Name: biobank for translational medicine: standard operating procedures for optimal sample management
Uploaded: 2022-11-30T12:40:00
Duration: 8 min 1 s
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Los autores desean agradecer a todos los pacientes que participaron activamente durante la última década en nuestros programas de investigación a través de la donación de sus bioespecímenes. Sin ellos, esta investigación no sería posible. También agradecemos a todo el personal que trabaja en IEO, enfermeras, técnicos, biólogos, médicos y directores de todas las unidades clínicas y de investigación. Los autores agradecen al Prof. Pier Paolo Di Fiore y al Prof. Giancarlo Pruneri por su orientación. Finalmente, dedicamos este trabajo al Prof. Umberto Veronesi, fundador de IEO, y su enfoque pionero para integrar la investigación del cáncer y la atención al paciente.

Este protocolo se centra en los SOP utilizados para el cáncer de mama, ovario, próstata, pulmón y colon. Todos los procedimientos descritos aquí fueron aprobados por el Comité Técnico Científico, el Comité de Ética (CE) y los Directores de los Programas de Mama, Ginecología, Urología, Cirugía Torácica y Cirugía del Sistema Digestivo. Los procedimientos de estudio siguen la Declaración de Helsinki de 1964, la Ley del Reglamento General de Protección de Datos (GDPR) de 2018 y las modificaciones posteriores. Un Acuerdo de Participación en Investigación (RPA) institucional, derivado de la ley GDPR, representa el consentimiento informado obtenido de todos los pacientes para recolectar muestras biológicas y datos personales, clínicos y genéticos. El RPA se obtuvo de todos los pacientes para almacenar, procesar y utilizar los datos obtenidos con fines científicos.
1. Requisitos previos de las muestras biológicas
<ol><li>Verifique si un paciente cumple con las condiciones para la inscripción según el protocolo RPA y proyectos y proporcione una descripción detallada de RPA a todos los pacientes.<ol><li>Aumentar la participación del paciente, por ej., transmitir un video educativo de dibujos animados en las salas de espera para informar a los pacientes sobre la importancia y el impacto de la RPA. Proporcione marcadores de gadgets a todos los pacientes (vea la animación de dibujos animados cortos de libre acceso en https://www.ieo.it/it/PER-I-PAZIENTI/I-diritti-del-paziente/Consensi-informati/ y https://vimeo.com/679070846).</li>
		<li>Capacitar al personal para llevar a cabo la administración del consentimiento durante cada fase de hospitalización y proporcionar información adicional si los pacientes participan en un estudio específico. NOTA: Si el RPA no está firmado, no se recogen muestras biológicas.</li>
		<li>Evite incluir casos que hayan presentado infección por SARS-CoV-2 (COVID-19), hepatitis B (VHB), hepatitis C (VHC) y virus de inmunodeficiencia humana (VIH).</li>
	</ol></li>
</ol>2. Software de biobanco
<ol><li>Utilice el software del sistema de gestión de información de laboratorio (LIMS) para rastrear todas las muestras biológicas. Asegurar la disponibilidad de un buen sistema operativo que obtenga automáticamente información personal y clínica en el registro del paciente y pueda integrarse con registros médicos, casos administrativos, RPA y datos patológicos del paciente, como se muestra en la Figura 2.</li>
	<li>Asegurar el registro de las muestras biológicas utilizando el software del biobanco.<ol><li>Identificar a los pacientes mediante códigos. Asigne un código único a cada individuo, que coincida con el número de registro médico (visita individual, tipo de servicio del paciente). NOTA: Durante el registro, el RPA científico se actualiza electrónicamente en el sistema operativo.</li>
	</ol></li>
	<li>Generar un ID de alícuota<ol><li>Indique el año y el sitio anatómico o tipo de biofluido (Tabla 1) del que proviene la muestra (Tabla 2), y agregue un número único progresivo por muestra.</li>
		<li>Para los órganos bilaterales, agregue un número secuencial para distinguir el origen de la muestra biológica del órgano derecho o izquierdo. Asigne la abreviatura con el sufijo 1 (para la izquierda) o 2 (para la derecha): dos dígitos. NOTA: Por ejemplo, una identificación detallada se parece a "12-B-00100-01", donde 12 indica el año y B indica el órgano = mama.</li>
	</ol></li>
	<li>Regístrese con un ID para cada alícuota<ol><li>Rastree dos macro tipos de muestras biológicas: sólidos y líquidos.</li>
		<li>Dividir en subcategorías: muestras frescas y muestras congeladas.</li>
	</ol></li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63950/63950fig02.jpg"> Figura 2: Una interfaz representativa de LIMS de biobanco. El RPA científico se actualiza electrónicamente desde el servidor de registros clínicos. Abreviaturas: LIMS = sistema de gestión de información de laboratorio; RPA = Acuerdo de Participación en Investigación. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63950/63950fig02large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
Tabla 1: Tipos de biofluidos y códigos correspondientes. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63950/TAB%201.xlsx" target="_blank">Haga clic aquí para descargar esta tabla.</a>
Tabla 2: Tipos de muestras de tejido y códigos correspondientes. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63950/TAB%202.xlsx" target="_blank">Haga clic aquí para descargar esta tabla.</a>
3. Recogida de muestras
<ol><li>Preparación del plan de cirugía diaria<ol><li>Determine si el paciente ha firmado el RPA o no y si es elegible.</li>
		<li>Compruebe las siguientes condiciones:<ol><li>Verificar el cumplimiento del paciente con los criterios de inclusión: informar cualquier caso positivo de VIH, VHB, VHC y COVID-19 en el campo de riesgo infeccioso "RI" apropiado para evitar recolectar muestras biológicas.</li>
			<li>Verifique si el paciente está inscrito en un ensayo clínico o en un proyecto de investigación específico aprobado completando correctamente el campo Estudio/Proyecto en cada perfil de paciente.</li>
			<li>Informar a los técnicos si se desconoce el riesgo de infección; Deseche especímenes con resultados positivos o riesgos desconocidos.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
	<li>Procesar y almacenar muestras en el biobanco, como se presenta en la Figura 3.<ol><li>Recolectar muestras de tejido fresco y congelado relacionadas con pacientes que se sometieron a cirugía.</li>
		<li>Recoger muestras citológicas, ya sea mediante técnicas aspirativas o esfoliativas, para extirpar quirúrgicamente pequeñas lesiones.</li>
		<li>Recolectar fluidos biológicos (por ejemplo, sangre, suero, plasma, PBMC, hisopo bucal, orina, heces y ascitis) de pacientes en la etapa previa a la hospitalización, pacientes inscritos en ensayos clínicos y cualquier otro sujeto involucrado en proyectos de detección aprobados.</li>
	</ol></li>
</ol><img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63950/63950fig03.jpg"> Figura 3: Jerarquía de muestras. De un solo paciente, varias subcategorías de episodios se procesan y almacenan en el biobanco. Abreviaturas: PMBCs = células mononucleares de sangre periférica; LIMS = sistema de gestión de información de laboratorio. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63950/63950fig03large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
4. Recolección de muestras de sangre
<ol><li>Recoger la sangre del paciente en 6 ml de vacutainers que contienen el anticoagulante Na 2 EDTA (7,2 mg, secado por pulverización). Registre los vacutainers etiquetados con el número de la historia clínica y el código del episodio y procese de dos maneras diferentes: frescos o congelados.</li>
	<li>Para muestras frescas, registre las muestras de sangre en el software del biobanco. Etiquete los vacutainers con el código de identificación del biobanco y entréguelos a los usuarios autorizados.</li>
	<li>Para las muestras congeladas almacenadas en el biobanco, prepare dos tubos codificados Cryobank 2D, cada uno de 900 μL de sangre (Figura 4). Registre las alícuotas en el software del biobanco, colóquelas en una placa de código de barras específica y guárdelas en congeladores (-80 ° C) para garantizar una temperatura constante.</li>
</ol><img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63950/63950fig04.jpg"> Figura 4: Materiales de muestra congelados . (A) tubos de código de barras 2D, (B) lector de código de barras para un solo tubo y (C) placa de tubos para registro y almacenamiento. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63950/63950fig04large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
5. Recogida de muestras de suero
<ol><li>Recolecte la sangre del paciente en "tubos de suero plástico" de vacutainer de 6 ml que contengan sílice recubierta por aerosol para inducir la coagulación. Dejar los vacutainers durante 3 h a temperatura ambiente (RT) para inducir la coagulación, y luego centrifugar a 828 x g durante 10 min a 20 °C.</li>
	<li>Almacene el suero (450 μL) en tubos codificados Cryobank 2D de 0,5 ml con un total de 3-4 alícuotas para cada muestra. Si el volumen sérico de la última alícuota es inferior a 450 μL, especifíquelo como "SOBRANTE" durante el registro para rastrear la cantidad correcta de suero congelado.</li>
	<li>Registre las alícuotas en el software del biobanco, colóquelas en una placa de código de barras específica y guárdelas en congeladores (-80 ° C) para garantizar una temperatura constante. NOTA: El número de alícuotas depende de la cantidad inicial de sangre total extraída y de la cantidad de suero obtenido.</li>
</ol>6. Aislamiento de células mononucleares de sangre periférica
<ol><li>Abra la campana de flujo laminar y límpiela con etanol al 70%. Prepare la bolsa para desechos biológicos, solución salina estéril 1x tamponada con fosfato (PBS) y un tubo cónico estéril vacío de 50 ml.</li>
	<li>Vierta la sangre (de los tubos de recolección de EDTA) en el tubo cónico estéril vacío de 50 ml y dilúyalo 1:1 usando 1x PBS estéril (por ejemplo, 15 ml de sangre + 15 ml de 1x PBS). Use el PBS para enjuagar el tubo de sangre.</li>
	<li>Centrifugar los tubos a 400 x g durante 30 min a 20 °C y procesar los tubos bajo una campana de riesgo biológico. Recupere la capa blanca intermedia que contiene PBMC con una pipeta Pasteur y colóquela en un nuevo tubo cónico estéril de 50 ml. Añadir hasta 45 ml de PBS para lavar las PBMC, mezclar y centrifugar a 400 x g durante 10 min a 4 °C. Recupere el pellet, resuspenda en PBS y cuente las células utilizando cámaras Burker desechables. NOTA: El volumen de PBS depende del pellet. A partir de 15 ml de sangre, asegurar un volumen de resuspensión de 2-3 ml y luego una dilución de 1:10 para contar. Usa la ecuación (1): Media de 3 cuadrados × 10.000 × factores de dilución × ml de volumen de resuspensión = número total de células (1)</li>
	<li>Lavar las PBMC de nuevo con PBS, mezclar y centrifugar a 400 x g durante 10 min a 4 °C. Diluir las PBMC a 2-3 x 106 células/ml en medio congelador (suero bovino fetal (FBS) + 10% de dimetilsulfóxido [DMSO]). Prepare los tubos codificados Cryobank 2D transfiriendo 1 ml de células resuspendidas a cada criotubo, colóquelos en una caja criogénica específica y guárdelos a -80 °C lo antes posible. NOTA: El medio congelador está compuesto de FBS con DMSO estéril al 10% y se almacena en alícuotas a −20 °C durante un máximo de 6 meses. Una vez descongelado lentamente a 4 °C, debe usarse dentro de las 2 semanas.</li>
</ol>7. Recolección de muestras de plasma
<ol><li>Recoger la sangre del paciente en 6 ml de vacutainers que contienen el anticoagulante Na 2 EDTA (7,2 mg, secado por pulverización). Centrifugar el vacutainer que contiene la sangre entera a 2.000 x g durante 10 min a 4 °C para separar el plasma.</li>
	<li>Extraer la capa superior del plasma con una pipeta Pasteur de 3 ml, transferir a un tubo estéril cónico estéril de 15 ml y centrifugar a 16.000 x g durante 10 min a 4 °C para eliminar las células sanguíneas contaminantes. Transfiera el plasma a tubos codificados Cryobank 2D de 1 ml.</li>
	<li>Registre las alícuotas en el software del biobanco, colóquelas en una placa de código de barras específica y guárdelas en un congelador (-80 ° C) para garantizar una temperatura constante.</li>
</ol>8. Recolección de muestras de heces e hisopos bucales
<ol><li>Recoja las heces y los hisopos bucales en tubos de 15 ml que contengan la siguiente solución específica: 50 mM de Tris-HCl, 10 mM de NaCl y 10 mM de EDTA, pH 7.5.</li>
	<li>Registre los tubos en el software del biobanco. Etiquete los tubos con los códigos del biobanco.</li>
	<li>Guarde las heces y los hisopos bucales a 4 °C en la nevera del biobanco.</li>
</ol>9. Procesamiento de tejidos
<ol><li>Haga que un patólogo examine muestras de tejido para determinar si el material que no es necesario para los procedimientos de diagnóstico es suficiente para fines de investigación. NOTA: Cuando el volumen de tejido es inferior a 1,5 mm3, se almacena en OCT o se proporciona como una muestra fresca (A) vinculada a una solicitud de investigación específica.</li>
	<li>Siempre que sea posible, recoja incluso la contraparte no patológica (NP) del tejido patológico (P). Coloque las muestras en placas de Petri de cultivo celular estéril etiquetadas como P y NP (Figura 5). Mantenga el tejido en el hielo a 4 °C y divídalo en tres partes cada una (A, B y C) si hay suficiente material disponible.<ol><li>Muestras de tejido fresco (A): coloque alícuotas frescas de tejido P y NP en tubos con el medio de cultivo apropiado definido en cada protocolo específico y envíelos a unidades de investigación externas (por ejemplo, laboratorios de investigación).</li>
		<li>Muestras de tejido OCT (B): coloque alícuotas frescas de tejido P y NP en criomoldes, llénelas con resina OCT (10,24% de alcohol polivinílico, 4,26% de polietilenglicol y 85,5% de ingredientes no reactivos) e inmediatamente colóquelas en un aparato de congelación instantánea a -80 °C. NOTA: A -80 °C, el tejido incrustado en OCT tarda entre 60 y 150 s en congelarse.</li>
		<li>Muestras de tejido (C): coloque las muestras de tejido restantes en tubos codificados Cryobank 2D en el aparato de congelación rápida.</li>
	</ol></li>
	<li>Conservar las placas a -80 °C. NOTA: Para cada alícuota de OCT congelada, realizar una prueba de control de calidad antes de la distribución y su uso para tener una evaluación histológica, como se describe en la sección 11.</li>
</ol><img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63950/63950fig05.jpg"> Figura 5: Flujo de trabajo del biobanco para muestras de tejido. Abreviaturas: LIMS = sistema de gestión de información de laboratorio; OCT = temperatura óptima de corte. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63950/63950fig05large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
10. Congelación de tejidos
<ol><li>Congelar el tejido rápidamente en vapores de isopentano utilizando un aparato de congelación rápida. Colocar las muestras de tejido en isopentano a -120 °C durante 3 min y almacenarlas en las salas de criopreservación a -80 °C. NOTA: Se utilizan dos metodologías para congelar muestras de tumor y tejido sano utilizando congelación instantánea para mantener la integridad de los ácidos nucleicos.</li>
</ol>11. Control de calidad de los tejidos
<ol><li>Aloje el instrumento criostato en un recipiente refrigerado a una temperatura entre -20 ° C y -40 ° C, y corte algunas criosecciones del bloqueOCT 17. Realizar tinción de hematoxilina y eosina (H&E) en la criosección18 del tejido. Analizar la morfología del tejido bajo un microscopio óptico19. NOTA: Las secciones tienen un espesor adecuado de 3-12 μm.<ol><li>Complete un formulario específico (Tabla 3).</li>
	</ol></li>
</ol>Tabla 3: Formulario de control de calidad de secciones de tejido congelado e incrustado en OCT. Abreviatura: OCT = temperatura óptima de corte. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63950/Table%203.xlsx" target="_blank">Haga clic aquí para descargar esta tabla.</a>
12. Solicitud y recuperación de especímenes con fines de investigación
<ol><li>Solicitar alícuotas almacenadas:<ol><li>Obtenga un formulario completo con el nombre del proyecto de investigación, el investigador principal (PI), la fecha de recogida y una breve descripción. Ejecute una consulta en la base de datos de software (DB), seleccione la alícuota, genere una lista de recogida para los técnicos y verifique el código de barras para cada alícuota recuperada. NOTA: Para obtener muestras del biobanco, los investigadores de nuestro instituto o colaboradores externos (con o sin fines de lucro) deben aplicar utilizando un formulario específico, y el proyecto es evaluado por un comité técnico-científico y el Comité de Ética.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol>
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H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+introduction+to+hardware,+software,+and+other+information+technology+needs+of+biomedical+biobanks.">An introduction to hardware, software, and other information technology needs of biomedical biobanks.</a> Methods in Molecular Biology. 1897, 17-29 (2019).</li><li>Paul, S., Gade, A., Mallipeddi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+state+of+cloud-based+biospecimen+and+biobank+data+management+tools.">The state of cloud-based biospecimen and biobank data management tools.</a> Biopreservation and Biobanking. 15 (2), 169-172 (2017).</li><li>Fthenou, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=implementation,+and+integration+of+heterogenous+information+technology+infrastructures+in+the+Qatar+biobank.">implementation, and integration of heterogenous information technology infrastructures in the Qatar biobank.</a> Biopreservation and Biobanking. 17 (6), 494-505 (2019).</li><li>Tukacs, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Model+requirements+for+Biobank+Software+Systems.">Model requirements for Biobank Software Systems.</a> Bioinformation. 8 (6), 290-292 (2012).</li><li>Willers, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+versatile,+secure,+and+sustainable+all-in-one+biobank-registry+data+solution:+The+A3BC+REDCap+model.">A versatile, secure, and sustainable all-in-one biobank-registry data solution: The A3BC REDCap model.</a> Biopreservation and Biobanking. , (2021).</li><li>D'Abramo, F., Schildmann, J., Vollmann, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Research+participants'+perceptions+and+views+on+consent+for+biobank+research:+A+review+of+empirical+data+and+ethical+analysis.">Research participants' perceptions and views on consent for biobank research: A review of empirical data and ethical analysis.</a> BMC Medical Ethics. 16, 60 (2015).</li><li>Policiuc, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+foundation+of+personalized+medicine+is+the+establishment+of+biobanks+and+their+standardization.">The foundation of personalized medicine is the establishment of biobanks and their standardization.</a> Journal of BUON. 23 (3), 550-560 (2018).</li><li>Lygirou, V., Makridakis, M., Vlahou, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+sample+collection+for+clinical+proteomics:+Existing+SOPs.">Biological sample collection for clinical proteomics: Existing SOPs.</a> Methods in Molecular Biology. 1243, 3-27 (2015).</li><li>Pisapia, P., Malapelle, U., Troncone, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liquid+biopsy+and+lung+cancer.">Liquid biopsy and lung cancer.</a> Acta Cytologica. 63 (6), 489-496 (2019).</li><li>Spruessel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+ischemia+time+affects+gene+and+protein+expression+patterns+within+minutes+following+surgical+tumor+excision.">Tissue ischemia time affects gene and protein expression patterns within minutes following surgical tumor excision.</a> Biotechniques. 36 (6), 1030-1037 (2004).</li></ol>

Los autores no tienen conflictos de intereses que revelar.

Aunque la oncología ha logrado enormes avances, el cáncer sigue siendo una de las principales causas de morbilidad y mortalidad en todo el mundo20. La comprensión de la heterogeneidad tumoral, su evolución temporal a lo largo del tiempo y los resultados del tratamiento dirigido dependen estrictamente de la recolección precisa de datos en el contexto de la atención clínica de rutina21. En este sentido, el enfoque "multi-ómico" está ganando impulso en la patología predictiva oncológica22. La evaluación tradicional de biomarcadores basados en tejidos se está integrando utilizando múltiples bioanalitos nuevos, como sangre, plasma, orina, saliva y heces23,24,25,26. Por lo tanto, los biobancos ahora son reconocidos como infraestructuras fundamentales para mejorar la práctica clínica. Mirando hacia atrás en la historia de la investigación del cáncer, nos damos cuenta de que los descubrimientos más impresionantes e innovadores nunca habrían sido posibles sin el examen directo del tejido canceroso o biopsias líquidas. Con el tiempo, la fuente de tejido canceroso y el tipo de biopsia líquida que se examinará ha evolucionado desde disecciones crudas, "encuentros casuales" aleatorios y, en algunos casos, tráfico ilícito hasta colecciones organizadas de cáncer y bancos estratégicos de oncología modernos. La consideración de muchas cuestiones éticas ha cambiado considerablemente tanto en la práctica como en los principales factores que distinguen a los bancos de oncología modernos de las colecciones de oncología del pasado.
Debido a los avances en la investigación del cáncer y la gran cantidad de información molecular que ahora proporcionan las tecnologías modernas, cada vez es más evidente que los biobancos, particularmente los de los centros oncológicos, pueden enfrentar varios tipos de problemas metodológicos. Entre estos, la tecnología se ha convertido en un desafío universal que aún impide la estandarización y armonización de SOP. Otro aspecto crítico para mantener las actividades centrales del biobanco es tener un software LIMS integrado capaz de recibir y mantener automáticamente todas las identificaciones del hospital y todos los datos clínicos codificados provenientes del software del hospital. Cabe destacar que se puede obtener otro software valioso utilizado para administrar biobancos y algunos programas gratuitos para la gestión de biobancos 27,28,29,30,31. Otro paso crítico en los biobancos es la implementación del pacto de participación para todos los pacientes y el acuerdo legal y ético necesario para el almacenamiento de datos clínicos y bioespecímenes10,32.
En este sentido, este protocolo tiene pautas bien definidas que no permiten la recolección y almacenamiento de bioespecímenes en ausencia de consentimiento. Este es también un tema crítico ya que los pacientes pueden retirar su participación incluso después de que sus muestras hayan sido almacenadas; Por lo tanto, se han implementado métodos para sacar rápidamente tales muestras del sistema de biobancos. Los bioespecímenes que llegan de pacientes reclutados por nuestro biobanco siguen estrictos protocolos de recolección y almacenamiento. En este sentido, se han evaluado varios aspectos importantes para monitorear este proceso y se están mejorando continuamente. En particular, la certificación ISO9001 requiere varios indicadores de rendimiento, como el tiempo isquémico caliente, que debe mantenerse durante menos de 30 minutos o 60 minutos, dependiendo de la fuente del tejido. Además, las biopsias líquidas y los fluidos biológicos se recolectan utilizando protocolos estandarizados siguiendo estrictos procedimientos de tiempo 15,33,34,35,36.
Las características específicas son de gran importancia en los flujos de trabajo de los biobancos. Estos incluyen la presencia de un patólogo certificado, que garantiza el muestreo del tejido por razones diagnósticas, y la recolección de tejido para biobancos en un marco de tiempo compatible con una alta calidad de muestras (el tiempo isquémico es una indicación importante para algunos tipos de investigación, como los ensayos dependientes de ARN, que requieren menos tiempo isquémico caliente). Además, la gestión del espacio necesario para el almacenamiento de muestras es de gran importancia en los biobancos. El número de biopsias líquidas recolectadas podría ser impulsado por el diseño del estudio. Las biopsias líquidas a menudo se pueden recolectar tanto durante el período preoperatorio como durante el período de seguimiento, según lo definido por cada diseño del estudio.
Debido a las campañas de cribado para la prevención del cáncer y el diagnóstico precoz de tumores, es decir, los tumores de mama de pequeño tamaño en etapas tempranas de desarrollo, así como la disponibilidad de técnicas quirúrgicas mínimamente invasivas, han reducido el número de muestras de tejidos disponibles para la investigación (ya que la mayoría de las muestras de tejido siempre se utilizan con fines de diagnóstico). La capacidad de recolectar y almacenar especímenes biológicos ha mejorado considerablemente en los últimos años. Esto se pudo observar para los fluidos biológicos, lo que refleja la mayor capacidad de este biobanco para apoyar a los grupos de investigación de este instituto en la creciente demanda de material anotado derivado del paciente. A pesar de estas mejoras, hemos experimentado algunas limitaciones para los estudios multicéntricos que requieren coordinación entre biobancos de diferentes partes del mundo, que solo pueden integrarse implementando procedimientos similares.
Una vez descartados la mayoría de los problemas éticos y técnicos relacionados con los biobancos, incluida la recopilación de toda la información clínica y demográfica, el siguiente objetivo es implementar la digitalización de todas las preparaciones histológicas y tinciones utilizadas para fines de diagnóstico e investigación. Esto es de fundamental importancia para la próxima generación de estudios que se beneficiarán enormemente de una patología digital y un biobanco totalmente integrados, que se convertirá en el estándar para el futuro. Solo una gran serie de pacientes con datos integrados e imágenes digitales puede alimentar estudios multicéntricos y grandes de inteligencia artificial (IA) para mejorar la atención al paciente con cáncer. En conclusión, creemos que una buena atención médica no termina con el diagnóstico y el tratamiento. Las mejores prácticas comprenden encontrar las formas de diagnóstico continuo y mejora del tratamiento para cualquier enfermedad, en particular las que afectan gravemente la esperanza o la calidad de vida.

Los biobancos son biorepositorios destinados a la recolección, almacenamiento, procesamiento y uso compartido de muestras biológicas humanas y datos asociados para investigación y diagnóstico. Su papel es crucial no solo para el descubrimiento y la validación de biomarcadores, sino también para el desarrollo de nuevos fármacos1. Por lo tanto, la gran mayoría de los programas de investigación traslacional y clínica dependen del acceso a bioespecímenes de alta calidad. En este sentido, los biobancos son considerados un puente entre la investigación académica y la industria farmacéutica/biotecnológica 2,3,4,5. Debido a las oportunidades sin precedentes que brindan la recopilación de big data y la inteligencia artificial, el papel de los biobancos en la investigación del cáncer está en continua evolución6.
El amplio espectro de biomateriales manejados por los biobancos se combina con información clínico-patológica, incluyendo datos demográficos y ambientales, tipo de tumor, grado histológico, estadio, presencia de invasión linfovascular y estado de los biomarcadores 7,8. Cuantos más especímenes y datos de alta calidad estén disponibles, más rápido avanzará la investigación e impactará la prestación de atención médica9. Existe un marco regulatorio estricto basado en principios éticos y legales que deben seguir los SOP, los controles de calidad y las pautas ampliamente adoptados (por ejemplo, el Instituto Nacional del Cáncer de los Estados Unidos, la Confederación de Biobancos del Cáncer del Reino Unido y la Sociedad Internacional de Repositorios Biológicos y Ambientales de la UE)10,11.
El desarrollo de POE para todos los aspectos principales de los biobancos aporta varias ventajas en términos de calidad, trazabilidad, consistencia, reproducibilidad y tiempos de respuesta12,13. Otro aspecto importante de la implementación del POE está representado por la optimización de la gestión del biobanco, que permite una mejor resolución de problemas y procedimientos alternativos para los empleados e investigadores del biobanco14. Todas estas facetas son parte del flujo de trabajo del biobanco (Figura 1).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63950/63950fig01v2.jpg"> Figura 1: Diferentes factores que contribuyen a la optimización del biobanco. Abreviatura: LIMS = sistema de gestión de información de laboratorio. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63950/63950fig01large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
Estos datos altamente específicos y sensibles requieren estrictos procedimientos estándar de gestión en biobancos. Se debe poner a disposición de todos los investigadores que necesiten acceder a las muestras y datos del biobanco un formulario de proyecto detallado y validado. La información proporcionada en la solicitud debe incluir la metodología y el diseño del estudio, las metas, los objetivos y el presupuesto. Debería crearse un Comité Científico Técnico de Biobanco con la función capital de la evaluación de las solicitudes de proyectos de investigación. Este organismo debe incluir miembros de la unidad de biobancos, divisiones clínicas, grupos de investigación, protección de datos, oficina legal y oficina de transferencia de tecnología.
La Unidad de Biobanco de Medicina Traslacional y Digital del Instituto Europeo de Oncología (IEO) es un referente mundial de biobancos en cuanto a calidad y cantidad de servicios prestados, así como por innovación. Esta instalación totalmente certificada (UNI EN ISO 9001: 2015-Certiquality) es una parte integral del nodo italiano BBMRI-ERIC (es decir, Biobanking and BioMolecular Resources Research Infrastructure) e interactúa tanto con las unidades clínicas como con la infraestructura de investigación.
Existe una gran heterogeneidad en los tipos de bioespecímenes almacenados por los biobancos. Estos incluyen muestras de tejido, ya sea fresco, congelado o conservado con parafina, biofluidos (por ejemplo, plasma, suero, sangre, orina, heces), cultivos celulares y células mononucleares de sangre periférica (PBMC). Nuestro biobanco opera sinérgicamente con la infraestructura europea de investigación para biobancos (BBMRI-ERIC), que es una de las redes de biobancos más grandes de Europa y proporciona un portal para el acceso a biobancos y recursos biomoleculares coordinados por nodos nacionales15. Además de BBMRI-ERIC, la Sociedad Internacional de Repositorios Biológicos y Ambientales (ISBER) también ha desempeñado un papel importante en la estandarización de los procedimientos operativos para los biobancos16.
La Unidad de Biobanco, que forma parte de la División de Patología, apuesta por la centralidad del paciente, el apoyo al desarrollo de la investigación clínica, la mejora continua, la potenciación de los recursos humanos, la colaboración internacional, el apoyo a eventos formativos, la seguridad en el trabajo y el crecimiento científico y tecnológico. La visión común es establecer los puntos de referencia nacionales y europeos para los biobancos en términos de calidad y cantidad de servicios e innovación. Las muestras biológicas recogidas se utilizan para identificar nuevos biomarcadores y nuevos fármacos (por ejemplo, para desarrollar terapias cada vez más personalizadas) y para garantizar el mejor tratamiento disponible para los pacientes a través de la excelencia en la investigación.
Cada espécimen biológico es recolectado y manipulado después de la verificación previa de la presencia del Acuerdo de Participación en Investigación Científica expresado por el paciente15. Las muestras biológicas recolectadas se utilizan para realizar proyectos de investigación o ensayos clínicos e incluyen muestras quirúrgicas patológicas y no patológicas excesivas (es decir, no necesarias para fines de diagnóstico), biopsias líquidas (por ejemplo, sangre, suero, plasma y orina) y otras muestras biológicas. Estos biomateriales se almacenan de acuerdo con protocolos de criopreservación dedicados. Este documento proporciona los protocolos del biobanco de un gran centro oncológico.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Blue Max Con Tubes 15 mL</td>
			<td>Falcon B.D</td>
			<td>352096</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blue Max Con Tubes 50 mL</td>
			<td>Euroclone Spa</td>
			<td>FLC352070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Box with 81 position for tissue storage</td>
			<td>Ettore Pasquali Srl.</td>
			<td>06.0945.00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cf-DNA/cf-RNA Preservative Tubes</td>
			<td>Norgen Biotek</td>
			<td>63950</td>
			<td>Preservation and isolation of both cf-DNA and cf-RNA from a single tube and in particular preserve cf-DNA/ct-DNA for 30 days at ambient temperature and for up to 8 days at 37 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryomold Standard (25 X 20 X 5 mm)</td>
			<td>Olympus Italia S.r.l.</td>
			<td>4557</td>
			<td>Disposable plastic Cryomold molds create a uniformly shaped, flat-surface specimen block when used with O.C.T</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl Sulfoxide Plastic Bottle - 1 L</td>
			<td>Vwr International S.R.L.</td>
			<td>MFCD00002089</td>
			<td>It acts to preserve the reconstitution of the medium for the storage of frozen cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dpbs 1x W/o Ca And Mg - 500 mL</td>
			<td>Microtech Srl</td>
			<td>TL1006-500ML</td>
			<td>Washing Buffer cell</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dualfilter T.I.P.S 1,000 &#181;L</td>
			<td>Euroclone Spa</td>
			<td>4809</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dualfilter T.I.P.S 200 &#181;L</td>
			<td>Euroclone Spa</td>
			<td>4823</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Easytrack Barcode Reader for single tube datamatrix&#160;</td>
			<td>Twin Helix Srl</td>
			<td>TH-ETR4400</td>
			<td>2D barcode tubes reader with USB connection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum Origin Brazileu S/fil</td>
			<td>Microtech S.R.L</td>
			<td>RM10532-500ML</td>
			<td>Defrost at +4 &#176;C, usually for two days, and once melted, start decomplementation at 56 &#176;C for 45 min 
			Let it cool down to room temperature, and aliquot it. Refroze them to -20 &#176;C, and remember to defrost them every time the aliquots are needed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll Paque Plus (ge) 6 x 500 mL</td>
			<td>Euroclone Spa</td>
			<td>GEH17144003</td>
			<td>Ficoll is a medium for density gradient, It is sterile and ready for use. It alloes to get peripheral blood mononuclear cells, bone marrow and umbilical cord blood</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fixing solution Killik of 100 mL (OCT)</td>
			<td>Bio-optica Milano S.p.a.</td>
			<td>05-9801</td>
			<td>Gel inclusion medium that solidifies at cold the water-soluble tissue (e.g., biopsies, frustules)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FLASH-FREEZE&#160;</td>
			<td>Milestone</td>
			<td>n.a.</td>
			<td>Freezing appliance</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forma 8600 Series Chest Freezers (Temperature Range: -50 &#176;C to -86 &#176;C) 85 liters</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Srl</td>
			<td>803CV</td>
			<td>Orizzontal freezer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopentane&#160; 500 mL</td>
			<td>Vwr International S.R.L.</td>
			<td>24872260</td>
			<td>Liquid included in theFLASH-FREEZE&#160; camera for freezing&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nautilus Lims Software</td>
			<td>Thermo Scientific&#8482;</td>
			<td>n.a.</td>
			<td>The software implementation&#160; is able to&#160; track all patients&#8217; biological samples. Receives Personal and Clinical information automatically during registration due to the integration with IEO operating systems. Nautilus is integrated with the web service through three IEO operative systems: BAC - IEO central registry with personal information, wHospital - medical record&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasteur pipette 10 mL</td>
			<td>&#160;Euroclone Spa&#160;</td>
			<td>CC4488</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasteur pipette 3 mL</td>
			<td>Euroclone Spa</td>
			<td>APT1502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PATHOX</td>
			<td>Dedalus ItaliTesi Elettronica e Sistemi Informativi S.p.A.a S.p.A.</td>
			<td>n.a.</td>
			<td>&#160;PATHOX - management system for the Pathology unit where several factors are registered for the Biobank, such as the histological samples, the related diagnoses, and biomarkers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes, polystyrene - size 100 mm x 20 mm, slippable</td>
			<td>Euroclone Spa</td>
			<td>FLC353003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Set of 4 adapters 19 x 5/7 mL vac</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Srl</td>
			<td>75003680</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Set of 4 adapters 4 x 50 conical</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Srl</td>
			<td>75003683</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Set of 4 adapters 9 x 15 mL conical</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Srl</td>
			<td>75003682</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single-use slide for counting cell</td>
			<td>Biosigma S.P.A.</td>
			<td>347143/001</td>
			<td>Specifically used for individual cell count</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stamps Freezerbondz for tissue boxes, nitrogen-liquid proof , H 9,53 mm x L 25,40 mm</td>
			<td>Twin Helix Srl</td>
			<td>THT-152-492-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Scientific&#160; TSX Series Ultra-Low Freezers (-50 &#176;C to -86 &#176;C) 949 liters</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Srl</td>
			<td>TSX70086V</td>
			<td>Vertical freezer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Scientific Refrigerated Centrifuge SL16R</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Srl</td>
			<td>75004030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue box labels in Permanent</td>
			<td>Twin Helix Srl</td>
			<td>THT-199-482-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tuerks Solution</td>
			<td>Merck Life Science S.R.L.</td>
			<td>1092770100</td>
			<td>In light microscopy, it is specifically used as stain for leukocyte</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TX-400 Rotor TX-400 swinging bucket hol</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Srl</td>
			<td>75003181</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>White box for storage</td>
			<td>Bio Optica</td>
			<td>07-7300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>wHospital Software</td>
			<td>wHealth Lutech Group</td>
			<td>n.a.</td>
			<td>wHospital - medical record management system with personal information, administrative cases, and the informed consent of the patients</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

biobank for translational medicine: standard operating procedures for optimal sample management

Los biobancos son infraestructuras de investigación clave destinadas a la recolección, almacenamiento, procesamiento y uso compartido de muestras biológicas humanas de alta calidad y datos asociados para investigación, diagnóstico y medicina personalizada. La Unidad de Biobanco de Medicina Traslacional y Digital del Instituto Europeo de Oncología (IEO) es un referente en este campo. Los biobancos colaboran con divisiones clínicas, grupos de investigación internos y externos y la industria, apoyando el tratamiento de los pacientes y el progreso científico, incluidos los diagnósticos innovadores, el descubrimiento de biomarcadores y el diseño de ensayos clínicos. Dado el papel central de los biobancos en la investigación moderna, los procedimientos operativos estándar (SOP) de los biobancos deben ser extremadamente precisos. Los SOP y controles realizados por especialistas certificados garantizan la más alta calidad de muestras para la implementación de estrategias personalizadas basadas en la ciencia, diagnósticas, pronósticas y terapéuticas. Sin embargo, a pesar de los numerosos esfuerzos para estandarizar y armonizar los biobancos, estos protocolos, que siguen un estricto conjunto de reglas, controles de calidad y pautas basadas en principios éticos y legales, no son fácilmente accesibles. Este documento presenta los procedimientos operativos estándar del biobanco de un gran centro oncológico.

Siguiendo los SOP descritos anteriormente, recolectamos un total de 38,446 biopsias líquidas biológicas anotadas y un total de 10,205 muestras de tejido desde abril de 2012 hasta diciembre de 2021 (Figura 6A). Además, analizamos en detalle las muestras recolectadas de las Divisiones de Urología, Ginecología, Senología, así como las Divisiones de Cabeza y Cuello, Cirugía Abdominal-Pélvica y Torácica. El mayor número de muestras de tejido que recolectamos fueron de tumores de mama (Figura 6B, C). Desde 2019, también hemos comenzado a recolectar otras muestras biológicas, como orina, heces e hisopos bucales, siguiendo el aumento significativo de la demanda a lo largo de los años (Figura 6D).
Como se muestra en la Figura 6A, la cantidad de muestras recolectadas, especialmente tejidos, durante 2020-2021 sufrió debido a la pandemia de COVID-19 y la reducción relacionada en los procedimientos oncológicos. Es importante destacar que el trabajo científico no disminuyó durante este período debido al uso de muestras de biobancos adecuadamente almacenadas y anotadas recolectadas en los años anteriores. La recolección adecuada de muestras biológicas y los datos clínico-patológicos asociados nos permitieron tener un biobanco retrospectivo y prospectivo bien estructurado y competitivo. Con este fin, la selección de la muestra quirúrgica debe ser realizada por el patólogo, tanto para garantizar un diagnóstico correcto como para tener la oportunidad de realizar investigaciones con muestras de tejido adecuadas. En nuestro biobanco se establecen y siguen firmemente procedimientos de trabajo específicos, por lo que aplicamos procedimientos estandarizados que cumplen con la certificación ISO 9001 en el contexto de los biobancos para investigación.
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63950/63950fig06.jpg"> Figura 6: Colección acumulada de bioespecímenes del Biobanco en el Instituto Europeo de Oncología, de 2012 a 2021. Recolección acumulativa de (A) muestras de tejido (curva naranja) y sangre con muestras de suero (curva azul); recolección acumulativa de (B) muestras de tejido mamario (curva roja); Recolección acumulativa de (C) muestras de tejido ovárico (curva verde), próstata (curva gris), pulmón (curva azul claro) y muestras de tejido de colon (curva amarilla). De 2019 a 2021, recolección acumulativa de (D) muestras biológicas adicionales: heces (línea azul), un hisopo bucal (línea rosa), plasma (línea verde claro) y orina (línea violeta). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63950/63950fig06large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Biobank for Translational Medicine: Standard Operating Procedures for Optimal Sample Management at JoVE.com

Biobank for Translational Medicine: Standard Operating Procedures for Optimal Sample Management

Los biobancos son recursos cruciales para la investigación biomédica y el Biobanco de Medicina Traslacional y Digital del Instituto Europeo de Oncología es un modelo en este campo. Aquí, proporcionamos una descripción detallada de los procedimientos operativos estándar de los biobancos para la gestión de diferentes tipos de muestras biológicas humanas.

Biobanco para Medicina Traslacional: Procedimientos Operativos Estándar para el Manejo Óptimo de Muestras

Biobanks are key research infrastructures aimed at the collection, storage, processing, and sharing of high-quality human biological samples and ...

Los biobancos son recursos esenciales para la investigación traslacional y clínica básica, pero también actúan como actores clave que vinculan la investigación académica y la industria farmacéutica-biotecnológica. Este protocolo presenta los procedimientos operativos estándar del biobanco en el IAO, un biobanco totalmente certificado que trabaja de acuerdo con el estándar más reciente para biotecnología, biobancos y requisitos generales para biobancos. La disponibilidad de biomuestras de alta calidad de pacientes con cáncer es fundamental para el desarrollo de herramientas de diagnóstico de próxima generación y los terapeutas las adaptan a pacientes individuales.El biobanco de material biológico de un paciente con cáncer requiere personal especializado y numerosas certificaciones. El personal debe estar constantemente capacitado y actualizado. Por lo tanto, este protocolo debe ser el punto de partida para aquellos que deseen establecer un biobanco.Para comenzar, transmita un video educativo de dibujos animados en las salas de espera para informar a los pacientes sobre la importancia del impacto de RPA. Proporcione marcadores de gadgets a todos los pacientes. Utilice el software LIMS para rastrear todas las muestras biológicas.Identificar a los pacientes mediante códigos. Asigne un código único a cada individuo que coincida con el número de registro médico. Verifique si el paciente está inscrito en un ensayo clínico o en un proyecto de investigación aprobado especificado completando correctamente el campo del proyecto de estudio en cada perfil de paciente.Informe a los técnicos si se desconoce el riesgo de infección. Deseche las muestras con resultados positivos o riesgos desconocidos. Para muestras frescas, registre las muestras de sangre en el software del biobanco.Etiquete los vacutainers con el código de identificación del biobanco y entréguelos a los usuarios autorizados. Para las muestras congeladas almacenadas en el biobanco, prepare dos tubos recubiertos de criobanco 2D cada uno de 900 microlitros de sangre. Registrar las alícuotas en el software del biobanco.Colóquelos en una placa de código de barras específica y guárdelos a menos 80 grados centígrados para garantizar una temperatura constante. Vierta la sangre de los tubos de recolección de EDTA en el tubo cónico estéril vacío de 50 mililitros y dilúyalo usando PBS estéril 1X. Use el PBS para enjuagar el tubo de sangre.Centrifugar los tubos a 400 RCF durante 30 minutos a 20 grados centígrados y procesar los tubos bajo una campana de riesgo biológico. Recupere la capa blanca intermedia que contiene PBMC con una pipeta Pasteur y colóquela en un nuevo tubo cónico estéril de 50 mililitros. Agregue hasta 45 mililitros de PBS para lavar los PBMC.Mezclar y centrifugar a 400 RCF durante 10 minutos a cuatro grados centígrados. Recuperar el pellet y resuspenderlo en PBS. Luego cuente las celdas usando cámaras de Burker desechables.Repita el lavado PBS para PBMC como se describe en el texto manuscrito. Diluya las PBMC en el medio congelador y prepare tubos recubiertos con cryobank 2D transfiriendo un mililitro de células resuspendidas a cada tubo criogénico. Coloque las muestras en una caja criogénica específica y guárdelas a menos 80 grados centígrados lo antes posible.Centrifugar el vacutainer que contiene las muestras de sangre entera a 2.000 G durante 10 minutos a cuatro grados centígrados. Retire la capa superior del plasma con una pipeta Pasteur de tres mililitros y transfiérala a un tubo cónico estéril de 15 mililitros. Luego centrifugar a 16, 000 RCF durante 10 minutos a cuatro grados centígrados para eliminar las células sanguíneas contaminantes.Transfiera el plasma a tubos recubiertos de criobanco 2D de un mililitro. Registrar las alícuotas en el software del biobanco. Colóquelos en una placa de código de barras específica y guárdelos a menos 80 grados para garantizar una temperatura constante.Haga que un patólogo examine muestras de tejido para determinar si el material que no es necesario para los procedimientos de diagnóstico es suficiente para fines de investigación. Siempre que sea posible, recoja incluso la contraparte no patológica del tejido patológico. Coloque las muestras en placas de Petri de cultivo celular estéril etiquetadas como P y NP. Mantenga el tejido en el hielo a cuatro grados centígrados y divídalo en tres partes cada una.A, B y C si hay suficiente material disponible. Para muestras de tejido fresco etiquetadas como A, colocar las alícuotas frescas de tejido P y NP en tubos con el medio de cultivo apropiado definido en cada protocolo específico y enviarlas a unidades de investigación externas. Para muestras de tejido OCT etiquetadas como B, llénelas con resina OCT y colóquelas inmediatamente en un aparato de congelación instantánea a menos 80 grados centígrados.Para muestras de tejido etiquetadas como C, coloque las muestras de tejido restantes en tubos recubiertos con cryobank 2D en el aparato de congelación rápida. Guarde los platos a menos 80 grados centígrados. Se recogieron un total de 38.446 biopsias líquidas biológicas anotadas y 10.205 muestras de tejido entre abril de 2012 y diciembre de 2021.El número de muestras recolectadas, especialmente tejidos de 2020 a 2021, disminuyó debido a la pandemia de COVID-19 y la reducción relacionada en los procedimientos oncológicos. Se analizaron en detalle las muestras recolectadas obtenidas de las divisiones de urología, ginecología, sonología y las divisiones de cirugía de cabeza y cuello, abdominal, pélvica y torácica. El mayor número de muestras de tejido se recogieron de tumores de mama.La recolección de otros especímenes biológicos, como orina, heces e hisopos bucales, ha aumentado significativamente después de la demanda a lo largo de los años. Esta opción proporciona una plataforma fundamental para el almacenamiento de muestras biológicas y mejora la reproducibilidad de los programas de investigación del cáncer. Estas muestras se pueden utilizar para diferentes aplicaciones de investigación, como la secuenciación de próxima generación o la espectrometría de masas.Nuestra plataforma es capaz de implementar nuevos algoritmos de inteligencia artificial en la investigación traslacional con el potencial de cambiar la forma en que se trata a los pacientes con cáncer.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

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Electrochemotherapy (ECT) is a local approach which is used for treating solid tumors of different histologies. Its mechanism is based on cell membrane ...

Investigación

Investigación sobre el cáncer

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Determinar la frecuencia inhibidora óptima para las células cancerosas Usando Tumor Tratamiento Fields (TTFields)

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Manejo de artefactos de movimiento respiratorio en 18tomografía por emisión de positrones F-fluorodeoxiglucosa utilizando un algoritmo de medición respiratoria óptima basado en la amplitud

Positron emission tomography (PET) combined with X-ray computed tomography (CT) is an important molecular imaging platform that is required for accurate ...

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In Vivo Immunogenicity Screening of Tumor-Derived Extracellular Vesicles by Flow Cytometry of Splenic T Cells

In Vivo Immunogenicity Screening of Tumor-Derived Extracellular Vesicles by Flow Cytometry of Splenic T Cells

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Immunogenic cell death of tumors, caused by chemotherapy or irradiation, can trigger tumor-specific T cell responses by releasing danger-associated ...