Name: live imaging of microtubule dynamics in glioblastoma cells invading the zebrafish brain
Uploaded: 2022-07-29T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Live Imaging of Microtubule Dynamics in Glioblastoma Cells Invading the Zebrafish Brain at JoVE.com

我们非常感谢P. Herbomel博士（法国巴斯德研究所）和他的实验室，特别是Valérie Briolat和Emma Colucci-Guyon为我们提供斑马鱼生产线和显微注射板的塑料模具，以及他们在斑马鱼实验程序方面的宝贵专业知识。我们非常感谢UtechS光子生物成像（C2RT，巴斯德研究所，由法国国家研究机构法国生物成像和ANR-10-INBS-04支持;对未来的投资）。这项工作得到了Ligue contre le cancer（EL2017。LNCC）、国家科学研究中心和巴斯德研究所，以及玛格丽特·米歇尔夫人和波尔凯先生的慷慨捐赠。

动物实验是根据欧盟处理实验动物的准则进行的。所有协议均由巴斯德研究所动物实验伦理委员会 - CEEA 89 和法国研究与教育部批准（许可证 #01265.03）。在注射或实时成像过程中，动物在实验程序结束时 Tricaine.At 麻醉，它们被麻醉剂过量安乐死。有关此协议中使用的材料、设备和软件的详细信息，请参阅 材料表 。该协议的一般工作流程如图 1 所示。
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以单细胞分辨率对肿瘤异种移植物进行成像很可能成为提高我们对GBM生物学理解的不可或缺的工具。小鼠PDX模型中的实时成像导致了关于GBM如何集体侵入脑组织的宝贵发现18。然而，迄今为止，时空分辨率还不足以揭示控制GBM侵袭的蛋白质的动力学。我们推断，通过将透明斑马鱼幼虫中GBM细胞的原位移植与高分辨率活体成像相结合，可以足够详细地分析细胞骨架蛋白（如MTs）以?...

细胞运动是一个刻板的过程，需要极性轴的建立和产生力的细胞骨架重排。肌动蛋白聚合及其与肌球蛋白的关联被认为是细胞运动所需的突出和收缩力的主要贡献者1。微管被认为是迁移过程中细胞极化和定向持久性的主要参与者2。近年来，MTs也被证明可以产生和稳定突起，以支持3D3细胞侵袭期间的机械压缩力。最近，MTs直接参与了粘连和机械敏感迁移的机械转导4。表征MT-plus末端动力学的动态不稳定性由聚合（生长）和解聚（收缩）的重复阶段组成，这些阶段由大量的微管结合蛋白和细胞内信号级联控制，例如由RHO-GTPase5，6，7控制的那些。MT网络在细胞迁移和侵袭中的作用使得MT动力学的研究成为更好地了解免疫细胞归巢，伤口愈合和癌症侵袭机制的关键因素。
癌细胞逃离原发性肿瘤核心、在组织中扩散并产生继发性肿瘤的能力是防止全球在 50 年前宣布的抗癌战争中取得成功的关键一步8，9.最大的障碍之一是了解癌细胞如何主动侵入组织。关键侵袭机制依赖于与控制非肿瘤细胞迁移相同的原理10。然而，癌细胞迁移特异性已经出现11，引发了对这种类型的迁移进行更好表征的需求。具体来说，由于肿瘤微环境似乎是癌症进展的关键参与者12，因此在相关的生理背景下观察和分析癌细胞侵袭对于揭示癌细胞播散的机制至关重要。
MT是癌症进展的核心，以维持增殖和侵袭。原 位 MT动力学的精确分析有助于识别两个过程中的MT改变剂（MTA）。MT动态会随着环境的变化而发生巨大变化。在 体外，当细胞以3D形式包埋在凝胶中时，用MT去稳定剂（如诺考达唑）处理可防止细胞突起形成，而对2D细胞迁移几乎没有影响13，14。尽管技术上具有挑战性，但活体成像的进步允许在癌细胞侵袭期间对MT动力学进行 体内 分析。例如，在小鼠皮下异种移植纤维肉瘤细胞中对MT的观察表明，肿瘤相关巨噬细胞影响肿瘤细胞中的MT动力学15。然而，这些小鼠模型涉及广泛的外科手术，并且对于不易接近的癌症（例如高度侵袭性脑肿瘤GBM）仍然不满意。
尽管15个月的平均生存时间令人沮丧16，但人们对GBM在脑实质内的传播方式或维持GBM细胞侵袭脑组织的关键分子元素知之甚少。小鼠原位异种移植（PDX）模型的改进和颅窗的建立为GBM细胞侵袭研究提供了新的前景17，18。然而，由于成像质量欠佳，该模型主要允许对浅表异种移植物进行纵向成像，并且迄今为止尚未成功用于研究细胞骨架蛋白的亚细胞成像。此外，在“3R”禁令减少使用啮齿动物并用低等脊椎动物取而代之之后，已经建立了替代模式。
利用在斑马鱼（Danio rerio）幼虫中观察到的原始免疫力，在鱼脑中原位注射GBM细胞19，20，21。在发育中的中脑心室附近注射概括了大部分人类GBM病理生理学21，并且观察到与人类血管共同选择相同的GBM侵袭首选模式22。由于鱼幼虫的透明度，该模型允许可视化GBM细胞从大多数GBM产生的脑室周围区域侵入大脑23。
由于MT对于体外GBM细胞侵袭至关重要24，25，因此需要更好地表征MT动力学并鉴定细胞侵袭期间的关键调节因子。然而，迄今为止，斑马鱼原位模型生成的数据尚未包括入侵过程中MT动力学的亚细胞分析。本文提供了一种方案来研究体内MT动力学并确定其在脑癌侵袭中的作用。在稳定的微管标记之后，GBM细胞在斑马鱼幼虫的大脑中以3dpf的速度显微注射，并在脑组织中的进展过程中以高时空分辨率实时成像。荧光MT的实时成像允许对MT加端动力学进行定性和定量分析。此外，该模型可以实时评估MTA对MT动力学和GBM细胞侵袭特性的影响。这种相对非侵入性的方案与一次处理的大量幼虫以及药物应用的便利性（在鱼水中）相结合，使该模型成为临床前测试的资产。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Glioblastoma cell culture</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foetal calf serum</td>
			<td>Eurobio</td>
			<td>CVFSVF00-01</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM NEAA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11140-050</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modified Eagle&#39;s medium</td>
			<td>Eurobio</td>
			<td>CM1MEM18-01</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin&#8211;streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U-87 MG</td>
			<td>ECACC</td>
			<td>89081402-1VL</td>
			<td>Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lenitivirus production</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSAria III</td>
			<td>BD bioscience</td>
			<td></td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSDiva software v8.0</td>
			<td>BD bioscience</td>
			<td></td>
			<td>Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEK-293T</td>
			<td>Merck</td>
			<td>12022001</td>
			<td>Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pMD2.G</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>Plasmid #12259</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>psPAX2</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>Plasmid #12260</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultracentrifuge Optima XPN-80</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td></td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell passaging and staining</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dPBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190-094</td>
			<td>Chemical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst 34580</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>63493</td>
			<td>Chemical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA (0,05%)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25300-054</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zebrafish husbandry</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence stereomicroscope LEICA M165FC</td>
			<td>LEICA</td>
			<td>https://www.leica-microsystems.com/fr/produits/stereomicroscopes-et-macroscopes/informations-detaillees/leica-m165-fc/</td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methylene Blue hydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M4159</td>
			<td>Chemical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-Phenylthiourea (PTU)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P7629-25G</td>
			<td>Chemical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer Pipettes fine tips</td>
			<td>Samco Scientific</td>
			<td>232</td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer Pipettes Large Bulb3mL</td>
			<td>Samco Scientific</td>
			<td>225</td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tricaine (Ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonate)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat#: A5040</td>
			<td>Chemical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Volvic Source Water</td>
			<td>DUTSCHER DOMINIQUE SAS</td>
			<td>999556</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xenotransplantation</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24-well plate</td>
			<td>TPP</td>
			<td>92024</td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Borosilicate glass capillaries (1.0 ODx0.58IDx150L mm)</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>(#30-0017 GC100-15</td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CellTram oil vario microinjector</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5176000.025</td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microloading pipet tips (Microloader) 20&#181;L</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>&#160;5242956003</td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator</td>
			<td>NARISHIGE</td>
			<td>https://products.narishige-group.com/group1/injection/english.html</td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral Oil</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M8410-100ml</td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>KL 2500 LCD</td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Universal capillary holder</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5176190002</td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vertical Pipette puller</td>
			<td>KOPF (Roucaire)</td>
			<td>Model 720</td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intravital Imaging</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3.5cm glass-bottom videoimaging dish</td>
			<td>MatTek Life Sciences, MA, USA</td>
			<td>P35G-1,5-14-C</td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acquisition software: NIS-Elements-AR version 5.21</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td>Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat-Block</td>
			<td>Techne</td>
			<td>DRI-BLOCK DB-2D</td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope head Nikon Ti2E</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sCMOS camera Prime 95B</td>
			<td>Photometrics</td>
			<td></td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sCMOS camera Orca Flash 4</td>
			<td>Hammatsu</td>
			<td></td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrapure Low melting point agarose</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>16520-050</td>
			<td>Chemical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yokagawa CSU-W1 spinning disk unit</td>
			<td>Hammatsu</td>
			<td></td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drug Treatment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D2650-100ML</td>
			<td>Chemical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nocodazole</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M1404-2MG</td>
			<td>Chemical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image Analysis</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaris 9.5.1 software</td>
			<td>Oxford Instruments</td>
			<td></td>
			<td>Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImarisFileConverter 9.5.1</td>
			<td>Oxford Instruments</td>
			<td></td>
			<td>Software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

live imaging of microtubule dynamics in glioblastoma cells invading the zebrafish brain

胶质母细胞瘤（GBM）在实际人群中中生存时间令人沮丧 - 在6至15个月之间 - 是最具破坏性的恶性脑肿瘤。治疗失败主要是由于GBM细胞的侵袭性，这说明了需要更好地了解GBM运动特性。为了研究支持GBM侵袭的分子机制，需要新的生理模型，能够深入表征侵袭过程中的蛋白质动力学。这些观察结果将为发现阻断肿瘤浸润和改善患者预后的新靶点铺平道路。本文报道了斑马鱼大脑中GBM细胞的原位异种移植如何允许亚细胞活体活体成像。专注于微管（MTs），我们描述了GBM细胞中MT标记的程序，在受精后3天（dpf）斑马鱼幼虫的透明大脑中微注射GBM细胞，在播散异种移植物中对MT进行活体成像，改变MT动力学以评估它们在GBM入侵期间的作用，并分析获得的数据。

为了分析MTs在体内GBM侵袭中的作用，我们在这里描述了通过慢病毒感染在GBM细胞中进行稳定MT标记的主要步骤，3 dpf斑马鱼幼虫中GBM细胞的原位异种移植，MT动力学的高分辨率活体成像，MTA处理及其对GBM侵袭的影响，以及MT动力学和体内侵袭的图像分析（图1）。 MT动态是通过沿着增长和收缩的MT构建kymograph来测量的（图3C），或?...

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Live Imaging of Microtubule Dynamics in Glioblastoma Cells Invading the Zebrafish Brain

我们报告了一种允许对侵入脊椎动物脑组织的胶质母细胞瘤（GBM）细胞中的微管动力学进行实时成像的技术。将荧光标记的GBM细胞的原位注射耦合到具有高分辨率活体成像的透明斑马鱼脑中，可以在 原位 癌症侵袭期间测量细胞骨架动力学。

侵入斑马鱼大脑的胶质母细胞瘤细胞微管动力学的实时成像

With a dismal median survival time in real populations-between 6 to 15 months-glioblastoma (GBM) is the most devastating malignant brain tumor. Treatment ...

该方法致力于通过将斑马鱼中脑癌细胞的特应性注射与亚细胞活体成像偶联来研究微管在脑癌侵袭中的作用。该技术的主要优点在于获得微管细胞骨架的高空间时间分辨率。它对于体内脑癌侵袭模型是独一无二的，它允许深入的微管动力学分析。原位脑癌细胞侵袭的亚细胞成像可用于分析可能参与癌症侵袭的任何感兴趣的蛋白质。首先，用PBS洗涤在37摄氏度下培养的胶质母细胞瘤细胞。通过加入一毫升0.05%胰蛋白酶EDTA并在细胞培养箱中以37摄氏度孵育5至10分钟，直到所有细胞完全分离，从而分离细胞。将细胞重悬于50毫升离心管中的5毫升完全胶质母细胞瘤细胞培养基中。加入45毫升冰冷的PBS，以134倍G离心五分钟。弃去上清液，并通过彻底上下移液，用一毫升冰冷的PBS重悬细胞。再加入49毫升冰冷的PBS，以134倍G离心五分钟。弃去上清液并将细胞重悬于200微升冰冷的PBS中。在移植过程中储存在冰上。要将胶质母细胞瘤细胞微注射到斑马鱼幼虫中脑中，用六毫升E3培养基填充显微注射铸板，每升三卡因补充160毫克。将十几个DEE-KOHR-EE-UH-NAY-TED幼虫转移到显微注射板中。一旦幼虫被麻醉并且对触摸完全没有反应，将它们放在侧面的沟渠中，抬起头，用00号画笔将卵黄囊推到沟槽壁上。然后使用微量加载尖端将五微升胶质母细胞瘤细胞加载到微毛细血管中，并将毛细血管插入通用毛细管支架中。将含有麻醉幼虫的显微注射板放在体视显微镜载物台上。使用微操纵器旋钮将微毛细管的尖端放在显微注射板的边缘。然后用手术刀将其折断，以创建一个大约细胞直径大小的尖锐入口点。通过在微量注射器中轻轻运行油并将针尖插入培养基中来验证细胞是否从毛细管中流出。将细胞集中在毛细血管的尖端，以最大限度地提高每注射体积注射的细胞数量，并避免用PBS填充脑组织。仔细检查从微毛细管出来的细胞，因为油被手动引入注射器。根据经验定义手动旋钮上输送 20 到 50 个细胞所需的圈数。通常，如果细胞足够浓缩，轻轻转动一次就足以弹出大约 10 个细胞。将毛细血管的尖端靠在大脑中静脉正上方的左视顶上。轻轻地将毛细血管按压在幼虫上，直到皮肤膜破裂。一旦到达视顶中的合适位置，即可弹出细胞。仔细观察毛细管的尖端，以可视化进入动物体内的细胞流，从而确保成功注射。根据需要对任意数量的动物重复该过程。根据实验者注射的速度，由于毛细血管中的细胞快速聚集，可能需要每 10 到 20 只幼虫换针。异种移植完成后，从显微注射板中取出幼虫，并在装有矿泉源水PTU和亚甲蓝培养基的24孔板中挑出幼虫。准备1%低熔点AH-KROH溶液。将500微升煮沸的1%低熔点AH-KROH溶液转移到1.5毫升离心管中，并在加热块上以37摄氏度冷却。在AH-KROHS中加入每升160微克的三卡因并充分混合。将一到四个异种移植的幼虫转移到一个3.5厘米的培养皿中，培养皿中装有矿泉源水PTU和亚甲基培养基，每升补充160微克的三卡因。一旦幼虫被麻醉并且对触摸完全无反应，使用细吸头移液管小心地将它们转移到含有AH-KROHS和三卡因的管中。轻轻地将幼虫与AH-KROHS混合。使用大灯泡转移移液管，将AH-KROHS中混合的幼虫放在玻璃底3.5厘米视频成像盘的中心 在体视显微镜下快速将幼虫放在其背上。使用微型加载尖端去除多余的AH-KROHS，以保持最薄的AH-KROHS层。AH-KROHS凝固后，加入2.5毫升成像介质。对于侵入性胶质母细胞瘤细胞中微管动力学的体内实时成像，将含有AH-KROHS嵌入异种移植幼虫的视频成像皿放置在温度设置为32摄氏度的倒置共聚焦显微镜的环境室中。使用电动XY载物台用10倍物镜在视频成像培养皿中查找幼虫。按逃生降低物镜转盘并将矿物油添加到60倍油物镜上，按逃生键返回初始焦点位置。观察红色通道中入侵的胶质母细胞瘤细胞，设置为561纳米激光源，20%激光功率和200毫秒的时间曝光。然后选择具有展开的微管网络和易于区分的微管细丝的细胞。设置 Z 系列设置。使用200微米范围的压电平台，选择微管网络的顶部和底部位置，其中10至30微米深的Z堆栈足以可视化迁移细胞突起中的微生物网络，Z切片步长为0.3微米。设置延时采集设置，以便在采集速度、Z-stack深度和荧光信号之间实现最佳平衡，以避免快速光漂白。每 5 到 10 秒获取一次微管图像，持续几分钟，并保存 5D 超堆栈。通过沿着生长和收缩的微管构建 kymograph 并随着时间的推移手动跟踪单个微管边缘来测量微管动力学。通过用200纳摩尔剂量的诺考达唑处理来评估在幼虫培养基中施用的药物治疗及其对微管网络组织的可逆影响。这导致微管网络的逐渐萎缩和胶质母细胞瘤细胞突起的消失在四小时后。洗掉药物恢复了胶质母细胞瘤细胞形成突起的能力。洗脱后12小时，细胞恢复沿脉管系统迁移，表明200纳摩尔剂量的诺考达唑足以破坏微管网络并迅速阻断体内胶质母细胞瘤细胞侵袭。对全球胶质母细胞瘤细胞侵袭的相同治疗进行为期三天的分析表明，与对照组相比，诺考达唑在体内阻止了长期胶质母细胞瘤细胞侵袭，而不会影响鱼的整体健康。记得从受精后三天健康的幼虫开始，将细胞浓缩到毛细血管中，尽量减少注射到大脑中的体积，并形成独特的肿瘤团块，并尽量避免注射到脑室。

Research

JoVE Journal

Biology

Live Imaging of the Zebrafish Embryonic Brain by Confocal Microscopy

现场共聚焦显微镜对斑马鱼的胚胎脑成像

In this video, we demonstrate the method our lab has developed to analyze the cell shape changes and rearrangements required to bend and fold the ...

科研

生物学

Live Imaging of Cell Motility and Actin Cytoskeleton of Individual Neurons and Neural Crest Cells in Zebrafish Embryos

在斑马鱼胚胎的单个神经元和神经嵴细胞的细胞运动和肌动蛋白细胞骨架的实时成像

The zebrafish is an ideal model for imaging cell behaviors during development in vivo. Zebrafish embryos are externally fertilized and thus easily ...

Transplantation of GFP-expressing Blastomeres for Live Imaging of Retinal and Brain Development in Chimeric Zebrafish Embryos

移植绿色荧光蛋白表达对视网膜和大脑发育的实时成像嵌合斑马鱼胚胎的卵裂球

Cells change extensively in their locations and property during embryogenesis. These changes are regulated by the interactions between the cells and their ...

Live Imaging of Cell Extrusion from the Epidermis of Developing Zebrafish

发展中国家斑马鱼的表皮细胞挤压实时成像

Homeostatic maintenance of epithelial tissues requires the continual removal of damaged cells without disrupting barrier function.  Our studies have found ...

4D Imaging of Protein Aggregation in Live Cells

在活细胞中蛋白质聚集的4D成像

One of the key tasks of any living cell is maintaining the proper folding of newly synthesized proteins in the face of ever-changing environmental ...

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

凋亡细胞清除过程中实时成像<em&gt;果蝇</em&gt;胚胎发育

The  proper elimination of unwanted or aberrant cells through apoptosis and  subsequent phagocytosis (apoptotic cell clearance) is crucial for normal  ...

Visualization of G3BP Stress Granules Dynamics in Live Primary Cells

中G3BP应力颗粒动力学在Live原代细胞可视化

SGs can be visualized in cells by immunostaining of specific protein components or polyA+ mRNAs. SGs are highly dynamic and the study of their assembly ...

Nephrotoxin Microinjection in Zebrafish to Model Acute Kidney Injury

肾毒素显微注射斑马鱼到模型急性肾损伤

The kidneys are susceptible to harm from exposure to chemicals they filter from the bloodstream. This can lead to organ injury associated with a rapid ...

High-resolution Time-lapse Imaging and Automated Analysis of Microtubule Dynamics in Living Human Umbilical Vein Endothelial Cells

高分辨率成像定时，并在活体人脐静脉内皮细胞微管动力学自动分析

The physiological process by which new vasculature forms from existing vasculature requires specific signaling events that trigger morphological changes ...

High-resolution Imaging and Analysis of Individual Astral Microtubule Dynamics in Budding Yeast

高分辨率成像和芽殖酵母个人星体微管动力学分析

Dynamic microtubules are fundamental to many cellular processes, and accurate measurements of microtubule dynamics can provide insight into how cells ...