Name: endothelial cell transcytosis assay as an in vitro model to evaluate inner blood-retinal barrier permeability
Uploaded: 2022-06-07T15:00:00
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इस काम को जेसी को एनआईएच अनुदान (आर01 ईवाई028100, ईवाई024963 और ईवाई031765) द्वारा समर्थित किया गया था। जेडडब्ल्यू को नाइट्स टेम्पलर आई फाउंडेशन करियर स्टार्टर ग्रांट द्वारा समर्थित किया गया था।

सभी पशु प्रयोगों को प्रकाश माइक्रोस्कोपी और ईएम छवियों (चित्रा 3) की पीढ़ी के लिए बोस्टन चिल्ड्रन हॉस्पिटल में संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (आईएसीयूसी) द्वारा अनुमोदित किया गया था। व...

बीआरबी रेटिना स्वास्थ्य और बीमारी में एक आवश्यक भूमिका निभाता है। संवहनी पारगम्यता का आकलन करने वाली इन विट्रो तकनीकें बाधा (बीआरबी / बीबीबी) विकास और कार्य से संबंधित अध्ययनों में महत्वपूर्ण उपक?...

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Biological Safety Cabinet&#160;</td>
			<td>Thermo Electron Corporation, Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>1286</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture petridish&#160;</td>
			<td>Nest Biotechnology</td>
			<td>704001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge&#160;</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tubes (15 mL)</td>
			<td>Corning Inc.</td>
			<td>352097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tubes (50 mL)</td>
			<td>Denville Scientific Inc.</td>
			<td>C1062-P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cyanine 3-human Transferrin&#160;</td>
			<td>Jackson ImmunoResearch</td>
			<td>AB_2337082</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endothelial Cell Basal Medium-2 (EBM-2)</td>
			<td>Lonza Bioscience</td>
			<td>CC-3156</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endothelial Cell Growth Medium-2 (EGM-2) SingleQuots supplements</td>
			<td>Lonza Bioscience</td>
			<td>CC-4176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EVOM Millicell Electrical Resistance System-2 (ERS-2)</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>MERS00002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>Lonza Bioscience</td>
			<td>CC-4102B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelatin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G7765</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemocytometer (2-chip)</td>
			<td>Bulldog Bio</td>
			<td>DHC-N002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horseradish Peroxidase (HRP)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P8250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human retinal microvascular endothelial cells (HRMEC)</td>
			<td>Cell Systems</td>
			<td>ACBRI 181</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Thermo Electron Corporation, Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>3110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L cells (for Control-conditioned medium)</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-2648</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L Wnt-3A cells (for Wnt3A-conditioned medium)</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-2647</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>DMi1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multimode Plate Reader</td>
			<td>EnSight, PerkinElmer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline (PBS) buffer (1x)</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>10010-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QuantaBlu Fluorogenic Peroxidase Substrate kit</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>15169</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human Norrin (rhNorrin)</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>3014-NR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human Vascular endothelial growth factor (rhVEGF)</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>293-VE</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe filter (0.22 &#181;m)</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SLGP033RS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transwell inserts (6.5 mm transwell, 0.4 &#181;m pore polyester membrane insert)</td>
			<td>Corning Inc.</td>
			<td>CLS3470-48EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA (0.25%) (1x)</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>25-200-072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath</td>
			<td>Precision, Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>51221060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>XAV939 (Wnt/&#946;-catenin Inhibitor)</td>
			<td>Selleckchem</td>
			<td>S1180</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

endothelial cell transcytosis assay as an in vitro model to evaluate inner blood-retinal barrier permeability

रक्त-रेटिना बाधा (बीआरबी) की शिथिलता कई संवहनी आंख रोगों के पैथोफिज़ियोलॉजी में योगदान देती है, जिसके परिणामस्वरूप अक्सर रेटिना एडिमा और बाद में दृष्टि हानि होती है। आंतरिक रक्त-रेटिना बाधा (आईबीआरबी) मुख्य रूप से शारीरिक परिस्थितियों में कम पारगम्यता के साथ रेटिना संवहनी एंडोथेलियम से बना है। कम पारगम्यता की इस विशेषता को आसन्न रेटिना माइक्रोवस्कुलर एंडोथेलियल कोशिकाओं के बीच पैरासेलुलर परिवहन की कम दरों के साथ-साथ उनके माध्यम से ट्रांससेलुलर परिवहन (ट्रांसकाइटोसिस) द्वारा कसकर विनियमित और बनाए रखा जाता है। रेटिना ट्रांससेलुलर बैरियर पारगम्यता का आकलन स्वास्थ्य और बीमारी में आईबीआरबी अखंडता में मौलिक अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकता है। इस अध्ययन में, हम मानव रेटिना माइक्रोवस्कुलर एंडोथेलियल कोशिकाओं (एचआरएमईसी) का उपयोग करके आईबीआरबी पारगम्यता का मूल्यांकन करने के लिए एक इन विट्रो मॉडल के रूप में एक एंडोथेलियल सेल (ईसी) ट्रांसकाइटोसिस परख का वर्णन करते हैं। यह परख क्रमशः रिसेप्टर- और कैवोले-मध्यस्थता ट्रांससेलुलर परिवहन प्रक्रियाओं में ट्रांसफरिन और हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज (एचआरपी) के परिवहन के लिए एचआरएमईसी की क्षमता का आकलन करती है। छिद्रपूर्ण झिल्ली पर संवर्धित पूरी तरह से कंफ्लुएंट एचआरएमईसी को फ्लोरोसेंट-टैग किए गए ट्रांसफरिन (क्लैथ्रिन-निर्भर ट्रांसकाइटोसिस) या एचआरपी (कैवोले-मध्यस्थता ट्रांसकाइटोसिस) के साथ इनक्यूबेट किया गया था ताकि निचले कक्ष में स्थानांतरित ट्रांसफरिन या एचआरपी के स्तर को मापा जा सके, जो ईसी मोनोलेयर में ट्रांसकाइटोसिस के स्तर का संकेत है। डब्ल्यूएनटी सिग्नलिंग, आईबीआरबी को विनियमित करने वाला एक ज्ञात मार्ग, कैवोले-मध्यस्थता एचआरपी-आधारित ट्रांसकाइटोसिस परख विधि को प्रदर्शित करने के लिए संशोधित किया गया था। यहां वर्णित ईसी ट्रांसकाइटोसिस परख संवहनी विकृति में ईसी पारगम्यता और आईबीआरबी अखंडता के आणविक नियामकों की जांच और दवा वितरण प्रणालियों की जांच के लिए एक उपयोगी उपकरण प्रदान कर सकता है।

रेटिना संवहनी एंडोथेलियम की ईएम छवियां विवो में एंडोथेलियल कोशिकाओं में ट्रांससाइटोटिक वेसिकुलर परिवहन और कैवोलर पुटिकाओं को दिखाती हैं। ईसी ट्रांसकाइटोसिस को रेटिना क्रॉ?...

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Endothelial Cell Transcytosis Assay as an In Vitro Model to Evaluate Inner Blood-Retinal Barrier Permeability

यह प्रोटोकॉल कैवोले-मध्यस्थता ट्रांससेलुलर परिवहन प्रक्रियाओं में कोशिकाओं में हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज परिवहन के लिए मानव रेटिना माइक्रोवस्कुलर एंडोथेलियल कोशिकाओं की क्षमता को मापकर आंतरिक रक्त-रेटिना बाधा पारगम्यता का मूल्यांकन करने के लिए एक मॉडल के रूप में एक इन विट्रो एंडोथेलियल सेल ट्रांसकाइटोसिस परख को दर्शाता है।

एंडोथेलियल सेल ट्रांसकाइटोसिस परख आंतरिक रक्त-रेटिना बाधा पारगम्यता का मूल्यांकन करने के लिए एक इन विट्रो मॉडल के रूप में

Dysfunction of the blood-retinal barrier (BRB) contributes to the pathophysiology of several vascular eye diseases, often resulting in retinal edema and ...

यह प्रोटोकॉल एंडोथेलियल ट्रांसकाइटोसिस पर एक विशिष्ट ध्यान देने के साथ रक्त-रेटिना या रक्त-मस्तिष्क बाधा जैसे चयनात्मक संवहनी बाधाओं के कार्य और पारगम्यता का अध्ययन करने के लिए एक उपयोगी सेल-आधारित मॉडल प्रदान करता है। यह परख स्थापित करना और उपयोग करना आसान है जिसके लिए किसी जीवित जानवर की आवश्यकता नहीं होती है। इसका उपयोग एंडोथेलियल सेल पारगम्यता और आंतरिक रक्त-रेटिना बाधा अखंडता को प्रभावित करने वाले ट्रांसकाइटोसिस के विभिन्न आणविक नियामकों की जांच के लिए किया जा सकता है।यह परख संवहनी जीव विज्ञान और आंख और मस्तिष्क अनुसंधान में अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकती है, जिससे बीआरबी बीबीबी नियंत्रण में अंतर्निहित अणु तंत्र की बेहतर समझ और बाधाओं के पार संभावित दवा वितरण की खोज की जा सकती है। शुरू करने के लिए, मानव रेटिना माइक्रोवैस्कुलर एंडोथेलियल कोशिकाओं या एचआरएमईसी को सीडिंग के लिए सेल कल्चर फिल्टर इंसर्ट तैयार करें, प्रत्येक इंसर्ट को 0.1% जिलेटिन समाधान के 200 माइक्रोलीटर के साथ 30 मिनट के लिए एक लामिनर प्रवाह हुड के तहत कोटिंग करके। सुनिश्चित करें कि समाधान फ़िल्टर सम्मिलित की पूरी निचली सतह को कवर करता है।37 डिग्री सेल्सियस और 5% कार्बन डाइऑक्साइड पर उगाए गए सुसंस्कृत एचआरएमईसी के साथ एक पेट्री डिश लें, और विकास मीडिया को एस्पिरेट करें। संभावित फ्लोटिंग या मृत कोशिकाओं से छुटकारा पाने के लिए लैमिनार फ्लो हुड के तहत 10 मिलीलीटर 1 एक्स पीबीएस के साथ कोशिकाओं को धीरे से दो बार कुल्ला करें। कोशिकाओं को 0.25% ट्रिप्सिन-ईडीटीए समाधान के 0.5 से 1 मिलीलीटर के साथ अलग करें और पेट्री डिश को इनक्यूबेटर में 37 डिग्री सेल्सियस और 5% कार्बन डाइऑक्साइड पर 5 मिनट के लिए रखें।4.5 से 9 मिलीलीटर विकास मीडिया जोड़कर ट्रिप्सिन गतिविधि को बुझाएं और सेल निलंबन को 10-मिलीलीटर पिपेट का उपयोग करके 15-मिलीलीटर ट्यूब में स्थानांतरित करें। कमरे के तापमान पर 5 मिनट के लिए कोशिकाओं को 200 गुना ग्राम पर घुमाएं। सुपरनैटेंट को सावधानीपूर्वक हटा दें और 3 मिलीलीटर विकास मीडिया में गोली को फिर से निलंबित करें।एक मैनुअल हेमोसाइटोमीटर या एक स्वचालित सेल काउंटर का उपयोग करके कोशिकाओं की संख्या की गणना करें और प्रति फिल्टर सम्मिलित 40,000 कोशिकाओं के घनत्व पर बीज करें। प्रत्येक सम्मिलित के लिए सेल निलंबन की मात्रा 250 माइक्रोलीटर है। पारगम्य आवेषण वाले कुओं से कोटिंग घोल को एस्पिरेट करें और प्रति सम्मिलित सेल निलंबन के 250 माइक्रोलीटर स्थानांतरित करें, फिर एक सम्मिलित में केवल माध्यम जोड़ें, जिसका उपयोग ट्रांसेंडोथेलियल विद्युत प्रतिरोध, या टीईईआर, माप के लिए रिक्त नियंत्रण के रूप में किया जाएगा।इसके साथ ही, बेसोलेटरल कक्षों में प्रति कुएं मध्यम के 750 माइक्रोलीटर भी जोड़ें। इनक्यूबेटर में पारगम्य प्रविष्टियों के साथ 24-वेल प्लेट को 7 से 12 दिनों तक रखें जब तक कि सुसंस्कृत कोशिकाएं पूरी तरह से संकुचित न हो जाएं और लगभग 20 ओम प्रति वर्ग सेंटीमीटर का वांछित टीईईआर मान प्राप्त न हो जाए। टीईईआर माप से पहले, तापमान संतुलन के लिए 15 से 20 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर लैमिनार प्रवाह हुड में सेल युक्त 24-वेल प्लेट रखें।एचआरएमईसी के लिए टीईआर को मापने के लिए, उपकला वोल्ट / ओम मीटर विद्युत प्रतिरोध प्रणाली का उपयोग करके, इलेक्ट्रोड को मीटर से कनेक्ट करें, और इलेक्ट्रोड को पहले 15 से 20 मिनट के लिए 70% इथेनॉल में भिगोकर और फिर इसे सेल कल्चर ईजीएम विकास माध्यम में संक्षेप में डुबोकर बराबर करें। इलेक्ट्रोड को सावधानीपूर्वक डुबोकर टीईईआर माप करें, जैसे कि छोटी नोक डालने में है और लंबी नोक कुएं के निचले हिस्से को छूती है। पहले रिक्त नियंत्रण में प्रतिरोध को मापें, फिर प्रत्येक सम्मिलित के लिए, तीन प्रतियों में टीईआर को मापें।लगभग 20 ओम वर्ग सेंटीमीटर के आसपास टीईआर मूल्यों के साथ संपर्क तक पहुंचने पर, सीरम-लिगैंड के साथ उपचार से पहले दोनों कक्षों में ईबीएम में 0.5% एफबीएस का उपयोग करके 37 डिग्री सेल्सियस पर 24 घंटे और 5% कार्बन डाइऑक्साइड पर कोशिकाओं को वंचित करता है। सीरम-कम ईबीएम का उपयोग पूरे परख में किया गया था। फ्लोरोसेंट साइनिन -3-टैग के साथ एपिकल चैंबर में सीरम-कम माध्यम का उपयोग करके कोशिकाओं को 37 डिग्री सेल्सियस पर 60 मिनट के लिए ट्रांसफरिन लिगैंड में इनक्यूबेट करें।सीरम-कम माध्यम के साथ मोनोलेयर को 4 बार और बेसोलेटरल रूप से धोने के बाद, कोशिकाओं वाले फिल्टर इंसर्ट में ताजा माध्यम जोड़ें और इंसर्ट को 24-वेल प्लेट के ताजा कुओं में स्थानांतरित करें जिसमें प्रीवार्म्ड सीरम-कम माध्यम होता है। इनक्यूबेटर में एक और 90 मिनट के लिए कोशिकाओं को इनक्यूबेट करें और फिर बेसोलेटरल कक्ष से माध्यम एकत्र करें। फ्लोरेसेंस डिटेक्टर का उपयोग करके बेसोलेटरल कक्ष से समाधान की प्रतिदीप्ति तीव्रता रिकॉर्ड करें।लगभग 20 ओम वर्ग सेंटीमीटर के आसपास टीईआर मूल्यों के साथ संपर्क तक पहुंचने पर, सीरम-लिगैंड के साथ उपचार से पहले दोनों कक्षों में ईबीएम में 0.5% एफबीएस का उपयोग करके कोशिकाओं को 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस और 5% कार्बन डाइऑक्साइड पर 5% कार्बन डाइऑक्साइड से वंचित करता है। सीरम-कम ईबीएम का उपयोग पूरे परख में किया गया था। इसके बाद, वांछित उपचार और वाहन नियंत्रण के साथ एपिकल कक्ष में कोशिकाओं का इलाज करें।कोशिकाओं में 5 मिलीग्राम प्रति मिलीलीटर हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज, या एचआरपी जोड़ें, और 37 डिग्री सेल्सियस पर 15 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें। एपिकल कक्ष में ताजा सीरम-कम माध्यम जोड़ें और इंसर्ट को एक ताजा कुएं में स्थानांतरित करें जिसमें प्रीवार्ड मीडिया हो। इनक्यूबेटर में अतिरिक्त 90 मिनट के लिए मोनोलेयर को इनक्यूबेट करें।बेसोलेटरल कक्ष से माध्यम एकत्र करने के बाद, एकत्र किए गए माध्यम में एचआरपी फ्लोरोजेनिक पेरोक्सीडेज सब्सट्रेट के 100 माइक्रोलीटर जोड़ें और 10 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर इनक्यूबेट करें। स्टॉप समाधान के 100 माइक्रोलीटर के साथ प्रतिक्रिया को रोकें और फ्लोरेसेंस प्लेट रीडर का उपयोग करके मीडिया में एचआरपी सब्सट्रेट प्रतिक्रिया उत्पाद के स्तर का पता लगाएं। इन विट्रो ट्रांसकाइटोसिस परख का प्रदर्शन करने से पहले, रेटिना में एंडोथेलियल सेल ट्रांसकाइटोसिस के विज़ुअलाइज़ेशन को पृष्ठभूमि की जानकारी के रूप में दिखाया गया है।यहां, प्रकाश माइक्रोस्कोप छवि डीएबी से सना 3 महीने के जंगली प्रकार के माउस रेटिना अनुभाग से एचआरपी से भरी रक्त वाहिका लुमेन दिखाती है। एचआरपी को रेट्रो-ऑर्बिटल इंजेक्शन दिया गया था। एचआरपी से भरे रेटिना वाहिकाओं को प्रकाश माइक्रोस्कोप के तहत गहरे भूरे रंग के अवक्षेप के रूप में देखा जा सकता है।ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप अल्ट्रा थिन सेक्शन आंतरिक रक्त-रेटिना बाधा में ईसी ट्रांसकाइटोसिस को दर्शाते हुए आरएमईसी के साथ एचआरपी से भरे ट्रांससाइटोटिक वाहिकाओं को दर्शाता है। यहां, बड़ी पुटिका संभावित रूप से मैक्रोपिनोसोम और ल्यूमिनोल पक्ष पर एक लाल रक्त कोशिका को दर्शाती है। टीईएम छवि आरएमईसी के भीतर एचआरपी से भरे छोटे ट्रांससाइटोटिक पुटिकाओं, संभवतः कैवोला पुटिकाओं को दिखाती है।सीएवी -1 एंटीबॉडी और आइसोलेक्टिन बी 4 का इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री धुंधला होना 3 महीने के जंगली प्रकार के माउस रेटिना में रेटिना रक्त वाहिकाओं में कैवोला पुटिकाओं के एक मार्कर सीएवी -1 के स्थानीयकरण को दर्शाता है। रेटिना एंडोथेलियल कोशिकाओं के भीतर इम्यूनोगोल्ड-लेबल सीएवी -1 की टीईएम छवि को सीएवी -1 पॉजिटिव कैवोला पुटिका की एक आवर्धित छवि के साथ यहां दिखाया गया है। ट्रांसफरिन का उपयोग करके एचआरएमईसी में क्लैथ्रिन-मध्यस्थता ईसी ट्रांसकाइटोसिस परख के लिए, यहां, एक फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोप छवि नीले रंग में डीएपीआई के साथ सना एचआरएमईसी के भीतर लाल रंग में एंडोसाइटोज्ड साइ 3 ट्रांसफरिन दिखाती है।एचआरपी का उपयोग करके कैवोले-मध्यस्थता ईसी ट्रांसकाइटोसिस के लिए, डब्ल्यूएनटी सिग्नलिंग का उपयोग परख को प्रदर्शित करने के लिए एक उदाहरण के रूप में किया जाता है। डब्ल्यूएनटी सिग्नलिंग हाल ही में कैवोले-मध्यस्थता ईसी ट्रांसकाइटोसिस को विनियमित करने के लिए पाया गया था। कोशिकाओं को डब्ल्यूएनटी पाथवे एक्टिवेटर डब्ल्यूएनटी 3 ए-वातानुकूलित माध्यम और पुनः संयोजक नॉरिन के साथ इलाज किया गया था, डब्ल्यूएनटी सिग्नलिंग अवरोधक एक्सएवी 939 और उनके प्रतिक्रियाशील नियंत्रण के साथ या उसके बिना।डब्ल्यूएनटी एक्टिवेटर्स ने एचआरपी-आधारित ट्रांसकाइटोसिस के स्तर को कम कर दिया, जिसे एक्सएवी 939 द्वारा उलट दिया गया था। मोनोलेयर अखंडता निर्धारित करने के लिए सही टीईआर माप महत्वपूर्ण है। यह विभिन्न कारकों जैसे अनुचित हैंडलिंग, तापमान में उतार-चढ़ाव, संस्कृति माध्यम, संस्कृति अवधि, आदि से बहुत प्रभावित होता है।इस परख को विवो स्थितियों में नकल करने वाले सह-संस्कृति या 3 डी ऑर्गेनोटाइपिक संस्कृति प्रणालियों के रूप में संशोधित किया जा सकता है।

Research

JoVE Journal

Medicine

Endothelial Cell Transcytosis Assay as an In Vitro Model to Evaluate Inner Blood-Retinal Barrier Permeability

Stem Cell Transplantation in an in vitro Simulated Ischemia/Reperfusion Model

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एक में स्टेम सेल प्रत्यारोपण इन विट्रो में नकली मॉडल / Ischemia reperfusion

Stem cell transplantation protocols are finding their way into clinical practice1,2,3. Getting better results, making the protocols more robust, and ...

An in vivo Assay to Test Blood Vessel Permeability

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एक<em&gt; Vivo में</em&gt; रक्त वाहिका पारगम्यता परीक्षण परख

This method is based on the intravenous injection of Evans Blue in mice as the test animal model. Evans blue is a dye that binds albumin. Under ...

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

मात्रात्मक वास्तविक समय पीसीआर का उपयोग करने के लिए एक प्रतियोगी murine अस्थि मज्जा प्रत्यारोपण के मॉडल में दाता कोशिका engraftment निर्धारित

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

Stretch in Brain Microvascular Endothelial Cells (cEND) as an In Vitro Traumatic Brain Injury Model of the Blood Brain Barrier

Stretch in Brain Microvascular Endothelial Cells cEND as an In Vitro Traumatic Brain Injury Model of the Blood Brain Barrier

एक के रूप में मस्तिष्क microvascular endothelial कोशिकाओं (cEND) में खिंचाव<em&gt; इन विट्रो में</emब्लड ब्रेन बैरियर के&gt; घाव मस्तिष्क चोट मॉडल

Due to the high mortality incident brought about by traumatic brain injury (TBI), methods that would enable one to better understand the underlying ...

Setting-up an In Vitro Model of Rat Blood-brain Barrier (BBB): A Focus on BBB Impermeability and Receptor-mediated Transport

Setting-up an In Vitro Model of Rat Blood-brain Barrier BBB: A Focus on BBB Impermeability and Receptor-mediated Transport

सेटिंग अप एक<em&gt; इन विट्रो</emचूहा रक्त मस्तिष्क बाधा के&gt; मॉडल (BBB): बीबीबी अछिद्रता और रिसेप्टर की मध्यस्थता परिवहन पर ध्यान केंद्रित

The blood brain barrier (BBB) specifically regulates molecular and cellular flux between the blood and the nervous tissue. Our aim was to develop and ...

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

एक के रूप में मस्तिष्क Microslices की excitotoxic उत्तेजना<em&gt; इन विट्रो</em&gt; स्ट्रोक के मॉडल

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As ...

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

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एक के रूप में ऑक्सीजन ग्लूकोज अभाव और Reoxygenation<em&gt; इन विट्रो</em&gt; Ischemia-reperfusion चोट मॉडल का अध्ययन रक्त मस्तिष्क बाधा शिथिलता के लिए

Ischemia-Reperfusion (IR) injury is known to contribute significantly to the morbidity and mortality associated with ischemic strokes. Ischemic ...

An Acute Retinal Model for Evaluating Blood Retinal Barrier Breach and Potential Drugs for Treatment

उपचार के लिए रक्त रेटिना बैरियर से ब्रीच और संभावित दवाओं का मूल्यांकन के लिए एक तीव्र रेटिना मॉडल

A low-cost, easy-to-use and powerful model system is established to evaluate potential treatments that could ameliorate blood retinal barrier breach. An ...

Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells

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तैयार करना और<em&gt; इन विट्रो</em&gt; चुम्बकीय की विशेषता मीर संशोधित अंतर्कलीय कोशिकाओं

To date, the available surgical and pharmacological treatments for cardiovascular diseases (CVD) are limited and often palliative. At the same time, gene ...

Neonatal Murine Cochlear Explant Technique as an In Vitro Screening Tool in Hearing Research

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नवजात शिलालेख के रूप में कण्ट्रोलर स्पष्टीकरण तकनीक<em&gt; विट्रो में</em&gt; सुनवाई अनुसंधान में स्क्रीनिंग टूल

While there have been remarkable advances in hearing research over the past few decades, there is still no cure for Sensorineural Hearing Loss (SNHL), a ...