Name: standardized rat coronary ring preparation and real-time recording of dynamic tension changes along vessel diameter
Uploaded: 2022-06-16T14:50:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Standardized Rat Coronary Ring Preparation and Real-Time Recording of Dynamic Tension Changes Along Vessel Diameter at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av Key FoU-prosjektet til Sichuan Provincial Science and Technology Plan (2022YFS0438), National Natural Science Foundation of China (82104533), China Postdoctoral Science Foundation (2020M683273) og Science &technology Department of Sichuan Province (2021YJ0175).

Dyreprotokollen ble gjennomgått og godkjent av styringskomiteen fra Chengdu University of Traditional Chinese Medicine (Record No. 2021-11). Mannlige Sprague Dawley (SD) rotter (260-300 g, 8-10 uker gamle) ble brukt til denne studien. Rottene ble holdt i et dyrekammer og var frie til å drikke og spise under eksperimentet.
1. Klargjøring av oppløsning
<ol><li>Forbered fysiologisk saltoppløsning (PSS) ved å oppløse 118 mM NaCl, 4,7 mM K+, 2,5 mM CaCl2</s...

<ol>
	<li>Malakar, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+on+coronary+artery+disease,+its+risk+factors,+and+therapeutics.">A review on coronary artery disease, its risk factors, and therapeutics.</a> Journal of Cellular Physiology. 234 (10), 16812-16823 (2019).</li><li>Murray, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=national+age-sex+specific+all-cause+and+cause-specific+mortality+for+240+causes+of+death,+1990-2013:+A+systematic+analysis+for+the+global+burden+of+disease+Study+2013.">national age-sex specific all-cause and cause-specific mortality for 240 causes of death, 1990-2013: A systematic analysis for the global burden of disease Study 2013.</a> The Lancet. 385 (9963), 117-171 (2015).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenosine+and+adenosine+receptor-mediated+action+in+coronary+microcirculation.">Adenosine and adenosine receptor-mediated action in coronary microcirculation.</a> Basic Research in Cardiology. 116 (1), 22 (2021).</li><li>Allaqaband, H., Gutterman, D. D., Kadlec, A. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+consequences+of+coronary+arteriolar+dysfunction+and+its+influence+on+cardiovascular+disease.">Physiological consequences of coronary arteriolar dysfunction and its influence on cardiovascular disease.</a> Physiology. 33 (5), 338-347 (2018).</li><li>Minelli, S., Minelli, P., Montinari, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflections+on+atherosclerosis:+Lesson+from+the+past+and+future+research+directions.">Reflections on atherosclerosis: Lesson from the past and future research directions.</a> Journal of Multidisciplinary Healthcare. 13, 621-633 (2020).</li><li>Alvarez-Alvarez, M. M., Zanetti, D., Carreras-Torres, R., Moral, P., Athanasiadis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+survey+of+sub-saharan+gene+flow+into+the+mediterranean+at+risk+loci+for+coronary+artery+disease.">A survey of sub-saharan gene flow into the mediterranean at risk loci for coronary artery disease.</a> European Journal of Human Genetics. 25 (4), 472-476 (2017).</li><li>LaCombe, P., Tariq, M. A., Lappin, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiology,+Afterload+Reduction.">Physiology, Afterload Reduction.</a> StatPearls [Internet]. , (2022).</li><li>Gutterman, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+human+microcirculation:+regulation+of+flow+and+beyond.">The human microcirculation: regulation of flow and beyond.</a> Circulation Research. 118 (1), 157-172 (2016).</li><li>Wang, G., Li, F., Hou, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complementary+and+alternative+therapies+for+stable+angina+pectoris+of+coronary+heart+disease:+A+protocol+for+systematic+review+and+network+meta-analysis.">Complementary and alternative therapies for stable angina pectoris of coronary heart disease: A protocol for systematic review and network meta-analysis.</a> Medicine. 101 (7), 28850 (2022).</li><li>Markousis-Mavrogenis, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+microvascular+disease:+the+&amp;#34;meeting+point&amp;#34;+of+cardiology.">Coronary microvascular disease: the &amp;#34;meeting point&amp;#34; of cardiology.</a> European Journal of Clinical Investigation. 52 (5), 13737 (2021).</li><li>Allison, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+in+vivo+continuous+cardiovascular+function+during+chronic+hypoxia.">Fetal in vivo continuous cardiovascular function during chronic hypoxia.</a> The Journal of Physiology. 594 (5), 1247-1264 (2016).</li><li>Wenceslau, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+the+measurement+of+vascular+function+and+structure+in+isolated+arteries+and+veins.">Guidelines for the measurement of vascular function and structure in isolated arteries and veins.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 321 (1), 77-111 (2021).</li><li>Liu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+Ca2++handling+for+the+regulation+of+vasoconstriction+between+rat+coronary+and+renal+arteries.">Comparison of Ca2+ handling for the regulation of vasoconstriction between rat coronary and renal arteries.</a> Journal of Vascular Research. 56 (4), 191-203 (2019).</li><li>Sun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isometric+contractility+measurement+of+the+mouse+mesenteric+artery+using+wire+myography.">Isometric contractility measurement of the mouse mesenteric artery using wire myography.</a> Journal of Visualized Experiments. (138), e58064 (2018).</li><li>Guo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+hypercontractility+to+acidosis+owes+to+the+greater+activity+of+TMEM16A/ANO1+in+the+arterial+smooth+muscle+cells.">Coronary hypercontractility to acidosis owes to the greater activity of TMEM16A/ANO1 in the arterial smooth muscle cells.</a> Biomedicine &amp; Pharmacotherapy. 139, 111615 (2021).</li><li>Ping, N. N., Cao, L., Xiao, X., Li, S., Cao, Y. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+determination+of+optimal+initial+tension+in+rat+coronary+artery+using+wire+myography.">The determination of optimal initial tension in rat coronary artery using wire myography.</a> Physiological Research. 63 (1), 143-146 (2014).</li><li>Niccoli, G., Scalone, G., Lerman, A., Crea, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+microvascular+obstruction+in+acute+myocardial+infarction.">Coronary microvascular obstruction in acute myocardial infarction.</a> European Heart Journal. 37 (13), 1024-1033 (2016).</li><li>Mumma, B., Flacke, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+diagnostic+and+therapeutic+strategies+in+microvascular+angina.">Current diagnostic and therapeutic strategies in microvascular angina.</a> Current Emergency and Hospital Medicine Reports. 3 (1), 30-37 (2015).</li><li>Lanza, G. A., Parrinello, R., Figliozzi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+microvascular+angina+pectoris.">Management of microvascular angina pectoris.</a> American Journal of Cardiovascular Drugs. 14 (1), 31-40 (2014).</li><li>Zhu, T. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beneficial+effects+of+intracoronary+tirofiban+bolus+administration+following+upstream+intravenous+treatment+in+patients+with+ST-elevation+myocardial+infarction+undergoing+primary+percutaneous+coronary+intervention:+The+ICT-AMI+study.">Beneficial effects of intracoronary tirofiban bolus administration following upstream intravenous treatment in patients with ST-elevation myocardial infarction undergoing primary percutaneous coronary intervention: The ICT-AMI study.</a> International Journal of Cardiology. 165 (3), 437-443 (2013).</li><li>Huang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restoration+of+coronary+flow+in+patients+with+no-reflow+after+primary+coronary+intervention+of+acute+myocardial+infarction+(RECOVER).">Restoration of coronary flow in patients with no-reflow after primary coronary intervention of acute myocardial infarction (RECOVER).</a> American Heart Journal. 164 (3), 394-401 (2012).</li><li>Fu, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-atherosclerosis+and+cardio-protective+effects+of+the+Angong+Niuhuang+Pill+on+a+high+fat+and+vitamin+D3+induced+rodent+model+of+atherosclerosis.">Anti-atherosclerosis and cardio-protective effects of the Angong Niuhuang Pill on a high fat and vitamin D3 induced rodent model of atherosclerosis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 195, 118-126 (2017).</li><li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chinese+medicine+She-Xiang-Xin-Tong-Ning,+containing+moschus,+corydalis+and+ginseng,+protects+from+myocardial+ischemia+injury+via+angiogenesis.">Chinese medicine She-Xiang-Xin-Tong-Ning, containing moschus, corydalis and ginseng, protects from myocardial ischemia injury via angiogenesis.</a> The American Journal of Chinese Medicine. 48 (1), 107-126 (2020).</li><li>Wu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three+dimensional+reconstruction+of+coronary+artery+stents+from+optical+coherence+tomography:+Experimental+validation+and+clinical+feasibility.">Three dimensional reconstruction of coronary artery stents from optical coherence tomography: Experimental validation and clinical feasibility.</a> Scientific Reports. 11 (1), 1-15 (2021).</li><li>Liu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Janus-like+role+of+fibroblast+growth+factor+2+in+arteriosclerotic+coronary+artery+disease:+Atherogenesis+and+angiogenesis.">Janus-like role of fibroblast growth factor 2 in arteriosclerotic coronary artery disease: Atherogenesis and angiogenesis.</a> Atherosclerosis. 229 (1), 10-17 (2013).</li><li>Hu, G., Li, X., Zhang, S., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+rat+thoracic+aorta+dilatation+by+astragaloside+IV+with+the+generation+of+endothelium-derived+hyperpolarizing+factors+and+nitric+oxide,+and+the+blockade+of+Ca2++channels.">Association of rat thoracic aorta dilatation by astragaloside IV with the generation of endothelium-derived hyperpolarizing factors and nitric oxide, and the blockade of Ca2+ channels.</a> Biomedical reports. 5 (1), 27-34 (2016).</li><li>Guo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anticonstriction+effect+of+MCA+in+rats+by+danggui+buxue+decoction.">Anticonstriction effect of MCA in rats by danggui buxue decoction.</a> Frontiers in Pharmacology. 12, 749915 (2021).</li><li>Jing, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apigenin+relaxes+rat+intrarenal+arteries,+depresses+Ca2+-activated+Cl&#8722;+currents+and+augments+voltage-dependent+K++currents+of+the+arterial+smooth+muscle+cells.">Apigenin relaxes rat intrarenal arteries, depresses Ca2+-activated Cl&#8722; currents and augments voltage-dependent K+ currents of the arterial smooth muscle cells.</a> Biomedicine &amp; Pharmacotherapy. 115, 108926 (2019).</li></ol>

Forstyrrelsen av koronarmikrosirkulasjonen, som involverer et bredt spekter av pasienter med CAD, har gradvis blitt anerkjent og bekymret grunnlaget for tilstrekkelig myokardiperfusjon. Tatt i betraktning de alvorlige komplikasjonene ved plutselig koronar hjertesykdom og kardiovaskulær sykdom, er rettidig legemiddelforebygging og behandling ekstremt viktig for et klinisk individ med CAD17. Uunngåelig har hemmeligholdelsen av koronararterieanatomi og kompleksiteten i den fysiologiske strukturen s...

Koronararteriesykdom (CAD) har blitt anerkjent og bekymret som en typisk og representativ kardiovaskulær sykdom, som er den ledende dødsårsaken i både utviklede og utviklingsland 1,2. Som en blod- og oksygenforsyningsrute for normal hjertefysiologisk funksjon, kommer sirkulerende blod inn og nærer hjertet gjennom to hoved koronararterier og et blodvaskulært nettverk på overflaten av myokardiet 3,4. Kolesterol og fettavsetninger i koronararteriene kuttet av hjertets blodtilførsel og den voldelige inflammatoriske responsen til det vaskulære systemet, forårsaker aterosklerose, stabil angina, ustabil angina, hjerteinfarkt eller plutselig hjertedød 5,6. Som svar på patologisk stenose i koronararteriene tilfredsstiller kompenserende akselerert fysiologisk hjerterytme blodtilførselen av hjertet selv eller vitale organer i kroppen ved å øke utgangen av venstre ventrikel7. Hvis langvarig koronarstenose ikke lindres i tide, kan det utvikle seg omfattende nye blodkar i visse områder av hjertet8. For tiden vedtar den kliniske behandlingen av CAD ofte legemiddeltrombolyse eller kirurgisk mekanisk trombolyse og en eksogen bionisk vaskulær bypass med hyppig medisinering og stor kirurgisk funksjonshemming9. Derfor er den funksjonelle undersøkelsen av koronararteriefysiologisk aktivitet fortsatt et presserende gjennombrudd for kardiovaskulære sykdommer10.
Det finnes ingen tilgjengelige tekniske metoder for å oppdage koronarfysiologisk aktivitet, bortsett fra trådløse telemetrisystemer, som dynamisk kan registrere in vivo koronartrykk, vaskulær spenning, oksygenmetning i blodet og pH-verdier11. Derfor, med tanke på koronararterienes tekstlige hemmelighold og kompleksitet, er nøyaktig identifisering og isolering av koronararteri utvilsomt de beste valgene for å utforske flere mekanismer for CAD in vitro4.
En serie multi myografi system, spesielt en wire mikrograf mikrograf mikrovaskulær spenningsdetektor (se Tabell over materialer), er en svært moden markedsførbar enhet for registrering av in vitro vev spenningsendringer av små vaskulære, lymfatiske og bronkial rør med egenskapene til høy presisjon og kontinuerlig dynamisk opptak12. Nevnte system har blitt mye brukt til å registrere in vitro vev spenning egenskaper av hulrom strukturer med diametre på 60 μm til 10 mm. De kontinuerlige varmefunksjonene til plattformen til trådmikrografen oppveide i stor grad stimuleringen av det ugunstige ytre miljøet. I mellomtiden tillater de konstante inngangene til gassblandingen og pH-verdiene oss å oppnå mer nøyaktige vaskulære spenningsdata i en lignende fysiologisk tilstand13. Men med tanke på kompleksiteten i anatomisk lokalisering av rotte koronararteri (figur 1), har isolasjonen vært forvirrende og begrenser mekanismens utforskning av diversifisert kardiovaskulær sykdom og narkotikautvikling. Derfor introduserer den nåværende protokollen den anatomiske plasseringen og separasjonsprosessen til rotte koronararterien i detalj, etterfulgt av spenningsmåling på plattformen til wiremikrografen14.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Apigenin</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>150731</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A501330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-glucose</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A610219</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China</td>
			<td>S3872</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100395</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100781</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LabChart Professional version 8.3&#160;</td>
			<td>ADInstruments, Australia</td>
			<td>&#8212;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2&#183;6H2O</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi myograph system&#160;</td>
			<td>Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark</td>
			<td>620M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100241</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100865</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steel wires</td>
			<td>Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark</td>
			<td>400447</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U46619</td>
			<td>Sigma, USA</td>
			<td>D8174</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

standardized rat coronary ring preparation and real-time recording of dynamic tension changes along vessel diameter

Som en viktig hendelse av kardiovaskulære systemsykdommer har koronararteriesykdom (CAD) blitt ansett som den viktigste skyldige av aterosklerose, hjerteinfarkt og angina pectoris, som alvorlig truer menneskers liv og helse over hele verden. Men hvordan du registrerer de dynamiske biomekaniske egenskapene til isolerte blodkar har lenge forvirret folk. I mellomtiden har presis posisjonering og isolering av koronararteriene for å måle dynamiske vaskulære spenningsendringer i in vitro blitt en trend i UTVIKLINGEN av CAD-legemidler. Den nåværende protokollen beskriver makroskopisk identifikasjon og mikroskopisk separasjon av rotte koronararteri. Sammentreknings- og dilatasjonsfunksjonen til koronararterieringen langs kardiameteren ble overvåket ved hjelp av det etablerte multi-myografisystemet. De standardiserte og programmerte protokollene for koronar ringspenningsmåling, fra prøvetaking til datainnsamling, forbedrer drastisk repeterbarheten av eksperimentelle data, noe som sikrer ektheten av vaskulære spenningsposter etter fysiologisk, patologisk og narkotikaintervensjon.

Anatomisk plassert, rotte koronar arterier distribuert og skjult dypt i myokardvev ble ikke lett gjenkjennelig. Ved å sammenligne koronararteriene til mennesker (figur 1A) og rotter (figur 1B) ble det utført rask og nøyaktig separasjon av rotte koronararteri i henhold til prøvetakingsprosessen i figur 2. Etter nøyaktig å ha funnet høyre auricle, lungearterie og apex fra forsiden under et optisk mikroskop, ble myokardiet disse...

Watch this Scientific Journal Video about Standardized Rat Coronary Ring Preparation and Real-Time Recording of Dynamic Tension Changes Along Vessel Diameter at JoVE.com

Standardized Rat Coronary Ring Preparation and Real-Time Recording of Dynamic Tension Changes Along Vessel Diameter

Den nåværende protokollen beskriver wire myografteknikken for måling av vaskulær reaktivitet av rotte koronararterien.

Standardisert rotte koronar ring forberedelse og sanntids registrering av dynamisk spenning endres langs fartøyets diameter

As a key event of cardiovascular system diseases, coronary artery disease (CAD) has been widely regarded as the main culprit of atherosclerosis, ...

Denne protokollen introduserer i detalj lokalisering, separasjon og muskulær ringfiksering av rotte koronararteri. Gir en ny metode for mekanismer, utforskning og behandling av ulike kardiovaskulære sykdommer. Systemet er egnet for og stabil registrering av de dynamiske endringene av in vitro arteriell spenning, lesing i diameter fra 60 mikrometer til 10 millimeter.Vi foreslår at nybegynnere først nøyaktig skal forstå den anatomiske plasseringen av hvert fartøy og kan starte med litt større kar som thoraxarterien og den mesenteriske arterien. Etter å ha dissosiert og fjernet hjertet, begynn med å tømme restblodet fra alle hjertekamrene ved å klemme forsiktig med medisinske plast tang. Plasser raskt det ferdigbehandlede hjertet i en Petri-tallerken som inneholder 95% oksygen og 5% karbondioksidmettet fysiologisk saltoppløsning ved fire grader Celsius, med en pH-verdi på 7,40.For å nøyaktig identifisere den anatomiske posisjonen til koronararteriene, juster holdningen til det isolerte hjertet under lysmikroskopet i henhold til skjematisk diagram. Klipp venstre og høyre ventrikulære hulrom langs inter ventrikulær septum fra roten av lungearterien med kirurgisk saks og pinsett. For å dissosiere venstre og høyre koronararterier fra myokardvevet, dissekerer høyre ventrikel under et optisk anatomisk mikroskop for å grundig eksponere høyre koronararteriegren.Identifiser deretter posisjonen til venstre koronararterie ved å rotere hjertevevet 45 grader med klokken. Etter å ha fjernet det omkringliggende klebrige myokardvevet, må du eksplisitt skjelne de pulserende venstre og høyre koronararteriene. Skill koronararteriene i midten umiddelbart og senk helt ned i fysiologisk saltoppløsning ved fire grader Celsius.Skaff deg en arteriell ring på omtrent to millimeter ved å vertikalt kutte den frittliggende arterien med anatomisk saks for å registrere vaskulær spenning under forskjellige stimuli. Forbered to to centimeter rustfrie ståltråder og pre-soak i fire grader Celsius fysiologisk saltoppløsning mettet med 95% oksygen og 5% karbondioksid. Før begge ledningene parallelt gjennom arterieringen sammen med fartøyets retning under et optisk anatomisk mikroskop og med ledninger av samme lengde eksponert i begge ender av det vaskulære hulrommet.Fest arterieringen med ståltråden foran og bak i badekaret på trådmikrografen fylt med boblende fysiologisk saltoppløsning med 95% oksygen og 5% karbondioksid. Drei den horisontale skrueknappen for en passende fremre og bakre avstand slik at de to ledningene er horisontale og arterieringen er i en naturlig tilstand av avslapning. Etter at du har installert DMT-badet på termostatapparatet, åpner du datainnsamlingsprogramvaren for å sikre at det tilsvarende banesignalet ble registrert.Angi parameterne. Oppnå den optimale startspenningen til arterieringen ved å påføre en rimelig spenning langs karets diameter. På dette tidspunktet setter du den viste vaskulære spenningsverdien til null.Deretter bruker du en tre milli Newton puls stimulus på arterieringen ved å rotere spiralaksen til badekaret. Klikk på LCD-panelet for å sette det til null milli Newton og vedlikeholde i en time. Etter inkubasjon i en time i oksygenmettet fysiologisk saltløsningsbuffer ved 37 grader Celsius pH 7,40, sett spenningsverdien til null milli Newton igjen på spenningskontrollpanelet til trådmikrografen.Utfør kontraktilaktiviteten til koronararterieringen med wire myografiteknikken og valider i tre separate operasjoner ved å stimulere med 60 millimolar kaliumionløsning i 10 minutter hver. Etter hver stimulering skyller du badekaret med den oksygenmettede fysiologiske saltoppløsningen til vaskulær tone går tilbake til sin opprinnelige tilstand. Tilsett 0,3 mikromolar U46619 for å bade og observere i 10 minutter.Tilsett en mikromolar apigenin og observere vaskulære effekter. Når dilatasjonen når et platå, legg til neste konsentrasjon. Tilsett en mikromolar apigenin til 60 millimolar kalium pre-krympende løsning for å observere den vaskulære effekten.Når dilatasjonen når et platå, legg til neste konsentrasjon. Tilsett 28 millimolar kaliumion til hvilevaskulær ring. Når sammentrekningen når et platå, legg til neste konsentrasjon.Tilsett 0,01 mikromolar U46619 i den hvilende vaskulære ringen. Når sammentrekningen når et platå, legg til neste konsentrasjon. Etter at en innledende tre milli Newton spenning ble påført arteriell ring, oversteg spenningen mer enn to milli Newton ved å bruke 60 millimolar kaliumionkonsentrasjon parallelt tre ganger.Dermed hadde prosedyrene ovenfor resultert i en isolert koronarring med utmerket fysiologisk aktivitet. Kumulativ kaliumionkonsentrasjon, eller U46619 ble tilsatt til badet av DMT620M, noe som resulterte i en konsentrasjonsavhengig økning i vitro vaskulær tone. Den neste konsentrasjonen av kaliumion eller U46619 ble tilsatt da vasokonstriksjonseffekten nådde et platå.For isolerte koronarringer innsnevret av kaliumion og U46619, testen stoffet apigenin i forårsaket vasodilatasjon på en overraskende konsentrasjonsavhengig måte. Hjertet dissekeres langs ventrikulær septum fra roten av lungearterien, utsetter og skiller to millimeter koronar muskuløs ring. Etter denne prosedyren kan vi registrere vaskulær spenning i retinal mikrovessel, nyrefunksjon, nyrearterie og i midtre cerebral arterie.En region dynamisk fra 60 mikrometer til 10 millimeter.

Research

JoVE Journal

Medicine

X-ray Dose Reduction through Adaptive Exposure in Fluoroscopic Imaging

X-ray fluoroscopy is widely used for image guidance during cardiac intervention. However, radiation dose in these procedures can be high, and this is a ...

Retrograde Perfusion and Filling of Mouse Coronary Vasculature as Preparation for Micro Computed Tomography Imaging

Retrograd perfusjon og Fylling av Mouse Coronary blodkar som forberedelse for Micro Datatomografiscanning Imaging

Visualization of the vasculature is becoming increasingly important for understanding many different disease states. While several techniques exist for ...

Real-time Digital Imaging of Leukocyte-endothelial Interaction in Ischemia-reperfusion Injury (IRI) of the Rat Cremaster Muscle

Real-time Digital Imaging of Leukocyte-endothelial Interaction in Ischemia-reperfusion Injury IRI of the Rat Cremaster Muscle

Real-time Digital Imaging av leukocyttantigener-endotelial Interaksjon i iskemi-reperfusjon Injury (IRI) av Rat Cremaster Muscle

Ischemia-reperfusion injury (IRI) has been implicated in a large array of pathological conditions such as cerebral stroke, myocardial infarction, ...

2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia

2-Vessel Okklusjon / Hypotensjon: A Rat Model of Global Brain Ischemia

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ...

Movement Retraining using Real-time Feedback of Performance

Movement Omskolering ved Real-time Tilbakemelding of Performance

Any modification of movement - especially movement patterns that have been honed over a number of years - requires re-organization of the neuromuscular ...

Cerebrospinal Fluid MicroRNA Profiling Using Quantitative Real Time PCR

Cerebrospinalvæsken MikroRNA Profilering Bruke Kvantitativ Real Time PCR

MicroRNAs (miRNAs) constitute a potent layer of gene regulation by guiding RISC to target sites located on mRNAs and, consequently, by modulating their ...

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

Cytostatikaindusert Vaskulær Toxicity - Real-time<em&gt; In vivo</em&gt; Imaging av Vessel Nedskrivning

Certain classes of chemotherapies may exert acute vascular changes that may progress into long-term conditions that may predispose the patient to an ...

Real-time Cytotoxicity Assays in Human Whole Blood

Real-time cytotoksisitetsanalyser i humant fullblod

A live cell-based whole blood cytotoxicity assay (WCA) that allows access to temporal information of the overall cell cytotoxicity is developed with ...

Cavernous Nerve Stimulation and Recording of Intracavernous Pressure in a Rat

Kavernøse nervestimulering og opptak av Intracavernous trykket i rotte

The stimulation of the cavernous nerve (CN) and measurement of intracavernous pressure (ICP) have been used extensively to test and evaluate therapies for ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Sanntid press volum analyse av akutt hjerteinfarkt i mus

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...