Name: isolation of monocyte-macrophage lineage cells from rat bones by secondary adherence method
Uploaded: 2022-07-13T15:00:00
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Este trabajo fue apoyado por la Fundación de Ciencias Naturales de la provincia de Zhejiang (subvención no. LY19H060001) y el Proyecto del Plan de Ciencia y Tecnología de Medicina Tradicional China de Zhejiang (no. 2022ZB093).

Todos los experimentos en este estudio se llevaron a cabo de acuerdo con las pautas de experimentación con animales del Centro de Investigación de Animales de Laboratorio de la Universidad Médica China de Zhejiang (Número de aprobación: IACUC-20181029-11).
1. Extracción celular
<ol><li>Coloque a las ratas Sprague-Dawley (ratas SD, de 1 a 10 días de edad, macho o hembra) en las jaulas de eutanasia llenas de CO2 a una tasa equilibrada de 30% -70% de volumen /...

<ol>
	<li>Jakubzick, C. V., Randolph, G. J., Henson, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monocyte+differentiation+and+antigen-presenting+functions.">Monocyte differentiation and antigen-presenting functions.</a> Nature Reviews. Immunology. 17 (6), 349-362 (2017).</li><li>Locati, M., Curtale, G., Mantovani, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diversity,+mechanisms,+and+significance+of+macrophage+plasticity.">Diversity, mechanisms, and significance of macrophage plasticity.</a> Annual Review of Pathology. 15 (1), 123-147 (2020).</li><li>Boyle, W. J., Simonet, W. S., Lacey, D. 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B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=microRNA-206+is+required+for+osteoarthritis+development+through+its+effect+on+apoptosis+and+autophagy+of+articular+chondrocytes+via+modulating+the+phosphoinositide+3-kinase/protein+kinase+B-mTOR+pathway+by+targeting+insulin-like+growth+factor-1.">microRNA-206 is required for osteoarthritis development through its effect on apoptosis and autophagy of articular chondrocytes via modulating the phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B-mTOR pathway by targeting insulin-like growth factor-1.</a> Journal of Cellular Biochemistry. 120 (4), 5287-5303 (2019).</li><li>Li, Z., MacDougald, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+models+for+investigating+how+bone+marrow+adipocytes+influence+bone+and+hematopoietic+cellularity.">Preclinical models for investigating how bone marrow adipocytes influence bone and hematopoietic cellularity.</a> Best Practice &amp; Research. Clinical Endocrinology &amp; Metabolism. 35 (4), 101547-101560 (2021).</li><li>Horowitz, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=marrow+adipocytes.">marrow adipocytes.</a> Adipocyte. 6 (3), 193-204 (2017).</li><li>Maridas, D. E., Rendina-Ruedy, E., Le, P. T., Rosen, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation,+culture,+and+differentiation+of+bone+marrow+stromal+cells+and+osteoclast+progenitors+frommice.">Isolation, culture, and differentiation of bone marrow stromal cells and osteoclast progenitors frommice.</a> Journal of Visualized Experiments. (131), e56750 (2018).</li><li>Schyns, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-classical+tissue+monocytes+and+two+functionally+distinct+populations+of+interstitial+macrophages+populate+the+mouse+lung.">Non-classical tissue monocytes and two functionally distinct populations of interstitial macrophages populate the mouse lung.</a> Nature Communications. 10 (1), 3964-3980 (2019).</li><li>Atif, S. M., Gibbings, S. L., Jakubzick, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+identification+of+interstitial+macrophages+from+the+lungs+using+different+digestion+enzymes+and+staining+strategies.">Isolation and identification of interstitial macrophages from the lungs using different digestion enzymes and staining strategies.</a> Methods in Molecular Biology. 1784, 69-76 (2018).</li><li>Scheven, B. A., Milne, J. S., Robins, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sequential+culture+approach+to+study+osteoclast+differentiation+from+nonadherent+porcine+bone+marrow+cells.">A sequential culture approach to study osteoclast differentiation from nonadherent porcine bone marrow cells.</a> In Vitro Cellular &amp; Developmental Biology. Animal. 34 (7), 568-577 (1998).</li><li>Bradley, E. W., Oursler, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoclast+culture+and+resorption+assays.">Osteoclast culture and resorption assays.</a> Methods in Molecular Biology. , 19-35 (2008).</li><li>Yu, Y. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+cytometric+analysis+of+myeloid+cells+in+human+blood,+bronchoalveolar+lavage,+and+lung+tissues.">Flow cytometric analysis of myeloid cells in human blood, bronchoalveolar lavage, and lung tissues.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 54 (1), 13-24 (2016).</li><li>Gibbings, S. L., Jakubzick, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+consistent+method+to+identify+and+isolate+mononuclear+phagocytes+from+human+lung+and+lymph+nodes.">A consistent method to identify and isolate mononuclear phagocytes from human lung and lymph nodes.</a> Methods in Molecular Biology. 1799, 381-395 (2018).</li><li>Jacquin, C., Gran, D. E., Lee, S. K., Lorenzo, J. A., Aguila, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+multiple+osteoclast+precursor+populations+in+murine+bone+marrow.">Identification of multiple osteoclast precursor populations in murine bone marrow.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 21 (1), 67-77 (2006).</li><li>Gibbings, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three+unique+interstitial+macrophages+in+the+murine+lung+at+steady+state.">Three unique interstitial macrophages in the murine lung at steady state.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 57 (1), 66-76 (2017).</li><li>Higashi, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultra-high-speed+western+blot+using+immunoreaction+enhancing+technology.">Ultra-high-speed western blot using immunoreaction enhancing technology.</a> Journal of Visualized Experiments. (163), e61657 (2020).</li><li>Gallagher, S., Chakavarti, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoblot+analysis.">Immunoblot analysis.</a> Journal of Visualized Experiments. 20 (16), 759 (2008).</li><li>Yin, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glycyrrhizic+acid+suppresses+osteoclast+differentiation+and+postmenopausal+osteoporosis+by+modulating+the+NF-&#954;B,+ERK,+and+JNK+signaling+pathways.">Glycyrrhizic acid suppresses osteoclast differentiation and postmenopausal osteoporosis by modulating the NF-&#954;B, ERK, and JNK signaling pathways.</a> European Journal of Pharmocology. 859, 172550 (2019).</li><li>Liu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LRRc17+controls+BMSC+senescence+via+mitophagy+and+inhibits+the+therapeutic+effect+of+BMSCs+on+ovariectomy-induced+bone+loss.">LRRc17 controls BMSC senescence via mitophagy and inhibits the therapeutic effect of BMSCs on ovariectomy-induced bone loss.</a> Redox Biology. , (2021).</li><li>Jin, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thioacetamide+promotes+osteoclast+transformation+of+bone+marrow+macrophages+by+influencing+PI3K/AKT+pathways.">Thioacetamide promotes osteoclast transformation of bone marrow macrophages by influencing PI3K/AKT pathways.</a> Journal of Orthopedic Surgery and Research. 17 (1), 53-63 (2022).</li></ol>

Los osteoclastos son uno de los tipos celulares más importantes involucrados en la aparición y desarrollo de enfermedades óseas, así como uno de los principales objetos de investigación de enfermedades óseas20. Los monocitos/macrófagos pueden diferenciarse en osteoclastos. Dado que los macrófagos mononucleares (células RAW264.7) son demasiado caros de comprar y se activan fácilmente durante el cultivo, es difícil realizar experimentos de diferenciación in vitro utilizando esta...

Se ha informado que las células del linaje monocitos-macrófagos existentes en la médula ósea pueden diferenciarse en monocitos sanguíneos y macrófagos tisulares 1,2. Las células anteriores, que pueden diferenciarse en osteoclastos para equilibrar el crecimiento y desarrollo óseo, se utilizan comúnmente como modelo celular para inducir osteoclastos in vivo 3,4. La médula ósea es un tejido especial que contiene varios tipos diferentes de células, que incluyen, entre otras, células madre mesenquimales de la médula ósea, células de monocitos-macrófagos (BMM) de la médula ósea, células madre hematopoyéticas, células endoteliales y células inmunes. De hecho, varios estudios previos sugirieron que las células adherentes que salían precipitadas de la cavidad de la médula ósea del hueso largo podrían diferenciarse en osteoblastos, osteoclastos, condrocitos o adipocitos 5,6,7,8. Aunque se han utilizado diferentes métodos de aislamiento y cultivo para producir diferentes poblaciones celulares homogéneas, todavía existen grandes desafíos para aislar y cultivar BMM de una variedad de tipos de células diferentes.
Se han desarrollado varios métodos para extraer macrófagos mononucleares de médula ósea (BMSC). Sin embargo, la mayoría de estos métodos son complejos 9,10,11. Por ejemplo, la centrifugación por gradiente de densidad requiere un kit especializado y la operación requiere mucho tiempo y es engorrosa. Este método es adecuado para el aislamiento de BMM a partir de muestras de sangre de alto volumen, pero no de muestras de médula ósea 9,12,13. Además, la extracción de muestras de tejido mediante la digestión de la colagenasa es un procedimiento complejo y lento; este método no se recomienda para el aislamiento de BMM a partir de muestras de médula ósea14,15. Además, aunque la separación de flujo puede resultar en poblaciones de monocitos/macrófagos altamente purificadas, requiere tamaños de muestra muy grandes y altos requisitos de instrumentos y equipos10,16. Además, el método de enriquecimiento de microperlas es extremadamente costoso y no es factible en un laboratorio general17.
Por lo tanto, en el estudio actual se propuso un método conveniente, rápido y barato para el aislamiento de macrófagos mononucleares de la médula ósea. Las células de la médula ósea adheridas durante diferentes puntos de tiempo se utilizaron para aislar BMM utilizando un método de adherencia secundaria. Los BMM extraídos con el método anterior podrían inducir la formación de osteoclastos in vitro, proporcionando así un modelo celular simple y conveniente para el futuro estudio de la osteoporosis in vitro.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>35 mm2 cell climbing slices</td>
			<td>NEST Biotechnology</td>
			<td>80102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-cathepsin K</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab19027</td>
			<td>1:1,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD11 isotype control</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab172730</td>
			<td>1 &#956;g/test,1.675 mg/Ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD11b/c</td>
			<td>Absin</td>
			<td>abs124232</td>
			<td>&#160;1&#956;g/test, 1 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-TRAP</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab191406</td>
			<td>1:1,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-&#946;-actin</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>&#160;AF5003</td>
			<td>1:1,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell climbing slices</td>
			<td>NEST Biotechnology</td>
			<td>80102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture dish</td>
			<td>corning</td>
			<td>430167</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture flask</td>
			<td>corning</td>
			<td>430168</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s modified eagle medium (DMEM)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>C11995500BT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10099141C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-rabbit IgG</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab150077</td>
			<td>for IF, 1:2,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>goat anti-rabbit IgG</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab6721</td>
			<td>for WB, 1:2,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M-CSF</td>
			<td>Pepro tech</td>
			<td>400-28</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BL302A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RANKL</td>
			<td>Pepro tech</td>
			<td>400-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SD rat</td>
			<td>Shanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd</td>
			<td></td>
			<td>1-10 days old</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SDS-PAGE gel preparation kit</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>P1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRAP/ALP Staining Kit</td>
			<td>Wako</td>
			<td>294-67001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA solution</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BL512A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wright-Giemsa solution</td>
			<td>Keygen Biotech</td>
			<td>KGA225-1</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of monocyte-macrophage lineage cells from rat bones by secondary adherence method

Con una disminución de la densidad mineral ósea, los huesos tienen más probabilidades de fracturarse, lo que afecta negativamente la calidad de vida de un paciente. El crecimiento y desarrollo de los huesos están regulados principalmente por osteoblastos y osteoclastos. Se ha aceptado ampliamente que los osteoclastos se derivan de las células de monocitos-macrófagos de la médula ósea (BMM). LosBMm y otras células madre hematopoyéticas se encuentran en la cavidad de la médula ósea. Por lo tanto, aislar BMM estables individuales de poblaciones celulares diferentes y heterogéneas es un gran desafío. Aquí presentamos un protocolo para el aislamiento de BMM de ratas SD, llamado método de adherencia secundaria. Se recogieron células adherentes cultivadas durante 24-48 h en cultivo primario. El análisis citométrico de flujo mostró que aproximadamente el 37,94% de las células eran CD11b/c+ (antígeno de superficie monocito-macrófago). La tinción de fosfatasa ácida resistente al tartrato (TRAP) y el análisis de western blot demostraron que losBMM podían diferenciarse en osteoclastos in vitro. Los hallazgos anteriores sugirieron que las células de adherencia secundaria podrían considerarse como un modelo celular adecuado para la investigación de la diferenciación de osteoclastos.

La población secundaria de células adherentes fue estable y uniforme. Con la proliferación celular continua, la mayoría de las células se hicieron más grandes, con forma irregular y crecieron en un disco adherente radial (Figura 2C, D). La citometría de flujo mostró que el porcentaje de células que expresan CD11b/c, un marcador molecular en la superficie de las células del linaje monocito-macrófago, fue de aproximadamente el 37,94%...

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Isolation of Monocyte-Macrophage Lineage Cells from Rat Bones by Secondary Adherence Method

Aquí presentamos un protocolo para el aislamiento de BMM de ratas SD, llamado método de adherencia secundaria.

Aislamiento de células del linaje monocito-macrófago de huesos de rata por método de adherencia secundaria

With a decrease of bone mineral density, bones are more likely to fracture, thus negatively affecting a patient's quality of life. The growth and ...

En este protocolo, las células de monocitos-macrófagos de la médula ósea se extraen por el método de adherencia secundaria. Las células de monocitos-macrófagos de la médula ósea pueden diferenciarse con éxito en osteoclastos, lo que proporciona un modelo celular estable para el estudio de los osteoclastos in vitro. Este método es adecuado para pequeñas muestras de médula ósea y puede extraer células de monocitos-macrófagos de médula ósea de la médula ósea de manera simple y rápida sin requerir equipos de laboratorio de alta tecnología.El aumento de osteoclastos puede ser la patogénesis potencial de la osteoporosis. Las células de monocitos-macrófagos de la médula ósea tienen cierto valor de investigación como células precursoras de osteoclastos. Para comenzar, sumerja a las ratas sacrificadas en alcohol al 75% durante 10 minutos para la desinfección.Después de extraer cuidadosamente todas las extremidades de la rata con tijeras y fórceps, aspire con PBS usando una pipeta y enjuague la sangre adherida a las extremidades. Luego, a dos mililitros del 10% FBS DMEM en un tubo de cinco mililitros. Después de transferir los huesos de las extremidades al tubo de cinco mililitros, use tijeras para cortar los huesos de las extremidades en el tubo en trozos pequeños y mezcle el homogeneizado para resuspendir las células de la médula ósea en el medio de cultivo.Párese durante cinco minutos hasta que los fragmentos de tejido se asienten en la parte inferior del tubo. A continuación, agregue 10 mililitros de 10% FBS DMEM en un plato de cultivo de 100 milímetros y luego transfiera el sobrenadante al plato de cultivo. Incubar a 37 grados Centígrados en 5% de dióxido de carbono durante aproximadamente 24 horas.Después de este tiempo de incubación, la mayoría de las células madre mesenquimales se adherirán a la pared del plato de cultivo y crecerán lentamente, mientras que la mayoría de las células de monocitos-macrófagos de la médula ósea aún estarán suspendidas en el medio de cultivo. Transfiera la suspensión celular en el plato de cultivo de 100 milímetros a un nuevo matraz cuadrado de 25 centímetros y continúe cultivando las células a 37 grados Celsius en 5% de dióxido de carbono durante 24 horas adicionales. Después de retirar el medio viejo con cuidado, reemplácelo con medio fresco después de que las células de monocitos-macrófagos de la médula ósea se hayan adherido a la pared del matraz.La citometría de flujo mostró que el porcentaje de células que expresan CD11b y c, un marcador molecular en la superficie de las células del linaje de monocitos-macrófagos fue de aproximadamente el 37,94%Con la proliferación celular continua, la mayoría de las células se hicieron más grandes dentro de forma irregular y se convirtieron en un disco adherente radial. Los resultados de la tinción TRAP mostraron que, en comparación con el grupo de control, el número de gránulos rojos púrpura intracelulares aumentó significativamente en las células inducidas con el activador del receptor del ligando kappa B del factor nuclear y el factor estimulante de colonias de macrófagos. El análisis de Western blot demostró que los niveles de expresión de las proteínas específicas de osteoclasto TRAP y catepsina K aumentaron significativamente en las células tratadas en comparación con el grupo de control.Lo más importante en este procedimiento es el tiempo para recolectar células adherentes secundarias en 24 a 48 horas de cultivo primario, las células de monocitos-macrófagos de la médula ósea comienzan a adherirse por completo. Las células de monocitos-macrófagos de la médula ósea aisladas por este método pueden ser inducidas en osteoclastos in vitro, proporcionando un modelo celular estable para el estudio de la osteoporosis.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Model of Disturbed Flow-Induced Atherosclerosis in Mouse Carotid Artery by Partial Ligation and a Simple Method of RNA Isolation from Carotid Endothelium

Un modelo de Disturbed inducida por el flujo de Aterosclerosis en la arteria carótida del ratón por la ligadura parcial y un método sencillo para el aislamiento de ARN del endotelio carótida

Despite the well-known close association, direct evidence linking disturbed flow to atherogenesis has been lacking. We have recently used a modified ...

Investigación

Medicina

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

Diferenciación de aislamiento, caracterización y comparativo de las células madre derivadas de la Pulpa Dental de los dientes permanentes mediante dos métodos diferentes

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Isolation of Cancer Stem Cells From Human Prostate Cancer Samples

El aislamiento de las células madre del cáncer de muestras de cáncer de próstata humano

The cancer stem cell (CSC) model has been considerably revisited over the last two decades. During this time CSCs have been identified and directly ...

Method for Obtaining Primary Ovarian Cancer Cells From Solid Specimens

Método para la obtención de las células del cáncer de ovario primarios a partir de muestras sólidas

Reliable tools for investigating ovarian cancer initiation and progression are urgently needed. While the use of ovarian cancer cell lines remains a ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Método de aislados<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Perfusión pulmonar en un modelo de rata: Lecciones Aprendidas de Desarrollo de un Programa EVLP Rata

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Isolation of Human Lymphatic Endothelial Cells by Multi-parameter Fluorescence-activated Cell Sorting

Aislamiento de células endoteliales linfático humano por Multi-parámetro de clasificación de células activadas por fluorescencia

Lymphatic system disorders such as primary lymphedema, lymphatic malformations and lymphatic tumors are rare conditions that cause significant morbidity ...

Isolation of Endothelial Progenitor Cells from Healthy Volunteers and Their Migratory Potential Influenced by Serum Samples After Cardiac Surgery

Aislamiento de células progenitoras endoteliales de voluntarios sanos y su potencial migratorio influenciado por las muestras de suero después de cirugía cardiaca

Endothelial progenitor cells (EPCs) are recruited from the bone marrow under pathological conditions like hypoxia and are crucially involved in the ...

Isolation and Cultivation of Adult Rat Cardiomyocytes

Aislamiento y cultivo de cardiomiocitos de rata adulta

In an intact heart, adjacent cells influence adult cardiomyocytes. With the method of isolation and cultivation of adult cardiomyocytes, a precise ...

Isolation of Primary Human Decidual Cells from the Fetal Membranes of Term Placentae

Aislamiento de células Decidual humanas primarias de las membranas fetales de la placenta de término

The decidua, also known as the pregnant endometrium, is a critically important reproductive tissue. Decidual cells, comprised mainly of decidualized ...

Isolation of Atrial Cardiomyocytes from a Rat Model of Metabolic Syndrome-related Heart Failure with Preserved Ejection Fraction

Aislamiento de cardiomiocitos auricular de un modelo de rata de la falta de corazón relacionados con el síndrome metabólico con fracción de eyección preservada

In this article, we describe an optimized, Langendorff-based procedure for the isolation of single-cell atrial cardiomyocytes (ACMs) from a rat model of ...