Name: facilitating cerebral organoid culture via lateral soft light illumination
Uploaded: 2022-06-06T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Facilitating Cerebral Organoid Culture via Lateral Soft Light Illumination at JoVE.com

تم دعم هذه الدراسة من قبل مؤسسة العلوم الطبيعية في مقاطعة قوانغدونغ (رقم المنحة 2020A0505100062) ، ومشروع الموضوعات الرئيسية للعلوم والتكنولوجيا في مدينة قوانغتشو (المنحة رقم 201904020025) ، والمؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم المنحة 31872800 ، 32070582 ، 82101937) ، ومشروع منحة أبحاث ما بعد الدكتوراه في مدينة قوانغتشو (إلى بانغتشو تشن).

وقد أجري البروتوكول عقب إعلان هلسنكي. تم منح الموافقة من قبل لجنة الأخلاقيات للمستشفى الثالث التابع لجامعة قوانغتشو الطبية (المراجعة الطبية والأخلاقية [2021] رقم 022). قبل التجربة، تم إعداد كل وسيط وفقا لصيغة يورغن أ. كنوبليش12 (الجداول التكميلية 1-4)، أو تم استخدام مجموعة ?...

<ol>
	<li>Jensen, C., Teng, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+it+time+to+start+transitioning+from+2D+to+3D+cell+culture.">Is it time to start transitioning from 2D to 3D cell culture.</a> Frontiers in Molecular Biosciences. 7 (33), (2020).</li><li>Quadrato, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+diversity+and+network+dynamics+in+photosensitive+human+brain+organoids.">Cell diversity and network dynamics in photosensitive human brain organoids.</a> Nature. 545 (7652), 48-53 (2017).</li><li>Lancaster, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+organoids+model+human+brain+development+and+microcephaly.">Cerebral organoids model human brain development and microcephaly.</a> Nature. 501 (7467), 373-379 (2013).</li><li>Qian, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=et+al.Brain-region-specific+organoids+using+mini-bioreactors+for+modeling+ZIKV+exposure.">et al.Brain-region-specific organoids using mini-bioreactors for modeling ZIKV exposure.</a> Cell. 165 (5), 1238-1254 (2016).</li><li>Hu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+cancer+organoids+analyzed+on+microwell+arrays+predict+drug+responses+of+patients+within+a+week.">Lung cancer organoids analyzed on microwell arrays predict drug responses of patients within a week.</a> Nature Communications. 12 (1), 2581 (2021).</li><li>Jung, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+one-stop+microfluidic-based+lung+cancer+organoid+culture+platform+for+testing+drug+sensitivity.">A one-stop microfluidic-based lung cancer organoid culture platform for testing drug sensitivity.</a> Lab on a Chip. 19 (17), 2854-2865 (2019).</li><li>Jalili-Firoozinezhad, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+complex+human+gut+microbiome+cultured+in+an+anaerobic+intestine-on-a-chip.">A complex human gut microbiome cultured in an anaerobic intestine-on-a-chip.</a> Nature Biomedical Engineering. 3 (7), 520-531 (2019).</li><li>Gkatzis, K., Taghizadeh, S., Huh, D., Stainier, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+three-dimensional+organoids+and+lung-on-a-chip+methods+to+study+lung+development,+regeneration+and+disease.">Use of three-dimensional organoids and lung-on-a-chip methods to study lung development, regeneration and disease.</a> The European Respiratory Journal. 52 (5), 1800876 (2018).</li><li>Ye, Y., Pui, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+nanoparticles+suspended+in+a+light+scattering+medium.">Detection of nanoparticles suspended in a light scattering medium.</a> Scientific Reports. 11 (1), 20268 (2021).</li><li>Staven, V., Waaseth, M., Wang, S., Gr&#248;nlie, I., Tho, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utilization+of+the+tyndall+effect+for+enhanced+visual+detection+of+particles+in+compatibility+testing+of+intravenous+fluids:+Validity+and+reliability.">Utilization of the tyndall effect for enhanced visual detection of particles in compatibility testing of intravenous fluids: Validity and reliability.</a> PDA Journal of Pharmaceutical Science and Technology. 69 (2), 270-283 (2015).</li><li>Fukuma, Y., Inui, T., Imashiro, C., Kurashina, Y., Takemura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homogenization+of+initial+cell+distribution+by+secondary+flow+of+medium+improves+cell+culture+efficiency.">Homogenization of initial cell distribution by secondary flow of medium improves cell culture efficiency.</a> PloS One. 15 (7), 0235827 (2020).</li><li>Lancaster, M. A., Knoblich, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+cerebral+organoids+from+human+pluripotent+stem+cells.">Generation of cerebral organoids from human pluripotent stem cells.</a> Nature Protocols. 9 (10), 2329-2340 (2014).</li><li>Ouyang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CRISPR/Cas9-targeted+deletion+of+polyglutamine+in+spinocerebellar+ataxia+type+3-derived+induced+pluripotent+stem+cells.">CRISPR/Cas9-targeted deletion of polyglutamine in spinocerebellar ataxia type 3-derived induced pluripotent stem cells.</a> Stem Cells and Development. 27 (11), 756-770 (2018).</li><li>Xian, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+safety+and+effectiveness+of+genetically+corrected+iPSCs+derived+from+&#946;-thalassaemia+patients+in+nonmyeloablative+&#946;-thalassaemic+mice.">The safety and effectiveness of genetically corrected iPSCs derived from &#946;-thalassaemia patients in nonmyeloablative &#946;-thalassaemic mice.</a> Stem Cell Research and Therapy. 11 (1), 288 (2020).</li><li>Kanof, M. E., Smith, P. D., Zola, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+whole+mononuclear+cells+from+peripheral+blood+and+cord+blood.">Isolation of whole mononuclear cells from peripheral blood and cord blood.</a> Current Protocols in Immunology. , (2001).</li><li>Knight, G. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+induction+of+singular+neural+rosette+emergence+within+hPSC-derived+tissues.">Engineering induction of singular neural rosette emergence within hPSC-derived tissues.</a> eLife. 7, 37549 (2018).</li><li>Rieder, H. L., Smithwick, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RPM+or+RCF.">RPM or RCF.</a> The American Review of Respiratory Disease. 132 (6), 1371 (1985).</li><li>Dole, V. P., Cotzias, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+nomogram+for+the+calculation+of+relative+centrifugal+force.">A nomogram for the calculation of relative centrifugal force.</a> Science. 113 (2941), 552-553 (1951).</li><li>Velasco, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Individual+brain+organoids+reproducibly+form+cell+diversity+of+the+human+cerebral+cortex.">Individual brain organoids reproducibly form cell diversity of the human cerebral cortex.</a> Nature. 570 (7762), 523-527 (2019).</li><li>Jacob, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+pluripotent+stem+cell-derived+neural+cells+and+brain+organoids+reveal+SARS-CoV-2+neurotropism+predominates+in+choroid+plexus+epithelium.">Human pluripotent stem cell-derived neural cells and brain organoids reveal SARS-CoV-2 neurotropism predominates in choroid plexus epithelium.</a> Cell Stem Cell. 27 (6), 937-950 (2020).</li><li>Kathuria, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptomic+landscape+and+functional+characterization+of+induced+pluripotent+stem+cell-derived+cerebral+organoids+in+schizophrenia.">Transcriptomic landscape and functional characterization of induced pluripotent stem cell-derived cerebral organoids in schizophrenia.</a> JAMA Psychiatry. 77 (7), 745-754 (2020).</li><li>Pa&#351;ca, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+cortical+neurons+and+astrocytes+from+human+pluripotent+stem+cells+in+3D+culture.">Functional cortical neurons and astrocytes from human pluripotent stem cells in 3D culture.</a> Nature Methods. 12 (7), 671-678 (2015).</li><li>Hu, B. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+differentiation+of+human+induced+pluripotent+stem+cells+follows+developmental+principles+but+with+variable+potency.">Neural differentiation of human induced pluripotent stem cells follows developmental principles but with variable potency.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (9), 4335-4340 (2010).</li><li>Tang, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DSCAM/PAK1+pathway+suppression+reverses+neurogenesis+deficits+in+iPSC-derived+cerebral+organoids+from+patients+with+Down+syndrome.">DSCAM/PAK1 pathway suppression reverses neurogenesis deficits in iPSC-derived cerebral organoids from patients with Down syndrome.</a> The Journal of Clinical Investigation. 131 (12), 135763 (2021).</li><li>Costa, M., Paulson, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+understanding+Machado-Joseph+disease.">Toward understanding Machado-Joseph disease.</a> Progress in Neurobiology. 97 (2), 239-257 (2012).</li><li>Trapnell, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcript+assembly+and+quantification+by+RNA-Seq+reveals+unannotated+transcripts+and+isoform+switching+during+cell+differentiation.">Transcript assembly and quantification by RNA-Seq reveals unannotated transcripts and isoform switching during cell differentiation.</a> Nature Biotechnology. 28 (5), 511-515 (2010).</li><li>Love, M. I., Huber, W., Anders, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Moderated+estimation+of+fold+change+and+dispersion+for+RNA-seq+data+with+DESeq2.">Moderated estimation of fold change and dispersion for RNA-seq data with DESeq2.</a> Genome Biology. 15 (12), 550 (2014).</li><li>Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+development+and+disease+with+organoids.">Modeling development and disease with organoids.</a> Cell. 165 (7), 1586-1597 (2016).</li><li>Klockgether, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age+related+axonal+neuropathy+in+spinocerebellar+ataxia+type+3/Machado-Joseph+disease+(SCA3/MJD).">Age related axonal neuropathy in spinocerebellar ataxia type 3/Machado-Joseph disease (SCA3/MJD).</a> Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 66 (2), 222-224 (1999).</li><li>Khan, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanded+polyglutamines+impair+synaptic+transmission+and+ubiquitin-proteasome+system+in+Caenorhabditis+elegans.">Expanded polyglutamines impair synaptic transmission and ubiquitin-proteasome system in Caenorhabditis elegans.</a> Journal of Neurochemistry. 98 (2), 576-587 (2006).</li><li>Teixeira-Castro, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serotonergic+signalling+suppresses+ataxin+3+aggregation+and+neurotoxicity+in+animal+models+of+Machado-Joseph+disease.">Serotonergic signalling suppresses ataxin 3 aggregation and neurotoxicity in animal models of Machado-Joseph disease.</a> Brain: A Journal of Neurology. 138, 3221-3237 (2015).</li><li>Joers, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurochemical+abnormalities+in+premanifest+and+early+spinocerebellar+ataxias.">Neurochemical abnormalities in premanifest and early spinocerebellar ataxias.</a> Annals of Neurology. 83 (4), 816-829 (2018).</li><li>Sivitilli, A., Ghiasi, P., Attisano, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+phenotypically+uniform+human+cerebral+organoids+from+pluripotent+stem+cells.">Production of phenotypically uniform human cerebral organoids from pluripotent stem cells.</a> Bio-protocol. 11 (8), 3985 (2021).</li><li>Sivitilli, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Robust+production+of+uniform+human+cerebral+organoids+from+pluripotent+stem+cells.">Robust production of uniform human cerebral organoids from pluripotent stem cells.</a> Life Science Alliance. 3 (5), (2020).</li><li>Camp, J. G., Treutlein, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+development:+Advances+in+mini-brain+technology.">Human development: Advances in mini-brain technology.</a> Nature. 545 (7652), 39-40 (2017).</li><li>Giandomenico, S. L., Sutcliffe, M., Lancaster, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+and+long-term+culture+of+advanced+cerebral+organoids+for+studying+later+stages+of+neural+development.">Generation and long-term culture of advanced cerebral organoids for studying later stages of neural development.</a> Nature Protocols. 16 (2), 579-602 (2021).</li><li>Yoon, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reliability+of+human+cortical+organoid+generation.">Reliability of human cortical organoid generation.</a> Nature Methods. 16 (1), 75-78 (2019).</li><li>Lancaster, M. A., Knoblich, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organogenesis+in+a+dish:+Modeling+development+and+disease+using+organoid+technologies.">Organogenesis in a dish: Modeling development and disease using organoid technologies.</a> Science. 345 (6194), 1247125 (2014).</li><li>Driehuis, E., Kretzschmar, K., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+patient-derived+cancer+organoids+for+drug-screening+applications.">Establishment of patient-derived cancer organoids for drug-screening applications.</a> Nature Protocols. 15 (10), 3380-3409 (2020).</li></ol>

تفتح المواد العضوية الدماغية آفاقا جديدة للبحوث الطبية. العديد من التطبيقات المفيدة لهذه التكنولوجيا بدأت للتو في استكشافها28. وجد هذا البحث أن نتائج تسلسل النسخ للعضويات الدماغية المريضة وراثيا والمواد العضوية الدماغية الطبيعية يمكن أن تعكس الاختلافات بين المرض والصحة. عل?...

بالمقارنة مع أنظمة الاستزراع ثنائية الأبعاد (2D) ، تتمتع أنظمة الاستزراع ثلاثية الأبعاد (3D) بالعديد من المزايا ، بما في ذلك التكرار الحقيقي والاستنساخ الفعال للهياكل المعقدة لبعض الأعضاء1. لذلك ، تعد المواد العضوية الدماغية واحدة من الطرق المساعدة المهمة لمجالات البحث في نمو الدماغ البشري والمرض2 ، وفحص الأدوية ، والعلاج الخلوي.
زراعة المواد العضوية الدماغية عن طريق طريقة التعليق الدوار تفضي إلى تطورها ونضجها3. على الرغم من أن أنظمة الزراعة العضوية الدماغية حققت نجاحا كبيرا ، إلا أنها لا تزال تواجه تحديات حرجة تحد من تطبيقها. على سبيل المثال ، تنطوي الزراعة اليدوية على خطوات معالجة معقدة وتضع عقبات أمام تحقيق تطبيقات واسعة النطاق. بالإضافة إلى ذلك ، في كل مرحلة من مراحل النمو في ثقافة المواد العضوية الدماغية ، هناك حاجة إلى تغييرات في وسائل الإعلام المختلفة والسيتوكينات4. ومع ذلك ، في المرحلة المبكرة ، يكون للعضويات أو EBs أحجام صغيرة (حوالي 200 ميكرومتر إلى 300 ميكرومتر) ولا يمكن الوصول إليها بصريا تقريبا بدون جهاز مناسب. حتما ، يتم مسح كمية معينة من العينات العضوية الثمينة بعيدا عند تغيير الوسط. تم استكشاف العديد من التقنيات للتغلب على هذا في أنواع أخرى من الثقافات العضوية ، وتشمل بعض الأمثلة غمر رقائق العضوية بأكملها في وسط ثقافة لمدة 3 أيام دون تدخل5 ؛ إضافة وسط جديد من خلال الغطاء بعد امتصاص الوسط القديم باستخدام ورق ماص5 ؛ أو تطبيق خطوط أنابيب الموائع الدقيقة المعقدة لتبادل السوائل6،7،8. عقبة أخرى تواجه في المرحلة المبكرة من زراعة المواد العضوية هي صعوبة تحقيق ملاحظات مباشرة بالعين المجردة ، والتي يمكن أن تسبب عمليات سيئة تؤدي إلى تلف عضوي وفقدانه أثناء خطوات نقل المواد العضوية. لذلك ، من الضروري إنشاء بروتوكول أكثر جدوى يسهل التغيير المتوسط ونقل المواد العضوية لتوليد المواد العضوية.
يتم اقتراح عملية محسنة مقابلة تستند إلى المبادئ الهندسية للتغلب على هذه المشاكل ، مما يسهل بشكل كبير ومريح العديد من الإجراءات العضوية. في الطبيعة ، عندما تشرق الشمس في منزل من خلال فجوة نافذة ، يمكن للعين المجردة رؤية الغبار يرقص في شعاع الضوء. بسبب الانعكاس المنتشر لأشعة الشمس على الغبار ، يتم انكسار بعض الضوء في مقلة العين لإنتاج صورة مرئية. مستوحاة من مبدأ هذه الظاهرة 9,10 ، صنعت هذه الدراسة مصباحا ضوئيا ناعما وأضاءت EBs أفقيا. وقد وجد أن EBs يمكن أن تكون واضحة بصريا دون التأثير على نطاق المشاهدة. يتم توليد تدفق ثانوي يشير إلى المركز في السائل عن طريق تدوير لوحة الثقافة بسبب تيارات الدوامة11. تتراكم EBs المنتشرة أصلا في وسط اللوحة. بناء على ذلك ، وظاهرة أن سرعة الترسيب للعضويات أسرع من سرعة الخلايا ، يتم اقتراح طريقة تشغيل سهلة للتغيير المتوسط ونقل المواد العضوية دون الطرد المركزي. يمكن فصل المواد العضوية في وسط المزرعة بشكل فعال عن الخلايا الحرة وشظايا الخلايا الميتة من خلال عملية النقل هذه.
هنا ، يتم اقتراح بروتوكول سهل التشغيل لتوليد عضويات دماغية من الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات. تم تحسين تقنية التشغيل من خلال تطبيق المبدأ الهندسي ، مما يجعل العمليات في ثقافة 3D بسيطة ومجدية مثل تلك الموجودة في ثقافة 2D. طريقة تبادل السوائل المحسنة وعملية نقل العضوية مفيدة أيضا لأنواع أخرى من ثقافة العضوية وتصميم آلات الزراعة التلقائية.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2 &#956;m Filter</td>
			<td>NEST Biotechnology, China</td>
			<td>331001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 &#956;L wide-bore pipette tip</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>9405163</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 &#956;L wide-bore pipette tip</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>9405020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Mercaptoethanol</td>
			<td>Merck, Germany</td>
			<td>8057400005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% Paraformaldehyde</td>
			<td>Servicebio, China</td>
			<td>G1101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well low adhesion plate</td>
			<td>NEST Biotechnology, China</td>
			<td>703011</td>
			<td>It is used for EBs suspension cultures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aaccute cell detachment solution</td>
			<td>STEMCELL Technologies, Canada</td>
			<td>07920</td>
			<td>It is used to digest iPSC into single cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AggreWell800 24-well</td>
			<td>STEMCELL Technologies, Canada</td>
			<td>34811</td>
			<td>Microporous culture plate for EBs preparation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Adherence Rinsing Solution</td>
			<td>STEMCELL Technologies, Canada</td>
			<td>07010</td>
			<td>Rinsing solution for cultureware to prevent cell adhesion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27-vit. A supplement</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>12587010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bFGF</td>
			<td>Peprotech, USA</td>
			<td>GMP100-18B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Beyotime Biotechnology, China</td>
			<td>ST025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>5810 R</td>
			<td>It can be used for centrifugation of various types of centrifuge tubes, reagent bottles and working plates.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glass</td>
			<td>Shitai Laboratory Equipment, China</td>
			<td>10212020C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Beyotime Biotechnology, China</td>
			<td>C1002</td>
			<td>Used for nuclear staining. After DAPI was combined with double stranded DNA, the maximum excitation wavelength was 364nm and the maximum emission wavelength was 454nm.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM-F12</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>11330032</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ES-quality FBS</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>10270106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll Paque</td>
			<td>General Electric Company, USA</td>
			<td>17-5442-02</td>
			<td>Isolate the peripheral blood mononuclear cells according to Ficoll-Paque method.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelatin</td>
			<td>Sangon Bioteach, China</td>
			<td>A609764</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamax supplement</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>35050061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamax supplement</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>17504044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-Chicken IgY&#160; secondary antibody</td>
			<td>Abcam, UK</td>
			<td>ab150171</td>
			<td>Goat anti-Chicken IgG. Conjugation: Alexa Fluor 647. Ex: 652 nm, Em: 668 nm. Use at 1:500 dilution.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-Mouse IgG secondary antibody</td>
			<td>Abcam, UK</td>
			<td>ab150120</td>
			<td>Goat anti-Mouse IgG. Conjugation: Alexa Fluor 594. Ex: 590 nm, Em: 617 nm. Use at 1:500 dilution.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-Rabbit IgG secondary antibody</td>
			<td>Abcam, UK</td>
			<td>ab150077</td>
			<td>Goat Anti-Rabbit IgG. Conjugation: Alexa Fluor 488. Ex: 495 nm, Em: 519 nm. Use at 1:500 dilution.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Merck, Germany</td>
			<td>H3149</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horizontal shaker</td>
			<td>Servicebio, China</td>
			<td>DS-H200</td>
			<td>Relative centrifugal force (RCF) of 0.11808 x g is more appropriate, according to the manufacturer INFORS HT (Switzerland).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Merck, Germany</td>
			<td>I9278-5ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KOSR</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>10828028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel</td>
			<td>Corning, USA</td>
			<td>354277</td>
			<td>Matrigel will solidify in the environment higher than 4 &#176;C, so it should be sub packed at low temperature.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM-NEAA</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>11140050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mTeSR1</td>
			<td>STEMCELL Technologies, Canada</td>
			<td>85850</td>
			<td>iPSC culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N2 supplement</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>17502048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>21103049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OCT4 primary antibody</td>
			<td>Abcam, UK</td>
			<td>ab19857</td>
			<td>Host: Rabbit. Dissolve with 500 &#956;L PBS. Use at 1:200 dilution.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pathological frozen slicer</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td>Leica CM1860</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PAX6 primary antibody</td>
			<td>Abcam, UK</td>
			<td>ab78545</td>
			<td>Host: Mouse. Use at 1:100 dilution.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>STEMCELL Technologies, Canada</td>
			<td>37350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PSC dissociation solution</td>
			<td>Beijing Saibei Biotechnology, China</td>
			<td>CA3001500</td>
			<td>Enzyme free dissociation solution can be used for iPSC digestion and passage.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sendai Reprogramming Kit</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>A16518</td>
			<td>Establish iPSC according to the protocol of Sendai Reprogramming Kit.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide Glass</td>
			<td>Shitai Laboratory Equipment, China</td>
			<td>188105W</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soft light lamp</td>
			<td>NUT</td>
			<td>NUT</td>
			<td>A simple self made device, refer to supplementary figure 2 for preparation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>STEMdiff Cerebral Organoid Kit</td>
			<td>STEMCELL Technologies, Canada</td>
			<td>8570</td>
			<td>Contain: 1. EB Formation Medium; 2. Induction Medium; 3. Expansion Medium; 4. Maturation Medium.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>STEMdiff Cerebral Organoid Maturation Kit</td>
			<td>STEMCELL Technologies, Canada</td>
			<td>8571</td>
			<td>Maturation Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sangon Bioteach, China</td>
			<td>A502792</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Merck, Germany</td>
			<td>X100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TUJ1 primary antibody</td>
			<td>Abcam, UK</td>
			<td>ab41489</td>
			<td>Host: Chicken. Use at 1:1000 dilution.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vaseline</td>
			<td>Sangon Bioteach, China</td>
			<td>A510146</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Y-27632</td>
			<td>STEMCELL Technologies, Canada</td>
			<td>72302</td>
			<td>Prepare a 5 mM stock solution in PBS, resuspend 1 mg in 624 &#181;L of PBS.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weblink</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Raw sequencing data</td>
			<td>Genome Sequence Archive (Genomics, Proteomics &#38; Bioinformatics 2021) in National Genomics Data Center (Nucleic Acids Res 2022), China National Center for Bioinformation / Beijing Institute of Genomics, Chinese Academy of Sciences</td>
			<td>GSA-Human: HRA002430</td>
			<td>https://ngdc.cncb.ac.cn/gsa-human/</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

facilitating cerebral organoid culture via lateral soft light illumination

في الوقت الحاضر ، لا تزال تكنولوجيا الزراعة العضوية الدماغية معقدة للعمل ويصعب تطبيقها على نطاق واسع. من الضروري إيجاد حل بسيط وعملي. لذلك ، يقترح بروتوكول عضوي دماغي أكثر جدوى في هذه الدراسة. لحل الإزعاج الذي لا مفر منه في التغيير المتوسط ونقل العضوية في المرحلة المبكرة ، يعمل البحث الحالي على تحسين تقنية التشغيل من خلال تطبيق المبدأ الهندسي. تم اعتماد مصباح ضوئي ناعم لإلقاء الضوء أفقيا على عينات الجسم الجنيني (EB) ، مما يسمح برؤية EBs بالعين المجردة من خلال تأثير الانعكاس المنتشر المحسن. باستخدام مبدأ التدفق الثانوي الناتج عن الدوران ، تتجمع المواد العضوية نحو مركز البئر ، مما يسهل تشغيل التغيير المتوسط أو النقل العضوي. بالمقارنة مع الخلية المشتتة ، يستقر الجسم الجنيني بشكل أسرع في الماصة. باستخدام هذه الظاهرة ، يمكن إزالة معظم الخلايا الحرة وشظايا الخلايا الميتة بشكل فعال بطريقة بسيطة ، مما يمنع EBs من تكبد أضرار من الطرد المركزي. تسهل هذه الدراسة تشغيل الثقافة العضوية الدماغية وتساعد على تعزيز تطبيق المواد العضوية في الدماغ.

وقد حفزت هذه الدراسة iPSCs (الشكل 2B) على الدخول في عضويات دماغية (الشكل 2C). عبرت EBs المزروعة في المرحلة المبكرة عن علامة OCT4 (الشكل 2A) ، والتي تشير إلى تعدد القدرات الجيد. في المرحلة اللاحقة ، تطورت EBs إلى عضويات دماغية ناضجة (الشكل 2D</strong...

Watch this Scientific Journal Video about Facilitating Cerebral Organoid Culture via Lateral Soft Light Illumination at JoVE.com

Facilitating Cerebral Organoid Culture via Lateral Soft Light Illumination

توفر المواد العضوية الدماغية فرصا غير مسبوقة لدراسة تطور الأعضاء وأمراض الأمراض البشرية. على الرغم من تحقيق نجاح كبير مع أنظمة الزراعة العضوية الدماغية ، إلا أنه لا تزال هناك صعوبات تشغيلية في تطبيق هذه التكنولوجيا. يصف هذا البروتوكول إجراء عضوي دماغي يسهل التغيير المتوسط والنقل العضوي.

تسهيل الثقافة العضوية الدماغية من خلال إضاءة الضوء الناعم الجانبي

At present, cerebral organoid culture technology is still complicated to operate and difficult to apply on a large scale. It is necessary to find a simple ...

يسهل البروتوكول تشغيل ثقافة المواد العضوية الدماغية ويساعد على تعزيز تطبيق المواد العضوية في الدماغ. يمكن رؤية المرحلة المبكرة من العضوية بالعين المجردة باستخدام مصباح ضوء ناعم جانبي مناسب للعديد من العمليات. طرق التغيير المتوسطة المحسنة وعمليات نقل المواد العضوية مفيدة أيضا لأنواع أخرى من الثقافات العضوية وتصميم آلات الثقافات الأوتوماتيكية.للبدء ، قم بزراعة iPSCs بوسط mTeSR1 في طبق بتري مغطى ب 35 ملم وقم بتغيير الوسط كل يوم. يجب ألا تتجاوز كثافة نمو iPSC 75٪ ، ثم قم بإخراج وسط mTeSR1 من iPSCs وغسله مرتين بملليمتر واحد من PBS. بعد سحب PBS ، أضف 300 ميكرولتر من محلول انفصال الخلايا لهضم iPSCs إلى خلايا مفردة لمدة ثلاث إلى أربع دقائق عند 37 درجة مئوية.في وقت لاحق ، أعد تعليق الخلايا في مليمترين من وسط تكوين EB وطرد مركزي للعينة لمدة خمس دقائق عند 300 مرة جم. عالج صفيحة البئر المتخصصة المكونة من 24 بئرا ب 500 ميكرولتر لكل بئر من محلول الشطف المضاد للالتصاق لمدة خمس دقائق. الآن ، أعد تعليق الخلايا في وسط تكوين EB الذي يحتوي على مثبط Rho kinase Y27632.بعد إزالة محلول الشطف المضاد للالتصاق ، اشطف كل بئر بملليلترين من وسط تكوين EB. بعد ذلك ، أضف الخلايا إلى لوحات البئر المتخصصة البالغ عددها 24 لوحة بكثافة ثلاثة أضعاف 10 إلى الخلايا السادسة لكل بئر وقم بالطرد المركزي للصفيحة عند 100 مرة g لمدة دقيقتين في درجة حرارة الغرفة. توزيع الخلايا بشكل موحد في كل غرفة في الجزء السفلي من اللوحة.احتضان العينات عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون لمدة 24 ساعة. إذا لم يتم استخدام الطرد المركزي في الخطوة السابقة ، فقم باحتضان لمدة 36 ساعة والحفاظ على ثبات العينة. استخدم لوحة أكريليك شفافة بسماكة 0.3 إلى 0.5 سم بحجم ورق A5 والصق وسادات بيضاء على الجزء الأمامي والخلفي من لوحة الأكريليك.بعد ذلك ، قم بتثبيت صف من مصابيح LED البيضاء على حافة اللوحة بحيث يمكن للأضواء الدخول من جانب لوحة الأكريليك ثم إطلاق النار بالتوازي. الآن ، قم بإعداد لوحة جديدة ذات ستة آبار منخفضة الالتصاق وأضف ملليلترين من وسط تكوين EB إلى كل بئر. بعد إزالة EBs مع الوسط باستخدام 1000 ميكرولتر من طرف ماصة التجويف العريض ، انقل ما يقرب من 100 EBs لكل بئر إلى لوحة الالتصاق الستة المنخفضة البئر.لاستبدال وسط تكوين EB كل يوم بنفس الحجم من الوسط الطازج ، قم بتحفيز تدفق دوامة عن طريق تدوير الطبق على طول مدار دائري. تتلاقى EBs أو العضوية مع مركز البئر بسبب التدفق الثانوي المتولد من خلال الدوران. استنشاق الوسط القديم عن طريق الأنابيب إلى حافة البئر ببطء.لا تمتص بشدة ، وإلا ستتم إزالة EBs معا. ثم أضف وسائط جديدة لإعادة تعليق EBs. بالنسبة للحث العصبي ، قم بإعداد لوحة جديدة ذات ستة مواضع منخفضة الالتصاق مع ثلاثة ملليلترات من وسط الحث العصبي لكل بئر.قم بتشغيل الضوء الناعم الجانبي وأطفئ مصادر الإضاءة الداخلية الأخرى. الآن انقل EBs إلى صفيحة البئر الستة مع وسط تحريض عصبي مضاف باستخدام طرف ماصة فم عريض لامتصاص كل من EBs ووسط الثقافة. ثم ، أمسك الماصة في وضع مستقيم.سوف تغرق EBs تدريجيا تحت الجاذبية وتتلاقى نحو فم طرف الماصة. عندما يلمس فم طرف الماصة سطح السائل مرة أخرى ، وبسبب التوتر السطحي السائل ، تغرق EBs بسرعة في الوسط. احتضان العينات عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون لمدة 24 ساعة.ضع مصفوفة الغشاء في ثلاجة بأربع درجات مئوية لمدة 60 دقيقة حتى تذوب. بعد تشغيل الضوء الناعم الجانبي ، قم بإيقاف تشغيل مصدر الضوء الموجود أعلى وحدة التحكم واحتفظ بمصفوفة الغشاء على الجليد لمنع التصلب. انقل كمية صغيرة من EBs إلى طبق 60 ملم يحتوي على وسط تمدد طازج لتسهيل إزالة EB واحد. باستخدام طرف ماصة بعرض التجويف يبلغ 200 ميكرولتر، قم بامتصاص EB واحد يحتوي على ما يقرب من 10 ميكرولترات متوسطة في كل مرة، ثم قم بعمل قطرات عن طريق إضافته إلى الجزء السفلي من لوحة البئر الستة.استخدم خمس قطرات لكل بئر. أضف 15 ميكرولتر من مصفوفة الغشاء إلى كل قطرة تحتوي على EB. امزج بسرعة وقم بتضمين كرة EB في وسط القطرة.اسمح للقطرات التي تحتوي على EBs بالتصلب عن طريق وضع صفيحة البئر الستة في حاضنة 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. ثم أضف ثلاثة ملليلترات من وسط التمدد إلى كل بئر وقم بتفجير EBs المدمجة في المصفوفة بلطف لتعليقها واحتضانها لمدة ثلاثة أيام. للنضج العضوي ، قم بإزالة الوسط الأصلي بلطف وأضف ثلاثة ملليلتر من وسط النضج إلى كل بئر.ضع الصفيحة العضوية على شاكر أفقي في حاضنة 37 درجة مئوية واستمر في تدوير الثقافة أفقيا. تغيير وسط النضج الطازج كل يومين إلى ثلاثة أيام. نظرا للجاذبية والكثافة الأعلى نسبيا من الوسط ، ستغرق EBs المعاد تعليقها تدريجيا.وبالتالي ، يمكن نقل EBs بسهولة. بالمقارنة مع EBs ، تغرق الخلايا الحرة وشظايا الخلايا الميتة ببطء أكبر. وبالتالي يمكن إزالة معظم الخلايا الحرة وشظايا الخلايا الميتة.عبرت EBs المزروعة في المرحلة المبكرة عن علامة OCT4 التي أشارت إلى تعدد القدرات الجيد. في المرحلة اللاحقة ، تطورت EBs إلى عضويات دماغية ناضجة. كانت المواد العضوية الدماغية الناضجة إيجابية لعلامة الخلايا السلفية القمية PAX6 وعلامة الخلايا العصبية المحددة tubulin J1. تم زراعة iPSCs من الأفراد الأصحاء ومرضى SCA3 لتنمو لتصبح عضويات.أظهرت ملامح التعبير الجيني للمجموعة العضوية الدماغية الطبيعية ومجموعة SCA3 العضوية الدماغية اختلافات كبيرة في المسارات مثل نقل الناقل العصبي وتكوين المشبك والتنظيم. عند تضمين EB مع مصفوفة الغشاء السفلي ، يجب ألا تكون أوقات التشغيل طويلة جدا لتجنب جفاف EBs. يوصى بالحماية بسرعة.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Facilitating Cerebral Organoid Culture via Lateral Soft Light Illumination

Light-mediated Formation and Patterning of Hydrogels for Cell Culture Applications

تشكيل الضوء بوساطة والزخرفة من الهلاميات المائية للتطبيقات خلية ثقافة

Click chemistries have been investigated for use in numerous biomaterials applications, including drug delivery, tissue engineering, and cell culture. In ...

Soft Lithographic Procedure for Producing Plastic Microfluidic Devices with View-ports Transparent to Visible and Infrared Light

الإجراء معدني لينة لإنتاج أجهزة موائع جزيئية البلاستيك مع عرض-منافذ شفافة للضوء المرئي والأشعة تحت الحمراء

Infrared (IR) spectro-microscopy of living biological samples is hampered by the absorption of water in the mid-IR range and by the lack of suitable ...

Production of Extracellular Matrix Fibers via Sacrificial Hollow Fiber Membrane Cell Culture

إنتاج ألياف المصفوفة خارج الخلية عبر الألياف المجوفة الذبيحة غشاء الخلية والثقافة

Engineered scaffolds derived from extracellular matrix (ECM) have driven significant interest in medicine for their potential in expediting wound closure ...

Handling and Assessment of Human Primary Prostate Organoid Culture

معالجة وتقييم الثقافة البشرية أورجانويد البروستاتا الأولية

This paper describes a detailed protocol for three-dimensional (3D) culturing, handling, and evaluation of human primary prostate organoids. The process ...

Applications for Open Source Microplate-Compatible Illumination Panels

تطبيقات للواح الاضاءه المتوافقة مع اللوحة المفتوحة المصدر

Microplates are commonly used in the modern laboratory environment for a wide variety of tasks both in small-scale laboratory benchtop operations as well ...

Bioinspired Soft Robot with Incorporated Microelectrodes

Bioinspired لينة روبوت مع Microelectrodes المدمجة

Bioinspired soft robotic systems that mimic living organisms using engineered muscle tissue and biomaterials are revolutionizing the current biorobotics ...

Building a Simple and Versatile Illumination System for Optogenetic Experiments

بناء نظام إضاءة بسيط ومتعدد الاستخدامات لتجارب البصريات الوراثية

Controlling biological processes using light has increased the accuracy and speed with which researchers can manipulate many biological processes. Optical ...

Experimental and Data Analysis Workflow for Soft Matter Nanoindentation

سير العمل التجريبي وتحليل البيانات للمسافة البادئة النانوية للمادة اللينة

Nanoindentation refers to a class of experimental techniques where a micrometric force probe is used to quantify the local mechanical properties of soft ...

Inactivation of Pathogens via Visible-Light Photolysis of Riboflavin-5&#8242;-Phosphate

Inactivation of Pathogens via Visible-Light Photolysis of Riboflavin-5&#8242;-Phosphate

تعطيل مسببات الأمراض عن طريق التحلل الضوئي للضوء المرئي للريبوفلافين -5′-فوسفات

Riboflavin-5&#39;-phosphate (or flavin mononucleotide; FMN) is sensitive to visible light. Various compounds, including reactive oxygen species (ROS), can ...

Reconstituting Cytoarchitecture and Function of Human Epithelial Tissues on an Open-Top Organ-Chip

إعادة تشكيل العمارة الخلوية ووظيفة الأنسجة الظهارية البشرية على رقاقة عضو مفتوحة

Nearly all human organs are lined with epithelial tissues, comprising one or multiple layers of tightly connected cells organized into three-dimensional ...