Name: intracerebroventricular delivery of gut-derived microbial metabolites in freely moving mice
Uploaded: 2022-06-02T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intracerebroventricular Delivery of Gut-Derived Microbial Metabolites in Freely Moving Mice at JoVE.com

우리는 동물을 돌보는 국립 쳉쿵 대학교 (NCKU)의 실험실 동물 센터 직원을 인정합니다. 이 작업은 CHENG-HSING 의료 재단의 Kun-Yen Huang 교수 교육 기금에서 C.-WL에 대한 장학금으로 지원되었습니다. 대만 과학 기술부 (MOST)의 기금 : (학부 연구 MOST 109-2813-C-006-095-B) TO T.-H.Y.; (대부분 107-2320-B-006-072-MY3; 109-2314-B-006-046; 110-2314-B-006-114; 110-2320-B-006-018-MY3)에서 W.-L.W.로; 그리고 고등 교육 새싹 프로젝트, 교육부에서 NCKU에서 W.-L.W까지의 대학 진흥 본부에

모든 실험 프로토콜과 동물 관리는 국립 쳉쿵 대학교 (NCKU) 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)의 승인을 받았습니다.
1. 실험동물에 대한 준비
<ol><li>공급 업체로부터 6-8 주 된 야생형 C57BL / 6JNarl 수컷 마우스를 구하십시오.</li>
	<li>표준 마우스 케이지에 마우스를 수용하고 표준 마우스 차우와 멸균 된 물을 자유롭게 만듭니다. 참고: NCKU 실험실 동물 센?...

장 유래 대사 산물은부분적으로 신체의 여러 결합 부위 6,12,24로 인해 많은 정확한 메커니즘없이 뇌 매개 질환과 관련이 있습니다. 이전 보고서에 따르면 SCFA는 G 단백질 결합 수용체, 후성 유전 조절자 및 신체의 여러 부위에서 에너지 생산 원을위한 리간드 역할을 할 수 있습니다 6,12</sup...

인간의 위장관에는 숙주 1,2,3에 영향을 미치는 다양한 미생물이 있습니다. 이 장내 박테리아는 숙주 4,5가 소비하는식이 성분을 활용하는 동안 장 유래 대사 산물을 분비 할 수 있습니다. 흥미롭게도, 말초에서 대사되지 않은 장 대사 산물은 순환을 통해 다른 기관으로 운반 될 수 있습니다6. 참고로, 이러한 분비 된 대사 산물은 중추 신경계와 장7 사이의 양방향 통신으로 정의되는 장-뇌 축의 매개체 역할을 할 수 있습니다. 이전 연구에 따르면 장 유래 대사 산물은 동물의 복잡한 행동과 감정을 조절할 수 있습니다 8,9,10,11.
단쇄 지방산 (SCFA)은식이 섬유와 소화되지 않는 탄수화물의 발효 과정에서 장내 미생물에 의해 생성되는 주요 대사 산물입니다6. 아세테이트, 프로피오네이트 및 부티레이트는 장12에서 가장 풍부한 SCFA입니다. SCFA는 위장관에서 세포의 에너지 원 역할을합니다. 장에서 대사되지 않은 SCFA는 문맥을 통해 뇌로 운반되어 뇌와 행동을 조절할 수 있습니다 6,12. 이전 연구에서는 SCFA가 신경 정신 장애에서 중요한 역할을 할 수 있다고 제안했습니다 6,12. 예를 들어, 자폐 스펙트럼 장애(ASD)의 동물 모델인 BTBR T+ Itpr3tf/J(BTBR) 마우스에서 부티레이트를 복강 내 주사하여 사회적 결핍을 구제했습니다13. 우울증 피험자로부터 미생물총을 투여받은 항생제 처리된 쥐는 불안과 유사한 행동과 대변 SCFA의 증가를 보였다14. 임상 적으로, 대변 SCFA 수준의 변화는 일반적으로 발달하는 대조군15,16과 비교하여 ASD 환자에서 관찰되었습니다. 우울증이 있는 사람들은 건강한 피험자보다 대변 SCFA 수치가 낮습니다17,18. 이 연구는 SCFA가 다양한 경로를 통해 동물과 인간의 행동을 바꿀 수 있음을 시사했습니다.
미생물 대사 산물은 신체의 여러 부위에 다양한 효과를 발휘하여 위장관, 미주 신경 및 교감 신경을 포함한 숙주 생리학및 행동 4,19에 영향을 미칩니다. 말초 경로를 통해 대사 산물을 투여 할 때 뇌에서 장 유래 대사 산물의 정확한 역할을 정확히 찾아내는 것은 어렵습니다. 이 논문은 자유롭게 움직이는 마우스의 뇌에서 장 유래 대사 산물의 영향을 조사하기위한 비디오 기반 프로토콜을 제시합니다 (그림 1). 우리는 SCFA가 행동 테스트 중에 가이드 캐뉼러를 통해 급격하게 주어질 수 있음을 보여주었습니다. 대사 산물의 유형, 부피 및 주입 속도는 목적에 따라 변형 될 수 있습니다. 캐뉼라이제이션 부위는 특정 뇌 영역에서 장 대사 산물의 영향을 탐색하도록 조정할 수 있습니다. 우리는 과학자들에게 장 유래 미생물 대사 산물이 뇌와 행동에 미치는 잠재적 영향을 탐구 할 수있는 방법을 제공하는 것을 목표로합니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Material</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Advil Liqui-Gels Solubilized Ibuprofen A2:D41</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 donkey anti-rabbit</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A-21206</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Fluorescent Gold (rabbit polyclonal)</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>AB153-I</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bottle Top Vacuum Filter, 500 mL, 0.22 &#956;m, PES, Sterile</td>
			<td>NEST</td>
			<td>121921LA01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C1016</td>
			<td>ACSF: 0.14 g/L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexidine scrub 2%</td>
			<td>Phoenix</td>
			<td>NDC 57319-611-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexidine solution</td>
			<td>Phoenix</td>
			<td>NDC 57319-599-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Commercial dummy</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>62004</td>
			<td>Single_OD 0.20 mm/ M3.5/G = 0.5 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Commercial guide cannul</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>62104</td>
			<td>Single_OD 0.41 mm-27G/ M3.5/C = 2.5 mm&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Commercial injector</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>62204</td>
			<td>Single_OD 0.21 mm-33G/ Mates with M3.5/C = 3.5 mm/G = 0.5 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-(+)-Glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G8270</td>
			<td>ACSF: 0.61 g/L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dental acrylic</td>
			<td>HYGENIC</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fixing screws</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>62521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoroshield mounting medium with DAPI</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>AB104139</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horse serum</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>16050130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringes</td>
			<td>BBraun</td>
			<td>XG-LBB-9151133S-1BX</td>
			<td>1 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane&#160;</td>
			<td>Panion &#38; BF biotech</td>
			<td>DG-4900-250D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P3911</td>
			<td>ACSF: 0.19 g/L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketoprofen&#160;</td>
			<td>Swiss Pharmaceutical</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine&#160;</td>
			<td>AstraZeneca</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low melting point agarose</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>16520</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M8266</td>
			<td>ACSF: 0.19 g/L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope cover slips</td>
			<td>MARIENFELD</td>
			<td>101242</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>4951PLUS-001E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil light, white NF</td>
			<td>Macron Fine Chemicals</td>
			<td>MA-6358-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S9888</td>
			<td>ACSF: 7.46 g/L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaH2PO4&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S8282</td>
			<td>ACSF: 0.18 g/L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S5761</td>
			<td>ACSF: 1.76 g/L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>n-butyl cyanoacrylate adhesive (tissue adhesive glue)</td>
			<td>3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td>3M Vetbond</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neural tracer&#160;</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>SC-358883</td>
			<td>FluoroGold</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P6148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyethylene tube</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>62329</td>
			<td>OD 1.50, I.D 0.50 mm and OD 1.09, I.D 0.38 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube Vet (eye) Ointment</td>
			<td>Dechra&#160;</td>
			<td>12920060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium acetate&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S2889</td>
			<td>SCFAs: 13.5 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium azide&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S2002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium butyrate&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>B5887</td>
			<td>SCFAs: 8 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium propionate&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P1880</td>
			<td>SCFAs: 5.18 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless guide cannula</td>
			<td>Chun Ta stainless steel enterprise CO., LTD.</td>
			<td>n/a</td>
			<td>OD 0.63 mm; Local vendor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless injector</td>
			<td>Chun Ta stainless steel enterprise CO., LTD.</td>
			<td>n/a</td>
			<td>OD 0.3 mm; dummy is made from injector; local vendor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superglue</td>
			<td>Krazy Glue</td>
			<td>KG94548R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1.08603.1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula holder</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>B485-68217</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ceiling camera</td>
			<td>FOSCAM</td>
			<td>R2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital stereotaxic instruments</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>51730D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting microscope</td>
			<td>INNOVIEW</td>
			<td>SEM-HT/TW</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Bead Sterilizer</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>RS1501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>53800M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica microscope&#160;</td>
			<td>Leica</td>
			<td>DM2500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting Forceps</td>
			<td>ROBOZ</td>
			<td>RS-5136</td>
			<td>Serrated, Slight Curve; Extra Delicate; 0.5mm Tip Width; 4&#34; Length&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting Scissors</td>
			<td>ROBOZ</td>
			<td>RS-5918</td>
			<td>4.5&#34; Angled Sharp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microinjection controller</td>
			<td>World Precision Instruments (WPI)</td>
			<td>MICRO2T</td>
			<td>SMARTouch Controller</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microinjection syringe pump</td>
			<td>World Precision Instruments (WPI)</td>
			<td>UMP3T-1</td>
			<td>UltraMicroPump3&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microliter syringe</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>80014</td>
			<td>10 &#181;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical Fiber Cold Light with double Fiber</td>
			<td>Step</td>
			<td>LGY-150</td>
			<td>Local vendor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pet trimmer</td>
			<td>WAHL</td>
			<td>09962-2018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vaporiser for Isoflurane</td>
			<td>Step</td>
			<td>AS-01</td>
			<td>Local vendor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vibratome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>VT1000S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal behavior video tracking software</td>
			<td>Noldus</td>
			<td>EthoVision</td>
			<td>Version: 15.0.1416</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica Application Suite X software</td>
			<td>Leica</td>
			<td>LASX</td>
			<td>Version: 3.7.2.22383</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intracerebroventricular delivery of gut-derived microbial metabolites in freely moving mice

장내 미생물총과 그 대사 산물이 숙주 생리학 및 행동에 미치는 영향은 지난 10년 동안 광범위하게 조사되었습니다. 수많은 연구에 따르면 장내 미생물총에서 파생된 대사 산물은 숙주의 복잡한 장-뇌 경로를 통해 뇌 매개 생리 기능을 조절합니다. 단쇄 지방산(SCFA)은 장내 마이크로바이옴에 의해 식이 섬유 발효 중에 생성되는 주요 박테리아 유래 대사 산물입니다. 장에서 분비된 SCFA는 말초의 여러 부위에서 작용하여 SCFA 수용체의 광대한 분포로 인해 면역, 내분비 및 신경 반응에 영향을 미칠 수 있습니다. 따라서 SCFA의 경구 및 복강 내 투여를 통해 SCFA의 중추 및 말초 효과를 구별하는 것은 어렵습니다. 이 논문은 자유롭게 움직이는 마우스에서 가이드 캐뉼러를 통해 뇌에서 SCFA의 기능적 역할을 조사하는 비디오 기반 방법을 제시합니다. 뇌에서 SCFA의 양과 유형은 주입량과 속도를 조절하여 조정할 수 있습니다. 이 방법은 과학자들에게 뇌에서 장 유래 대사 산물의 역할을 이해하는 방법을 제공 할 수 있습니다.

마우스를 가이드 캐뉼라 이식으로부터 회복된 지 1주일 후에 SCFA를 주입하여 신규한 케이지에서 운동 활성을 평가하였다. 마우스를 새로운 케이지에 넣고 뇌의 측면 심실에 이식 된 상업용 가이드 캐뉼라를 통해 처음 5 분 동안 2,100nL의 SCFA 또는 ACSF (7nL / s의 전달 속도)를 뇌에 주입했습니다. 새로운 케이지에서의 운동 활동은 주입 후 추가로 30 분 동안 기록되었습니다. SCFAs와 ACSF의 주입 사이의 신...

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Intracerebroventricular Delivery of Gut-Derived Microbial Metabolites in Freely Moving Mice

장 유래 미생물 대사 산물은 동물에서 복잡한 행동으로 이어지는 다면적 효과가 있습니다. 우리는 가이드 캐뉼러를 통한 뇌실 내 전달을 통해 뇌에서 장 유래 미생물 대사 산물의 효과를 설명하는 단계별 방법을 제공하는 것을 목표로합니다.

자유롭게 움직이는 마우스에서 장 유래 미생물 대사 산물의 뇌실 내 전달

The impact of gut microbiota and their metabolites on host physiology and behavior has been extensively investigated in this decade. Numerous studies have ...

장내 미생물총에 의해 방출되는 대사 산물은 숙주에 복잡한 효과를 생성합니다. 이 프로토콜은 마우스의 뇌와 행동에서 장 대사 산물의 역할을 조사하는 방법을 제시합니다. 이 기술은 자유롭게 움직이는 마우스의 뇌에 장 대사 산물을 전달하는 정확하고 세심하며 검증 된 방법을 제공합니다.우리는 장 뇌 축 연구에 대한 통찰력을위한 포괄적이고 생리 학적 최상의 방법론을 제공합니다. 마우스를 정위 프레임에 놓고 입체 앞니 홀더의 앞니 막대에 마우스 앞니를 고정합니다. 코 콘 마스크로 코를 덮으십시오.그런 다음 상단 핀치 반사를 통해 마우스의 통각을 평가하고 수술 부위를 절개하기 전에 일정한 호흡 속도를 확인하십시오. 머리에 손질 된 모피가 접착 테이프로 제거되면 진통제 케토 프로 펜을 피하 주사하여 통증을 완화하고 눈 연고를 바르십시오. 그런 다음 외이도에 뾰족한 이어 바를 삽입하여 머리를 고정하십시오.앞니 홀더의 코 클램프를 조이고 머리를 부드럽게 눌러 머리가 고정되었는지 확인합니다. 클로르헥시딘 면봉을 3번 번갈아 가며 스크럽하여 두피를 소독합니다. 이제 해부 메스를 사용하여 두피를 앞쪽 뒤쪽으로 1cm 미만으로 절개하십시오.절개 부위를 연 후 미세 해부 집게로 잡은 면봉으로 두개골을 닦으십시오. 입체 좌표를 기반으로 원고에 설명 된대로 오른쪽 측면 심실의 위치를 식별하고 레이블을 지정합니다. 다음으로, 정위 드릴을 사용하여 라벨이 붙은 부위의 두개골을 통해 구멍을 뚫고 나중에 두개골에 2-4 개의 구멍을 더 뚫습니다.리도카인 면봉으로 두개골을 닦고 구멍에 2-4 개의 스테인리스 나사를 장착하십시오. 상업용 가이드 캐뉼러를 정위 캐뉼라 홀더에 놓고 섭씨 150도에서 유리 속도 살균기로 소독합니다. 그런 다음 정위 캐뉼라 홀더를 측심실용으로 뚫린 구멍으로 옮기고 원하는 깊이에 도달할 때까지 상업용 가이드 캐뉼라를 구멍에 천천히 삽입합니다.이제 10 마이크로 리터의 n- 부틸 시아 노 아크릴 레이트 접착제를 적용하여 드릴 구멍에 상업용 가이드 캐뉼러를 고정하고 3-4 분 동안 기다립니다. 정위 캐뉼라 홀더에서 상업용 가이드 캐뉼라를 부드럽게 풀고 절개된 두피에 치과용 아크릴을 바르고 상업용 가이드 캐뉼라를 고정하고 최소 5분 동안 기다립니다. 상업용 더미를 상업용 가이드 캐뉼러에 이식합니다.그런 다음 마취에서 회복하기 위해 아래에 가열 패드가 있는 새 케이지에 마우스를 넣고 마우스가 완전히 깨어날 때까지 계속 관찰합니다. 10 마이크로 리터의 증류수가 들어있는 마이크로 리터 주사기를 마이크로 주입 펌프에 장착하십시오. 인슐린 주사기를 사용하여 폴리에틸렌 튜브에 증류수를 채우고 마이크로 리터 주사기를 매달린 폴리에틸렌 튜브에 연결합니다.미세 주입 컨트롤러를 켜고 모든 채널 표시를 눌러 명령 화면에 액세스합니다. 그런 다음 구성을 누르고 초당 100 나노 리터의 전달 속도로 볼륨 목표를 9, 800 나노 리터로 설정하십시오. 그런 다음 방향을 눌러 주입 모드로 전환하고 실행을 눌러 마이크로 리터 주사기에 연결된 폴리에틸렌 튜브에서 9, 800 나노 리터의 증류수를 주입합니다.이제 인젝터를 미네랄 오일이 들어있는 바이알에 넣고 구성을 누르고 볼륨 목표를 초당 100 나노 리터로 전달 속도로 3, 000 나노 리터로 설정하십시오. 3, 000 나노 리터의 미네랄 오일을 인출하려면 방향을 눌러 철수 모드로 전환 한 다음 실행을 누릅니다. 마이크로 리터 주사기 바늘에서 폴리에틸렌 튜브를 분해하십시오.마이크로 리터 주사기 바늘에서 3, 000 나노 리터의 증류수를 뱉어 내려면 방향을 눌러 주입 모드로 전환하고 실행을 누릅니다. 그런 다음 마이크로 리터 주사기를 폴리에틸렌 튜브에 다시 삽입하십시오. SCFA가 들어있는 바이알에 인젝터를 넣습니다.구성을 누르고 볼륨 목표를 9, 500 나노 리터로 설정하고 전달 속도를 초당 100 나노 리터로 설정합니다. 방향을 눌러 9, 500 나노 리터의 SCFA를 인출하여 인출 모드로 전환하고 실행을 누릅니다. 오일 SCFA 상에 라벨을 지정하여 SCFA가 성공적으로 주입되었는지 확인합니다.구성을 누르고 전달 속도로 원하는 볼륨 목표를 초당 7나노리터로 설정합니다. 방향을 눌러 주입 모드로 전환합니다. SCFA 주입을 위해 캐뉼라에 주입기를 삽입하기 전에 상업용 인젝터의 앞쪽 끝에서 액체가 나올 때까지 마이크로리터 주사기를 앞으로 주입하려면 실행을 누릅니다.마우스를 마취한 후 상업용 인젝터를 상업용 가이드 캐뉼라에 삽입합니다. 마우스가 마취에서 회복되면 새로운 케이지에 넣고 35 분 동안 자유롭게 탐색 할 수 있습니다. 처음 5 분 동안 2, 100 나노 리터의 목표 부피에 대해 초당 7 나노 리터의 전달 속도를 사용하여 SCFA를 주입하십시오.그런 다음 주입 모드로 방향을 누르고 실행을 누릅니다. 행동 테스트 후 상업용 가이드 캐뉼라에서 상업용 인젝터를 제거합니다. 주입 부위를 확인하기 위해 초당 7 나노 리터의 전달 속도로 2, 100 나노 리터의 중성 추적자를 주입하십시오.형광 현미경을 사용하여 주입 부위의 형광 신호를 이미지화합니다. ACSF와 SCFA가 주입 된 마우스는 총 35 분 동안 새로운 케이지에서 여행했습니다. SCFA와 ACSF의 주입 사이의 신규한 케이지에서의 운동 활성에는 차이가 관찰되지 않았다.형광 염료는 상업용 가이드 캐뉼라를 주입했을 때 마우스 뇌실과 마우스 뇌의 주변 영역에서 검출되었습니다. 유사하게, 스테인레스 스틸 가이드 캐뉼러를 통한 주입은 측면 심실과 마우스 뇌의 주변 영역에서 신호를 감지합니다. 이 절차를 회로 기반 신경 기술과 결합하면 과학자들은 장 대사 산물에 의해 기여하는 뇌 및 행동의 회로 기반 제어에 대한 통찰력을 얻을 수 있습니다.이 기술은 연구자들이 복잡한 장내 뇌 축에서 미생물총과 대사 산물의 역할을 탐구할 수 있는 길을 열어줍니다.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

High-density EEG Recordings of the Freely Moving Mice using Polyimide-based Microelectrode

Polyimide 기반 Microelectrode를 사용하여 자유롭게 이동 마우스의 고밀도 뇌파 레코딩

Electroencephalogram (EEG) indicates the averaged electrical activity of the neuronal populations on a large-scale level. It is widely utilized as a ...

연구

신경과학

Recording Single Neurons' Action Potentials from Freely Moving Pigeons Across Three Stages of Learning

자유롭게 학습의 세 단계에 걸쳐 비둘기를 이동에서 단일 신경 세포 &#39;활동 전위를 기록

While the subject of learning has attracted immense interest from both behavioral and neural scientists, only relatively few investigators have observed ...

Recording EEG in Freely Moving Neonatal Rats Using a Novel Method

새로운 방법으로 자유롭게 움직이는 신생아 쥐의 뇌파 기록

EEG is a useful method to detect electrical activity in the brain. Moreover, it is a widely used diagnostic tool for various neurological conditions, such ...

Intracerebroventricular Treatment with Resiniferatoxin and Pain Tests in Mice

수지 성 소와 쥐의 통증 검사를 가진 뇌경치료

The transient receptor potential vanilloid type 1 (TRPV1), a thermosensitive cation channel, is known to trigger pain in the peripheral nerves. In ...

Noninvasive EEG Recordings from Freely Moving Piglets

자유롭게 이동 Piglets에서 비 침 투 적인 뇌 파 기록

The method allows the recording of high-quality electroencephalograms (EEGs) from freely moving piglets directly in the pigpen. We use a one-channel ...

Microdialysis of Excitatory Amino Acids During EEG Recordings in Freely Moving Rats

자유롭게 이동 하는 쥐에서 뇌 파 기록 하는 동안 흥분 성의 아미노산의 Microdialysis

Microdialysis is a well-established neuroscience technique that correlates the changes of neurologically active substances diffusing into the brain ...

Long-term Sensory Conflict in Freely Behaving Mice

자유롭게 행동 하는 쥐에 장기 감각 충돌

Long-term sensory conflict protocols are a valuable means of studying motor learning. The presented protocol produces a persistent sensory conflict for ...

Hybrid Microdrive System with Recoverable Opto-Silicon Probe and Tetrode for Dual-Site High Density Recording in Freely Moving Mice

자유롭게 움직이는 마우스에서 이중 사이트 고밀도 레코딩을 위한 회수 가능한 광실리콘 프로브 및 Tetrode가 있는 하이브리드 마이크로드라이브 시스템

Multi-regional neural recordings can provide crucial information to understanding fine-timescale interactions between multiple brain regions. However, ...

Multi-Fiber Photometry to Record Neural Activity in Freely-Moving Animals

자유롭게 움직이는 동물의 신경 활동을 기록하는 다중 섬유 광도 측정법

Recording the activity of a group of neurons in a freely-moving animal is a challenging undertaking. Moreover, as the brain is dissected into smaller and ...

Extracellular Electrophysiological Recording in the Motor Cortex of Mice

Multichannel Extracellular Recording in Freely Moving Mice

Advancements in Multichannel Extracellular Recording for Studying Neuronal Activity in Freely Moving Mice (Video) | JoVE

자유롭게 움직이는 마우스의 다채널 세포외 기록

The protocol aims to uncover the properties of neuronal firing and network local field potentials (LFPs) in behaving mice carrying out specific tasks by ...