Name: a calcium phosphate-induced mouse abdominal aortic aneurysm model
Uploaded: 2022-11-18T13:50:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Calcium Phosphate-Induced Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model at JoVE.com

Это исследование было поддержано финансированием Национального фонда естественных наук Китая (NSFC, 81730010, 91839302, 81921001, 31930056 и 91529203) и Национальной ключевой программы исследований и разработок Китая (2019YFA 0801600).

Исследования на животных проводились в соответствии с руководящими принципами Институционального комитета по уходу за животными и их использованию Научного центра здравоохранения Пекинского университета и были одобрены Комитетом по биомедицинской этике Пекинского университета (LA2...

<ol>
	<li>Kent, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abdominal+aortic+aneurysms.">Abdominal aortic aneurysms.</a> The New England Journal of Medicine. 371, 2101-2108 (2014).</li><li>Patelis, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+in+the+research+of+abdominal+aortic+aneurysms+development.">Animal models in the research of abdominal aortic aneurysms development.</a> Physiological Research. 66 (6), 899-915 (2017).</li><li>Gertz, S. D., Kurgan, A., Eisenberg, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aneurysm+of+the+rabbit+common+carotid+artery+induced+by+periarterial+application+of+calcium-chloride+in+vivo.">Aneurysm of the rabbit common carotid artery induced by periarterial application of calcium-chloride in vivo.</a> Journal of Clinical Investigation. 81 (3), 649-656 (1988).</li><li>Yamanouchi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accelerated+aneurysmal+dilation+associated+with+apoptosis+and+inflammation+in+a+newly+developed+calcium+phosphate+rodent+abdominal+aortic+aneurysm+model.">Accelerated aneurysmal dilation associated with apoptosis and inflammation in a newly developed calcium phosphate rodent abdominal aortic aneurysm model.</a> Journal of Vascular Surgery. 56 (2), 455-461 (2012).</li><li>Wang, Y. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+apolipoprotein+E,+age+and+aortic+site+on+calcium+phosphate+induced+abdominal+aortic+aneurysm+in+mice.">Influence of apolipoprotein E, age and aortic site on calcium phosphate induced abdominal aortic aneurysm in mice.</a> Atherosclerosis. 235 (1), 204-212 (2014).</li><li>Zhao, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unspliced+xbp1+confers+VSMC+homeostasis+and+prevents+aortic+aneurysm+formation+via+foxo4+interaction.">Unspliced xbp1 confers VSMC homeostasis and prevents aortic aneurysm formation via foxo4 interaction.</a> Circulation Research. 121 (12), 1331-1345 (2017).</li><li>Jia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+macrophage+TFEB-14-3-3+epsilon+interface+by+naringenin+inhibits+abdominal+aortic+aneurysm.">Targeting macrophage TFEB-14-3-3 epsilon interface by naringenin inhibits abdominal aortic aneurysm.</a> Cell Discovery. 8 (1), 21 (2022).</li><li>Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole+animal+perfusion+fixation+for+rodents.">Whole animal perfusion fixation for rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (65), e3564 (2012).</li><li>Yu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CYLD+deubiquitinates+nicotinamide+adenine+dinucleotide+phosphate+oxidase+4+contributing+to+adventitial+remodeling.">CYLD deubiquitinates nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4 contributing to adventitial remodeling.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (8), 1698-1709 (2017).</li><li>Altobelli, E., Rapacchietta, L., Profeta, V. F., Fagnano, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risk+factors+for+abdominal+aortic+aneurysm+in+population-based+studies:+A+systematic+review+and+meta-analysis.">Risk factors for abdominal aortic aneurysm in population-based studies: A systematic review and meta-analysis.</a> International Journal of Environmental Research and Public Health. 15 (12), 2805 (2018).</li><li>Theivacumar, N. S., Stephenson, M. A., Mistry, H., Valenti, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diabetes+mellitus+and+aortic+aneurysm+rupture:+A+favorable+association.">Diabetes mellitus and aortic aneurysm rupture: A favorable association.</a> Vascular and Endovascular Surgery. 48 (1), 45-50 (2014).</li><li>Tanaka, T., Takei, Y., Yamanouchi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperglycemia+suppresses+calcium+phosphate-induced+aneurysm+formation+through+inhibition+of+macrophage+activation.">Hyperglycemia suppresses calcium phosphate-induced aneurysm formation through inhibition of macrophage activation.</a> Journal of the American Heart Association. 5 (3), 003062 (2016).</li><li>Lu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subcutaneous+angiotensin+II+infusion+using+osmotic+pumps+induces+aortic+aneurysms+in+mice.">Subcutaneous angiotensin II infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (103), e53191 (2015).</li><li>Urry, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutral+sites+for+calcium+ion+binding+to+elastin+and+collagen:+A+charge+neutralization+theory+for+calcification+and+its+relationship+to+atherosclerosis.">Neutral sites for calcium ion binding to elastin and collagen: A charge neutralization theory for calcification and its relationship to atherosclerosis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 68 (4), 810-814 (1971).</li><li>Li, Z. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Runx2+(runt-related+transcription+factor+2)-mediated+microcalcification+is+a+novel+pathological+characteristic+and+potential+mediator+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Runx2 (runt-related transcription factor 2)-mediated microcalcification is a novel pathological characteristic and potential mediator of abdominal aortic aneurysm.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 40 (5), 1352-1369 (2020).</li><li>Kelly, M. J., Igari, K., Yamanouchi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoclast-like+cells+in+aneurysmal+disease+exhibit+an+enhanced+proteolytic+phenotype.">Osteoclast-like cells in aneurysmal disease exhibit an enhanced proteolytic phenotype.</a> International Journal of Molecular Sciences. 20 (19), 4689 (2019).</li></ol>

Периаортальное применение CaPO4 является надежным подходом к индуцированию ААА у мышей. В нескольких исследованиях использовалась модель CaPO4 и последовательно сообщалось, что это быстрый и воспроизводимый метод изучения ААА у мышей 7,9. Считает...

Аневризма брюшной аорты (ААА) является смертельным сердечно-сосудистым заболеванием, характеризующимся постоянным расширением брюшной аорты, с высокими показателями смертности после разрыва. ААА связана со старением, курением, мужским полом, гипертонией и гиперлипидемией1. Было показано, что несколько патологических процессов способствуют образованию ААА, включая протеолиз волокон внеклеточного матрикса, инфильтрацию иммунных клеток и потерю гладкомышечных клеток сосудов. В настоящее время патологические механизмы ААА остаются неуловимыми, и не существует проверенных препаратов для лечения ААА1. Исследования ААА человека ограничены из-за существования небольшого количества образцов аорты человека; таким образом, было создано и широко принято несколько моделей ААА животных, индуцированных химической модификацией, включая подкожную инфузию ангиотензина II (AngII), периваскулярную или внутрипросветную инкубацию эластазы и периваскулярное применение фосфата кальция2. Широко используемой моделью мыши является применение фосфата кальция (CaPO4) к адвентиции инфраренальной брюшной аорты, что является экономически эффективным и не требует генетической модификации.
Прямое периаортальное применение CaCl2 к сонной артерии кроликов для индуцирования аневризмальных изменений первоначально сообщалось Gertz et al.3, а затем было применено к брюшной аорте мышей. Модель была разработана Yamanouchi et al. для ускорения расширения аорты с использованием кристаллов CaPO4 у мышей4. Инфильтрация CaPO4 в аорту мышей рекапитулирует многие патологические особенности, наблюдаемые в ААА человека, включая глубокую инфильтрацию макрофагов, деградацию внеклеточного матрикса и отложение кальция. Факторы риска ААА человека, такие как гиперлипидемия, также увеличивают CaPO 4-индуцированную ААА у мышей5. В отличие от AngII перфузионно-индуцированной ААА у мышей ApoE-/- или LDLR-/-, CaPO 4-индуцированная ААА встречается в инфраренальной аортальной области, которая имитирует ААА человека. В настоящее время этот метод широко применяется для оценки восприимчивости к развитию ААА у генетически модифицированных мышей и оценки анти-ААА эффектов препаратов 6,7.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>MECKLIN</td>
			<td>C805225</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Biomed</td>
			<td>SH5001-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>HARVEYBIO</td>
			<td>MB5051</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal ventilator</td>
			<td>RWD</td>
			<td>H1550501-012</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a calcium phosphate-induced mouse abdominal aortic aneurysm model

Аневризма брюшной аорты (ААА) является опасным для жизни сердечно-сосудистым заболеванием, которое встречается во всем мире и характеризуется необратимым расширением брюшной аорты. В настоящее время используется несколько химически индуцированных мышиных моделей ААА, каждая из которых имитирует отдельный аспект патогенеза ААА. Модель ААА, индуцированная фосфатом кальция, является быстрой и экономически эффективной моделью по сравнению с моделями ААА, индуцированными ангиотензином II и эластазой. Применение кристаллов CaPO4 к аорте мыши приводит к деградации эластичных волокон, потере гладкомышечных клеток, воспалению и отложению кальция, связанному с расширением аорты. В этой статье представлен стандартный протокол для модели ААА, индуцированной CaPO4. Протокол включает подготовку материала, хирургическое применение CaPO4 к адвентициям инфраренальной брюшной аорты, сбор аорты для визуализации аневризм аорты и гистологические анализы у мышей.

Через 14 дней после применения CaPO4 самцы мышей C57BL/6J были усыплены, а их аорты были собраны и очищены. Морфология аорты была изображена для визуализации образования ААА. Как показано на фиг.1А-В, применение CaPO4 приводило к расширению инфраренал...

Watch this Scientific Journal Video about A Calcium Phosphate-Induced Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model at JoVE.com

A Calcium Phosphate-Induced Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model

Этот протокол описывает мышиную модель мышиной аневризмы брюшной аорты (ААА), индуцированную фосфатом кальция, для изучения патологических особенностей и молекулярных механизмов ААА.

Модель аневризмы брюшной аорты мыши, индуцированная фосфатом кальция

An abdominal aortic aneurysm (AAA) is a life-threatening cardiovascular disease that occurs worldwide and is characterized by irreversible dilation of the ...

Этот протокол описывает индуцированную фосфатом кальция аневризму брюшной аорты тройной А мышиной модели для изучения патологических особенностей в молекулярных механизмах аневризмы брюшной аорты. Модель аневризмы брюшной аорты, индуцированная фосфатом кальция, является быстрой и экономически эффективной моделью по сравнению с моделями аневризмы брюшной аорты, индуцированной эластазой. Демонстрировать процедуру будет Зэю Кай, пост-врач здесь, сотрудник из нашей лаборатории.Для начала нарежьте полоски шириной 0,3 сантиметра из свободных от порошка резиновых перчаток и марли. Затем купите восьми-десятинедельных мышей C57BL6J Mayo и поместите животных в кондиционированную среду с 12-часовым световым темным циклом и свободным доступом к пище и воде. Затем автоклавируйте марлю, ватные тампоны, ножницы и щипцы перед операцией и получите бетадин, 70% этанол и антисептическое средство для мытья рук.Сбрить волосы в животе анестезированной мыши с помощью электрической машинки для стрижки или крема для удаления волос. Затем смажьте и протрите выбритый участок бетадином, а затем 70% этанолом несколько раз круговыми движениями. Затем сделайте примерно 1,5-сантиметровый разрез внизу живота по средней линии живота с помощью ножниц.Используя стерильный ватный тампон, смоченный нормальным физиологическим раствором, осторожно удалите кишечник до тех пор, пока не будет видна инфраренальная аорта. Затем рассекните соединительную ткань и жир от инфраренальной аорты на участок примерно на 0,5 сантиметра, избегая при этом любого разрыва мелких сосудов до спинной стороны. Затем упакуйте кусочек пропитанной физиологическим раствором резиновой перчаточной полоски под брюшную аорту и брюшную основную вену, вытирая лишнюю жидкость с помощью ватного тампона.После этого упакуйте кусочек марли, пропитанный 0,5 молярным хлоридом кальция на адвентиции инфраренальной брюшной сосудистой системы в течение 10 минут. Снимите марлю и упакуйте еще один кусочек марли, пропитанный раствором PBS, в течение пяти минут, чтобы получить кристаллы ортофосфата кальция в C2 в адвентиции аорты. Затем аккуратно снимите резиновую полоску перчатки и марлю.После сброса кишечного тракта мыши зашить брюшной разрез и кожу пятинулевым швом. Далее поместите мышь на грелку, пока мышь не придет в сознание. Размещайте мышь еще 14 дней и внимательно следите за мышью после операции и наблюдайте, по крайней мере, каждый день впоследствии.После 14 дней операции разрезайте усыпленную грудную и брюшную полости мыши вентрально и разрезайте правое предсердие. Обижают мышей буфером PBS через левый желудочек сердца, чтобы удалить кровь в аорте, а затем перфузируют с 4% параформальдегидом, как описано в рукописи. Аккуратно удалите адвентициальную ткань и жир под стереомикроскопом.Затем собирают аорту и помещают ее в трубку, содержащую пять миллилитров 4% параформальдегида в течение 48 часов. Затем прикрепите аорту к черной восковой пластине с помощью игл насекомых и приступайте к получению изображений аорты. После 14 дней применения ортофосфата кальция была изображена морфология аорты для визуализации формирования аневризмы брюшной аорты.Было отмечено, что ортофосфат кальция приводит к расширению инфраренальной брюшной аорты и приводит к резкой деградации эластических волокон, о чем свидетельствуют разрывы эластина. Использование стерильного ватного тампона, смоченного нормальным физиологическим раствором, для удаления кишечника до тех пор, пока не будет видна инфраренальная аорта, а затем извлечение соединительной ткани и жира из инфраренальной аорты. В целом, модель аневризмы брюшной аорты, индуцированная фосфоратом кальция, является быстрым и экономически эффективным подходом к изучению молекулярных механизмов и терапевтических стратегий аневризмы брюшной аорты и может применяться параллельно с другими моделями для полной имитации особенностей аневризмы брюшной аорты человека.

Research

JoVE Journal

Biology

Creation of Murine Experimental Abdominal Aortic Aneurysms with Elastase 

Создание мышей экспериментальной аневризмы брюшной аорты с эластазы

Transient intraluminal infusion of porcine pancreatic elastase into the infrarenal segment of the abdominal aorta is the most widely used animal model of ...

Aortic Ring Assay

Аортального кольца Пробирной

Angiogenesis, the sprouting of blood vessels from preexisting vasculature is associated with both natural and pathological processes. Various angiogenesis ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

В естественных изображений и лечебных процедур в Ортотопическая мышиной модели рака яичников

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

Выделение и первичной культуре мышиных эндотелиальных клеток аорты

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Trans-inner Cell Mass Injection of Embryonic Stem Cells Leads to Higher Chimerism Rates

Транс внутренняя ячейка массы впрыска эмбриональных стволовых клеток приводит к более высоким ставкам химеризма

In an effort to increase efficiency in the creation of genetically modified mice via ES Cell methodologies, we present an adaptation to the current ...

A Mouse Model of Intestinal Partial Obstruction

Мыши модель частичной непроходимостью кишечника

Intestinal obstructions, that impede or block peristaltic movement, can be caused by abdominal adhesions and most gastrointestinal (GI) diseases including ...

Simultaneous Measurements of Intracellular Calcium and Membrane Potential in Freshly Isolated and Intact Mouse Cerebral Endothelium

Одновременного измерения внутриклеточного кальция и мембранный потенциал в свеже изолированных и нетронутыми мыши мозгового эндотелия

Cerebral arteries and their respective microcirculation deliver oxygen and nutrients to the brain via blood flow regulation. Endothelial cells line the ...

Imaging Calcium Dynamics in Subpopulations of Mouse Pancreatic Islet Cells

Изображение динамики кальция в субпопуляциях мышей поджелудочной железы клеток на икры

Pancreatic islet hormones regulate blood glucose homeostasis. Changes in blood glucose induce oscillations of cytosolic calcium in pancreatic islet cells ...

Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A (EYFP-CENP-A)

Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A EYFP-CENP-A

Анализ масс-спектрометрии для выявления повсеместного ания метеоуожего тега CENP-A (EYFP-CENP-A)

Studying the structure and the dynamics of kinetochores and centromeres is important in understanding chromosomal instability (CIN) and cancer ...

A Mouse Model of Lumbar Spine Instability

Мышь Модель поясничного позвоночника нестабильности

Intervertebral disc degeneration (IDD) is a common pathological change leading to low back pain. Appropriate animal models are desired for understanding ...