Name: intracerebroventricular delivery of gut-derived microbial metabolites in freely moving mice
Uploaded: 2022-06-02T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intracerebroventricular Delivery of Gut-Derived Microbial Metabolites in Freely Moving Mice at JoVE.com

We erkennen het personeel van het Laboratory Animal Center van de National Cheng Kung University (NCKU) voor de zorg voor de dieren. Dit werk werd ondersteund door de beurs van Prof. Kun-Yen Huang Education Fund van CHENG-HSING Medical Foundation aan C.-W.L.; de fondsen van het Ministerie van Wetenschap en Technologie (MOST) in Taiwan: (Undergraduate Research MOST 109-2813-C-006-095-B) aan T.-H.Y.; (MOST 107-2320-B-006-072-MY3; 109-2314-B-006-046; 110-2314-B-006-114; 110-2320-B-006-018-MY3) naar W.-L.W.; en het Higher Education Sprout Project, Ministerie van Onderwijs aan het hoofdkantoor van University Advancement bij NCKU naar W.-L.W.

Alle experimentele protocollen en de verzorging van de dieren werden goedgekeurd door de National Cheng Kung University (NCKU) Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC).
1. Voorbereiding op het proefdier
<ol><li>Verkrijg 6-8 weken oude wild-type C57BL / 6JNarl mannelijke muizen van een leverancier.</li>
	<li>Huis de muizen in een standaard muizenkooi met standaard muizen chow en gesteriliseerd water ad libitum. OPMERKING: De huisvestingsomstandigheden v...

Van de darm afgeleide metabolieten zijn in verband gebracht met hersengemedieerde ziekten zonder veel nauwkeurig mechanisme, gedeeltelijk vanwege hun meerdere bindingsplaatsen in het lichaam 6,12,24. Eerdere rapporten gaven aan dat SCFA's kunnen dienen als liganden voor G-eiwitgekoppelde receptoren, epigenetische regulatoren en bronnen voor energieproductie op meerdere locaties in het lichaam 6,12</s...

Het menselijke maagdarmkanaal herbergt diverse micro-organismen die de gastheerbeïnvloeden 1,2,3. Deze darmbacteriën kunnen darm-afgeleide metabolieten afscheiden tijdens hun gebruik van voedingscomponenten die door de gastheer worden geconsumeerd 4,5. Interessant is dat de darmmetabolieten die niet in de periferie worden gemetaboliseerd, via circulatie naar andere organen kunnen worden getransporteerd6. Van belang is dat deze uitgescheiden metabolieten kunnen dienen als mediatoren voor de darm-hersenas, gedefinieerd als de bidirectionele communicatie tussen het centrale zenuwstelsel en de darm7. Eerdere studies hebben aangetoond dat van de darm afgeleide metabolieten complex gedrag en emotie bij dieren kunnen moduleren 8,9,10,11.
Korte keten vetzuren (SCFA's) zijn de belangrijkste metabolieten geproduceerd door darmmicrobiota tijdens de fermentatie van voedingsvezels en onverteerbare koolhydraten6. Acetaat, propionaat en butyraat zijn de meest voorkomende SCFA's in de darm12. SCFA's dienen als de energiebron voor cellen in het maagdarmkanaal. Niet-gemetaboliseerde SCFA's in de darm kunnen via de poortader naar de hersenen worden getransporteerd, waardoor hersenen en gedrag worden gemoduleerd 6,12. Eerdere studies hebben gesuggereerd dat SCFA's een cruciale rol kunnen spelen bij neuropsychiatrischeaandoeningen 6,12. Bijvoorbeeld, intraperitoneale injectie van butyraat in BTBR T + Itpr3tf / J (BTBR) muizen, een diermodel van autismespectrumstoornis (ASS), redde hun sociale tekorten13. Met antibiotica behandelde ratten die microbiota kregen van depressieve proefpersonen vertoonden een toename van angstachtig gedrag en fecale SCFA's14. Klinisch werden veranderingen in fecale SCFA's waargenomen bij mensen met ASS in vergelijking met typisch ontwikkelende controles15,16. Mensen met een depressie hebben lagere fecale SCFA's dan gezonde proefpersonen 17,18. Deze studies suggereerden dat SCFA's het gedrag bij dieren en mensen via verschillende routes kunnen veranderen.
Microbiële metabolieten oefenen verschillende effecten uit op meerdere plaatsen in het lichaam, met invloed op de fysiologie en het gedrag van de gastheer 4,19, waaronder het maagdarmkanaal, de nervus vagus en de sympathische zenuw. Het is moeilijk om de precieze rol van darm-afgeleide metabolieten in de hersenen te bepalen bij het toedienen van de metabolieten via perifere routes. Dit artikel presenteert een op video gebaseerd protocol om de effecten van darm-afgeleide metabolieten in de hersenen van een vrij bewegende muis te onderzoeken (figuur 1). We toonden aan dat SCFA's acuut konden worden gegeven via de gidscanule tijdens gedragstests. Het type, het volume en de infusiesnelheid van metabolieten kunnen worden gewijzigd afhankelijk van het doel. De plaats van cannulisatie kan worden aangepast om de impact van darmmetabolieten in een specifiek hersengebied te onderzoeken. We willen wetenschappers een methode bieden om de potentiële impact van van de darm afgeleide microbiële metabolieten op de hersenen en het gedrag te onderzoeken.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Material</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Advil Liqui-Gels Solubilized Ibuprofen A2:D41</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 donkey anti-rabbit</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A-21206</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Fluorescent Gold (rabbit polyclonal)</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>AB153-I</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bottle Top Vacuum Filter, 500 mL, 0.22 &#956;m, PES, Sterile</td>
			<td>NEST</td>
			<td>121921LA01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C1016</td>
			<td>ACSF: 0.14 g/L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexidine scrub 2%</td>
			<td>Phoenix</td>
			<td>NDC 57319-611-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexidine solution</td>
			<td>Phoenix</td>
			<td>NDC 57319-599-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Commercial dummy</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>62004</td>
			<td>Single_OD 0.20 mm/ M3.5/G = 0.5 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Commercial guide cannul</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>62104</td>
			<td>Single_OD 0.41 mm-27G/ M3.5/C = 2.5 mm&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Commercial injector</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>62204</td>
			<td>Single_OD 0.21 mm-33G/ Mates with M3.5/C = 3.5 mm/G = 0.5 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-(+)-Glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G8270</td>
			<td>ACSF: 0.61 g/L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dental acrylic</td>
			<td>HYGENIC</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fixing screws</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>62521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoroshield mounting medium with DAPI</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>AB104139</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horse serum</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>16050130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringes</td>
			<td>BBraun</td>
			<td>XG-LBB-9151133S-1BX</td>
			<td>1 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane&#160;</td>
			<td>Panion &#38; BF biotech</td>
			<td>DG-4900-250D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P3911</td>
			<td>ACSF: 0.19 g/L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketoprofen&#160;</td>
			<td>Swiss Pharmaceutical</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine&#160;</td>
			<td>AstraZeneca</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low melting point agarose</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>16520</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M8266</td>
			<td>ACSF: 0.19 g/L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope cover slips</td>
			<td>MARIENFELD</td>
			<td>101242</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>4951PLUS-001E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil light, white NF</td>
			<td>Macron Fine Chemicals</td>
			<td>MA-6358-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S9888</td>
			<td>ACSF: 7.46 g/L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaH2PO4&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S8282</td>
			<td>ACSF: 0.18 g/L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S5761</td>
			<td>ACSF: 1.76 g/L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>n-butyl cyanoacrylate adhesive (tissue adhesive glue)</td>
			<td>3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td>3M Vetbond</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neural tracer&#160;</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>SC-358883</td>
			<td>FluoroGold</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P6148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyethylene tube</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>62329</td>
			<td>OD 1.50, I.D 0.50 mm and OD 1.09, I.D 0.38 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube Vet (eye) Ointment</td>
			<td>Dechra&#160;</td>
			<td>12920060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium acetate&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S2889</td>
			<td>SCFAs: 13.5 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium azide&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S2002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium butyrate&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>B5887</td>
			<td>SCFAs: 8 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium propionate&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P1880</td>
			<td>SCFAs: 5.18 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless guide cannula</td>
			<td>Chun Ta stainless steel enterprise CO., LTD.</td>
			<td>n/a</td>
			<td>OD 0.63 mm; Local vendor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless injector</td>
			<td>Chun Ta stainless steel enterprise CO., LTD.</td>
			<td>n/a</td>
			<td>OD 0.3 mm; dummy is made from injector; local vendor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superglue</td>
			<td>Krazy Glue</td>
			<td>KG94548R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1.08603.1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula holder</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>B485-68217</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ceiling camera</td>
			<td>FOSCAM</td>
			<td>R2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital stereotaxic instruments</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>51730D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting microscope</td>
			<td>INNOVIEW</td>
			<td>SEM-HT/TW</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Bead Sterilizer</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>RS1501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>53800M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica microscope&#160;</td>
			<td>Leica</td>
			<td>DM2500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting Forceps</td>
			<td>ROBOZ</td>
			<td>RS-5136</td>
			<td>Serrated, Slight Curve; Extra Delicate; 0.5mm Tip Width; 4&#34; Length&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting Scissors</td>
			<td>ROBOZ</td>
			<td>RS-5918</td>
			<td>4.5&#34; Angled Sharp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microinjection controller</td>
			<td>World Precision Instruments (WPI)</td>
			<td>MICRO2T</td>
			<td>SMARTouch Controller</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microinjection syringe pump</td>
			<td>World Precision Instruments (WPI)</td>
			<td>UMP3T-1</td>
			<td>UltraMicroPump3&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microliter syringe</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>80014</td>
			<td>10 &#181;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical Fiber Cold Light with double Fiber</td>
			<td>Step</td>
			<td>LGY-150</td>
			<td>Local vendor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pet trimmer</td>
			<td>WAHL</td>
			<td>09962-2018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vaporiser for Isoflurane</td>
			<td>Step</td>
			<td>AS-01</td>
			<td>Local vendor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vibratome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>VT1000S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal behavior video tracking software</td>
			<td>Noldus</td>
			<td>EthoVision</td>
			<td>Version: 15.0.1416</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica Application Suite X software</td>
			<td>Leica</td>
			<td>LASX</td>
			<td>Version: 3.7.2.22383</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intracerebroventricular delivery of gut-derived microbial metabolites in freely moving mice

De impact van darmmicrobiota en hun metabolieten op de fysiologie en het gedrag van de gastheer is in dit decennium uitgebreid onderzocht. Talrijke studies hebben aangetoond dat van darmmicrobiota afgeleide metabolieten hersengemedieerde fysiologische functies moduleren via ingewikkelde darm-hersenroutes in de gastheer. Korte keten vetzuren (SCFA's) zijn de belangrijkste van bacteriën afgeleide metabolieten die worden geproduceerd tijdens de fermentatie van voedingsvezels door het darmmicrobioom. Uitgescheiden SCFA's uit de darm kunnen op meerdere plaatsen in de periferie werken en de immuun-, endocriene en neurale reacties beïnvloeden vanwege de enorme distributie van SCFA-receptoren. Daarom is het een uitdaging om de centrale en perifere effecten van SCFA's te differentiëren door orale en intraperitoneale toediening van SCFA's. Dit artikel presenteert een op video gebaseerde methode om de functionele rol van SCFA's in de hersenen te ondervragen via een gidscanule bij vrij bewegende muizen. De hoeveelheid en het type SCFA's in de hersenen kunnen worden aangepast door het infusievolume en de snelheid te regelen. Deze methode kan wetenschappers een manier bieden om de rol van darm-afgeleide metabolieten in de hersenen te waarderen.

De muis werd 1 week na herstel van de implantatie van de gidscanule toegediend met SCFA's om de locomotorische activiteit in een nieuwe kooi te evalueren. De muis werd in een nieuwe kooi geplaatst en toegediend met 2.100 nL SCFA's of ACSF in de eerste 5 minuten (afgiftesnelheid van 7 nL / s) in de hersenen via de commerciële gidscanule geïmplanteerd in de laterale ventrikel van de hersenen. De locomotorische activiteit in een nieuwe kooi werd geregistreerd gedurende nog eens 30 minuten na infusie. Er werd geen verschil...

Watch this Scientific Journal Video about Intracerebroventricular Delivery of Gut-Derived Microbial Metabolites in Freely Moving Mice at JoVE.com

Intracerebroventricular Delivery of Gut-Derived Microbial Metabolites in Freely Moving Mice

Van de darm afgeleide microbiële metabolieten hebben veelzijdige effecten die leiden tot complex gedrag bij dieren. We streven ernaar om een stapsgewijze methode te bieden om de effecten van van de darm afgeleide microbiële metabolieten in de hersenen af te bakenen via intracerebroventriculaire toediening via een gidscanule.

Intracerebroventriculaire toediening van van de darm afgeleide microbiële metabolieten in vrij bewegende muizen

The impact of gut microbiota and their metabolites on host physiology and behavior has been extensively investigated in this decade. Numerous studies have ...

De metabolieten die vrijkomen door darmmicrobiota produceren complexe effecten op de gastheer. Dit protocol presenteert een methode om de rol van darmmetabolieten in de hersenen en het gedrag van de muis te ondervragen. Deze techniek biedt een nauwkeurige, zorgvuldige en gevalideerde methode om darmmetabolieten in een brein af te leveren bij vrij bewegende muizen.We bieden een uitgebreide en fysiologische beste methodologie voor inzicht in darmhersenasonderzoek. Plaats de muis op het stereotaxische frame en bevestig de snijtanden van de muis op de snijbalk in de stereotaxische snijtandhouder. Bedek de neus met het neuskegelmasker.Evalueer vervolgens de nociceptie van de muis via de bovenste knijpreflex en zorg voor een constante ademhalingsfrequentie voordat de operatieplaats wordt ingesneden. Zodra de vacht op het hoofd is verwijderd door de plakband, injecteert u subcutaan de pijnstillende ketoprofen om pijn te verlichten en oogzalf aan te brengen. Bevestig vervolgens het hoofd door de puntige oorstang in de gehoorgang te steken.Draai de neusklem op de snijtandhouder aan en druk de kop voorzichtig in om ervoor te zorgen dat de kop vastzit. Gebruik 3 afwisselende scrubs van chloorhexidine-wattenstaafje om de hoofdhuid te desinfecteren. Gebruik nu het ontleden van scalpel om een incisie van minder dan een centimeter in de hoofdhuid te maken op een voorste posterieure manier.Veeg na het openen van de incisie de schedel af met een wattenstaafje dat wordt vastgehouden door een micro-ontleedtang. Identificeer en label op basis van de stereotaxische coördinaten de positie van de rechter laterale ventrikel zoals beschreven in het manuscript. Boor vervolgens een gat door de schedel op de gelabelde plaats met behulp van een stereotaxische boor en boor later nog twee tot vier gaten in de schedel.Veeg de schedel af met lidocaïne wattenstaafje en monteer 2 tot 4 roestvrijstalen schroeven op de gaten. Plaats de commerciële gidscanule op de stereotaxische canulehouder en desinfecteer met de glazen snelheidssterilisator op 150 graden Celsius. Verplaats vervolgens de stereotaxische canulehouder naar het gat dat is geboord voor de laterale ventrikel en steek langzaam de commerciële geleidecanule in het gat totdat de gewenste diepte is bereikt.Breng nu 10 microliter n-butylcyanoacrylaatlijm aan om de commerciële geleidecanule in het geboorde gat te bevestigen en wacht 3 tot 4 minuten. Laat de commerciële gidscanule voorzichtig los van de stereotaxische canulehouder en breng tandheelkundig acrylaat aan op de ingesneden hoofdhuid om de commerciële gidscanule te fixeren en wacht minstens 5 minuten. Implanteer de commerciële dummy in de commerciële gidscanule.Plaats de muis vervolgens in een nieuwe kooi met een verwarmingskussen eronder voor herstel van de anesthesie en observeer continu totdat de muis volledig ontwaakt. Monteer de microliterspuit, met 10 microliter gedestilleerd water, op de micro-injectiepomp. Vul met behulp van een insulinespuit de polyethyleenbuis met gedestilleerd water en sluit de microliterspuit aan op de hangende polyethyleenbuis.Schakel de microinjectiecontroller in en druk op display alle kanalen om toegang te krijgen tot het opdrachtscherm. Druk vervolgens op configuratie en stel het volumedoel in op 9.800 nanoliter met een leveringssnelheid van 100 nanoliter per seconde. Druk vervolgens op richting om over te schakelen naar de infusiemodus en druk op run om 9.800 nanoliter gedestilleerd water te infuseren uit de polyethyleenbuis die is aangesloten op de microliterspuit.Plaats nu de injector in een injectieflacon met de minerale olie, druk op de configuratie en stel het volumedoel in op 3.000 nanoliter met een afgiftesnelheid van 100 nanoliter per seconde. Voor het opnemen van 3.000 nanoliter minerale olie drukt u op direction om over te schakelen naar de opnamemodus en drukt u vervolgens op uitvoeren. Demonteer de polyethyleenbuis van de naald van de microliterspuit.Om 3.000 nanoliter gedestilleerd water uit de naald van de microliterspuit te spugen, drukt u op richting om over te schakelen naar de infusiemodus en drukt u op run. Steek vervolgens de microliterspuit terug in de polyethyleenbuis. Plaats de injector in een injectieflacon met SCFA's.Druk op de configuratie en stel het volumedoel in op 9.500 nanoliter met een leveringssnelheid van 100 nanoliter per seconde. Trek 9.500 nanoliter SCFA's op door op richting te drukken om over te schakelen naar de opnamemodus en druk op uitvoeren. Label de olie SCFA's fase om te valideren of de SCFA's met succes zijn geïnfundeerd.Druk op configuratie en stel het gewenste volumedoel in met een leveringssnelheid van 7 nanoliter per seconde. Druk op richting om over te schakelen naar de infuse-modus. Druk op run om de microliterspuit naar voren te laten trekken totdat de vloeistof aan de voorkant van de commerciële injector naar buiten komt voordat de injector in de canule wordt ingebracht voor scaffa-injectie.Na het verdoven van de muis, plaatst u de commerciële injector in de commerciële geleidecanule. Zodra de muis is hersteld van anesthesie, plaatst u hem in een nieuwe kooi en laat u hem 35 minuten vrij verkennen. Infundeer SCFA's met een toedieningssnelheid van 7 nanoliter per seconde voor een doelvolume van 2.100 nanoliter in de eerste 5 minuten.Druk vervolgens op direction naar de infuse-modus en druk op uitvoeren. Verwijder na gedragstesten de commerciële injector uit de commerciële geleidecanule. Infundeer 2, 100 nanoliter van de neutrale tracer met de toedieningssnelheid van 7 nanoliter per seconde om de infusieplaats te verifiëren.Beeld het fluorescerende signaal op de infusieplaats af met behulp van een fluorescentiemicroscoop. Zowel ACSF- als SCFA's-geïnfundeerde muizen reisden in totaal 35 minuten in een nieuwe kooi. Er werd geen verschil waargenomen in de locomotorische activiteit in de nieuwe kooi tussen infusie van SCFA's en ACSF.De fluorescerende kleurstof werd gedetecteerd in de laterale ventrikel en de omliggende gebieden van de muizenhersenen wanneer deze werd toegediend met een commerciële gidscanule. Evenzo leidt infusie door de roestvrijstalen geleidecanule tot de detectie van signalen in de laterale ventrikel en de omliggende gebieden van de muizenhersenen. Door deze procedure te combineren met circuitgebaseerde neurale technologieën kunnen wetenschappers inzicht krijgen in de circuitgebaseerde controle van de hersenen en het gedrag dat wordt bijgedragen door darmmetabolieten.Deze techniek maakt de weg vrij voor de onderzoekers om de rol van microbiota en metabolieten in de ingewikkelde darmhersenas te onderzoeken.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

High-density EEG Recordings of the Freely Moving Mice using Polyimide-based Microelectrode

High-density EEG-registraties van de vrij bewegende muizen met behulp van Polyimide op basis van micro-elektrode

Electroencephalogram (EEG) indicates the averaged electrical activity of the neuronal populations on a large-scale level. It is widely utilized as a ...

Recording Single Neurons' Action Potentials from Freely Moving Pigeons Across Three Stages of Learning

Opnemen Single Neuronen &#39;actiepotentialen van vrij bewegende Duiven over drie stadia van het leerproces

While the subject of learning has attracted immense interest from both behavioral and neural scientists, only relatively few investigators have observed ...

Recording EEG in Freely Moving Neonatal Rats Using a Novel Method

EEG opnemen bij vrij bewegende neonatale ratten met behulp van een nieuwe methode

EEG is a useful method to detect electrical activity in the brain. Moreover, it is a widely used diagnostic tool for various neurological conditions, such ...

Intracerebroventricular Treatment with Resiniferatoxin and Pain Tests in Mice

Intracerebroventriculaire behandeling met resiniferatoxine en pijntests bij muizen

The transient receptor potential vanilloid type 1 (TRPV1), a thermosensitive cation channel, is known to trigger pain in the peripheral nerves. In ...

Noninvasive EEG Recordings from Freely Moving Piglets

Noninvasive EEG opnamen vrij bewegen biggen

The method allows the recording of high-quality electroencephalograms (EEGs) from freely moving piglets directly in the pigpen. We use a one-channel ...

Microdialysis of Excitatory Amino Acids During EEG Recordings in Freely Moving Rats

Microdialysis van Excitatory aminozuren tijdens EEG opnames in vrij bewegende ratten

Microdialysis is a well-established neuroscience technique that correlates the changes of neurologically active substances diffusing into the brain ...

Long-term Sensory Conflict in Freely Behaving Mice

Op lange termijn sensorisch Conflict in vrij gedragen muizen

Long-term sensory conflict protocols are a valuable means of studying motor learning. The presented protocol produces a persistent sensory conflict for ...

Hybrid Microdrive System with Recoverable Opto-Silicon Probe and Tetrode for Dual-Site High Density Recording in Freely Moving Mice

Hybride Microdrive systeem met herstelbaar opto-silicium sonde en Tetrode voor Dual-site high density opname in vrij bewegende muizen

Multi-regional neural recordings can provide crucial information to understanding fine-timescale interactions between multiple brain regions. However, ...

Multi-Fiber Photometry to Record Neural Activity in Freely-Moving Animals

Multi-Fiber fotometrie om neurale activiteit op te nemen in vrij bewegende dieren

Recording the activity of a group of neurons in a freely-moving animal is a challenging undertaking. Moreover, as the brain is dissected into smaller and ...

Extracellular Electrophysiological Recording in the Motor Cortex of Mice

Multichannel Extracellular Recording in Freely Moving Mice

Advancements in Multichannel Extracellular Recording for Studying Neuronal Activity in Freely Moving Mice (Video) | JoVE

Meerkanaals extracellulaire opname in vrij bewegende muizen

The protocol aims to uncover the properties of neuronal firing and network local field potentials (LFPs) in behaving mice carrying out specific tasks by ...