Name: isolation of monocyte-macrophage lineage cells from rat bones by secondary adherence method
Uploaded: 2022-07-13T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Monocyte-Macrophage Lineage Cells from Rat Bones by Secondary Adherence Method at JoVE.com

Detta arbete stöddes av Natural Science Foundation i Zhejiang-provinsen (bidrag nr. LY19H060001) och Zhejiang Traditional Chinese Medicine Science and Technology Plan Project (nr 2022ZB093).

Alla experiment i denna studie genomfördes i enlighet med riktlinjerna för djurförsök från Zhejiang Chinese Medical University Laboratory Animal Research Center (godkännande nr: IACUC-20181029-11).
1. Cell extraktion
<ol><li>Lägg Sprague-Dawley-råttorna (SD-råttor, 1-10 dagar gamla, hane eller hona) i eutanasiburarna fyllda med CO2 med en balanserad hastighet på 30%-70% behållarvolym/minut. Efter att råttorna förlorat medvetandet (20-60 min), avliva r...

<ol>
	<li>Jakubzick, C. V., Randolph, G. J., Henson, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monocyte+differentiation+and+antigen-presenting+functions.">Monocyte differentiation and antigen-presenting functions.</a> Nature Reviews. Immunology. 17 (6), 349-362 (2017).</li><li>Locati, M., Curtale, G., Mantovani, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diversity,+mechanisms,+and+significance+of+macrophage+plasticity.">Diversity, mechanisms, and significance of macrophage plasticity.</a> Annual Review of Pathology. 15 (1), 123-147 (2020).</li><li>Boyle, W. J., Simonet, W. S., Lacey, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoclast+differentiation+and+activation.">Osteoclast differentiation and activation.</a> Nature. 423 (6937), 337-342 (2003).</li><li>Ono, T., Nakashima, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+osteoclast+biology.">Recent advances in osteoclast biology.</a> Histochemistry and Cell Biology. 149 (4), 325-341 (2018).</li><li>Zhou, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wnt/&#223;-catenin-mediated+p53+suppression+is+indispensable+for+osteogenesis+of+mesenchymal+progenitor+cells.">Wnt/&#223;-catenin-mediated p53 suppression is indispensable for osteogenesis of mesenchymal progenitor cells.</a> Cell Death &amp; Disease. 12 (6), 521-534 (2021).</li><li>Yu, Q., Zhao, B., He, Q., Zhang, Y., Peng, X. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=microRNA-206+is+required+for+osteoarthritis+development+through+its+effect+on+apoptosis+and+autophagy+of+articular+chondrocytes+via+modulating+the+phosphoinositide+3-kinase/protein+kinase+B-mTOR+pathway+by+targeting+insulin-like+growth+factor-1.">microRNA-206 is required for osteoarthritis development through its effect on apoptosis and autophagy of articular chondrocytes via modulating the phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B-mTOR pathway by targeting insulin-like growth factor-1.</a> Journal of Cellular Biochemistry. 120 (4), 5287-5303 (2019).</li><li>Li, Z., MacDougald, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+models+for+investigating+how+bone+marrow+adipocytes+influence+bone+and+hematopoietic+cellularity.">Preclinical models for investigating how bone marrow adipocytes influence bone and hematopoietic cellularity.</a> Best Practice &amp; Research. Clinical Endocrinology &amp; Metabolism. 35 (4), 101547-101560 (2021).</li><li>Horowitz, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=marrow+adipocytes.">marrow adipocytes.</a> Adipocyte. 6 (3), 193-204 (2017).</li><li>Maridas, D. E., Rendina-Ruedy, E., Le, P. T., Rosen, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation,+culture,+and+differentiation+of+bone+marrow+stromal+cells+and+osteoclast+progenitors+frommice.">Isolation, culture, and differentiation of bone marrow stromal cells and osteoclast progenitors frommice.</a> Journal of Visualized Experiments. (131), e56750 (2018).</li><li>Schyns, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-classical+tissue+monocytes+and+two+functionally+distinct+populations+of+interstitial+macrophages+populate+the+mouse+lung.">Non-classical tissue monocytes and two functionally distinct populations of interstitial macrophages populate the mouse lung.</a> Nature Communications. 10 (1), 3964-3980 (2019).</li><li>Atif, S. M., Gibbings, S. L., Jakubzick, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+identification+of+interstitial+macrophages+from+the+lungs+using+different+digestion+enzymes+and+staining+strategies.">Isolation and identification of interstitial macrophages from the lungs using different digestion enzymes and staining strategies.</a> Methods in Molecular Biology. 1784, 69-76 (2018).</li><li>Scheven, B. A., Milne, J. S., Robins, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sequential+culture+approach+to+study+osteoclast+differentiation+from+nonadherent+porcine+bone+marrow+cells.">A sequential culture approach to study osteoclast differentiation from nonadherent porcine bone marrow cells.</a> In Vitro Cellular &amp; Developmental Biology. Animal. 34 (7), 568-577 (1998).</li><li>Bradley, E. W., Oursler, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoclast+culture+and+resorption+assays.">Osteoclast culture and resorption assays.</a> Methods in Molecular Biology. , 19-35 (2008).</li><li>Yu, Y. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+cytometric+analysis+of+myeloid+cells+in+human+blood,+bronchoalveolar+lavage,+and+lung+tissues.">Flow cytometric analysis of myeloid cells in human blood, bronchoalveolar lavage, and lung tissues.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 54 (1), 13-24 (2016).</li><li>Gibbings, S. L., Jakubzick, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+consistent+method+to+identify+and+isolate+mononuclear+phagocytes+from+human+lung+and+lymph+nodes.">A consistent method to identify and isolate mononuclear phagocytes from human lung and lymph nodes.</a> Methods in Molecular Biology. 1799, 381-395 (2018).</li><li>Jacquin, C., Gran, D. E., Lee, S. K., Lorenzo, J. A., Aguila, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+multiple+osteoclast+precursor+populations+in+murine+bone+marrow.">Identification of multiple osteoclast precursor populations in murine bone marrow.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 21 (1), 67-77 (2006).</li><li>Gibbings, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three+unique+interstitial+macrophages+in+the+murine+lung+at+steady+state.">Three unique interstitial macrophages in the murine lung at steady state.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 57 (1), 66-76 (2017).</li><li>Higashi, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultra-high-speed+western+blot+using+immunoreaction+enhancing+technology.">Ultra-high-speed western blot using immunoreaction enhancing technology.</a> Journal of Visualized Experiments. (163), e61657 (2020).</li><li>Gallagher, S., Chakavarti, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoblot+analysis.">Immunoblot analysis.</a> Journal of Visualized Experiments. 20 (16), 759 (2008).</li><li>Yin, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glycyrrhizic+acid+suppresses+osteoclast+differentiation+and+postmenopausal+osteoporosis+by+modulating+the+NF-&#954;B,+ERK,+and+JNK+signaling+pathways.">Glycyrrhizic acid suppresses osteoclast differentiation and postmenopausal osteoporosis by modulating the NF-&#954;B, ERK, and JNK signaling pathways.</a> European Journal of Pharmocology. 859, 172550 (2019).</li><li>Liu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LRRc17+controls+BMSC+senescence+via+mitophagy+and+inhibits+the+therapeutic+effect+of+BMSCs+on+ovariectomy-induced+bone+loss.">LRRc17 controls BMSC senescence via mitophagy and inhibits the therapeutic effect of BMSCs on ovariectomy-induced bone loss.</a> Redox Biology. , (2021).</li><li>Jin, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thioacetamide+promotes+osteoclast+transformation+of+bone+marrow+macrophages+by+influencing+PI3K/AKT+pathways.">Thioacetamide promotes osteoclast transformation of bone marrow macrophages by influencing PI3K/AKT pathways.</a> Journal of Orthopedic Surgery and Research. 17 (1), 53-63 (2022).</li></ol>

Osteoklaster är en av de viktigaste celltyperna som är involverade i förekomst och utveckling av bensjukdomar, liksom ett av de primära föremålen för bensjukdomsforskning20. Monocyt/makrofager kan differentieras till osteoklaster. Eftersom mononukleära makrofager (RAW264.7-celler) är för dyra att köpa och lätt aktiveras under odling är det svårt att utföra in vitro-differentieringsexperiment med denna cellinje. Även om flera metoder har utvecklats för att extrahera monocy...

Det har rapporterats att monocyt-makrofag-härstamningsceller som finns i benmärgen kan differentiera till blodmonocyter och vävnadsmakrofager 1,2. Ovanstående celler, som kan differentieras till osteoklaster för att balansera bentillväxt och utveckling, används ofta som en cellmodell för att inducera osteoklaster in vivo 3,4. Benmärg är en speciell vävnad som innehåller flera olika typer av celler, som inkluderar men inte bara är begränsade till benmärgsmesenkymala stamceller, benmärgsmonocyt-makrofagceller (BMM), hematopoetiska stamceller, endotelceller och immunceller. Faktum är att flera tidigare studier föreslog att vidhäftande celler som rusade ut ur benmärgshålan i det långa benet kunde differentieras till osteoblaster, osteoklaster, kondrocyter eller adipocyter 5,6,7,8. Även om olika isolerings- och odlingsmetoder har använts för att producera olika homogena cellpopulationer, finns det fortfarande stora utmaningar med att isolera och odla BMM från en mängd olika celltyper.
Flera metoder har utvecklats för att extrahera benmärgsmononukleära makrofager (BMSC). Majoriteten av dessa metoder är dock komplexa 9,10,11. Till exempel kräver densitetsgradientcentrifugering ett specialiserat kit och operationen är tidskrävande och besvärlig. Denna metod är lämplig för isolering av BMM från blodprover med hög volym, men inte från benmärgsprover 9,12,13. Dessutom är extraktion av vävnadsprover med användning av kollagenasuppslutning ett komplext och tidskrävande förfarande; Denna metod rekommenderas inte för isolering av BMM från benmärgsprover14,15. Dessutom, även om flödesseparation kan resultera i högrenade monocyt- / makrofagpopulationer, kräver det mycket stora provstorlekar och höga instrument- och utrustningskrav10,16. Dessutom är mikroberikningsmetoden extremt dyr och är inte genomförbar i ett allmänt laboratorium17.
Därför föreslogs i den aktuella studien en bekväm, snabb och billig metod för isolering av mononukleära makrofager från benmärgen. Benmärgsceller vidhäftade under olika tidpunkter användes för att isolera BMM med hjälp av en sekundär vidhäftningsmetod. BMM extraherade med ovanstående metod kan inducera bildandet av osteoklaster in vitro, vilket ger en enkel och bekväm cellmodell för framtida studier av osteoporos in vitro.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>35 mm2 cell climbing slices</td>
			<td>NEST Biotechnology</td>
			<td>80102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-cathepsin K</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab19027</td>
			<td>1:1,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD11 isotype control</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab172730</td>
			<td>1 &#956;g/test,1.675 mg/Ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD11b/c</td>
			<td>Absin</td>
			<td>abs124232</td>
			<td>&#160;1&#956;g/test, 1 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-TRAP</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab191406</td>
			<td>1:1,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-&#946;-actin</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>&#160;AF5003</td>
			<td>1:1,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell climbing slices</td>
			<td>NEST Biotechnology</td>
			<td>80102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture dish</td>
			<td>corning</td>
			<td>430167</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture flask</td>
			<td>corning</td>
			<td>430168</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s modified eagle medium (DMEM)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>C11995500BT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10099141C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-rabbit IgG</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab150077</td>
			<td>for IF, 1:2,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>goat anti-rabbit IgG</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab6721</td>
			<td>for WB, 1:2,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M-CSF</td>
			<td>Pepro tech</td>
			<td>400-28</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BL302A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RANKL</td>
			<td>Pepro tech</td>
			<td>400-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SD rat</td>
			<td>Shanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd</td>
			<td></td>
			<td>1-10 days old</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SDS-PAGE gel preparation kit</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>P1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRAP/ALP Staining Kit</td>
			<td>Wako</td>
			<td>294-67001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA solution</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BL512A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wright-Giemsa solution</td>
			<td>Keygen Biotech</td>
			<td>KGA225-1</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of monocyte-macrophage lineage cells from rat bones by secondary adherence method

Med en minskning av benmineraltätheten är ben mer benägna att spricka, vilket påverkar patientens livskvalitet negativt. Tillväxten och utvecklingen av ben regleras huvudsakligen av osteoblaster och osteoklaster. Det har varit allmänt accepterat att osteoklaster härrör från benmärgsmonocyt-makrofagceller (BMM). BMM och andra hematopoetiska stamceller finns i benmärgshålan. Därför är det en enorm utmaning att isolera enstaka stabila BMM från olika och heterogena cellpopulationer. Här presenterar vi ett protokoll för isolering av BMM från SD-råttor, kallad sekundär vidhäftningsmetod. Vidhäftande celler odlade i 24-48 h i primärkulturen samlades in. Flödescytometrisk analys visade att cirka 37,94% av cellerna var CD11b / c + (monocyt-makrofagytantigen). Tartratresistent syrafosfatas (TRAP) färgning och western blot analys visade att BMM kunde differentiera till osteoklaster in vitro. Ovanstående resultat föreslog att de sekundära följsamhetscellerna kunde betraktas som en lämplig cellulär modell för osteoklastdifferentieringsforskning.

Den sekundära vidhäftande cellpopulationen var stabil och enhetlig. Med den kontinuerliga cellproliferationen blev majoriteten av cellerna större, med oregelbunden form och växte till en radiell vidhäftande skiva (figur 2C, D). Flödescytometri visade att andelen celler som uttrycker CD11b / c, en molekylär markör på ytan av monocyt-makrofaglinjeceller, var cirka 37,94% (figur 2A, B). Fö...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Monocyte-Macrophage Lineage Cells from Rat Bones by Secondary Adherence Method at JoVE.com

Isolation of Monocyte-Macrophage Lineage Cells from Rat Bones by Secondary Adherence Method

Här presenterar vi ett protokoll för isolering av BMM från SD-råttor, kallad sekundär vidhäftningsmetod.

Isolering av monocyt-makrofaglinjeceller från råttben med sekundär vidhäftningsmetod

With a decrease of bone mineral density, bones are more likely to fracture, thus negatively affecting a patient's quality of life. The growth and ...

I detta protokoll extraheras benmärgsmonocyt-makrofagceller med sekundär vidhäftningsmetod. Benmärgsmonocytafageceller kan framgångsrikt differentieras till osteoklaster, vilket ger en stabil cellmodell för studier av osteoklaster in vitro. Denna metod är lämplig för små benmärgsprover och kan extrahera benmärgsmonocytakrofagceller från benmärg enkelt och snabbt utan att behöva högteknologisk laboratorieutrustning.Ökningen av osteoklaster kan vara den potentiella patogenesen av osteoporos. Benmärgsmonocyt-makrofagceller har ett visst forskningsvärde som osteoklastprekursorceller. Börja med att fördjupa de avlivade råttorna i 75% alkohol i 10 minuter för desinfektion.Efter att försiktigt ha tagit bort alla råttans lemmar med sax och pincett, aspirera med PBS med en pipett och spola blodet som fäster vid lemmarna. Sedan vid två milliliter av 10% FBS DMEM i ett fem milliliter rör. Efter överföring av benbenen till fem milliliter röret, använd sax för att skära lembenbenen i röret i små bitar och blanda homogenatet för att återsuspendera benmärgscellerna i odlingsmediet.Stå i fem minuter tills vävnadsfragmenten satte sig i botten av röret. Tillsätt sedan 10 ml 10% FBS DMEM i en 100 millimeter kulturrätt och överför sedan supernatanten till kulturrätten. Inkubera vid 37 grader Celsius i 5% koldioxid i cirka 24 timmar.Efter denna inkubationstid kommer majoriteten av mesenkymala stamceller att fästa vid odlingsskålväggen och växa långsamt, medan de flesta benmärgsmonocyt-makrofagceller fortfarande kommer att suspenderas i odlingsmediet. Överför cellsuspensionen i 100 millimeters odlingsskålen till en ny 25 centimeter fyrkantig kolv och fortsätt att odla cellerna vid 37 grader Celsius i 5% koldioxid i ytterligare 24 timmar. Efter att ha tagit bort det gamla mediet försiktigt, byt ut med färskt medium efter att benmärgsmonocyta-makrofagceller har fäst vid kolvväggen.Flödescytometri visade att andelen celler som uttrycker CD11b och c, en molekylär markör på ytan av monocyt-makrofaglinjeceller var cirka 37,94%Med den kontinuerliga cellproliferationen blev majoriteten av cellerna större inom oregelbunden form och växte till en radiell vidhäftande skiva. TRAP-fläckresultaten visade att jämfört med kontrollgruppen ökade antalet intracellulära lila röda granuler signifikant i celler inducerade med receptoraktivator av kärnfaktor kappa B-ligand och makrofagkolonistimulerande faktor. Western blot-analys visade att uttrycksnivåerna för de osteoklastspecifika proteinerna TRAP och cathepsin K ökade signifikant i behandlade celler jämfört med kontrollgruppen.Det viktigaste i denna procedur är tiden att samla sekundära vidhäftande celler i 24 till 48 timmars primärkultur, benmärgsmonocytakrofagceller börjar klibba helt. Benmärgsmonocytan-makrofagceller isolerade med denna metod kan induceras till osteoklaster in vitro, vilket ger en stabil cellmodell för studier av osteoporos.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Model of Disturbed Flow-Induced Atherosclerosis in Mouse Carotid Artery by Partial Ligation and a Simple Method of RNA Isolation from Carotid Endothelium

En modell av Disturbed Flow-Induced ateroskleros hos mus Carotid Artery genom partiell Ligation och en enkel metod för RNA Isolering från Carotid endotelet

Despite the well-known close association, direct evidence linking disturbed flow to atherogenesis has been lacking. We have recently used a modified ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

Isolering, karakterisering och jämförande differentiering av mänskliga Dental celler Pulp Stem Härstammar från permanenta tänder med hjälp av två olika metoder

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Isolation of Cancer Stem Cells From Human Prostate Cancer Samples

Isolering av cancer stamceller från mänskliga Prostate Cancer Prov

The cancer stem cell (CSC) model has been considerably revisited over the last two decades. During this time CSCs have been identified and directly ...

Method for Obtaining Primary Ovarian Cancer Cells From Solid Specimens

Metod för att erhålla primär äggstockscancerceller från Solid Prover

Reliable tools for investigating ovarian cancer initiation and progression are urgently needed. While the use of ovarian cancer cell lines remains a ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Metod för Isolerad<em&gt; Ex vivo</em&gt; Lung Perfusion i en råttmodell: Lärdomar från Utveckla en Rat EVLP Program

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Isolation of Human Lymphatic Endothelial Cells by Multi-parameter Fluorescence-activated Cell Sorting

Isolering av Human Lymphatic endotelceller från Multi-parameter fluorescensaktiverad cellsortering

Lymphatic system disorders such as primary lymphedema, lymphatic malformations and lymphatic tumors are rare conditions that cause significant morbidity ...

Isolation of Endothelial Progenitor Cells from Healthy Volunteers and Their Migratory Potential Influenced by Serum Samples After Cardiac Surgery

Isolering av Endothelial stamceller från friska frivilliga och flyttning Potential Influenser serumprover efter hjärtkirurgi

Endothelial progenitor cells (EPCs) are recruited from the bone marrow under pathological conditions like hypoxia and are crucially involved in the ...

Isolation and Cultivation of Adult Rat Cardiomyocytes

Isolering och odling av vuxen råtta hjärtmuskelcellerna

In an intact heart, adjacent cells influence adult cardiomyocytes. With the method of isolation and cultivation of adult cardiomyocytes, a precise ...

Isolation of Primary Human Decidual Cells from the Fetal Membranes of Term Placentae

Isolering av primära mänskliga Decidual celler från foster hinnor av termen efterbörd

The decidua, also known as the pregnant endometrium, is a critically important reproductive tissue. Decidual cells, comprised mainly of decidualized ...

Isolation of Atrial Cardiomyocytes from a Rat Model of Metabolic Syndrome-related Heart Failure with Preserved Ejection Fraction

Isolering av förmaksflimmer hjärtmuskelcellerna från en råtta modell av metabola syndromet-relaterade hjärtsvikt med bevarad ejektionsfraktion

In this article, we describe an optimized, Langendorff-based procedure for the isolation of single-cell atrial cardiomyocytes (ACMs) from a rat model of ...