Name: destabilization of the medial meniscus and cartilage scratch murine model of accelerated osteoarthritis
Uploaded: 2022-07-06T14:30:00
Duration: 7 min 6 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Destabilization of the Medial Meniscus and Cartilage Scratch Murine Model of Accelerated Osteoarthritis at JoVE.com

ברצוננו להודות על עבודתם של ג'מה צ'רלסוורת' ומנדי פריור מאוניברסיטת ליברפול, שרכשו את תמונות ה- μCT המשמשות בפרסום זה. העבודה מומנה על ידי Versus Arthritis (מענקים 20199 ו-22483). לינט דאנינג מומנה על ידי Versus Arthritis (מענק 20199). קנדל מק'קולוך מומן על ידי מלגת דוקטורט של UWS. כרמן הוזה מומנה על ידי Versus Arthritis (מענקים 20199 ו-22483).

<ol>
	<li>Arthritis Research UK. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+State+of+Musculoskeletal+Health+2018.">The State of Musculoskeletal Health 2018.</a> Arthritis Research UK. , (2018).</li><li>Mahir, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+knee+osteoarthritis+on+the+quality+of+life.">Impact of knee osteoarthritis on the quality of life.</a> Annals of Physical and Rehabilitation Medicine. 59, 159 (2016).</li><li>Chen, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis:+toward+a+comprehensive+understanding+of+pathological+mechanism.">Osteoarthritis: toward a comprehensive understanding of pathological mechanism.</a> Bone Research. 5, 16044 (2016).</li><li>Glasson, S. S., Blanchet, T. J., Morris, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+surgical+destabilization+of+the+medial+meniscus+(DMM)+model+of+osteoarthritis+in+the+129/SvEv+mouse.">The surgical destabilization of the medial meniscus (DMM) model of osteoarthritis in the 129/SvEv mouse.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 15 (9), 1061-1069 (2007).</li><li>Sophocleous, A., Huesa, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis+mouse+model+of+destabilization+of+the+medial+meniscus.">Osteoarthritis mouse model of destabilization of the medial meniscus.</a> Methods in Molecular Biology. 1914, 281-293 (2019).</li><li>McCulloch, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accelerated+post+traumatic+osteoarthritis+in+a+dual+injury+murine+model.">Accelerated post traumatic osteoarthritis in a dual injury murine model.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 27 (12), 1800-1810 (2019).</li><li>Fan, X., Wu, X., Crawford, R., Xiao, Y., Prasadam, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macro,+micro,+and+molecular+changes+of+the+osteochondral+interface+in+osteoarthritis+development.">Macro, micro, and molecular changes of the osteochondral interface in osteoarthritis development.</a> Frontiers in Cell and Developmental Biology. 9, 659654 (2021).</li><li>Hwang, H. S., Park, I. Y., Hong, J. I., Kim, J. R., Kim, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+joint+degeneration+and+pain+in+male+and+female+mice+in+DMM+model+of+osteoarthritis.">Comparison of joint degeneration and pain in male and female mice in DMM model of osteoarthritis.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 29 (5), 728-738 (2021).</li><li>Loga, I. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+pain+at+an+earlier+stage+of+chondropathy+protect+female+mice+against+structural+progression+after+surgically+induced+osteoarthritis.">Does pain at an earlier stage of chondropathy protect female mice against structural progression after surgically induced osteoarthritis.</a> Arthritis &amp; Rheumatology. 72 (12), 2083-2093 (2020).</li><li>Ma, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis+severity+is+sex+dependent+in+a+surgical+mouse+model.">Osteoarthritis severity is sex dependent in a surgical mouse model.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 15 (6), 695-700 (2007).</li><li>Cicero, L., Fazzotta, S., Palumbo, V. D., Cassata, G., Lo Monte, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthesia+protocols+in+laboratory+animals+used+for+scientific+purposes.">Anesthesia protocols in laboratory animals used for scientific purposes.</a> Acta Biomedica. 89 (3), 337-342 (2018).</li><li>Huesa, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proteinase-activated+receptor+2+modulates+OA-related+pain,+cartilage+and+bone+pathology.">Proteinase-activated receptor 2 modulates OA-related pain, cartilage and bone pathology.</a> Annals of the Rheumatic Diseases. 75 (11), 1989-1997 (2016).</li><li>Tappe-Theodor, A., King, T., Morgan, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pros+and+cons+of+clinically+relevant+methods+to+assess+pain+in+rodents.">Pros and cons of clinically relevant methods to assess pain in rodents.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 100, 335-343 (2019).</li><li>Stewart, K., Schroeder, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lab+animal+research.+blood+withdrawal+I.">Lab animal research. blood withdrawal I.</a> JoVE Science Education Database. , (2018).</li><li>Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+tactile+allodynia+in+the+rat+paw.">Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw.</a> Journal of Neuroscience Methods. 53 (1), 55-63 (1994).</li><li>Lakes, E. H., Allen, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gait+analysis+methods+for+rodent+models+of+arthritic+disorders:+reviews+and+recommendations.">Gait analysis methods for rodent models of arthritic disorders: reviews and recommendations.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 24 (11), 1837-1849 (2016).</li><li>Das Neves Borges, P., Forte, A. E., Vincent, T. L., Dini, D., Marenzana, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid,+automated+imaging+of+mouse+articular+cartilage+by+microCT+for+early+detection+of+osteoarthritis+and+finite+element+modelling+of+joint+mechanics.">Rapid, automated imaging of mouse articular cartilage by microCT for early detection of osteoarthritis and finite element modelling of joint mechanics.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 22 (10), 1419-1428 (2014).</li><li>vander Kraan, P. M., vanden Berg, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteophytes:+relevance+and+biology.">Osteophytes: relevance and biology.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 15 (3), 237-244 (2007).</li><li>Glasson, S. S., Chambers, M. G., Van Den Berg, W. B., Little, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+OARSI+histopathology+initiative+-+recommendations+for+histological+assessments+of+osteoarthritis+in+the+mouse.">The OARSI histopathology initiative - recommendations for histological assessments of osteoarthritis in the mouse.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 18, 17-23 (2010).</li><li>Jackson, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depletion+of+protease-activated+receptor+2+but+not+protease-activated+receptor+1+may+confer+protection+against+osteoarthritis+in+mice+through+extracartilaginous+mechanisms.">Depletion of protease-activated receptor 2 but not protease-activated receptor 1 may confer protection against osteoarthritis in mice through extracartilaginous mechanisms.</a> Arthritis and Rheumatology. 66 (12), 3337-3348 (2014).</li><li>Pinamont, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+histomorphometric+evaluation+of+osteoarthritis+in+a+surgical+mouse+model.">Standardized histomorphometric evaluation of osteoarthritis in a surgical mouse model.</a> Journal of Visualized Experiments. (159), e60991 (2020).</li></ol>

למחברים אין מה לחשוף.

כדי לבצע אינדוקציה כירורגית של דלקת מפרקים ניוונית פוסט טראומטית (PTOA), מומלץ מאוד לתמוך בעוזר (למשל, להכין את העכברים בזמן שהמפעיל מתמקד בניתוח). זה מקל על ניתוח אספטי, ובכך להפחית את הסיכונים של זיהומים ולהפוך את ההתערבות יעילה יותר בניסויים גדולים. קל לאבד את מישור המיקוד במהלך הניתוח, ולכן מיקרוסקופ הכולל דוושות למיקוד הוא תכונה חשובה בשמירה על סטריליות לאורך כל הניתוח. מיקום העכבר והברך הוא קריטי. הברך חייבת להיות פונה כלפי מעלה וכפופה מספיק כדי למקסם את הפתח של שטח מפרק הברך, מה שמקל על הגישה לרצועה להחדרת המיקרובלייד כדי לגרד את משטח הקונדיל. זיהוי ה- MMTL יכול להיות מאתגר, במיוחד כאשר כרית השומן גדולה מהרגיל או שיש דימום קטן. כדי למנוע דימום, יש לדחוף את כרית השומן כלפי מעלה כדי למנוע קרעים ודימום לאחר מכן. אם כרית השומן גדולה, זה עשוי לקחת קצת יותר זמן, אבל בסבלנות להמשיך לדחוף אותו כלפי מעלה.
ה- MMTL קרוב למדי לקונדיל הטיביאלי, ולכן יש להיזהר שלא לפגוע בסחוס בעת מיקום הלהב התחתון של מספריים הקפיצים המעוקלים מתחת ל- MMTL. הלהבים המעוקלים צריכים להצביע לכיוון הצד המדיאלי ומעט כלפי מעלה, במקביל לקונדיל. לחיתוך הטוב ביותר של ה-MMTL, ודא שהמספריים חדים. בדקו כי המניסקוס יכול לנוע באופן מדיאלי לאחר חיתוך הרצועה, שכן לעיתים נשאר חיבור קטן הדורש חיתוך נוסף. כאשר מציגים את המיקרובלייד כדי לגרד את הקונדיל, הוא חייב להיות בניצב לקונדיל. מקרבים את השריטה הראשונה לאמצע המפרק אך נזהרים שלא לפגוע ברצועה הצולבת הקדמית. לאחר מכן לנוע לכיוון הצד המדיאלי ואז מאחורי המניסקוס. השריטות עשויות להיראות כקווים לבנים קלושים על הסחוס. מכיוון שאנו משתמשים בדרך כלל בקליפים, החתך הראשוני מבוצע בצד הצדדי, כך שהתפסים ממוקמים בצד הרגל לאחר סגירת הפצע. פעולה זו מונעת מהקליפסים לשפשף את הברך כשהעכבר חוזר לתנועה. בעת שימוש בתפרים, מומלץ מאוד להשתמש בתפרים תת-עוריים. אם משתמשים בתפרים חיצוניים, העכברים צפויים לכרסם בתפרים ולפתוח את הפצע שלהם, מה שיגדיל את הסיכויים לזיהום. כאשר ניתוח זה נעשה נכון, אסור שייקח יותר מ-5-10 דקות, מהחתך ועד לסגירת הפצע, ובכך למזער את החשיפה של הסחוס וכל נזק בלתי מבוקר נוסף שעלול להתרחש. לאחר הניתוח, העכברים מתאוששים מהר מאוד וכמעט מיד יכולים לטפס לתוך הכלוב ולנוע כרגיל. אם העכברים אינם פעילים, יש להתייעץ עם המומחה המתאים ביחידה.
לצורך הערכה התנהגותית של כאב, הוערך נושא משקל דינמי. עם זאת, שיטה זו עשויה להיחשב פחות רגישה ממבחני כאב מעוררים אחרים, כגון בדיקת פון פריי15. מומלץ להשתמש ביותר משיטה אחת כדי לפקח ולהעריך כאב. השינויים שנצפו שבועיים לאחר התערבות ב- DCS, למרות שהם חולפים, מצביעים על ירידה כללית בהעמסה של רגל OA בהשוואה לרגל הבריאה. לכן, ניתן להשתמש בשבועיים לאחר התערבות DCS כדי להעריך כאבים אוסטאו-ארתריטיים מוקדמים או כאבים בפציעות במודלים של עכברים. הדמיה של אוסטאופיטים שעברו מינרליזציה על ידי μCT מאפשרת כימות תלת מימדי, אשר ניתן להתאים גם לסעיפים ההיסטולוגיים12, ומוסיפה ממד נוסף לחקר הופעת אוסטאופיטים ואבולוציה. בקבוצה שלנו, נוכחות אוסטאופיטים הייתה משתנה במודל DMM בין ובתוך אופרטורים (2.3 ± 1 לעומת 1.2 ± 1, n > 7, P = 0.0183), בעוד שאינדוקציה של DCS הובילה בחוזקה ליצירת אוסטאופיטים בכל המקרים ללא קשר לאופרטור (2.6 ± 0.7 לעומת 2.4 ± 0.5, n > 7, P = 0.711). כמו כן, ישנם באופן משמעותי יותר ויותר אוסטאופיטים במודל DCS בהשוואה ל- DMM. לפיכך, DCS הוא מודל אידיאלי לחקר היווצרות אוסטאופיטים. כימות של אוסטאוסקלרוזיס המוגבל לאזור ההעמסה של העצם התת-כונדרלית הוא גם שיפור באיתור שינויים קטנים. השוואת התא המדיאלי של הרגל המופעלת לרגל הנגדית מציעה גם דרך לנרמל כנגד פנוטיפ העצם הפנימי של אותו עכבר מסוים12. הוספת שריטות הסחוס במודל DCS היא אמצעי מבוקר לגרימת נזק סחוס ממוקד במהלך הניתוח המאיץ רבים מההיבטים של המחלה. אחת ההשלכות של ההליך הניסיוני הכולל פגיעה מכוונת בסחוס עצמו היא שיש לשלול או להתאים את הנזק הארטפכלי הזה במערכת דירוג הסחוס. בגלל מגבלה זו, איננו ממליצים על מודל זה אם מטרתו העיקרית של המחקר היא להבין את ההשפעה של דלקת מפרקים ניוונית על הסחוס עצמו. לבסוף, מומלץ מאוד גם שלפחות שני ציונים עיוורים ידרגו את נזקי הסחוס ואת ציוני הסינוביטיס. זה מאמת ומשפר את הסטנדרטיזציה של מערכות הניקוד.
מגבלה של מחקר זה היא שמידת השונות בכל הפרמטרים המשווים בין מודלי DCS ו- DMM לא הוערכה במלואה. נושא זה יטופל בעתיד במחקרים מקיפים יותר, שיוכלו לכלול גם הערכה של השונות בין מפעילים ממוסדות שונים.
לסיכום, הפתוגנזה המואצת של OA במודל DCS הנוכחי מאפשרת ייצוג של OA פוסט טראומטי ומספקת כלי מחקר רב עוצמה וחזק לחקור ולהבהיר את המנגנונים הפתופיזיולוגיים הבסיסיים של OA המניעים את מחלת המפרקים הכרונית המתישה הזו. בנוסף, הוא מאפשר לחקור את OA בחלון זמן קצר יותר, תוך התמקדות באוסטיאופיטוגנזה, כאבי OA והשפעת פגיעה בסחוס על המפרק כולו.

דלקת מפרקים ניוונית (OA) היא המחלה השכיחה ביותר של שלד-שריר בקרב אנשים מעל גיל 45, עם יותר מ-8.75 מיליון פונים לטיפול בבריטניה1. השכיחות הגוברת של המחלה הובילה לעלייה במחיר הכלכלי והחברתי, תורמת רבות למוגבלות ומפחיתה את איכות החיים של החולים1. ללא טיפולים זמינים, יש צורך דחוף להאיץ את המחקר כדי להבין את התפתחות המחלה והתקדמותה. המחלה מורכבת וגם רב גורמית באופיה. המדדים הקליניים העיקריים של המחלה הם כאב ותנועתיות מפרקים2, ו- OA משפיע על כל הרקמות במפרק, לא רק על הסחוס3. אחד האתגרים העיקריים בהבנת OA הוא שזה יכול לקחת שנים, לפעמים עשרות שנים, מהצגה ראשונית / פציעה ועד התקדמות מחלה סימפטומטית עם כאב וחוסר תנועה. 
מידול אוסטאוארתריטיס במכרסמים שיפר את הידע שלנו על פתופיזיולוגיה של OA בכך שאיפשר לנו להבין את הייזום וההתקדמות במסגרת זמן קצרה בהרבה ועם בדיקה מפורטת של הרקמות המעורבות. ישנם מודלים רבים של מורין של דלקת מפרקים ניוונית, מבעלי חיים מהונדסים גנטית ועד מודלים של התערבות כירורגית. מודל המורין הנפוץ ביותר של OA פוסט טראומטי הוא ערעור היציבות של המניסקוס המדיאלי (DMM)4,5. אזהרה של המודל היא השונות בין אופרטורים שונים. מנתחים מנוסים יכולים לבצע את ההליך עם נזק מינימלי למפרק, בעוד מפעילים לא מנוסים חושפים את קפסולת המפרק לפרקי זמן ארוכים יותר וגורמים נזק לסחוס. שונות זו בתהליך משפיעה על חומרת המודל, כאשר נזק ראשוני רב יותר מוביל לעלייה בציוני הנזק לסחוס ולהיווצרות אוסטאופיטים. מתוך כוונה לצמצם את השונות בין המפעילים ולחקות נזקי סחוס כתוצאה מהתערבות קלינית, מפותחת גרסה שונה של מודל זה, שבמסגרתה נגרם נזק נוסף מבוקר על פני הסחוס בצורה של שלוש שריטות שטחיות6. זה גם מאפשר למדל את התקדמות OA הנובעת מנזק לסחוס שנגרם על ידי כמה התערבויות קליניות. בהשוואה למודל DMM הסטנדרטי, הפגיעה הישירה בסחוס גורמת להיווצרות אוסטאופיטים בולטים המואצת באופן עקבי, לפגיעה מוגברת בסחוס ולדלקת, ולכאבים פונדקאיים הניתנים למדידה בעכברים זכרים.
מודל זה מתאים במיוחד לחקר OA פוסט-טראומטי בשלב מוקדם, תוך התמקדות בהיווצרות אוסטאופיטים, הצגת כאב (בעכברים זכרים), סינוביטיס ושינויים מוקדמים בפרמטרים של העצם. העקביות של היווצרות אוסטאופיטים במודל זה הופכת את זה לרלוונטי לחקר תיקון עצם ואוסיפיקציה אנדוכונדרלית מכיוון שהיווצרות אוסטאופיטים היא תהליך של תיקון באמצעות אוסיפיקציה אנדוכונדרלית7. המודל גם מחקה נזק הנגרם ישירות לסחוס במהלך התערבויות קליניות, כגון ניתוחים ארתרוסקופיים, ולכן הוא מתאים גם לחקר ההשפעה של פגיעה בסחוס על המפרק כולו.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>#11 scalpel blade (and scalpel handle).</td>
			<td>World precision instruments</td>
			<td>500240</td>
			<td>access the joint capsule</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15&#176; Cutting Angle microsurgical stab knife</td>
			<td>MSP</td>
			<td>REF7503</td>
			<td>scratch the cartilage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 vicryl rapide</td>
			<td>Any medical supplies provider</td>
			<td>-</td>
			<td>alternative method to close wound</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anaesthetic rig</td>
			<td>Generic (many different suppliers)</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibacterial skin clenser (Hibiscrub)</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>-</td>
			<td>To sterilise surgical skin area</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Applicator for 7 mm clips</td>
			<td>World precision instruments</td>
			<td>500343</td>
			<td>close the wound</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Balance</td>
			<td>Generic (many different suppliers)</td>
			<td>-</td>
			<td>To weigh mouse</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt curved forceps</td>
			<td>Fine science tools</td>
			<td>500232</td>
			<td>move the patellar ligament to the side</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine (Vetergesic)</td>
			<td>Supplied by unit as it is a prescription drug</td>
			<td>-</td>
			<td>Analgesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CT analyser</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>3D.SUITE software</td>
			<td>Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ctvol</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>3D.SUITE software</td>
			<td>Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data viewer</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>3D.SUITE software</td>
			<td>Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dynamic weight bearing equipment</td>
			<td>Bioseb</td>
			<td>BIO-DWB-DUAL</td>
			<td>Measure limb loading and has cage, pressure matt and software for analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Merck</td>
			<td>E9884</td>
			<td>10% solution in PBS (or water) to decalcify bone pH 7.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Generic (many different suppliers)</td>
			<td>-</td>
			<td>for embedding decalcified bones</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Green FCF</td>
			<td>Merck</td>
			<td>F7252</td>
			<td>For staining sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glacial acetic acid</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1005706</td>
			<td>For stianing sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Haematoxylin solution</td>
			<td>Merck</td>
			<td>GHS132</td>
			<td>Nuclear staining in paraffin sections.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoskins #21 micro-tweezers.</td>
			<td>Cameron surgical limited</td>
			<td>PHF1085</td>
			<td>move the fat pad</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluorane</td>
			<td>Supplied by unit as it is a prescription drug</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice</td>
			<td>Charles river</td>
			<td>-</td>
			<td>C57Bl6/J male 8 weeks old (to allow acclimatisation in the unit)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcomputed tomography scanner</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>SKYSCAN 1272 CMOS</td>
			<td>&#181;CT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropore surgical paper tape</td>
			<td>FisherScientific</td>
			<td>12787597</td>
			<td>hold leg in position</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffin wax</td>
			<td>Generic (many different suppliers)</td>
			<td>-</td>
			<td>for embedding decalcified bones</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reflex 7 mm stainless steel wound clips or</td>
			<td>Fine science tools</td>
			<td>12032-07</td>
			<td>close the wound</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Remover for 7 mm clips</td>
			<td>World precision instruments</td>
			<td>500347</td>
			<td>remove wound clips</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotary Microtome</td>
			<td>Generic (many different suppliers)</td>
			<td>-</td>
			<td>To cut section of Paraffin embedded tissue.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safranin-O</td>
			<td>Merck</td>
			<td>S2255</td>
			<td>For staining sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serrated curved forceps</td>
			<td>Fine science tools</td>
			<td>15915</td>
			<td>hold the skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Drape</td>
			<td>Generic (many different suppliers)</td>
			<td>-</td>
			<td>To ensure sterility of surgical area</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Drape with key hole</td>
			<td>Generic (many different suppliers)</td>
			<td>-</td>
			<td>To cover mouse and expose leg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile saline</td>
			<td>Generic (many different suppliers)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile surgical drape</td>
			<td>Generic (many different suppliers)</td>
			<td>-</td>
			<td>maintain sterile environment for surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile surgical drape with key hole</td>
			<td>Generic (many different suppliers)</td>
			<td>-</td>
			<td>cover the mouse and keep leg through key hole</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Scissors</td>
			<td>World precision instruments</td>
			<td>14393</td>
			<td>open the wound</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical microscope.</td>
			<td>Generic (many different suppliers)</td>
			<td>-</td>
			<td>Adjustable focus.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas spring scissors with 2 mm blades.</td>
			<td>Fine science tools</td>
			<td>15000-04</td>
			<td>cut the MMTL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Generic (many different suppliers)</td>
			<td>-</td>
			<td>for embedding decalcified bones</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

destabilization of the medial meniscus and cartilage scratch murine model of accelerated osteoarthritis

דלקת מפרקים ניוונית היא מחלת השלד-שריר השכיחה ביותר בקרב אנשים מעל גיל 45, מה שמוביל לעלות כלכלית וחברתית הולכת וגדלה. מודלים של בעלי חיים משמשים לחיקויים היבטים רבים של המחלה. הפרוטוקול הנוכחי מתאר את מודל שריטת היציבות והסחוס (DCS) של דלקת מפרקים ניוונית פוסט טראומטית. בהתבסס על התערערות היציבות הנפוצה של מודל המניסקוס המדיאלי (DMM), DCS מציג שלוש שריטות על משטח הסחוס. המאמר הנוכחי מדגיש את השלבים לערעור היציבות של הברך על ידי מעבר הרצועה המניסקוטיביאלית המדיאלית ואחריה שלוש שריטות שטחיות מכוונות על הסחוס המפרקי. שיטות הניתוח האפשריות על ידי נשיאת משקל דינמית, טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת והיסטולוגיה מודגמות גם הן. בעוד שמודל DCS אינו מומלץ למחקרים המתמקדים בהשפעת דלקת מפרקים ניוונית על הסחוס, הוא מאפשר לחקור את התפתחות דלקת מפרקים ניוונית בחלון זמן קצר יותר, עם דגש מיוחד על (1) היווצרות אוסטאופיטים, (2) כאבים אוסטאוארתריטיים ופציעות, ו-(3) השפעת פגיעה בסחוס בכל המפרק.

אחוז העומס לכל משקל גוף כולל של הרגל האחורית/OA הושווה לרגל הקונטרלטרלית/קונטרולרית. למרות שפרמטרים אחרים עשויים גם הם לתת הבדלים משמעותיים, כמו העלייה בעומס הכפות הקדמיות לאחר התערבות כירורגית, שינוי עקבי בעומס הכפות האחוריות מצביע על העדפה להשתמש ברגל אחת על פני השנייה והוא אינדיקטור ישיר יותר לאי נוחות משמעותית עבור העכבר עקב התפתחות OA. לא היו שינויים משמעותיים בעומס הרגליים האחוריות בדגם DMM תוך 8 שבועות לאחר האינדוקציה, בעוד שעכברי DCS מעדיפים את הרגל הקונטרלטרלית/בקרה באופן משמעותי שבועיים לאחר ההתערבות (איור 3A).
עצם תת-כונדרלית נותחה על ידי התמקדות בנפח שמתחת לאזור הטעון המדיאלי של הקונדיל הטיביאלי. כאן הערכנו את צפיפות העצם של אזור זה על ידי קביעת אחוז העצם המינרלית באזור העניין וחישבנו את היחס בין הרגל הקונטרלטרלית לרגל האיפסילטרלית. היחס מצביע על כך שלשני המודלים יש צפיפות עצם מוגברת בגפה הפגועה (יחס מעל 1) 4 שבועות לאחר האינדוקציה (איור 3B). הופעתם של אוסטאופיטים בולטת יותר במודל DCS, שבו יש עלייה משמעותית במספר ובנפח בהשוואה למודל DMM שבועיים לאחר התערבות (איור 3C,D). DCS מציג נזק סחוס מוגבר בתאי הטיביאליות והירך המדיאלית ובסינוביטיס (איור 3E,F) 4 שבועות לאחר האינדוקציה.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64159/64159fig01.jpg"> איור 1: התערבות כירורגית להשראת OA פוסט טראומטי בעכבר. תמונות עוקבות מייצגות את השלבים השונים של ההליך. (A) חשיפה של קפסולת מפרק החותכת את הממברנה השטחית סביב הברך על ידי החדרת להב אזמל מספר 11 בצד המדיאלי של הרצועה הפטלרית והרחק מהרצועה. זה יחשוף את כרית השומן האינפרא-פטלרית. (B) זיהוי והעברה של הרצועה המניסקוטיביאלית המדיאלית. כדי לזהות את הרצועה, הזיזו את הרצועה הפטלרית לכיוון הצד הצדדי ואז דחפו את כרית השומן כלפי מעלה. זה מאפשר הדמיה של הרצועה כקו לבן אופקי קטן ממש מעל הקונדיל הטיביאלי (מסומן כאן עם חץ שחור). כדי לחתוך את הרצועה, הלהב התחתון של מספריים קפיץ ממוקם מתחת לרצועה, נזהר לא לפגוע בסחוס. הזיזו את המניסקוס לכיוון הצד המדיאלי כדי לדמיין את הקונדיל הטיביאלי. (C) גירוד פני השטח של הסחוס החשוף וסגירת הפצע. כדי לגרד את הסחוס, המיקרובלייד מוכנס לכיוון הצד האחורי, שם הוא יוצר קשר עם הסחוס ואז נע קדימה לכיוון החלק הקדמי של המפרק. לאחר סיום השריטות, משכו את העור מעל הברך וסגרו את הפצע על ידי תפירה תת-עורית או באמצעות קליפסים לפצע. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64159/64159fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64159/64159fig02.jpg"> איור 2: הערכה של דלקת מפרקים ניוונית בעכבר . (A) נשיאת משקל דינמית מורכבת מהתאמת העומס על מחצלת לחץ לכפה המתאימה. לאחר מכן העומס מבוטא כאחוז מהמשקל הכולל. (B) עצם תת-כונדרלית נמדדת על ידי בחירת נפח עניין באזור ההעמסה של הקונדיל הטיביאלי המדיאלי ובחירת הלוח התת-כונדרלי או העצם הטרבקולרית. תמונות אלה הן ברזולוציה של 4.5 מיקרומטר. (C) אוסטאופיטים מזוהים ומכמתים בתצוגה תלת-ממדית של תמונות μCT שנרכשו. נפח האוסטאופיטים נמדד על ידי בחירת ROI התוחם את קצה האוסטיאופיט. צפיפות העצם מחושבת כנפח העצם לכל נפח אוסטאופיט. התמונות המוצגות כאן צולמו ברזולוציה של 2 מיקרומטר, אך הכימות נעשה בדרך כלל ברזולוציה של 4.5 מיקרומטר. (D) ציוני הסחוס והסינוביטיס נלקחים מקטעים של 6 מיקרומטר המוכתמים בספרנין-O ובירוק מהיר. קטע קורונלי של ברך העכבר שבו כל הרבעים, המסומנים בקופסה שחורה, נראים לניקוד ומוצגת הגדלה של הצד המדיאלי. גם הסינוביטיס המקיפה את הצד המדיאלי של מפרק הברך נראית לעין, במיוחד מעל ומתחת למניסקוס העקור. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64159/64159fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64159/64159fig03.jpg"> איור 3: הערכה מייצגת של OA במודלים של DMM ו-DCS. (A) DWB נמדד עד 8 שבועות לאחר האינדוקציה בניסויים שבוצעו על ידי אותו מפעיל מומחה. העומס מבוטא כיחס בין העומס המופעל/OA לעומת העומס הקונטרלטרלי/בקרה. מבחני t זוגיים של שתי הרגליים מוצגים גם בדגמי Sham (אפור), DMM (כחול) ו- DCS (ורוד). ניתוח μCT 4 שבועות לאחר התערבות כירורגית. (B) עצם תת-כונדרלית נותחה 4 שבועות לאחר התערבות כירורגית והתבטאה כיחס בין האיפסילטרל לבין % BV/TV הקונטרלטרלי. (C) מספר האוסטאופיטים ונפח האוסטאופיטים (D) נותחו שבועיים לאחר האינדוקציה. הערכה היסטולוגית 4 שבועות לאחר אינדוקציה של (E) נזק לסחוס של הסחוס הטיביאלי המדיאלי והמפרקי הירך ו-(F) סינוביטיס קיבלו ציון בשיטות סטנדרטיות19,20. הנתונים מבוטאים כממוצע ± סטיית תקן, n ≥ 5. הנתונים הושוו על-ידי ANOVA במדדים חוזרים עם תיקון מבחן Šídák (A), מבחן t זוגי (A) או מבחן t רגיל של תלמיד (B-F). *P < 0.05, **P < 0.01, ***P < 0.001, ns = לא משמעותי. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64159/64159fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a>
קובץ משלים 1: טיפול ומצב דגירה להטמעת פרפין. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64159/64159_Supplementary%20File%201.zip" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Destabilization of the Medial Meniscus and Cartilage Scratch Murine Model of Accelerated Osteoarthritis at JoVE.com

Destabilization of the Medial Meniscus and Cartilage Scratch Murine Model of Accelerated Osteoarthritis

הפרוטוקול הנוכחי מתאר את שריטות המיקרובלייד המבוקרות על פני השטח של הסחוס המפרקי לאחר ערעור היציבות של ברך העכבר על ידי חיתוך הרצועה המיניסקוטיבית המדיאלית. מודל חייתי זה מציג צורה מואצת של דלקת מפרקים ניוונית (OA) המתאימה לחקר היווצרות אוסטאופיטים, אוסטאוסקלרוזיס וכאבים בשלב מוקדם.

ערעור היציבות של המניסקוס המדיאלי ושריטה הסחוס מודל מורין של דלקת מפרקים ניוונית מואצת

Osteoarthritis is the most prevalent musculoskeletal disease in people over 45, leading to an increasing economic and societal cost. Animal models are ...

שיטה זו מדגימה היבטים רבים של דלקת מפרקים ניוונית פוסט-טראומטית אנושית, ומאפשרת לנו דרך לחקור את המחלה ואת ההשפעה של טיפולים אפשריים בפרק זמן קצר יותר. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שבטווח הקצר, שבועיים בלבד לאחר ההתערבות, העכברים הציגו היווצרות אוסטאופיטים עקבית ומדידה, כמו גם שינויים בעומס ברגל הפגועה המעידים על כאב. אנו ממליצים להשתמש במודל זה של המחקר של היווצרות אוסטאופיטים ואוסיפיקציה אנדוכונדרלית, כמו גם כאב מונע פציעה.הזיהוי והחיתוך של הרצועה המניסקוטיביאלית המדיאלית יכול להיות מאתגר, ולכן אנו ממליצים לתרגל זאת על קדקודים עד לביטחון. מי שתעזור להדגים את ההליך תהיה לינט דאנינג, עוזרת מחקר במרכז למדעי השלד והשרירים. כדי להתחיל, לייעד חדר סטרילי לביצוע הניתוח, להבטיח כי כל המשטחים הם סטריליים.סדרו והניחו מכשירים סטריליים על וילונות סטריליים. לאחר מכן, שקול את העכבר. גזרו את פרוות העכבר המרדים מעל הברך, הצד הקדמי והצד הצדדי מאמצע השוק ועד אמצע הירך, עם קוצצי שיער קטנים.יש לחטא את העור על ידי מריחת תכשיר ניקוי אנטיבקטריאלי על עור מגולח וחשוף. עבור משכך כאבים, לנהל 0.05 מיליגרם לק"ג של buprenorphine תת עורית. הניחו את העכבר על הצד הגבי, השאירו את הברך שעליה יש לנתח כלפי מעלה, והניחו את אפו של העכבר בזרבובית המחוברת למתקן ההרדמה.כסו את העכבר בווילון סטרילי עם פתח חור מנעול קטן. מקמו את הרגל שעליה יש לנתח כאשר הברך קבועה בזווית של פחות מ-90 מעלות, כאשר הרצועה הפטלרית פונה כלפי מעלה וכף הרגל משותקת באמצעות סרט ניתוח. התאימו את המיקרוסקופ כך שיתמקד ברצועת הפטלר.צובטים את עור הברך בצד הצדדי עם מלקחיים משוננים. בצעו חתך קטן במקביל לגיד הפטאלי הדיסטלי באמצעות מספריים כירורגיים. מציגים את המספריים ומרחיבים את החתך לכ-10 מילימטרים.הזז את העור לצד המדיאלי, חושף את הרצועה הפטלרית ואת הרמה הטיביאלית הפרוקסימלית. באמצעות להב מספר 11, לבצע חתך מלמעלה למטה לאורך הצד המדיאלי של הרצועה הפטלרית. כאשר מגיעים לתחתית הרצועה הפטלרית, סובבו את הלהב ב-90 מעלות והרחיבו את החתך מהרצועה הפטלרית לכיוון הצד המדיאלי, כדי לקבל גישה לקפסולה המפרקית.צבוט את הרצועה הפטלרית עם מלקחיים קהים ומסובב את פרק כף היד כדי להזיז את הרצועה הפטלרית לצד הצדדי, מספיק כדי לחשוף את ה- IFP. בעודכם עדיין אוחזים קלות ברצועת הפטלאר, צבטו את ה-IFP בפינצטה זעירה כדי להרים אותה ולהזיז אותה מעט כלפי מעלה. אם יש דימום, הפעל לחץ עם צמר גפן.זהה את ה- MMTL של המניסקוס המדיאלי, המעגן את קרן הגולגולת של המניסקוס המדיאלי לרמה הטיביאלית הקדמית. יש לנתק בזהירות את ה-MMTL באמצעות מספריים קפיציים קטנים בעלי להב דו-מילימטרי, ולהשאיר את המניסקוס המדיאלי ורצועות אחרות ללא פגע. בעזרת סכין מיקרו-כירורגית של שלושה מילימטרים, מסמנים שלוש כניסות במרווחים שווים על הסחוס המפרקי הטיביאלי בכיוון מהחלק האחורי לחלק הקדמי.סגרו את העור עם שניים או שלושה קליפסים קטנים של שבעה מילימטרים לסגירת פצעים. הסר מהדקי מתכת בין חמישה לשבעה ימים לאחר הניתוח. לאחר מכן, הערך כאב או הליכה בכל שלב במהלך המחקר.כימות רקמה שעברה סידן על ידי ניתוח סריקות Micro-CT של מפרקי הברך. כדי לנתח טרשת עצם תת-כונדרלית, בחר VOI במרכז העומס הטיביאלי המדיאלי. לאחר מכן, קבע את צפיפות העצם התת-כונדרלית ואת ארכיטקטורת המיקרו על ידי בחירת אזור עניין התוחם את המבנה הטרבקולרי עם האפיפיזה הטיביאלית, הלוח התת-כונדרלי, או העצם התת-כונדרלית הכוללת בתצוגה הקורונלית הדו-ממדית של הערימה, באמצעות תוכנת מנתח CT.זהה אוסטאופיטים בערימות התמונות התלת-ממדיות המשוחזרות באמצעות תוכנת CTVol. הערך את נזקי הסחוס ואת הסינוביטיס על פי ציון נזקי הסחוס OARSI 19 וסינוביטיס ציון 20, במקטעים מוטמעים בפרפין, חמישה מיקרומטרים. לא היו שינויים משמעותיים בעומס הרגליים האחוריות בדגם DMM תוך שמונה שבועות לאחר האינדוקציה, בעוד שעכברי DCS העדיפו את הרגל הקונטרלטרלית, או הבקרה, באופן משמעותי, שבועיים לאחר ההתערבות.היחס בין הרגל הקונטרלטרלית לרגל האיפסילטרלית הצביע על כך שלשני הדגמים הייתה צפיפות עצם מוגברת באזור העמסת העצם התת-כונדרלית של הגפה הפגועה, ארבעה שבועות לאחר האינדוקציה. הופעת האוסטאופיטים בלטה יותר בעכברי DCS, עם עלייה משמעותית במספר ובנפח בהשוואה למודל DMM שבועיים לאחר ההתערבות. DCS מציג נזק סחוס מוגבר בתאי הטיביאליות והירך המדיאליים, וסינוביטיס ארבעה שבועות לאחר האינדוקציה.הנזק צריך להיות מוגבל למבנים שאנו רוצים להשפיע עליהם במכוון, ולכן יש צורך בזהירות מיוחדת כדי לשמור על כל המבנים האחרים שלמים ולמזער את החשיפה של הסחוס. השינוי כך שיכלול שריטות סחוס מכוונות מאפשר לנו לחקור דלקת מפרקים ניוונית תוך התמקדות באוסטיאופיטוגנזה, דלקת מפרקים ניוונית מוקדמת או כאבי פציעה, והשפעת פגיעה בסחוס על המפרק כולו.

Research

JoVE Journal

Medicine

The Monoiodoacetate Model of Osteoarthritis Pain in the Mouse

מודל Monoiodoacetate של אוסטיאוארתריטיס כאב העכבר

A major symptom of patients with osteoarthritis (OA) is pain that&#160;is triggered by peripheral as well as central changes within the pain pathways. The ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

אינדוקציה של טרשת עורקים מואצת בעכברים: מודל "פגיעת חוט"

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

The Rabbit Model of Accelerated Atherosclerosis: A Methodological Perspective of the Iliac Artery Balloon Injury

הדגם הארנב של טרשת עורקים מואצת: מבט מתודולוגי הפגיעה בעורק Iliac בלון

Acute coronary syndrome resulting from coronary occlusion following atherosclerotic plaque development and rupture is the leading cause of death in the ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Contractility איזומטרי מדידה של עורק מצע המעי העליון העכבר באמצעות חוט Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

The Lower Body Positive Pressure Treadmill for Knee Osteoarthritis Rehabilitation

הגוף התחתון חיובי לחץ הליכון עבור שיקום אוסטיאוארתריטיס ברך

Here, based on a clinician&rsquo;s point-of-view, we propose a two-model lower body positive pressure (LBPP) protocol (walking and squatting models) in ...

Osteoarthritis Pain Model Induced by Intra-Articular Injection of Mono-Iodoacetate in Rats

מודל כאב אוסטאוארתריטיס המושרה על ידי הזרקה תוך-מפרקית של מונו-יודואצטט בחולדות

The current animal models of osteoarthritis (OA) can be divided into spontaneous models and induced models, both of which aim to simulate the ...

Standardized Histomorphometric Evaluation of Osteoarthritis in a Surgical Mouse Model

מתוקננת הערכה היסטראורמטרית של אוסטיאוארתריטיס במודל עכבר כירורגי

One of the most prevalent joint disorders in the United States, osteoarthritis (OA) is characterized by progressive degeneration of articular cartilage, ...

Flow Cytometry Analysis of Immune Cell Subsets within the Murine Spleen, Bone Marrow, Lymph Nodes and Synovial Tissue in an Osteoarthritis Model

ניתוח ציתום זרימה של תת-סטים של תאים חיסוניים בתוך הטחול מורין, מח העצם, בלוטות הלימפה ורקמות Synovial במודל דלקת מפרקים ניוונית

Osteoarthritis (OA) is one of the most prevalent musculoskeletal diseases, affecting patients suffering from pain and physical limitations. Recent ...

Development and Evaluation of a Rat Model of Full-Thickness Cartilage Defects

פיתוח והערכה של מודל חולדה של פגמים בסחוס בעובי מלא

Cartilage defects of the knee joint caused by trauma are a common sports joint injury in the clinic, and these defects result in joint pain, impaired ...

Standardized Tuina Manipulation for Knee Osteoarthritis in Rats

Tuina Manipulation to Reduce Inflammation and Cartilage Loss in Knee Osteoarthritis Rats

Understanding the Mechanism of Tuina Manipulation in Rats (Video) | JoVE

מניפולציה Tuina כדי להפחית דלקת ואובדן סחוס בחולדות osteoarthritis הברך

Clinical trials suggest that Tuina manipulation is effective in treating knee osteoarthritis (KOA), while further studies are required to discover its ...