Name: phospholipid mediator induced transformation in three-dimensional cultures
Uploaded: 2022-07-27T14:20:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Phospholipid Mediator Induced Transformation in Three-Dimensional Cultures at JoVE.com

Vi takker IISER Pune Microscopy Facility for adgang til udstyr og infrastruktur og støtte til eksperimenterne. Denne undersøgelse blev støttet af et tilskud fra Institut for Bioteknologi (DBT), Indiens regering (BT / PR8699 / MED / 30/1018/2013), Science and Engineering Research Board (SERB), Indiens regering (EMR / 2016 / 001974) og delvist af IISER, Pune Core-finansiering. A. K. blev finansieret af CSIR-SRF-stipendium, LA blev finansieret gennem DST-INSPIRE-stipendium, V.C blev finansieret af DBT (BT / PR8699 / MED / 30/1018/2013).

1. Såning af MCF10A-celler i lrECM
<ol><li>Vedligehold MCF10A-celler (klæbende brystepitelceller) i vækstmediet. Passage cellerne hver 4. dag. BEMÆRK: Sammensætning af vækstmedium: DMEM med høj glukose uden natriumpyruvat indeholdende hesteserum (5%), insulin (10 μg/ml), hydrocortison (0,5 μg/ml), epidermal vækstfaktor, EGF (20 ng/ml), koleratoksin (100 ng/ml) og penicillin-streptomycin (100 enheder/ml) (se materialetabel).</li>
	<li>Optøning lrECM (se Materialeta...

Etablerede cellelinjebaserede modeller bruges i vid udstrækning til at studere processen med carcinogenese. Monolagskulturer af celler fortsætter med at give indsigt i de forskellige molekylære signalveje, der formidler karakteristiske ændringer i kræftceller32. Undersøgelser af rollen som velkendte onkogener som Ras, Myc og muteret p53 blev først rapporteret ved hjælp af monolagskulturer som modelsystem33,34,35,36<sup c...

Et utal af modeller er tilgængelige for at studere udviklingen af kræft, hver af dem er unikke og repræsenterer en undertype af denne komplekse sygdom. Hver model giver unik og værdifuld indsigt i kræftbiologi og har forbedret midlerne til at efterligne den faktiske sygdomstilstand. Etablerede cellelinjer dyrket som et monolag har givet værdifuld indsigt i vitale processer in vitro, såsom spredning, invasivitet, migration og apoptose1. Selvom todimensionel (2D) cellekultur har været det traditionelle værktøj til at undersøge pattedyrcellernes reaktion på flere miljøforstyrrelser, synes ekstrapolering af disse fund for at forudsige responser på vævsniveau ikke tilstrækkelig overbevisende. Den største begrænsning ved 2D-kulturerne er, at det skabte mikromiljø adskiller sig stort set fra selve brystvævet2. 2D-kultur mangler cellernes interaktion med den ekstracellulære matrix, hvilket er afgørende for væksten af ethvert væv. Trækkræfter, som cellen oplever i monolagskulturer, hindrer også polariteten af disse celler og ændrer således cellesignalering og adfærd 3,4,5. Tredimensionelle (3D) kultursystemer har åbnet en ny vej inden for kræftforskning med deres evne til at efterligne in vivo-forholdene in vitro. Mange vigtige mikromiljømæssige signaler, der går tabt i 2D-cellekultur, kan genetableres ved hjælp af 3D-kulturer af lamininrig ekstracellulær matrix (lrECM)6.
Forskellige undersøgelser har identificeret betydningen af tumormikromiljøet i carcinogenese 7,8. Inflammationsrelaterede faktorer er en stor del af mikromiljøet. Platelet Activating Factor (PAF) er en phospholipid mediator udskilt af forskellige immunceller, der medierer flere immunresponser 9,10. Høje niveauer af PAF udskilles af forskellige brystkræftcellelinjer og er forbundet med forbedret spredning11. Undersøgelser fra vores laboratorium har vist, at den langvarige tilstedeværelse af PAF i acinarkulturer fører til transformation af brystepitelceller12. PAF aktiverer PAF-receptoren (PAFR) og aktiverer PI3K/Akt-signalaksen13. PAFR rapporteres også at være forbundet med EMT, invasion og metastase14.
Den nuværende protokol demonstrerer et modelsystem til at studere PAF-induceret transformation ved hjælp af 3D-kulturer af brystepitelceller, som det tidligere er blevet beskrevet af Chakravarty et al.12. Brystepitelcellerne dyrket på den ekstracellulære matrix (3D-kulturer) har tendens til at danne polariserede vækstarresterede sfæroider. Disse kaldes acini og ligner meget acini af brystvæv, den mindste funktionelle enhed i brystkirtlen, in vivo15. Disse sfæroider (figur 1A, B) består af et monolag af tætpakkede polariserede epitelceller, der omgiver et hult lumen og er fastgjort til kældermembranen (figur 1C). Denne morfogeneseproces er blevet godt beskrevet i litteratur16. Når cellerne sås på lrECM, gennemgår de opdeling og differentiering for at danne en klynge af celler, som derefter polariserer fra dag 4 og fremefter. På dag 8 består acini af en gruppe polariserede celler, der er i direkte kontakt med den ekstracellulære matrix og en klynge af upolariserede celler indesluttet i de ydre polariserede celler uden kontakt til matrixen. Disse upolariserede celler er kendt for at gennemgå apoptose ved dag 12 af kultur, der danner et hult lumen. På dag 16 dannes væksthæmmede strukturer16.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64146/64146fig01.jpg"> Figur 1: Kerner af celler i acini farvet med en nuklear plet . (A) 3D-konstruktion af acini. (B) Fasekontrastbillede af MCF10A acini dyrket på Matrigel i 20 dage. (C) Det midterste afsnit viser tilstedeværelsen af et hult lumen. Skala bar = 20 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64146/64146fig01large.jpg" target="_blank">Klik her for at se en større version af denne figur.</a>
I modsætning til 2D-kulturer hjælper acinarkulturer med at skelne mellem normale og transformerede celler gennem tilsyneladende morfologiændringer. Ikke-transformerede brystepitelceller danner acini med et hult lumen, der efterligner den normale menneskelige bryst acini. Disse sfæroider viser ved transformation en forstyrret morfologi karakteriseret ved et stort tab af polaritet (et af kendetegnene ved kræft), fravær af lumen eller forstyrrelse af det hule lumen (på grund af unddragelse af apoptose), der kan induceres på grund af deregulering af forskellige gener17,18,19,20 . Disse transformationer kan studeres ved hjælp af almindeligt anvendte teknikker såsom immunfluorescens. Således kan 3D-cellekulturmodellen fungere som en simpel metode til at undersøge processen med bryst acinarmorfogenese og brystcarcinogenese. Etablering af et 3D-kultursystem for at forstå effekten af en phospholipidmediator, PAF, vil hjælpe med præklinisk lægemiddelscreening med høj kapacitet.
Dette arbejde har tilpasset 3D 'on top' kulturprotokol16,21 til undersøgelse af transformation induceret af PAF22. De fænotypiske ændringer induceret ved eksponering af acini for phospholipidmediatoren blev undersøgt ved anvendelse af immunfluorescens. Forskellige polaritets- og epitel-til-mesenkymale overgangsmarkører (EMT) 12,16 blev anvendt i undersøgelsen. Tabel 1 nævner deres normale lokalisering og deres forventede fænotype ved transformation.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Antistoffer</td>
			<td>Markerer</td>
			<td>Normal lokalisering</td>
			<td>Transformeret fænotype</td>
		</tr><tr><td>α6-Integrin</td>
			<td>Basolateral</td>
			<td>Basal med svag lateral plet</td>
			<td>Stærk lateral / apikal plet</td>
		</tr><tr><td>β-Catenin</td>
			<td>Celle-celle-kryds</td>
			<td>Basolateral</td>
			<td>Unormal / nuklear eller cytoplasmatisk lokalisering</td>
		</tr><tr><td>Vimentin</td>
			<td>Emt</td>
			<td>Fraværende / svag tilstedeværelse</td>
			<td>Opregulering</td>
		</tr></tbody></table>Tabel 1: Markører anvendt i undersøgelsen. Forskellige markører anvendes med deres lokalisering i nærvær og fravær af PAF-behandling.
Denne metode kan bedst bruges til at studere / screene plausible lægemidler og målrette gener for forskellige brystkræftundertyper. Dette kan give data om lægemiddelrespons tættere på in vivo-scenariet og bidrage til hurtigere og mere pålidelig lægemiddeludvikling. Dette system kan også bruges til at studere molekylær signalering forbundet med lægemiddelrespons og lægemiddelresistens.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.05% Trypsin EDTA</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>25300062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16% paraformaldehyde</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>AA433689M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Mouse Alexa Flour 488</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A11029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Rabbit Alexa Flour 488</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-11008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A7030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chamber Coverglass</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>155409</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholera Toxin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C8052-1MG</td>
			<td>1 mg/mL in dH2O</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Leica SP8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11965126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E6758</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E9644-0.2MG</td>
			<td>100 mg/mL in dH2O</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F(ab&#8217;)2 fragment of antibody raised in goat against mouse antigen</td>
			<td>Jackson Immunoresearch</td>
			<td>115-006-006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GM130 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab52649</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat Serum</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab7481</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>33258</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horse Serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16050122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrocortisone</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H0888</td>
			<td>1 mg/mL in ethanol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image Processing Software</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I1882</td>
			<td>10 mg/mL stock dH2O</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lrECM (Matrigel)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>356231</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting reagent (Slow fade Gold Anti-fade)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>S36937</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuclear Stain&#160; (Hoechst)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>33258</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PAF</td>
			<td>Cayman Chemicals</td>
			<td>91575-58-5</td>
			<td>Methylcarbamyl PAF C-16, procured as a 10 mg/mL in ethanol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>17-602E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Azide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S2002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris Base</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>B9754</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween 20</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9416</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vimentin antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab92547</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#945;6-integrin antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>MAB1378</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

phospholipid mediator induced transformation in three-dimensional cultures

Flere modeller er blevet udviklet til at studere kræft, såsom gnavermodeller og etablerede cellelinjer. Værdifulde indsigter i carcinogenese er blevet tilvejebragt af undersøgelser ved hjælp af disse modeller. Cellelinjer har givet en forståelse af dereguleringen af molekylær signalering forbundet med brysttumorigenese, mens gnavermodeller i vid udstrækning anvendes til at studere cellulære og molekylære egenskaber ved brystkræft in vivo. Etableringen af 3D-kulturer af brystepitel- og kræftceller hjælper med at bygge bro over kløften mellem in vivo- og in vitro-modeller ved at efterligne in vivo-forholdene in vitro. Denne model kan bruges til at forstå dereguleringen af komplekse molekylære signalhændelser og de cellulære egenskaber under brystcarcinogenese. Her modificeres et 3D-kultursystem til at studere en fosfolipidmediatorinduceret (blodpladeaktiveringsfaktor, PAF) transformation. Immunmodulatorer og andre udskillede molekyler spiller en vigtig rolle i tumorinitiering og progression i brystet. I denne undersøgelse udsættes 3D-acinarkulturer af brystepitelceller for PAF-udviste transformationsegenskaber såsom tab af polaritet og ændrede cellulære egenskaber. Dette 3D-kultursystem vil hjælpe med at kaste lys over genetiske og / eller epigenetiske forstyrrelser induceret af forskellige små molekyleenheder i tumormikromiljøet. Derudover vil dette system også give en platform til identifikation af nye såvel som kendte gener, der kan være involveret i transformationsprocessen.

MCF10A-celler danner ved eksponering for PAF-behandling acinarstrukturer med meget forskellige fænotyper. α6-integrin viste sig at være fejllokaliseret med mere apikal farvning. Nogle få acini viste også diskontinuerlig farvning (figur 2A). Begge disse fænotyper indikerer tabet af basal polaritet, som det fremgår af litteratur24,25. Tidligere rapporter tyder på α6-integrins kontroversielle rolle i kræftmetastase. α6-integr...

Watch this Scientific Journal Video about Phospholipid Mediator Induced Transformation in Three-Dimensional Cultures at JoVE.com

Phospholipid Mediator Induced Transformation in Three-Dimensional Cultures

Den nuværende protokol beskriver oprettelsen af 3D 'ovenpå ' kulturer af en ikke-transformeret brystepitelcellelinje, MCF10A, der er blevet modificeret til at studere blodpladeaktiveringsfaktor (PAF) induceret transformation. Immunfluorescens er blevet brugt til at vurdere transformationen og diskuteres detaljeret.

Fosfolipidmediator induceret transformation i tredimensionelle kulturer

Several models have been developed to study cancer, such as rodent models and established cell lines. Valuable insights into carcinogenesis have been ...

Vores modificerede 3D-analysekulturer kan bruges til at undersøge forskellige komponenters rolle i et kræftmikromiljø, hvilket fører til identifikation af nye biomarkører og lægemiddelmål. Denne metode gør det muligt at studere ændringer i den cellulære fænotype og molekylære signalering, der ligner immunsystemet. Det kan også ændres for at imødekomme specifikke krav til en undersøgelse.Denne metode kan hjælpe med at identificere nye biomarkører, der kan hjælpe med tidlig påvisning af brystkræft. Molekylær indsigt kan også bruges til at identificere nye lægemiddelmål. Denne metode kan bruges til at studere både tumorigenese og morfogenese efter forstyrrelse af gen eller gener, der kan give indsigt i den rolle, som genet eller generne spiller.Til at begynde med trypsiniserer cellerne ved at opsuge mediet og vaske med 2 ml PBS. Tilsæt 900 mikroliter 0,05% Trypsin-EDTA og inkuber ved 37 grader Celsius i ca. 15 minutter, eller indtil cellerne er helt trypsiniseret. Forbered en seng af lrECM i otte brønde i et kammerdækglasglas ved at belægge hver brønd med 60 mikroliter lrECM.Placer det i en 37 grader Celsius kuldioxidinkubator i højst 15 minutter. For at forberede cellesuspensionen tilsættes 5 ml re-suspensionsmedium for at slukke trypsinaktiviteten og dreje cellerne ved 112 gange g i 10 minutter ved 25 grader Celsius. Aspirer det brugte medium og suspender cellerne igen i 2 ml analysemedium.Bland suspensionen godt for at sikre dannelsen af en enkeltcellesuspension. Tæl cellerne ved hjælp af et hæmocytometer og beregn mængden af cellesuspension, der er nødvendig for at frø 6.000 celler i hver brønd. I henhold til antallet af krævede brønde fortyndes cellesuspensionen i overlejringsmediet.Tilsæt 400 mikroliter af den fortyndede cellesuspension til de forberedte lrECM-senge, og sørg omhyggeligt for ikke at forstyrre lrECM-sengen. Inkubere ved 37 grader Celsius i en befugtet 5% kuldioxidinkubator. Efter 3 timer tilsættes 200 nanomol PAF til hver brønd.Tilsæt den samme koncentration af PAF under hver medieændring, og genopfyld cellerne med frisk medium hver 4. dag. Efter 20 dages dyrkning pipetteres forsigtigt mediet ud af hver brønd og vaskes brøndene med 400 mikroliter forvarmet PBS. Fix acinarstrukturerne ved at tilsætte 400 mikroliter frisklavet 4% paraformaldehyd og inkubere i 20 minutter ved stuetemperatur.Skyl brøndene en gang med iskold PBS og gennemtræng med PBS indeholdende 0,5% Triton X-100 i 10 minutter ved 4 grader Celsius. Efter 10 minutter pipetteres Triton X-100-opløsningen forsigtigt ud og skylles med 400 mikroliter frisklavet PBS-glycin. Der tilsættes 400 mikroliter af den primære blokerende opløsning bestående af 10 % gedeserum i immunfluorescensbuffer og inkuberes ved stuetemperatur i 60 minutter.Fjern den primære blokeringsopløsning, tilsæt 200 mikroliter 2% sekundært blokerende antistof fremstillet i den primære blokeringsopløsning, og lad det stå ved stuetemperatur i 45 til 60 minutter. Det primære antistof fremstilles i 2% sekundær blokerende antistofopløsning i en 1:100 fortynding. Fjern den sekundære blokeringsopløsning, tilsæt det frisklavede antistof, og inkuber natten over ved 4 grader Celsius.Pipetter forsigtigt den primære antistofopløsning, og vask den tre gange med 400 mikroliter immunfluorescensbuffer. Derefter fremstilles en 1:200 fortynding af det fluorophorekonjugerede sekundære antistof i den primære blokeringsopløsning og inkuberes diasene i den sekundære antistofopløsning i 40 til 60 minutter ved stuetemperatur. Skyl diasene med 400 mikroliter immunfluorescensbuffer i 20 minutter efterfulgt af to vaske med PBS i 10 minutter hver.Modpletter kernerne med PBS indeholdende 0,5 nanogram pr. milliliter kerneplet i 5 til 6 minutter ved stuetemperatur. Vask diasene tre gange med 400 mikroliter PBS for at fjerne den overskydende plet. Pipetter forsigtigt hele PBS'en ud, og sørg for, at restopløsningen fjernes.Tilsæt derefter en dråbe monteringsreagens i hver brønd, og lad det stå ved stuetemperatur natten over. Til sidst skal du afbilde diasene under 40x eller 63x forstørrelse på et konfokalmikroskop og tage optiske Z-sektioner på 0,6 millimeter trinstørrelse. Billederne repræsenterer kernerne af celler i acini farvet med en nuklear plet.3D-konstruktionen af acini og fasekontrastbilledet af MCF10A acini dyrket på lrECM i 20 dage er vist her. Den midterste sektion viser tilstedeværelsen af et hult lumen. PAF forstyrrer polariteten og inducerer EMT-lignende ændringer i MCF10A bryst acini.MCF10A-celler blev dyrket som 3D on top's i lrECM. Kulturerne blev behandlet med PAF på dag 0, 4, 8, 12 og 16. Kulturerne blev opretholdt i 20 dage og derefter immunostained for alpha6-integrin og nuklear plet, GM130, en markør for apikal polaritet, og Vimentin, en EMT-markør.Den midterste stak af den respektive acini er blevet vist her. De repræsentative data er for 40-50 acini fra tre biologisk uafhængige eksperimenter. LRECM-sengen skal laves omhyggeligt, så den er jævnt fordelt uden luftbobler.Cellesuspensionen skal også blandes jævnt og tilsættes langsomt for at undgå klumpning. Man kan få protein og RNA fra 3D-kulturerne, som derefter kan bruges til at undersøge de forskellige molekylære veje.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Moving Upwards: A Simple and Flexible In Vitro Three-dimensional Invasion Assay Protocol

Moving Upwards: A Simple and Flexible In Vitro Three-dimensional Invasion Assay Protocol

Bevæger sig opad: En enkel og fleksibel In Vitro tredimensionale Invasion Assay protokol

Although 3D invasion assays have been developed, the challenge remains to study cells without affecting the integrity of their microenvironment. ...

Generation of High-Throughput Three-Dimensional Tumor Spheroids for Drug Screening

Generation af høj overførselshastighed tredimensionale Tumor Spheroids for narkotika-Screening

Cancer cells have routinely been cultured in two dimensions (2D) on a plastic surface. This technique, however, lacks the true environment a tumor mass is ...

A Three-dimensional Thymic Culture System to Generate Murine Induced Pluripotent Stem Cell-derived Tumor Antigen-specific Thymic Emigrants

En tredimensionel Thymisk kultur system til at generere murine induceret pluripotente stamcelle-afledte tumor antigen-specifikke Thymisk emigranter

The inheritance of pre-rearranged T cell receptors (TCRs) and their epigenetic rejuvenation make induced pluripotent stem cell (iPSC)-derived T cells a ...

Longitudinal Morphological and Physiological Monitoring of Three-dimensional Tumor Spheroids Using Optical Coherence Tomography

Langsgående morfologiske og fysiologiske overvågning af tre-dimensionelle Tumor Spheroids bruge optisk kohærens tomografi

Tumor spheroids have been developed as a three-dimensional (3D) cell culture model in cancer research and anti-cancer drug discovery. However, currently, ...

Three-Dimensional Bone Extracellular Matrix Model for Osteosarcoma

Tre-dimensionelle knogle ekstracellulære Matrix Model for osteosarkom

Osteosarcoma (OS) is the most common and a highly aggressive primary bone tumor. It is characterized with anatomic and histologic variations along with ...

Fully Human Tumor-based Matrix in Three-dimensional Spheroid Invasion Assay

Fuldt humant tumor-baserede matrix i tredimensionale Spheroid invasion assay

Two-dimensional cell culture-based assays are commonly used in in vitro cancer research. However, they lack several basic elements that form the tumor ...

Evaluating Cell Death Using Cell-Free Supernatant of Probiotics in Three-Dimensional Spheroid Cultures of Colorectal Cancer Cells

Evaluering cell død ved hjælp af cellefri supernatant af probiotika i tre-dimensionelle sfæroid kulturer colorectal cancerceller

This manuscript describes a protocol to evaluate cancer cell deaths in three dimensional (3D) spheroids of multicellular types of cancer cells using ...

In Vitro Evaluation of Oncogenic Transformation in Human Mammary Epithelial Cells

In Vitro evaluering af onkogene transformation i humane mammary epitelceller

Tumorigenesis is a multi-step process in which cells acquire capabilities&#160;that allow their growth, survival, and dissemination under hostile ...

A Three-dimensional Model of Spheroids to Study Colon Cancer Stem Cells

En tre-dimensionel model af sfæroider til undersøgelse tyktarmskræft stamceller

Colorectal cancers are characterized by heterogeneity and a hierarchical organization comprising a population of cancer stem cells (CSCs) responsible for ...

Three-Dimensional In Vitro Biomimetic Model of Neuroblastoma Using Collagen-Based Scaffolds

Three-Dimensional In Vitro Biomimetic Model of Neuroblastoma Using Collagen-Based Scaffolds

Tredimensionel in vitro biomimetisk model af neuroblastom ved hjælp af kollagenbaserede stilladser

Neuroblastoma is the most common extracranial solid tumor in children, accounting for 15% of overall pediatric cancer deaths. The native tumor tissue is a ...