Name: using a bipolar electrode to create a temporal lobe epilepsy mouse model by electrical kindling of the amygdala
Uploaded: 2022-06-29T14:30:00
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이 연구는 중국 국립 자연 과학 재단 (No. 82030037, 81871009)과 베이징시 보건위원회 (11000022T000000444685)의 지원을 받았다. 이 원고를 준비하는 동안 언어적 도움을 주신 TopEdit(www.topeditsci.com)에 감사드립니다.

이 실험은 수도 의과 대학 Xuanwu 병원의 실험 동물 윤리위원회의 승인을 받았습니다. 모든 마우스는 Capital Medical University, Xuanwu Hospital의 동물 실험실에 보관되었습니다. 이 프로토콜은 네 부분으로 나뉩니다. 처음 두 부분에서는 전극과 EEG 기록/자극 장비를 연결하는 슬립 링을 사용하여 전극과 전기 회로를 구축하는 방법을 소개합니다. 세 번째 부분에서는 전극 이식의 작동 방법을 설명하고 네 번...

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	<li>Kurita, T., Sakurai, K., Takeda, Y., Horinouchi, T., Kusumi, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Very+long-term+outcome+of+non-surgically+treated+patients+with+temporal+lobe+epilepsy+with+hippocampal+sclerosis:+A+retrospective+study.">Very long-term outcome of non-surgically treated patients with temporal lobe epilepsy with hippocampal sclerosis: A retrospective study.</a> PLoS One. 11 (7), 0159464 (2016).</li><li>Choy, M., Duffy, B. A., Lee, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optogenetic+study+of+networks+in+epilepsy.">Optogenetic study of networks in epilepsy.</a> Journal of Neuroscience Research. 95 (12), 2325-2335 (2017).</li><li>Aroniadou-Anderjaska, V., Fritsch, B., Qashu, F., Braga, M. 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P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PTZ-induced+seizures+in+mice+require+a+revised+Racine+scale.">PTZ-induced seizures in mice require a revised Racine scale.</a> Epilepsy &amp; Behavior. 95, 51-55 (2019).</li><li>Carriero, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+guinea+pig+model+of+mesial+temporal+lobe+epilepsy+following+nonconvulsive+status+epilepticus+induced+by+unilateral+intrahippocampal+injection+of+kainic+acid.">A guinea pig model of mesial temporal lobe epilepsy following nonconvulsive status epilepticus induced by unilateral intrahippocampal injection of kainic acid.</a> Epilepsia. 53 (11), 1917-1927 (2012).</li><li>Levesque, M., Avoli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+kainic+acid+model+of+temporal+lobe+epilepsy.">The kainic acid model of temporal lobe epilepsy.</a> Neuroscience Biobehavioral Reviews. 37, 2887-2899 (2013).</li><li>Fujita, A., Ota, M., Kato, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Urinary+volatile+metabolites+of+amygdala-kindled+mice+reveal+novel+biomarkers+associated+with+temporal+lobe+epilepsy.">Urinary volatile metabolites of amygdala-kindled mice reveal novel biomarkers associated with temporal lobe epilepsy.</a> Scientific Reports. 9 (1), 10586 (2019).</li><li>Li, J. 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H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amygdala+pathology+in+amyotrophic+lateral+sclerosis+and+primary+lateral+sclerosis.">Amygdala pathology in amyotrophic lateral sclerosis and primary lateral sclerosis.</a> Journal of the Neurological Sciences. 417, 117039 (2020).</li><li>Kuchukhidze, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emotional+recognition+in+patients+with+mesial+temporal+epilepsy+associated+with+enlarged+amygdala.">Emotional recognition in patients with mesial temporal epilepsy associated with enlarged amygdala.</a> Frontiers in Neurology. 12, 803787 (2021).</li><li>Soper, C., Wicker, E., Kulick, C. V., N'Gouemo, P., Forcelli, P. 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간질은 여러 증상과 다양한 원인을 가진 질병 그룹이다18. 모든 유형의 간질에 단일 모델을 사용할 수는 없으며 연구자는 특정 연구에 적합한 모델을 선택해야 합니다. 본 연구는 전극 제조의 가장 접근하기 쉬운 방법 중 하나를 소개합니다. 이 방법의 다양한 부분은 다양한 실험 조건에 적응하도록 조정할 수 있습니다.
이 방법은 자극 및 기록 기능을 모두 ?...

측두엽 간질(TLE)은 가장 흔한 유형의 간질이며 약물 내성 간질로 전환될 위험이 높습니다. 선택적 편도체(amygdalohippocampectomy)와 같은 수술은 TLE에 대한 효과적인 치료법이며, 이 질환의 간질 발생 및 ictogenesis는 아직 조사 중이다 1,2. TLE의 발병기전은 해마뿐만 아니라 편도체에서도 광범위하게 발생하는 것으로 나타났습니다 3,4. 예를 들어, 편도체 경화증과 편도체 비대는 모두 TLE 발작의 원인으로 자주 보고되었다 5,6. 편도체의 중요성은 과소평가될 수 없습니다. 편도체 모델은 간질 형성 연구에 필수적이며 이 모델에 대한 명확한 설명이 시급히 필요합니다.
동물 모델에서 발작을 유도하기 위해 몇 가지 접근법이 제안되었습니다. 과거에는 초기 단계에서 경련 약물을 복강 주사했다7. 이 방법은 편리했지만 간질 병소의 위치는 불확실했습니다. 정위 기술과 상세한 동물 뇌 지도의 발달로 국소화 문제를 해결하기 위해 두개내 약물 주입이 적용되었다8. 그러나 급성기의 중증 발작에 대한 개입 부족으로 사망률이 높았고 만성 자발 발작은 불안정한 간질 및 발작 빈도 9,10의 문제를 동반했습니다. 마지막으로 전기 점화 방법이 개발되었습니다. 이 방법은 주기적으로 특정 뇌 영역을 여러 번 자극하여, 발작 위치와 발병 시간을 명확히 조절하여 발작을 유도할 수 있게 한다11.
이 방법의 장점은 전극의 두개내 이식이 최소 침습적이라는 것이다12. 또한, 발작의 중증도는 자극의 종료에 의해 제어되어 발작으로 인한 사망률을 줄입니다. 이러한 변경은 이전 접근 방식의 단점을 해결했습니다. 특히, 이 모델은 인간의 발작을 적절하게 모방할 수 있으며, SE를 빠르게 유도하는 능력 때문에 간질 상태(status epilepticus, SE) 연구에 특히 적합하다13. 또한 항간질제 스크리닝(anti-epileptic drug screening)14 및 간질의 기전에 관한 연구에도 사용될 수 있다. 마지막으로, 편도체는 기억 조절, 보상 처리, 감정과 밀접한 관련이 있다는 것은 잘 알려져 있다15. 이러한 정신 기능 장애는 간질 환자에게서 자주 발생하므로, 간질의 정서적 문제를 연구하는 데는 편도체 간질 모델이 더 나은 선택이 될 수 있다16.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488-conjugated Donkey anti-Rabbit IgG</td>
			<td>invitrogen</td>
			<td>A-21206</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>c-Fos antibody</td>
			<td></td>
			<td>ab222699</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cranial drill</td>
			<td>SANS</td>
			<td>SA302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dental cement</td>
			<td>NISSIN</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EEG recording and stimulation equipment</td>
			<td>Neuracle Technology (Changzhou) Co., Ltd</td>
			<td>NSHHFS-210803</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lead-free tin wire</td>
			<td>BAKON</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pin header/Female header</td>
			<td>XIANMISI</td>
			<td></td>
			<td>spacing of 1.27 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silver wire</td>
			<td>A-M systems</td>
			<td>786000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slip ring</td>
			<td>Senring Electronics Co.,Ltd</td>
			<td>SNM008-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tungsten wire</td>
			<td>A-M systems</td>
			<td>796000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ultrafine multi-stand wire</td>
			<td>Shenzhen Chengxing wire and cable</td>
			<td>UL10064-FEP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>welding equipment</td>
			<td>BAKON</td>
			<td>BK881</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using a bipolar electrode to create a temporal lobe epilepsy mouse model by electrical kindling of the amygdala

편도체는 발작의 가장 흔한 기원 중 하나이며, 편도체 마우스 모델은 간질의 설명에 필수적입니다. 그러나 실험 프로토콜을 자세히 설명한 연구는 거의 없습니다. 이 논문은 양극성 전극 제조 방법의 도입과 함께 편도체 전기 점화 간질 모델 제작의 전체 과정을 보여줍니다. 이 전극은 자극과 기록을 모두 할 수 있어 자극 및 기록을 위해 별도의 전극을 이식하여 발생하는 뇌 손상을 줄일 수 있습니다. 장기 뇌파도(EEG) 기록 목적을 위해 슬립 링을 사용하여 케이블 엉킴 및 낙하로 인한 기록 중단을 제거했습니다.
기저외측 편도체(AP: 1.67 mm, L: 2.7 mm, V: 4.9 mm)를 19.83 ± 5.742회 주기적으로 자극(60Hz, 15분마다 1초) 한 후, 6마리의 마우스에서 완전한 점화가 관찰되었습니다(라신 척도로 분류된 3개의 연속 등급 V 에피소드의 유도로 정의됨). 전체 점화 과정에서 두개내 EEG가 기록되었으며, 점화 후 20-70초 동안 지속되는 편도체에서 간질 분비물이 관찰되었습니다. 따라서 이것은 편도체에서 유래한 간질을 모델링하기 위한 강력한 프로토콜이며 이 방법은 측두엽 간질에서 편도체의 역할을 밝히는 데 적합합니다. 이 연구는 근심 측두엽 간질 및 새로운 항간질제의 메커니즘에 대한 향후 연구에 기여합니다.

전극과 회로는 EEG를 기록하고 자극으로 기능할 수 있도록 합니다(그림 1). 이 설정은 전극을 별도로 이식, 기록 및 자극하는 복잡성을 피하고 뇌 조직의 손상을 최소화합니다. 슬립 링을 적용하면 모든 유형의 장치와 전극을 연결할 수 있습니다.
건강한 성인 수컷 C57BL/6 마우스 6마리에 전극 이식 수술을 시행하였고, 수술 2주 후에 전기자극을 실시하였다....

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Using a Bipolar Electrode to Create a Temporal Lobe Epilepsy Mouse Model by Electrical Kindling of the Amygdala

편도체는 측두엽 간질에서 중요한 역할을 하며, 이 간질은 이 구조에서 유래하고 전파됩니다. 이 기사는 기록 및 자극 기능을 모두 갖춘 심부 뇌 전극의 제조에 대한 자세한 설명을 제공합니다. 편도체에서 유래하는 내측 측두엽 간질 모델을 소개합니다.

양극성 전극을 사용하여 편도체의 전기적 점화에 의한 측두엽 간질 마우스 모델 생성

The amygdala is one of the most common origins of seizures, and the amygdala mouse model is essential for the illustration of epilepsy. However, few ...

이 프로토콜은 편도체를 기원으로 하는 간질 모델을 제안했습니다. 그것은 근심 측두엽 구조를 조사하는 길을 열어줍니다. 이 모델은 실험의 기초로 해석 될 수 있습니다.이 프로토콜은 저렴하고 효율적인 방법이므로 대부분의 실험실에서 신속하게 수행 할 수 있습니다. 이 절차를 시연하는 것은 우리 연구실의 대학원생 인 Yongchang Lu가 될 것입니다. 곰 직경이 76.2 마이크로 미터 인 테프론 코팅 텅스텐 와이어 2cm 길이로 시작하여 미리 준비된 구성 요소를 수집하는 것으로 시작하십시오.같은 길이의 곰 직경이 127마이크로미터인 은선 1개와 2x2개의 게이지 로프 핀 1세트. 라이터를 사용하여 각 텅스텐 와이어의 한쪽 끝을 태워 절연 코팅의 5mm를 제거합니다. 초미세 다중 가닥 와이어 부분을 벗겨냅니다.어두워지기 시작하는 아래쪽에서 위쪽 끝까지 포장을 풀고 위쪽으로 계속 이동합니다. 이 초미세 와이어와 텅스텐 와이어를 한쪽 끝을 꼬집고 다른 쪽 끝을 부드럽게 비틀어 결합하여 두 재료를 쉽게 얽힐 수 있습니다. 와이어가 단단히 감겨 있는지 확인하고 여분의 초미세 와이어를 잘라내기 위해 부드럽게 당깁니다.공정 전반에 걸쳐 텅스텐 와이어를 똑바로 유지하십시오. 로프 핀을 cl에 고정amp핀의 긴 면이 바깥쪽을 향하도록 용접 테이블의 경우. 주사기 바늘을 사용하여 솔더 페이스트를 집어 핀에 바릅니다.용접 토치를 섭씨 320도로 가열합니다. 토치 팁으로 무연 주석 와이어를 녹이고 닦습니다. 텅스텐 와이어의 상단을 로프 핀의 한 바늘과 겹치고 토치의 땜납을 사용하여 텅스텐 와이어를 핀에 접착합니다.다른 텅스텐 와이어와 다른 은선을 같은 방법으로 로프 핀에 용접하여 각 와이어가 바늘에 해당하도록합니다. 두 개의 열수축 튜브를 텅스텐 와이어의 상단보다 약간 길게 자릅니다. 두 개의 텅스텐 와이어의 회로가 직렬로 배치되지 않도록 전도성 부분이 튜브에 완전히 덮여 있는지 확인하기 위해 두 개의 텅스텐 와이어의 솔더 조인트에 놓습니다.용접 테이블 클램프에서 전극을 제거하고 수축 튜브를 가열할 때 전극의 모양이 사라지기 쉽기 때문에 큰 펜치로 전극을 부드럽게 잡습니다. 좋은 열전도율 cl을 사용하십시오.amp 약간 더 많은 힘으로. 공기 덕트를 켜고 섭씨 320도의 온도에 도달할 때까지 가열합니다.열수축 튜브가 조여질 때까지 몇 초 동안 불어줍니다. 핫멜트 접착제로 전극을 강화하십시오. 두 개의 텅스텐 와이어를 잡고 끝을 벌리면서 함께 비틀어 놓습니다.꼬인 텅스텐 와이어를 약 10mm 길이로 잘라서 끝 부분의 간격이 0.5mm를 초과하지 않도록합니다. 로프 핀의 용접되지 않은 쪽에 멀티 미터의 한 막대를 놓고 텅스텐 와이어 또는 은색 와이어의 끝을 다른 막대에 부드럽게 접촉하여 멀티 미터로 전극을 확인합니다. 회로가 매끄러운지 확인합니다.선이 직렬로 배치되지 않았는지 확인하십시오. 양쪽 끝에서 절연 스킨 5mm를 벗겨 내면의 금속 와이어가 노출됩니다. 각 스타터 와이어에 열수축 튜브 섹션을 추가합니다.EEG 장치 커넥터 플러그로 각 와이어를 용접합니다. 열수축 튜브를 뜨거운 공기로 수축시킵니다. 각 로터 와이어에 열수축 튜브 섹션을 추가합니다.빨간색과 주황색 와이어의 전도성 부분을 함께 나사로 고정하고 로프 핀에 맞도록 조인트와 헤더에 용접합니다. 헤더의 다른 두 와이어를 각 조인트에 용접합니다. 마우스의 무게를 잰다.마우스가 완전히 마취되면 면도기로 눈에서 귀 부분까지 머리카락을 면도하십시오. 스테레오탁스 프레임에 마우스를 고정하십시오. 앞니를 앞니에 넣고 양쪽 이어바를 귀에 같은 깊이로 삽입합니다.에리스로마이신 눈 연고를 눈에 바르면 수술 중 밝은 빛으로 인한 건조와 실명을 예방할 수 있습니다. iodophor와 75 % 알코올의 면봉을 번갈아 가며 수술 부위를 최소 3 회 소독하십시오. 수술 부위를 완전히 노출시키기 위해 세로 절개를 하거나 전방 및 후방 천문과 전극 이식 부위를 노출시키는 한 삼각형 절개를 합니다.작은 면봉을 동그랗게 말아서 3% 과산화수소로 적십니다. 전방 및 후방 천문이 보일 때까지 노출된 부위를 작은 면봉으로 부드럽게 문질러 두개골에 부착된 연조직을 제거합니다. 전방 및 후방 천문이 수평이 되도록 전방 및 후방 높이를 조정합니다.앞쪽 천문의 위치를 축의 원점으로 생각하십시오. 왼쪽 소뇌 두개골에 스테인리스 스틸 나사를 고정합니다. 브레그마에서 편도체 점화의 좌표를 설정하고 정위 장치를 조정하여 이 지점을 찾아 표시합니다.0.5mm 직경의 해골 드릴로 행진 지점에 구멍을 뚫습니다. 전극을 정위 장치의 위치 지정 막대에 고정합니다. 전극을 구멍 위에 수직으로 놓고 천천히 마이너스 4.9mm까지 떨어뜨립니다.은선을 나사에 세 번 감습니다. 작동 중 전극 본체가 흔들리지 않도록 주의하십시오. 치과용 시멘트를 혼합하여 전극과 두개골 표면에 부드럽게 도포합니다.치과용 시멘트가 굳으면 고정전극을 둘러싸고 있는 시멘트가 원뿔형이 될 때까지 외부를 개질한다. 그런 다음 입체 장치에서 전극을 분리합니다. 마우스를 제거하고 케이지에 다시 넣습니다.다른 생쥐와 분리하여 유지합니다. 마우스 머리의 전극과 EEG 장치를 연결하는 슬리퍼 케이블이 있는 맞춤형 상자에 마우스를 넣습니다. 상자 뚜껑의 구멍을 통해 케이블을 연결하고 마우스가 자유롭게 움직일 수 있도록 상자에 남아 있는 길이를 조정합니다.EEG 장치를 켜고 올바르게 작동하는지 확인하십시오. 10개의 자극 주기 동안 1초 동안 60Hz에서 1밀리초의 단상 구형파 펄스를 전달하도록 자극기 파라미터를 설정합니다. 첫 번째 자극을 위해 50마이크로암페어의 전류 강도로 시작합니다.고주파 스파이크를 특징으로 하는 방전 후 EEG를 모니터링합니다. 방전 후 관찰되지 않으면 다음 자극에 25 마이크로 암페어를 추가하고 방전 후가 관찰되고 5 초 동안 지속될 때까지 10 분마다이 과정을 계속하십시오. 결정된 전류 강도로 마우스를 15분마다, 하루에 20번 이상 자극하지 마십시오.자극에 대한 행동 반응을 모니터링하십시오. 전극 이식 수술은 6 명의 건강한 성인 남성 C57 검정 6 마리의 마우스에 수행되었으며 전기 자극은 수술 후 2 주 후에 수행되었습니다. 행동 발작 수준은 자극의 수가 증가함에 따라 점차 증가했으며 완전한 점화에 필요한 자극의 수가 기록되었습니다.방전 후 EEG는 5-15초 동안 지속되었습니다. 그런 다음 두개 내 자연 분비물이 심화되고 행동 증상이 시작되었습니다. 발작 지속 시간은 일반적으로 1분 미만으로 무호흡을 유발하는 심한 경련으로 인한 사망 위험을 줄였습니다.뇌 조직에서 c-Fos의 발현은 완전 점화 2시간 후 면역조직화학에 의해 검출되었습니다. 결과는 동측 편도체에서 c-Fos의 발현이 크게 증가하여 이 모델의 타당성을 입증하는 것을 보여줍니다. 텅스텐 와이어 끝의 분리는 반 밀리미터를 초과해서는 안되며, 그렇지 않으면 뇌 구멍을 통과하지 않습니다.전극의 길이가 너무 길어서는 안되며, 그렇지 않으면 생쥐의 활동에 영향을 미칩니다.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

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곤충 Antennal 엽에 가스 크로마토 그래피 - 멀티 유닛 레코딩 (GCMR)를 사용하여 강한 휘발성 물질의 식별

All  organisms inhabit a world full of sensory stimuli that determine their  behavioral and physiological response to their environment. Olfaction is ...

연구

신경과학

Trypsin Digest Protocol to Analyze the Retinal Vasculature of a Mouse Model

트립신 다이제스트 프로토콜 마우스 모델의 망막 혈관을 분석하는

Trypsin digest is the gold standard method to analyze the retinal vasculature 1-5. It allows visualization of the entire network of complex ...

A Comprehensive Protocol for Manual Segmentation of the Medial Temporal Lobe Structures

내측 측두엽 구조의 수동 분할을위한 포괄적 인 프로토콜

The present paper describes a comprehensive protocol for manual tracing of the set of brain regions comprising the medial temporal lobe (MTL): amygdala, ...

Pentylenetetrazole-Induced Kindling Mouse Model

Pentylenetetrazole 유도 점화 마우스 모델

Pentylenetetrazole (PTZ) is a GABA-A receptor antagonist. An intraperitoneal injection of PTZ into an animal induces an acute, severe seizure at a high ...

The Power of Interstimulus Interval for the Assessment of Temporal Processing in Rodents

설치류에서 시간적 처리의 평가 대 한 Interstimulus 간격의 힘

Temporal processing deficits have been implicated as a potential elemental dimension of higher-level cognitive processes, commonly observed in ...

Behavioral And Physiological Analysis In A Zebrafish Model Of Epilepsy

간질의 제브라피시 모델의 행동 및 생리학적 분석

Epilepsy represents one of the most common neurological disorders, affecting an estimated 50 million people worldwide. Recent advances in genetic research ...

Successful In vivo Calcium Imaging with a Head-Mount Miniaturized Microscope in the Amygdala of Freely Behaving Mouse

자유롭게 행동하는 마우스의 편도체에 있는 머리 산 소형 현미경을 가진 성공적인 생체 내 칼슘 화상 진찰

In vivo real-time monitoring of neuronal activities in freely moving animals is one of key approaches to link neuronal activity to behavior. For this ...

A Behavioral Screen for Heat-Induced Seizures in Mouse Models of Epilepsy

간질의 마우스 모델에서 열 유발 발작에 대한 행동 화면

Transgenic mouse models have proved to be powerful tools in studying various aspects of human neurological disorders, including epilepsy. The ...

Preparation and Implantation of Electrodes for Electrically Kindling VGAT-Cre Mice to Generate a Model for Temporal Lobe Epilepsy

It was discovered that electrical kindling of VGAT-Cre mice led to the spontaneous motor and electrographic seizures. A recent paper focused on how unique ...

Registration of Calcium Transients in Mouse Neuromuscular Junction with High Temporal Resolution using Confocal Microscopy

Estimation of the presynaptic calcium level is a key task in studying synaptic transmission since calcium entry into the presynaptic cell triggers a ...