Name: standardized rat coronary ring preparation and real-time recording of dynamic tension changes along vessel diameter
Uploaded: 2022-06-16T14:50:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Standardized Rat Coronary Ring Preparation and Real-Time Recording of Dynamic Tension Changes Along Vessel Diameter at JoVE.com

تم دعم هذا العمل من قبل مشروع البحث والتطوير الرئيسي لخطة العلوم والتكنولوجيا في مقاطعة سيتشوان (2022YFS0438) ، والمؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (82104533) ، ومؤسسة علوم ما بعد الدكتوراه الصينية (2020M683273) ، وقسم العلوم والتكنولوجيا في مقاطعة سيتشوان (2021YJ0175).

تمت مراجعة البروتوكول الحيواني والموافقة عليه من قبل لجنة الإدارة من جامعة تشنغدو للطب الصيني التقليدي (السجل رقم 2021-11). تم استخدام ذكور الفئران Sprague Dawley (SD) (260-300 جم ، 8-10 أسابيع) لهذه الدراسة. تم الاحتفاظ بالفئران في غرفة حيوانية وكانت حرة في الشرب وتناول الطعام أثناء التجربة.
<...

<ol>
	<li>Malakar, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+on+coronary+artery+disease,+its+risk+factors,+and+therapeutics.">A review on coronary artery disease, its risk factors, and therapeutics.</a> Journal of Cellular Physiology. 234 (10), 16812-16823 (2019).</li><li>Murray, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=national+age-sex+specific+all-cause+and+cause-specific+mortality+for+240+causes+of+death,+1990-2013:+A+systematic+analysis+for+the+global+burden+of+disease+Study+2013.">national age-sex specific all-cause and cause-specific mortality for 240 causes of death, 1990-2013: A systematic analysis for the global burden of disease Study 2013.</a> The Lancet. 385 (9963), 117-171 (2015).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenosine+and+adenosine+receptor-mediated+action+in+coronary+microcirculation.">Adenosine and adenosine receptor-mediated action in coronary microcirculation.</a> Basic Research in Cardiology. 116 (1), 22 (2021).</li><li>Allaqaband, H., Gutterman, D. D., Kadlec, A. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+consequences+of+coronary+arteriolar+dysfunction+and+its+influence+on+cardiovascular+disease.">Physiological consequences of coronary arteriolar dysfunction and its influence on cardiovascular disease.</a> Physiology. 33 (5), 338-347 (2018).</li><li>Minelli, S., Minelli, P., Montinari, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflections+on+atherosclerosis:+Lesson+from+the+past+and+future+research+directions.">Reflections on atherosclerosis: Lesson from the past and future research directions.</a> Journal of Multidisciplinary Healthcare. 13, 621-633 (2020).</li><li>Alvarez-Alvarez, M. M., Zanetti, D., Carreras-Torres, R., Moral, P., Athanasiadis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+survey+of+sub-saharan+gene+flow+into+the+mediterranean+at+risk+loci+for+coronary+artery+disease.">A survey of sub-saharan gene flow into the mediterranean at risk loci for coronary artery disease.</a> European Journal of Human Genetics. 25 (4), 472-476 (2017).</li><li>LaCombe, P., Tariq, M. A., Lappin, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiology,+Afterload+Reduction.">Physiology, Afterload Reduction.</a> StatPearls [Internet]. , (2022).</li><li>Gutterman, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+human+microcirculation:+regulation+of+flow+and+beyond.">The human microcirculation: regulation of flow and beyond.</a> Circulation Research. 118 (1), 157-172 (2016).</li><li>Wang, G., Li, F., Hou, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complementary+and+alternative+therapies+for+stable+angina+pectoris+of+coronary+heart+disease:+A+protocol+for+systematic+review+and+network+meta-analysis.">Complementary and alternative therapies for stable angina pectoris of coronary heart disease: A protocol for systematic review and network meta-analysis.</a> Medicine. 101 (7), 28850 (2022).</li><li>Markousis-Mavrogenis, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+microvascular+disease:+the+&amp;#34;meeting+point&amp;#34;+of+cardiology.">Coronary microvascular disease: the &amp;#34;meeting point&amp;#34; of cardiology.</a> European Journal of Clinical Investigation. 52 (5), 13737 (2021).</li><li>Allison, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+in+vivo+continuous+cardiovascular+function+during+chronic+hypoxia.">Fetal in vivo continuous cardiovascular function during chronic hypoxia.</a> The Journal of Physiology. 594 (5), 1247-1264 (2016).</li><li>Wenceslau, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+the+measurement+of+vascular+function+and+structure+in+isolated+arteries+and+veins.">Guidelines for the measurement of vascular function and structure in isolated arteries and veins.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 321 (1), 77-111 (2021).</li><li>Liu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+Ca2++handling+for+the+regulation+of+vasoconstriction+between+rat+coronary+and+renal+arteries.">Comparison of Ca2+ handling for the regulation of vasoconstriction between rat coronary and renal arteries.</a> Journal of Vascular Research. 56 (4), 191-203 (2019).</li><li>Sun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isometric+contractility+measurement+of+the+mouse+mesenteric+artery+using+wire+myography.">Isometric contractility measurement of the mouse mesenteric artery using wire myography.</a> Journal of Visualized Experiments. (138), e58064 (2018).</li><li>Guo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+hypercontractility+to+acidosis+owes+to+the+greater+activity+of+TMEM16A/ANO1+in+the+arterial+smooth+muscle+cells.">Coronary hypercontractility to acidosis owes to the greater activity of TMEM16A/ANO1 in the arterial smooth muscle cells.</a> Biomedicine &amp; Pharmacotherapy. 139, 111615 (2021).</li><li>Ping, N. N., Cao, L., Xiao, X., Li, S., Cao, Y. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+determination+of+optimal+initial+tension+in+rat+coronary+artery+using+wire+myography.">The determination of optimal initial tension in rat coronary artery using wire myography.</a> Physiological Research. 63 (1), 143-146 (2014).</li><li>Niccoli, G., Scalone, G., Lerman, A., Crea, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+microvascular+obstruction+in+acute+myocardial+infarction.">Coronary microvascular obstruction in acute myocardial infarction.</a> European Heart Journal. 37 (13), 1024-1033 (2016).</li><li>Mumma, B., Flacke, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+diagnostic+and+therapeutic+strategies+in+microvascular+angina.">Current diagnostic and therapeutic strategies in microvascular angina.</a> Current Emergency and Hospital Medicine Reports. 3 (1), 30-37 (2015).</li><li>Lanza, G. A., Parrinello, R., Figliozzi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+microvascular+angina+pectoris.">Management of microvascular angina pectoris.</a> American Journal of Cardiovascular Drugs. 14 (1), 31-40 (2014).</li><li>Zhu, T. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beneficial+effects+of+intracoronary+tirofiban+bolus+administration+following+upstream+intravenous+treatment+in+patients+with+ST-elevation+myocardial+infarction+undergoing+primary+percutaneous+coronary+intervention:+The+ICT-AMI+study.">Beneficial effects of intracoronary tirofiban bolus administration following upstream intravenous treatment in patients with ST-elevation myocardial infarction undergoing primary percutaneous coronary intervention: The ICT-AMI study.</a> International Journal of Cardiology. 165 (3), 437-443 (2013).</li><li>Huang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restoration+of+coronary+flow+in+patients+with+no-reflow+after+primary+coronary+intervention+of+acute+myocardial+infarction+(RECOVER).">Restoration of coronary flow in patients with no-reflow after primary coronary intervention of acute myocardial infarction (RECOVER).</a> American Heart Journal. 164 (3), 394-401 (2012).</li><li>Fu, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-atherosclerosis+and+cardio-protective+effects+of+the+Angong+Niuhuang+Pill+on+a+high+fat+and+vitamin+D3+induced+rodent+model+of+atherosclerosis.">Anti-atherosclerosis and cardio-protective effects of the Angong Niuhuang Pill on a high fat and vitamin D3 induced rodent model of atherosclerosis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 195, 118-126 (2017).</li><li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chinese+medicine+She-Xiang-Xin-Tong-Ning,+containing+moschus,+corydalis+and+ginseng,+protects+from+myocardial+ischemia+injury+via+angiogenesis.">Chinese medicine She-Xiang-Xin-Tong-Ning, containing moschus, corydalis and ginseng, protects from myocardial ischemia injury via angiogenesis.</a> The American Journal of Chinese Medicine. 48 (1), 107-126 (2020).</li><li>Wu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three+dimensional+reconstruction+of+coronary+artery+stents+from+optical+coherence+tomography:+Experimental+validation+and+clinical+feasibility.">Three dimensional reconstruction of coronary artery stents from optical coherence tomography: Experimental validation and clinical feasibility.</a> Scientific Reports. 11 (1), 1-15 (2021).</li><li>Liu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Janus-like+role+of+fibroblast+growth+factor+2+in+arteriosclerotic+coronary+artery+disease:+Atherogenesis+and+angiogenesis.">Janus-like role of fibroblast growth factor 2 in arteriosclerotic coronary artery disease: Atherogenesis and angiogenesis.</a> Atherosclerosis. 229 (1), 10-17 (2013).</li><li>Hu, G., Li, X., Zhang, S., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+rat+thoracic+aorta+dilatation+by+astragaloside+IV+with+the+generation+of+endothelium-derived+hyperpolarizing+factors+and+nitric+oxide,+and+the+blockade+of+Ca2++channels.">Association of rat thoracic aorta dilatation by astragaloside IV with the generation of endothelium-derived hyperpolarizing factors and nitric oxide, and the blockade of Ca2+ channels.</a> Biomedical reports. 5 (1), 27-34 (2016).</li><li>Guo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anticonstriction+effect+of+MCA+in+rats+by+danggui+buxue+decoction.">Anticonstriction effect of MCA in rats by danggui buxue decoction.</a> Frontiers in Pharmacology. 12, 749915 (2021).</li><li>Jing, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apigenin+relaxes+rat+intrarenal+arteries,+depresses+Ca2+-activated+Cl&#8722;+currents+and+augments+voltage-dependent+K++currents+of+the+arterial+smooth+muscle+cells.">Apigenin relaxes rat intrarenal arteries, depresses Ca2+-activated Cl&#8722; currents and augments voltage-dependent K+ currents of the arterial smooth muscle cells.</a> Biomedicine &amp; Pharmacotherapy. 115, 108926 (2019).</li></ol>

تم التعرف تدريجيا على اضطراب دوران الأوعية الدقيقة التاجية ، والذي ينطوي على مجموعة واسعة من المرضى الذين يعانون من CAD ، ويتعلق الأمر بأساس تروية عضلة القلب الكافية. بالنظر إلى المضاعفات الخطيرة لأمراض القلب التاجية المفاجئة وأمراض القلب والأوعية الدموية ، فإن الوقاية من الأدوية وعلاجها...

تم الاعتراف بمرض الشريان التاجي (CAD) على نطاق واسع والقلق كمرض قلبي وعائي نموذجي وتمثيلي ، كونه السبب الرئيسي للوفاة في كل من البلدان المتقدمة والنامية 1,2. كطريق لإمداد الدم والأكسجين للوظيفة الفسيولوجية الطبيعية للقلب ، يدخل الدم المتداول ويغذي القلب من خلال شريانين تاجيين رئيسيين وشبكة وعائية دموية على سطح عضلة القلب 3,4. تقطع رواسب الكوليسترول والدهون في الشرايين التاجية إمدادات الدم في القلب والاستجابة الالتهابية العنيفة لنظام الأوعية الدموية ، مما يسبب تصلب الشرايين أو الذبحة الصدرية المستقرة أو الذبحة الصدرية غير المستقرة أو احتشاء عضلة القلب أو الموت القلبي المفاجئ 5,6. استجابة للتضيق المرضي للشرايين التاجية ، فإن ضربات القلب الفسيولوجية التعويضية المتسارعة ترضي إمدادات الدم من القلب نفسه أو الأعضاء الحيوية في الجسم عن طريق زيادة إنتاج البطين الأيسر7. إذا لم يتم تخفيف تضيق الشريان التاجي لفترات طويلة في الوقت المناسب ، فقد تتطور أوعية دموية جديدة واسعة النطاق في مناطق معينة من القلب8. في الوقت الحاضر ، غالبا ما يعتمد العلاج السريري ل CAD انحلال الجلطات الدوائي أو انحلال الجلطات الميكانيكية الجراحية وتجاوز الأوعية الدموية الإلكترونية الخارجية مع الأدوية المتكررة والإعاقة الجراحية الكبيرة9. لذلك ، لا يزال التحقيق الوظيفي للنشاط الفسيولوجي للشريان التاجي اختراقا عاجلا لأمراض القلب والأوعية الدموية10.
لا توجد وسائل تقنية متاحة للكشف عن النشاط الفسيولوجي التاجي ، باستثناء أنظمة القياس عن بعد اللاسلكية ، والتي يمكنها التسجيل ديناميكيا في ضغط الشريان التاجي في الجسم الحي ، والتوتر الوعائي ، وتشبع الأكسجين في الدم ، وقيم الأس الهيدروجيني11. لذلك ، بالنظر إلى السرية والتعقيد النسيجية للشرايين التاجية ، فإن التحديد الدقيق للشرايين التاجية وعزلها هما بلا شك أفضل الخيارات لاستكشاف آليات متعددة من CAD في المختبر4.
نظام myograph متعدد السلسلة ، ولا سيما كاشف التوتر الوعائي الدقيق السلكي المجهري (انظر جدول المواد) ، هو جهاز ناضج للغاية قابل للتسويق لتسجيل تغيرات توتر الأنسجة في المختبر للأنابيب الوعائية واللمفاوية والشعب الهوائية الصغيرة مع خصائص عالية الدقة وتسجيل ديناميكي مستمر12. تم استخدام النظام المذكور على نطاق واسع لتسجيل خصائص توتر الأنسجة في المختبر لهياكل التجويف التي يتراوح قطرها من 60 ميكرومتر إلى 10 مم. تعوض ميزات التسخين المستمر لمنصة المجهر السلكي إلى حد كبير تحفيز البيئة الخارجية المعاكسة. وفي الوقت نفسه ، تسمح لنا المدخلات الثابتة لخليط الغاز وقيم الأس الهيدروجيني بالحصول على بيانات توتر الأوعية الدموية الأكثر دقة في حالة فسيولوجية مماثلة13. ومع ذلك ، بالنظر إلى تعقيد التوطين التشريحي للشرايين التاجية للفئران (الشكل 1) ، فإن عزلتها كانت محيرة وتحد من استكشاف الآلية لأمراض القلب والأوعية الدموية المتنوعة وتطوير الأدوية. لذلك ، يقدم هذا البروتوكول الموقع التشريحي وعملية الفصل للشريان التاجي للفئران بالتفصيل ، يليه قياس التوتر على منصة التصوير المجهري السلكي14.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Apigenin</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>150731</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A501330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-glucose</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A610219</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China</td>
			<td>S3872</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100395</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100781</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LabChart Professional version 8.3&#160;</td>
			<td>ADInstruments, Australia</td>
			<td>&#8212;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2&#183;6H2O</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi myograph system&#160;</td>
			<td>Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark</td>
			<td>620M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100241</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100865</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steel wires</td>
			<td>Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark</td>
			<td>400447</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U46619</td>
			<td>Sigma, USA</td>
			<td>D8174</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

standardized rat coronary ring preparation and real-time recording of dynamic tension changes along vessel diameter

كحدث رئيسي لأمراض الجهاز القلبي الوعائي ، تم اعتبار مرض الشريان التاجي (CAD) على نطاق واسع الجاني الرئيسي لتصلب الشرايين واحتشاء عضلة القلب والذبحة الصدرية ، والتي تهدد بشكل خطير حياة وصحة الناس في جميع أنحاء العالم. ومع ذلك ، فإن كيفية تسجيل الخصائص الميكانيكية الحيوية الديناميكية للأوعية الدموية المعزولة قد حيرت الناس منذ فترة طويلة. وفي الوقت نفسه ، أصبح تحديد المواقع الدقيقة وعزل الشرايين التاجية لقياس تغيرات التوتر الوعائي الديناميكي في المختبر اتجاها في تطوير دواء CAD. يصف هذا البروتوكول التحديد العياني والفصل المجهري للشرايين التاجية للفئران. تمت مراقبة وظيفة الانكماش والتمدد لحلقة الشريان التاجي على طول قطر الوعاء باستخدام نظام myograph المتعدد المعمول به. تعمل البروتوكولات الموحدة والمبرمجة لقياس توتر الحلقة التاجية ، من أخذ العينات إلى الحصول على البيانات ، على تحسين قابلية تكرار البيانات التجريبية بشكل كبير ، مما يضمن صحة سجلات التوتر الوعائي بعد التدخل الفسيولوجي والمرضي والدواءي.

في الموقع التشريحي ، لم يكن من السهل التعرف على شرايين الفئران التاجية الموزعة والمخفية في عمق أنسجة عضلة القلب. من خلال مقارنة الشرايين التاجية للبشر (الشكل 1A) والفئران (الشكل 1B) ، تم إجراء فصل سريع ودقيق للشرايين التاجية للفئران وفقا لعملية أخذ العينات في ...

Watch this Scientific Journal Video about Standardized Rat Coronary Ring Preparation and Real-Time Recording of Dynamic Tension Changes Along Vessel Diameter at JoVE.com

Standardized Rat Coronary Ring Preparation and Real-Time Recording of Dynamic Tension Changes Along Vessel Diameter

يصف هذا البروتوكول تقنية التصوير العضلي السلكي لقياس التفاعل الوعائي للشريان التاجي للفئران.

إعداد حلقة الشريان التاجي الموحدة للفئران والتسجيل في الوقت الفعلي لتغيرات التوتر الديناميكي على طول قطر الوعاء

As a key event of cardiovascular system diseases, coronary artery disease (CAD) has been widely regarded as the main culprit of atherosclerosis, ...

يقدم هذا البروتوكول بالتفصيل توطين وفصل وتثبيت الحلقة العضلية للشرايين التاجية للفئران. توفير طريقة جديدة لآليات واستكشاف وعلاج أمراض القلب والأوعية الدموية المختلفة. النظام مناسب والتسجيل المستقر للتغيرات الديناميكية للتوتر الشرياني في المختبر ، وقراءة قطرها من 60 ميكرومتر إلى 10 ملم.نقترح أن المبتدئين يجب أن يفهموا أولا بدقة الموقع التشريحي لكل وعاء ويمكن أن يبدأوا بوعاء أكبر قليلا مثل الشريان الصدري والشريان المساريقي. بعد فصل القلب وإزالته ، ابدأ بتصريف الدم المتبقي من جميع غرف القلب عن طريق الضغط بشكل معتدل باستخدام ملقط بلاستيكي طبي. ضع القلب المعالج مسبقا بسرعة في طبق بتري يحتوي على 95٪ من الأكسجين و 5٪ من محلول الملح الفسيولوجي المشبع بثاني أكسيد الكربون عند أربع درجات مئوية ، وتبلغ قيمة الرقم الهيدروجيني 7.40.لتحديد الموقع التشريحي للشرايين التاجية بدقة ، اضبط وضع القلب المعزول تحت المجهر الضوئي وفقا للمخطط التخطيطي. قطع تجاويف البطين الأيسر والأيمن على طول الحاجز بين البطينين من جذر الشريان الرئوي باستخدام مقص جراحي وملاقط. لفصل الشرايين التاجية اليسرى واليمنى عن أنسجة عضلة القلب، قم بتشريح البطين الأيمن تحت المجهر التشريحي البصري لفضح فرع الشريان التاجي الأيمن بدقة.ثم حدد موضع الشريان التاجي الأيسر عن طريق تدوير أنسجة القلب 45 درجة في اتجاه عقارب الساعة. بعد إزالة أنسجة عضلة القلب اللزجة المحيطة ، قم بتمييز الشرايين التاجية اليسرى واليمنى النابضة بشكل صريح. افصل الشرايين التاجية في الوسط على الفور وانغمس تماما في محلول الملح الفسيولوجي عند أربع درجات مئوية.الحصول على حلقة شريانية من حوالي مليمترين عن طريق قطع الشريان المنفصل عموديا بمقص تشريحي لتسجيل توتر الأوعية الدموية تحت محفزات مختلفة. قم بإعداد سلكين من الفولاذ المقاوم للصدأ بسنتيمترين وانقع مسبقا في محلول ملح فسيولوجي بأربع درجات مئوية مشبع بنسبة 95٪ من الأكسجين و 5٪ من ثاني أكسيد الكربون. مرر كلا السلكين بالتوازي عبر الحلقة الشريانية جنبا إلى جنب مع اتجاه الوعاء تحت المجهر التشريحي البصري ومع أسلاك متساوية الطول مكشوفة في طرفي تجويف الأوعية الدموية.قم بإصلاح الحلقة الشريانية باستخدام الأسلاك الفولاذية الأمامية والخلفية في حمام المجهر السلكي المملوء بمحلول الملح الفسيولوجي الفقاعي بنسبة 95٪ من الأكسجين و 5٪ من ثاني أكسيد الكربون. قم بتدوير المقبض اللولبي الأفقي للحصول على تباعد أمامي وخلفي مناسب بحيث يكون السلكان أفقيين وتكون الحلقة الشريانية في حالة طبيعية من الاسترخاء. بعد تثبيت حمام DMT على جهاز الترموستاتي ، افتح برنامج الحصول على البيانات لضمان تسجيل إشارة المسار المقابلة.تعيين المعلمات. تحقيق التوتر الأولي الأمثل للحلقة الشريانية عن طريق تطبيق توتر معقول على طول قطر الوعاء. عند هذه النقطة، اضبط قيمة توتر الأوعية الدموية المعروضة على الصفر.بعد ذلك ، ضع محفزا نبضيا نيوتن ثلاثة مللي على الحلقة الشريانية عن طريق تدوير المحور الحلزوني للحمام. انقر فوق لوحة LCD لضبطها على صفر مللي نيوتن والاحتفاظ بها لمدة ساعة واحدة. بعد الحضانة لمدة ساعة واحدة في محلول الملح الفسيولوجي المشبع بالأكسجين عند 37 درجة مئوية درجة حموضة 7.40 ، اضبط قيمة التوتر على صفر مللي نيوتن مرة أخرى على لوحة التحكم في التوتر في المجهر السلكي.قم بإجراء النشاط الانقباضي لحلقة الشريان التاجي باستخدام تقنية myograph السلكية والتحقق من صحتها في ثلاث عمليات منفصلة عن طريق التحفيز باستخدام 60 ملليمولار من محلول أيون البوتاسيوم لمدة 10 دقائق لكل منهما. بعد كل تحفيز ، اغسل الحمام بمحلول الملح الفسيولوجي المشبع بالأكسجين حتى تعود نغمة الأوعية الدموية إلى حالتها الأولية. أضف 0.3 ميكرومولار U46619 إلى الحمام وراقب لمدة 10 دقائق.أضف أبيجينين ميكرومولار واحد ولاحظ تأثيرات الأوعية الدموية. عندما يصل التمدد إلى هضبة ، أضف التركيز التالي. أضف أبيجينين ميكرومولار واحد إلى محلول ما قبل انكماش البوتاسيوم 60 مللي مول لمراقبة تأثير الأوعية الدموية.عندما يصل التمدد إلى هضبة ، أضف التركيز التالي. أضف 28 ملليمولار أيون البوتاسيوم إلى حلقة الأوعية الدموية أثناء الراحة. عندما يصل الانكماش إلى هضبة ، أضف التركيز التالي.أضف 0.01 ميكرومولار U46619 إلى حلقة الأوعية الدموية أثناء الراحة. عندما يصل الانكماش إلى هضبة ، أضف التركيز التالي. بعد تطبيق توتر نيوتن أولي بثلاثة ملليمترات على الحلقة الشريانية، تجاوز توترها أكثر من مليملين نيوتن من خلال تطبيق تركيز أيون البوتاسيوم 60 ملليمولار بالتوازي ثلاث مرات.وهكذا أدت الإجراءات المذكورة أعلاه إلى حلقة تاجية معزولة ذات نشاط فسيولوجي ممتاز. تمت إضافة تركيز أيون البوتاسيوم التراكمي ، أو U46619 إلى حمام DMT620M ، مما أدى إلى زيادة تعتمد على التركيز في نغمة الأوعية الدموية في المختبر. تمت إضافة التركيز التالي لأيون البوتاسيوم أو U46619 عندما وصل تأثير تضيق الأوعية إلى هضبة.بالنسبة للحلقات التاجية المعزولة المقيدة بأيون البوتاسيوم و U46619 ، تسبب عقار الاختبار apigenin في توسع الأوعية بطريقة تعتمد على التركيز بشكل مدهش. يتم تشريح القلب على طول الحاجز البطيني من جذر الشريان الرئوي ، مما يعرض ويفصل الحلقة العضلية التاجية التي يبلغ طولها مليمترين. بعد هذا الإجراء ، يمكننا تسجيل توتر الأوعية الدموية في الأوعية الدقيقة في شبكية العين ، ووظائف الكلى ، والشريان الكلوي ، وفي الشريان الدماغي الأوسط.منطقة ديناميكية من 60 ميكرومتر إلى 10 ملم.

Research

JoVE Journal

Medicine

X-ray Dose Reduction through Adaptive Exposure in Fluoroscopic Imaging

الأشعة السينية من خلال خفض الجرعة التعرض التكيفية في التصوير جهاز أشعة

X-ray fluoroscopy is widely used for image guidance during cardiac intervention. However, radiation dose in these procedures can be high, and this is a ...

Retrograde Perfusion and Filling of Mouse Coronary Vasculature as Preparation for Micro Computed Tomography Imaging

إلى الوراء الإرواء وملء الأوعية الدموية التاجية الفأر كما التحضير للتصوير المقطعي بالكمبيوتر مايكرو

Visualization of the vasculature is becoming increasingly important for understanding many different disease states. While several techniques exist for ...

Real-time Digital Imaging of Leukocyte-endothelial Interaction in Ischemia-reperfusion Injury (IRI) of the Rat Cremaster Muscle

Real-time Digital Imaging of Leukocyte-endothelial Interaction in Ischemia-reperfusion Injury IRI of the Rat Cremaster Muscle

في الوقت الحقيقي التصوير الرقمي من خلايا الدم البيضاء البطاني التفاعل في الإسكيمية-ضخه من الإصابات (IRI) في الجرذان العضلة المشمرة

Ischemia-reperfusion injury (IRI) has been implicated in a large array of pathological conditions such as cerebral stroke, myocardial infarction, ...

2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia

2 الأوعية الدموية الانسداد / انخفاض ضغط الدم: نموذج الفئران من نقص التروية الدماغية العالمية

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ...

Movement Retraining using Real-time Feedback of Performance

حركة إعادة التدريب في الوقت الحقيقي باستخدام ملاحظات من الأداء

Any modification of movement - especially movement patterns that have been honed over a number of years - requires re-organization of the neuromuscular ...

Cerebrospinal Fluid MicroRNA Profiling Using Quantitative Real Time PCR

النخاعي السوائل عن طريق الرنا الميكروي التنميط الكمي في الوقت الحقيقي PCR

MicroRNAs (miRNAs) constitute a potent layer of gene regulation by guiding RISC to target sites located on mRNAs and, consequently, by modulating their ...

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

الناجم عن العلاج الكيميائي الأوعية الدموية سمية - في الوقت الحقيقي<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; التصوير من سفينة انخفاض

Certain classes of chemotherapies may exert acute vascular changes that may progress into long-term conditions that may predispose the patient to an ...

Real-time Cytotoxicity Assays in Human Whole Blood

في الوقت الحقيقي السمسة فحوصات في الدم الكامل بالبشر

A live cell-based whole blood cytotoxicity assay (WCA) that allows access to temporal information of the overall cell cytotoxicity is developed with ...

Cavernous Nerve Stimulation and Recording of Intracavernous Pressure in a Rat

تسجيل للضغط إينتراكافيرنوس في الفئران وتحفيز العصب الكهفي

The stimulation of the cavernous nerve (CN) and measurement of intracavernous pressure (ICP) have been used extensively to test and evaluate therapies for ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

تحليل حجم الضغط في الوقت الحقيقي من احتشاء عضلة القلب الحاد في الفئران

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...