Name: left anterior descending coronary artery ligation for ischemia-reperfusion research: model improvement via technical modifications and quality control
Uploaded: 2022-12-16T12:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Left Anterior Descending Coronary Artery Ligation for Ischemia-Reperfusion Research: Model Improvement via Technical Modifications and Quality Control at JoVE

Эта модель была разработана при финансовой поддержке Министерства науки и технологий Тайваня (MOST 109-2320-B-030-006-MY3).

Все эксперименты на животных проводились в соответствии с Руководством по уходу и использованию лабораторных животных, опубликованным Национальными институтами здравоохранения США (публикация NIH No 85-23, пересмотренная в 1996 году). Протокол исследования был одобрен и в соответствии с ру?...

Предлагаемый протокол имеет несколько отличительных особенностей, таких как определение точного положения для лигирования LAD, создание устройства для управления петлей петли в одном шве и поддержка модифицированного хирургического маневра для уменьшения повреждения тканей, что поз?...

Ишемическая болезнь сердца является основной причиной смерти во всем мире 1,2. В дополнение к контролю модифицируемых факторов риска для предотвращения развития ишемической болезни сердца, терапевтические стратегии крайне необходимы для острого коронарного синдрома 3,4. Было обнаружено, что кардиогенный шок и фатальная аритмия при остром инфаркте миокарда с подъемом сегмента ST (STEMI) увеличивают вероятность госпитальной летальности 5,6,7,8. Первичное чрескожное коронарное вмешательство (ЧКВ) является предпочтительным методом леченияИМпST 9,10,11; Однако терапевтический эффект имеет потолок, когда время от двери до баллона составляет <90 мин12,13. Необходимы дополнительные стратегии для дальнейшего улучшения клинических исходов заболевания 14,15,16,17,18,19.
Эксперимент с острой ишемией-реперфузией миокарда (ИК) с перевязкой левой передней нисходящей артерии (LAD) у крыс является одной из моделей на животных, сопоставимых с клиническим сценарием, в котором пациентам с ИМпST требуется короткое время от двери до баллона, чтобы спасти сердце от ишемического повреждения. Тем не менее, хирургически индуцированная ИМпST у мелких животных часто является технически сложной, поскольку это сложная операция, связанная с высокой смертностью и большими вариациями размера инфаркта 20,21,22,23,24. Чтобы преодолеть техническую проблему, в настоящем исследовании была разработана всеобъемлющая и эффективная модель животных на крысах (поскольку они крупнее мышей), чтобы создать надежный и воспроизводимый протокол исследования острой ИК-диагностики миокарда путем технической модификации. Предлагаемый протокол приводит к меньшему количеству хирургических осложнений, меньшему повреждению тканей и меньшей вероятности смертности во время операции. Кроме того, была использована процедура для измерения размера инфаркта и площади риска (AAR) и, таким образом, проверки качества результатов исследования. Предложенный протокол может быть использован для исследования патофизиологических процессов острого ИК-стресса миокарда для разработки новых терапевтических стратегий против повреждения.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Evan&#8217;s blue</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>E2129</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Shinva</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>1507002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blades</td>
			<td>Shinva</td>
			<td>s2646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel handles</td>
			<td>Shinva</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk sutures</td>
			<td>SharpointTM</td>
			<td>DC-2150N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical needle</td>
			<td>AnchorTM</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triphenyltetrazolium chloride (TTC) solution</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>T8170-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ventilator</td>
			<td>Harvard Rodent Ventilator</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

left anterior descending coronary artery ligation for ischemia-reperfusion research: model improvement via technical modifications and quality control

Ишемическая болезнь сердца является основной причиной смерти во всем мире. Полное прекращение кровотока в коронарных артериях вызывает инфаркт миокарда с подъемом сегмента ST (STEMI), что приводит к кардиогенному шоку и фатальной аритмии, которые связаны с высокой смертностью. Первичное коронарное вмешательство (ЧКВ) для реканализации коронарной артерии значительно улучшает исходы STEMI, но успехи, достигнутые в сокращении времени от двери до баллона, не смогли снизить внутрибольничную смертность, что свидетельствует о необходимости дополнительных терапевтических стратегий. Перевязка левой передней нисходящей коронарной артерии (LAD) у крыс представляет собой животную модель для исследования острой ИР миокарда, которая сопоставима с клиническим сценарием, в котором быстрая коронарная реканализация через ЧКВ используется для STEMI; однако ИМпST, индуцированная ЧКВ, является технически сложной и сложной операцией, связанной с высокой смертностью и большими различиями в размерах инфаркта. Мы определили идеальное положение для лигирования LAD, создали устройство для управления петлей петли и поддержали модифицированный хирургический маневр, тем самым уменьшив повреждение тканей, чтобы создать надежный и воспроизводимый протокол исследования острой ишемии-реперфузии миокарда (IR) для крыс. Это операция, не связанная с выживанием. Мы также предлагаем метод проверки качества результатов исследования, который является критическим шагом для определения точности последующих биохимических анализов.

В конце ишемии миокарда и реперфузии следует оценить качество лигирования LAD перед дальнейшими биохимическими или молекулярными анализами.
Достаточность окклюзии LAD через лигирование определяли путем введения 1 мл 2% синего красителя Эвана через центральный венозный ка...

Watch this Scientific Journal Video about Left Anterior Descending Coronary Artery Ligation for Ischemia-Reperfusion Research: Model Improvement via Technical Modifications and Quality Control at JoVE

Left Anterior Descending Coronary Artery Ligation for Ischemia-Reperfusion Research: Model Improvement via Technical Modifications and Quality Control

Здесь мы представляем протокол, ориентированный на контроль качества перевязки левой передней нисходящей коронарной артерии путем технической модификации традиционной процедуры на крысах для исследования острой ишемии-реперфузии миокарда.

Перевязка левой передней нисходящей коронарной артерии для исследования ишемии-реперфузии: совершенствование модели с помощью технических модификаций и контроля качества

Coronary heart disease is the leading cause of death globally. Complete cessation of blood flow in coronary arteries causes ST-segment elevation ...

Ишемия сердца является основной причиной смерти во всем мире. Эта процедура может быть выполнена, чтобы вызвать ишемию-реперфузионное повреждение сердца. Этот протокол предназначен для точного, надежного и последовательного управления LAD.Чтобы приготовить солевые влажные ватные тампоны, отщипните небольшую часть стерильной ваты и несколько раз скатайте ее, чтобы сформировать шар. Окуните ватные тампоны в стерильный 0,9%-ный физиологический раствор и отожмите излишки физиологического раствора. Храните ватные тампоны в чистой коробке, стерилизованной 75% этанолом.Чтобы подготовить удерживающие крючки, стерилизуйте зажимы и резинки 75% этанолом. Чтобы подготовить петлю для перевязки, поместите середину шелкового стежка 7-0 в полукруг тройного пружинного ушка конической хирургической иглы без обжима. Чтобы подготовить контроллер петли малого барабана, отрежьте ножницами пятимиллиметровую полиэтиленовую трубку 10.Затем, для эксперимента, обезболите восьминедельного самца крысы Sprague Dawley и проверьте рефлексы, ущипнув хвост и задние лапы. Затем откройте ткань между двумя хрящевыми кольцами ниже голосовой щели с помощью ножниц и вставьте трехсантиметровую полиэтиленовую трубку 50, чтобы она действовала как эндотрахеальная трубка. Подключите эндотрахеальную трубку к аппарату искусственной вентиляции легких.Дотроньтесь до груди и найдите манубриум и стернальный угол. Затем определите левое боковое ребро, которое соединяется с углом грудины. Определите межреберье под ребром A. Используйте щипцы с тонкими наконечниками, чтобы аккуратно приподнять кожу близко к межреберью.Затем с помощью ножниц создайте косой разрез в один сантиметр вдоль линий натяжения кожи от точки примерно в пяти миллиметрах слева от грудинного тела. Отделите кожу и мышечные слои от разреза с помощью ножниц. Затем зацепите мышечные слои за пределами левой передней грудной стенки вниз с помощью согнутых зажимов, чтобы обнажить ребра под ними.Определив ребро В ниже ребра А, отрежьте ребро В тупыми ножницами от середины реберного хряща. Осторожно прикоснитесь к ране и сожмите ее солевым влажным ватным тампоном на несколько секунд, если возникает кровотечение. Затем зацепите четыре согнутых зажима за межреберную мышцу и ребра, чтобы аккуратно раздвинуть стенку грудной клетки в четырех направлениях и создать прямоугольное хирургическое окно, чтобы осторожно открыть грудную клетку от разреза ребра B. Осторожно прижмите левое легкое и прилегающие ткани, покрывающие перикард, другим изогнутым зажимом, чтобы предотвратить случайное повреждение тканей во время процедуры.Обнажите сердце, удалив тонкий перикард щипцами. Затем определите первую ветвь левой главной коронарной артерии, или LMCA, между легочной артерией и левой ушной раковиной. Используя хирургическую иглу, создайте открытую петлю лигирования, вставив и пропустив шелковый стежок под LAD в месте, расположенном непосредственно дистальнее первой ветви LMCA в направлении слева на правую сторону LAD, чтобы избежать случайного прокола левой ушной раковины.Если LAD невидим из-за жидкости или крови, покрывающих поверхность сердца, аккуратно проведите мазок с поверхности сердца, чтобы визуализировать коронарные артерии. Вставьте два конца шелкового шва с одной стороны открытой петли в круг другой стороны, чтобы образовалась петля для петли. Затем вставьте два конца шелкового шва петли малого барабана в подготовленный контроллер малого барабана, прежде чем замкнуть петлю.Проведите контроллером петли малого барабана вдоль шелкового шва, осторожно растягивая шелк, чтобы закрыть петлю малого барабана. Остановите коронарный кровоток LAD, чтобы вызвать ишемию миокарда на один час. После того, как петля будет надежно завязана, возьмитесь за шелк, чтобы зафиксировать положение контроллера петли малого барабана щипцами Келли.Положите другой конец щипцов Келли на хирургический стол. Закройте операционное окно влажными ватными тампонами с физиологическим раствором во время перевязки LAD. Откройте щипцы Келли, затем отпустите контроллер петли малого барабана для реперфузии коронарного кровотока в течение двух часов.Показана валидация качества лигирования LAD синим по Эвансу. Миокард с коронарной перфузией окрашивался в синий цвет по сравнению с неперфузированной областью, которая оставалась красной. Низкая вариация в области риска, или процент ААА среди исследуемых животных, указывает на точное местоположение лигирования LAD.Кроме того, размер инфаркта оценивали как отношение площади инфаркта к AAR в контрольной и обработанной группах. Процент размера инфаркта в группе лечения ниже, чем в контролируемой группе перевязки LAD. Этот метод открывает исследователям путь к изучению новых терапевтических подходов против ишемической болезни сердца.

Research

JoVE Journal

Medicine

Coronary Artery Ligation and Intramyocardial Injection in a Murine Model of Infarction

Коронарных артерий и Лигирование Intramyocardial инъекций в мышиной модели миокарда

Mouse models are a valuable tool for studying acute injury and chronic remodeling of the myocardium in vivo.  With the advent of genetic modifications to ...

Modified Technique for Coronary Artery Ligation in Mice

Измененный Техника для лигирования коронарной артерии у мышей

Myocardial infarction (MI) is one of the most important causes of mortality in humans1-3. In order to improve morbidity and mortality in patients with MI ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Мышиной модели ишемии миокарда-реперфузии через перевязки левой передней нисходящей артерии

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure

Постоянный Лигирование артерии передней нисходящей коронарной у мышей: Модель, перенесших инфаркт миокарда ремоделирования и сердечной недостаточности

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Мышиной модели кишечная ишемия-реперфузии

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Мышиная левая передняя нисход (ЛАД) аортокоронарное Лигирование: Улучшенная и Простая модель инфаркт миокард

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery (ALCAPA)

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery ALCAPA

Прямой Re-имплантация левой коронарной артерии в аорту у взрослых с аномальным происхождения левой коронарной артерии от легочной артерии (ALCAPA)

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Изометрические сократимости измерение верхней брыжеечной артерии мыши, с помощью проволоки миография

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion

Два судна окклюзии модель мыши церебральной ишемии-реперфузии

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

Оценка коронарного потока резерва после миокарда ишемия Реперфузия у крыс

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...