Name: standardized rat coronary ring preparation and real-time recording of dynamic tension changes along vessel diameter
Uploaded: 2022-06-16T14:50:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Standardized Rat Coronary Ring Preparation and Real-Time Recording of Dynamic Tension Changes Along Vessel Diameter at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af Key R&D-projektet fra Sichuan Provincial Science and Technology Plan (2022YFS0438), National Natural Science Foundation of China (82104533), China Postdoctoral Science Foundation (2020M683273) og Science &Technology Department of Sichuan Province (2021YJ0175).

Dyreprotokollen blev gennemgået og godkendt af forvaltningskomitéen fra Chengdu University of Traditional Chinese Medicine (record no. 2021-11). Hanrotter af Sprague Dawley (SD) (260-300 g, 8-10 uger gamle) blev anvendt til denne undersøgelse. Rotterne blev holdt i et dyrekammer og kunne frit drikke og spise under forsøget.
1. Forberedelse af opløsning
<ol><li>Der fremstilles fysiologisk saltopløsning (PSS) ved at opløse 118 mM NaCl, 4,7 mM K+, 2,5 mMC...

<ol>
	<li>Malakar, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+on+coronary+artery+disease,+its+risk+factors,+and+therapeutics.">A review on coronary artery disease, its risk factors, and therapeutics.</a> Journal of Cellular Physiology. 234 (10), 16812-16823 (2019).</li><li>Murray, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=national+age-sex+specific+all-cause+and+cause-specific+mortality+for+240+causes+of+death,+1990-2013:+A+systematic+analysis+for+the+global+burden+of+disease+Study+2013.">national age-sex specific all-cause and cause-specific mortality for 240 causes of death, 1990-2013: A systematic analysis for the global burden of disease Study 2013.</a> The Lancet. 385 (9963), 117-171 (2015).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenosine+and+adenosine+receptor-mediated+action+in+coronary+microcirculation.">Adenosine and adenosine receptor-mediated action in coronary microcirculation.</a> Basic Research in Cardiology. 116 (1), 22 (2021).</li><li>Allaqaband, H., Gutterman, D. D., Kadlec, A. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+consequences+of+coronary+arteriolar+dysfunction+and+its+influence+on+cardiovascular+disease.">Physiological consequences of coronary arteriolar dysfunction and its influence on cardiovascular disease.</a> Physiology. 33 (5), 338-347 (2018).</li><li>Minelli, S., Minelli, P., Montinari, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflections+on+atherosclerosis:+Lesson+from+the+past+and+future+research+directions.">Reflections on atherosclerosis: Lesson from the past and future research directions.</a> Journal of Multidisciplinary Healthcare. 13, 621-633 (2020).</li><li>Alvarez-Alvarez, M. M., Zanetti, D., Carreras-Torres, R., Moral, P., Athanasiadis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+survey+of+sub-saharan+gene+flow+into+the+mediterranean+at+risk+loci+for+coronary+artery+disease.">A survey of sub-saharan gene flow into the mediterranean at risk loci for coronary artery disease.</a> European Journal of Human Genetics. 25 (4), 472-476 (2017).</li><li>LaCombe, P., Tariq, M. A., Lappin, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiology,+Afterload+Reduction.">Physiology, Afterload Reduction.</a> StatPearls [Internet]. , (2022).</li><li>Gutterman, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+human+microcirculation:+regulation+of+flow+and+beyond.">The human microcirculation: regulation of flow and beyond.</a> Circulation Research. 118 (1), 157-172 (2016).</li><li>Wang, G., Li, F., Hou, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complementary+and+alternative+therapies+for+stable+angina+pectoris+of+coronary+heart+disease:+A+protocol+for+systematic+review+and+network+meta-analysis.">Complementary and alternative therapies for stable angina pectoris of coronary heart disease: A protocol for systematic review and network meta-analysis.</a> Medicine. 101 (7), 28850 (2022).</li><li>Markousis-Mavrogenis, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+microvascular+disease:+the+&amp;#34;meeting+point&amp;#34;+of+cardiology.">Coronary microvascular disease: the &amp;#34;meeting point&amp;#34; of cardiology.</a> European Journal of Clinical Investigation. 52 (5), 13737 (2021).</li><li>Allison, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+in+vivo+continuous+cardiovascular+function+during+chronic+hypoxia.">Fetal in vivo continuous cardiovascular function during chronic hypoxia.</a> The Journal of Physiology. 594 (5), 1247-1264 (2016).</li><li>Wenceslau, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+the+measurement+of+vascular+function+and+structure+in+isolated+arteries+and+veins.">Guidelines for the measurement of vascular function and structure in isolated arteries and veins.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 321 (1), 77-111 (2021).</li><li>Liu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+Ca2++handling+for+the+regulation+of+vasoconstriction+between+rat+coronary+and+renal+arteries.">Comparison of Ca2+ handling for the regulation of vasoconstriction between rat coronary and renal arteries.</a> Journal of Vascular Research. 56 (4), 191-203 (2019).</li><li>Sun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isometric+contractility+measurement+of+the+mouse+mesenteric+artery+using+wire+myography.">Isometric contractility measurement of the mouse mesenteric artery using wire myography.</a> Journal of Visualized Experiments. (138), e58064 (2018).</li><li>Guo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+hypercontractility+to+acidosis+owes+to+the+greater+activity+of+TMEM16A/ANO1+in+the+arterial+smooth+muscle+cells.">Coronary hypercontractility to acidosis owes to the greater activity of TMEM16A/ANO1 in the arterial smooth muscle cells.</a> Biomedicine &amp; Pharmacotherapy. 139, 111615 (2021).</li><li>Ping, N. N., Cao, L., Xiao, X., Li, S., Cao, Y. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+determination+of+optimal+initial+tension+in+rat+coronary+artery+using+wire+myography.">The determination of optimal initial tension in rat coronary artery using wire myography.</a> Physiological Research. 63 (1), 143-146 (2014).</li><li>Niccoli, G., Scalone, G., Lerman, A., Crea, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+microvascular+obstruction+in+acute+myocardial+infarction.">Coronary microvascular obstruction in acute myocardial infarction.</a> European Heart Journal. 37 (13), 1024-1033 (2016).</li><li>Mumma, B., Flacke, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+diagnostic+and+therapeutic+strategies+in+microvascular+angina.">Current diagnostic and therapeutic strategies in microvascular angina.</a> Current Emergency and Hospital Medicine Reports. 3 (1), 30-37 (2015).</li><li>Lanza, G. A., Parrinello, R., Figliozzi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+microvascular+angina+pectoris.">Management of microvascular angina pectoris.</a> American Journal of Cardiovascular Drugs. 14 (1), 31-40 (2014).</li><li>Zhu, T. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beneficial+effects+of+intracoronary+tirofiban+bolus+administration+following+upstream+intravenous+treatment+in+patients+with+ST-elevation+myocardial+infarction+undergoing+primary+percutaneous+coronary+intervention:+The+ICT-AMI+study.">Beneficial effects of intracoronary tirofiban bolus administration following upstream intravenous treatment in patients with ST-elevation myocardial infarction undergoing primary percutaneous coronary intervention: The ICT-AMI study.</a> International Journal of Cardiology. 165 (3), 437-443 (2013).</li><li>Huang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restoration+of+coronary+flow+in+patients+with+no-reflow+after+primary+coronary+intervention+of+acute+myocardial+infarction+(RECOVER).">Restoration of coronary flow in patients with no-reflow after primary coronary intervention of acute myocardial infarction (RECOVER).</a> American Heart Journal. 164 (3), 394-401 (2012).</li><li>Fu, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-atherosclerosis+and+cardio-protective+effects+of+the+Angong+Niuhuang+Pill+on+a+high+fat+and+vitamin+D3+induced+rodent+model+of+atherosclerosis.">Anti-atherosclerosis and cardio-protective effects of the Angong Niuhuang Pill on a high fat and vitamin D3 induced rodent model of atherosclerosis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 195, 118-126 (2017).</li><li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chinese+medicine+She-Xiang-Xin-Tong-Ning,+containing+moschus,+corydalis+and+ginseng,+protects+from+myocardial+ischemia+injury+via+angiogenesis.">Chinese medicine She-Xiang-Xin-Tong-Ning, containing moschus, corydalis and ginseng, protects from myocardial ischemia injury via angiogenesis.</a> The American Journal of Chinese Medicine. 48 (1), 107-126 (2020).</li><li>Wu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three+dimensional+reconstruction+of+coronary+artery+stents+from+optical+coherence+tomography:+Experimental+validation+and+clinical+feasibility.">Three dimensional reconstruction of coronary artery stents from optical coherence tomography: Experimental validation and clinical feasibility.</a> Scientific Reports. 11 (1), 1-15 (2021).</li><li>Liu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Janus-like+role+of+fibroblast+growth+factor+2+in+arteriosclerotic+coronary+artery+disease:+Atherogenesis+and+angiogenesis.">Janus-like role of fibroblast growth factor 2 in arteriosclerotic coronary artery disease: Atherogenesis and angiogenesis.</a> Atherosclerosis. 229 (1), 10-17 (2013).</li><li>Hu, G., Li, X., Zhang, S., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+rat+thoracic+aorta+dilatation+by+astragaloside+IV+with+the+generation+of+endothelium-derived+hyperpolarizing+factors+and+nitric+oxide,+and+the+blockade+of+Ca2++channels.">Association of rat thoracic aorta dilatation by astragaloside IV with the generation of endothelium-derived hyperpolarizing factors and nitric oxide, and the blockade of Ca2+ channels.</a> Biomedical reports. 5 (1), 27-34 (2016).</li><li>Guo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anticonstriction+effect+of+MCA+in+rats+by+danggui+buxue+decoction.">Anticonstriction effect of MCA in rats by danggui buxue decoction.</a> Frontiers in Pharmacology. 12, 749915 (2021).</li><li>Jing, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apigenin+relaxes+rat+intrarenal+arteries,+depresses+Ca2+-activated+Cl&#8722;+currents+and+augments+voltage-dependent+K++currents+of+the+arterial+smooth+muscle+cells.">Apigenin relaxes rat intrarenal arteries, depresses Ca2+-activated Cl&#8722; currents and augments voltage-dependent K+ currents of the arterial smooth muscle cells.</a> Biomedicine &amp; Pharmacotherapy. 115, 108926 (2019).</li></ol>

Forstyrrelsen af koronar mikrocirkulation, som involverer en bred vifte af patienter med CAD, er gradvist blevet anerkendt og vedrørte grundlaget for tilstrækkelig myokardiumperfusion. I betragtning af de alvorlige komplikationer af pludselig koronar hjertesygdom og hjerte-kar-sygdom er rettidig lægemiddelforebyggelse og behandling ekstremt vigtig for en klinisk person med CAD17. Uundgåeligt har hemmeligholdelsen af koronararterieanatomi og kompleksiteten af dens fysiologiske struktur alvorlig...

Koronararteriesygdom (CAD) er blevet bredt anerkendt og bekymret som en typisk og repræsentativ hjerte-kar-sygdom, der er den største dødsårsag i både udviklede lande og udviklingslande 1,2. Som en blod- og iltforsyningsrute for normal hjertefysiologisk funktion kommer cirkulerende blod ind og nærer hjertet gennem to hovedarterier og et blodvaskulært netværk på overfladen af myokardiet 3,4. Kolesterol og fedtdepoter i kranspulsårerne afskærer hjertets blodforsyning og det vaskulære systems voldsomme inflammatoriske reaktion, hvilket forårsager aterosklerose, stabil angina, ustabil angina, myokardieinfarkt eller pludselig hjertedød 5,6. Som reaktion på patologisk stenose i kranspulsårerne tilfredsstiller kompenserende accelereret fysiologisk hjerteslag blodforsyningen af selve hjertet eller vitale organer i kroppen ved at øge udgangen af venstre ventrikel7. Hvis langvarig koronar stenose ikke lindres i tide, kan omfattende nye blodkar udvikle sig i visse områder af hjertet8. På nuværende tidspunkt vedtager den kliniske behandling af CAD ofte lægemiddeltrombolyse eller kirurgisk mekanisk trombolyse og en eksogen bionisk vaskulær bypass med hyppig medicin og stor kirurgisk handicap9. Derfor er den funktionelle undersøgelse af koronararterie fysiologisk aktivitet stadig et presserende gennembrud for hjerte-kar-sygdomme10.
Der er ingen tilgængelige tekniske midler til at detektere koronar fysiologisk aktivitet, bortset fra trådløse telemetrisystemer, som dynamisk kan registrere in vivo koronartryk, vaskulær spænding, iltmætning i blodet og pH-værdier11. Derfor, i betragtning af koronararteriernes stoflige hemmeligholdelse og kompleksitet, er nøjagtig identifikation og isolering af kranspulsårer utvivlsomt de bedste valg til at udforske flere mekanismer af CAD in vitro4.
Et serie multi myografsystem, især en mikrovaskulær spændingsdetektor (se Materialetabel), er en meget moden omsættelig anordning til registrering af in vitro vævsspændingsændringer af små vaskulære, lymfatiske og bronchiale rør med egenskaberne høj præcision og kontinuerlig dynamisk optagelse12. Det nævnte system er i vid udstrækning blevet anvendt til at registrere in vitro vævsspændingsegenskaber for hulrumsstrukturer med diametre på 60 μm til 10 mm. De kontinuerlige opvarmningsfunktioner på trådmikrografens platform opvejer stort set stimuleringen af det ugunstige ydre miljø. I mellemtiden giver de konstante indgange af gasblandingen og pH-værdierne os mulighed for at opnå mere nøjagtige vaskulære spændingsdata i en lignende fysiologisk tilstand13. I betragtning af kompleksiteten af anatomisk lokalisering af rotte koronararterier (figur 1) har dens isolation imidlertid været forvirrende og begrænset mekanismens udforskning af diversificeret hjerte-kar-sygdom og lægemiddeludvikling. Derfor introducerer denne protokol den anatomiske placering og separationsproces af rotte koronararterien i detaljer efterfulgt af spændingsmåling på trådmikrografens platform14.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Apigenin</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>150731</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A501330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-glucose</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A610219</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China</td>
			<td>S3872</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100395</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100781</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LabChart Professional version 8.3&#160;</td>
			<td>ADInstruments, Australia</td>
			<td>&#8212;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2&#183;6H2O</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi myograph system&#160;</td>
			<td>Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark</td>
			<td>620M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100241</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100865</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steel wires</td>
			<td>Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark</td>
			<td>400447</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U46619</td>
			<td>Sigma, USA</td>
			<td>D8174</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

standardized rat coronary ring preparation and real-time recording of dynamic tension changes along vessel diameter

Som en nøglebegivenhed af hjerte-kar-systemsygdomme er koronararteriesygdom (CAD) blevet bredt betragtet som den største synder af aterosklerose, myokardieinfarkt og angina pectoris, som alvorligt truer menneskers liv og sundhed over hele verden. Men hvordan man registrerer de dynamiske biomekaniske egenskaber ved isolerede blodkar har længe forvirret folk. I mellemtiden er præcis positionering og isolering af kranspulsårer til måling af in vitro dynamiske vaskulære spændingsændringer blevet en tendens i CAD-lægemiddeludvikling. Den nuværende protokol beskriver den makroskopiske identifikation og mikroskopiske adskillelse af rotte koronararterier. Sammentræknings- og udvidelsesfunktionen af koronararterierringen langs kardiameteren blev overvåget ved hjælp af det etablerede multimyografsystem. De standardiserede og programmerede protokoller for koronar ringspændingsmåling, fra prøveudtagning til dataindsamling, forbedrer repeterbarheden af de eksperimentelle data enormt, hvilket sikrer ægtheden af vaskulære spændingsregistre efter fysiologisk, patologisk og lægemiddelintervention.

Anatomisk placeret, rotte koronararterier fordelt og skjult dybt i myokardievæv blev ikke let genkendt. Ved at sammenligne kranspulsårerne hos mennesker (figur 1A) og rotter (figur 1B) blev der udført hurtig og nøjagtig adskillelse af rottepulsårer i henhold til prøveudtagningsprocessen i figur 2. Efter nøjagtigt at have lokaliseret den højre aurikel, lungearterie og spids forfra under et optisk mikroskop, blev myokardiet di...

Watch this Scientific Journal Video about Standardized Rat Coronary Ring Preparation and Real-Time Recording of Dynamic Tension Changes Along Vessel Diameter at JoVE.com

Standardized Rat Coronary Ring Preparation and Real-Time Recording of Dynamic Tension Changes Along Vessel Diameter

Den nuværende protokol beskriver trådmyografteknikken til måling af vaskulær reaktivitet af rottens kranspulsåre.

Standardiseret rotte koronarringforberedelse og realtidsregistrering af dynamiske spændingsændringer langs kardiameter

As a key event of cardiovascular system diseases, coronary artery disease (CAD) has been widely regarded as the main culprit of atherosclerosis, ...

Denne protokol introducerer detaljeret lokalisering, adskillelse og muskulær ringfiksering af rotte koronararterier. Tilvejebringelse af en ny metode til mekanismer, udforskning og behandling af forskellige hjerte-kar-sygdomme. Systemet er velegnet til og stabil registrering af de dynamiske ændringer af in vitro arteriel spænding, aflæsning i diameter fra 60 mikrometer til 10 millimeter.Vi foreslår, at nybegyndere først nøjagtigt forstår den anatomiske placering af hvert fartøj og kan starte med lidt større kar som thoraxarterien og mesenterien. Efter dissociering og fjernelse af hjertet, skal du begynde med at dræne det resterende blod fra alle hjertekamrene ved mildt at klemme med medicinsk plasttang. Anbring hurtigt det forbehandlede hjerte i en petriskål indeholdende 95% ilt og 5% kuldioxidmættet fysiologisk saltopløsning ved fire grader Celsius med en pH-værdi på 7,40.For nøjagtigt at identificere koronararteriernes anatomiske position skal du justere det isolerede hjertes kropsholdning under lysmikroskopet i henhold til det skematiske diagram. Skær venstre og højre ventrikulære hulrum langs det inter ventrikulære septum fra roden af lungearterien med kirurgisk saks og pincet. For at adskille venstre og højre kranspulsårer fra myokardievævet skal du dissekere højre ventrikel under et optisk anatomisk mikroskop for grundigt at udsætte den højre kranspulsåregren.Identificer derefter placeringen af den venstre kranspulsåre ved at rotere hjertevævet 45 grader med uret. Efter fjernelse af det omgivende klæbrige myokardievæv skal du eksplicit skelne de pulserende venstre og højre kranspulsårer. Adskil koronararterierne i midten med det samme og nedsænk helt i fysiologisk saltopløsning ved fire grader Celsius.Få en arteriel ring på ca. to millimeter ved lodret at skære den løsrevne arterie med anatomisk saks for at registrere vaskulær spænding under forskellige stimuli. Forbered to to centimeter rustfri ståltråde og blødgør i fire grader Celsius fysiologisk saltopløsning mættet med 95% ilt og 5% kuldioxid. Før begge ledninger parallelt gennem arteriel ring sammen med fartøjets retning under et optisk anatomisk mikroskop og med ledninger af samme længde udsat i begge ender af vaskulærhulen.Fastgør arterieringen med ståltråden foran og bagpå i badet på trådmikrografen fyldt med boblende fysiologisk saltopløsning med 95% ilt og 5% kuldioxid. Drej den vandrette skrueknap for en passende afstand for og bag, så de to ledninger er vandrette, og arterierringen er i en naturlig afslapningstilstand. Når du har installeret DMT-badet på det termostatiske apparat, skal du åbne dataindsamlingssoftwaren for at sikre, at det tilsvarende stisignal blev registreret.Indstil parametrene. Opnå den optimale indledende spænding af arteriel ring ved at anvende en rimelig spænding langs beholderens diameter. På dette tidspunkt skal du indstille den viste vaskulære spændingsværdi til nul.Påfør derefter en tre milli Newton pulsstimulering på arteriel ring ved at dreje badets spiralakse. Klik på LCD-panelet for at indstille det til nul milli Newton og vedligeholde i en time. Efter inkubation i en time i oxygenmættet fysiologisk saltopløsningsbuffer ved 37 grader Celsius pH 7,40 indstilles spændingsværdien til nul milli Newton igen på trådmikrografens spændingskontrolpanel.Udfør den kontraktile aktivitet af koronararterierringen med trådmyografteknikken og valider i tre separate operationer ved at stimulere med 60 millimolar kaliumionopløsning i 10 minutter hver. Efter hver stimulering skylles badet med den iltmættede fysiologiske saltopløsning, indtil vaskulær tone vender tilbage til sin oprindelige tilstand. Tilsæt 0,3 mikromolar U46619 til bad og observer i 10 minutter.Tilsæt en mikromolær apigenin og observer vaskulære virkninger. Når udvidelsen når et plateau, skal du tilføje den næste koncentration. Tilsæt en mikromolær apigenin til 60 millimolar kaliumforkrympende opløsning for at observere den vaskulære virkning.Når udvidelsen når et plateau, skal du tilføje den næste koncentration. Tilsæt 28 millimolar kaliumion til den hvilende vaskulære ring. Når sammentrækningen når et plateau, skal du tilføje den næste koncentration.Tilsæt 0,01 mikromolar U46619 til den hvilende vaskulære ring. Når sammentrækningen når et plateau, skal du tilføje den næste koncentration. Efter at en indledende tre milli Newton-spænding blev påført arteriel ring, oversteg dens spænding mere end to milli Newton ved at anvende 60 millimolar kaliumionkoncentration parallelt tre gange.Således havde procedurerne ovenfor resulteret i en isoleret koronarring med fremragende fysiologisk aktivitet. Kumulativ kaliumionkoncentration eller U46619 blev tilsat til badet af DMT620M, hvilket resulterede i en koncentrationsafhængig stigning i vitro vaskulær tone. Den næste koncentration af kaliumion eller U46619 blev tilsat, da vasokonstriktionseffekten nåede et plateau.For isolerede koronarringe indsnævret af kaliumion og U46619 forårsagede testlægemidlet apigenin vasodilatation på en overraskende koncentrationsafhængig måde. Hjertet dissekeres langs ventrikulær septum fra roden af lungearterien, udsætter og adskiller to millimeter koronar muskelring. Efter denne procedure kan vi registrere vaskulær spænding i retinale mikrofartøjer, nyrefunktion, nyrearterie og i den midterste cerebrale arterie.En region dynamisk fra 60 mikrometer til 10 millimeter.

Research

JoVE Journal

Medicine

X-ray Dose Reduction through Adaptive Exposure in Fluoroscopic Imaging

X-ray fluoroscopy is widely used for image guidance during cardiac intervention. However, radiation dose in these procedures can be high, and this is a ...

Retrograde Perfusion and Filling of Mouse Coronary Vasculature as Preparation for Micro Computed Tomography Imaging

Retrograd perfusion og påfyldning af Mouse koronar kar som forberedelse til Micro Computed Tomography Imaging

Visualization of the vasculature is becoming increasingly important for understanding many different disease states. While several techniques exist for ...

Real-time Digital Imaging of Leukocyte-endothelial Interaction in Ischemia-reperfusion Injury (IRI) of the Rat Cremaster Muscle

Real-time Digital Imaging of Leukocyte-endothelial Interaction in Ischemia-reperfusion Injury IRI of the Rat Cremaster Muscle

Realtid Digital Imaging af leukocyt-endotel Interaktion med iskæmi-reperfusionsskade (IRI) af rotte Cremaster Muscle

Ischemia-reperfusion injury (IRI) has been implicated in a large array of pathological conditions such as cerebral stroke, myocardial infarction, ...

2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia

2-tillukning af blodkar / Hypotension: A Rat Model of Global hjerneiskæmi

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ...

Movement Retraining using Real-time Feedback of Performance

Bevægelse Omskoling med Real-time feedback af Performance

Any modification of movement - especially movement patterns that have been honed over a number of years - requires re-organization of the neuromuscular ...

Cerebrospinal Fluid MicroRNA Profiling Using Quantitative Real Time PCR

Cerebrospinalvæske microRNA ved brug af kvantitativ real time PCR

MicroRNAs (miRNAs) constitute a potent layer of gene regulation by guiding RISC to target sites located on mRNAs and, consequently, by modulating their ...

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

Kemoterapi-induceret vaskulær toksicitet - Real-time<em&gt; In vivo</em&gt; Imaging af Vessel Nedskrivninger

Certain classes of chemotherapies may exert acute vascular changes that may progress into long-term conditions that may predispose the patient to an ...

Real-time Cytotoxicity Assays in Human Whole Blood

Real-time cytotoksicitetsassays i humant fuldblod

A live cell-based whole blood cytotoxicity assay (WCA) that allows access to temporal information of the overall cell cytotoxicity is developed with ...

Cavernous Nerve Stimulation and Recording of Intracavernous Pressure in a Rat

Bundløs nervestimulation og optagelse af intrakavernøs pres i en rotte

The stimulation of the cavernous nerve (CN) and measurement of intracavernous pressure (ICP) have been used extensively to test and evaluate therapies for ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Real-time pres-binds analyse af akut myokardieinfarkt i mus

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...