Name: isolation of monocyte-macrophage lineage cells from rat bones by secondary adherence method
Uploaded: 2022-07-13T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Monocyte-Macrophage Lineage Cells from Rat Bones by Secondary Adherence Method at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af Natural Science Foundation of Zhejiang Province (tilskudsnr. LY19H060001) og Zhejiang Traditional Chinese Medicine Science and Technology Plan Project (nr. 2022ZB093).

Alle forsøg i denne undersøgelse blev udført i overensstemmelse med retningslinjerne for dyreforsøg fra Zhejiang Chinese Medical University Laboratory Animal Research Center (godkendelsesnr.: IACUC-20181029-11).
1. Celleekstraktion
<ol><li>Sæt Sprague-Dawley rotterne (SD rotter, 1-10 dage gamle, han eller hun) i eutanasiburene fyldt med CO2 med en afbalanceret hastighed på 30%-70% beholdervolumen / minut. Når rotterne mister bevidstheden (20-60 min), skal d...

<ol>
	<li>Jakubzick, C. V., Randolph, G. J., Henson, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monocyte+differentiation+and+antigen-presenting+functions.">Monocyte differentiation and antigen-presenting functions.</a> Nature Reviews. Immunology. 17 (6), 349-362 (2017).</li><li>Locati, M., Curtale, G., Mantovani, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diversity,+mechanisms,+and+significance+of+macrophage+plasticity.">Diversity, mechanisms, and significance of macrophage plasticity.</a> Annual Review of Pathology. 15 (1), 123-147 (2020).</li><li>Boyle, W. J., Simonet, W. S., Lacey, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoclast+differentiation+and+activation.">Osteoclast differentiation and activation.</a> Nature. 423 (6937), 337-342 (2003).</li><li>Ono, T., Nakashima, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+osteoclast+biology.">Recent advances in osteoclast biology.</a> Histochemistry and Cell Biology. 149 (4), 325-341 (2018).</li><li>Zhou, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wnt/&#223;-catenin-mediated+p53+suppression+is+indispensable+for+osteogenesis+of+mesenchymal+progenitor+cells.">Wnt/&#223;-catenin-mediated p53 suppression is indispensable for osteogenesis of mesenchymal progenitor cells.</a> Cell Death &amp; Disease. 12 (6), 521-534 (2021).</li><li>Yu, Q., Zhao, B., He, Q., Zhang, Y., Peng, X. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=microRNA-206+is+required+for+osteoarthritis+development+through+its+effect+on+apoptosis+and+autophagy+of+articular+chondrocytes+via+modulating+the+phosphoinositide+3-kinase/protein+kinase+B-mTOR+pathway+by+targeting+insulin-like+growth+factor-1.">microRNA-206 is required for osteoarthritis development through its effect on apoptosis and autophagy of articular chondrocytes via modulating the phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B-mTOR pathway by targeting insulin-like growth factor-1.</a> Journal of Cellular Biochemistry. 120 (4), 5287-5303 (2019).</li><li>Li, Z., MacDougald, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+models+for+investigating+how+bone+marrow+adipocytes+influence+bone+and+hematopoietic+cellularity.">Preclinical models for investigating how bone marrow adipocytes influence bone and hematopoietic cellularity.</a> Best Practice &amp; Research. Clinical Endocrinology &amp; Metabolism. 35 (4), 101547-101560 (2021).</li><li>Horowitz, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=marrow+adipocytes.">marrow adipocytes.</a> Adipocyte. 6 (3), 193-204 (2017).</li><li>Maridas, D. E., Rendina-Ruedy, E., Le, P. T., Rosen, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation,+culture,+and+differentiation+of+bone+marrow+stromal+cells+and+osteoclast+progenitors+frommice.">Isolation, culture, and differentiation of bone marrow stromal cells and osteoclast progenitors frommice.</a> Journal of Visualized Experiments. (131), e56750 (2018).</li><li>Schyns, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-classical+tissue+monocytes+and+two+functionally+distinct+populations+of+interstitial+macrophages+populate+the+mouse+lung.">Non-classical tissue monocytes and two functionally distinct populations of interstitial macrophages populate the mouse lung.</a> Nature Communications. 10 (1), 3964-3980 (2019).</li><li>Atif, S. M., Gibbings, S. L., Jakubzick, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+identification+of+interstitial+macrophages+from+the+lungs+using+different+digestion+enzymes+and+staining+strategies.">Isolation and identification of interstitial macrophages from the lungs using different digestion enzymes and staining strategies.</a> Methods in Molecular Biology. 1784, 69-76 (2018).</li><li>Scheven, B. A., Milne, J. S., Robins, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sequential+culture+approach+to+study+osteoclast+differentiation+from+nonadherent+porcine+bone+marrow+cells.">A sequential culture approach to study osteoclast differentiation from nonadherent porcine bone marrow cells.</a> In Vitro Cellular &amp; Developmental Biology. Animal. 34 (7), 568-577 (1998).</li><li>Bradley, E. W., Oursler, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoclast+culture+and+resorption+assays.">Osteoclast culture and resorption assays.</a> Methods in Molecular Biology. , 19-35 (2008).</li><li>Yu, Y. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+cytometric+analysis+of+myeloid+cells+in+human+blood,+bronchoalveolar+lavage,+and+lung+tissues.">Flow cytometric analysis of myeloid cells in human blood, bronchoalveolar lavage, and lung tissues.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 54 (1), 13-24 (2016).</li><li>Gibbings, S. L., Jakubzick, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+consistent+method+to+identify+and+isolate+mononuclear+phagocytes+from+human+lung+and+lymph+nodes.">A consistent method to identify and isolate mononuclear phagocytes from human lung and lymph nodes.</a> Methods in Molecular Biology. 1799, 381-395 (2018).</li><li>Jacquin, C., Gran, D. E., Lee, S. K., Lorenzo, J. A., Aguila, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+multiple+osteoclast+precursor+populations+in+murine+bone+marrow.">Identification of multiple osteoclast precursor populations in murine bone marrow.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 21 (1), 67-77 (2006).</li><li>Gibbings, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three+unique+interstitial+macrophages+in+the+murine+lung+at+steady+state.">Three unique interstitial macrophages in the murine lung at steady state.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 57 (1), 66-76 (2017).</li><li>Higashi, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultra-high-speed+western+blot+using+immunoreaction+enhancing+technology.">Ultra-high-speed western blot using immunoreaction enhancing technology.</a> Journal of Visualized Experiments. (163), e61657 (2020).</li><li>Gallagher, S., Chakavarti, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoblot+analysis.">Immunoblot analysis.</a> Journal of Visualized Experiments. 20 (16), 759 (2008).</li><li>Yin, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glycyrrhizic+acid+suppresses+osteoclast+differentiation+and+postmenopausal+osteoporosis+by+modulating+the+NF-&#954;B,+ERK,+and+JNK+signaling+pathways.">Glycyrrhizic acid suppresses osteoclast differentiation and postmenopausal osteoporosis by modulating the NF-&#954;B, ERK, and JNK signaling pathways.</a> European Journal of Pharmocology. 859, 172550 (2019).</li><li>Liu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LRRc17+controls+BMSC+senescence+via+mitophagy+and+inhibits+the+therapeutic+effect+of+BMSCs+on+ovariectomy-induced+bone+loss.">LRRc17 controls BMSC senescence via mitophagy and inhibits the therapeutic effect of BMSCs on ovariectomy-induced bone loss.</a> Redox Biology. , (2021).</li><li>Jin, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thioacetamide+promotes+osteoclast+transformation+of+bone+marrow+macrophages+by+influencing+PI3K/AKT+pathways.">Thioacetamide promotes osteoclast transformation of bone marrow macrophages by influencing PI3K/AKT pathways.</a> Journal of Orthopedic Surgery and Research. 17 (1), 53-63 (2022).</li></ol>

Osteoklaster er en af de mest betydningsfulde celletyper, der er involveret i forekomsten og udviklingen af knoglesygdomme, samt et af de primære objekter for knoglesygdomsforskning20. Monocyt / makrofager kan differentiere sig til osteoklaster. Da mononukleære makrofager (RAW264.7-celler) er for dyre at købe og let aktiveres under dyrkning, er det vanskeligt at udføre in vitro-differentieringseksperimenter ved hjælp af denne cellelinje. Selvom der er udviklet flere metoder til ekstr...

Det er blevet rapporteret, at monocyt-makrofag-afstamningsceller, der findes i knoglemarven, kan differentiere sig til blodmonocytter og vævsmakrofager 1,2. Ovennævnte celler, som kan differentiere sig til osteoklaster for at afbalancere knoglevækst og udvikling, anvendes almindeligvis som en cellemodel til at inducere osteoklaster in vivo 3,4. Knoglemarv er et specielt væv, der indeholder flere forskellige typer celler, som omfatter, men ikke kun er begrænset til knoglemarv mesenkymale stamceller, knoglemarv monocyt-makrofagceller (BMM'er), hæmatopoietiske stamceller, endotelceller og immunceller. Faktisk antydede flere tidligere undersøgelser, at vedhængende celler, der skyndte sig ud af knoglemarvshulen i den lange knogle, kunne differentiere sig til osteoblaster, osteoklaster, kondrocytter eller adipocytter 5,6,7,8. Selvom forskellige isolations- og dyrkningsmetoder er blevet brugt til at producere forskellige homogene cellepopulationer, er der stadig store udfordringer med at isolere og dyrkeBM'er fra en række forskellige celletyper.
Flere metoder er blevet udviklet til at ekstrahere knoglemarv mononukleære makrofager (BMSC'er). Imidlertid er størstedelen af disse metoder komplekse 9,10,11. For eksempel kræver densitetsgradientcentrifugering et specialiseret sæt, og operationen er tidskrævende og besværlig. Denne metode er egnet til isolering af BMI fra højvolumen blodprøver, men ikke fra knoglemarvsprøver 9,12,13. Derudover er ekstraktion af vævsprøver ved hjælp af collagenasefordøjelse en kompleks og tidskrævende procedure; denne metode anbefales ikke til isolering af BBM'er fra knoglemarvsprøver14,15. Hertil kommer, at selvom flowadskillelse kan resultere i stærkt oprensede monocyt/makrofagpopulationer, kræver det meget store prøvestørrelser og høje instrument- og udstyrskrav10,16. Derudover er mikrobeadberigelsesmetoden ekstremt dyr og er ikke mulig i et generelt laboratorium17.
Derfor blev der i den nuværende undersøgelse foreslået en bekvem, hurtig og billig metode til isolering af mononukleære makrofager fra knoglemarven. Knoglemarvsceller klæbet til forskellige tidspunkter blev brugt til at isolereBMM'er ved hjælp af en sekundær adhærensmetode. BBM'er ekstraheret med ovennævnte metode kunne inducere dannelsen af osteoklaster in vitro og dermed give en enkel og bekvem cellemodel til den fremtidige undersøgelse af osteoporose in vitro.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>35 mm2 cell climbing slices</td>
			<td>NEST Biotechnology</td>
			<td>80102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-cathepsin K</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab19027</td>
			<td>1:1,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD11 isotype control</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab172730</td>
			<td>1 &#956;g/test,1.675 mg/Ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD11b/c</td>
			<td>Absin</td>
			<td>abs124232</td>
			<td>&#160;1&#956;g/test, 1 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-TRAP</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab191406</td>
			<td>1:1,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-&#946;-actin</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>&#160;AF5003</td>
			<td>1:1,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell climbing slices</td>
			<td>NEST Biotechnology</td>
			<td>80102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture dish</td>
			<td>corning</td>
			<td>430167</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture flask</td>
			<td>corning</td>
			<td>430168</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s modified eagle medium (DMEM)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>C11995500BT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10099141C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-rabbit IgG</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab150077</td>
			<td>for IF, 1:2,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>goat anti-rabbit IgG</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab6721</td>
			<td>for WB, 1:2,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M-CSF</td>
			<td>Pepro tech</td>
			<td>400-28</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BL302A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RANKL</td>
			<td>Pepro tech</td>
			<td>400-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SD rat</td>
			<td>Shanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd</td>
			<td></td>
			<td>1-10 days old</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SDS-PAGE gel preparation kit</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>P1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRAP/ALP Staining Kit</td>
			<td>Wako</td>
			<td>294-67001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA solution</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BL512A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wright-Giemsa solution</td>
			<td>Keygen Biotech</td>
			<td>KGA225-1</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of monocyte-macrophage lineage cells from rat bones by secondary adherence method

Med et fald i knoglemineraltætheden er knogler mere tilbøjelige til at bryde, hvilket påvirker patientens livskvalitet negativt. Væksten og udviklingen af knogler reguleres hovedsageligt af osteoblaster og osteoklaster. Det er blevet bredt accepteret, at osteoklaster stammer fra knoglemarv monocyt-makrofagceller (BMM'er). BBM'er og andre hæmatopoietiske stamceller er placeret i knoglemarvshulen. Derfor er det en enorm udfordring at isolere enkeltstabileBM'er fra forskellige og heterogene cellepopulationer. Her præsenterer vi en protokol til isolering afBMM'er fra SD-rotter, kaldet den sekundære adhærens metode. Vedhængende celler dyrket i 24-48 timer i primær kultur blev indsamlet. Flowcytometrisk analyse viste, at ca. 37,94% af cellerne var CD11b / c + (monocyt-makrofag overfladeantigen). Tartratresistent syrefosfatase (TRAP) farvning og western blot analyse viste, at BBM'er kunne differentieres til osteoklaster in vitro. Ovenstående resultater antydede, at de sekundære adhærensceller kunne betragtes som en passende cellulær model til osteoklastdifferentieringsforskning.

Den sekundære klæbende cellepopulation var stabil og ensartet. Med den kontinuerlige celleproliferation blev størstedelen af cellerne større med uregelmæssig form og voksede til en radial klæbende disk (figur 2C, D). Flowcytometri viste, at procentdelen af celler, der udtrykker CD11b / c, en molekylær markør på overfladen af monocyt-makrofag-afstamningsceller, var ca. 37,94% (figur 2A, B...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Monocyte-Macrophage Lineage Cells from Rat Bones by Secondary Adherence Method at JoVE.com

Isolation of Monocyte-Macrophage Lineage Cells from Rat Bones by Secondary Adherence Method

Her præsenterer vi en protokol til isolering afBMM'er fra SD-rotter, kaldet den sekundære adhærens metode.

Isolering af monocyt-makrofag-afstamningsceller fra rotteben ved sekundær adhærens metode

With a decrease of bone mineral density, bones are more likely to fracture, thus negatively affecting a patient's quality of life. The growth and ...

I denne protokol ekstraheres knoglemarv monocyt-makrofagceller ved sekundær adhærens metode. Knoglemarv monocyt-makrofagceller kan med succes differentiere sig til osteoklaster, hvilket giver en stabil cellemodel til undersøgelse af osteoklaster in vitro. Denne metode er velegnet til små knoglemarvsprøver og kan udtrække knoglemarv monocyt-makrofagceller fra knoglemarv enkelt og hurtigt uden at kræve højteknologisk laboratorieudstyr.Stigningen af osteoklaster kan være den potentielle patogenese af osteoporose. Knoglemarv monocyt-makrofagceller har en vis forskningsværdi som osteoklastprecursorceller. Til at begynde med nedsænkes de aflivede rotter i 75% alkohol i 10 minutter til desinfektion.Efter forsigtig fjernelse af alle rottens lemmer med saks og tang, aspireres med PBS ved hjælp af en pipette og skyller blodet, der klæber til lemmerne. Derefter ved to milliliter af 10% FBS DMEM i et fem milliliter rør. Efter overførsel af lemmerne i fem milliliterrøret skal du bruge en saks til at skære lemmerne i røret i små stykker og blande homogenatet for at genoplive knoglemarvscellerne i kulturmediet.Stå i fem minutter, indtil vævsfragmenterne sætter sig til bunden af røret. Tilsæt derefter 10 ml 10% FBS DMEM i en 100 millimeter kulturskål, og overfør derefter supernatanten til kulturskålen. Inkuberes ved 37 grader Celsius i 5% kuldioxid i ca. 24 timer.Efter denne inkubationstid vil størstedelen af mesenkymale stamceller klæbe til kulturskålvæggen og vokse langsomt, mens de fleste knoglemarvsmonocytonofagceller stadig vil blive suspenderet i kulturmediet. Overfør cellesuspensionen i 100 millimeter kulturskålen til en ny 25 centimeter firkantet kolbe og fortsæt med at dyrke cellerne ved 37 grader Celsius i 5% kuldioxid i yderligere 24 timer. Efter at have fjernet det gamle medium omhyggeligt, skal du udskifte med frisk medium, efter at knoglemarvsmonocyt-makrofagceller har klæbet til kolbevæggen.Flowcytometri viste, at procentdelen af celler, der udtrykker CD11b og c, en molekylær markør på overfladen af monocyt-makrofag-afstamningsceller, var ca. 37,94%Med den kontinuerlige celleproliferation blev størstedelen af cellerne større inden for uregelmæssig form og voksede til en radial klæbende skive. TRAP-pletresultaterne viste, at sammenlignet med kontrolgruppen blev antallet af intracellulære lilla røde granulater signifikant forøget i celler induceret med receptoraktivator af nuklear faktor kappa B ligand og makrofagkolonistimulerende faktor. Western blot-analyse viste, at ekspressionsniveauerne af de osteoklastspecifikke proteiner TRAP og cathepsin K blev signifikant forøget i behandlede celler sammenlignet med kontrolgruppen.Det vigtigste i denne procedure er tiden til at indsamle sekundære klæbende celler i 24 til 48 timers primær kultur, knoglemarv monocyt-makrofagceller begynder at klæbe fuldstændigt. Knoglemarv monocyt-makrofagceller isoleret ved denne metode kan induceres i osteoklaster in vitro, hvilket giver en stabil cellemodel til undersøgelse af osteoporose.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Model of Disturbed Flow-Induced Atherosclerosis in Mouse Carotid Artery by Partial Ligation and a Simple Method of RNA Isolation from Carotid Endothelium

Despite the well-known close association, direct evidence linking disturbed flow to atherogenesis has been lacking. We have recently used a modified ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

Isolation, karakterisering og sammenlignende differentiering af humane Dental Pulp stamceller fra blivende tænder ved hjælp af to forskellige metoder

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Isolation of Cancer Stem Cells From Human Prostate Cancer Samples

Isolering af kræft stamceller fra humane Prostata Cancer Prøver

The cancer stem cell (CSC) model has been considerably revisited over the last two decades. During this time CSCs have been identified and directly ...

Method for Obtaining Primary Ovarian Cancer Cells From Solid Specimens

Fremgangsmåde til at opnå primær ovariecancer celler fra Solid Prøver

Reliable tools for investigating ovarian cancer initiation and progression are urgently needed. While the use of ovarian cancer cell lines remains a ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Metode til isoleret<em&gt; Ex vivo</em&gt; Lung Perfusion i en rotte Model: Erfaringer fra at udvikle en rotte EVLP Program

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Isolation of Human Lymphatic Endothelial Cells by Multi-parameter Fluorescence-activated Cell Sorting

Isolering af human lymfeendotelceller af Multi-parameter Fluorescens-aktiveret cellesortering

Lymphatic system disorders such as primary lymphedema, lymphatic malformations and lymphatic tumors are rare conditions that cause significant morbidity ...

Isolation of Endothelial Progenitor Cells from Healthy Volunteers and Their Migratory Potential Influenced by Serum Samples After Cardiac Surgery

Isolering af endotel progenitorceller fra raske frivillige og deres træk Potential Påvirket af Serum Prøver efter hjertekirurgi

Endothelial progenitor cells (EPCs) are recruited from the bone marrow under pathological conditions like hypoxia and are crucially involved in the ...

Isolation and Cultivation of Adult Rat Cardiomyocytes

Isolering og dyrkning af voksen rotte Cardiomyocytes

In an intact heart, adjacent cells influence adult cardiomyocytes. With the method of isolation and cultivation of adult cardiomyocytes, a precise ...

Isolation of Primary Human Decidual Cells from the Fetal Membranes of Term Placentae

Isolering af primære humane Decidual celler fra de føtale membraner af udtrykket efterbyrd

The decidua, also known as the pregnant endometrium, is a critically important reproductive tissue. Decidual cells, comprised mainly of decidualized ...

Isolation of Atrial Cardiomyocytes from a Rat Model of Metabolic Syndrome-related Heart Failure with Preserved Ejection Fraction

Isolering af atrieflimren Cardiomyocytes fra en rotte Model af metabolisk syndrom-relaterede hjertesvigt med bevarede uddrivningsfraktion

In this article, we describe an optimized, Langendorff-based procedure for the isolation of single-cell atrial cardiomyocytes (ACMs) from a rat model of ...