Name: in vitro reconstitution of the actin cytoskeleton inside giant unilamellar vesicles
Uploaded: 2022-08-25T13:40:00
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우리는 ARO MURI W911NF-14-1-0403을 M.P.M., 국립 보건원 (NIH) R01 1R01GM126256에서 M.P.M., 국립 보건원 (NIH) U54 CA209992, NIH RO1 GM126256, NIH U54 CA209992, 미시간 대학 / 제넨테크, SUBK00016255 및 인간 국경 과학 프로그램 (HFSP) 보조금 번호 RGY0073 / 2018을 M.P.M.에 지원하는 것을 인정합니다. 이 자료에 표현 된 의견, 결과, 결론 또는 권장 사항은 저자의 의견이며 ARO, NIF 또는 HFSP의 견해를 반드시 반영하지는 않습니다. S.C.는 V. Yadav, C. Muresan, S. Amiri와의 유익한 토론을 인정합니다.

1. 완충액 및 단백질 용액의 제조
<ol><li>0.1 mM CaCl2, 10 mM HEPES (pH 7.5), 1 mM DTT, 0.5 mM 다브코,320 mM 수크로오스 및 0.2 mM ATP를 혼합하여 총 부피 5 mL의 수성 내부 비중합 (INP) 완충액을 제조하였다.</li>
	<li>단백질을 다음 농도로 4°C에서 INP 버퍼에 첨가하여 단백질 믹스(PM)를 제조하였다: 11.2 μM 비형광 G-액틴, 2.8 μM 형광 표지된 액틴, 및 0.24 μM Arp2/3 (표 of Materials). F-액틴 ?...

몇 가지 주요 단계는 준비 과정 동안 리포솜의 높은 수율의 성공을 결정합니다. 오일에 지질 필름을 완전히 용해시키기 위해서는 유리 바이알 바닥의 지질 막이 완전히 사라질 때까지 샘플을 초음파 처리해야합니다. 초음파 처리 후, 지질-오일 혼합물은 지질 분자가 추가로 분산되기 위해 어두운 조건 하에서 실온에서 밤새 저장되어야 한다(29). 혼합물은 최대 일주일 동안 4°C에?...

액틴 세포골격은 분자 수준의 수축성 및 힘 생성 1,2,3을 조정함으로써 세포의 세포내 구조를 구성하는데 근본적인 역할을 한다. 그 결과, 세포 변형4,5, 분열6, 이동 7,8 및 부착9를 포함하는 수많은 필수 세포 활동을 매개한다. 액틴 네트워크의 시험관내 재구성은 최근 몇 년 동안10,11,12,13,14,15,16,17에서 엄청난 주목을 받았다. 재구성의 목표는 살아있는 세포 내에 존재하는 복잡한 생화학 적 조절이없는 세포의 최소 모델을 구축하는 것입니다. 이는 특정 세포내 활동을 조사하기 위한 조절가능한 환경을 제공하고, 액틴 세포골격(18,19)의 상이한 성분들의 확인 및 분석을 용이하게 한다. 또한, 인지질 거대 유니라멜라 소포(GUVs, 리포솜) 내부의 시험관내 액틴 네트워크의 캡슐화는 반투과성 경계를 갖는 한정된 그러나 변형가능한 공간을 제공한다. 그것은 세포 내 액틴 기계의 생리적, 기계적 미세 환경 9,20,21,22을 모방합니다.
리포솜을 제조하는 다양한 방법 중에서, 지질막 수화 방법(팽윤 방법이라고도 함)은 가장 초기의 기술(23) 중 하나이다. 건조 지질 필름은 완충제를 첨가하여 수화되어 막강한 기포를 형성하여 결국 소포(24)가됩니다. 더 높은 수율로 더 큰 소포를 생산하기 위해, 전기 형성 방법(25)으로 알려진 필름 수화 방법으로부터 발전하는 개선된 방법은 AC 전기장을 적용하여 수화 공정(26)을 효율적으로 촉진시킨다. 액틴 캡슐화를 위한 이러한 수화-기반 방법의 주요 한계는 고농축 단백질의 낮은 캡슐화 효율을 가지며, 단지 특정 지질 조성물(24)과 양립가능하다는 것이다. 이에 비해 반전된 에멀젼 기술은 지질 성분 및 단백질 농도 20,27,28,29에 대한 제한이 적습니다. 이 방법에서, 캡슐화를 위한 단백질의 혼합물이 내부 수성 완충액에 첨가되고, 이는 나중에 지질 함유 광유 용액에서 유화되어, 지질-단층 액적을 형성한다. 단층 지질 방울은 원심분리를 통해 다른 지질 / 오일 - 물 계면을 통과하여 이중층 지질 소포 (리포솜)를 형성합니다. 이 기술은 액틴 캡슐화24,30에 대한 가장 성공적인 전략 중 하나임이 입증되었습니다. 별개로, 펄스 분사(31,32), 과도 막 토출(33), 및 cDICE 방법(34)을 포함하는 일부 미세유체 장치 방법이 있다. 반전 에멀젼 방법과 미세 유체 방법 사이의 유사점은 사용되는 지질 용매 (오일)와 리포솜의 외부 전단지의 형성을위한 지질 / 오일 - 물 계면의 도입입니다. 대조적으로, 미세유체 방법에 의한 리포솜의 생성은 미세유체 장치의 셋업을 필요로 하고, 이중층의 두 전단지 사이에 포획된 오일을 수반하며, 이는 오일 제거(35)를 위한 추가적인 단계를 필요로 한다.
이 원고에서, 우리는 이전에22에서 사용했던 바와 같이 중합된 F-액틴 네트워크를 캡슐화하는 리포솜을 제조하기 위해 반전된 에멀젼 기술을 사용했다. 캡슐화를 위한 단백질 혼합물을 먼저 액틴을 그의 구상(G) 형태로 유지하기 위해 비중합 조건의 완충액에 넣었다. 전체 공정은 초기 액틴 중합을 방지하기 위해 4°C에서 수행되었고, 이는 나중에 샘플을 실온으로 가온하도록 허용함으로써 촉발되었다. 일단 실온에서 일단 액틴은 그의 필라멘트성 (F) 형태로 중합된다. 다양한 액틴 결합 단백질을 내부 수성 완충 용액에 첨가하여 단백질 기능 및 특성을 연구 할 수 있으므로 액틴 네트워크 및 막 표면과의 상호 작용에 대한 통찰력을 추가로 제공합니다. 이 방법은 또한 최종 리포솜(28,37)의 크기에 가까운 다양한 목적 단백질(36) 및 대형 물체(미세입자, 자기 추진식 마이크로수영 등)의 캡슐화에도 적용될 수 있다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-{[n(5-amino-1-carboxypentyl)iminodiacetic acid]succinyl} nickel salt (DOGS-NTA-Ni)&#160;</td>
			<td>Avanti Polar Lipids Inc.</td>
			<td>231615773</td>
			<td>Nickel Lipid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1,4-Diazabicyclo[2.2.2]octane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D27802-25G</td>
			<td>DABCO</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Actin protein (&#62;99% pure): rabbit skeletal muscle</td>
			<td>Cytoskeleton, Inc</td>
			<td>AKL99-D</td>
			<td>non-fluorescent G-actin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Actin protein (rhodamine): rabbit skeletal muscle</td>
			<td>Cytoskeleton, Inc</td>
			<td>AR05</td>
			<td>fluorescently labeled actin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adenosine 5&#8242;-triphosphate disodium salt hydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A2383-10G</td>
			<td>ATP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 dye</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td></td>
			<td>fluorescent dye</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Andor iQ3</td>
			<td>Andor Technologies</td>
			<td></td>
			<td>control and acquisition software for confocal microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arp2/3 Protein Complex: Porcine Brain</td>
			<td>Cytoskeleton, Inc</td>
			<td>RP01P-A</td>
			<td>Arp 2/3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dihydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>10035048</td>
			<td>CaCl2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chamlide Chambers (4-well for 12 mm round coverslip)</td>
			<td>Quorum Technologies</td>
			<td></td>
			<td>incubation chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cofilin protein: human recombinant</td>
			<td>Cytoskeleton, Inc</td>
			<td>CF01-C</td>
			<td>cofilin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal Microscope (63&#215; oil-immersion objective)</td>
			<td>Andor Technologies</td>
			<td>LEICA DMi8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-(+)-GLUCOSE BIOXTRA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G7528</td>
			<td>glucose</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dithiothreitol</td>
			<td>DOT Scientific&#160;</td>
			<td>DSD11000-10</td>
			<td>DTT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelsolin Protein: Homo Sapiens Recombinant</td>
			<td>Cytoskeleton, Inc</td>
			<td>HPG6</td>
			<td>gelsolin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton 1750 Gastight Syringe, 500 &#181;L, cemented needle, 22 G, 2&#34; conical tip</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td>UX-07940-53</td>
			<td>glass syringe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>AmericanBio</td>
			<td>7365-45-9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ/Fiji</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>https://imagej.net/tutorials/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-alpha-Phosphatidylcholine</td>
			<td>Avanti Polar Lipids Inc.</td>
			<td>97281442</td>
			<td>EPC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>7786303</td>
			<td>MgCl2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil, BioReagent, for molecular biology, light oil</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>8042475</td>
			<td>mineral oil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-WASP fragment WWA (aa400&#8211;501, VCA-His)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>VCA-His is purified using lab protocol. The protocol can be provided upon reasonable requests</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oregon Green 488 1,2-Dihexadecanoyl-sn-Glycero-3-Phosphoethanolamine (Oregon Green 488 DHPE)</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>O12650</td>
			<td>DHPE</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>7447407</td>
			<td>KCl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>57-50-1</td>
			<td>sucrose</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-Casein from bovine milk</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C6905-250MG</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro reconstitution of the actin cytoskeleton inside giant unilamellar vesicles

세포의 주요 기계 기계 인 액틴 세포 골격은 세포 변형, 분열, 이동 및 부착을 포함한 수많은 필수적인 물리적 세포 활동을 매개합니다. 그러나, 생체내에서 액틴 네트워크의 역학 및 구조를 연구하는 것은 살아있는 세포 내의 생화학적 및 유전적 조절에 의해 복잡하다. 세포 내 생화학 적 조절이없는 최소한의 모델을 구축하기 위해 액틴은 거대한 unilamellar vesicles (GUV, 리포솜이라고도 함) 내부에 캡슐화됩니다. 생체모방 리포솜은 세포 크기이며 세포 골격 네트워크의 기계적 및 동적 특성에 대한 정량적 통찰력을 촉진하여 상향식 합성 생물학을위한 실행 가능한 경로를 열어줍니다. 캡슐화를 위해 리포솜을 생성하기 위해 역전 에멀젼 방법 (에멀젼 전달 방법이라고도 함)이 사용되며, 이는 복잡한 용액을 리포솜으로 캡슐화하여 다양한 세포 모방 시스템을 제조하는 가장 성공적인 기술 중 하나입니다. 이 방법으로, 관심있는 단백질의 혼합물이 내부 완충액에 첨가되고, 이는 나중에 인지질 함유 광유 용액에서 유화되어 단층 지질 방울을 형성한다. 원하는 리포솜은 지질/오일-물 계면을 가로지르는 단층 지질 방울로부터 생성된다. 이 방법은 농축된 액틴 중합체를 원하는 지질 성분을 갖는 리포솜 내로 캡슐화할 수 있게 하여, 생체모방 세포골격 네트워크의 시험관내 재구성을 위한 길을 닦아준다.

반전된 에멀젼 기술에 기초한 리포좀의 제조는 도 1에 그래픽으로 그리고 개략적으로 도시되어 있다.
먼저, 비어있는(bare) 리포좀(직경 5-50 μm)을 인지질(EPC)과 형광 지질(DHPE)로 구성하여 제조하였다. 밝고 먼 적색 형광 염료를 대조군 실험으로서 베어 리포좀 내에 캡슐화하였다. 지질 단일층이 액적의 주변에서 성공적으로 형성되었는지 여부는 <strong clas...

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In Vitro Reconstitution of the Actin Cytoskeleton Inside Giant Unilamellar Vesicles

이 원고에서는 F-actin 세포 골격을 거대한 unilamellar 지질 소포 (리포솜이라고도 함)로 캡슐화하는 실험 기술과 리포솜 막의 내부 전단지에 피질 생모방 F- 액틴 층을 형성하는 방법을 보여줍니다.

체외 거대한 Unilamellar 소포 내부의 Actin Cytoskeleton 재구성

The actin cytoskeleton, the principal mechanical machinery in the cell, mediates numerous essential physical cellular activities, including cell ...

이 조치는 복잡한 생화학 적 규제가없는 세포의 최소 모델을 구축합니다. 사용 된 기술은 높은 수율의 리포좀을 생성 할 수 있으며 세포 골격 단백질에 대한 높은 캡슐화 효율을 가질 수 있습니다. 이 측정은 다양한 단백질과 미세 입자 및 자체 준비 마이크로 수영 선수와 같은 큰 물체의 캡슐화에 적용될 수 있습니다.개인은 처음 몇 번의 시도 동안 리포좀 수율을 높이는 데 어려움을 겪고 있습니다. 수율을 높이기 위해 자세한 내용은 원고의 섹션을 정기적으로 토론하는 것이 좋습니다. 시작하기 위해, 0.1 밀리몰 CACL 2, 10 밀리몰 HEPES, 1 밀리몰 DTT, 0.5 밀리몰 DAPCO, 320 밀리몰 수크로스 및 0.2 밀리몰 ATP를 혼합함으로써 총 부피 5 밀리리터의 수성 내부 비중합 완충액을 제조한다.섭씨 4도에서 내부 비중합 완충액에 단백질을 첨가하여 단백질 혼합물을 준비합니다. 액틴 층을 형성하려면 100 나노 몰 겔 칼린, 4 마이크로 몰 코 팔린 및 2.2 마이크로 몰 VCA HEZ를 단백질 혼합물에 첨가하십시오. 대조 실험으로 단백질 혼합물을 밀리리터당 100마이크로그램 형광 염료로 대체합니다.100 밀리몰 염화칼륨을 혼합하여 총 부피 5 밀리리터의 수성 내부 중합 완충액을 준비한다. 4 밀리몰 염화 마그네슘, 10 밀리몰 hepes, 1 밀리몰 DTT, 0.5 밀리몰 DABCO, 10 밀리몰 ATP 및 80 밀리몰 자당. 내부 비중합 완충액과 내부 중합 완충액을 1:1의 부피비로 혼합하여 최종 완충액을 준비하고, 리포좀 내에 캡슐화될 총 부피의 내부 수용액을 수득한다.10 밀리몰 HEPES, 50 밀리몰 염화칼륨, 2 밀리몰 마그네슘 클로라이드, 0.2 밀리몰 칼슘 클로라이드, 2 밀리몰 ATP, 1 밀리몰 DTT, 0.5 밀리몰 DAPCO, 212 밀리몰 포도당 및 0.1 밀리리터 베타 케이싱을 혼합함으로써 총 부피 150 마이크로리터의 수성 외부 완충액을 준비한다. 지질 오일 혼합물을 준비하려면 먼저 EGGPC 밀리리터 당 25 밀리그램의 100 마이크로 리터를 유리 바이알에 첨가하십시오. 아르곤 가스로 클로로포름을 증발시켜 바이알 바닥에 건조한 고체 지질 필름을 남깁니다.액틴 층을 형성하려면 클로로포름이 증발하기 전에 EGGPC와 니켈 지질의 비율을 10:1로 니켈 지질에 첨가하고 혼합합니다. 미네랄 오일 2 밀리리터를 첨가하십시오. 클로로포름을 증발시키고 지질 오일 혼합물을 실온에서 1시간 동안 수조에서 초음파 처리하여 지질을 재현탁시킨다.관심있는 단백질을 함유하는 단일층 지질 방울을 제조하기 위해 오일 에멀젼에서 최종 완충액을 준비한다. 플라스틱 튜브에 100 마이크로리터의 지질 오일 혼합물을 취하여 시작하고 10 마이크로리터의 최종 완충액을 지질 오일 혼합물에 첨가합니다. 최종 버퍼가 하나의 액적에 있는지 확인하십시오.유리 주사기를 사용하여 소량의 지질 오일 혼합물을 먼저 그린 다음 주사기 끝을 물방울 주변에 배치하여 최종 완충액 방울을 추출하여 작은 물방울로 분해합니다. 흐린 에멀젼이 형성 될 때까지 위아래로 부드럽게 여러 번 흡인하십시오. 30 마이크로 리터의 외부 버퍼를 별도의 플라스틱 튜브에 넣으십시오.30마이크로리터의 지질 오일 혼합물을 외부 완충액 위에 놓고 약 10분 동안 그대로 두어 계면에서 지질 단층을 형성합니다. 리포좀을 준비하려면 최종 버퍼 오일 에멀젼 50 마이크로 리터를 튜브의 상단 오일 상에 조심스럽게 첨가하십시오. 플라스틱 튜브를 섭씨 4도에서 15분 동안 100배 G로 원심분리합니다.리포좀 형성을 최적화하기 위해 시간과 원심분리 속도를 변경합니다. 필요한 경우 피펫으로 추가 부피를 흡인하여 오일 상을 조심스럽게 제거합니다. 리포좀 상 위에 메니스커스 오일이 생성되지 않도록 피펫 팁을 튜브 측면에 두지 않도록 하십시오.새 피펫으로 피펫의 끝을 자릅니다. 피펫을 나머지 바닥 단계에 천천히 붙이고 수성 부피를 흡인하여 리포좀을 수집합니다. 100 마이크로 리터의 외부 완충액을 배양 챔버의 웰에 붓습니다.수집된 리포좀을 외부 완충액에 부드럽게 증착한 다음 챔버 위에 다른 커버 슬립을 놓습니다. 63 x 오일 이멀젼 대물렌즈를 사용하여 컨포칼 현미경으로 리포좀을 관찰합니다. 488, 647 및 561 나노 미터 레이저 라인을 사용하십시오.형광 표지된 지질, 캡슐화된 형광 염료 및 캡슐화된 형광 표지된 액틴을 각각 관찰하였다. 관심 프레임을 캡처하고 이미지를 TIF 형식으로 저장합니다. 이미지 J 소프트웨어를 사용하여 TIF 파일을 열어 이미지 J.Start의 이미지를 처리하고 분석합니다.이미지로 이동한 다음 조정을 클릭합니다. 밝기 대비가 끝나면 최소 및 최대 설정과 밝기 및 대비 슬라이더를 조정하여 이미지의 밝기와 대비를 원하는 배율로 조정합니다. 도구 모음에서 사각형 선택 도구를 클릭하고 관심 영역을 선택합니다.이미지로 이동한 다음 자르기를 클릭하여 ROI를 자릅니다. 분석으로 이동한 다음 배율 설정을 클릭합니다. 팝업 창에서 픽셀 종횡비 필드에 1.0을 입력하고 마이크로미터를 길이 단위로 설정합니다.픽셀 단위의 거리 필드에 이미지 너비를 픽셀 단위로 입력합니다. 알려진 거리 필드에 실제 이미지 너비를 미크론 단위로 입력합니다. 리포좀의 크기를 측정하려면 도구 모음의 타원형 선택 도구를 사용하여 리포솜의 가장자리를 따라 원을 그립니다.분석으로 이동 한 다음 측정을 클릭하여 리포솜의 직경을 계산할 수있는 원의 면적을 측정합니다. 성공적인 리포좀 생성은 녹색 형광 지질 이중층인 얇은 원형 링의 시각화를 통해 확인됩니다. 488 나노미터 레이저 하에서 공초점 현미경을 사용하여 형광 염료의 캡슐화를 확인했습니다.리포좀의 내부 환경은 647 나노 미터 레이저 하에서 균일하게 형광을 발해야합니다. 리포좀의 형성은 얇은 녹색 원형 고리로 시각화 할 수 있습니다. 리포좀 내부의 네트워크에서 재구성 된 영향은 이질적이며 액틴 필라멘트의 분기 된 네트워크 구조로 나타납니다.분기 아키텍처는 VCA HEZ와 함께 액틴 필라멘트의 핵 생성 및 분기를 동시에 제어하는 ARP 2 3 복합체의 도입으로 촉발되었습니다. 얇지만 조밀하게 분지된 액틴 층은 형광등으로 시각화될 수 있는 리포좀의 이중층의 내부 전단지에 생성됩니다. 지질 오디오 최종 완충액 혼합물은 일반적으로 기포가 유입되지 않도록 유리 주사기를 통해 앞뒤로 펌핑되어야 합니다.혼합물은 공정 후 희끄무레해야합니다. 이 기술은 복잡한 생화학 적 규제가없는 세포의 최소 모델을 구축하기위한 길을 열었습니다. 이 세포 모방 시스템을 통해 연구자들은 세포 골격 단백질, 핵 장치 및 분자 모터의 기계적 및 동적 특성을 탐구 할 수 있습니다.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

In Vitro Reconstitution of the Actin Cytoskeleton Inside Giant Unilamellar Vesicles

The Encapsulation of Cell-free Transcription and Translation Machinery in Vesicles for the Construction of Cellular Mimics

휴대 모방 자의 건설을위한 소포는의 셀이없는 전사 및 번역 기계의 캡슐화

As interest shifts from individual molecules to systems of molecules, an increasing number of laboratories have sought to build from the bottom up ...

연구

생체공학

Eye Irritation Test (EIT) for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial (RhCE) Tissue Model

Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model

복원 된 인간의 각막 모양의 상피 (RHCE) 조직 모델을 사용하여 눈에 자극성 화학 물질의 위험 식별을위한 눈 자극 시험 (EIT)

To comply with the Seventh Amendment to the EU Cosmetics Directive and EU REACH legislation, validated non-animal alternative methods for reliable and ...

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

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<em&gt; 체외</em쥐의 추간판의&gt; 장기 문화 모델

Intervertebral disc (IVD) degeneration is a significant contributor to low back pain. The IVD is a fibrocartilaginous joint that serves to transmit and ...

The Organoid Reconstitution Assay (ORA) for the Functional Analysis of Intestinal Stem and Niche Cells

The Organoid Reconstitution Assay ORA for the Functional Analysis of Intestinal Stem and Niche Cells

장 줄기와 틈새 세포의 기능 분석을 위한 Organoid 재구성 분석 결과 (오 라)

The intestinal epithelium is characterized by an extremely rapid turnover rate. In mammals, the entire epithelial lining is renewed within 4 - 5 days. ...

Decellularization of Whole Human Heart Inside a Pressurized Pouch in an Inverted Orientation

거꾸로 방향 가압된 주머니 안에 전체 인간의 마음의 decellularization

The ultimate solution for patients with end-stage heart failure is organ transplant. But donor hearts are limited, immunosuppression is required, and ...

Evaluation of the Storage Stability of Extracellular Vesicles

세포 밖 소포체의 저장 안정성 평가

Extracellular vesicles (EVs) are promising targets in current research, to be used as drugs, drug-carriers, and biomarkers. For their clinical ...

Bioparticle Microarrays for Chemotactic and Molecular Analysis of Human Neutrophil Swarming in vitro

생체 외에서 인간 호중구 떼의 화학 및 분자 분석을 위한 생체 입자 미세어레이

Neutrophil swarming is a cooperative process by which neutrophils seal off a site of infection and promote tissue reorganization. Swarming has classically ...

Advanced 3D Liver Models for In vitro Genotoxicity Testing Following Long-Term Nanomaterial Exposure

장기 나노 물질 노출 다음 체외 물질 독성 테스트를 위한 고급 3D 간 모델

Due to the rapid development and implementation of a diverse array of engineered nanomaterials (ENM), exposure to ENM is inevitable and the development of ...