यह प्रोटोकॉल गर्म पानी के शोधन की कीटाणुशोधन प्रभावकारिता का परीक्षण करता है। यह आकलन करने में मदद कर सकता है कि क्या वॉशर और ड्रायर वायरस से दूषित कपड़ों की सफाई के लिए उपयुक्त हैं। इस शोधन तकनीक का मुख्य लाभ यह है कि इसे गुणवत्ता आश्वासन प्रक्रिया के माध्यम से प्रक्रियाओं का उपयोग करके छोटे पैमाने पर अन्य प्रयोगशालाओं में दोहराया जा सकता है।
प्रक्रिया का प्रदर्शन एक माइक्रोबायोलॉजिस्ट अहमद अब्देल-हैडी, मारिएला मोंगे और जोनाथन सॉयर, अनुसंधान वैज्ञानिक और हमारी प्रयोगशाला के अन्य लोग करेंगे। शुरू करने के लिए, पाठ में वर्णित विआयनीकृत पानी में सामग्री को तौलकर और मिलाकर संशोधित ट्राइप्टिक सोया आगर तैयार करें। फिर, नरम आगर में एक मिलीलीटर, केंद्रित फी 6 एलिकोट और लॉग चरण स्यूडोमोनास सिरिंगे संस्कृति के 100 माइक्रोलीटर जोड़ें।
इसके बाद, 100 मिलीमीटर के व्यास वाले एक ठोस संशोधित ट्राइप्टिक सोया आगर प्लेट की सतह पर नरम आगर डालें। प्लेटों को धीरे-धीरे घुमाकर और ठोस आगर की सतह पर समान रूप से नरम आगर वितरित करके बुलबुले या फैलाव को रोकें। कमरे के तापमान पर रात भर इनक्यूबेशन के बाद, धीरे से एक बाँझ सेल स्प्रेडर के साथ तीन प्लेटों की सामग्री को एक बाँझ 50 मिलीलीटर क्रॉनिकल ट्यूब में खुरचें जिसमें 15 मिलीलीटर एसएम बफर हो।
एगर को तोड़ने के लिए एक से दो मिनट के लिए अधिकतम सेटिंग पर ट्यूबों को भंवर करें और फिर उन्हें 7,000 गुना जी पर 15 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूज करें। फ़िल्टर किए गए सुपरनैटेंट को क्रायोवियल्स में एक मिलीलीटर एलिकोट के रूप में 80 डिग्री सेल्सियस पर आगे के उपयोग तक स्टोर करें। विभिन्न स्थानों पर बिना धोए गए व्यक्तिगत सुरक्षा उपकरणों या पीपीई वस्तुओं की लंबाई और चौड़ाई को मापने और रिकॉर्ड करके पूर्व-परीक्षण दृश्य मूल्यांकन करें।
टीकाकरण के लिए, 1X PBS के 10 मिलीलीटर की कुल मात्रा में एक ग्राम गोमांस निकालने को भंग करके 10% गोमांस निकालने का समाधान तैयार करें। 0.2 माइक्रोन सिरिंज फ़िल्टर का उपयोग करके समाधान की पूरी मात्रा को फ़िल्टर करें। इसके बाद जैव सुरक्षा कैबिनेट के अंदर, पीपीई आइटम पर कई बूंदों के रूप में समाधान की 10 माइक्रोलीटर मात्रा को पाइप करके और पिपेट की नोक का उपयोग करके प्रति नमूना लगभग 10 से सातवीं पट्टिका बनाने वाली इकाइयों के साथ परीक्षण और सकारात्मक नियंत्रण कूपन का टीकाकरण करें।
एक गर्म प्लेट का उपयोग करके 50 डिग्री सेल्सियस तक शोधन समाधान को गर्म करें और बार हिलाएं। फिर शोधन समाधान के पीएच और तापमान को मापें और रिकॉर्ड करें और बाँझपन जांच के लिए 10 मिलीलीटर समाधान एकत्र करें। फिर, एक निष्फल वॉशर में 3.25 लीटर शोधन समाधान डालें।
वॉशर में पीपीई आइटम, एक टीका चेहरा ढंकना और चार गैर-दूषित फिल्म मास्क बिना कूपन के रखें। 18 मिनट तक पीपीई आइटम धोने के बाद, वॉशर को छान लें और फोम को हटाने के लिए हर बार पांच लीटर कमरे के तापमान नल के पानी से तीन बार कुल्ला करें। वॉशर में 3.25 लीटर कमरे के तापमान निष्फल नल का पानी जोड़ें और नौ मिनट लंबा कुल्ला चक्र करें।
इसके बाद, पीपीई आइटम को पांच मिनट के लिए स्पिन करने के लिए वॉशर स्पिन साइड में ले जाएं। ड्रायर में 93 डिग्री सेल्सियस की उच्च गर्मी सेटिंग पर पीपीई वस्तुओं को 80 मिनट तक सुखाएं। फिर पीपीई आइटम को ड्रायर से बाँझ कार्यक्षेत्र में ले जाएं।
अयोग्य रूप से टीका लगाए गए वस्तुओं से कूपन हटा दें और उन्हें शंक्वाकार ट्यूबों में रखें। इसके बाद, उपकरण की अधिकतम सेटिंग पर दो मिनट के लिए भंवर करके शोरबा को बेअसर करने वाले शोरबा के 10 मिलीलीटर में कूपन निकालें। पारंपरिक नरम शीर्ष एगर ओवरले विधि का उपयोग करके अर्क को प्लेट करने के लिए, नरम एगर ट्यूब में परीक्षण नमूना एलिकोट जोड़ें जिसमें छह मिलीलीटर नरम एगर और लॉग चरण पी सिरिंगा के 100 माइक्रोलीटर शामिल हैं।
इसके बाद, नरम आगर को एक ठोस संशोधित ट्राइप्टिक सोया एगर प्लेट की सतह पर डालें और प्लेट को घुमाकर ठोस आगर की सतह पर नरम आगर को समान रूप से वितरित करें। कमरे के तापमान पर रात भर इनक्यूबेशन के बाद, मैन्युअल रूप से प्रत्येक प्लेट पर प्लेटफ़ॉर्मिंग इकाइयों की गणना करें। पूर्ण आकार के पीपीई या कपड़ों से वायरल कीटाणुशोधन की शोधन प्रभावशीलता का आकलन करने के लिए व्यवस्थित प्रयोगशाला परीक्षण से पता चला है कि प्लेटफॉर्मिंग यूनिट या पीएफयू प्लेट गिनती और निकाले गए नमूना मात्रा ने प्रति परीक्षण कूपन प्लेटफॉर्मिंग इकाइयों की संख्या की गणना को सक्षम किया।
प्रतिनिधि वायरल रिकवरी के परिणाम एक चेहरे को ढंकने वाले परीक्षण के लिए प्राप्त किए गए थे। लॉन्ड्रिंग परीक्षणों ने कपड़ों की वस्तुओं के खिंचाव या संकोचन और प्रोटोकॉल के गुणवत्ता नियंत्रित डेटा जैसे भौतिक गुणों के बारे में जानकारी प्रदान की। फी 6 से चेहरे को ढंकने, डेनिम और स्क्रब पीपीई सामग्री को कीटाणुरहित करने में गर्म पानी के शोधन की प्रभावकारिता इस ग्राफ में प्रदर्शित की गई थी जहां सितारे पूर्ण कीटाणुशोधन को दर्शाते हैं।
क्रॉस-संदूषण को रोकने के लिए इस प्रक्रिया में सड़न रोकनेवाली तकनीकों का उपयोग करना महत्वपूर्ण है। इसके अलावा, कूपन के लिए इनोकुलम सुखाने का समय प्रत्येक सामग्री के लिए अद्वितीय है और परीक्षण से पहले स्थापित किया गया है। अन्य मानार्थ तरीकों में सामग्री क्षरण या आगे के आकार के आकलन का पता लगाने के लिए माइक्रोस्कोपी और तरल प्रवेश परीक्षण शामिल हैं, यह सुनिश्चित करने के लिए कि बाधा संरक्षण अभी भी पहनने वाले के लिए फिट बैठता है।
इस तकनीक ने पूर्ण पैमाने पर कपड़ों और पीपीई वस्तुओं के लिए शोधन प्रभावकारिता और सामग्री परीक्षण को बढ़ाने का आधार प्रदान किया। यह एक अन्य संक्रामक घटना या महामारी के दौरान प्रभावी शोधन प्रक्रियाओं को स्थापित करने में भी सहायता कर सकता है।
