Name: surgical tips and tricks for performing porcine pancreas transplantation
Uploaded: 2022-07-20T14:50:00
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O protocolo recebeu aprovação ética do Comitê de Cuidados com Animais, instituto geral de pesquisa de Toronto. Os animais receberam cuidados humanizados em conformidade com a Sociedade Nacional de Pesquisa Médica e Guia para o cuidado de animais de laboratório, National Institute of Health (NIH), Ontário, Canadá. Para este estudo, foram utilizados suínos machos Yorkshire, com 15 semanas de idade, pesando entre 40 e 50 kg.
OBS: Todo o protocolo do estudo está dividido nas seguintes et...

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	<li>Gruessner, R. W., Gruessner, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+current+state+of+pancreas+transplantation.">The current state of pancreas transplantation.</a> Nature Reviews. Endocrinology. 9 (9), 555-562 (2013).</li><li>Redfield, R. R., Rickels, M. R., Naji, A., Odorico, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pancreas+transplantation+in+the+modern+era.">Pancreas transplantation in the modern era.</a> Gastroenterology Clinics of North America. 45 (1), 145-166 (2016).</li><li>Canadian Institute for Health Information. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Annual+Statistics+on+Organ+Replacement+in+Canada:+Dialysis,+Tranplantation+and+Donation,+2009+to+2018.">Annual Statistics on Organ Replacement in Canada: Dialysis, Tranplantation and Donation, 2009 to 2018.</a> Canadian Institute for Health Information. , (2019).</li><li>Prudhomme, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex-situ+perfusion+of+pancreas+for+whole-organ+transplantation:+Is+it+safe+and+feasible?A+systematic+review.">Ex-situ perfusion of pancreas for whole-organ transplantation: Is it safe and feasible?A systematic review.</a> Journal of Diabetes Science and Technology. 14 (1), 120-134 (2020).</li><li>Ferrer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pig+pancreas+anatomy:+Implications+for+pancreas+procurement,+preservation,+and+islet+isolation.">Pig pancreas anatomy: Implications for pancreas procurement, preservation, and islet isolation.</a> Transplantation. 86 (11), 1503-1510 (2008).</li><li>Parmentier, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+ex+vivo+pancreas+perfusion+for+the+preservation+of+pancreas+allografts+before+transplantation.">Normothermic ex vivo pancreas perfusion for the preservation of pancreas allografts before transplantation.</a> Journal of Visualized Experiments. , (2022).</li><li>Chaib, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Total+pancreatectomy:+Porcine+model+for+inducing+diabetes+-+Anatomical+assessment+and+surgical+aspects.">Total pancreatectomy: Porcine model for inducing diabetes - Anatomical assessment and surgical aspects.</a> European Surgical Research. 46 (1), 52-55 (2011).</li><li>Prudhomme, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Total+pancreatectomy+and+pancreatic+allotransplant+in+a+porcine+experimental+model.">Total pancreatectomy and pancreatic allotransplant in a porcine experimental model.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 18 (3), 353-358 (2022).</li><li>Grussner, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Streptozotocin-induced+diabetes+mellitus+in+pigs.">Streptozotocin-induced diabetes mellitus in pigs.</a> Hormone and Metabolic Research. 25 (4), 199-203 (1993).</li><li>Mazilescu, L. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+ex+situ+pancreas+perfusion+for+the+preservation+of+porcine+pancreas+grafts.">Normothermic ex situ pancreas perfusion for the preservation of porcine pancreas grafts.</a> American Journal of Transplantation. 22 (5), 1339-1349 (2022).</li><li>Kumar, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+normothermic+porcine+pancreas:+A+physiological+model+for+preservation+and+transplant+study.">Ex vivo normothermic porcine pancreas: A physiological model for preservation and transplant study.</a> International Journal of Surgery. 54, 206-215 (2018).</li><li>Kaths, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+ex+vivo+kidney+perfusion+for+the+preservation+of+kidney+grafts+prior+to+transplantation.">Normothermic ex vivo kidney perfusion for the preservation of kidney grafts prior to transplantation.</a> Journal of Visualized Experiments. (101), e52909 (2015).</li></ol>

O protocolo atual tem sido realizado para demonstrar a técnica e a viabilidade da pancreatectomia e alotransplante de pâncreas em modelos suínos. Os animais foram observados por um período de 3 dias após o transplante para demonstrar a confiabilidade da técnica de pancreatectomia e do alotransplante. Todos os animais foram monitorados e amamentados por 3 dias após a cirurgia usando um protocolo padronizado de cuidados com os animais com antibióticos, fluidos, analgésicos, nutrição suplementar e imunossupressor...

Nas últimas décadas, houve um progresso significativo nas estratégias de manejo perioperatório e nas técnicas cirúrgicas, levando à evolução do transplante de pâncreas para uma das estratégias mais promissoras para o tratamento do diabetes mellitus com doença renal terminal (geralmente em conjunto com o transplante renal)1 . Entretanto, complicações como pancreatite do enxerto, lesão de isquemia-reperfusão e trombose vascular continuam sendo os maiores desafios a serem superados para garantir resultados bem-sucedidos, mais ainda nos enxertos de critérios estendidos maislesados2. Além disso, os enxertos de pâncreas são os mais comumente descartados na captação e apresentam as menores taxas de utilização (9%) para qualquer órgão3. Portanto, a máquina de perfusão visa fornecer um ambiente homeostático ótimo para o enxerto de pâncreas com o objetivo de aumentar a taxa de utilização do enxerto, semelhante ao que tem sido alcançado nos transplantes de fígado, rim e pulmão4. A anatomia pancreática porcina é complexa em termos de sua arquitetura lobular (composta por três lobos), suas extensões ao redor do eixo mesenterico-portal, suas variações vasculares mesentéricas (em 40%-50%) e seus delicados canais vasculares ao longo da alça C doduodeno5. Esses atributos anatômicos contribuem para uma dissecção desafiadora tanto na recuperação do enxerto pancreato-duodenal quanto na pancreatectomia receptora para induzir um estado iatrogênico de diabetes apancreático, ou seja, estado de diabetes mellitus induzido cirurgicamente com glicemia de jejum acima de 8 mmol/L. Com base nessas características, a pancreatectomia suína com transplante fornece a replicação mais próxima possível da técnica que poderia ser realizada em humanos como um tratamento definitivo contra o estágio terminal diabetes mellitus. O presente artigo tem como objetivo abordar os seguintes aspectos: (i) delineamento dos cuidados perioperatórios com suínos durante pancreatectomia receptora e implante de enxerto de pâncreas; (ii) detalhes técnicos passo a passo da pancreatectomia do receptor e implante do enxerto pancreato-duodenal e (iii) dicas e truques da operação pancreática do doador e do receptor em modelos porcinos para minimizar a lesão do enxerto e do receptor.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Belzer UW Cold storage solution</td>
			<td>Bridge to life Ltd (Columbia, SC, USA)</td>
			<td>4055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium gluconate (10%)</td>
			<td>Fresenius Kabi Canada Ltd (Toronto, ON)</td>
			<td>C360019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Composelect (blood collection bags)</td>
			<td>Fresenius Kabi Canada Ltd (Toronto, ON)</td>
			<td>PQ31555</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin (10000 IU/10 ml)</td>
			<td>Fresenius Kabi Canada Ltd (Toronto, ON)</td>
			<td>C504710</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lactated Ringer&#39;s</td>
			<td>Baxter (Mississauga, ON, Canada)</td>
			<td>JB2324</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Percutaneous Sheath Introducer Set with Integral Hemostasis Valve/side Port for use with 7-7.5 Fr Catheters&#160;</td>
			<td>Arrow International LLC</td>
			<td>SI-09880</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium bicarbonate (8.4%)</td>
			<td>Fresenius Kabi Canada Ltd (Toronto, ON)</td>
			<td>C908950</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solu-Medrol</td>
			<td>Pfizer Canada Inc.&#160;</td>
			<td>52246-14-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical retreival and transplant instrument set</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

surgical tips and tricks for performing porcine pancreas transplantation

Apesar dos resultados promissores do transplante de pâncreas no diabetes mellitus tipo 1 e na síndrome metabólica, a maior preocupação em torno dessa técnica de ponta continua sendo a escassez de órgãos considerados aptos para transplante. A alta resistência intravascular, o delicado arcabouço capilar intraparenquimatoso e a complexa anatomia lobular ao redor da vasculatura mesentérica tornam esse órgão mais suscetível a lesões e menos tolerante a traumas triviais em comparação com órgãos como fígado e rim. A dissecção cirúrgica meticulosa e o manuseio criterioso dos tecidos formam a pedra angular de todo o exercício do transplante de pâncreas. Devido à semelhança morfológica entre a anatomia do pâncreas suíno com os vasos mesentéricos circundantes e os órgãos quando comparada à anatomia humana, a demonstração da técnica no modelo suíno poderia ajudar a extrapolar com mais precisão para um ambiente humano. O presente artigo tem como objetivo delinear as dicas e truques cirúrgicos essenciais que precisam ser seguidos, a fim de garantir uma maior taxa de sucesso do transplante deste órgão altamente suscetível em um modelo suíno de sobrevida de 3 dias.

Os parâmetros bioquímicos peri e pós-operatórios, até 3 dias, dos cinco modelos de sobrevida do transplante de pâncreas são resumidos a seguir (numerados como PTX 1 a 5 em cronologia). Dos cinco transplantes totais de pâncreas, todos se saíram bem durante o período de sobrevida de 3 dias, como evidenciado pelo bem-estar geral e pelos testes de lesão pancreática e função endócrina. Os resultados apresentados a seguir são representativos da experiência de um modelo de sobrevida de 3 dias de pancreatectomia...

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Surgical Tips and Tricks for Performing Porcine Pancreas Transplantation

O artigo em vídeo resume a técnica de pancreatectomia e alotransplante de pâncreas em um modelo de sobrevida de 3 dias suíno com uma descrição passo a passo do método e ênfase nas dicas e truques cirúrgicos para lidar com a precária e delicada anatomia visceral suína.

Dicas e truques cirúrgicos para realizar o transplante de pâncreas suíno

Despite the promising results of pancreas transplantation in type 1 diabetes mellitus and metabolic syndrome, the biggest concern around this ...

O protocolo ajudaria a fornecer uma abordagem passo a passo para o procedimento precário do transplante de pâncreas em modelos suínos. A técnica segue quase os mesmos passos observados em humanos e, portanto, é o modelo mais próximo possível de ser replicado na prática clínica. As estruturas viscerais porcinas e os vasos são extremamente frágeis quando comparados aos seres humanos.E, portanto, esse é o maior desafio para quem está fazendo a cirurgia pela primeira vez. Comece fazendo uma incisão na linha média do xifesterno até a sínfise púbica usando o modo de corte puro do eletrocautério de Bovie. Certifique-se de manter lateral à uretra na parte inferior da incisão além do falo para evitar lesões.Colocar o afastador de parede abdominal auto-reconfortante para evitar lesar o baço e o fígado, para otimizar a exposição ao campo cirúrgico. Para mobilizar a cabeça do pâncreas, fornecer contratração para o sulco pancreaticoduodenal com a ajuda do assistente. Dissecção ao longo do plano fascial avascular entre o lobo duodenal do parênquima pancreático na VCI infra-hepática.Iniciar a mobilização do anel pancreático dissecando ao longo da fáscia em qualquer aspecto da veia porta para garantir a mobilização completa do lobo de conexão da veia porta sobrejacente. A maneira mais segura é começar a dissecar ao longo de cada lado da veia porta e separar os tecidos no sentido horário ou anti-horário. Em seguida, identifique a junção entre os tecidos pancreático e parental e comece a dissecar a cauda da veia esplênica subjacente, permanecendo próxima ao parênquima.Ligate e dividir as pequenas tributárias venosas ao parênquima, tomando cuidado para não lesionar a veia esplênica, usando laços Silk 3-0. Para a mobilização do corpo pancreático, dissecar ao longo da fina camada de tecido que separa o parênquima do intestino grosso e do estômago, preservando a fina arcada vascular ao longo da região infrapilórica. Em seguida, para a mobilização pancreaticoduodenal, separar o parênquima da alça C da dupla por dissecção acentuada no sulco pancreaticoduodenal por tração, contratração, preservando a fina arcada vascular ao longo da alça C do duodeno.Em seguida, identifique o ducto pancreático. Ligate com seda 2-0 amarra e divide, mantendo em torno de três a cinco milímetros do coto do ducto na alça C duodenal, ficando afastado da arcada vascular duodenal. Complete a última parte da mobilização dissecando o parênquima a partir da junção entre o lobo de conexão, duodeno e cólon em ambos os lados da veia porta.Extrair o espécime em massa dividindo o lóbulo de conexão na face anterior da veia porta. A divisão parenquimatosa é necessária para extrair o espécime devido à sua localização circunferencial ao redor da veia porta. Garantir a hemostasia ao longo das áreas de dissecção e inspecionar o duodeno em busca de qualquer lesão e congestão vascular.Preparar a veia porta do enxerto e a extremidade proximal da aorta aparando as bordas para a anastomose. Coloque o enxerto preparado na bolsa de órgãos com solução de UW em um banho de gelo. Tome biópsias de agulha de núcleo da cauda pancreática, armazene-as em formalina e congele.Extrair RNA em um estágio posterior. Sutura do local da biópsia com Prolene 6-0 em forma de figura de oito. Iniciar a dissecção aortocava identificando o ureter direito e dissecando ao longo da fáscia, separando o ureter do revestimento retroperitoneal sobre a veia cava inferior.Dissecção ao longo da borda lateral da aorta para expô-la do músculo sóleo subjacente. Em seguida, dissecar ao longo do sulco interaortocavo para separar a aorta da VCI. Garantir a mobilização adequada da aorta e da VCI por meio de uma tentativa de colocação de pinças vasculares de Satinsky.Troque de posição com o primeiro assistente e prepare o campo cirúrgico retraindo as alças intestinais do lado esquerdo para expor os grandes vasos para anastomose. Colocar as pinças de ensaio na VCI e na aorta para reavaliar uma mobilização adequada de ambos os vasos para a anastomose. Após a colocação da pinça vascular de mordida lateral na VCI, faça uma pequena abertura na parede anterior do vaso e estenda-a até um tamanho adequado craniana e caudalmente usando tesoura de Potts.Lave o lúmen com soro fisiológico heparinizado usando a bainha flexível de uma cânula IV. Com a agulha dupla Prolene 6-0, faça suturas de canto de dentro para fora na VCI e na veia porta do enxerto. Fixar a sutura do canto da criança e passar uma das agulhas ao longo da parede posterior do enxerto e da veia receptora de forma contínua.Fixar a parede anterior de forma externa e contínua e fixar o nó no centro da parede anterior após lavar a luz da anastomose com solução salina heparinizada. Em seguida, coloque uma pinça vascular do Bulldog na veia porta do enxerto longe da anastomose e solte lentamente a pinça de mordida lateral da VCI receptora. Verifique se há enchimento venoso e qualquer sangramento importante da anastomose.Em seguida, colocar a pinça de mordida lateral na aorta sem lesar os ramos lombares ao longo da parede posteromedial do vaso. Instruir o anestesista a injetar heparina e metilprednisolona através do cateter venoso central. Faça uma abertura na parede anterior do vaso e estenda-a cranial e caudalmente, tomando cuidado para não dissecar ao longo da parede do vaso.Lave o lúmen com soro fisiológico heparinizado. E com agulha dupla Prolene 6-0, sutura da extremidade proximal da aorta do enxerto à abertura aórtica do receptor de forma contínua pela técnica do paraquedas. Lavar o lúmen com soro fisiológico heparinizado antes de amarrar o nó final na parede anterior do vaso.Antes de iniciar a reperfusão, verifique as alterações hemodinâmicas para qualquer queda drástica da PA média. Monitorar minuto a minuto a PA invasiva e realizar uma titulação de dose do vasopressor e da pré-carga hídrica para manter a PA média alvo entre 45 e 50 milímetros de mercúrio. Em seguida, manter a hemostasia após a retirada da pinça Bulldog da veia, avaliando se há sangramento maior do parênquima, região paraaórtica e área periportal. Solte a pinça aórtica e verifique se há sangramento no local da anastomose arterial.Fixar os pontos de sangramento com ligaduras e sutura hemostática. Peça ao anestesista para injetar um frasco de ácido tranexâmico através do cateter venoso central. É essencial minimizar o manuseio agressivo do pâncreas durante essa fase de reperfusão para evitar edema e hematoma do enxerto.Após não haver torção mesentérica, isolar uma alça de jejuno a 40 a 50 centímetros de distância da junção duodenojejunal e aproximá-la do enxerto. Anastomosar o duodeno do enxerto ao jejuno receptor de forma contínua látero-lateral com fio de polidioxanona 4-0. Confirmar hemostasia ao redor do enxerto e nos locais de anastomose.Em seguida, faça três biópsias com agulha grossa da cauda pancreática uma hora após a reperfusão. Armazenar em formalina, congelar snap, e extrair RNA mais tarde. Sutura do local da biópsia com Prolene 6-0 em forma de figura de oito.Após avaliação da presença de esfregões retidos e hemostasia, sutura contínua do músculo reto abdominal com agulha de polidioxanona 0, mantendo a linha média inferior afastada da uretra. Fechar a pele com pontos contínuos de seda 0. Crie um túnel subcutâneo no pescoço e fixe o cateter venoso central enterrando-o sob o túnel e suturando a pele sobrejacente com uma agulha de corte Silk 0-0.Após garantir uma PA média estável e uma tendência de melhora do pH e dos níveis de lactato na gasometria, remova o cateter arterial e ligue o vaso para garantir a hemostasia no pescoço. Feche a pele sobrejacente com sutura de seda 0 de forma contínua. A frequência cardíaca média uma hora após a reperfusão foi de 135 batimentos por minuto, em média, e a pressão arterial média foi de aproximadamente 37 mililitros de mercúrio.Esses níveis foram mantidos sob uma alta dose de infusão de noradrenalina, que pôde ser reduzida e interrompida em todos os cinco casos antes de deslocar o animal de volta para sua baia. Os níveis de lactato foram monitorados na sala de cirurgia por três horas após a reperfusão. Todos os cinco animais estavam clinicamente alertas, evidenciados pela movimentação ativa dos membros e padrão respiratório dentro de cinco a seis horas da reperfusão.Os níveis pós-operatórios de amilase, lipase sérica e lactato desidrogenase foram monitorados nos primeiros três dias. Um teste de tolerância à glicose de 120 minutos foi realizado no terceiro dia de pós-operatório. Amostras de sangue foram posteriormente retiradas e processadas para níveis de glicose em dois minutos, cinco minutos, 10 minutos, 20 minutos 30 minutos, 60 minutos, 90 minutos e 120 minutos.O manuseio meticuloso da arcada vascular ao redor do pâncreas durante a pancreatectomia é crucial. E realizar esta etapa cuidadosamente garante um bom suprimento vascular para o duodeno no final da cirurgia, que por sua vez é um determinante fundamental do sucesso após a pancreatectomia. Essa técnica abriu a opção de perfusão em máquina com transplante em modelos suínos e estabeleceu modelos de sobrevida.

Research

JoVE Journal

Medicine

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

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Medicina

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

O transplante de válvula pulmonar Usando um modelo do rato de Heterotópica Transplante de Coração

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Mouse Model for Pancreas Transplantation Using a Modified Cuff Technique

Modelo do rato para transplante de pâncreas, usando uma técnica modificada do manguito

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A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

Um modelo do rato de ortotópico transplante hepático, usando uma técnica de anastomose magnético romance para reconstrução de veia Cava Suprahepatic

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A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Um modelo pré-clínico porcino de transplante cardíaco ortotópico

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Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach

Transplante de rim de rato ortotópico: uma abordagem cirúrgica nova e simplificada

Kidney transplantation offers increased survival rates and improved quality of life for patients with end-stage renal disease, as compared to any type of ...

Laparoscopic Radical Left Pancreatectomy for Pancreatic Cancer: Surgical Strategy and Technique Video

Pancreatectomia esquerda radical laparoscópica para câncer pancreático: estratégia cirúrgica e vídeo técnico

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Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP

Transplante ortotópico de pulmão esquerdo em modelo suíno juvenil para PESL

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. ...