Name: phospholipid mediator induced transformation in three-dimensional cultures
Uploaded: 2022-07-27T14:20:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Phospholipid Mediator Induced Transformation in Three-Dimensional Cultures at JoVE.com

Vi tackar IISER Pune Microscopy Facility för tillgång till utrustning och infrastruktur och stöd för experimenten. Denna studie stöddes av ett bidrag från Department of Biotechnology (DBT), Indiens regering (BT/PR8699/MED/30/1018/2013), Science and Engineering Research Board (SERB), Indiens regering (EMR/2016/001974) och delvis av IISER, Pune Core funding. A. K. finansierades av CSIR-SRF-stipendiet, LA finansierades genom DST-INSPIRE-stipendium, V.C finansierades av DBT (BT/PR8699/MED/30/1018/2013).

1. Såning av MCF10A-celler i lrECM
<ol><li>Behåll MCF10A-celler (vidhäftande bröstepitelceller) i tillväxtmediet. Passera cellerna var 4: e dag. OBS: Sammansättning av tillväxtmedium: DMEM med hög glukos utan natriumpyruvat innehållande hästserum (5%), insulin (10 μg / ml), hydrokortison (0,5 μg / ml), epidermal tillväxtfaktor, EGF (20 ng / ml), koleratoxin (100 ng / ml) och penicillin-streptomycin (100 enheter / ml) (se materialtabell).</li>
	<li>Tina lrECM (se <strong...

Etablerade cellinjebaserade modeller används ofta för att studera processen för cancerframkallande. Monolagerkulturer av celler fortsätter att ge insikter i de olika molekylära signalvägarna som förmedlar karakteristiska förändringar i cancerceller32. Studier av rollen av välkända onkogener som Ras, Myc och muterad p53 rapporterades först med monolagerkulturer som modellsystem33,34,35,36<...

En myriad av modeller finns tillgängliga för att studera utvecklingen av cancer, var och en av dem är unik och representerar en subtyp av denna komplexa sjukdom. Varje modell ger unika och värdefulla insikter i cancerbiologi och har förbättrat medlen för att efterlikna det faktiska sjukdomstillståndet. Etablerade cellinjer som odlas som ett monolager har gett värdefulla insikter i viktiga processer in vitro, såsom spridning, invasivitet, migration och apoptos1. Även om tvådimensionell (2D) cellodling har varit det traditionella verktyget för att undersöka däggdjurscellernas svar på flera miljöstörningar, verkar extrapolering av dessa fynd för att förutsäga vävnadsnivåsvar inte tillräckligt övertygande. Den största begränsningen av 2D-kulturerna är att den skapade mikromiljön skiljer sig till stor del från bröstvävnaden i sig2. 2D-kulturen saknar interaktionen mellan cellerna och den extracellulära matrisen, vilket är avgörande för tillväxten av vilken vävnad som helst. Dragkrafter som upplevs av cellen i monolagerkulturer hindrar också polariteten hos dessa celler, vilket förändrar cellsignalering och beteende 3,4,5. Tredimensionella (3D) odlingssystem har öppnat en ny väg inom cancerforskningen med sin förmåga att efterlikna in vivo-förhållandena in vitro. Många viktiga mikromiljösignaler som går förlorade i 2D-cellodling kan återupprättas med hjälp av 3D-kulturer av lamininrik extracellulär matris (lrECM)6.
Olika studier har identifierat betydelsen av tumörmikromiljön vid cancerframkallande 7,8. Inflammationsassocierade faktorer är en stor del av mikromiljön. Trombocytaktiveringsfaktor (PAF) är en fosfolipidmediator som utsöndras av olika immunceller som förmedlar flera immunsvar 9,10. Höga nivåer av PAF utsöndras av olika bröstcancercellinjer och är förknippade med förbättrad proliferation11. Studier från vårt laboratorium har visat att den långvariga närvaron av PAF i acinarkulturer leder till omvandling av bröstepitelceller12. PAF aktiverar PAF-receptorn (PAFR) och aktiverar PI3K/Akt-signalaxeln13. PAFR rapporteras också vara associerad med EMT, invasion och metastasering14.
Detta protokoll visar ett modellsystem för att studera PAF-inducerad transformation, med hjälp av 3D-kulturer av bröstepitelceller, som tidigare har beskrivits av Chakravarty et al.12. Bröstepitelcellerna som odlas på den extracellulära matrisen (3D-kulturer) tenderar att bilda polariserade tillväxtarresterade sfäroider. Dessa kallas acini och liknar acini i bröstvävnad, den minsta funktionella enheten i bröstkörteln, in vivo15. Dessa sfäroider (figur 1A,B) består av ett monolager av tätt packade polariserade epitelceller som omger en ihålig lumen och är fästa vid källarmembranet (figur 1C). Denna process av morfogenes har beskrivits väl i litteratur16. När de seedas på lrECM genomgår cellerna delning och differentiering för att bilda ett kluster av celler, som sedan polariseras från dag 4 och framåt. Vid dag 8 består acini av en grupp polariserade celler som är i direkt kontakt med den extracellulära matrisen och ett kluster av opolariserade celler inneslutna i de yttre polariserade cellerna, utan kontakt med matrisen. Dessa opolariserade celler är kända för att genomgå apoptos vid dag 12 av kulturen och bildar en ihålig lumen. Vid dag 16 bildas tillväxtarresterade strukturer16.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64146/64146fig01.jpg"> Figur 1: Kärnor av celler i acini färgade med en kärnfläck . (A) 3D-konstruktion av acini. (B) Faskontrastbild av MCF10A acini odlad på Matrigel i 20 dagar. (C) Den mittersta sektionen visar närvaron av en ihålig lumen. Skalstreck = 20 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64146/64146fig01large.jpg" target="_blank">Klicka här för att se en större version av denna figur.</a>
Till skillnad från 2D-kulturer hjälper acinarkulturer att skilja normala och transformerade celler genom uppenbara morfologiska förändringar. Icke-transformerade bröstepitelceller bildar acini med en ihålig lumen som efterliknar den normala mänskliga bröstacini. Dessa sfäroider, vid transformation, visar en störd morfologi som kännetecknas av en stor förlust av polaritet (ett av kännetecknen för cancer), frånvaro av lumen eller störning av den ihåliga lumen (på grund av undvikande av apoptos) som kan induceras på grund av avreglering av olika gener17,18,19,20 . Dessa transformationer kan studeras med hjälp av vanliga tekniker såsom immunofluorescens. Således kan 3D-cellodlingsmodellen fungera som en enkel metod för att undersöka processen för bröstacinarmorfogenes och bröstcancer. Att etablera ett 3D-odlingssystem för att förstå effekten av en fosfolipidmediator, PAF, kommer att hjälpa till med preklinisk läkemedelsscreening med hög genomströmning.
Detta arbete har anpassat 3D 'on top' kulturprotokoll16,21 för att studera transformation inducerad av PAF 22. De fenotypiska förändringarna som inducerades av exponering av acini för fosfolipidmediatorn studerades med användning av immunofluorescens. Olika markörer för polaritet och epitelial till mesenkymal övergång (EMT)12,16 användes i studien. Tabell 1 nämner deras normala lokalisering och deras förväntade fenotyp vid transformation.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Antikroppar</td>
			<td>Markerar</td>
			<td>Normal lokalisering</td>
			<td>Transformerad fenotyp</td>
		</tr><tr><td>α6-Integrin</td>
			<td>Basolateral</td>
			<td>Basal med svag lateral fläck</td>
			<td>Stark lateral / apikal fläck</td>
		</tr><tr><td>β-Catenin</td>
			<td>Korsning mellan cell och cell</td>
			<td>Basolateral</td>
			<td>Onormal / nukleär eller cytoplasmatisk lokalisering</td>
		</tr><tr><td>Vimentin</td>
			<td>Emt</td>
			<td>Frånvarande / svag närvaro</td>
			<td>Uppreglering</td>
		</tr></tbody></table>Tabell 1: Markörer som använts i studien. Olika markörer som används med deras lokalisering i närvaro och frånvaro av PAF-behandling.
Denna metod kan bäst användas för att studera / screena troliga läkemedel och målgener för olika bröstcancerundertyper. Detta kan ge en läkemedelsresponsdata närmare in vivo-scenariot , vilket hjälper till med snabbare och mer tillförlitlig läkemedelsutveckling. Detta system kan också användas för att studera molekylär signalering associerad med läkemedelssvar och läkemedelsresistens.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.05% Trypsin EDTA</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>25300062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16% paraformaldehyde</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>AA433689M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Mouse Alexa Flour 488</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A11029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Rabbit Alexa Flour 488</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-11008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A7030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chamber Coverglass</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>155409</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholera Toxin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C8052-1MG</td>
			<td>1 mg/mL in dH2O</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Leica SP8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11965126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E6758</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E9644-0.2MG</td>
			<td>100 mg/mL in dH2O</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F(ab&#8217;)2 fragment of antibody raised in goat against mouse antigen</td>
			<td>Jackson Immunoresearch</td>
			<td>115-006-006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GM130 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab52649</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat Serum</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab7481</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>33258</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horse Serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16050122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrocortisone</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H0888</td>
			<td>1 mg/mL in ethanol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image Processing Software</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I1882</td>
			<td>10 mg/mL stock dH2O</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lrECM (Matrigel)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>356231</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting reagent (Slow fade Gold Anti-fade)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>S36937</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuclear Stain&#160; (Hoechst)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>33258</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PAF</td>
			<td>Cayman Chemicals</td>
			<td>91575-58-5</td>
			<td>Methylcarbamyl PAF C-16, procured as a 10 mg/mL in ethanol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>17-602E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Azide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S2002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris Base</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>B9754</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween 20</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9416</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vimentin antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab92547</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#945;6-integrin antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>MAB1378</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

phospholipid mediator induced transformation in three-dimensional cultures

Flera modeller har utvecklats för att studera cancer, till exempel gnagarmodeller och etablerade cellinjer. Värdefulla insikter om cancerframkallande ämnen har getts genom studier med hjälp av dessa modeller. Cellinjer har gett en förståelse för avregleringen av molekylär signalering i samband med brösttumörigenes, medan gnagarmodeller används i stor utsträckning för att studera cellulära och molekylära egenskaper hos bröstcancer in vivo. Upprättandet av 3D-kulturer av bröstepitel- och cancerceller hjälper till att överbrygga klyftan mellan in vivo- och in vitro-modeller genom att efterlikna in vivo-förhållandena in vitro. Denna modell kan användas för att förstå avregleringen av komplexa molekylära signalhändelser och de cellulära egenskaperna under bröstcancer. Här modifieras ett 3D-odlingssystem för att studera en fosfolipidmediatorinducerad (trombocytaktiveringsfaktor, PAF) transformation. Immunmodulatorer och andra utsöndrade molekyler spelar en viktig roll i tumörinitiering och progression i bröstet. I den aktuella studien utsätts 3D-acinarkulturer av bröstepitelceller för PAF uppvisade transformationsegenskaper såsom förlust av polaritet och förändrade cellulära egenskaper. Detta 3D-odlingssystem kommer att hjälpa till att belysa genetiska och / eller epigenetiska störningar inducerade av olika småmolekylära enheter i tumörmikromiljön. Dessutom kommer detta system också att tillhandahålla en plattform för identifiering av nya såväl som kända gener som kan vara involverade i omvandlingsprocessen.

MCF10A-celler, vid exponering för PAF-behandling, bildar acinarstrukturer med mycket distinkta fenotyper. α6-integrin visade sig vara fellokaliserat med mer apikal färgning. Några acini visade också diskontinuerlig färgning (figur 2A). Båda dessa fenotyper indikerar förlusten av basal polaritet, vilket framgår av litteraturen24,25. Tidigare rapporter indikerar den kontroversiella rollen av α6-integrin i cancermetastaser. α...

Watch this Scientific Journal Video about Phospholipid Mediator Induced Transformation in Three-Dimensional Cultures at JoVE.com

Phospholipid Mediator Induced Transformation in Three-Dimensional Cultures

Detta protokoll beskriver upprättandet av 3D "på toppen " -kulturer av en icke-transformerad bröstepitelcelllinje, MCF10A, som har modifierats för att studera trombocytaktiveringsfaktor (PAF) inducerad transformation. Immunofluorescens har använts för att bedöma transformationen och diskuteras i detalj.

Fosfolipidmediatörinducerad transformation i tredimensionella kulturer

Several models have been developed to study cancer, such as rodent models and established cell lines. Valuable insights into carcinogenesis have been ...

Våra modifierade 3D-analyskulturer kan användas för att undersöka olika komponenters roll i en cancermikromiljö, vilket leder till identifiering av nya biomarkörer och läkemedelsmål. Denna metod gör det möjligt för en att studera förändringar i den cellulära fenotypen och molekylär signalering som liknar immunsystemet. Det kan också modifieras för att uppfylla specifika krav i en studie.Denna metod kan hjälpa till att identifiera nya biomarkörer som kan hjälpa till att tidigt upptäcka bröstcancer. Molekylära insikter kan också användas för att identifiera nya läkemedelsmål. Denna metod kan användas för att studera både tumorigenes och morfogenes efter störning av gen eller gener som kan ge insikt i genens eller genernas roll.För att börja, trypsinisera cellerna genom att aspirera mediet och tvätta med 2 ml PBS. Tillsätt 900 mikroliter 0,05% Trypsin-EDTA och inkubera vid 37 grader Celsius i cirka 15 minuter eller tills cellerna är helt trypsiniserade. Förbered en bädd av lrECM i åtta brunnar i en kammare täckglasskiva genom att belägga varje brunn med 60 mikroliter lrECM.Placera den i en 37 grader Celsius koldioxidinkubator i högst 15 minuter. För att förbereda cellsuspensionen, tillsätt 5 ml re-suspensionsmedium för att släcka trypsinaktiviteten och snurra cellerna vid 112 gånger g i 10 minuter vid 25 grader Celsius. Aspirera det förbrukade mediet och suspendera cellerna igen i 2 ml analysmedium.Blanda suspensionen väl för att säkerställa bildandet av en enda cellsuspension. Räkna cellerna med hjälp av en hemocytometer och beräkna volymen cellsuspension som behövs för att fröa 6 000 celler i varje brunn. Beroende på antalet brunnar som krävs, späd cellsuspensionen i överlagringsmediet.Tillsätt 400 mikroliter av den utspädda cellsuspensionen till de förberedda lrECM-sängarna, se försiktigt till att inte störa lrECM-sängen. Inkubera vid 37 grader Celsius i en fuktad 5% koldioxidinkubator. Efter 3 timmar, tillsätt 200 nanomol PAF till varje brunn.Lägg till samma koncentration av PAF under varje mediebyte och fyll på cellerna med färskt medium var 4: e dag. Efter 20 dagars odling, pipettera försiktigt ut mediet från varje brunn och tvätta brunnarna med 400 mikroliter förvärmd PBS. Fixa acinarstrukturerna genom att tillsätta 400 mikroliter nyberedd 4% paraformaldehyd och inkubera i 20 minuter vid rumstemperatur.Skölj brunnarna en gång med iskall PBS och permeabilisera med PBS som innehåller 0,5% Triton X-100 i 10 minuter vid 4 grader Celsius. Efter 10 minuter, pipettera ut Triton X-100-lösningen försiktigt och skölj med 400 mikroliter nyberedd PBS-glycin. Tillsätt 400 mikroliter av den primära blockeringslösningen bestående av 10% getserum i immunofluorescensbuffert och inkubera vid rumstemperatur i 60 minuter.Ta bort den primära blockeringslösningen, tillsätt 200 mikroliter 2% sekundär blockerande antikropp framställd i den primära blockeringslösningen och lämna den vid rumstemperatur i 45 till 60 minuter. Bered den primära antikroppen i 2% sekundär blockerande antikroppslösning i en 1:100 utspädning. Ta bort den sekundära blockeringslösningen, tillsätt den nyberedda antikroppen och inkubera över natten vid 4 grader Celsius.Pipettera försiktigt den primära antikroppslösningen och tvätta den tre gånger med 400 mikroliter immunofluorescensbuffert. Bered därefter en 1:200 utspädning av den fluoroforkonjugerade sekundära antikroppen i den primära blockeringslösningen och inkubera objektglasen i den sekundära antikroppslösningen i 40 till 60 minuter vid rumstemperatur. Skölj bilderna med 400 mikroliter immunofluorescensbuffert i 20 minuter, följt av två tvättar med PBS i 10 minuter vardera.Motfläcka kärnorna med PBS innehållande 0,5 nanogram per milliliter kärnfläck i 5 till 6 minuter vid rumstemperatur. Tvätta bilderna tre gånger med 400 mikroliter PBS för att ta bort överflödig fläck. Pipettera försiktigt ut hela PBS och se till att restlösningen tas bort.Tillsätt sedan en droppe monteringsreagens i varje brunn och låt den stå vid rumstemperatur över natten. Slutligen avbilda bilderna under 40x eller 63x förstoring på ett konfokalmikroskop och ta optiska Z-sektioner med 0,6 millimeter stegstorlek. Bilderna representerar kärnorna i celler i acini färgade med en kärnfläck.3D-konstruktionen av acini och faskontrastbilden av MCF10A acini som odlas på lrECM i 20 dagar visas här. Den mittersta sektionen visar närvaron av en ihålig lumen. PAF stör polariteten och inducerar EMT-liknande förändringar i MCF10A bröstacini.MCF10A-celler odlades som 3D på toppens kulturer i lrECM. Kulturerna behandlades med PAF dag 0, 4, 8, 12 och 16. Kulturerna bibehölls i 20 dagar och immunbehandlades sedan för alfa6-integrin och kärnfläck, GM130, en markör för apikal polaritet, och Vimentin, en EMT-markör.Den mittersta stacken av respektive acini har visats här. De representativa uppgifterna är för 40-50 acini från tre biologiskt oberoende experiment. LRECM-sängen måste göras noggrant så att den sprids jämnt utan luftbubblor.Cellsuspensionen bör också blandas jämnt och tillsättas långsamt för att undvika klumpning. Man kan få protein och RNA från 3D-kulturerna som sedan kan användas för att undersöka de olika molekylära vägarna.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Moving Upwards: A Simple and Flexible In Vitro Three-dimensional Invasion Assay Protocol

Moving Upwards: A Simple and Flexible In Vitro Three-dimensional Invasion Assay Protocol

Flytta uppåt: Ett enkelt och flexibelt In Vitro tredimensionella Invasion Assay protokoll

Although 3D invasion assays have been developed, the challenge remains to study cells without affecting the integrity of their microenvironment. ...

Generation of High-Throughput Three-Dimensional Tumor Spheroids for Drug Screening

Generation av High-Throughput tredimensionella tumör Spheroids för drogkontroll

Cancer cells have routinely been cultured in two dimensions (2D) on a plastic surface. This technique, however, lacks the true environment a tumor mass is ...

A Three-dimensional Thymic Culture System to Generate Murine Induced Pluripotent Stem Cell-derived Tumor Antigen-specific Thymic Emigrants

Ett tredimensionellt thymic kultur system för att generera murin inducerad pluripotenta stamcells härledda tumör antigen-specifika thymic emigranter

The inheritance of pre-rearranged T cell receptors (TCRs) and their epigenetic rejuvenation make induced pluripotent stem cell (iPSC)-derived T cells a ...

Longitudinal Morphological and Physiological Monitoring of Three-dimensional Tumor Spheroids Using Optical Coherence Tomography

Längsgående morfologiska och fysiologiska övervakning av tredimensionella tumör Spheroids använder optisk koherenstomografi

Tumor spheroids have been developed as a three-dimensional (3D) cell culture model in cancer research and anti-cancer drug discovery. However, currently, ...

Three-Dimensional Bone Extracellular Matrix Model for Osteosarcoma

Tredimensionella ben extracellulärmatrix modell för osteosarkom

Osteosarcoma (OS) is the most common and a highly aggressive primary bone tumor. It is characterized with anatomic and histologic variations along with ...

Fully Human Tumor-based Matrix in Three-dimensional Spheroid Invasion Assay

Helt mänsklig tumör-baserade Matrix i tredimensionell sfäroid invasion assay

Two-dimensional cell culture-based assays are commonly used in in vitro cancer research. However, they lack several basic elements that form the tumor ...

Evaluating Cell Death Using Cell-Free Supernatant of Probiotics in Three-Dimensional Spheroid Cultures of Colorectal Cancer Cells

Utvärdera celldöd med hjälp av cellfri supernatant av probiotika i tredimensionella sfäroidkulturer av kolorektalcancerceller

This manuscript describes a protocol to evaluate cancer cell deaths in three dimensional (3D) spheroids of multicellular types of cancer cells using ...

In Vitro Evaluation of Oncogenic Transformation in Human Mammary Epithelial Cells

In Vitro Utvärdering av Oncogenic Transformation i mänskliga mammary Epitelial celler

Tumorigenesis is a multi-step process in which cells acquire capabilities&#160;that allow their growth, survival, and dissemination under hostile ...

A Three-dimensional Model of Spheroids to Study Colon Cancer Stem Cells

En tredimensionell modell av sfäroider för att studera tjocktarmscancerstamceller

Colorectal cancers are characterized by heterogeneity and a hierarchical organization comprising a population of cancer stem cells (CSCs) responsible for ...

Three-Dimensional In Vitro Biomimetic Model of Neuroblastoma Using Collagen-Based Scaffolds

Three-Dimensional In Vitro Biomimetic Model of Neuroblastoma Using Collagen-Based Scaffolds

Tredimensionell in vitro biomimetisk modell av neuroblastom med hjälp av kollagenbaserade strukturer

Neuroblastoma is the most common extracranial solid tumor in children, accounting for 15% of overall pediatric cancer deaths. The native tumor tissue is a ...