Name: whole-kidney three-dimensional staining with cubic
Uploaded: 2022-07-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Whole-Kidney Three-Dimensional Staining with CUBIC at JoVE.com

Bu çalışmanın bir kısmı Prof. Hiroki R. Ueda (Tokyo Üniversitesi), Prof. Etsuo A. Susaki (Juntendo Üniversitesi), Prof. Tetsuhiro Tanaka (Tohoku Üniversitesi), Prof. Masafumi Fukagawa, Dr. Takehiko Wada ve Dr. Hirotaka Komaba (Tokai Üniversitesi) ile işbirliği içinde yürütülmüştür.

Tüm deneyler Tokyo Üniversitesi Kurumsal İnceleme Kurulu tarafından onaylandı. Tüm hayvan prosedürleri Ulusal Sağlık Enstitüleri kılavuzlarına göre gerçekleştirildi. Bu çalışmada 8 haftalık erkek C57BL/6NJcl fareler kullanıldı. Fareler ticari kaynaklardan elde edilmiştir (bakınız Malzeme Tablosu).
1. Hayvan hazırlığı ve böbrek fiksasyonu
<ol><li>Aşağıdaki adımları izleyerek perfüzyon fiksasyonu gerçekleştirin.<ol><li>İzo...

<ol>
	<li>Velez-Fort, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+stimulus+selectivity+and+connectivity+of+layer+six+principal+cells+reveals+cortical+microcircuits+underlying+visual+processing.">The stimulus selectivity and connectivity of layer six principal cells reveals cortical microcircuits underlying visual processing.</a> Neuron. 83 (6), 1431-1443 (2014).</li><li>Susaki, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-brain+imaging+with+single-cell+resolution+using+chemical+cocktails+and+computational+analysis.">Whole-brain imaging with single-cell resolution using chemical cocktails and computational analysis.</a> Cell. 157 (3), 726-739 (2014).</li><li>Erturk, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+imaging+of+solvent-cleared+organs+using+3DISCO.">Three-dimensional imaging of solvent-cleared organs using 3DISCO.</a> Nature Protocols. 7 (11), 1983-1995 (2012).</li><li>Tainaka, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+Landscape+for+Tissue+Clearing+Based+on+Hydrophilic+Reagents.">Chemical Landscape for Tissue Clearing Based on Hydrophilic Reagents.</a> Cell Reports. 24 (8), 2196-2210 (2018).</li><li>Susaki, E. A., Ueda, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-body+and+whole-organ+clearing+and+imaging+techniques+with+single-cell+resolution:+toward+organism-level+systems+biology+in+mammals.">Whole-body and whole-organ clearing and imaging techniques with single-cell resolution: toward organism-level systems biology in mammals.</a> Cell Chemical Biology. 23 (1), 137-157 (2016).</li><li>Keller, P. J., Dodt, H. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light+sheet+microscopy+of+living+or+cleared+specimens.">Light sheet microscopy of living or cleared specimens.</a> Current Opinion in Neurobiology. 22 (1), 138-143 (2012).</li><li>Susaki, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advanced+CUBIC+protocols+for+whole-brain+and+whole-body+clearing+and+imaging.">Advanced CUBIC protocols for whole-brain and whole-body clearing and imaging.</a> Nature Protocols. 10 (11), 1709-1727 (2015).</li><li>Kubota, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-body+profiling+of+cancer+metastasis+with+single-cell+resolution.">Whole-body profiling of cancer metastasis with single-cell resolution.</a> Cell Reports. 20 (1), 236-250 (2017).</li><li>Hasegawa, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+three-dimensional+analysis+(CUBIC-kidney)+visualizes+abnormal+renal+sympathetic+nerves+after+ischemia/reperfusion+injury.">Comprehensive three-dimensional analysis (CUBIC-kidney) visualizes abnormal renal sympathetic nerves after ischemia/reperfusion injury.</a> Kidney International. 96 (1), 129-138 (2019).</li><li>Hasegawa, S., Inoue, T., Inagi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroimmune+interactions+and+kidney+disease.">Neuroimmune interactions and kidney disease.</a> Kidney Research and Clinical Practice. 38 (3), 282-294 (2019).</li><li>Hasegawa, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+oral+hypoxia-inducible+factor+prolyl+hydroxylase+inhibitor+enarodustat+counteracts+alterations+in+renal+energy+metabolism+in+the+early+stages+of+diabetic+kidney+disease.">The oral hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase inhibitor enarodustat counteracts alterations in renal energy metabolism in the early stages of diabetic kidney disease.</a> Kidney International. 97 (5), 934-950 (2020).</li><li>Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole+animal+perfusion+fixation+for+rodents.">Whole animal perfusion fixation for rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (65), e3564 (2012).</li><li>Hasegawa, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+sympathetic+signaling+in+macrophages+blocks+systemic+inflammation+and+protects+against+renal+ischemia-reperfusion+injury.">Activation of sympathetic signaling in macrophages blocks systemic inflammation and protects against renal ischemia-reperfusion injury.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 32 (7), 1599-1615 (2021).</li><li>Renier, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=iDISCO:+a+simple,+rapid+method+to+immunolabel+large+tissue+samples+for+volume+imaging.">iDISCO: a simple, rapid method to immunolabel large tissue samples for volume imaging.</a> Cell. 159 (4), 896-910 (2014).</li><li>Klingberg, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fully+automated+evaluation+of+total+glomerular+number+and+capillary+tuft+size+in+nephritic+kidneys+using+lightsheet+microscopy.">Fully automated evaluation of total glomerular number and capillary tuft size in nephritic kidneys using lightsheet microscopy.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 28 (2), 452-459 (2017).</li><li>Zhao, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+probing+of+intact+human+organs.">Cellular and molecular probing of intact human organs.</a> Cell. 180 (4), 796-812 (2020).</li><li>Susaki, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Versatile+whole-organ/body+staining+and+imaging+based+on+electrolyte-gel+properties+of+biological+tissues.">Versatile whole-organ/body staining and imaging based on electrolyte-gel properties of biological tissues.</a> Nature Communications. 11 (1), 1-22 (2020).</li></ol>

Mevcut protokol, sempatik sinirler, toplama kanalları, arterler, proksimal tübüller ve glomerüller 9,10,11 gibi çeşitli yapıların tüm böbrek 3D görüntülenmesine izin verdi. Bu boyama yöntemi, iskemi-reperfüzyon hasarı 9,10 ve diyabetik böbrek hastalığının ilk aşamasında glomerülomegali sonrası renal sempatik sinirlerdeki değişimi görselleştirerek makroskopik gözlem...

Böbrek çeşitli hücre popülasyonlarından oluşur. Konvansiyonel patoloji bize böbrek mikroçevresi hakkında çok fazla bilgi vermesine rağmen, böbrek hastalığı progresyonu sırasında hücreler arası çapraz konuşmayı tam olarak anlamak için üç boyutlu (3D) görüntülemeye ihtiyaç vardır. Geçmişte, tüm organ 3D görüntüleme1 için çok sayıda seri kesitleme ve görüntü rekonstrüksiyonu yapılması gerekiyordu. Ancak bu yöntem çok fazla çaba gerektiriyordu ve tekrarlanabilirlik açısından sorunlar yaşıyordu.
Optik temizleme, bu engelin üstesinden gelmek için iyi bir stratejidir 2,3. Doku opaklığı esas olarak ışık saçılması ve emiliminden kaynaklanır, çünkü her organ su, protein ve lipitler dahil olmak üzere çeşitli maddelerden oluşur. Bu nedenle, doku temizlemenin temel stratejisi, dokulardaki su ve lipitleri, proteinlerle aynı optik özelliklere sahip kırılma indisi (RI) eşleşen reaktiflerle değiştirmektir4. Şeffaf bir örneği gözlemlemek için, hafif bir tabaka floresan mikroskobu yararlıdır5. Işık tabakaları şeffaf numuneyi yandan aydınlatır ve uyarma sinyalleri dikey konumda bulunan objektif lens aracılığıyla elde edilir6. Bu mikroskopi, konfokal veya multifoton floresan mikroskopisinden farklı olan tek bir taramada kesit bilgisi elde eder. Böylece, düşük fotobeyazlatma seviyesine sahip z-stack görüntülerini hızlı bir şekilde elde edebilir.
Net, Engelsiz Beyin/Vücut Görüntüleme Kokteylleri ve Hesaplamalı Analiz (CUBIC), ışık tabakası floresan mikroskobuile tüm organların görüntülenmesini sağlayan doku temizleme yöntemlerinden biridir 2,7,8. KÜBİK ve tam montajlı immünofloresan boyama, fare böbrek 3D yapılarını görselleştirmek için bu çalışmada optimize edilmiştir 9,10,11. Bu bütünsel boyama yöntemini kullanarak, böbrek sempatik sinirlerindeki değişiklik, diyabetikböbrek hastalığı 11'in erken evresinde iskemi-reperfüzyon hasarı 9,10 ve glomerülomegaliden sonra, ayrıca kan damarları, proksimal tübüller ve bütün bir böbrekte toplama kanalları9 olarak görselleştirilir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>14 mL Round Bottom High Clarity PP Test Tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352059</td>
			<td>Tissue clearing, staining, wash</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,3-dimethyl-1-phenyl-5-pyrazolone/antipyrine</td>
			<td>Tokyo Chemical Industry</td>
			<td>D1876</td>
			<td>CUBIC-R+</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>37%-Formaldehyde Solution</td>
			<td>Nacalai Tesque</td>
			<td>16223-55</td>
			<td>Post fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4%-Paraformaldehyde Phosphate Buffer Solution</td>
			<td>Nacalai Tesque</td>
			<td>09154-85</td>
			<td>Kidney fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Flour 555-conjugated donkey anti-sheep IgG antibody</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-21436</td>
			<td>Secondary antibody (1:100)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Flour 647-conjugated donkey anti-rabbit IgG antibody</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-31573</td>
			<td>Secondary antibody (1:200)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-aquaporin 2 (AQP2) antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab199975</td>
			<td>Primary antibody (1:100)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-podocin antibody</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P0372</td>
			<td>Primary antibody (1:100)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-sodium glucose cotransporter 2 (SGLT2) antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab85626</td>
			<td>Primary antibody (1:100)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-tyrosine hydroxylase (TH) antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab113</td>
			<td>Primary antibody (1:100)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-&#945;-smooth muscle actin (&#945;-SMA) antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab5694</td>
			<td>Primary antibody (1:200)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blocker Casein in PBS</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>37528</td>
			<td>Staining buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Butorphanol Tartrate</td>
			<td>Meiji</td>
			<td>005526</td>
			<td>Anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6NJcl</td>
			<td>Nippon Bio-Supp.Center</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Mouse strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaris</td>
			<td>Bitplane</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Imaging analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Macro-zoom microscope</td>
			<td>OLYMPUS</td>
			<td>MVX10</td>
			<td>The observation unit of the custom-built microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medetomidine Hydrochloride</td>
			<td>Kyoritsu-Seiyaku</td>
			<td>008656</td>
			<td>Anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam</td>
			<td>SANDOZ</td>
			<td>27803229</td>
			<td>Anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M8410</td>
			<td>Immersion oil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-buthyldiethanolamine</td>
			<td>Tokyo Chemical Industry</td>
			<td>B0725</td>
			<td>CUBIC-L, CUBIC-R+</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nicotinamide</td>
			<td>Tokyo Chemical Industry</td>
			<td>N0078</td>
			<td>CUBIC-R+</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyethylene glycol mono-p-isooctylphenyl ether/Triton X-100</td>
			<td>Nacalai Tesque</td>
			<td>12967-45</td>
			<td>CUBIC-L, PBST</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon oil HIVAC-F4</td>
			<td>Shin-Etsu Chemical</td>
			<td>50449832</td>
			<td>Immersion oil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium azide</td>
			<td>Wako</td>
			<td>195-11092</td>
			<td>Staining buffer</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

whole-kidney three-dimensional staining with cubic

Konvansiyonel patoloji böbrek mikroyapısı hakkında çok sayıda bilgi vermesine rağmen, üç boyutlu (3D) bilgi eksikliği nedeniyle böbrekteki kan damarlarının, proksimal tübüllerin, toplama kanallarının, glomerüllerin ve sempatik sinirlerin kesin yapısını bilmek zordu. Optik temizleme, bu büyük engelin üstesinden gelmek için iyi bir stratejidir. Bütün bir organdaki çoklu hücreler, doku temizleme ve 3D görüntüleme tekniği birleştirilerek tek hücre çözünürlüğünde analiz edilebilir. Bununla birlikte, tüm organ görüntüleme için hücre etiketleme yöntemleri az gelişmiş kalmaktadır. Özellikle, antikor penetrasyonundaki zorluk nedeniyle tüm organ boyama zordur. Mevcut protokol, CUBIC (Clear, Unobstructed Brain/Body Imaging Cocktails and Computational analysis) doku temizleme yöntemi ile 3D görüntüleme için tam montajlı bir fare böbrek boyama geliştirdi. Protokol, iskemi-reperfüzyon hasarı sonrası renal sempatik denervasyonun ve diyabetik böbrek hastalığının erken evresinde glomerülomegalinin kapsamlı bir bakış açısıyla görselleştirilmesini sağlamıştır. Böylece, bu teknik makroskopik bir bakış açısı sağlayarak böbrek araştırmalarında yeni keşiflere yol açabilir.

Bu boyama yöntemi kullanılarak bütün böbrekte sempatik sinirler [anti-tirozin hidroksilaz (TH) antikoru] ve arterler [anti-α-düz kas aktin (αSMA) antikoru] (Şekil 4A,B ve Video 1) görselleştirildi9. İskemi/reperfüzyon hasarı (IRI)9,10 sonrası anormal renal sempatik sinirler de görüntülendi (Şekil 4C). Ayrıca, tüm dalak<sup cla...

Watch this Scientific Journal Video about Whole-Kidney Three-Dimensional Staining with CUBIC at JoVE.com

Whole-Kidney Three-Dimensional Staining with CUBIC

Mevcut protokol, üç boyutlu (3D) böbrek görüntüleme için bir doku temizleme yöntemi ve tam montajlı immünofloresan boyama yöntemini tanımlamaktadır. Bu teknik, böbrek patolojisinde makroskopik perspektifler sunarak yeni biyolojik keşiflere yol açabilir.

KÜBİK ile Tüm Böbrek Üç Boyutlu Boyama

Although conventional pathology provided numerous information about kidney microstructure, it was difficult to know the precise structure of blood ...

Bu protokol, tam böbrekte üç boyutlu yapıların görselleştirilmesine izin verir, bu da makroskopik bir bakış açısı sağlayarak böbrek araştırmalarında yenilikçi keşiflere yol açabilir. Tüm organ boyama işlemi, antikor penetrasyonundaki zorluk nedeniyle zordur. Bu protokol, böbreklerin antikorlar tarafından yüksek kaliteli, tam montajlı boyanmasını göstermiştir.Başlamak için, perfüzyon fiksasyonu ve böbrek örneklemesinden hemen sonra, böbreği 16 saat boyunca dört santigrat derecede% 4 paraformaldehit içine batırarak daldırma fiksasyonunu gerçekleştirin. PBS kullanarak her biri iki saat boyunca üç yıkama yapın. Sabit böbreği, oda sıcaklığında hafifçe sallanarak, 14 mililitrelik yuvarlak tabanlı bir tüpe yedi milimetre% 50 CUBIC-L'ye batırarak renk giderme ve delipidasyon işlemini gerçekleştirin.Altı saat sonra, böbreği 14 milimetrelik yuvarlak tabanlı bir tüpe yedi mililitre CUBIC-L'ye batırın ve beş gün boyunca 37 santigrat derecede hafifçe sallayın. CUBIC-L'yi her gün yenileyin. Renk giderme ve delipidasyon tamamlandıktan sonra, numune işleme için bir dağıtım kaşığı kullanın ve böbreği iki saat boyunca oda sıcaklığında PBS ile üç kez yıkayın.Boyama tampon çözeltisinde seyreltilmiş birincil antikorlarda delipide olmuş böbreği immünoboyar, yedi gün boyunca 37 santigrat derecede bir inkübatör çalkalayıcısında hafifçe sallanır. Daha sonra, böbreği% 0.5Triton X-100 ile PBS'de, PBST olarak da bilinir, bir gün boyunca oda sıcaklığında yıkayın. İkincil antikorların boyanması için, böbreği boyama tamponunda, karanlıkta, yedi gün boyunca 37 santigrat derecede hafifçe sallayarak ikincil antikorlarla tedavi edin.Lekelenmeyi bir gün boyunca oda sıcaklığında PBST yıkama ile sabitleyin. Fiksasyon sonrası, böbreği üç saat boyunca PB'de% 1 formaldehit içine batırın ve altı saat boyunca oda sıcaklığında PBS ile yıkayın. Böbreği% 50 CUBIC-R + 'nın yedi mililitrelik bir yuvarlak alt tüpüne bir gün boyunca sallayarak batırarak kırılma indisi eşleşmesini gerçekleştirin, ardından iki gün boyunca oda sıcaklığında sallanarak yedi mililitre CUBIC-R + ile tedavi edin.İmmün boyama yöntemi yardımıyla bütün böbrekteki sempatik sinirler ve arterler 3D böbrek görüntülemede görselleştirildi. Ayrıca iskemi-reperfüzyon hasarı sonrası anormal renal sempatik sinirler görüntülendi. Bu protokol aynı zamanda tüm dalaktaki sempatik sinirlerin görselleştirilmesini kolaylaştırdı.Üç boyutlu immünofloresan boyama için veri niceleme işlemi burada gösterilmektedir. Ek olarak, toplama kanalları, proksimal tübüllerin S1 segmenti ve glomerüller bütün bir böbrekte başarıyla görselleştirildi. Diyabetik böbrek hastalığının erken evrelerinde ilaç uygulamasından kaynaklanan baskılanmış glomerülomegali, 3D görüntülemede de görselleştirildi.Bu protokol, tüm böbrek içindeki spesifik molekülü etiketleyebilir. Böylece, araştırmacılar vaskülatüründeki yapı değişikliğini analiz edebilir veya böbrek dokularında nadir olaylar bulabilirler.

Research

JoVE Journal

Medicine

Three-dimensional Imaging of Nociceptive Intraepidermal Nerve Fibers in Human Skin Biopsies

İnsan Cilt Biyopsiler içinde Nosiseptif İntraepidermal Sinir Elyaf üç boyutlu görüntüleme

A punch biopsy of the skin is commonly used to quantify intraepidermal nerve fiber densities (IENFD) for the diagnosis of peripheral polyneuropathy 1,2. ...

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional (3D) Model

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional 3D Model

Üç boyutlu (3D) Modeli Kullanılarak Meme Kanseri Hücre invazivliğinin Kantitasyonu

It is now well known that the cellular and tissue microenvironment are critical regulators influencing tumor initiation and progression. Moreover, the ...

Three-dimensional Co-culture Model for Tumor-stromal Interaction

Tümör-stromal Etkileşim için üç boyutlu Co-kültür Modeli

Cancer progression (initiation, growth, invasion and metastasis) occurs through interactions between malignant cells and the surrounding tumor stromal ...

Three-Dimensional (3D) Tumor Spheroid Invasion Assay

Three-Dimensional 3D Tumor Spheroid Invasion Assay

Üç boyutlu (3D) Tümör Sfero Yayılması deneyindeki

Invasion of surrounding normal tissues is generally considered to be a key hallmark of malignant (as opposed to benign) tumors. For some cancers in ...

Three-dimensional Alginate-bead Culture of Human Pituitary Adenoma Cells

İnsan Hipofiz Adenom Hücreleri üç boyutlu Aljinat-boncuk Kültür

A three-dimensional culture method is described in which primary pituitary adenoma cells are grown in alginate beads. Alginate is a polymer derived from ...

Three-Dimensional Printing of a Complex Aortic Anomaly

Karmaşık bir aort anomali üç boyutlu baskı

Complex congenital aortic anomalies include diverse types of malformations that may be clinically asymptomatic or present with respiratory or esophageal ...

Estimation of Nephron Number in Whole Kidney using the Acid Maceration Method

Asit maserasyon yöntemini kullanarak tüm böbrek netron numarasının tahmini

Nephron endowment refers to the total number of nephrons an individual is born with, as nephrogenesis in humans is completed by 36 weeks of gestation and ...

Three-Dimensional Printing Guide Template Assisted Percutaneous Vertebroplasty (PVP)

Three-Dimensional Printing Guide Template Assisted Percutaneous Vertebroplasty PVP

Üç Boyutlu Baskı Kılavuzu Şablon Destekli Perkütan Vertebroplasti (PVP)

Percutaneous vertebroplasty (PVP) is considered an effective treatment for the back pain caused by osteoporotic vertebral compression fracture. The ...

Three-Dimensional Collagen Matrix Scaffold Implantation as a Liver Regeneration Strategy

Karaciğer Rejenerasyon Stratejisi Olarak Üç Boyutlu Kollajen Matris İskele İmplantasyonu

Liver diseases are the leading cause of death worldwide. Excessive alcohol consumption, a high-fat diet, and hepatitis C virus infection promote fibrosis, ...

Guided Endodontics: Three-Dimensional Planning and Template-Aided Preparation of Endodontic Access Cavities

Rehberli Endodonti: Üç Boyutlu Planlama ve Endodontik Erişim Boşluklarının Şablon Destekli Hazırlanması

Pulp canal obliterations (PCO) are often a consequence of dental trauma, such as luxation injuries. Even though dentin apposition is a sign of vital pulp, ...