Name: assay for adhesion and agar invasion in s. cerevisiae
Uploaded: 2006-11-08T00:00:00
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Gostaríamos de agradecer a Lisa Schneper e Katrin Duevel de suas idéias no desenvolvimento deste ensaio.

<ol><li> Colocar 200ul de culturas de interesse crescente em placas sintéticas mídia com as condições necessárias a fome (SC com glicose 2% versus SC com glicose 0,2%, por exemplo) Se a densidade de culturas são muito diferentes um do outro, ajustar a contagem de células por cultura 200ul de modo que cada gota tem aproximadamente a mesma quantidade de células. </li><li> Certifique-se manter registros de que queda nas placas é que a cultura. </li><li> Mantenha a tampa entreaberta prato e deixe em temperatura ambiente ou a 30 ° C até g...

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	<li>Costerton, J. W., Lewandowski, Z., Caldwell, D. E., Korber, D. R., Lappin-Scott, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbial+biofilms.">Microbial biofilms.</a> Annu Rev Microbiol. 49, 711-745 (1995).</li><li>Elortondo, F. J. P., Salmeron, J., Albisu, M., Casas, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biofilms+in+the+food+industry.">Biofilms in the food industry.</a> Food Science and Technology International. 5, 25-30 (1999).</li><li>Keinanen, M. M., Martikainen, P. J., Kontro, M. 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R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mat+formation+in+Saccharomyces+cerevisiae+requires+nutrient+and+pH+gradients.">Mat formation in Saccharomyces cerevisiae requires nutrient and pH gradients.</a> Eukaryot Cell. , (2007).</li></ol>

Células de levedura mostrar modos diversos de diferenciação de acordo com a disponibilidade de nutrientes e condições ambientais, incluindo a formação de esporos sob condições de estresse de fome e, filamentação sob várias tensões de nutrientes e floculação. Diversas leveduras, incluindo S. cerevisiae e C. albicans, também podem ser encontradas em biofilmes formados por um conjunto diversificado de microorganismos. Embora haja alguma correlação com filamentação e comportamento invasivo, não está claro exatamente como f...

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		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
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<td>Moticam 350</td>
<td>Camera</td>
<td>Motic</td>
<td>discontinued (new model: Moticam 352)</td>
<td>A relatively cheap camera that attaches to eye pieces of microscopes and captures digital images for PC or Mac.</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

assay for adhesion and agar invasion in s. cerevisiae

Leveduras são encontradas em biofilmes naturais, onde muitos microrganismos colonizam superfícies. Em ambientes artificiais, tais como superfícies de objetos feitos pelo homem, os biofilmes podem reduzir a produtividade industrial, destruir estruturas, e ameaçam a vida humana. 1-3 Por outro lado, aproveitando o poder de biofilmes pode ajudar a limpar o meio ambiente e geração de energia sustentável. 08/04 A capacidade de S. cerevisiae para colonizar superfícies e participar em biofilmes complexo foi ignorada na maior parte, até a redescoberta dos programas de diferenciação desencadeada por várias vias de sinalização e sugestões ambientais a este organismo. 9, 10 O interesse de continuar no uso de S. cerevisiae como organismo modelo para entender a interação e convergência das vias de sinalização, como o Ras-PKA, Kss1 MAPK e Hog1 vias de osmolaridade, rapidamente colocado S. cerevisiae na junção de biofilme biologia e da pesquisa de transdução de sinal. 20/11 Para este fim, a diferenciação de células de levedura em longas e adesivo, filamentos pseudohyphal tornou-se uma leitura conveniente para a ativação de vias de transdução de sinal em várias mudanças ambientais. No entanto, filamentação é uma coleção de fenótipos complexos, o que faz a dosagem para ele como se fosse um fenótipo simples enganosa. Na última década, vários ensaios foram adotados com sucesso a partir de estudos biofilme bacteriano para a pesquisa de leveduras, tais como ensaios MAT formação para medida de dispersão colônia em agar suave e coloração violeta cristal para medir quantitativamente a adesão da superfície celular. 12, 21 No entanto, tem havido alguma confusão em ensaios desenvolvidos para avaliar qualitativamente os fenótipos adesiva e invasiva de leveduras em ágar. Aqui, apresentamos um método simples e confiável para avaliar a qualidade adesiva e invasiva de cepas de leveduras com fácil de compreender as etapas para isolar a avaliação de adesão da avaliação invasão. Nosso método, adotado a partir de estudos anteriores, 10, 16 envolve células que crescem em meios líquidos e revestimento em condições diferenciais de nutrientes para o crescimento de grandes manchas, que em seguida, lave com água para avaliar a adesão e esfregar as células completamente fora da superfície do ágar para avaliar a invasão em o ágar. Nós eliminamos a necessidade de estrias células em ágar, o que afeta a invasão de células no agar. Em geral, observamos que as cepas haplóides que invadem agar são sempre cola, mas não todas as estirpes adesivo pode invadir o ágar. Nossa abordagem pode ser usada em conjunto com outros ensaios a dissecar cuidadosamente os passos e requisitos de diferenciação de transdução de sinal de levedura, diferenciação, quorum sensing, e formação de biofilme.

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Assay for Adhesion and Agar Invasion in S. cerevisiae

Nós descrevemos um ensaio qualitativo para a adesão e invasão de levedura ágar como uma medida de diferenciação invasivo e pseudohyphal. Este ensaio simples pode ser usado para avaliar o fenótipo invasivo de mutantes diversas, bem como as pistas efeitos ambientais e vias de sinalização na diferenciação de levedura.

Ensaio para a Adesão e Invasão Agar em S. cerevisiae

Yeasts are found in natural biofilms, where many microorganisms colonize surfaces. In artificial environments, such as surfaces of man-made objects, ...

Research

JoVE Journal

Biology

A high-throughput method to globally study the organelle morphology in S. cerevisiae

Um método de alto rendimento para estudar a morfologia global organela em S. cerevisiae

High-throughput methods to examine protein localization or organelle morphology is an effective tool for studying protein interactions and can help ...

Biologia

Identification of protein complexes with quantitative proteomics in S. cerevisiae

Identificação de complexos de proteínas com proteômica quantitativa em S. cerevisiae

Lipids are the building blocks of cellular membranes that function as barriers and in compartmentalization of cellular processes, and recently, as ...

An In vitro FluoroBlok Tumor Invasion Assay

An In vitro FluoroBlok Tumor Invasion Assay

Um In vitro FluoroBlok Assay invasão tumoral

The hallmark of metastatic cells is their ability to invade through the basement membrane and migrate to other parts of the body. Cells must be able to ...

Agar-Block Microcosms for Controlled Plant Tissue Decomposition by Aerobic Fungi

Agar-Microcosmos Bloco de decomposição controlada de Tecidos Vegetais por fungos aeróbicos

The two principal methods for studying fungal biodegradation of lignocellulosic plant tissues were developed for wood preservative testing (soil-block; ...

A Fluorescence Microscopy Assay for Monitoring Mitophagy in the Yeast Saccharomyces cerevisiae

A Fluorescence Microscopy Assay for Monitoring Mitophagy in the Yeast Saccharomyces cerevisiae

Um Ensaio de microscopia de fluorescência para Mitophagy Monitoramento no fermento Saccharomyces cerevisiae

Autophagy is important for turnover of cellular components under a range of different conditions. It serves an essential homeostatic function as well as a ...

Studying Age-dependent Genomic Instability using the S. cerevisiae Chronological Lifespan Model

Studying Age-dependent Genomic Instability using the S. cerevisiae Chronological Lifespan Model

Estudando Idade-dependente Instabilidade Genômica usando o S. cerevisiae Modelo Lifespan cronológica

Studies using the Saccharomyces cerevisiae aging model have uncovered life span regulatory pathways that are partially conserved in higher eukaryotes1-2. ...

Isolation of Primary Mouse Trophoblast Cells and Trophoblast Invasion Assay

Isolamento de células primário do mouse trofoblasto e Ensaio invasão do trofoblasto

The placenta is responsible for the transport of nutrients, gasses and growth factors to the fetus, as well as the elimination of wastes.  
Thus, defects ...

Flow Cytometry-based Purification of S. cerevisiae Zygotes

Flow Cytometry-based Purification of S. cerevisiae Zygotes

Purificação Citometria de Fluxo com base em<em&gt; S. cerevisiae</em&gt; Zigotos

Zygotes are essential intermediates between haploid and diploid states in the life cycle of many organisms, including yeast (Figure 1) 1. S. cerevisiae ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualização e análise de moléculas de mRNA Usando Fluorescência<em&gt; In Situ</em&gt; A hibridação em<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

Coupled Assays for Monitoring Protein Refolding in Saccharomyces cerevisiae

Coupled Assays for Monitoring Protein Refolding in Saccharomyces cerevisiae

Ensaios para Monitoramento juntamente redobramento de proteínas em<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em

Proteostasis, defined as the combined processes of protein folding/biogenesis, refolding/repair, and degradation, is a delicate cellular balance that must ...