Name: whole-kidney three-dimensional staining with cubic
Uploaded: 2022-07-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Whole-Kidney Three-Dimensional Staining with CUBIC at JoVE.com

تم تنفيذ جزء من هذا العمل من خلال التعاون مع البروفيسور هيروكي ر. أويدا (جامعة طوكيو) ، والبروفيسور إيتسو أ. سوساكي (جامعة جونتيندو) ، والبروفيسور تيتسوهيرو تاناكا (جامعة توهوكو) ، والبروفيسور ماسافومي فوكاغاوا ، والدكتور تاكيهيكو وادا ، والدكتور هيروتاكا كومابا (جامعة توكاي).

تمت الموافقة على جميع التجارب من قبل مجلس المراجعة المؤسسية بجامعة طوكيو. تم تنفيذ جميع الإجراءات الحيوانية وفقا لإرشادات المعاهد الوطنية للصحة. تم استخدام ذكور الفئران C57BL / 6NJcl ، البالغة من العمر 8 أسابيع ، للدراسة الحالية. تم الحصول على الفئران من مصادر تجارية (انظر جدول المواد)....

<ol>
	<li>Velez-Fort, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+stimulus+selectivity+and+connectivity+of+layer+six+principal+cells+reveals+cortical+microcircuits+underlying+visual+processing.">The stimulus selectivity and connectivity of layer six principal cells reveals cortical microcircuits underlying visual processing.</a> Neuron. 83 (6), 1431-1443 (2014).</li><li>Susaki, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-brain+imaging+with+single-cell+resolution+using+chemical+cocktails+and+computational+analysis.">Whole-brain imaging with single-cell resolution using chemical cocktails and computational analysis.</a> Cell. 157 (3), 726-739 (2014).</li><li>Erturk, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+imaging+of+solvent-cleared+organs+using+3DISCO.">Three-dimensional imaging of solvent-cleared organs using 3DISCO.</a> Nature Protocols. 7 (11), 1983-1995 (2012).</li><li>Tainaka, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+Landscape+for+Tissue+Clearing+Based+on+Hydrophilic+Reagents.">Chemical Landscape for Tissue Clearing Based on Hydrophilic Reagents.</a> Cell Reports. 24 (8), 2196-2210 (2018).</li><li>Susaki, E. A., Ueda, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-body+and+whole-organ+clearing+and+imaging+techniques+with+single-cell+resolution:+toward+organism-level+systems+biology+in+mammals.">Whole-body and whole-organ clearing and imaging techniques with single-cell resolution: toward organism-level systems biology in mammals.</a> Cell Chemical Biology. 23 (1), 137-157 (2016).</li><li>Keller, P. J., Dodt, H. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light+sheet+microscopy+of+living+or+cleared+specimens.">Light sheet microscopy of living or cleared specimens.</a> Current Opinion in Neurobiology. 22 (1), 138-143 (2012).</li><li>Susaki, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advanced+CUBIC+protocols+for+whole-brain+and+whole-body+clearing+and+imaging.">Advanced CUBIC protocols for whole-brain and whole-body clearing and imaging.</a> Nature Protocols. 10 (11), 1709-1727 (2015).</li><li>Kubota, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-body+profiling+of+cancer+metastasis+with+single-cell+resolution.">Whole-body profiling of cancer metastasis with single-cell resolution.</a> Cell Reports. 20 (1), 236-250 (2017).</li><li>Hasegawa, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+three-dimensional+analysis+(CUBIC-kidney)+visualizes+abnormal+renal+sympathetic+nerves+after+ischemia/reperfusion+injury.">Comprehensive three-dimensional analysis (CUBIC-kidney) visualizes abnormal renal sympathetic nerves after ischemia/reperfusion injury.</a> Kidney International. 96 (1), 129-138 (2019).</li><li>Hasegawa, S., Inoue, T., Inagi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroimmune+interactions+and+kidney+disease.">Neuroimmune interactions and kidney disease.</a> Kidney Research and Clinical Practice. 38 (3), 282-294 (2019).</li><li>Hasegawa, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+oral+hypoxia-inducible+factor+prolyl+hydroxylase+inhibitor+enarodustat+counteracts+alterations+in+renal+energy+metabolism+in+the+early+stages+of+diabetic+kidney+disease.">The oral hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase inhibitor enarodustat counteracts alterations in renal energy metabolism in the early stages of diabetic kidney disease.</a> Kidney International. 97 (5), 934-950 (2020).</li><li>Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole+animal+perfusion+fixation+for+rodents.">Whole animal perfusion fixation for rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (65), e3564 (2012).</li><li>Hasegawa, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+sympathetic+signaling+in+macrophages+blocks+systemic+inflammation+and+protects+against+renal+ischemia-reperfusion+injury.">Activation of sympathetic signaling in macrophages blocks systemic inflammation and protects against renal ischemia-reperfusion injury.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 32 (7), 1599-1615 (2021).</li><li>Renier, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=iDISCO:+a+simple,+rapid+method+to+immunolabel+large+tissue+samples+for+volume+imaging.">iDISCO: a simple, rapid method to immunolabel large tissue samples for volume imaging.</a> Cell. 159 (4), 896-910 (2014).</li><li>Klingberg, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fully+automated+evaluation+of+total+glomerular+number+and+capillary+tuft+size+in+nephritic+kidneys+using+lightsheet+microscopy.">Fully automated evaluation of total glomerular number and capillary tuft size in nephritic kidneys using lightsheet microscopy.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 28 (2), 452-459 (2017).</li><li>Zhao, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+probing+of+intact+human+organs.">Cellular and molecular probing of intact human organs.</a> Cell. 180 (4), 796-812 (2020).</li><li>Susaki, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Versatile+whole-organ/body+staining+and+imaging+based+on+electrolyte-gel+properties+of+biological+tissues.">Versatile whole-organ/body staining and imaging based on electrolyte-gel properties of biological tissues.</a> Nature Communications. 11 (1), 1-22 (2020).</li></ol>

سمح البروتوكول الحالي بتصوير 3D للكلى بالكامل لهياكل مختلفة مثل الأعصاب الودية ، وجمع القنوات ، والشرايين ، والأنابيب القريبة ، والكبيبات9،10،11. قدمت طريقة التلوين هذه ملاحظة عيانية وأدت إلى اكتشافات بيولوجية جديدة ، من خلال تصور التغيير ...

تتكون الكلية من مجموعات خلايا مختلفة. على الرغم من أن علم الأمراض التقليدي يعطينا الكثير من المعلومات حول البيئة المكروية للكلى ، إلا أن هناك حاجة إلى التصوير ثلاثي الأبعاد (3D) لفهم الحديث المتبادل بين الخلايا بدقة أثناء تطور مرض الكلى. في الماضي ، كان هناك حاجة إلى إجراء عدد كبير من التقسيم التسلسلي وإعادة بناء الصورة لتصوير 3D للجهاز بالكامل1. ومع ذلك ، فإن هذه الطريقة تتطلب الكثير من الجهد ولديها مشاكل من حيث التكاثر.
المقاصة البصرية هي استراتيجية جيدة للتغلب على هذه العقبة 2,3. يرجع عتامة الأنسجة بشكل أساسي إلى تشتت الضوء وامتصاصه لأن كل عضو يتكون من مواد مختلفة ، بما في ذلك الماء والبروتين والدهون. وبالتالي ، فإن الاستراتيجية الأساسية لإزالة الأنسجة هي استبدال الماء والدهون في الأنسجة بكواشف مطابقة لمعامل الانكسار (RI) لها نفس الخصائص البصرية مثل البروتينات4. من أجل مراقبة عينة شفافة ، فإن الفحص المجهري الفلوري للورقة الضوئية مفيد5. تضيء صفائح الضوء العينة الشفافة من الجانب ، ويتم الحصول على إشارات الإثارة من خلال العدسة الموضوعية الموجودة في وضع رأسي6. يحصل هذا الفحص المجهري على معلومات المقطع العرضي في عملية مسح واحدة ، والتي تختلف عن الفحص المجهري الفلوري متحد البؤر أو متعدد الفوتونات. وبالتالي ، يمكنه الحصول بسرعة على صور z-stack بمستوى منخفض من التبييض الضوئي.
تعد كوكتيلات التصوير الواضحة وغير المعوقة للدماغ / الجسم والتحليل الحسابي (CUBIC) إحدى طرق إزالة الأنسجة التي تتيح تصوير الأعضاء بالكامل بواسطة الفحص المجهري الفلوريللصفائح الضوئية 2،7،8. تم تحسين تلطيخ CUBIC و Cycl-mount المناعي بالكامل في الدراسة الحالية لتصور هياكل 3D لكلية الفأر9،10،11. باستخدام طريقة التلوين الكاملة هذه ، يتم تصور التغيير في الأعصاب الودية الكلوية بعد إصابة نقص التروية 9،10 وتضخم الكبيبات في المرحلة المبكرة من مرض الكلى السكري11 ، وكذلك الأوعية الدموية والأنابيب القريبة والقنوات المجمعة في الكلى الكاملة9.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>14 mL Round Bottom High Clarity PP Test Tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352059</td>
			<td>Tissue clearing, staining, wash</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,3-dimethyl-1-phenyl-5-pyrazolone/antipyrine</td>
			<td>Tokyo Chemical Industry</td>
			<td>D1876</td>
			<td>CUBIC-R+</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>37%-Formaldehyde Solution</td>
			<td>Nacalai Tesque</td>
			<td>16223-55</td>
			<td>Post fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4%-Paraformaldehyde Phosphate Buffer Solution</td>
			<td>Nacalai Tesque</td>
			<td>09154-85</td>
			<td>Kidney fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Flour 555-conjugated donkey anti-sheep IgG antibody</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-21436</td>
			<td>Secondary antibody (1:100)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Flour 647-conjugated donkey anti-rabbit IgG antibody</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-31573</td>
			<td>Secondary antibody (1:200)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-aquaporin 2 (AQP2) antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab199975</td>
			<td>Primary antibody (1:100)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-podocin antibody</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P0372</td>
			<td>Primary antibody (1:100)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-sodium glucose cotransporter 2 (SGLT2) antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab85626</td>
			<td>Primary antibody (1:100)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-tyrosine hydroxylase (TH) antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab113</td>
			<td>Primary antibody (1:100)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-&#945;-smooth muscle actin (&#945;-SMA) antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab5694</td>
			<td>Primary antibody (1:200)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blocker Casein in PBS</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>37528</td>
			<td>Staining buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Butorphanol Tartrate</td>
			<td>Meiji</td>
			<td>005526</td>
			<td>Anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6NJcl</td>
			<td>Nippon Bio-Supp.Center</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Mouse strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaris</td>
			<td>Bitplane</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Imaging analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Macro-zoom microscope</td>
			<td>OLYMPUS</td>
			<td>MVX10</td>
			<td>The observation unit of the custom-built microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medetomidine Hydrochloride</td>
			<td>Kyoritsu-Seiyaku</td>
			<td>008656</td>
			<td>Anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam</td>
			<td>SANDOZ</td>
			<td>27803229</td>
			<td>Anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M8410</td>
			<td>Immersion oil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-buthyldiethanolamine</td>
			<td>Tokyo Chemical Industry</td>
			<td>B0725</td>
			<td>CUBIC-L, CUBIC-R+</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nicotinamide</td>
			<td>Tokyo Chemical Industry</td>
			<td>N0078</td>
			<td>CUBIC-R+</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyethylene glycol mono-p-isooctylphenyl ether/Triton X-100</td>
			<td>Nacalai Tesque</td>
			<td>12967-45</td>
			<td>CUBIC-L, PBST</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon oil HIVAC-F4</td>
			<td>Shin-Etsu Chemical</td>
			<td>50449832</td>
			<td>Immersion oil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium azide</td>
			<td>Wako</td>
			<td>195-11092</td>
			<td>Staining buffer</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

whole-kidney three-dimensional staining with cubic

على الرغم من أن علم الأمراض التقليدي قدم العديد من المعلومات حول البنية المجهرية للكلى ، إلا أنه كان من الصعب معرفة التركيب الدقيق للأوعية الدموية ، والأنابيب القريبة ، وقنوات التجميع ، والكبيبات ، والأعصاب الودية في الكلى بسبب نقص المعلومات ثلاثية الأبعاد (3D). المقاصة البصرية هي استراتيجية جيدة للتغلب على هذه العقبة الكبيرة. يمكن تحليل خلايا متعددة في عضو كامل بدقة خلية واحدة من خلال الجمع بين إزالة الأنسجة وتقنية التصوير 3D. ومع ذلك ، لا تزال طرق وضع العلامات الخلوية لتصوير الأعضاء بأكملها متخلفة. على وجه الخصوص ، يمثل تلطيخ الأعضاء بالكامل تحديا بسبب صعوبة اختراق الأجسام المضادة. طور البروتوكول الحالي تلطيخ كلى فأر كامل التركيب للتصوير 3D باستخدام طريقة إزالة الأنسجة CUBIC (كوكتيلات تصوير الدماغ / الجسم الواضحة دون عائق والتحليل الحسابي). وقد مكن البروتوكول من تصور إزالة التعصيب الكلوي الودي بعد إصابة نقص التروية وتضخم الكبيبات في المرحلة المبكرة من مرض الكلى السكري من وجهة نظر شاملة. وبالتالي ، يمكن أن تؤدي هذه التقنية إلى اكتشافات جديدة في أبحاث الكلى من خلال توفير منظور عياني.

باستخدام طريقة التلوين هذه ، تم تصور الأعصاب الودية [الجسم المضاد لهيدروكسيلاز التيروزين (TH)] والشرايين [الجسم المضاد للأكتين العضلي α الملساء (αSMA)] في كلية كاملة (الشكل 4 أ ، ب والفيديو 1)9. كما تم تصوير الأعصاب الكلوية الودية غير الطبيعية بعد إ...

Watch this Scientific Journal Video about Whole-Kidney Three-Dimensional Staining with CUBIC at JoVE.com

Whole-Kidney Three-Dimensional Staining with CUBIC

يصف البروتوكول الحالي طريقة إزالة الأنسجة وتلطيخ الفلورسنت المناعي بالكامل لتصوير الكلى ثلاثي الأبعاد (3D). يمكن أن تقدم هذه التقنية وجهات نظر عيانية في أمراض الكلى ، مما يؤدي إلى اكتشافات بيولوجية جديدة.

تلطيخ ثلاثي الأبعاد للكلى بالكامل مع CUBIC

Although conventional pathology provided numerous information about kidney microstructure, it was difficult to know the precise structure of blood ...

يسمح هذا البروتوكول بتصور الهياكل ثلاثية الأبعاد في الكلى الكاملة ، والتي يمكن أن تؤدي إلى اكتشافات مبتكرة في أبحاث الكلى من خلال توفير منظور عياني. يعد تلطيخ الأعضاء بالكامل أمرا صعبا بسبب صعوبة اختراق الأجسام المضادة. أظهر هذا البروتوكول تلطيخ الكلى بالكامل بالأجسام المضادة.للبدء ، قم بإجراء تثبيت الغمر مباشرة بعد تثبيت التروية وأخذ عينات الكلى ، عن طريق غمر الكلى في 4٪ بارافورمالدهيد عند أربع درجات مئوية لمدة 16 ساعة. أعط ثلاث غسلات باستخدام PBS لمدة ساعتين لكل منهما. قم بإجراء عملية إزالة اللون وإزالة الدهون عن طريق غمر الكلى الثابتة في سبعة ملليمترات من 50٪ CUBIC-L في أنبوب دائري القاع سعة 14 ملليلتر ، مع اهتزاز لطيف في درجة حرارة الغرفة.بعد ست ساعات ، اغمر الكلى في سبعة ملليلتر من CUBIC-L في أنبوب دائري القاع 14 ملم ، مع اهتزاز لطيف عند 37 درجة مئوية لمدة خمسة أيام. قم بتحديث CUBIC-L كل يوم. بمجرد اكتمال إزالة اللون وإزالة الدهون ، استخدم ملعقة توزيع للتعامل مع العينات واغسل الكلى ثلاث مرات باستخدام PBS في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين.Immunostain الكلى delipidated في الأجسام المضادة الأولية المخففة في محلول عازلة تلطيخ ، مع اهتزاز لطيف في شاكر حاضنة عند 37 درجة مئوية لمدة سبعة أيام. بعد ذلك ، اغسل الكلى باستخدام 0.5٪ Triton X-100 في PBS ، المعروف أيضا باسم PBST ، في درجة حرارة الغرفة ليوم واحد. بالنسبة لتلطيخ الأجسام المضادة الثانوية ، عالج الكلى بأجسام مضادة ثانوية في المخزن المؤقت للتلطيخ ، في الظلام ، مع اهتزاز لطيف عند 37 درجة مئوية لمدة سبعة أيام.إصلاح تلطيخ مع غسل PBST في درجة حرارة الغرفة ليوم واحد. بعد التثبيت ، اغمر الكلى في 1٪ فورمالديهايد في PB لمدة ثلاث ساعات ، واغسلها باستخدام PBS في درجة حرارة الغرفة لمدة ست ساعات. قم بإجراء مطابقة معامل الانكسار عن طريق غمر الكلى في سبعة ملليلتر من 50٪ CUBIC-R + في أنبوب دائري القاع سعة 14 ملليلتر مع الاهتزاز لمدة يوم واحد ، يليه العلاج بسبعة ملليلتر من CUBIC-R + مع الاهتزاز في درجة حرارة الغرفة لمدة يومين.بمساعدة طريقة تلطيخ المناعة ، تم تصور الأعصاب والشرايين المتعاطفة في الكلى بأكملها في تصوير الكلى 3D. علاوة على ذلك ، تم تصوير الأعصاب الكلوية المتعاطفة غير الطبيعية بعد إصابة نقص التروية. سهل هذا البروتوكول أيضا تصور الأعصاب الودية في الطحال بأكمله.يتم عرض عملية القياس الكمي للبيانات للتلطيخ المناعي ثلاثي الأبعاد هنا. بالإضافة إلى ذلك ، تم تصور قنوات التجميع ، والجزء S1 من الأنابيب القريبة ، والكبيبات بنجاح في كلية كاملة. كما تم تصور تضخم الكبيبات المكبوت ، الناتج عن إعطاء الدواء في المراحل المبكرة من مرض الكلى السكري ، في التصوير 3D.يمكن لهذا البروتوكول تسمية جزيء معين داخل كلية بأكملها. وبالتالي ، يمكن للباحثين تحليل تغيير البنية في الأوعية الدموية أو العثور على أحداث نادرة في أنسجة الكلى.

Research

JoVE Journal

Medicine

Three-dimensional Imaging of Nociceptive Intraepidermal Nerve Fibers in Human Skin Biopsies

التصوير ثلاثي الأبعاد من مسبب الألياف العصبية داخل البشرة في خزعات الجلد البشري

A punch biopsy of the skin is commonly used to quantify intraepidermal nerve fiber densities (IENFD) for the diagnosis of peripheral polyneuropathy 1,2. ...

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional (3D) Model

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional 3D Model

الكمي لسرطان الثدي الغزو خلية باستخدام ثلاثي الأبعاد (3D) نموذج

It is now well known that the cellular and tissue microenvironment are critical regulators influencing tumor initiation and progression. Moreover, the ...

Three-dimensional Co-culture Model for Tumor-stromal Interaction

ثلاثي الأبعاد نموذج المشارك الثقافة ل-ورم انسجة التفاعل

Cancer progression (initiation, growth, invasion and metastasis) occurs through interactions between malignant cells and the surrounding tumor stromal ...

Three-Dimensional (3D) Tumor Spheroid Invasion Assay

Three-Dimensional 3D Tumor Spheroid Invasion Assay

ثلاثي الأبعاد (3D) ورم الجسم الشبه الكروي الغزو الفحص

Invasion of surrounding normal tissues is generally considered to be a key hallmark of malignant (as opposed to benign) tumors. For some cancers in ...

Three-dimensional Alginate-bead Culture of Human Pituitary Adenoma Cells

ثلاثي الأبعاد الثقافة الجيني حبة من خلايا الإنسان ورم الغدة النخامية

A three-dimensional culture method is described in which primary pituitary adenoma cells are grown in alginate beads. Alginate is a polymer derived from ...

Three-Dimensional Printing of a Complex Aortic Anomaly

الطباعة ثلاثية الأبعاد ليمثل شذوذاً الابهري المعقدة

Complex congenital aortic anomalies include diverse types of malformations that may be clinically asymptomatic or present with respiratory or esophageal ...

Estimation of Nephron Number in Whole Kidney using the Acid Maceration Method

تقدير عدد النيفرون في الكلي الكامل باستخدام طريقه النقع الحمضي

Nephron endowment refers to the total number of nephrons an individual is born with, as nephrogenesis in humans is completed by 36 weeks of gestation and ...

Three-Dimensional Printing Guide Template Assisted Percutaneous Vertebroplasty (PVP)

Three-Dimensional Printing Guide Template Assisted Percutaneous Vertebroplasty PVP

قالب دليل الطباعة ثلاثي الابعاد بمساعده راب الفقرات الجلدية (PVP)

Percutaneous vertebroplasty (PVP) is considered an effective treatment for the back pain caused by osteoporotic vertebral compression fracture. The ...

Three-Dimensional Collagen Matrix Scaffold Implantation as a Liver Regeneration Strategy

ثلاثي الأبعاد الكولاجين مصفوفة زرع سقالة كاستراتيجية تجديد الكبد

Liver diseases are the leading cause of death worldwide. Excessive alcohol consumption, a high-fat diet, and hepatitis C virus infection promote fibrosis, ...

Guided Endodontics: Three-Dimensional Planning and Template-Aided Preparation of Endodontic Access Cavities

علاج جذور الأسنان الموجه: التخطيط ثلاثي الأبعاد والتحضير بمساعدة القالب لتجاويف الوصول اللبية

Pulp canal obliterations (PCO) are often a consequence of dental trauma, such as luxation injuries. Even though dentin apposition is a sign of vital pulp, ...