Name: isolation of monocyte-macrophage lineage cells from rat bones by secondary adherence method
Uploaded: 2022-07-13T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Monocyte-Macrophage Lineage Cells from Rat Bones by Secondary Adherence Method at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av Natural Science Foundation i Zhejiang-provinsen (tilskuddsnr. LY19H060001) og Zhejiang Traditional Chinese Medicine Science and Technology Plan Project (nr. 2022ZB093).

Alle eksperimenter i denne studien ble utført i samsvar med retningslinjene for dyreforsøk fra Zhejiang Chinese Medical University Laboratory Animal Research Center (Godkjenning nr. IACUC-20181029-11).
1. Celleutvinning
<ol><li>Sett Sprague-Dawley rotter (SD rotter, 1-10 dager gammel, mann eller kvinne) i eutanasi bur fylt med CO2 med en balansert hastighet på 30%-70% containervolum / minutt. Etter at rottene mister bevisstheten (20-60 min), euthanize rotten ve...

<ol>
	<li>Jakubzick, C. V., Randolph, G. J., Henson, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monocyte+differentiation+and+antigen-presenting+functions.">Monocyte differentiation and antigen-presenting functions.</a> Nature Reviews. Immunology. 17 (6), 349-362 (2017).</li><li>Locati, M., Curtale, G., Mantovani, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diversity,+mechanisms,+and+significance+of+macrophage+plasticity.">Diversity, mechanisms, and significance of macrophage plasticity.</a> Annual Review of Pathology. 15 (1), 123-147 (2020).</li><li>Boyle, W. J., Simonet, W. S., Lacey, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoclast+differentiation+and+activation.">Osteoclast differentiation and activation.</a> Nature. 423 (6937), 337-342 (2003).</li><li>Ono, T., Nakashima, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+osteoclast+biology.">Recent advances in osteoclast biology.</a> Histochemistry and Cell Biology. 149 (4), 325-341 (2018).</li><li>Zhou, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wnt/&#223;-catenin-mediated+p53+suppression+is+indispensable+for+osteogenesis+of+mesenchymal+progenitor+cells.">Wnt/&#223;-catenin-mediated p53 suppression is indispensable for osteogenesis of mesenchymal progenitor cells.</a> Cell Death &amp; Disease. 12 (6), 521-534 (2021).</li><li>Yu, Q., Zhao, B., He, Q., Zhang, Y., Peng, X. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=microRNA-206+is+required+for+osteoarthritis+development+through+its+effect+on+apoptosis+and+autophagy+of+articular+chondrocytes+via+modulating+the+phosphoinositide+3-kinase/protein+kinase+B-mTOR+pathway+by+targeting+insulin-like+growth+factor-1.">microRNA-206 is required for osteoarthritis development through its effect on apoptosis and autophagy of articular chondrocytes via modulating the phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B-mTOR pathway by targeting insulin-like growth factor-1.</a> Journal of Cellular Biochemistry. 120 (4), 5287-5303 (2019).</li><li>Li, Z., MacDougald, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+models+for+investigating+how+bone+marrow+adipocytes+influence+bone+and+hematopoietic+cellularity.">Preclinical models for investigating how bone marrow adipocytes influence bone and hematopoietic cellularity.</a> Best Practice &amp; Research. Clinical Endocrinology &amp; Metabolism. 35 (4), 101547-101560 (2021).</li><li>Horowitz, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=marrow+adipocytes.">marrow adipocytes.</a> Adipocyte. 6 (3), 193-204 (2017).</li><li>Maridas, D. E., Rendina-Ruedy, E., Le, P. T., Rosen, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation,+culture,+and+differentiation+of+bone+marrow+stromal+cells+and+osteoclast+progenitors+frommice.">Isolation, culture, and differentiation of bone marrow stromal cells and osteoclast progenitors frommice.</a> Journal of Visualized Experiments. (131), e56750 (2018).</li><li>Schyns, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-classical+tissue+monocytes+and+two+functionally+distinct+populations+of+interstitial+macrophages+populate+the+mouse+lung.">Non-classical tissue monocytes and two functionally distinct populations of interstitial macrophages populate the mouse lung.</a> Nature Communications. 10 (1), 3964-3980 (2019).</li><li>Atif, S. M., Gibbings, S. L., Jakubzick, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+identification+of+interstitial+macrophages+from+the+lungs+using+different+digestion+enzymes+and+staining+strategies.">Isolation and identification of interstitial macrophages from the lungs using different digestion enzymes and staining strategies.</a> Methods in Molecular Biology. 1784, 69-76 (2018).</li><li>Scheven, B. A., Milne, J. S., Robins, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sequential+culture+approach+to+study+osteoclast+differentiation+from+nonadherent+porcine+bone+marrow+cells.">A sequential culture approach to study osteoclast differentiation from nonadherent porcine bone marrow cells.</a> In Vitro Cellular &amp; Developmental Biology. Animal. 34 (7), 568-577 (1998).</li><li>Bradley, E. W., Oursler, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoclast+culture+and+resorption+assays.">Osteoclast culture and resorption assays.</a> Methods in Molecular Biology. , 19-35 (2008).</li><li>Yu, Y. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+cytometric+analysis+of+myeloid+cells+in+human+blood,+bronchoalveolar+lavage,+and+lung+tissues.">Flow cytometric analysis of myeloid cells in human blood, bronchoalveolar lavage, and lung tissues.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 54 (1), 13-24 (2016).</li><li>Gibbings, S. L., Jakubzick, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+consistent+method+to+identify+and+isolate+mononuclear+phagocytes+from+human+lung+and+lymph+nodes.">A consistent method to identify and isolate mononuclear phagocytes from human lung and lymph nodes.</a> Methods in Molecular Biology. 1799, 381-395 (2018).</li><li>Jacquin, C., Gran, D. E., Lee, S. K., Lorenzo, J. A., Aguila, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+multiple+osteoclast+precursor+populations+in+murine+bone+marrow.">Identification of multiple osteoclast precursor populations in murine bone marrow.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 21 (1), 67-77 (2006).</li><li>Gibbings, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three+unique+interstitial+macrophages+in+the+murine+lung+at+steady+state.">Three unique interstitial macrophages in the murine lung at steady state.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 57 (1), 66-76 (2017).</li><li>Higashi, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultra-high-speed+western+blot+using+immunoreaction+enhancing+technology.">Ultra-high-speed western blot using immunoreaction enhancing technology.</a> Journal of Visualized Experiments. (163), e61657 (2020).</li><li>Gallagher, S., Chakavarti, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoblot+analysis.">Immunoblot analysis.</a> Journal of Visualized Experiments. 20 (16), 759 (2008).</li><li>Yin, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glycyrrhizic+acid+suppresses+osteoclast+differentiation+and+postmenopausal+osteoporosis+by+modulating+the+NF-&#954;B,+ERK,+and+JNK+signaling+pathways.">Glycyrrhizic acid suppresses osteoclast differentiation and postmenopausal osteoporosis by modulating the NF-&#954;B, ERK, and JNK signaling pathways.</a> European Journal of Pharmocology. 859, 172550 (2019).</li><li>Liu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LRRc17+controls+BMSC+senescence+via+mitophagy+and+inhibits+the+therapeutic+effect+of+BMSCs+on+ovariectomy-induced+bone+loss.">LRRc17 controls BMSC senescence via mitophagy and inhibits the therapeutic effect of BMSCs on ovariectomy-induced bone loss.</a> Redox Biology. , (2021).</li><li>Jin, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thioacetamide+promotes+osteoclast+transformation+of+bone+marrow+macrophages+by+influencing+PI3K/AKT+pathways.">Thioacetamide promotes osteoclast transformation of bone marrow macrophages by influencing PI3K/AKT pathways.</a> Journal of Orthopedic Surgery and Research. 17 (1), 53-63 (2022).</li></ol>

Osteoklaster er en av de viktigste celletypene som er involvert i forekomst og utvikling av beinsykdommer, samt en av de primære gjenstandene for beinsykdomsforskning20. Monocytt/makrofager kan skille seg ut i osteoklaster. Siden mononukleære makrofager (RAW264.7-celler) er for dyre å kjøpe og lett aktiveres under kultur, er det vanskelig å utføre in vitro differensieringsforsøk ved hjelp av denne cellelinjen. Selv om det er utviklet flere metoder for å trekke ut monocytter/makrof...

Det har blitt rapportert at monocytt-makrofag avledningsceller som finnes i benmargen kan skille seg ut i blodmonocytter og vevsmakrofager 1,2. Ovennevnte celler, som kan skille seg ut i osteoklaster for å balansere beinvekst og utvikling, brukes ofte som en cellemodell for å indusere osteoklaster i vivo 3,4. Benmarg er et spesielt vev som inneholder flere forskjellige typer celler, som inkluderer, men ikke bare er begrenset til benmarg mesenchymale stamceller, benmarg monocytt-makrofagceller (BMMs), hematopoietiske stamceller, endotelceller og immunceller. Faktisk antydet flere tidligere studier at tilhengerceller rushed ut av benmargshulen i det lange beinet kunne skille seg ut i osteoblaster, osteoklaster, kondrocytter eller adipocytter 5,6,7,8. Selv om ulike isolasjons- og kulturmetoder har blitt brukt til å produsere forskjellige homogene cellepopulasjoner, er det fortsatt store utfordringer med å isolere og dyrke BMMer fra en rekke forskjellige celletyper.
Flere metoder er utviklet for å trekke ut benmarg mononukleære makrofager (BMSCer). Imidlertid er flertallet av disse metodene komplekse 9,10,11. For eksempel krever tetthet gradient sentrifugering et spesialisert sett, og operasjonen er tidkrevende og tungvint. Denne metoden er egnet for isolering av BMMer fra blodprøver med høyt volum, men ikke fra benmargsprøver 9,12,13. I tillegg er utvinning av vevsprøver ved hjelp av kollagenal fordøyelse en kompleks og tidkrevende prosedyre; Denne metoden anbefales ikke for isolering av BMMer fra benmargsprøver14,15. I tillegg, selv om strømningsseparasjon kan resultere i svært rensede monocytt/makrofagpopulasjoner, krever det svært store utvalgsstørrelser og høye instrument- og utstyrskrav10,16. I tillegg er mikrobeadberikelsesmetoden ekstremt dyr og er ikke mulig i et generelt laboratorium17.
Derfor ble det i den nåværende studien foreslått en praktisk, rask og billig metode for isolering av mononukleære makrofager fra benmargen. Benmargceller som fulgte for forskjellige tidspunkter, ble brukt til å isolere BMMer ved hjelp av en sekundær tilslutningsmetode. BMMs ekstrahert med ovennevnte metode kan indusere dannelsen av osteoklaster in vitro, og dermed gi en enkel og praktisk cellemodell for fremtidig studie av osteoporose in vitro.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>35 mm2 cell climbing slices</td>
			<td>NEST Biotechnology</td>
			<td>80102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-cathepsin K</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab19027</td>
			<td>1:1,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD11 isotype control</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab172730</td>
			<td>1 &#956;g/test,1.675 mg/Ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD11b/c</td>
			<td>Absin</td>
			<td>abs124232</td>
			<td>&#160;1&#956;g/test, 1 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-TRAP</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab191406</td>
			<td>1:1,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-&#946;-actin</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>&#160;AF5003</td>
			<td>1:1,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell climbing slices</td>
			<td>NEST Biotechnology</td>
			<td>80102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture dish</td>
			<td>corning</td>
			<td>430167</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture flask</td>
			<td>corning</td>
			<td>430168</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s modified eagle medium (DMEM)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>C11995500BT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10099141C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-rabbit IgG</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab150077</td>
			<td>for IF, 1:2,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>goat anti-rabbit IgG</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab6721</td>
			<td>for WB, 1:2,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M-CSF</td>
			<td>Pepro tech</td>
			<td>400-28</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BL302A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RANKL</td>
			<td>Pepro tech</td>
			<td>400-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SD rat</td>
			<td>Shanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd</td>
			<td></td>
			<td>1-10 days old</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SDS-PAGE gel preparation kit</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>P1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRAP/ALP Staining Kit</td>
			<td>Wako</td>
			<td>294-67001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA solution</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BL512A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wright-Giemsa solution</td>
			<td>Keygen Biotech</td>
			<td>KGA225-1</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of monocyte-macrophage lineage cells from rat bones by secondary adherence method

Med en reduksjon av benmineraltetthet er bein mer sannsynlig å sprekke, og påvirker dermed pasientens livskvalitet negativt. Veksten og utviklingen av bein er hovedsakelig regulert av osteoblaster og osteoklaster. Det har blitt allment akseptert at osteoklaster er avledet fra benmarg monocytt-makrofagceller (BMMer). BMMer og andre hematopoietiske stamceller ligger i benmargshulen. Derfor er det en stor utfordring å isolere enkeltstabile BMMer fra forskjellige og heterogene cellepopulasjoner. Her presenterer vi en protokoll for isolering av BMMer fra SD-rotter, kalt sekundær tilslutningsmetode. Tilhengere celler dyrket i 24-48 timer i primærkulturen ble samlet inn. Strømningscytometrisk analyse viste at omtrent 37,94% av cellene var CD11b/c+ (monocytt-makrofag overflateantigen). Tartratresistent syrefosfatase (TRAP) farging og vestlig blot analyse viste at BMMer kunne skille seg ut i osteoklaster in vitro. Ovennevnte funn antydet at sekundære tilslutningsceller kunne betraktes som en egnet cellulær modell for osteoklastdifferensieringsforskning.

Den sekundære tilhengercellepopulasjonen var stabil og ensartet. Med den kontinuerlige celleproliferasjonen ble de fleste cellene større, med uregelmessig form og vokste til en radial tilhengerdisk (figur 2C, D). Flowcytometri viste at prosentandelen celler som uttrykte CD11b/c, en molekylær markør på overflaten av monocytt-makrofagsavstamningsceller, var ca. 37,94 % (figur 2A, B). For ytter...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Monocyte-Macrophage Lineage Cells from Rat Bones by Secondary Adherence Method at JoVE.com

Isolation of Monocyte-Macrophage Lineage Cells from Rat Bones by Secondary Adherence Method

Her presenterer vi en protokoll for isolering av BMMer fra SD-rotter, kalt sekundær tilslutningsmetode.

Isolering av monocytt-makrofag av slektslinjer fra rottebein ved sekundær tilslutningsmetode

With a decrease of bone mineral density, bones are more likely to fracture, thus negatively affecting a patient's quality of life. The growth and ...

I denne protokollen ekstraheres benmargsmonocytt-makrofagceller ved sekundær tilslutningsmetode. Benmarg monocytt-makrofagceller kan med hell skille seg ut i osteoklaster, noe som gir en stabil cellemodell for studiet av osteoklaster in vitro. Denne metoden er egnet for små benmargsprøver og kan trekke ut benmargsmonocytt-makrofagceller fra benmarg enkelt og raskt uten å kreve høyteknologisk laboratorieutstyr.Økningen av osteoklaster kan være den potensielle patogenesen av osteoporose. Benmarg monocytt-makrofagceller har en viss forskningsverdi som osteoklastforløperceller. For å begynne med, senk de euthanized rotter i 75% alkohol i 10 minutter for desinfeksjon.Etter forsiktig fjerning av alle lemmer av rotten med saks og tang, aspirerer med PBS ved hjelp av en pipette og skyller blodet som holder seg til lemmer. Deretter ved to milliliter av 10% FBS DMEM i en fem milliliter rør. Etter å ha overført lembenene inn i fem milliliterrøret, bruk saks til å kutte lembenene i røret i små biter og bland homogenatet for å gjenopplive benmargscellene i kulturmediet.Stå i fem minutter til vevsfragmentene slo seg ned til bunnen av røret. Deretter legger du til 10 milliliter 10% FBS DMEM i en 100 millimeter kulturrett, og overfør deretter supernatanten til kulturretten. Inkuber ved 37 grader Celsius i 5% karbondioksid i ca. 24 timer.Etter denne inkubasjonstiden vil flertallet av mesenchymale stamceller holde seg til kulturfatveggen og vokse sakte, mens de fleste benmargsmonocytt-makrofagceller fortsatt vil bli suspendert i kulturmediet. Overfør cellefjæringen i 100 millimeter kulturrett til en ny 25 centimeter firkantet kolbe og fortsett å dyrke cellene ved 37 grader Celsius i 5% karbondioksid i ytterligere 24 timer. Etter å ha fjernet det gamle mediet forsiktig, erstatt med friskt medium etter at benmarg monocytt-makrofagceller har festet seg til kolbeveggen.Flowcytometri viste at prosentandelen celler som uttrykte CD11b og c, en molekylær markør på overflaten av monocytt-makrofagslinjeceller var ca. 37,94%Med den kontinuerlige celleproliferasjonen ble de fleste cellene større i uregelmessig form og vokste til en radial tilhengerskive. TRAP-flekkresultatene viste at sammenlignet med kontrollgruppen ble antallet intracellulære lilla røde granulater betydelig økt i celler indusert med reseptoraktivator av kjernefysisk faktor kappa B-ligand og makrofagkolonistimulerende faktor. Vestlig blotanalyse viste at uttrykksnivåene til osteoklastspesifikke proteiner TRAP og cathepsin K ble betydelig økt i behandlede celler sammenlignet med kontrollgruppen.Det viktigste i denne prosedyren er tiden for å samle sekundære tilhengerceller i 24 til 48 timer med primærkultur, benmarg monocytt-makrofagceller begynner å holde seg helt. Benmarg monocytt-makrofagceller isolert ved denne metoden kan induseres til osteoklaster in vitro, noe som gir en stabil cellemodell for studiet av osteoporose.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Model of Disturbed Flow-Induced Atherosclerosis in Mouse Carotid Artery by Partial Ligation and a Simple Method of RNA Isolation from Carotid Endothelium

Despite the well-known close association, direct evidence linking disturbed flow to atherogenesis has been lacking. We have recently used a modified ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

Isolasjon, karakterisering og Comparative Differensiering av Human tannpulpa stamceller hentet fra permanente tenner ved hjelp av to ulike metoder

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Isolation of Cancer Stem Cells From Human Prostate Cancer Samples

Isolering av kreft stamceller fra menneskelige prostata kreft Samples

The cancer stem cell (CSC) model has been considerably revisited over the last two decades. During this time CSCs have been identified and directly ...

Method for Obtaining Primary Ovarian Cancer Cells From Solid Specimens

Metode for Innhenting av primær eggstokkreft celler fra solide Prøver

Reliable tools for investigating ovarian cancer initiation and progression are urgently needed. While the use of ovarian cancer cell lines remains a ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Måte Isolert<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Lung Perfusjons i en Rat Modell: Erfaringer fra å utvikle en Rat EVLP Program

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Isolation of Human Lymphatic Endothelial Cells by Multi-parameter Fluorescence-activated Cell Sorting

Isolering av human lymfatisk endotelceller ved Multi-parameter fluorescens-aktivert cellesortering

Lymphatic system disorders such as primary lymphedema, lymphatic malformations and lymphatic tumors are rare conditions that cause significant morbidity ...

Isolation of Endothelial Progenitor Cells from Healthy Volunteers and Their Migratory Potential Influenced by Serum Samples After Cardiac Surgery

Isolering av endothelial stamceller fra friske frivillige og deres trekkende Potential påvirket av serumprøver etter hjerteoperasjon

Endothelial progenitor cells (EPCs) are recruited from the bone marrow under pathological conditions like hypoxia and are crucially involved in the ...

Isolation and Cultivation of Adult Rat Cardiomyocytes

Isolasjon og dyrking av voksen rotte Cardiomyocytes

In an intact heart, adjacent cells influence adult cardiomyocytes. With the method of isolation and cultivation of adult cardiomyocytes, a precise ...

Isolation of Primary Human Decidual Cells from the Fetal Membranes of Term Placentae

Isolering av primære Decidual menneskeceller fra fosterets membraner av begrepet Placentae

The decidua, also known as the pregnant endometrium, is a critically important reproductive tissue. Decidual cells, comprised mainly of decidualized ...

Isolation of Atrial Cardiomyocytes from a Rat Model of Metabolic Syndrome-related Heart Failure with Preserved Ejection Fraction

Isolering av Atrial Cardiomyocytes fra en rotte modell av Metabolsk syndrom-relaterte hjertesvikt med bevarte utstøting brøk

In this article, we describe an optimized, Langendorff-based procedure for the isolation of single-cell atrial cardiomyocytes (ACMs) from a rat model of ...