Name: standardized rat coronary ring preparation and real-time recording of dynamic tension changes along vessel diameter
Uploaded: 2022-06-16T14:50:00
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Este trabajo fue apoyado por el proyecto clave de I + D del Plan Provincial de Ciencia y Tecnología de Sichuan (2022YFS0438), la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (82104533), la Fundación de Ciencia Postdoctoral de China (2020M683273) y el Departamento de Ciencia y Tecnología de la Provincia de Sichuan (2021YJ0175).

El protocolo animal fue revisado y aprobado por el Comité de Gestión de la Universidad de Medicina Tradicional China de Chengdu (Registro No. 2021-11). Se utilizaron ratas macho Sprague Dawley (SD) (260-300 g, 8-10 semanas de edad) para el presente estudio. Las ratas se mantuvieron en una cámara de animales y fueron libres de beber y comer durante el experimento.
1. Preparación de la solución
<ol><li>Preparar solución salina fisiológica (PSS) disolviendo 118 mM de NaC...

<ol>
	<li>Malakar, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+on+coronary+artery+disease,+its+risk+factors,+and+therapeutics.">A review on coronary artery disease, its risk factors, and therapeutics.</a> Journal of Cellular Physiology. 234 (10), 16812-16823 (2019).</li><li>Murray, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=national+age-sex+specific+all-cause+and+cause-specific+mortality+for+240+causes+of+death,+1990-2013:+A+systematic+analysis+for+the+global+burden+of+disease+Study+2013.">national age-sex specific all-cause and cause-specific mortality for 240 causes of death, 1990-2013: A systematic analysis for the global burden of disease Study 2013.</a> The Lancet. 385 (9963), 117-171 (2015).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenosine+and+adenosine+receptor-mediated+action+in+coronary+microcirculation.">Adenosine and adenosine receptor-mediated action in coronary microcirculation.</a> Basic Research in Cardiology. 116 (1), 22 (2021).</li><li>Allaqaband, H., Gutterman, D. D., Kadlec, A. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+consequences+of+coronary+arteriolar+dysfunction+and+its+influence+on+cardiovascular+disease.">Physiological consequences of coronary arteriolar dysfunction and its influence on cardiovascular disease.</a> Physiology. 33 (5), 338-347 (2018).</li><li>Minelli, S., Minelli, P., Montinari, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflections+on+atherosclerosis:+Lesson+from+the+past+and+future+research+directions.">Reflections on atherosclerosis: Lesson from the past and future research directions.</a> Journal of Multidisciplinary Healthcare. 13, 621-633 (2020).</li><li>Alvarez-Alvarez, M. M., Zanetti, D., Carreras-Torres, R., Moral, P., Athanasiadis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+survey+of+sub-saharan+gene+flow+into+the+mediterranean+at+risk+loci+for+coronary+artery+disease.">A survey of sub-saharan gene flow into the mediterranean at risk loci for coronary artery disease.</a> European Journal of Human Genetics. 25 (4), 472-476 (2017).</li><li>LaCombe, P., Tariq, M. A., Lappin, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiology,+Afterload+Reduction.">Physiology, Afterload Reduction.</a> StatPearls [Internet]. , (2022).</li><li>Gutterman, D. 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(138), e58064 (2018).</li><li>Guo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+hypercontractility+to+acidosis+owes+to+the+greater+activity+of+TMEM16A/ANO1+in+the+arterial+smooth+muscle+cells.">Coronary hypercontractility to acidosis owes to the greater activity of TMEM16A/ANO1 in the arterial smooth muscle cells.</a> Biomedicine &amp; Pharmacotherapy. 139, 111615 (2021).</li><li>Ping, N. N., Cao, L., Xiao, X., Li, S., Cao, Y. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+determination+of+optimal+initial+tension+in+rat+coronary+artery+using+wire+myography.">The determination of optimal initial tension in rat coronary artery using wire myography.</a> Physiological Research. 63 (1), 143-146 (2014).</li><li>Niccoli, G., Scalone, G., Lerman, A., Crea, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+microvascular+obstruction+in+acute+myocardial+infarction.">Coronary microvascular obstruction in acute myocardial infarction.</a> European Heart Journal. 37 (13), 1024-1033 (2016).</li><li>Mumma, B., Flacke, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+diagnostic+and+therapeutic+strategies+in+microvascular+angina.">Current diagnostic and therapeutic strategies in microvascular angina.</a> Current Emergency and Hospital Medicine Reports. 3 (1), 30-37 (2015).</li><li>Lanza, G. A., Parrinello, R., Figliozzi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+microvascular+angina+pectoris.">Management of microvascular angina pectoris.</a> American Journal of Cardiovascular Drugs. 14 (1), 31-40 (2014).</li><li>Zhu, T. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beneficial+effects+of+intracoronary+tirofiban+bolus+administration+following+upstream+intravenous+treatment+in+patients+with+ST-elevation+myocardial+infarction+undergoing+primary+percutaneous+coronary+intervention:+The+ICT-AMI+study.">Beneficial effects of intracoronary tirofiban bolus administration following upstream intravenous treatment in patients with ST-elevation myocardial infarction undergoing primary percutaneous coronary intervention: The ICT-AMI study.</a> International Journal of Cardiology. 165 (3), 437-443 (2013).</li><li>Huang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restoration+of+coronary+flow+in+patients+with+no-reflow+after+primary+coronary+intervention+of+acute+myocardial+infarction+(RECOVER).">Restoration of coronary flow in patients with no-reflow after primary coronary intervention of acute myocardial infarction (RECOVER).</a> American Heart Journal. 164 (3), 394-401 (2012).</li><li>Fu, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-atherosclerosis+and+cardio-protective+effects+of+the+Angong+Niuhuang+Pill+on+a+high+fat+and+vitamin+D3+induced+rodent+model+of+atherosclerosis.">Anti-atherosclerosis and cardio-protective effects of the Angong Niuhuang Pill on a high fat and vitamin D3 induced rodent model of atherosclerosis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 195, 118-126 (2017).</li><li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chinese+medicine+She-Xiang-Xin-Tong-Ning,+containing+moschus,+corydalis+and+ginseng,+protects+from+myocardial+ischemia+injury+via+angiogenesis.">Chinese medicine She-Xiang-Xin-Tong-Ning, containing moschus, corydalis and ginseng, protects from myocardial ischemia injury via angiogenesis.</a> The American Journal of Chinese Medicine. 48 (1), 107-126 (2020).</li><li>Wu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three+dimensional+reconstruction+of+coronary+artery+stents+from+optical+coherence+tomography:+Experimental+validation+and+clinical+feasibility.">Three dimensional reconstruction of coronary artery stents from optical coherence tomography: Experimental validation and clinical feasibility.</a> Scientific Reports. 11 (1), 1-15 (2021).</li><li>Liu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Janus-like+role+of+fibroblast+growth+factor+2+in+arteriosclerotic+coronary+artery+disease:+Atherogenesis+and+angiogenesis.">Janus-like role of fibroblast growth factor 2 in arteriosclerotic coronary artery disease: Atherogenesis and angiogenesis.</a> Atherosclerosis. 229 (1), 10-17 (2013).</li><li>Hu, G., Li, X., Zhang, S., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+rat+thoracic+aorta+dilatation+by+astragaloside+IV+with+the+generation+of+endothelium-derived+hyperpolarizing+factors+and+nitric+oxide,+and+the+blockade+of+Ca2++channels.">Association of rat thoracic aorta dilatation by astragaloside IV with the generation of endothelium-derived hyperpolarizing factors and nitric oxide, and the blockade of Ca2+ channels.</a> Biomedical reports. 5 (1), 27-34 (2016).</li><li>Guo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anticonstriction+effect+of+MCA+in+rats+by+danggui+buxue+decoction.">Anticonstriction effect of MCA in rats by danggui buxue decoction.</a> Frontiers in Pharmacology. 12, 749915 (2021).</li><li>Jing, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apigenin+relaxes+rat+intrarenal+arteries,+depresses+Ca2+-activated+Cl&#8722;+currents+and+augments+voltage-dependent+K++currents+of+the+arterial+smooth+muscle+cells.">Apigenin relaxes rat intrarenal arteries, depresses Ca2+-activated Cl&#8722; currents and augments voltage-dependent K+ currents of the arterial smooth muscle cells.</a> Biomedicine &amp; Pharmacotherapy. 115, 108926 (2019).</li></ol>

La alteración de la microcirculación coronaria, que involucra a una amplia gama de pacientes con EAC, se ha reconocido gradualmente y se ha preocupado por la base para una adecuada perfusión de miocardio. Teniendo en cuenta las complicaciones graves de la enfermedad coronaria repentina y la enfermedad cardiovascular, la prevención y el tratamiento oportunos de los medicamentos son extremadamente importantes para un individuo clínico con CAD17. Inevitablemente, el secreto de la anatomía de la...

La enfermedad arterial coronaria (EAC) ha sido ampliamente reconocida y preocupada como una enfermedad cardiovascular típica y representativa, siendo la principal causa de muerte tanto en los países desarrollados como en los países en desarrollo 1,2. Como vía de suministro de sangre y oxígeno para la función fisiológica cardíaca normal, la sangre circulante entra y nutre el corazón a través de dos arterias coronarias principales y una red vascular sanguínea en la superficie del miocardio 3,4. Los depósitos de colesterol y grasa en las arterias coronarias cortan el suministro de sangre del corazón y la respuesta inflamatoria violenta del sistema vascular, causando aterosclerosis, angina estable, angina inestable, infarto de miocardio o muerte súbita cardíaca 5,6. En respuesta a la estenosis patológica de las arterias coronarias, los latidos cardíacos fisiológicos acelerados compensatorios satisfacen el suministro de sangre del corazón mismo o de los órganos vitales del cuerpo al aumentar la producción del ventrículo izquierdo7. Si la estenosis coronaria prolongada no se alivia a tiempo, se pueden desarrollar nuevos vasos sanguíneos extensos en ciertas áreas del corazón8. En la actualidad, el tratamiento clínico de la EAC suele adoptar la trombólisis farmacológica o la trombólisis mecánica quirúrgica y un bypass vascular biónico exógeno con medicación frecuente y gran discapacidad quirúrgica9. Por lo tanto, la investigación funcional de la actividad fisiológica de la arteria coronaria sigue siendo un avance urgente para las enfermedades cardiovasculares10.
No hay medios técnicos disponibles para detectar la actividad fisiológica coronaria, a excepción de los sistemas de telemetría inalámbricos, que pueden registrar dinámicamente la presión coronaria in vivo , la tensión vascular, la saturación de oxígeno en sangre y los valores de pH11. Por lo tanto, teniendo en cuenta el secreto textural y la complejidad de las arterias coronarias, la identificación precisa y el aislamiento de las arterias coronarias son, sin duda, las mejores opciones para explorar múltiples mecanismos de CAD in vitro4.
Un sistema de miógrafo múltiple en serie, en particular un detector de tensión microvascular micrográfico de alambre (ver Tabla de Materiales), es un dispositivo comercializable muy maduro para registrar cambios de tensión tisular in vitro de pequeños tubos vasculares, linfáticos y bronquiales con las características de alta precisión y registro dinámico continuo12. Dicho sistema se ha empleado ampliamente para registrar las características de tensión tisular in vitro de las estructuras de cavidad con diámetros de 60 μm a 10 mm. Las características de calentamiento continuo de la plataforma de la micrografía de alambre compensan en gran medida la estimulación del entorno externo adverso. Mientras tanto, las entradas constantes de la mezcla de gases y los valores de pH nos permiten obtener datos de tensión vascular más precisos en un estado fisiológico similar13. Sin embargo, teniendo en cuenta la complejidad de la localización anatómica de las arterias coronarias de ratas (Figura 1), su aislamiento ha sido desconcertante y limita la exploración del mecanismo de la enfermedad cardiovascular diversificada y el desarrollo de fármacos. Por lo tanto, el presente protocolo introduce en detalle la ubicación anatómica y el proceso de separación de la arteria coronaria de la rata, seguido de la medición de la tensión en la plataforma de la micrografía de alambre14.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Apigenin</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>150731</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A501330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-glucose</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A610219</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China</td>
			<td>S3872</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100395</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100781</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LabChart Professional version 8.3&#160;</td>
			<td>ADInstruments, Australia</td>
			<td>&#8212;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2&#183;6H2O</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi myograph system&#160;</td>
			<td>Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark</td>
			<td>620M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100241</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>A100865</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steel wires</td>
			<td>Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark</td>
			<td>400447</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U46619</td>
			<td>Sigma, USA</td>
			<td>D8174</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

standardized rat coronary ring preparation and real-time recording of dynamic tension changes along vessel diameter

Como un evento clave de las enfermedades del sistema cardiovascular, la enfermedad de las arterias coronarias (EAC) ha sido ampliamente considerada como el principal culpable de la aterosclerosis, el infarto de miocardio y la angina de pecho, que amenazan seriamente la vida y la salud de las personas en todo el mundo. Sin embargo, cómo registrar las características biomecánicas dinámicas de los vasos sanguíneos aislados ha desconcertado a las personas durante mucho tiempo. Mientras tanto, el posicionamiento preciso y el aislamiento de las arterias coronarias para medir los cambios de tensión vascular dinámica in vitro se han convertido en una tendencia en el desarrollo de fármacos CAD. El presente protocolo describe la identificación macroscópica y la separación microscópica de las arterias coronarias de ratas. La función de contracción y dilatación del anillo de la arteria coronaria a lo largo del diámetro del vaso se monitoreó utilizando el sistema de miógrafo múltiple establecido. Los protocolos estandarizados y programados de medición de la tensión del anillo coronario, desde el muestreo hasta la adquisición de datos, mejoran enormemente la repetibilidad de los datos experimentales, lo que garantiza la autenticidad de los registros de tensión vascular después de la intervención fisiológica, patológica y farmacológica.

Las arterias coronarias de ratas distribuidas y ocultas anatómicamente en el tejido miocárdico no se reconocían fácilmente. Al comparar las arterias coronarias de humanos (Figura 1A) y ratas (Figura 1B), se realizó una separación rápida y precisa de las arterias coronarias de ratas de acuerdo con el proceso de muestreo en la Figura 2. Después de localizar con precisión la aurícula derecha, la arteria pulmonar y el ápice d...

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Standardized Rat Coronary Ring Preparation and Real-Time Recording of Dynamic Tension Changes Along Vessel Diameter

El presente protocolo describe la técnica de miógrafo de alambre para medir la reactividad vascular de la arteria coronaria de la rata.

Preparación estandarizada del anillo coronario de la rata y registro en tiempo real de los cambios dinámicos de tensión a lo largo del diámetro del vaso

As a key event of cardiovascular system diseases, coronary artery disease (CAD) has been widely regarded as the main culprit of atherosclerosis, ...

Este protocolo introduce en detalle la localización, separación y fijación del anillo muscular de las arterias coronarias de rata. Proporcionar un nuevo método para los mecanismos, la exploración y el tratamiento de diversas enfermedades cardiovasculares. El sistema es adecuado para el registro estable de los cambios dinámicos de la tensión arterial in vitro, leyendo en diámetro desde 60 micrómetros hasta 10 milímetros.Sugerimos que los principiantes primero deben comprender con precisión la ubicación anatómica de cada vaso y pueden comenzar con un vaso ligeramente más grande, como la arteria torácica y la arteria mesentérica. Después de disociar y extraer el corazón, comience drenando la sangre residual de todas las cámaras del corazón apretando ligeramente con fórceps de plástico médico. Coloque rápidamente el corazón preprocesado en una placa de Petri que contenga 95% de oxígeno y 5% de solución de sal fisiológica saturada de dióxido de carbono a cuatro grados centígrados, con un valor de pH de 7.40.Para identificar con precisión la posición anatómica de las arterias coronarias, ajuste la postura del corazón aislado bajo el microscopio de luz de acuerdo con el diagrama esquemático. Corte las cavidades ventriculares izquierda y derecha a lo largo del tabique interventricular desde la raíz de la arteria pulmonar con tijeras quirúrgicas y pinzas. Para disociar las arterias coronarias izquierda y derecha del tejido miocárdico, diseccione el ventrículo derecho bajo un microscopio anatómico óptico para exponer completamente la rama de la arteria coronaria derecha.Luego identifique la posición de la arteria coronaria izquierda girando el tejido cardíaco 45 grados en el sentido de las agujas del reloj. Después de extirpar el tejido miocárdico pegajoso circundante, discierna explícitamente las arterias coronarias izquierda y derecha pulsantes. Separe las arterias coronarias en el medio inmediatamente y sumérjase completamente en una solución de sal fisiológica a cuatro grados centígrados.Adquirir un anillo arterial de unos dos milímetros cortando verticalmente la arteria desprendida con tijeras anatómicas para registrar la tensión vascular bajo diferentes estímulos. Prepare dos alambres de acero inoxidable de dos centímetros y remoje previamente en una solución de sal fisiológica de cuatro grados Celsius saturada con 95% de oxígeno y 5% de dióxido de carbono. Pase ambos cables paralelamente a través del anillo arterial junto con la dirección del vaso bajo un microscopio anatómico óptico y con cables de igual longitud expuestos en ambos extremos de la cavidad vascular.Fije el anillo arterial con el alambre de acero por delante y por detrás en el baño de la micrografía de alambre llena de solución salina fisiológica burbujeante con 95% de oxígeno y 5% de dióxido de carbono. Gire la perilla del tornillo horizontal para un espaciado delantero y trasero adecuado de modo que los dos cables estén horizontales y el anillo arterial esté en un estado natural de relajación. Después de instalar el baño DMT en el aparato termostático, abra el software de adquisición de datos para asegurarse de que se registró la señal de ruta correspondiente.Establezca los parámetros. Lograr la tensión inicial óptima del anillo arterial aplicando una tensión razonable a lo largo del diámetro del vaso. En este punto, establezca el valor de tensión vascular mostrado en cero.Después, aplique un estímulo de pulso de Newton de tres milímetros al anillo arterial girando el eje espiral del baño. Haga clic en el panel LCD para configurarlo en cero mil newton y mantenerlo durante una hora. Después de la incubación durante una hora en un tampón de solución de sal fisiológica saturada de oxígeno a 37 grados Celsius pH 7.40, ajuste el valor de tensión a cero mil Newton nuevamente en el panel de control de tensión de la micrografía de alambre.Realizar la actividad contráctil del anillo de la arteria coronaria con la técnica de miógrafo de alambre y validar en tres operaciones separadas estimulando con 60 milimolares de solución de iones de potasio durante 10 minutos cada una. Después de cada estimulación, enjuague el baño con la solución de sal fisiológica saturada de oxígeno hasta que el tono vascular vuelva a su estado inicial. Agregue 0.3 micromolares U46619 al baño y observe durante 10 minutos.Agregue una apigenina micromolar y observe los efectos vasculares. Cuando la dilatación alcance una meseta, agregue la siguiente concentración. Agregue una apigenina micromolar a la solución precontraíble de potasio de 60 milimolares para observar el efecto vascular.Cuando la dilatación alcance una meseta, agregue la siguiente concentración. Agregue 28 milimolares de iones de potasio al anillo vascular en reposo. Cuando la contracción alcance una meseta, agregue la siguiente concentración.Añadir 0,01 micromolar U46619 al anillo vascular en reposo. Cuando la contracción alcance una meseta, agregue la siguiente concentración. Después de aplicar una tensión inicial de tres mil Newton al anillo arterial, su tensión excedió más de dos mil newton al aplicar una concentración de iones de potasio de 60 milimolares en paralelo tres veces.Por lo tanto, los procedimientos anteriores habían dado como resultado un anillo coronario aislado con una excelente actividad fisiológica. La concentración acumulativa de iones de potasio, o U46619 se agregó al baño de DMT620M, lo que resultó en un aumento dependiente de la concentración en el tono vascular in vitro. La siguiente concentración de ion potasio o U46619 se agregó cuando el efecto vasoconstricción alcanzó una meseta.Para anillos coronarios aislados constreñidos por iones de potasio y U46619, el fármaco de prueba apigenina en causó vasodilatación de una manera sorprendentemente dependiente de la concentración. El corazón se disecciona a lo largo del tabique ventricular desde la raíz de la arteria pulmonar, exponiendo y separando dos milímetros del anillo muscular coronario. Después de este procedimiento, podemos registrar la tensión vascular en los microvasos de la retina, la función renal, la arteria renal y en la arteria cerebral media.Una región dinámica de 60 micrómetros a 10 milímetros.

Research

JoVE Journal

Medicine

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Investigación

Medicina

Retrograde Perfusion and Filling of Mouse Coronary Vasculature as Preparation for Micro Computed Tomography Imaging

Perfusión retrógrada y llenado de la vasculatura coronaria del ratón, como preparación para la Micro tomografía computarizada

Visualization of the vasculature is becoming increasingly important for understanding many different disease states. While several techniques exist for ...

Real-time Digital Imaging of Leukocyte-endothelial Interaction in Ischemia-reperfusion Injury (IRI) of the Rat Cremaster Muscle

Real-time Digital Imaging of Leukocyte-endothelial Interaction in Ischemia-reperfusion Injury IRI of the Rat Cremaster Muscle

En tiempo real de imágenes digitales de los leucocitos del endotelio interacción en el daño por isquemia-reperfusión (IRI) del músculo cremáster Rata

Ischemia-reperfusion injury (IRI) has been implicated in a large array of pathological conditions such as cerebral stroke, myocardial infarction, ...

2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia

2 vasos Oclusión / Hipotensión: un modelo de rata de isquemia cerebral global

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ...

Movement Retraining using Real-time Feedback of Performance

Movimiento de Reconversión utilizando información en tiempo real del rendimiento

Any modification of movement - especially movement patterns that have been honed over a number of years - requires re-organization of the neuromuscular ...

Cerebrospinal Fluid MicroRNA Profiling Using Quantitative Real Time PCR

Líquido cefalorraquídeo MicroRNA perfiles utilizando cuantitativa en tiempo real PCR

MicroRNAs (miRNAs) constitute a potent layer of gene regulation by guiding RISC to target sites located on mRNAs and, consequently, by modulating their ...

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

Inducida por la quimioterapia Vascular Toxicidad - En tiempo real<em&gt; En vivo</em&gt; Imagen de Deterioro del buque

Certain classes of chemotherapies may exert acute vascular changes that may progress into long-term conditions that may predispose the patient to an ...

Real-time Cytotoxicity Assays in Human Whole Blood

En tiempo real Ensayos de citotoxicidad en sangre entera humana

A live cell-based whole blood cytotoxicity assay (WCA) that allows access to temporal information of the overall cell cytotoxicity is developed with ...

Cavernous Nerve Stimulation and Recording of Intracavernous Pressure in a Rat

Estímulo del nervio cavernoso y grabación de la presión intracavernosa en una rata

The stimulation of the cavernous nerve (CN) and measurement of intracavernous pressure (ICP) have been used extensively to test and evaluate therapies for ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Análisis en tiempo real de presión-volumen del infarto agudo de miocardio en ratones

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...