii feeding on blueberry and artificial diet.</a> Journal of Applied Entomology. 142 (5), 483-494 (2018).</li><li>Wang, X. G., Nance, A. H., Jones, J. M. L., Hoelmer, K. A., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aspects+of+the+biology+and+reproductive+strategy+of+two+Asian+larval+parasitoids+evaluated+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Aspects of the biology and reproductive strategy of two Asian larval parasitoids evaluated for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 121, 58-65 (2018).</li><li>Wang, X. G., Biondi, A., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+responses+of+three+candidate+Asian+larval+parasitoids+evaluated+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Functional responses of three candidate Asian larval parasitoids evaluated for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Economic Entomology. 113 (1), 73-80 (2020).</li><li>Wang, X. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+Asobara+japonica+as+a+potential+biological+control+agent+for+the+spotted+wing+drosophila,+Drosophila+suzukii.">Assessment of Asobara japonica as a potential biological control agent for the spotted wing drosophila, Drosophila suzukii.</a> Entomologia Generalis. 41, 1-12 (2021).</li><li>Hougardy, E., Hogg, B. N., Wang, X. G., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+thermal+performances+of+two+Asian+larval+parasitoids+of+Drosophila+suzukii.">Comparison of thermal performances of two Asian larval parasitoids of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 136, 104000 (2019).</li><li>Wang, X. G., Hogg, B. N., Hougardy, E., Nance, A. H., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+competitive+outcomes+among+three+solitary+larval+endoparasitoids+as+candidate+agents+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Potential competitive outcomes among three solitary larval endoparasitoids as candidate agents for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 130, 18-26 (2019).</li><li>Daane, K. M., Biondi, A., Wang, X. G., Hogg, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+host+ranges+of+three+Asian+larval+parasitoids+of+Drosophila+suzukii.">Potential host ranges of three Asian larval parasitoids of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 94 (4), 1171-1182 (2021).</li><li>Girod, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+specificity+of+Asian+parasitoids+for+potential+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Host specificity of Asian parasitoids for potential classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 91 (4), 1241-1250 (2018).</li><li>Seehausen, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+a+cryptic+parasitoid+species+reveals+its+suitability+as+a+biological+control+agent.">Evidence for a cryptic parasitoid species reveals its suitability as a biological control agent.</a> Scientific Reports. 10 (1), 19096 (2020).</li><li>Nomano, F. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+differentiation+of+Ganaspis+brasiliensis+(Hymenoptera:+Figitidae)+from+East+and+Southeast+Asia.">Genetic differentiation of Ganaspis brasiliensis (Hymenoptera: Figitidae) from East and Southeast Asia.</a> Applied Entomology and Zoology. 52 (3), 429-437 (2017).</li><li>Kasuya, N., Mitsui, H., Ideo, S., Watada, M., Kimura, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ecological,+morphological+and+molecular+studies+on+Ganaspis+individuals+(Hymenoptera:+Figitidae)+attacking+Drosophila+suzukii+(Diptera:+Drosophilidae).">Ecological, morphological and molecular studies on Ganaspis individuals (Hymenoptera: Figitidae) attacking Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae).</a> Applied Entomology and Zoology. 48 (1), 87-92 (2013).</li><li>Matsuura, A., Mitsui, H., Kimura, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+preliminary+study+on+distributions+and+oviposition+sites+of+Drosophila+suzukii+(Diptera:+Drosophilidae)+and+its+parasitoids+on+wild+cherry+tree+in+Tokyo,+central+Japan.">A preliminary study on distributions and oviposition sites of Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae) and its parasitoids on wild cherry tree in Tokyo, central Japan.</a> Applied Entomology and Zoology. 53 (1), 47-53 (2018).</li><li>Abram, P. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+records+of+Leptopilina,+Ganaspis,+and+Asobara+species+associated+with+Drosophila+suzukii+in+North+America,+including+detections+of+L.+japonica+and+G.+brasiliensis.">New records of Leptopilina, Ganaspis, and Asobara species associated with Drosophila suzukii in North America, including detections of L. japonica and G. brasiliensis.</a> Journal of Hymenoptera Research. 78, 1-17 (2020).</li><li>Puppato, S., Grassi, A., Pedrazzoli, F., De Cristofaro, A., Ioriatti, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+report+of+Leptopilina+japonica+in+Europe.">First report of Leptopilina japonica in Europe.</a> Insects. 11 (9), 611 (2020).</li><li>Dalton, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+survival+of+Drosophila+suzukii+under+simulated+winter+conditions+of+the+Pacific+Northwest+and+seasonal+field+trapping+in+five+primary+regions+of+small+and+stone+fruit+production+in+the+United+States.">Laboratory survival of Drosophila suzukii under simulated winter conditions of the Pacific Northwest and seasonal field trapping in five primary regions of small and stone fruit production in the United States.</a> Pest Managagement Science. 67 (11), 1368-1374 (2011).</li></ol>

생물학적 조절제의 장기간의 연구 및 후속 현장 방출은 효과적이고 경제적인 사육 기술의 가용성에 의존한다. 이 연구에서 설명 된 방법은 Ganaspis brasiliensis의 소규모 및 대규모 양육을위한 효율적인 프로토콜로 입증되었습니다. 소규모 사육 프로토콜은 노동력을 최적화하고 기생충과 숙주 식민지를 동시에 유지하는 데 필요한 특수 장비를 줄이기 위해 수년에 걸쳐 개발되었습니다. 실험실...

동아시아가 원산지인 초파리인 초파리(Drosophila suzukii, Matsumura)(딥테라: 초파리대)는 아메리카 대륙, 유럽 및 아프리카 1,2 일부 지역에서 널리 설립되었습니다. 파리는 매우 다식 성이며, 원산지 및 침입 지역 1,2,3에서 부드럽고 얇은 피부를 가진 다양한 재배 및 야생 과일을 활용할 수 있습니다. 이 해충에 대한 현재의 관리 전략은 감수성이있는 과일이 익을 때 작물 밭에서 성인 파리를 대상으로하는 살충제의 빈번한 사용에 크게 의존합니다. 반복되는 스프레이가 자주 사용되는데, 아마도 비작물 서식지에서 저수지 플라이 개체군이 지속적으로 유출되고 침략 지역(1,4)에 거주하는 효과적인 천적이 부족하기 때문일 수 있다. 생물학적 통제, 특히 자기 영속적 인 특수 기생충을 통한 생물학적 통제는 조경 수준에서 비행 개체군을 억제하는 데 도움이 될 수 있으며이 이동성이 높은 다식성 해충 4,5,6의 지속 가능한 지역 전체 관리에 중요한 역할을 할 수 있습니다.
지난 수십 년 동안 연구자들은 동아시아 7,8,9의 파리의 토착 범위에서 초파리 스즈키의 공동 진화 된 기생충과 미주 및 유럽 4,5,6의 파리의 침략 지역에서 효과적이지만 새로 관련된 기생충을 발견하기위한 노력에 중점을 두었습니다. 파리의 새로 침입 된 지역에서는 Asobara c.f. tabida (Nees) (Hymenoptera : Braconidae), Leptopilina boulardi (Barbotin et al.) 및 L. heterotoma (Thompson) (Hymenoptera : Figitidae)와 같이 일반적으로 발생하는 유충 초파리 기생충은 파리의 강한 면역 저항으로 인해 D. suzukii에서 기생 수준이 낮거나 발달 할 수 없습니다10. 북미와 유럽의 Pachycrepoideus vindemiae (Rondani) (Hymenoptera : Pteromalidae) 및 Trichopria drosophilae (Perkins) (Hymenoptera : Diapriidae)와 같은 일부 국제 및 일반 번데기 기생충 만이 파리에서 쉽게 발전 할 수 있습니다4. 대조적으로, 동아시아에서의 탐사 는 D. suzukii 4,5,6에서 많은 애벌레 기생충을 발견했습니다. 그 중 Asobara japonica Belokobylskij, Ganaspis brasiliensis Ihering, Leptopilina japonica Novković & Kimura는 지배적 인 애벌레 기생충 7,8,9,11입니다. 특히, 두 개의 피규어 (L. japonica 및 G. brasiliensis)는 D. suzukii 및 / 또는 천연 식물 7,8,9에서 다른 밀접하게 관련된 drosophilids에 의해 감염된 신선한 과일에서 주로 발견되는 주요 기생충이었습니다. 이 세 개의 아시아 유충 기생충은 미국과 유럽의 검역 시설로 수입되었으며, 상대적 효율성 12,13,14,15,16,17, 기후 적응성 18, 잠재적 인 상호 특이적 경쟁 상호 작용 19, 그리고 가장 중요한 것은 숙주 특이성 8,20,21에 대해 평가되었습니다. ,22.
검역 평가에 따르면 Ganaspis brasiliensis는 다른 테스트 된 아시아 유충 기생충보다 Drosophila suzukii에 더 특이적이었지만 다양한 숙주 특이성을 가진 다른 생물형 또는 암호 종으로 구성 될 가능성이 높습니다 8,21,22,23,24. Nomano et al.22는 미토콘드리아 시토크롬 옥시다제 I 유전자 단편의 분자 분석을 기반으로 서로 다른 지리적 영역의 Ganaspis 개인을 5 개의 유전 그룹 (G1-G5로 명명)으로 그룹화했습니다. G2 및 G4 그룹은 몇몇 남아시아 열대 지역에서만 보고되고, G5 그룹은 알려지지 않은 숙주(들)로부터 아시아 및 다른 지역(예를 들어, 아르헨티나, 브라질, 하와이 및 멕시코)으로부터 보고되었다(버핑턴, 개인 관찰). 한국7, 중국8 및 일본에서 D. suzukii에 의해 감염된 야생 과일의 현장 컬렉션 9,23,25는 G1 단독 또는 G1 및 G3 그룹을 나타내는 표본의 혼합물을 발견했습니다. 두 그룹은 D. suzukii 및 다른 밀접하게 관련된 숙주 파리가 서식하는 동일한 숙주 식물에 공존하고 공존하는 것처럼 보입니다. 그럼에도 불구하고, G1은 G3보다 D. suzukii에 대해 더 높은 수준의 숙주 또는 숙주 서식지 특이성을 갖는 것으로 보이지만, 둘 다 검역 검사21,22에서 밀접하게 관련된 많은 종을 공격하지만, 두 그룹 사이에 약간의 차이가 관찰되었다. 더 상세한 분자 분석은 특히 G1 및 G3 그룹의 종 상태를 결정하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 연구는 G1 G. brasiliensis 및 G3 G. brasiliensis라고 부릅니다. 일부 초기 연구에서는 G1 G. brasiliensis를 G로 명명했습니다. cf. brasiliensis 14,21,22. G1 G. brasiliensis는 최근 미국과 이탈리아의 D. suzukii에 대한 현장 출시를 위해 승인되었으며 (다른 여러 유럽 국가에서도 현재 도입을 고려하고 있음), G3 G. brasiliensis는 가까운 장래에 현장 출시를 위해 고려 될 수 있습니다. 최근 설문 조사에 따르면 캐나다 브리티시 컬럼비아주 26 및 미국 워싱턴 주 (Beers et al., 미공개 데이터)의 L. japonica 및 G1 G. brasiliensis의 출현 인구와 이탈리아 트렌토 주27의 모험적인 L. japonica 인구가 발견되었습니다.
Drosophila suzukii 관리를위한 생물학적 제어 프로그램 개발에 대한 상당한 관심과 Ganaspis brasiliensis의 모험적이고 고의적 인 도입의 실질적인 생물학적 통제 잠재력을 감안할 때, 미래의 장기 연구 및 / 또는 현장 방출을 위해이 애벌레 기생충에 대한 효율적인 양육 방법을 개발할 필요가 있습니다. 이 프로토콜 및 관련 비디오 기사는이 기생충에 대한 두 가지 양육 방법을 설명합니다 : (1) D. 스즈키의 배양을위한 숙주 과일 (블루 베리)과 인공 식단의 혼합물을 사용하여 플라스크에서 소규모 실험실 사육. 이 방법은 원래 중국 쿤밍 (Kunming, China)에서 수집 한 G3 재료를 사용하여 개발되었습니다8. (2) D. 스즈키의 배양을 위해 숙주 과일 (블루 베리)을 사용하여 큰 새장에서 현장 방출을위한 대량 사육. 대규모 사육에 사용 된 유전 그룹은 일본 도쿄에서 시작된 G1 주식 9,22 개였습니다. 두 그룹 모두에 바이알 또는 작은 용기를 사용하는 것과 같은 다른 양육 방법의 다른 스케일도 간략하게 논의됩니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Active dry yeast</td>
			<td>Fleischmanns Yeast, Cincinatti, OH, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to cover fruit to reduce mold growth and enhance the frui attraction to the flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bacteriological agar</td>
			<td>Merk Life Science S.r.l., Milan, Italy</td>
			<td>A1296 - 5KG</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bleach solution</td>
			<td>Clorox Company, Oakland, CA, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to disinfect flesh fruit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blue stopper</td>
			<td>Azer Scientific, Morgantown, PA, USA</td>
			<td>ES3837</td>
			<td>Used for sealing the tube while allowing ventilation for insects</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blueberries</td>
			<td>Grocery Store, Newark, DE, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Provided as host fruit for the flies (various other fruit can also be used)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BugDorm insect rearing cage (W24.5 x D24.5 x H63.0 cm)</td>
			<td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan</td>
			<td>4E3030</td>
			<td>Used for rearing parasitoids (parasitism cage)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BugDorm insect rearing cage (W32.5 x D32.5 x H32.5 cm)</td>
			<td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan</td>
			<td>4E4590</td>
			<td>Used for rearing flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BugDorm insect rearing cage (W32.5 x D32.5 x H32.5 cm)</td>
			<td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan</td>
			<td>4E4545</td>
			<td>Used for rearing parasitoids (eclosion cage)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chicken wire (0.64 cm, 19 gauge)</td>
			<td>Everbilt, OH, USA</td>
			<td>308231EB</td>
			<td>Used to lift up the fruit to allow maximum parasitoid oviposition</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cornmeal</td>
			<td>Grocery Store, Trento, TN, Italy</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dental cotton roll (1 x 3.8 cm)</td>
			<td>Gima S.p.A., Gessate, MI, Italy</td>
			<td>35000</td>
			<td>Used for providing water to the parasitoids within the storage container</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila diet</td>
			<td>Frontier Scientific, Newark, DE, USA</td>
			<td>TF1003</td>
			<td>Custom diet used to rear flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila vial narrow, Polystirene (2.5 x 9.5 cm)</td>
			<td>VWR International, LLC., Radnor, PA, US</td>
			<td>75813-160</td>
			<td>Used for providing water to the parasitoids within the cage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila vial plugs, Cellulose acetate (2.5 cm)</td>
			<td>VWR International, LLC., Radnor, PA, US</td>
			<td>89168-886</td>
			<td>Used for providing water to the parasitoids within the cage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Erlenmeyer flask (250 mL)</td>
			<td>Carolina Biological, Burlington, NC, USA</td>
			<td>731029</td>
			<td>Used for rearing flies and parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon-style centrifuge tube (50 mL)</td>
			<td>VWR International, LLC., Radnor, PA, US</td>
			<td>VWRI525-0611</td>
			<td>Modified to ship adult parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foam stopper</td>
			<td>Jaece Industries, North Tanawanda, NY, USA</td>
			<td>L800-C</td>
			<td>Used for sealing the flasks while allowing ventilation for insects</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Honey</td>
			<td>Grocery Store, Newark, DE, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Provided as food for parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Identi-Plug plastic foam stopper</td>
			<td>Fisher Scientific Company, L.L.C., Pittsburg, PA, US</td>
			<td>14-127-40E</td>
			<td>Used as feeder for parasitoids and to seal the storage container</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Industrial paper towel</td>
			<td>Grocery Store, Newark, DE, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Provided as a pupation substrate for pupae and mitigated moisture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micron mesh fabric (250 mL)</td>
			<td>Industrial Netting, Maple Grove, MN, USA</td>
			<td>WN0250-72</td>
			<td>Used to make ventilation lid for insects</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nutritional yeast (flakes)</td>
			<td>Grocery Store, Trento, TN, Italy</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paper coaster (10.2 cm)</td>
			<td>Hoffmaster, WI, USA</td>
			<td>35NG26</td>
			<td>Porvided as pupation substrate for flies and parsitized pupae</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic cup (&#216; 13.3 cm, 800 mL)</td>
			<td>Berry Superfos, Taastrup, Denmark</td>
			<td>Unipak 5134</td>
			<td>Modified to store adult parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic lid (&#216; 13.3 cm)</td>
			<td>Berry Superfos, Taastrup, Denmark</td>
			<td>PP 2830</td>
			<td>Modified to store adult parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propionic acid</td>
			<td>Merk Life Science S.r.l., Milan, Italy</td>
			<td>P1386 - 1L</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saccharose</td>
			<td>Grocery Store, Trento, TN, Italy</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soup cup with lid (475 mL)</td>
			<td>StackMan, Vietnam</td>
			<td>DC1648</td>
			<td>Used for parasitized larvae to pupate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soybean flour</td>
			<td>Grocery Store, Trento, TN, Italy</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>White felt washer (0.64 cm thick, 5 mm ID x 20 mm OD)</td>
			<td>Quiklok, Lincoln, NH, US</td>
			<td>WFW/.25 x 5 x 20 mm</td>
			<td>Used as feeding ring for parasitoids</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

methods for rearing the parasitoid ganaspis brasiliensis, a promising biological control agent for the invasive drosophila suzukii

동아시아가 원산지인 초파리인 초파리( Drosophila suzukii , Matsumura)(딥테라: 초파리대)는 지난 십 년간 아프리카의 미주, 유럽 및 일부 지역에서 널리 설립되어 침입한 지역에서 다양한 부드러운 껍질을 가진 과일의 파괴적인 해충이 되었습니다. 생물학적 통제, 특히 자기 영속적이고 전문화 된 기생충을 통한 생물학적 통제는이 고도로 이동성이 높은 다식성 해충에 대한 지속 가능한 지역 전체 관리를위한 실행 가능한 옵션이 될 것으로 예상됩니다. 가나피스 브라실리엔시스 Ihering (Hymenoptera : Figitidae)은 동아시아에 널리 분포하는 애벌레 기생충이며, D. suzukii의 가장 효과적인 기생충 중 하나 인 것으로 밝혀졌습니다.
효능 및 잠재적 인 비 표적 위험에 대한 엄격한 사전 도입 평가에 따라,이 종의 숙주 특이적 유전 그룹 중 하나 (G1 G. brasiliensis)는 최근 미국과 이탈리아에서 도입 및 현장 방출을 위해 승인되었습니다. 동아시아에서 D. suzukii를 공격하는 것으로 일반적으로 밝혀진 또 다른 유전 그룹 (G3 G. brasiliensis)은 가까운 장래에 도입 될 것으로 간주 될 수 있습니다. 현재 연구를 위해 G. brasiliensis를 키우거나 D. suzukii에 대한 현장 방출을위한 대량 생산에 엄청난 관심이 있습니다. 이 프로토콜 및 관련 비디오 기사는이 기생충에 대한 효과적인 양육 방법을 연구를위한 소규모 및 대량 생산 및 현장 출시를위한 대규모 모두에 대해 설명합니다. 이러한 방법은이 글로벌 침습성 해충에 대한 유망한 생물학적 방제제로서이 아시아 원주민 기생충의 장기적인 연구 및 사용에 도움이 될 수 있습니다.

그림 4는 USDA-ARS 유익한 곤충 소개 유닛 (뉴어크, 델라웨어)의 검역 시설에서 두 개의 다른 기생충 밀도 (6 또는 10 쌍)와 두 개의 다른 노출 시간 (5 또는 10 일)을 사용하여 G3 Ganaspis brasiliensis의 소규모 실험실 사육의 대표적인 결과를 보여줍니다. 기생충 밀도 및 노출 시간의 각 조합에 대해 14번의 반복실험이 있었다. 총 64 개의 플라스크는 4,018 마리의 말벌 (플라스크 당 ...

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Methods for Rearing the Parasitoid Ganaspis brasiliensis, a Promising Biological Control Agent for the Invasive Drosophila suzukii

Ganaspis brasiliensis-Drosophila suzukii (세계적인 침습성 과일 작물 해충)의 애벌레 기생충 -이 해충의 생물학적 방제를 위해 유럽과 미국에 도입 될 것으로 승인되었거나 고려되었습니다. 이 기사는이 기생충의 소규모 및 대규모 양육을위한 프로토콜을 제공합니다.

기생충 Ganaspis brasiliensis를 양육하는 방법, 침습성 초파리 스즈키에 대한 유망한 생물학적 조절제

Native to East Asia, the spotted-wing drosophila, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), has established widely in the Americas, Europe, ...

바이오 조절제의 장기적인 연구 및 사용은 효과적이고 경제적 인 양육 기술의 가용성에 달려 있으며,이 프로토콜은이 기생충을 사육하는 데 효율적인 것으로 입증되었습니다. 현재 연구 또는 현장 방출을 위해이 기생충을 키우는 데 엄청난 관심이 있으며,이 프로토콜은이 유망한 바이오 조절제의 향후 장기 연구 및 사용에 도움이 될 것입니다. 첫 번째 사용자는 기사에 제공된 관련 참고 문헌과 방법의 몇 가지 관행을 읽음으로써 관련 곤충의 기본 생물학을 이해해야 할 수도 있습니다.숙주 식단을 만들기 위해, 먼저, 원고에 설명 된대로식이 요법의 액체 부분을 준비하십시오. 그런 다음 25 ~ 30 그램의 으깬 블루 베리를 빈 250 밀리리터 플라스크에 넣으십시오. 그런 다음 으깬 블루 베리의 꼭대기를 덮고있는 액체로 플라스크에 액체를 붓습니다.다음으로, 숙주 Drosophila 스즈키를 기르기 위해 먼저 흡수성 종이 타월 조각을 자르고 중앙에서 비틀어주십시오. 그런 다음 종이 타월의 꼬인 중간 부분을 다이어트 플라스크에 넣으십시오. 수분을 유지하려면 증류수를 사용하여 종이 타월과 식단을 적시십시오.그런 다음 성적으로 성숙한 성인 파리를 옮기려면 파리 식민지 플라스크의 마개를 조심스럽게 제거하고 다이어트 플라스크에 뒤집습니다. 이 노출 후 일주일 후, 파리가 출현하기 위해 삼 주 동안 환경 챔버에서 파리를 잡으십시오. 숙주 유충을 기생충에 노출시키려면 먼저 성인 파리와 종이 타월을 플라스크에서 꺼내 파리 알과 애벌레를 남겨 둡니다.유충의 번식 기질 역할을하려면 새로운 흡수성 종이 타월을 접어 플라스크에 넣으십시오. 그런 다음 기생충 G3 Ganaspis brasiliensis의 여섯 명의 여성과 남성 쌍을 플라스크에 넣고 거품 마개 바닥에 얇은 꿀 층을 줄이십시오. 기생충을 수집하고 저장하려면 오일 후에 성인을 제거하십시오.그런 다음 플라스크를 앞에서 언급 한 조건 하에서 35 일 동안 환경 챔버에 보관하십시오. 성인 말벌의 출현과 함께, 일주일에 세 번 그들을 열망하십시오. 말벌을 잡으려면 먼저 2.5x9.5 평방 센티미터의 초파리 바이알 바닥에 젖었지만 증류수로 포화되지 않은 종이 타월을 놓습니다.그런 다음 약 60 마리의 말벌을 바이알로 옮기고 출현 날짜를 표시하십시오. 바이알을 환경 챔버에 보관하십시오. 일주일에 두 번, 바이알의 거품 마개 바닥에 얇은 꿀 층을 줄무늬.첫째, Drosophila 스즈키의 대규모 사육을 준비하여 1, 500 ~ 2, 000 성적으로 성숙한 성인 파리를 50:50 성비로 크고 뜨개질 된 메쉬로 덮인 케이지에 배치하십시오. 그런 다음 물에 적신 면화와 표준 초파리 배지가있는 네 개에서 여섯 개의 페트리 접시가있는 접시를 케이지에 넣으십시오. 매주 두 번, 노출 된 페트리 요리를 신선한 요리로 교체하십시오.뚜껑이없는 각 페트리 접시를 800 밀리리터 플라스틱 컵에 넣고 컵을 미세한 메쉬로 덮으십시오. 그런 다음 컵을 섭씨 23도 및 75 % 상대 습도에서 12 ~ 15 일 동안 배양하십시오. 부화 후, 새로 부화 한 성인 Drosophila 스즈키를 양육 케이지로 옮깁니다.다음으로, 블루 베리를 찬물에 한 분 동안 헹구고 표백제로 채워진 분지에 과일을 담그고 3 분 동안 5 %로 희석하여 숙주 유충을 준비하십시오. 그런 다음 아홉 센티미터의 페트리 접시에 씻은 블루 베리를 채 웁니다. 늦은 오후 시간에는 Petri 접시를 양육 케이지에 넣고 밤새 두십시오.다음날 아침, 페트리 요리를 부드럽게 탭하여 과일에서 파리를 제거하고 사육 케이지에서 과일을 제거하십시오. 한편, 기생 G1 Ganaspis brasiliensis를위한 기생 케이지와 말벌 출현 케이지를 준비하십시오. 두 케이지 모두 하나 이상의 피더를 일시 중단하기 위해 천장 아래에 얇은 끈이 있어야합니다.각 케이지에서 물이 들어있는 초파리 바이알을 현탁하고 상대 습도에 따라 다섯 일에서 칠일마다 셀룰로오스 아세테이트 플러그를 천장에서 거꾸로 밀봉하십시오. Drosophila 스즈키 케이지에서 감염된 블루 베리를 꺼내 자마자 1, 500에서 2, 000 Ganaspis brasiliensis 말벌과 함께 기생 케이지에 2 ~ 3 일 동안 넣으십시오. 다음으로, 바닥에 흡수성 종이가있는 800 밀리리터 플라스틱 컵에 과일을 모으십시오.열린 컵을 적어도 28 일 동안 섭씨 21도 및 65 % 상대 습도의 출현 또는 망막 케이지에서 배양하십시오. 배양의 두 번째 및 세 번째 주 동안, 조기 숙주 eclosion에 대한 케이지를 매주 확인하십시오. 연속적인 기생충 수집을 용이하게하려면 성인 파리를 제거하십시오.배양의 네 번째 주가 끝나면 케이지에 피더와 수원을 제공하십시오. 성인 말벌의 약 10-15 %를 수집하고 오래되고 비생산적인 말벌을 대체하기 위해 기생 케이지로 옮깁니다. eclosion 케이지의 나머지 말벌에서 최대 700 명의 성인을 50:50 성비로 보관하고 물로 채워진 두 밀리리터 튜브가 들어있는 800 밀리리터 플라스틱 컵을 컵으로 보관하고 컵 바닥에 치과용 면봉으로 밀봉하십시오.뚜렷한 출현 상태가있는 컵을 최대 한 달 동안 환경 챔버에 보관하십시오. 기생충을 운송하려면 약 200 명의 성인을 50 밀리리터 원뿔형 튜브에 넣으십시오. 그런 다음 모든 튜브를 얼음 팩과 함께 절연 운송 용기에 넣으십시오.이 프로토콜은 실험실의 농업 해충 Drosophila suzuki에 대한 기생충 에이전트 인 G3 Ganaspis brasiliensis의 소규모 사육을 성공적으로 가져 왔습니다. 자손 생산은 기생충 밀도와 노출 시간의 차이에 영향을받지 않았습니다. G1 Ganaspis brasiliensis의 대규모 생성도 달성 될 수 있으며, 숙주 Drosophila 스즈키에 처음 노출 된 후 5 주 후에 생산이 시작됩니다.8 주에서 22 주까지, 기생충 생산은 그들에게 노출 된 과일의 양에 비례하게되었습니다. 적절한 사육 온도를 유지하고 습도를 조절하며 항상 성인 곤충에게 음식을 제공하는 것이 매우 중요합니다. 이 방법은 말벌의 번식을 극대화하기 위해 숙주와 기생충의 사육 밀도를 최적화하고 대체 숙주에서이 기생충을 사육 할 가능성을 모색함으로써 더욱 개선 될 수 있습니다.

Research

JoVE Journal

Biology

Methods for Rearing the Parasitoid Ganaspis brasiliensis, a Promising Biological Control Agent for the Invasive Drosophila suzukii

Protocol for Mosquito Rearing (A. gambiae)

Protocol for Mosquito Rearing A. gambiae

모스키토 리어링 (A. gambiae)에 대한 프로토콜

This protocol describes mosquito rearing in the insectary. The insectary rooms are maintained at 28&deg;C and ~80% humidity, with a 12 hr. day/night ...

연구

생물학

Labeling hESCs and hMSCs with Iron Oxide Nanoparticles for Non-Invasive in vivo Tracking with MR Imaging

이런 산화물로 hESCs과 hMSCs을 라벨링하는 MR 영상과 생체내 추적 비침습에 대한 Nanoparticles

In recent years, stem cell research has led to a better understanding of developmental biology, various diseases and its potential impact on regenerative ...

Labeling Stem Cells with Fluorescent Dyes for non-invasive Detection with Optical Imaging

광학 이미징과 비침습 감지를위한 형광 염료와 함께 줄기 세포를 라벨링

Optical imaging (OI) is an easy, fast and inexpensive tool for in vivo monitoring of new stem cell based therapies. The technique is based on ex vivo ...

Electrophysiological Methods for Recording Synaptic Potentials from the NMJ of Drosophila Larvae

Drosophila의 애벌레의 NMJ에서 시냅틱 후보를 녹음 Electrophysiological 방법

In this video, we describe the electrophysiological methods for recording synaptic transmission at the neuromuscular junction (NMJ) of Drosophila larva. ...

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

에 Electrophysiological 녹음 Drosophila 엠브료

Drosophila is a premier genetic model for the study of both embryonic development and functional neuroscience. Traditionally, these fields are quite ...

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

에 잔 심장을 떠올리 Drosophila</em

The Drosophila heart has recently emerged as a good model system for examining the genetic, cellular, and molecular mechanisms underlying function in ...

Methods for the Study of the Zebrafish Maxillary Barbel

Zebrafish 상악 바벌의 연구 방법

Barbels are skin sensory appendages found in fishes, reptiles and amphibians.  The zebrafish, Danio rerio, develops two pairs of barbels- a short nasal ...

An Optimized Protocol for Rearing Fopius arisanus, a Parasitoid of Tephritid Fruit Flies

An Optimized Protocol for Rearing Fopius arisanus, a Parasitoid of Tephritid Fruit Flies

리어링을위한 최적화된 프로토콜 Fopius arisanus Tephritid 과일 Parasitoid 난다

Fopius arisanus (Sonan) is an important parasitoid of Tephritid fruit flies for at least two reasons. First, it is the one of only three opiine ...

Blastomere Explants to Test for Cell Fate Commitment During Embryonic Development

Blastomere Explants는 배아 개발하는 동안 세포 운명의 헌신에 대해 테스트 할

Fate maps, constructed from lineage tracing all of the cells of an embryo, reveal  which tissues descend from each cell of the embryo.  Although fate maps ...

Autonomously Bioluminescent Mammalian Cells for Continuous and Real-time Monitoring of Cytotoxicity

세포 독성의 지속적인 실시간 모니터링을위한 자율적으로 바이오 루미 네 센트 포유 동물 세포

Mammalian  cell-based in vitro assays have been  widely employed as alternatives to animal testing for toxicological studies but  have been limited due to ...