Name: methods for rearing the parasitoid ganaspis brasiliensis, a promising biological control agent for the invasive drosophila suzukii
Uploaded: 2022-06-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Methods for Rearing the Parasitoid Ganaspis brasiliensis, a Promising Biological Control Agent for the Invasive Drosophila suzukii at JoVE.com

Авторы благодарят Лукаса Зеехаузена и Марка Кениса (CABI, Швейцария) за любезное предоставление G1 G. brasiliensis. Финансирование в Италии было предоставлено Provincia Autonoma di Trento, Тренто, Италия, и в США Национальным институтом продовольствия и сельского хозяйства, премией USDA Specialty Crops Research Initiative (#2020-5118-32140), Службой инспекции здоровья животных и растений Министерства сельского хозяйства США (Farm Bill, фонд 14-8130-0463) и базовыми фондами USDA ARS CRIS (проект 8010-22000-033-00D). Министерство сельского хозяйства США является поставщиком равных возможностей и работодателем и не одобряет продукты, упомянутые в этой публикации.

1. Методы мелкомасштабного лабораторного выращивания G3 G3 Ganaspis brasiliensis
<ol><li>Подготовьте диету хозяина.<ol>
<li>Добавьте 600 мл дистиллированной воды в стеклянную емкость объемом 1 500 мл и нагрейте воду на конфорке.</li>
		<li>Добавьте 88,6 г коммерчески доступной сухой диеты (изготовле?...

<ol>
	<li>Asplen, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasion+biology+of+spotted+wing+drosophila+(Drosophila+suzukii):+a+global+perspective+and+future+priorities.">Invasion biology of spotted wing drosophila (Drosophila suzukii): a global perspective and future priorities.</a> Journal of Pest Science. 88 (3), 469-494 (2015).</li><li>Tait, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+suzukii+(Diptera:+Drosophilidae):+A+decade+of+research+towards+a+sustainable+integrated+pest+management+program.">Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae): A decade of research towards a sustainable integrated pest management program.</a> Journal of Economic Entomology. 114 (5), 1950-1974 (2021).</li><li>Kirschbaum, D. S., Funes, C. F., Buonocore-Biancheri, M. J., Su&#225;rez, L., Ovruski, S. M., Garcia, F. R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biology+and+ecology+of+Drosophila+suzukii+(Diptera:+Drosophilidae).">The biology and ecology of Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae).</a> Drosophila suzukii management. , 41-92 (2020).</li><li>Wang, X. G., Lee, J. C., Daane, K. M., Buffington, M. L., Hoelmer, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Biological control of Drosophila suzukii.</a> CAB Reviews. 15, 054 (2020).</li><li>Lee, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+control+of+spotted-wing+drosophila+(Diptera:+Drosophilidae):+Current+and+pending+tactics.">Biological control of spotted-wing drosophila (Diptera: Drosophilidae): Current and pending tactics.</a> Journal of Integreated Pest Management. 10 (1), 13 (2019).</li><li>Wang, X. G., Lee, J. C., Daane, K. M., Hoelmer, K. A., Garcia, F. R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+control+of+spotted-wing+drosophila:+An+update+on+promising+agents.">Biological control of spotted-wing drosophila: An update on promising agents.</a> Drosophilia suzukii management. , 143-167 (2020).</li><li>Daane, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+exploration+of+parasitoids+of+Drosophila+suzukii+in+South+Korea+as+potential+classical+biological+agents.">First exploration of parasitoids of Drosophila suzukii in South Korea as potential classical biological agents.</a> Journal of Pest Science. 89 (3), 823-835 (2016).</li><li>Giorgini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploration+for+native+parasitoids+of+Drosophila+suzukii+in+China+reveals+a+diversity+of+parasitoid+species+and+narrow+host+range+of+the+dominant+parasitoid.">Exploration for native parasitoids of Drosophila suzukii in China reveals a diversity of parasitoid species and narrow host range of the dominant parasitoid.</a> Journal of Pest Science. 92 (2), 509-522 (2019).</li><li>Girod, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+parasitoid+complex+of+D.+suzukii+and+other+fruit+feeding+Drosophila+species+in+Asia.">The parasitoid complex of D. suzukii and other fruit feeding Drosophila species in Asia.</a> Scientific Reports. 8 (1), 11839 (2018).</li><li>Kacsoh, B. Z., Schlenke, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+hemocyte+load+is+associated+with+increased+resistance+against+parasitoids+in+Drosophila+suzukii,+a+relative+of+D.+melanogaster.">High hemocyte load is associated with increased resistance against parasitoids in Drosophila suzukii, a relative of D. melanogaster.</a> PLoS ONE. 7 (4), 34721 (2012).</li><li>Buffington, M. L., Forshage, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Redescription+of+Ganaspis+brasiliensis+(Ihering,+1905),+new+combination+(Hymenoptera:+Figitidae),+a+natural+enemy+of+the+invasive+Drosophila+suzukii+(Matsumura,+1931)(Diptera:+Drosophilidae).">Redescription of Ganaspis brasiliensis (Ihering, 1905), new combination (Hymenoptera: Figitidae), a natural enemy of the invasive Drosophila suzukii (Matsumura, 1931)(Diptera: Drosophilidae).</a> Procedings of the Entomoogical Society of Washington. 118 (1), 1-13 (2016).</li><li>Biondi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innate+olfactory+responses+of+Asobara+japonica+(Hymenoptera:+Braconidae)towards+fruits+infested+by+the+invasive+spotted+wing+drosophila.">Innate olfactory responses of Asobara japonica (Hymenoptera: Braconidae)towards fruits infested by the invasive spotted wing drosophila.</a> Journal of Insect Behavior. 30 (5), 495-506 (2017).</li><li>Biondi, A., Wang, X. G., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+preference+of+three+Asian+larval+parasitoids+to+closely+related+Drosophila+species:+implications+for+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Host preference of three Asian larval parasitoids to closely related Drosophila species: implications for biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 94 (2), 273-283 (2021).</li><li>Girod, P., Rossignaud, L., Haye, T., Turlings, T. C. J., Kenis, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+Asian+parasitoids+in+larvae+of+Drosophila+suzukii+feeding+on+blueberry+and+artificial+diet.">Development of Asian parasitoids in larvae of Drosophila suzukii feeding on blueberry and artificial diet.</a> Journal of Applied Entomology. 142 (5), 483-494 (2018).</li><li>Wang, X. G., Nance, A. H., Jones, J. M. L., Hoelmer, K. A., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aspects+of+the+biology+and+reproductive+strategy+of+two+Asian+larval+parasitoids+evaluated+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Aspects of the biology and reproductive strategy of two Asian larval parasitoids evaluated for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 121, 58-65 (2018).</li><li>Wang, X. G., Biondi, A., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+responses+of+three+candidate+Asian+larval+parasitoids+evaluated+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Functional responses of three candidate Asian larval parasitoids evaluated for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Economic Entomology. 113 (1), 73-80 (2020).</li><li>Wang, X. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+Asobara+japonica+as+a+potential+biological+control+agent+for+the+spotted+wing+drosophila,+Drosophila+suzukii.">Assessment of Asobara japonica as a potential biological control agent for the spotted wing drosophila, Drosophila suzukii.</a> Entomologia Generalis. 41, 1-12 (2021).</li><li>Hougardy, E., Hogg, B. N., Wang, X. G., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+thermal+performances+of+two+Asian+larval+parasitoids+of+Drosophila+suzukii.">Comparison of thermal performances of two Asian larval parasitoids of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 136, 104000 (2019).</li><li>Wang, X. G., Hogg, B. N., Hougardy, E., Nance, A. H., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+competitive+outcomes+among+three+solitary+larval+endoparasitoids+as+candidate+agents+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Potential competitive outcomes among three solitary larval endoparasitoids as candidate agents for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 130, 18-26 (2019).</li><li>Daane, K. M., Biondi, A., Wang, X. G., Hogg, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+host+ranges+of+three+Asian+larval+parasitoids+of+Drosophila+suzukii.">Potential host ranges of three Asian larval parasitoids of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 94 (4), 1171-1182 (2021).</li><li>Girod, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+specificity+of+Asian+parasitoids+for+potential+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii.">Host specificity of Asian parasitoids for potential classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 91 (4), 1241-1250 (2018).</li><li>Seehausen, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+a+cryptic+parasitoid+species+reveals+its+suitability+as+a+biological+control+agent.">Evidence for a cryptic parasitoid species reveals its suitability as a biological control agent.</a> Scientific Reports. 10 (1), 19096 (2020).</li><li>Nomano, F. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+differentiation+of+Ganaspis+brasiliensis+(Hymenoptera:+Figitidae)+from+East+and+Southeast+Asia.">Genetic differentiation of Ganaspis brasiliensis (Hymenoptera: Figitidae) from East and Southeast Asia.</a> Applied Entomology and Zoology. 52 (3), 429-437 (2017).</li><li>Kasuya, N., Mitsui, H., Ideo, S., Watada, M., Kimura, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ecological,+morphological+and+molecular+studies+on+Ganaspis+individuals+(Hymenoptera:+Figitidae)+attacking+Drosophila+suzukii+(Diptera:+Drosophilidae).">Ecological, morphological and molecular studies on Ganaspis individuals (Hymenoptera: Figitidae) attacking Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae).</a> Applied Entomology and Zoology. 48 (1), 87-92 (2013).</li><li>Matsuura, A., Mitsui, H., Kimura, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+preliminary+study+on+distributions+and+oviposition+sites+of+Drosophila+suzukii+(Diptera:+Drosophilidae)+and+its+parasitoids+on+wild+cherry+tree+in+Tokyo,+central+Japan.">A preliminary study on distributions and oviposition sites of Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae) and its parasitoids on wild cherry tree in Tokyo, central Japan.</a> Applied Entomology and Zoology. 53 (1), 47-53 (2018).</li><li>Abram, P. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+records+of+Leptopilina,+Ganaspis,+and+Asobara+species+associated+with+Drosophila+suzukii+in+North+America,+including+detections+of+L.+japonica+and+G.+brasiliensis.">New records of Leptopilina, Ganaspis, and Asobara species associated with Drosophila suzukii in North America, including detections of L. japonica and G. brasiliensis.</a> Journal of Hymenoptera Research. 78, 1-17 (2020).</li><li>Puppato, S., Grassi, A., Pedrazzoli, F., De Cristofaro, A., Ioriatti, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+report+of+Leptopilina+japonica+in+Europe.">First report of Leptopilina japonica in Europe.</a> Insects. 11 (9), 611 (2020).</li><li>Dalton, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+survival+of+Drosophila+suzukii+under+simulated+winter+conditions+of+the+Pacific+Northwest+and+seasonal+field+trapping+in+five+primary+regions+of+small+and+stone+fruit+production+in+the+United+States.">Laboratory survival of Drosophila suzukii under simulated winter conditions of the Pacific Northwest and seasonal field trapping in five primary regions of small and stone fruit production in the United States.</a> Pest Managagement Science. 67 (11), 1368-1374 (2011).</li></ol>

Долгосрочные исследования и последующие полевые выбросы агента биологического контроля зависят от наличия эффективных и экономичных методов выращивания. Описанные методы в этом исследовании оказались эффективными протоколами как для мелкомасштабного, так и для крупномасштабного в...

Родом из Восточной Азии, пятнистая дрозофила, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), широко распространилась в Северной и Южной Америке, Европе и некоторых частях Африки 1,2. Муха чрезвычайно полифаговая, будучи способной использовать различные культурные и дикие плоды с мягкой и тонкой кожурой в своих родных и захваченных регионах 1,2,3. Современные стратегии борьбы с этим вредителем в значительной степени зависят от частого использования инсектицидов, которые нацелены на взрослых мух на полях сельскохозяйственных культур, когда созревают восприимчивые плоды. Часто используются повторные опрыскивания, возможно, из-за постоянного распространения популяций резервуарных мух из некультурных мест обитания и отсутствия эффективных естественных врагов, обитающих в захваченных регионах 1,4. Биологический контроль, особенно с помощью самовоспроизводящихся специализированных паразитоидов, может помочь подавить популяции мух на ландшафтном уровне и сыграть решающую роль в устойчивом управлении этим высокомобильным и полифаговым вредителем 4,5,6 в масштабах всего района.
За последнее десятилетие исследователи сосредоточили усилия на обнаружении совместно эволюционировавших паразитоидов Drosophila suzukii в родных ареалах мухи в Восточной Азии 7,8,9, а также эффективных, но недавно ассоциированных паразитоидов в захваченных регионах мухи в Северной и Южной Америке и Европе 4,5,6. В недавно захваченных регионах мухи обычно встречающиеся личинки Drosophila parasitoids, такие как Asobara c.f. tabida (Nees) (Hymenoptera: Braconidae), Leptopilina boulardi (Barbotin et al.) и L. heterotoma (Thompson) (Hymenoptera: Figitidae), не могут развиваться или иметь низкий уровень паразитизма на D. suzukii из-за сильного иммунного сопротивления мухи10. Только некоторые космополитические и универсальные паразитоиды куколки, такие как Pachycrepoideus vindemiae (Rondani) (Hymenoptera: Pteromalidae) и Trichopria drosophilae (Perkins) (Hymenoptera: Diapriidae) в Северной Америке и Европе, и Trichopria anastrephae Lima в Южной Америке, могут легко развиться из этой мухи4. Напротив, исследования в Восточной Азии обнаружили ряд личиночных паразитоидов от D. suzukii 4,5,6. Среди них Asobara japonica Belokobylskij, Ganaspis brasiliensis Ihering и Leptopilina japonica Novković & Kimura являются доминирующими личиночными паразитоидами 7,8,9,11. В частности, две фигитиды (L. japonica и G. brasiliensis) были основными паразитоидами, преимущественно встречающимися в свежих фруктах, зараженных D. suzukii и/или другими близкородственными дрозофилидами в естественной растительности 7,8,9. Эти три азиатских личиночных паразитоида были импортированы в карантинные учреждения в США и Европе и оценены по их относительной эффективности 12,13,14,15,16,17, климатической адаптивности 18, потенциальным межвидовым конкурентным взаимодействиям19 и, самое главное, специфичности хозяина 8,20,21 ,22.
Карантинные оценки показали, что Ganaspis brasiliensis был более специфичным для хозяина Drosophila suzukii, чем другие протестированные азиатские личиночные паразитоиды, хотя он, вероятно, состоит из разных биотипов или загадочных видов с различной специфичностью хозяина 8,21,22,23,24. Nomano et al.22 сгруппировали людей Ganaspis из разных географических регионов в пять генетических групп (названных G1-G5) на основе молекулярного анализа фрагмента гена митохондриальной цитохромоксидазы I. Группы G2 и G4 зарегистрированы только в нескольких тропических местах Южной Азии, а группа G5 была зарегистрирована из Азии и других регионов (например, Аргентины, Бразилии, Гавайев и Мексики) от неизвестного хозяина (Buffington, личное наблюдение). Полевые коллекции диких фруктов, зараженных D. suzukii в Южной Корее7, Китае8 и Японии 9,23,25 обнаружили G1 отдельно или смесь образцов, представляющих группы G1 и G3. Эти две группы, по-видимому, симпатричны и сосуществуют на одних и тех же растениях-хозяевах, населенных D. suzukii и другими близкородственными мухами-хозяевами. Тем не менее, между двумя группами наблюдались некоторые различия, причем G1, по-видимому, имеет более высокую степень специфичности хозяина или среды обитания для D. suzukii, чем G3, хотя они оба атакуют ряд близкородственных видов в карантинных тестах21,22. Дальнейший подробный молекулярный анализ может помочь определить видовой статус, особенно для групп G1 и G3. Это исследование называет их G1 G. brasiliensis и G3 G. brasiliensis. Некоторые ранние исследования также называли G1 G. brasiliensis как G. ср. brasiliensis 14,21,22. G1 G. brasiliensis недавно был одобрен для полевого выпуска против D. suzukii в США и Италии (несколько других европейских стран также в настоящее время рассматривают возможность его введения), в то время как G3 G. brasiliensis может быть рассмотрен для полевого выпуска в ближайшем будущем. Недавние опросы также обнаружили адвентивные популяции как L. japonica, так и G1 G. brasiliensis в Британской Колумбии, Канаде26 и штате Вашингтон, США (Beers et al., неопубликованные данные), и адвентивные популяции L. japonica в провинции Тренто, Италия27.
Учитывая значительный интерес к разработке программ биологического контроля для лечения Drosophila suzukii и значительный потенциал биологического контроля адвентивных и преднамеренных интродукций Ganaspis brasiliensis, существует необходимость в разработке эффективных методов выращивания этого паразитоида личинок для будущих долгосрочных исследований и / или полевого высвобождения. Этот протокол и связанная с ним видеостатья описывают два набора методов выращивания этого паразитоида: (1) мелкомасштабное лабораторное выращивание в колбах с использованием смеси плодов хозяина (черники) и искусственная диета для культуры D. suzukii. Методы были разработаны с использованием материала G3, первоначально собранного из Куньмина, Китай8. (2) Массовое выращивание для выпуска в поле в больших клетках с использованием плодов хозяина (черники) для культуры D. suzukii. Генетической группой, используемой для крупномасштабного выращивания, был стад G1, происходящий из Токио, Япония 9,22. Другие масштабы методов выращивания, такие как использование флаконов или небольших контейнеров для обеих групп, также кратко обсуждаются.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Active dry yeast</td>
			<td>Fleischmanns Yeast, Cincinatti, OH, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to cover fruit to reduce mold growth and enhance the frui attraction to the flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bacteriological agar</td>
			<td>Merk Life Science S.r.l., Milan, Italy</td>
			<td>A1296 - 5KG</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bleach solution</td>
			<td>Clorox Company, Oakland, CA, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to disinfect flesh fruit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blue stopper</td>
			<td>Azer Scientific, Morgantown, PA, USA</td>
			<td>ES3837</td>
			<td>Used for sealing the tube while allowing ventilation for insects</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blueberries</td>
			<td>Grocery Store, Newark, DE, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Provided as host fruit for the flies (various other fruit can also be used)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BugDorm insect rearing cage (W24.5 x D24.5 x H63.0 cm)</td>
			<td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan</td>
			<td>4E3030</td>
			<td>Used for rearing parasitoids (parasitism cage)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BugDorm insect rearing cage (W32.5 x D32.5 x H32.5 cm)</td>
			<td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan</td>
			<td>4E4590</td>
			<td>Used for rearing flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BugDorm insect rearing cage (W32.5 x D32.5 x H32.5 cm)</td>
			<td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan</td>
			<td>4E4545</td>
			<td>Used for rearing parasitoids (eclosion cage)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chicken wire (0.64 cm, 19 gauge)</td>
			<td>Everbilt, OH, USA</td>
			<td>308231EB</td>
			<td>Used to lift up the fruit to allow maximum parasitoid oviposition</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cornmeal</td>
			<td>Grocery Store, Trento, TN, Italy</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dental cotton roll (1 x 3.8 cm)</td>
			<td>Gima S.p.A., Gessate, MI, Italy</td>
			<td>35000</td>
			<td>Used for providing water to the parasitoids within the storage container</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila diet</td>
			<td>Frontier Scientific, Newark, DE, USA</td>
			<td>TF1003</td>
			<td>Custom diet used to rear flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila vial narrow, Polystirene (2.5 x 9.5 cm)</td>
			<td>VWR International, LLC., Radnor, PA, US</td>
			<td>75813-160</td>
			<td>Used for providing water to the parasitoids within the cage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila vial plugs, Cellulose acetate (2.5 cm)</td>
			<td>VWR International, LLC., Radnor, PA, US</td>
			<td>89168-886</td>
			<td>Used for providing water to the parasitoids within the cage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Erlenmeyer flask (250 mL)</td>
			<td>Carolina Biological, Burlington, NC, USA</td>
			<td>731029</td>
			<td>Used for rearing flies and parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon-style centrifuge tube (50 mL)</td>
			<td>VWR International, LLC., Radnor, PA, US</td>
			<td>VWRI525-0611</td>
			<td>Modified to ship adult parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foam stopper</td>
			<td>Jaece Industries, North Tanawanda, NY, USA</td>
			<td>L800-C</td>
			<td>Used for sealing the flasks while allowing ventilation for insects</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Honey</td>
			<td>Grocery Store, Newark, DE, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Provided as food for parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Identi-Plug plastic foam stopper</td>
			<td>Fisher Scientific Company, L.L.C., Pittsburg, PA, US</td>
			<td>14-127-40E</td>
			<td>Used as feeder for parasitoids and to seal the storage container</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Industrial paper towel</td>
			<td>Grocery Store, Newark, DE, USA</td>
			<td>None</td>
			<td>Provided as a pupation substrate for pupae and mitigated moisture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micron mesh fabric (250 mL)</td>
			<td>Industrial Netting, Maple Grove, MN, USA</td>
			<td>WN0250-72</td>
			<td>Used to make ventilation lid for insects</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nutritional yeast (flakes)</td>
			<td>Grocery Store, Trento, TN, Italy</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paper coaster (10.2 cm)</td>
			<td>Hoffmaster, WI, USA</td>
			<td>35NG26</td>
			<td>Porvided as pupation substrate for flies and parsitized pupae</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic cup (&#216; 13.3 cm, 800 mL)</td>
			<td>Berry Superfos, Taastrup, Denmark</td>
			<td>Unipak 5134</td>
			<td>Modified to store adult parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic lid (&#216; 13.3 cm)</td>
			<td>Berry Superfos, Taastrup, Denmark</td>
			<td>PP 2830</td>
			<td>Modified to store adult parasitoids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propionic acid</td>
			<td>Merk Life Science S.r.l., Milan, Italy</td>
			<td>P1386 - 1L</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saccharose</td>
			<td>Grocery Store, Trento, TN, Italy</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soup cup with lid (475 mL)</td>
			<td>StackMan, Vietnam</td>
			<td>DC1648</td>
			<td>Used for parasitized larvae to pupate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soybean flour</td>
			<td>Grocery Store, Trento, TN, Italy</td>
			<td>None</td>
			<td>Used to prepare the Standard Drosophila Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>White felt washer (0.64 cm thick, 5 mm ID x 20 mm OD)</td>
			<td>Quiklok, Lincoln, NH, US</td>
			<td>WFW/.25 x 5 x 20 mm</td>
			<td>Used as feeding ring for parasitoids</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

methods for rearing the parasitoid ganaspis brasiliensis, a promising biological control agent for the invasive drosophila suzukii

Родом из Восточной Азии, пятнистая дрозофила, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), широко распространилась в Северной и Южной Америке, Европе и некоторых частях Африки за последнее десятилетие, став разрушительным вредителем различных мягкокожих фруктов в своих захваченных регионах. Ожидается, что биологический контроль, особенно с помощью самовоспроизводящихся и специализированных паразитоидов, станет жизнеспособным вариантом устойчивого управления этим высокомобильным и полифаговым вредителем в масштабах всего района. Ganaspis brasiliensis Ihering (Hymenoptera: Figitidae) является личиночным паразитоидом, который широко распространен в Восточной Азии и, как было установлено, является одним из самых эффективных паразитоидов D. suzukii.
После тщательной предварительной оценки его эффективности и потенциальных нецелевых рисков одна из наиболее специфических для хозяина генетических групп этого вида (G1 G. brasiliensis) была недавно одобрена для интродукции и выпуска в полевые условия в Соединенных Штатах и Италии. Другая генетическая группа (G3 G. brasiliensis), которая также обычно подвергалась нападению на D. suzukii в Восточной Азии, может быть рассмотрена для внедрения в ближайшем будущем. В настоящее время существует огромный интерес к выращиванию G. brasiliensis для исследований или в массовом производстве для полевого выпуска против D. suzukii. Этот протокол и связанная с ним видеостатья описывают эффективные методы выращивания этого паразитоида, как в небольшом масштабе для исследований, так и в больших масштабах для массового производства и выпуска в полевые условия. Эти методы могут принести пользу дальнейшим долгосрочным исследованиям и использованию этого паразитоида азиатского происхождения в качестве перспективного агента биологического контроля над этим глобальным инвазивным вредителем.

На рисунке 4 показаны репрезентативные результаты мелкомасштабного лабораторного выращивания G3 G3 Ganaspis brasiliensis с использованием двух различных плотностей паразитоидов (шесть или 10 пар) и двух разных времени воздействия (5 или 10 дней) в карантинном учреждении UsDA-ARS Benef...

Watch this Scientific Journal Video about Methods for Rearing the Parasitoid Ganaspis brasiliensis, a Promising Biological Control Agent for the Invasive Drosophila suzukii at JoVE.com

Methods for Rearing the Parasitoid Ganaspis brasiliensis, a Promising Biological Control Agent for the Invasive Drosophila suzukii

Ganaspis brasiliensis - личиночный паразитоид Drosophila suzukii (глобальный инвазивный вредитель плодовых культур) - был одобрен или рассматривается для интродукции в Европу и Соединенные Штаты для биологического контроля этого вредителя. В этой статье представлены протоколы как мелкомасштабного, так и крупномасштабного выращивания этого паразитоида.

Методы выращивания паразитоида Ganaspis brasiliensis, перспективного агента биологического контроля для инвазивной Drosophila suzukii

Native to East Asia, the spotted-wing drosophila, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), has established widely in the Americas, Europe, ...

Долгосрочные исследования и использование биоконтролирующего агента зависят от наличия эффективных и экономичных методов выращивания, и этот протокол доказал свою эффективность для выращивания этого паразитоида. В настоящее время существует огромный интерес к выращиванию этого паразитоида для исследований или полевого высвобождения, и протокол принесет пользу будущим долгосрочным исследованиям и использованию этого многообещающего агента биоконтроля. Первым пользователям может потребоваться понять некоторую базовую биологию вовлеченных насекомых, прочитав соответствующие ссылки, приведенные в статье, и некоторые практики методов.Для составления диеты хозяина, во-первых, подготовьте жидкую часть диеты, как описано в рукописи. Затем добавьте от 25 до 30 граммов протертой черники в пустую 250-миллилитровую колбу. Затем налейте жидкость в колбу с жидкостью, просто покрывающей верхнюю часть протертой черники.Далее, для выращивания хозяина Drosophila suzuki, сначала вырежьте кусок впитывающего бумажного полотенца и закрутите его в центре. Затем поместите скрученный средний участок бумажного полотенца в диетическую колбу. Для удержания влаги используйте дистиллированную воду, чтобы намочить бумажное полотенце и диету.Затем, чтобы перенести половозрелых взрослых мух, осторожно снимите пробку колбы колонии мух и переверните ее в колбу диеты. После недели этого воздействия держите мух в экологической камере в течение трех недель для появления мух. Чтобы подвергнуть личинку хозяина воздействию паразитоидов, сначала удалите взрослых мух и бумажное полотенце из колбы, оставив яйца мух и личинки.Чтобы служить подложкой для окукливания личинок, сложите новое впитывающее бумажное полотенце и вставьте его в колбу. Затем аспирируйте шесть женских и мужских пар паразитоида G3 Ganaspis brasiliensis в колбу и проведите тонким слоем меда на дне пенной пробки. Для сбора и хранения паразитоидов удаляют взрослых через пять дней.Затем храните колбу в экологической камере в течение 35 дней в условиях, упомянутых ранее. При появлении взрослых ос аспирируют их три раза в неделю. Для удержания ос сначала поместите бумажное полотенце, смоченное, но не насыщенное дистиллированной водой, на дно флакона Drosophila размером 2,5 на 9,5 квадратных сантиметров.Затем переложите во флакон около 60 ос и отметьте дату появления. Храните флакон в экологической камере. Два раза в неделю наносите тонкий слой меда на дно пенной пробки флаконов.Во-первых, организуйте крупномасштабное выращивание Drosophila suzuki, поместив от 1 500 до 2000 половозрелых взрослых мух в соотношении полов 50:50 в большую, вязаную, покрытую сеткой клетку. Затем поместите в клетку тарелку с пропитанным водой хлопком и четыре-шесть чашек Петри со стандартной средой дрозофилы. Два раза в неделю заменяйте открытую посуду Петри на свежую.Поместите каждую зараженную чашку Петри без крышки в 800-миллилитровый пластиковый стаканчик и накройте чашку мелкой сеткой. Затем высиживают чашки при 23 градусах Цельсия и относительной влажности 75% в течение 12-15 дней. После инкубации перенесите недавно вылупившуюся взрослую Drosophila suzuki в клетку для выращивания.Далее начинают подготовку личинок хозяина с промывки черники в холодной воде на одну минуту и замачивают плоды в тазу, наполненном раствором отбеливателя, разбавленном до 5% в течение трех минут. Затем наполните девятисантиметровую посуду Петри вымытой черникой. В поздние послеобеденные часы положите чашки Петри в клетку для выращивания и оставьте их на ночь.На следующее утро осторожно постучите по чашке Петри, чтобы выбить мух из плодов и удалить плоды из клетки для выращивания. Тем временем подготовьте клетку паразитизма и клетку появления ос для паразитоида G1 Ganaspis brasiliensis. Обе клетки должны иметь тонкую нить ниже потолка для подвешивания одного или нескольких кормушек.В каждой клетке подвешивайте флакон Drosophila, содержащий воду, и герметизируйте с помощью ацетатной пробки целлюлозы вверх ногами от потолка каждые пять-семь дней, в зависимости от относительной влажности. Сразу после извлечения зараженной черники из клетки Drosophila suzuki поместите ее в клетку паразитизма с 1 500 до 2000 ос Ganaspis brasiliensis на два-три дня. Затем соберите плоды в 800-миллилитровый пластиковый стаканчик с абсорбирующей бумагой внизу.Высиживать открытую чашку в клетке всходов или эклозии при 21 градусе Цельсия и относительной влажности 65% в течение не менее 28 дней. В течение второй и третьей недель инкубации еженедельно проверяйте клетку на раннюю эклозию хозяина. Чтобы облегчить последовательный сбор паразитоидов, удалите взрослых мух.В конце четвертой недели инкубации обеспечьте в клетку кормушку и источник воды. Соберите от 10 до 15% взрослых ос и переведите их в клетку паразитизма, чтобы заменить старых и непродуктивных ос. Из оставшихся ос клетки эклозии храните до 700 взрослых особей в соотношении полов 50:50 с 800-миллилитровым пластиковым стаканчиком, содержащим двухмиллилитровую трубку, заполненную водой и запечатанную зубным ватным рулетом на дне чашки.Храните чашку с выраженным всходовым состоянием в экологической камере до одного месяца. Для транспортировки паразитоидов поместите около 200 взрослых особей в коническую трубку объемом 50 миллилитров. Затем поместите все трубы в изолирующий транспортный контейнер вместе с пакетами со льдом.Этот протокол привел к успешному мелкомасштабному выращиванию G3 Ganaspis brasiliensis, паразитоидного агента, против сельскохозяйственного вредителя Drosophila suzuki в лаборатории. На производство потомства не повлияли различия в плотности паразитоидов и времени воздействия. Крупномасштабное поколение G1 Ganaspis brasiliensis также может быть достигнуто, причем производство началось через пять недель после первоначального воздействия хозяина Drosophila suzuki.С 8 по 22 неделю паразитоидная продукция стала пропорциональна количеству фруктов, подвергшихся их воздействию. Критически важно поддерживать подходящую температуру выращивания, контролировать влажность и всегда обеспечивать пищу для взрослых насекомых. Методы могут быть дополнительно улучшены путем оптимизации плотности выращивания хозяина и паразитоида для максимального размножения ос и изучения возможности выращивания этого паразитоида на альтернативных хозяевах.

Research

JoVE Journal

Biology

Methods for Rearing the Parasitoid Ganaspis brasiliensis, a Promising Biological Control Agent for the Invasive Drosophila suzukii

Protocol for Mosquito Rearing (A. gambiae)

Protocol for Mosquito Rearing A. gambiae

Протокол Mosquito воспитание (А. gambiae)

This protocol describes mosquito rearing in the insectary. The insectary rooms are maintained at 28&deg;C and ~80% humidity, with a 12 hr. day/night ...

Labeling hESCs and hMSCs with Iron Oxide Nanoparticles for Non-Invasive in vivo Tracking with MR Imaging

Маркировка ЭСК и hMSCs с Оксид железа наночастиц для неинвазивного в естественных условиях слежения с МРТ

In recent years, stem cell research has led to a better understanding of developmental biology, various diseases and its potential impact on regenerative ...

Labeling Stem Cells with Fluorescent Dyes for non-invasive Detection with Optical Imaging

Маркировка стволовых клеток с флуоресцентными красителями для неинвазивного обнаружения оптических изображений с

Optical imaging (OI) is an easy, fast and inexpensive tool for in vivo monitoring of new stem cell based therapies. The technique is based on ex vivo ...

Electrophysiological Methods for Recording Synaptic Potentials from the NMJ of Drosophila Larvae

Электрофизиологические методы регистрации синаптические потенциалы от NMJ личинок дрозофилы

In this video, we describe the electrophysiological methods for recording synaptic transmission at the neuromuscular junction (NMJ) of Drosophila larva. ...

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Электрофизиологические Запись в Drosophila Эмбрионов

Drosophila is a premier genetic model for the study of both embryonic development and functional neuroscience. Traditionally, these fields are quite ...

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

Визуализация бьющееся сердце в Drosophila</em

The Drosophila heart has recently emerged as a good model system for examining the genetic, cellular, and molecular mechanisms underlying function in ...

Methods for the Study of the Zebrafish Maxillary Barbel

Методы изучения данио рерио Верхнечелюстная Барбель

Barbels are skin sensory appendages found in fishes, reptiles and amphibians.  The zebrafish, Danio rerio, develops two pairs of barbels- a short nasal ...

An Optimized Protocol for Rearing Fopius arisanus, a Parasitoid of Tephritid Fruit Flies

An Optimized Protocol for Rearing Fopius arisanus, a Parasitoid of Tephritid Fruit Flies

Оптимизированный протокол для разведения Fopius arisanus, Паразитоид из Tephritid плодовых мух

Fopius arisanus (Sonan) is an important parasitoid of Tephritid fruit flies for at least two reasons. First, it is the one of only three opiine ...

Blastomere Explants to Test for Cell Fate Commitment During Embryonic Development

Бластомеров эксплантов для тестирования для сотовых приверженности судьбы во время эмбрионального развития

Fate maps, constructed from lineage tracing all of the cells of an embryo, reveal  which tissues descend from each cell of the embryo.  Although fate maps ...

Autonomously Bioluminescent Mammalian Cells for Continuous and Real-time Monitoring of Cytotoxicity

Автономно Биолюминесцентный клетках млекопитающих для непрерывных и мониторинга в реальном времени цитотоксичности

Mammalian  cell-based in vitro assays have been  widely employed as alternatives to animal testing for toxicological studies but  have been limited due to ...