Name: in vitro reconstitution of the actin cytoskeleton inside giant unilamellar vesicles
Uploaded: 2022-08-25T13:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vitro Reconstitution of the Actin Cytoskeleton Inside Giant Unilamellar Vesicles at JoVE.com

Vi anerkjenner finansiering ARO MURI W911NF-14-1-0403 til MPM, National Institutes of Health (NIH) R01 1R01GM126256 til MPM, National Institutes of Health (NIH) U54 CA209992, NIH RO1 GM126256, NIH U54 CA209992, University of Michigan / Genentech, SUBK00016255 og Human Frontiers Science Program (HFSP) tilskuddsnummer RGY0073/2018 til MPM Enhver mening, funn, konklusjoner eller anbefalinger uttrykt i dette materialet er de av forfatterne (e) og gjenspeiler ikke nødvendigvis synspunktene til ARO, NIH eller HFSP. SC anerkjenner fruktbare diskusjoner med V. Yadav, C. Muresan og S. Amiri.

1. Fremstilling av buffere og proteinløsninger
<ol><li>Forbered den vandige indre ikke-polymerisasjonsbufferen (INP) i et totalt volum på 5 ml ved å blande 0,1 mM CaCl 2, 10 mM HEPES (pH 7,5), 1 mM DTT, 0,5 mM Dabco, 320 mM sukrose og0,2 mM ATP.</li>
	<li>Forbered proteinblandingen (PM) ved å tilsette proteiner til INP-bufferen ved 4 °C med følgende konsentrasjoner: 11,2 μM ikke-fluorescerende G-aktin, 2,8 μM fluorescerende merket aktin og 0,24 μM Arp2/3 (materialtabell</str...

Flere viktige trinn bestemmer suksessen til et høyt utbytte av liposomer under forberedelsesprosessen. For å oppløse lipidfilmen helt i oljen, må prøven sonikeres til lipidfilmen i bunnen av glassflasken forsvinner helt. Etter sonikering må lipid-oljeblandingen lagres over natten ved romtemperatur under mørke forhold for at lipidmolekylene skal dispergere ytterligere29. Blandingen kan oppbevares ved 4 °C i opptil en uke. Ved fremstilling av en FB / oljeemulsjon med monolags lipiddråper so...

Aktincytoskelettet spiller en grunnleggende rolle i konstruksjonen av cellens intracellulære arkitektur ved å koordinere kontraktilitet på molekylært nivå og kraftgenerering 1,2,3. Som et resultat formidler den mange viktige cellulære aktiviteter, inkludert celledeformasjon4,5, divisjon6, migrasjon 7,8 og vedheft9. In vitro-rekonstitueringen av actin-nettverk har fått enorm oppmerksomhet de siste årene 10,11,12,13,14,15,16,17. Målet med rekonstituering er å bygge en minimal modell av cellen uten den komplekse biokjemiske reguleringen som eksisterer i levende celler. Dette gir et kontrollerbart miljø for å undersøke spesifikke intracellulære aktiviteter og letter identifisering og analyse av forskjellige komponenter i aktincytoskelettet18,19. Videre gir innkapslingen av in vitro aktinnettverk inne i fosfolipid gigantiske unilamellære vesikler (GUV, liposomer) et begrenset, men deformerbart rom med en semi-permeabel grense. Det etterligner det fysiologiske og mekaniske mikromiljøet til aktinmaskineriet i cellen 9,20,21,22.
Blant ulike metoder for å forberede liposomer er lipidfilmhydreringsmetoden (også kjent som hevelsesmetoden) en av de tidligste teknikkene23. Den tørre lipidfilmen hydrerer med tilsetning av buffere, og danner membranøse bobler som til slutt blir vesikler24. For å produsere større vesikler med høyere utbytte, bruker en forbedret metode som går videre fra filmhydreringsmetoden, kjent som elektroformasjonsmetoden25, et AC-elektrisk felt for effektivt å fremme hydreringsprosessen26. De viktigste begrensningene ved disse hydreringsbaserte metodene for aktininnkapsling er at den har lav innkapslingseffektivitet av høyt konsentrerte proteiner, og den er bare kompatibel med spesifikke lipidsammensetninger24. Den inverterte emulsjonsteknikken har til sammenligning færre begrensninger for lipidkomponenter og proteinkonsentrasjoner20,27,28,29. I denne metoden tilsettes en blanding av proteiner for innkapsling til den indre vandige bufferen, som senere emulgeres i en lipidholdig mineraloljeløsning, og danner lipid-monolagsdråper. Monolags lipiddråper krysser deretter gjennom et annet lipid / olje-vanngrensesnitt gjennom sentrifugering for å danne dobbeltlags lipidvesikler (liposomer). Denne teknikken har vist seg å være en av de mest vellykkede strategiene for aktininnkapsling24,30. Separat er det noen mikrofluidiske enhetsmetoder, inkludert pulserende spyling 31,32, forbigående membranutkast33 og cDICE-metoden34. Likhetene mellom den inverterte emulsjonsmetoden og den mikrofluidiske metoden er lipidløsningsmidlet (olje) som benyttes og innføringen av lipid / olje-vann-grensesnitt for dannelsen av den ytre brosjyren av liposomer. Derimot krever genereringen av liposomer ved den mikrofluidiske metoden et oppsett av mikrofluidiske enheter og ledsages av olje fanget mellom de to brosjyrene i dobbeltlaget, noe som krever et ekstra trinn for oljefjerning35.
I dette manuskriptet brukte vi den inverterte emulsjonsteknikken for å fremstille liposomer som innkapsler et polymerisert F-aktinnettverk som tidligere brukt22. Proteinblandingen for innkapsling ble først plassert i en buffer med ikke-polymeriserende forhold for å opprettholde aktin i sin kuleformede (G) form. Hele prosessen ble utført ved 4 °C for å forhindre tidlig aktinpolymerisering, som senere ble utløst ved å la prøven varmes opp til romtemperatur. En gang ved romtemperatur polymeriserer aktinet til sin filamentøse (F) form. En rekke aktinbindende proteiner kan tilsettes den indre vandige bufferløsningen for å studere proteinfunksjoner og egenskaper, og dermed gi ytterligere innsikt i samspillet med aktinnettverket og membranoverflaten. Denne metoden kan også brukes til innkapsling av forskjellige proteiner av interesse36 og store gjenstander (mikropartikler, selvdrevne mikroswimmere, etc.) nær størrelsen på de endelige liposomene 28,37.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-{[n(5-amino-1-carboxypentyl)iminodiacetic acid]succinyl} nickel salt (DOGS-NTA-Ni)&#160;</td>
			<td>Avanti Polar Lipids Inc.</td>
			<td>231615773</td>
			<td>Nickel Lipid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1,4-Diazabicyclo[2.2.2]octane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D27802-25G</td>
			<td>DABCO</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Actin protein (&#62;99% pure): rabbit skeletal muscle</td>
			<td>Cytoskeleton, Inc</td>
			<td>AKL99-D</td>
			<td>non-fluorescent G-actin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Actin protein (rhodamine): rabbit skeletal muscle</td>
			<td>Cytoskeleton, Inc</td>
			<td>AR05</td>
			<td>fluorescently labeled actin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adenosine 5&#8242;-triphosphate disodium salt hydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A2383-10G</td>
			<td>ATP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 dye</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td></td>
			<td>fluorescent dye</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Andor iQ3</td>
			<td>Andor Technologies</td>
			<td></td>
			<td>control and acquisition software for confocal microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arp2/3 Protein Complex: Porcine Brain</td>
			<td>Cytoskeleton, Inc</td>
			<td>RP01P-A</td>
			<td>Arp 2/3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dihydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>10035048</td>
			<td>CaCl2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chamlide Chambers (4-well for 12 mm round coverslip)</td>
			<td>Quorum Technologies</td>
			<td></td>
			<td>incubation chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cofilin protein: human recombinant</td>
			<td>Cytoskeleton, Inc</td>
			<td>CF01-C</td>
			<td>cofilin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal Microscope (63&#215; oil-immersion objective)</td>
			<td>Andor Technologies</td>
			<td>LEICA DMi8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-(+)-GLUCOSE BIOXTRA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G7528</td>
			<td>glucose</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dithiothreitol</td>
			<td>DOT Scientific&#160;</td>
			<td>DSD11000-10</td>
			<td>DTT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelsolin Protein: Homo Sapiens Recombinant</td>
			<td>Cytoskeleton, Inc</td>
			<td>HPG6</td>
			<td>gelsolin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton 1750 Gastight Syringe, 500 &#181;L, cemented needle, 22 G, 2&#34; conical tip</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td>UX-07940-53</td>
			<td>glass syringe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>AmericanBio</td>
			<td>7365-45-9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ/Fiji</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>https://imagej.net/tutorials/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-alpha-Phosphatidylcholine</td>
			<td>Avanti Polar Lipids Inc.</td>
			<td>97281442</td>
			<td>EPC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>7786303</td>
			<td>MgCl2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil, BioReagent, for molecular biology, light oil</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>8042475</td>
			<td>mineral oil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-WASP fragment WWA (aa400&#8211;501, VCA-His)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>VCA-His is purified using lab protocol. The protocol can be provided upon reasonable requests</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oregon Green 488 1,2-Dihexadecanoyl-sn-Glycero-3-Phosphoethanolamine (Oregon Green 488 DHPE)</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>O12650</td>
			<td>DHPE</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>7447407</td>
			<td>KCl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>57-50-1</td>
			<td>sucrose</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-Casein from bovine milk</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C6905-250MG</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro reconstitution of the actin cytoskeleton inside giant unilamellar vesicles

Aktincytoskelettet, det viktigste mekaniske maskineriet i cellen, formidler mange viktige fysiske cellulære aktiviteter, inkludert celledeformasjon, deling, migrasjon og adhesjon. Imidlertid er studiet av dynamikken og strukturen til aktinnettverket in vivo komplisert av den biokjemiske og genetiske reguleringen i levende celler. For å bygge en minimal modell uten intracellulær biokjemisk regulering, er aktin innkapslet i gigantiske unilamellære vesikler (GUV, også kalt liposomer). De biomimetiske liposomene er i cellestørrelse og muliggjør en kvantitativ innsikt i de mekaniske og dynamiske egenskapene til cytoskelettnettverket, og åpner en levedyktig rute for bottom-up syntetisk biologi. For å generere liposomer for innkapsling, benyttes den inverterte emulsjonsmetoden (også referert til som emulsjonsoverføringsmetoden), som er en av de mest vellykkede teknikkene for innkapsling av komplekse løsninger i liposomer for å fremstille forskjellige cellelignende systemer. Med denne metoden tilsettes en blanding av proteiner av interesse til den indre bufferen, som senere emulgeres i en fosfolipidholdig mineraloljeløsning for å danne monolags lipiddråper. De ønskede liposomene genereres fra monolags lipiddråper som krysser et lipid / olje-vann-grensesnitt. Denne metoden muliggjør innkapsling av konsentrerte aktinpolymerer i liposomene med ønskede lipidkomponenter, og baner vei for in vitro rekonstituering av et biomimicking cytoskjelettnettverk.

Fremstillingen av liposomer basert på den omvendte emulsjonsteknikken er illustrert grafisk og skjematisk i figur 1.
Først ble tomme (bare) liposomer (~ 5-50 μm i diameter) som var sammensatt av fosfolipid (EPC) og fluorescerende lipid (DHPE) fremstilt. Et lyst, langt rødt fluorescerende fargestoff ble innkapslet i nakne liposomer som et kontrolleksperiment. Hvorvidt et lipidmonolag har blitt dannet i periferien av dråpen, kan bestemmes ved å observere monol...

Watch this Scientific Journal Video about In Vitro Reconstitution of the Actin Cytoskeleton Inside Giant Unilamellar Vesicles at JoVE.com

In Vitro Reconstitution of the Actin Cytoskeleton Inside Giant Unilamellar Vesicles

I dette manuskriptet demonstrerer vi eksperimentelle teknikker for å innkapsle F-aktincytoskelettet i gigantiske unilamellære lipidvesikler (også kalt liposomer), og metoden for å danne et cortex-biomimicking F-aktinlag ved den indre brosjyren av liposommembranen.

In vitro Rekonstituering av aktincytoskjelettet inne i gigantiske unilamellære vesikler

The actin cytoskeleton, the principal mechanical machinery in the cell, mediates numerous essential physical cellular activities, including cell ...

Dette tiltaket bygger en minimumsmodell av cellen uten komplekse biokjemiske forskrifter. Teknikken som brukes kan generere høyt utbytte av liposomer og har høy innkapslingseffektivitet for cytoskelettproteiner. Dette tiltaket kan brukes til innkapsling av forskjellige proteiner og store gjenstander som mikropartikler og selvforberedende mikrosvømmere.En person sliter med å øke liposomutbyttet for de første forsøkene. Det anbefales å regelmessig diskutere delen av manuskriptet for flere detaljer for å øke utbyttet. Til å begynne med, fremstill den vandige indre ikke-polymerisasjonsbufferen i et totalt volum på fem milliliter ved å blande 0, 1 millimolar CACL to, 10 millimolar HEPES, en millimolar DTT, 0, 5 millimolar DAPCO, 320 millimolar sukrose og 0, 2 millimolar ATP.Forbered proteinblandingen ved å tilsette proteiner til den indre ikke-polymerisasjonsbufferen ved fire grader Celsius. For å danne et aktinlag, tilsett 100 nanomolar gellcalin, fire mikromolar coughalin og 2,2 mikromolar VCA HEZ til proteinblandingen. Som et kontrolleksperiment, erstatt proteinblanding med 100 mikrogram per milliliter fluorescerende fargestoff.Forbered den vandige indre polymerisasjonsbufferen i et totalt volum på fem milliliter ved å blande 100 millimolært kaliumklorid. Fire millimolar magnesiumklorid, 10 millimolar HEPES, en millimolar DTT, 0,5 millimolar DABCO, 10 millimolar ATP og 80 millimolar sukrose. Forbered den endelige bufferen ved å blande indre ikke-polymerisasjonsbuffer og indre polymerisasjonsbuffer ved et volumforhold på en til en, for å gi den indre vandige løsningen i et totalt volum på 30 mikroliter som vil bli innkapslet i liposomet.Forbered den vandige utvendige bufferen i et totalt volum på 150 mikroliter ved å blande 10 millimolar HEPES, 50 millimolar kaliumklorid, to millimolar magnesiumklorid, 0,2 millimolar kalsiumklorid, to millimolar ATP, en millimolar DTT, 0,5 millimolar DAPCO, 212 millimolar glukose og 0,1 milligram per milliliter beta-foringsrør. For å forberede lipidoljeblandingen, begynn med å tilsette 100 mikroliter 25 milligram per milliliter EGGPC i et glassflaske. Fordamp kloroform med argongass og etterlat en tørr, fast lipidfilm i bunnen av hetteglasset.For å danne et aktinlag, tilsett nikkellipid i et 10 til ett forhold mellom EGGPC og nikkellipid og bland, før fordampning av kloroform. Tilsett to milliliter mineralolje. Fordamp kloroformen og sonikere lipidoljeblandingen ved romtemperatur i et bad i en time for å resuspendere lipidene.Forbered en endelig buffer i oljeemulsjon for fremstilling av monolags lipiddråper som inneholder proteinet av interesse. Start med å ta 100 mikroliter av lipidoljeblandingen i et plastrør og tilsett 10 mikroliter endelig buffer til lipidoljeblandingen. Forsikre deg om at den endelige bufferen er i ett dråpe.Bruk en glasssprøyte til å trekke en liten mengde lipidoljeblanding først og deretter den endelige bufferdråpen ved å plassere sprøytespissen i periferien av dråpen for å bryte den opp i små dråper. Aspirer forsiktig opp og ned flere ganger til en uklar emulsjon dannes. Sett 30 mikroliter utvendig buffer i et separat plastrør.Plasser 30 mikroliter av lipidoljeblandingen på toppen av utvendig buffer og la den sitte i ca. 10 minutter for å utvikle et lipidmonolag ved grensesnittet. For å forberede liposomer, tilsett forsiktig 50 mikroliter av den endelige bufferoljeemulsjonen, til den øverste oljefasen av røret. Sentrifuge plastrøret ved 100 ganger G i 15 minutter ved fire grader Celsius.Varier tid og sentrifugeringshastighet, for å optimalisere for liposomdannelse. Fjern oljefasen forsiktig med pipettesuger ekstra volum om nødvendig. Pass på at pipettespissen ikke legges på siden av røret for å unngå å lage en menisk olje på toppen av liposomfasen.Skjær pipetten av pipetten med en ny pipette. Stikk pipetten sakte inn i den gjenværende bunnfasen og aspirer det vandige volumet for å samle liposomer. Hell 100 mikroliter utvendig buffer i brønnen til et inkubasjonskammer.Deponer de oppsamlede liposomene forsiktig i den utvendige bufferen og legg deretter en annen dekselslipp på toppen av kammeret. Observer liposomer med et konfokalt mikroskop ved hjelp av et 63 x oljenedsenkningsmål. Bruk 488, 647 og 561 nanometer laserlinjer.For å observere fluorescerende merket lipid, innkapslet fluorescerende fargestoff og innkapslet fluorescerende merket aktin henholdsvis. Ta rammene av interesse og lagre bildene i TIF-format. Behandle og analyser bilder i bilde J.Start ved å åpne TIF-filen, ved hjelp av bilde J programvare.Gå til bildet, og klikk deretter på juster. Etterfulgt av lysstyrkekontrast, juster lysstyrken og kontrasten til bildet til ønsket skala ved å justere minimums- og maksimumsinnstillingene og lysstyrke- og kontrastglidebryterne. Klikk på rektangelvalgverktøyet i verktøylinjen og velg interesseområdet.Gå til bilde, og klikk deretter beskjær for å beskjære avkastningen. Gå til analyse, og klikk deretter angi skala. I popup-vinduet skriver du inn 1.0 i pikselstørrelsesforholdsfeltet og angir mikrometer som lengdeenhet.I feltet avstand i piksler angir du bildebredden i piksler. I det kjente avstandsfeltet skriver du inn den virkelige bildebredden i mikron. For å måle størrelsen på liposomet, bruk det ovale markeringsverktøyet på verktøylinjen, tegne en sirkel langs kanten av liposomet.Gå til analyser, klikk deretter mål, for å måle området av sirkelen, hvorfra diameteren av liposomet kan beregnes. Vellykket liposomgenerering verifiseres gjennom visualisering av den tynne sirkulære ringen som er det grønne fluorescerende lipid-dobbeltlaget. Under en 488 nanometer laser ved hjelp av konfokal mikroskopi for å bekrefte innkapsling av fluorescerende fargestoff.Det indre miljøet til liposomene skal være jevnt fluorescerende under en 647 nanometer laser. Dannelsen av liposomer kan visualiseres av de tynne grønne sirkulære ringene. Den rekonstituerte affekten i nettverk inne i liposomer er heterogen, og manifesterer seg som forgrenede nettverksstrukturer av aktinfilamenter.Grenarkitekturen ble utløst av introduksjonen av ARP to tre-komplekset, som samtidig styrer kjernedannelsen og forgreningen av aktinfilamenter, sammen med VCA HEZ. Et tynt, men tett forgrenet aktinlag opprettes ved den indre brosjyren av dobbeltlaget av liposomer som kan visualiseres som en fluorescerende skal. Den endelige bufferblandingen for lipidlyd må vanligvis pumpes frem og tilbake gjennom en glasssprøyte for å unngå å introdusere luftbobler.Blandingen må være hvitaktig etter prosess. Denne teknikken banet vei for å bygge en minimal modell av cellen, uten komplekse biokjemiske forskrifter. Med dette cellelignende systemet kan forskere utforske de mekaniske og dynamiske egenskapene til cytoskelettproteiner, nukleator og molekylmotor.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

In Vitro Reconstitution of the Actin Cytoskeleton Inside Giant Unilamellar Vesicles

The Encapsulation of Cell-free Transcription and Translation Machinery in Vesicles for the Construction of Cellular Mimics

Den Innkapsling av Cell-free transkripsjon og oversettelse Machinery i Blemmer for bygging av Cellular Etterligner

As interest shifts from individual molecules to systems of molecules, an increasing number of laboratories have sought to build from the bottom up ...

Eye Irritation Test (EIT) for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial (RhCE) Tissue Model

Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model

Øyeirritasjonstest (EIT) for fareidentifikasjon for Eye irriterende kjemikalier som bruker Rekonstruert Menneskelig Hornhinnen lignende Epithelial (RHCE) Tissue Modell

To comply with the Seventh Amendment to the EU Cosmetics Directive and EU REACH legislation, validated non-animal alternative methods for reliable and ...

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

en<em&gt; In Vitro</em&gt; Organ Culture Modell av Murine mellomvirvelskive

Intervertebral disc (IVD) degeneration is a significant contributor to low back pain. The IVD is a fibrocartilaginous joint that serves to transmit and ...

The Organoid Reconstitution Assay (ORA) for the Functional Analysis of Intestinal Stem and Niche Cells

The Organoid Reconstitution Assay ORA for the Functional Analysis of Intestinal Stem and Niche Cells

Organoid rekonstituering analysen (ORA) for funksjonell analyse av Intestinal stammen og nisje celler

The intestinal epithelium is characterized by an extremely rapid turnover rate. In mammals, the entire epithelial lining is renewed within 4 - 5 days. ...

Decellularization of Whole Human Heart Inside a Pressurized Pouch in an Inverted Orientation

Decellularization av hele hjerte inne i en trykksatt pose i en omvendt retning

The ultimate solution for patients with end-stage heart failure is organ transplant. But donor hearts are limited, immunosuppression is required, and ...

Evaluation of the Storage Stability of Extracellular Vesicles

Evaluering av lagrings stabiliteten til ekstracellulære blemmer

Extracellular vesicles (EVs) are promising targets in current research, to be used as drugs, drug-carriers, and biomarkers. For their clinical ...

Bioparticle Microarrays for Chemotactic and Molecular Analysis of Human Neutrophil Swarming in vitro

Biopartikkel Mikroarrayer for kjemotaktisk og molekylær analyse av human nøytrofil svermer in vitro

Neutrophil swarming is a cooperative process by which neutrophils seal off a site of infection and promote tissue reorganization. Swarming has classically ...

Advanced 3D Liver Models for In vitro Genotoxicity Testing Following Long-Term Nanomaterial Exposure

Avanserte 3D levermodeller for in vitro gentoksisitetstesting etter langvarig nanomaterialeeksponering

Due to the rapid development and implementation of a diverse array of engineered nanomaterials (ENM), exposure to ENM is inevitable and the development of ...