Name: surgical tips and tricks for performing porcine pancreas transplantation
Uploaded: 2022-07-20T14:50:00
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该协议获得了多伦多综合研究所动物护理委员会的伦理批准。动物根据加拿大安大略省国家卫生研究院（NIH）的国家医学研究学会和实验动物护理指南接受了人道护理。在这项研究中，使用了15周龄的无血缘关系的约克郡公猪，体重为40-50公斤。
注：整个研究方案分为以下主要步骤：（i）器官取回和背台准备;（二）受者全胰腺切除术和（三）移植物植入术。供体和受体的整?...

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	<li>Gruessner, R. W., Gruessner, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+current+state+of+pancreas+transplantation.">The current state of pancreas transplantation.</a> Nature Reviews. Endocrinology. 9 (9), 555-562 (2013).</li><li>Redfield, R. R., Rickels, M. R., Naji, A., Odorico, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pancreas+transplantation+in+the+modern+era.">Pancreas transplantation in the modern era.</a> Gastroenterology Clinics of North America. 45 (1), 145-166 (2016).</li><li>Canadian Institute for Health Information. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Annual+Statistics+on+Organ+Replacement+in+Canada:+Dialysis,+Tranplantation+and+Donation,+2009+to+2018.">Annual Statistics on Organ Replacement in Canada: Dialysis, Tranplantation and Donation, 2009 to 2018.</a> Canadian Institute for Health Information. , (2019).</li><li>Prudhomme, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex-situ+perfusion+of+pancreas+for+whole-organ+transplantation:+Is+it+safe+and+feasible?A+systematic+review.">Ex-situ perfusion of pancreas for whole-organ transplantation: Is it safe and feasible?A systematic review.</a> Journal of Diabetes Science and Technology. 14 (1), 120-134 (2020).</li><li>Ferrer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pig+pancreas+anatomy:+Implications+for+pancreas+procurement,+preservation,+and+islet+isolation.">Pig pancreas anatomy: Implications for pancreas procurement, preservation, and islet isolation.</a> Transplantation. 86 (11), 1503-1510 (2008).</li><li>Parmentier, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+ex+vivo+pancreas+perfusion+for+the+preservation+of+pancreas+allografts+before+transplantation.">Normothermic ex vivo pancreas perfusion for the preservation of pancreas allografts before transplantation.</a> Journal of Visualized Experiments. , (2022).</li><li>Chaib, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Total+pancreatectomy:+Porcine+model+for+inducing+diabetes+-+Anatomical+assessment+and+surgical+aspects.">Total pancreatectomy: Porcine model for inducing diabetes - Anatomical assessment and surgical aspects.</a> European Surgical Research. 46 (1), 52-55 (2011).</li><li>Prudhomme, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Total+pancreatectomy+and+pancreatic+allotransplant+in+a+porcine+experimental+model.">Total pancreatectomy and pancreatic allotransplant in a porcine experimental model.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 18 (3), 353-358 (2022).</li><li>Grussner, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Streptozotocin-induced+diabetes+mellitus+in+pigs.">Streptozotocin-induced diabetes mellitus in pigs.</a> Hormone and Metabolic Research. 25 (4), 199-203 (1993).</li><li>Mazilescu, L. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+ex+situ+pancreas+perfusion+for+the+preservation+of+porcine+pancreas+grafts.">Normothermic ex situ pancreas perfusion for the preservation of porcine pancreas grafts.</a> American Journal of Transplantation. 22 (5), 1339-1349 (2022).</li><li>Kumar, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+normothermic+porcine+pancreas:+A+physiological+model+for+preservation+and+transplant+study.">Ex vivo normothermic porcine pancreas: A physiological model for preservation and transplant study.</a> International Journal of Surgery. 54, 206-215 (2018).</li><li>Kaths, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+ex+vivo+kidney+perfusion+for+the+preservation+of+kidney+grafts+prior+to+transplantation.">Normothermic ex vivo kidney perfusion for the preservation of kidney grafts prior to transplantation.</a> Journal of Visualized Experiments. (101), e52909 (2015).</li></ol>

目前的方案已经用于证明在猪模型中进行胰腺切除术和胰腺同种异体移植的技术和可行性。在移植后观察动物3天，以证明胰腺切除术和同种异体移植技术的可靠性。所有动物在手术后使用抗生素、液体、镇痛药、补充营养和免疫抑制剂（即环孢素）的标准化动物护理方案进行监测和护理 3 天。在术后第三天（72小时后或更早，如果临床恶化而要求）通过道德认可的人道技术处死。从尾部、体、头?...

在过去的几十年中，围手术期管理策略和手术技术取得了重大进展，导致胰腺移植发展成为治疗糖尿病伴终末期肾病（通常与肾移植联合使用）的最有希望的策略之一1.然而，移植物胰腺炎、缺血再灌注损伤和血管血栓形成等并发症仍然是确保成功结局需要克服的最大挑战，在受损更大的扩展标准移植物2中更是如此。此外，胰腺移植物是采购中最常丢弃的移植物，对任何器官的利用率最低（9%）3。因此，机器灌注旨在为胰腺移植物提供最佳的稳态环境，目的是提高移植物利用率，类似于在肝、肾和肺移植中取得的成就4。猪胰腺解剖结构复杂，包括其小叶结构（包括三个叶），围绕肠系膜门轴的延伸，肠系膜血管变化（40%-50%），以及沿十二指肠C环的细腻血管通道5。这些解剖学属性有助于在提取胰十二指肠移植物和受者胰腺切除术中具有挑战性的夹层，以诱导医源性胰腺糖尿病状态，即手术诱导的糖尿病状态，空腹血糖水平高于 8 mmol/L。 基于这些特征，猪胰腺切除术联合移植提供了该技术的最接近的复制，该技术可以在人类中进行，作为针对终末期的确定性治疗方法。 糖尿病。本文旨在涵盖以下几个方面：（i）受者胰腺切除术和胰腺移植植入期间围手术期猪护理概述;（ii）受者胰腺切除术和胰十二指肠移植物植入的技术步骤细节，以及（iii）猪模型中供体和受体胰腺手术的提示和技巧，以尽量减少移植物和受体损伤。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Belzer UW Cold storage solution</td>
			<td>Bridge to life Ltd (Columbia, SC, USA)</td>
			<td>4055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium gluconate (10%)</td>
			<td>Fresenius Kabi Canada Ltd (Toronto, ON)</td>
			<td>C360019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Composelect (blood collection bags)</td>
			<td>Fresenius Kabi Canada Ltd (Toronto, ON)</td>
			<td>PQ31555</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin (10000 IU/10 ml)</td>
			<td>Fresenius Kabi Canada Ltd (Toronto, ON)</td>
			<td>C504710</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lactated Ringer&#39;s</td>
			<td>Baxter (Mississauga, ON, Canada)</td>
			<td>JB2324</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Percutaneous Sheath Introducer Set with Integral Hemostasis Valve/side Port for use with 7-7.5 Fr Catheters&#160;</td>
			<td>Arrow International LLC</td>
			<td>SI-09880</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium bicarbonate (8.4%)</td>
			<td>Fresenius Kabi Canada Ltd (Toronto, ON)</td>
			<td>C908950</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solu-Medrol</td>
			<td>Pfizer Canada Inc.&#160;</td>
			<td>52246-14-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical retreival and transplant instrument set</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

surgical tips and tricks for performing porcine pancreas transplantation

尽管胰腺移植在1型糖尿病和代谢综合征中取得了有希望的结果，但围绕这种最先进技术的最大担忧仍然是缺乏被认为适合移植的器官。与肝脏和肾脏等器官相比，高血管内阻力、脆弱的实质内毛细血管框架和肠系膜脉管系统周围的复杂小叶解剖结构使该器官更容易受伤，对轻微创伤的耐受性更低。细致的手术解剖和明智的组织处理构成了整个胰腺移植工作的基石。由于与人体解剖结构相比，猪胰腺与周围肠系膜血管和器官的解剖结构在形态学上相似，因此在猪模型中演示该技术有助于最准确地将其推断为人类环境。本文旨在概述需要遵循的基本手术技巧和窍门，以确保在猪3天生存模型中移植这种高度敏感的器官的成功率更高。

下面总结了五种胰腺移植生存模型的围手术期和术后长达 3 天的生化参数（按年表编号为 PTX 1 至 5）。在五例胰腺移植中，所有胰腺移植在3天生存期内都表现良好，这从其总体健康状况以及胰腺损伤和内分泌功能测试中可见一斑。下面描述的结果代表了受者胰腺切除术的3天生存模型的经验，然后在移植物静态冷藏后进行胰腺同种异体移植。
胰腺切除术的平均手术时间为52分?...

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Surgical Tips and Tricks for Performing Porcine Pancreas Transplantation

该视频文章总结了猪3天生存模型中的胰腺切除术和胰腺同种异体移植技术，并逐步描述了该方法，并强调了处理不稳定和精细的猪内脏解剖结构的手术技巧和窍门。

进行猪胰腺移植的手术技巧和窍门

Despite the promising results of pancreas transplantation in type 1 diabetes mellitus and metabolic syndrome, the biggest concern around this ...

该方案将有助于为猪模型中胰腺移植的不稳定过程提供循序渐进的方法。该技术遵循与在人类中观察到的几乎相同的步骤，因此是最接近在临床实践中复制的模型。与人类相比，猪的内脏结构和血管非常脆弱。因此，这对任何第一次做手术的人来说都是最大的挑战。首先使用牛电灼术的纯切割模式从剑胸骨到耻骨联合做一个中线切口。确保在以外的切口下部保持尿道外侧，以避免受伤。放置自保全腹壁牵开器，避免损伤脾脏和肝脏，以优化暴露于手术区域。为了动员胰头，在助手的帮助下对胰十二指肠沟进行反牵引。沿肝下IVC中胰实质十二指肠叶之间的无血管筋膜平面进行解剖。通过沿门静脉两侧的筋膜解剖来启动胰环动员，以确保连接叶从上覆的门静脉完全动员。最安全的方法是沿着门静脉的两侧开始解剖，并顺时针或逆时针方向分离组织。接下来，确定胰腺和亲本组织之间的连接处，并开始解剖下层脾静脉的尾巴，靠近实质。结扎并分割小静脉支流到实质，注意不要伤害脾静脉，使用 Silk 3-0 领带。对于胰腺体动员，沿着将实质与大肠和胃分开的薄组织层解剖，沿幽门下区域保留薄血管弓。然后对于胰十二指肠动员，通过牵引，反牵引在胰十二指肠沟中尖锐解剖，将实质与二重奏的C环分开，沿十二指肠的C形环保留薄血管弓。接下来，确定胰管。与Silk 2-0的结扎和分裂，在十二指肠C形环上保持约三到五毫米的导管残端，远离十二指肠血管弓。通过从门静脉两侧的连接叶、十二指肠和结肠之间的交界处解剖实质来完成活动的最后一部分。通过将门静脉前侧的连接叶分开来提取样本。提取标本需要实质分割，因为它位于门静脉周围的圆周位置。确保沿夹层区域止血，并检查十二指肠是否有任何损伤和血管充血。通过修剪吻合边缘来准备移植门静脉和主动脉近端。将准备好的移植物放入装有UW溶液的器官袋中，放在冰浴上。从胰尾取核心针活检，将它们储存在福尔马林中，然后快速冷冻。在稍后阶段提取RNA。使用Prolene 6-0以八字形的方式缝合活检部位。通过识别右输尿管并沿筋膜解剖开始主动脉腔夹层，将输尿管与下腔静脉上的腹膜后覆盖物分开。沿主动脉外缘解剖，使其与下面的比目鱼肌暴露。接下来，沿主动脉腔沟解剖，将主动脉与IVC分开。通过试验Satinsky血管钳夹放置，确保主动脉和IVC充分活动。与第一助手切换位置，并通过缩回左侧的肠袢来准备手术区域，以暴露主要血管以进行吻合。将试验夹放在IVC和主动脉上，以重新评估两个血管的充分动员以进行吻合。将血管侧咬夹放入IVC后，在血管前壁上开一个小口，并使用Potts剪刀将其颅骨和尾部伸展至足够的尺寸。使用静脉插管的柔性鞘用肝素化盐水冲洗管腔。使用Prolene 6-0双针，在IVC和移植门静脉上做角形由内而外的缝合线。固定角缝合线，并沿着移植物和受体静脉的后壁连续运行其中一根针。以由外而内连续的方式固定前壁，并用肝素化盐水冲洗吻合腔后将结固定在前壁中央。然后将斗牛犬的血管夹放在远离吻合口的移植门静脉上，并慢慢从受体IVC中释放侧咬夹。检查静脉再充盈，以及吻合口是否有大出血。接下来，将侧咬夹放在主动脉上，而不会损伤沿血管后内侧壁的腰支。指导麻醉师通过中心静脉导管注射肝素和甲泼尼龙。在血管前壁上开一个口，并向颅骨和尾部延伸，注意不要沿着血管壁解剖。用肝素化盐水冲洗管腔。并使用Prolene 6-0双针，通过降落伞技术将移植主动脉的近端连续缝合到受体主动脉开口。用肝素化盐水冲洗管腔，然后将最后一个结绑在血管前壁上。在开始再灌注之前，检查血流动力学改变是否有任何平均血压急剧下降。每分钟监测有创血压，并对血管加压药和液体前负荷进行剂量滴定，以将目标平均血压保持在 45 至 50 毫米汞柱之间。然后，通过评估实质、主动脉旁区域和门脉周围区域的任何大出血，从静脉中取出斗牛犬夹后保持止血。松开主动脉钳夹并检查动脉吻合口部位是否有出血。用结扎和止血缝合固定出血点。要求麻醉师通过中心静脉导管注射一瓶氨甲环酸。在再灌注的这一阶段，必须尽量减少对胰腺的积极处理，以避免移植物水肿和血肿。在确保无肠系膜扭转后，在距十二指肠空肠交界处 40 至 50 厘米处隔离一圈空肠，并将其靠近移植物。使用聚二恶烷酮4-0缝合线以侧对侧连续的方式将十二指肠移植物吻合到受体空肠。确认移植物周围和吻合部位止血。然后在再灌注后一小时从胰尾进行三次核心穿刺活检。储存在福尔马林中，快速冷冻，稍后提取RNA。用Prolene 6-0以八字形的方式缝合活检部位。在评估拖把滞留并确保止血后，使用聚二恶烷酮 0 针连续缝合腹直肌，使中下线远离尿道。使用连续的Silk 0缝合线闭合皮肤。在颈部创建一个皮下隧道，并通过将其埋在隧道下方并用 Silk 0-0 切割针缝合覆盖的皮肤来固定中心静脉导管。在确保血气分析中的平均血压稳定且pH和乳酸水平呈改善趋势后，移除动脉导管并结扎血管以确保颈部止血。用 Silk 0 缝合线以连续方式关闭覆盖的皮肤。再灌注后一小时的平均心率平均为每分钟135次，平均血压约为37毫升汞柱。在高剂量的去甲肾上腺素输注下维持这些水平，在所有五种情况下都可以逐渐减少并停止，然后再将动物移回其围栏。再灌注后在手术室监测乳酸水平3小时。所有五只动物在临床上都是警觉的，在再灌注后五到六个小时内四肢和呼吸模式的积极运动很明显。监测术后前三天淀粉酶、血清脂肪酶和血清乳酸脱氢酶水平。术后第三天进行120分钟葡萄糖耐量试验。随后提取血液样本并在2分钟，5分钟，10分钟，20分钟30分钟，60分钟，90分钟和120分钟处理葡萄糖水平。在胰腺切除术中，细致处理胰腺周围的血管弓至关重要。仔细执行此步骤可确保在手术结束时十二指肠的良好血管供应，这反过来又是胰腺切除术后成功的关键决定因素。该技术开辟了猪模型移植机器灌注的选择，并建立了生存模型。

Research

JoVE Journal

Medicine

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科研

医学

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