Name: a calcium phosphate-induced mouse abdominal aortic aneurysm model
Uploaded: 2022-11-18T13:50:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Calcium Phosphate-Induced Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model at JoVE.com

تم دعم هذا البحث بتمويل من المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (NSFC ، 81730010 ، 91839302 ، 81921001 ، 31930056 ، و 91529203) والبرنامج الوطني للبحث والتطوير الرئيسي في الصين (2019YFA 0801600).

تم إجراء الدراسات على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية للجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوانات في مركز العلوم الصحية بجامعة بكين وتمت الموافقة عليها من قبل لجنة أخلاقيات الطب الحيوي بجامعة بكين (LA2015142). تم تخدير جميع الفئران للجراحة باستخدام إيزوفلوران (1.5٪ -2٪) ، وتم مراقبة التخدير بعنا?...

<ol>
	<li>Kent, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abdominal+aortic+aneurysms.">Abdominal aortic aneurysms.</a> The New England Journal of Medicine. 371, 2101-2108 (2014).</li><li>Patelis, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+in+the+research+of+abdominal+aortic+aneurysms+development.">Animal models in the research of abdominal aortic aneurysms development.</a> Physiological Research. 66 (6), 899-915 (2017).</li><li>Gertz, S. D., Kurgan, A., Eisenberg, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aneurysm+of+the+rabbit+common+carotid+artery+induced+by+periarterial+application+of+calcium-chloride+in+vivo.">Aneurysm of the rabbit common carotid artery induced by periarterial application of calcium-chloride in vivo.</a> Journal of Clinical Investigation. 81 (3), 649-656 (1988).</li><li>Yamanouchi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accelerated+aneurysmal+dilation+associated+with+apoptosis+and+inflammation+in+a+newly+developed+calcium+phosphate+rodent+abdominal+aortic+aneurysm+model.">Accelerated aneurysmal dilation associated with apoptosis and inflammation in a newly developed calcium phosphate rodent abdominal aortic aneurysm model.</a> Journal of Vascular Surgery. 56 (2), 455-461 (2012).</li><li>Wang, Y. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+apolipoprotein+E,+age+and+aortic+site+on+calcium+phosphate+induced+abdominal+aortic+aneurysm+in+mice.">Influence of apolipoprotein E, age and aortic site on calcium phosphate induced abdominal aortic aneurysm in mice.</a> Atherosclerosis. 235 (1), 204-212 (2014).</li><li>Zhao, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unspliced+xbp1+confers+VSMC+homeostasis+and+prevents+aortic+aneurysm+formation+via+foxo4+interaction.">Unspliced xbp1 confers VSMC homeostasis and prevents aortic aneurysm formation via foxo4 interaction.</a> Circulation Research. 121 (12), 1331-1345 (2017).</li><li>Jia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+macrophage+TFEB-14-3-3+epsilon+interface+by+naringenin+inhibits+abdominal+aortic+aneurysm.">Targeting macrophage TFEB-14-3-3 epsilon interface by naringenin inhibits abdominal aortic aneurysm.</a> Cell Discovery. 8 (1), 21 (2022).</li><li>Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole+animal+perfusion+fixation+for+rodents.">Whole animal perfusion fixation for rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (65), e3564 (2012).</li><li>Yu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CYLD+deubiquitinates+nicotinamide+adenine+dinucleotide+phosphate+oxidase+4+contributing+to+adventitial+remodeling.">CYLD deubiquitinates nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4 contributing to adventitial remodeling.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (8), 1698-1709 (2017).</li><li>Altobelli, E., Rapacchietta, L., Profeta, V. F., Fagnano, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risk+factors+for+abdominal+aortic+aneurysm+in+population-based+studies:+A+systematic+review+and+meta-analysis.">Risk factors for abdominal aortic aneurysm in population-based studies: A systematic review and meta-analysis.</a> International Journal of Environmental Research and Public Health. 15 (12), 2805 (2018).</li><li>Theivacumar, N. S., Stephenson, M. A., Mistry, H., Valenti, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diabetes+mellitus+and+aortic+aneurysm+rupture:+A+favorable+association.">Diabetes mellitus and aortic aneurysm rupture: A favorable association.</a> Vascular and Endovascular Surgery. 48 (1), 45-50 (2014).</li><li>Tanaka, T., Takei, Y., Yamanouchi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperglycemia+suppresses+calcium+phosphate-induced+aneurysm+formation+through+inhibition+of+macrophage+activation.">Hyperglycemia suppresses calcium phosphate-induced aneurysm formation through inhibition of macrophage activation.</a> Journal of the American Heart Association. 5 (3), 003062 (2016).</li><li>Lu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subcutaneous+angiotensin+II+infusion+using+osmotic+pumps+induces+aortic+aneurysms+in+mice.">Subcutaneous angiotensin II infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (103), e53191 (2015).</li><li>Urry, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutral+sites+for+calcium+ion+binding+to+elastin+and+collagen:+A+charge+neutralization+theory+for+calcification+and+its+relationship+to+atherosclerosis.">Neutral sites for calcium ion binding to elastin and collagen: A charge neutralization theory for calcification and its relationship to atherosclerosis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 68 (4), 810-814 (1971).</li><li>Li, Z. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Runx2+(runt-related+transcription+factor+2)-mediated+microcalcification+is+a+novel+pathological+characteristic+and+potential+mediator+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Runx2 (runt-related transcription factor 2)-mediated microcalcification is a novel pathological characteristic and potential mediator of abdominal aortic aneurysm.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 40 (5), 1352-1369 (2020).</li><li>Kelly, M. J., Igari, K., Yamanouchi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoclast-like+cells+in+aneurysmal+disease+exhibit+an+enhanced+proteolytic+phenotype.">Osteoclast-like cells in aneurysmal disease exhibit an enhanced proteolytic phenotype.</a> International Journal of Molecular Sciences. 20 (19), 4689 (2019).</li></ol>

التطبيق حول الأبهر ل CaPO4 هو نهج قوي للحث على AAA في الفئران. استخدمت العديد من الدراسات نموذج CaPO4 وأفادت باستمرار أن هذه طريقة سريعة وقابلة للتكرار لدراسة AAA في الفئران 7,9. يعتبر هذا النموذج ملخصا لجزء من ميزات تمدد الأوعية الدموية الأبهري البشري وي...

تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني (AAA) هو مرض قلبي وعائي قاتل يتميز بالتمدد الدائم للشريان الأورطي البطني ، مع ارتفاع معدلات الوفيات بمجرد حدوث التمزق. يرتبط AAA بالشيخوخة والتدخين وجنس الذكور وارتفاع ضغط الدم وفرط شحميات الدم1. ثبت أن العديد من العمليات المرضية تساهم في تكوين AAA ، بما في ذلك التحلل البروتيني لألياف المصفوفة خارج الخلية ، وتسلل الخلايا المناعية ، وفقدان خلايا العضلات الملساء الوعائية. حاليا ، لا تزال الآليات المرضية ل AAA بعيدة المنال ، ولا توجد أدوية مثبتة لعلاج AAA1. البحث في AAA البشري محدود بسبب وجود عدد قليل من عينات الأبهر البشري. وهكذا ، تم إنشاء العديد من نماذج AAA الحيوانية التي يسببها التعديل الكيميائي واعتمادها على نطاق واسع ، بما في ذلك ضخ الأنجيوتنسين II (AngII) تحت الجلد ، وحضانة الإيلاستاز حول الأوعية الدموية أو داخل اللمعة ، وتطبيق فوسفات الكالسيوم حول الأوعية الدموية2. نموذج الفأر الشائع الاستخدام هو تطبيق فوسفات الكالسيوم (CaPO4) على ظهور الشريان الأورطي البطني تحت الكلوي ، وهو فعال من حيث التكلفة ولا يتطلب تعديلا وراثيا.
تم الإبلاغ عن التطبيق المباشر حول الأبهر ل CaCl2 على الشريان السباتي للأرانب للحث على تغيير تمدد الأوعية الدموية في البداية بواسطة Gertz et al.3 وتم تطبيقه لاحقا على الأبهر البطني للفئران. تم تطوير النموذج بواسطة Yamanouchi et al. لتسريع تمدد الأبهر باستخدام بلورات CaPO 4 في الفئران4. يلخص تسلل CaPO4 إلى أورتاس الفئران العديد من السمات المرضية التي لوحظت في AAAs البشرية ، بما في ذلك تسلل البلاعم العميق ، وتدهور المصفوفة خارج الخلية ، وترسب الكالسيوم. عوامل الخطر من AAA البشري ، مثل فرط شحميات الدم ، تزيد أيضا من AAA الناجم عن CaPO4 في الفئران5. على عكس AAA الناجم عن التروية AngII في الفئران ApoE / - أو LDLR-/- ، يحدث AAA الناجم عن CaPO4 في منطقة الأبهر تحت الكلوي ، والتي تحاكي AAA البشري. حاليا ، تم تطبيق هذه الطريقة على نطاق واسع لتقييم القابلية لتطوير AAA في الفئران المعدلة وراثيا وتقييم الآثار المضادة ل AAA للأدوية 6,7.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>MECKLIN</td>
			<td>C805225</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Biomed</td>
			<td>SH5001-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>HARVEYBIO</td>
			<td>MB5051</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal ventilator</td>
			<td>RWD</td>
			<td>H1550501-012</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a calcium phosphate-induced mouse abdominal aortic aneurysm model

تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني (AAA) هو مرض قلبي وعائي يهدد الحياة ويحدث في جميع أنحاء العالم ويتميز بتمدد لا رجعة فيه للشريان الأورطي البطني. حاليا ، يتم استخدام العديد من نماذج AAA المستحثة كيميائيا ، كل منها يحاكي جانبا مختلفا من التسبب في AAA. نموذج AAA الناجم عن فوسفات الكالسيوم هو نموذج سريع وفعال من حيث التكلفة مقارنة بنماذج AAA التي يسببها الأنجيوتنسين II والإيلاستاز. يؤدي تطبيق بلورات CaPO4 على الشريان الأورطي للفأر إلى تدهور الألياف المرنة ، وفقدان خلايا العضلات الملساء ، والالتهاب ، وترسب الكالسيوم المرتبط بتمدد الأبهر. تقدم هذه المقالة بروتوكولا قياسيا لنموذج AAA المستحث CaPO4. يتضمن البروتوكول تحضير المواد ، والتطبيق الجراحي ل CaPO4 على ظهور الشريان الأورطي البطني تحت الكلوي ، وحصاد الأبهر لتصور تمدد الأوعية الدموية الأبهري ، والتحليلات النسيجية في الفئران.

بعد 14 يوما من تطبيق CaPO4 ، تم القتل الرحيم للفئران الذكور C57BL / 6J ، وتم حصاد وتنظيف الأورتا الخاصة بهم. تم تصوير مورفولوجيا الأورتا لتصور تشكيل AAA. كما هو موضح في الشكل 1A-B ، أدى تطبيق CaPO4 إلى تمدد الشريان الأورطي البطني تحت الكلوي. من الناحية النسيج...

Watch this Scientific Journal Video about A Calcium Phosphate-Induced Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model at JoVE.com

A Calcium Phosphate-Induced Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model

يصف هذا البروتوكول نموذج فأر تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني الناجم عن فوسفات الكالسيوم (AAA) لدراسة السمات المرضية والآليات الجزيئية ل AAAs.

نموذج تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني للفأر الناجم عن فوسفات الكالسيوم

An abdominal aortic aneurysm (AAA) is a life-threatening cardiovascular disease that occurs worldwide and is characterized by irreversible dilation of the ...

يصف هذا البروتوكول نموذج تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني الناجم عن فوسفات الكالسيوم الثلاثي لدراسة السمات المرضية في الآليات الجزيئية لتمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني. يعد نموذج تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني الناجم عن فوسفات الكالسيوم نموذجا سريعا وفعالا من حيث التكلفة مقارنة بأنبوب الأنجيوتنسين ونماذج تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني الناجم عن الإيلاستاز. سيوضح الإجراء Zeyu Cai ، ما بعد الطبيب هنا ، زميل من مختبرنا.للبدء في قطع شرائح بعرض 0.3 سم من القفازات المطاطية الخالية من المسحوق والشاش. ثم قم بشراء فئران C57BL6J Mayo التي يبلغ عمرها ثمانية إلى عشرة أسابيع ، وقم بإيواء الحيوانات في بيئة مكيفة الهواء مع دورة مظلمة خفيفة لمدة 12 ساعة وحرية الوصول إلى الطعام والماء. بعد ذلك ، قم بتعقيم الشاش ومسحات القطن والمقص والملقط قبل الجراحة ، واحصل على Betadine و 70٪ إيثانول وغسول اليدين المطهر.حلق شعر البطن من الفأر المخدر باستخدام ماكينة قص كهربائية أو كريم إزالة الشعر. ثم مسحة ومسح المنطقة المحلوقة مع Betadine ، تليها 70 ٪ من الإيثانول عدة مرات في حركة دائرية. ثم قم بعمل شق حوالي 1.5 سم في أسفل البطن على طول خط الوسط من البطن باستخدام المقص.باستخدام قطعة قطن معقمة مبللة بمحلول ملحي طبيعي ، قم بإزالة الأمعاء بعناية حتى يصبح الشريان الأورطي تحت الكلوي مرئيا. بعد ذلك ، قم بتشريح النسيج الضام والدهون من الشريان الأورطي تحت الكلوي لقسم يبلغ طوله حوالي 0.5 سم مع تجنب أي تمزق في الأوعية الصغيرة إلى الجانب الظهري. ثم قم بتعبئة قطعة من شريط القفازات المطاطية المبللة بالمحلول الملحي تحت الشريان الأورطي البطني والوريد الرئيسي البطني أثناء مسح السائل الزائد باستخدام قطعة قطن.بعد ذلك ، قم بتعبئة قطعة من الشاش المنقوع ب 0.5 كلوريد الكالسيوم المولي على أدفنتيتيا الأوعية الدموية البطنية تحت الكلوية لمدة 10 دقائق. قم بإزالة الشاش وقم بتعبئة قطعة أخرى من الشاش المنقوع بمحلول PBS لمدة خمس دقائق لتوليد بلورات فوسفات الكالسيوم أورثو في C2 في ظهور الشريان الأورطي. ثم قم بإزالة شريط القفازات المطاطي والشاش بعناية.بعد إعادة ضبط القناة المعوية للماوس ، قم بخياطة شق البطن والجلد بخياطة خمسة صفر. بعد ذلك ، ضع الماوس على وسادة التدفئة حتى يستعيد الماوس وعيه. ضع الفأر لمدة 14 يوما أخرى وراقب الماوس عن كثب بعد الجراحة وراقبه كل يوم على الأقل بعد ذلك.بعد 14 يوما من الجراحة ، قم بقطع تجاويف الفأر الصدري والبطني الرحيم وافتح الأذين الأيمن. غزير الفئران مع العازلة PBS من خلال البطين الأيسر للقلب لإزالة الدم في الشريان الأورطي ومن ثم peruse مع 4٪ بارافورمالدهيد كما هو موضح في المخطوطة. قم بإزالة الأنسجة العرضية والدهون بعناية تحت مجهر ستيريو.ثم حصاد الشريان الأورطي ووضعه في أنبوب يحتوي على خمسة ملليلتر من 4 ٪ بارافورمالدهيد لمدة 48 ساعة. ثم قم بتثبيت الشريان الأورطي على صفيحة شمعية سوداء مع إبر الحشرات وانتقل إلى الحصول على صور الأبهر. بعد 14 يوما من تطبيق أورثوفوسفات الكالسيوم ، تم تصوير مورفولوجيا الأبهر لتصور تكوين تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني.لوحظ أن أورثوفوسفات الكالسيوم أدى إلى تمدد الشريان الأورطي البطني تحت الكلوي وأدى إلى تدهور كبير في الألياف المرنة كما يتضح من فواصل الإيلاستين. استخدام مسحة قطنية معقمة مبللة بمحلول ملحي عادي لإزالة الأمعاء حتى يصبح الشريان الأورطي تحت المرئي ثم استخراج النسيج الضام والدهون من الشريان الأورطي تحت الكلوي. بشكل عام ، يعد نموذج تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني الناجم عن فوسفورات الكالسيوم نهجا سريعا وفعالا من حيث التكلفة لاستكشاف الآليات الجزيئية والاستراتيجيات العلاجية لتمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني ويمكن تطبيقه بالتوازي مع النماذج الأخرى لتقليد ميزات تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني البشري بشكل كامل.

Research

JoVE Journal

Biology

Creation of Murine Experimental Abdominal Aortic Aneurysms with Elastase 

خلق الفئران التجريبية تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني مع إيلاستاز

Transient intraluminal infusion of porcine pancreatic elastase into the infrarenal segment of the abdominal aorta is the most widely used animal model of ...

Aortic Ring Assay

الأبهر خاتم الفحص

Angiogenesis, the sprouting of blood vessels from preexisting vasculature is associated with both natural and pathological processes. Various angiogenesis ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

في الجسم الحي التصوير والعلاجات العلاجية في الفأر نموذج مثلي من سرطان المبيض

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

العزلة والثقافة الابتدائية من خلايا الفأر الأورطي غشائي

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Trans-inner Cell Mass Injection of Embryonic Stem Cells Leads to Higher Chimerism Rates

حقن الخلية الداخلية عبر كتلة من الخلايا الجذعية الجنينية يؤدي إلى ارتفاع في أسعار تشيميريسم

In an effort to increase efficiency in the creation of genetically modified mice via ES Cell methodologies, we present an adaptation to the current ...

A Mouse Model of Intestinal Partial Obstruction

نموذج الفأر من انسداد الأمعاء الجزئي

Intestinal obstructions, that impede or block peristaltic movement, can be caused by abdominal adhesions and most gastrointestinal (GI) diseases including ...

Simultaneous Measurements of Intracellular Calcium and Membrane Potential in Freshly Isolated and Intact Mouse Cerebral Endothelium

قياسات متزامنة من الكالسيوم داخل الخلايا وإمكانات غشاء في البطانة الدماغي الماوس معزولة طازجة وسليمة

Cerebral arteries and their respective microcirculation deliver oxygen and nutrients to the brain via blood flow regulation. Endothelial cells line the ...

Imaging Calcium Dynamics in Subpopulations of Mouse Pancreatic Islet Cells

تصوير ديناميات الكالسيوم في السكان الفرعيين من خلايا الفئران جزيرة البنكرياس

Pancreatic islet hormones regulate blood glucose homeostasis. Changes in blood glucose induce oscillations of cytosolic calcium in pancreatic islet cells ...

Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A (EYFP-CENP-A)

Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A EYFP-CENP-A

تحليل قياس الطيف الكتلي لتحديد Ubiquitylation من EYFP الموسومة CENP-A (EYFP-CENP-A)

Studying the structure and the dynamics of kinetochores and centromeres is important in understanding chromosomal instability (CIN) and cancer ...

A Mouse Model of Lumbar Spine Instability

نموذج الماوس من عدم استقرار العمود الفقري القطني

Intervertebral disc degeneration (IDD) is a common pathological change leading to low back pain. Appropriate animal models are desired for understanding ...