Name: quantitative determination of de novo fatty acid synthesis in brown adipose tissue using deuterium oxide
Uploaded: 2023-05-12T12:10:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantitative Determination of De Novo Fatty Acid Synthesis in Brown Adipose Tissue Using Deuterium Oxide at JoVE.com

نشكر أعضاء مختبر سانشيز جورماتشيس ووالاس على المناقشات القيمة. تم دعم هذا العمل بمنح من جمعية القلب الأمريكية (18CDA34080527 إلى JSG و 19POST34380545 إلى RM) ، والمعاهد الوطنية للصحة (R21OD031907 إلى JSG) ، وجائزة مجلس أمناء CCHMC ، وجائزة مركز CCHMC لعلم جينوم الأطفال ، وجائزة مركز CCHMC لعلم الجينوم والعلاجات المندلية. تم دعم هذا العمل جزئيا من قبل NIH P30 DK078392 من المركز الأساسي لأبحاث أمراض الجهاز الهضمي في سينسيناتي. المحتوى هو مسؤولية المؤلفين وحدهم ولا يمثل بالضرورة الآراء الرسمية للمعاهد الوطنية للصحة. تم دعم RT و MW من خلال زمالة UCD Ad Astra.

تمت الموافقة على جميع التجارب من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوانات المؤسسية في المركز الطبي لمستشفى سينسيناتي للأطفال.
1. إعداد D2O
ملاحظة: لتجنب التباين التجريبي ، قم بإعداد محلول / مياه شرب كافية لجميع الفئران طوال مدة التجربة.
<ol><li>للحقن داخل...

يعد فهم التوازن والتفاعل بين المسارات الأيضية المعقدة خطوة لا غنى عنها نحو فهم الأساس البيولوجي للأمراض المرتبطة بالتمثيل الغذائي. هنا ، نعرض منهجية غير جراحية وغير مكلفة لتحديد التغييرات في تخليق الأحماض الدهنية دي نوفو. هذه الطريقة مقتبسة من الطرق المنشورة سابقا والتي طورت حسابات...

السمنة والأمراض الأيضية المرتبطة بها هي جائحة تعرض الأجيال الحالية والمستقبلية للخطر 1,2. عادة ما يتم تبسيطه كنتيجة لعدم التوازن بين استهلاك الطاقة والإنفاق ، يؤثر عدم التنظيم الأيضي المرتبط بالسمنة على عدد كبير من المسارات الأيضية التي تتحكم فيها العوامل البيئية والداخلية3. ومع ذلك ، يتم اختبار عدد قليل فقط من المسارات بشكل روتيني في النماذج الحيوانية من عدم التنظيم الأيضي.
على سبيل المثال ، يتم قياس التخلص من الجلوكوز بشكل روتيني عن طريق اختبارات تحمل الجلوكوز والأنسولين ، ربما بسبب بساطة استخدام أجهزة مراقبة الجلوكوز المحمولة4. كما يتم تقدير المعدلات النسبية لجلوكوز الجسم بالكامل وأكسدة الدهون بشكل روتيني بناء على نسبة التبادل التنفسي من مقايسات القياس الحراري غير المباشر 5,6. ومع ذلك ، فإن غالبية جميع الجوانب الأخرى لعملية التمثيل الغذائي لا يتم تقييمها وظيفيا بشكل روتيني. هذا يؤدي إلى تفسيرات غير مكتملة لحالة التمثيل الغذائي والخيارات العلاجية المفقودة. واحدة من هذه المسارات الرئيسية هي دي نوفو ليبوجينيسيس.
De novo lipogenesis (DNL) هي العملية التي يتم من خلالها توليد أحماض دهنية جديدة من السلائف. يعتبر الجلوكوز السلائف الرئيسية التي تساهم في DNL7 لكامل الجسم ، ولكن السلائف الأخرى ، مثل الأسيتات والفركتوز واللاكتات والأحماض الأمينية المتفرعة السلسلة ، قد ثبت أنها مصادر كربون ذات صلة بطريقة مكانية وتعتمد على الحالة8،9،10،11،12. DNL هو مساهم رئيسي في التوازن الأيضي وهو ضروري للتطور الطبيعي13. بالإضافة إلى ذلك ، ارتبطت التغيرات في DNL بالسرطان 14,15 والتمثيل الغذائي 16,17,18 وأمراض القلب والأوعية الدموية 19,20.
يتكون مسار DNL من المكونات الأنزيمية الأساسية ATP citrate lyase (ACLY) ، و acetyl-CoA carboxylase (ACC1 / 2) ، وسينسيز الأحماض الدهنية (FAS) التي تنتج بشكل أساسي بالميتات ، وهو حمض دهني مشبع ب 16 كربونا. ومع ذلك ، يمكن أيضا إنتاج الأحماض الدهنية ذات السلسلة الفردية والمتفرعة بمعدلات أقل9. تعمل Elongases و desaturases على تعديل هذه الأحماض الدهنية ، مما يخلق مجموعة متنوعة من أنواع الأحماض الدهنية المفيدة لمجموعة متنوعة من الوظائف (على سبيل المثال ، تخزين الطاقة على المدى الطويل والتلاعب بسيولة الغشاء).
يتم التحكم في التعبير عن الآلية الأنزيمية DNL من خلال عدد قصير من عوامل النسخ. الأكثر وصفا حتى الآن تشمل عائلة بروتين ربط العناصر التنظيمية للستيرول (SREBP) ، وبروتين ربط عنصر استجابة الكربوهيدرات (ChREBP) ، ومستقبلات الكبد X (LXR) 21،22،23،24،25،26. على الرغم من التداخل الواضح في وظائفها ، فقد تم الإبلاغ عن اللوائح الفردية القائمة على هيمنة نوع الخلية والظروف الفسيولوجية أو المرضية21،22،27،28.
ومن اللافت للنظر أن عددا من مثبطات خطوات مختارة من مسار DNL قد تمت الموافقة عليها للاستخدام السريري أو في المراحل قبل السريرية أو السريرية من التطور لعدد من الأمراض ، بما في ذلك السمنة ومرض الكبد الدهني غير الكحولي / التهاب الكبد الدهني غير الكحولي (NAFLD / NASH) وأمراض القلب والأوعية الدموية29. تسلط هذه الجهود الضوء على أهمية DNL في الصحة والمرض.
في السنوات الأخيرة ، زاد استخدام طرق التقييم الكمي لتخليق الأحماض الدهنية الجديدة 30. الطريقة الأكثر شيوعا لتقييم ذلك هي استخدام الماء الثقيل المسمى (D2O) ، حيث يتم دمج الهيدروجين الثقيل المسمى في سلاسل الأسيل أثناء التخليق بشكل مباشر وغير مباشر ، عن طريق تبادل الديوتيريوم مع الهيدروجين من ركائز DNL NAPDH و acetyl-CoA و malonyl-CoA. على الرغم من أن هذا النهج يكتسب شعبية ، إلا أن هناك نقصا في البروتوكولات التفصيلية المتاحة للجمهور والمناسبة للقادمين الجدد في هذا المجال. هنا ، نحدد طريقة للتقييم الكمي لتوليف دي نوفو لمنتجات FAS باستخدام D2O وقياس الطيف الكتلي اللوني للغاز (GCMS) ، مع الحسابات التي طورها Lee et al.31 سابقا. تقيس هذه الطريقة تخليق الأحماض الدهنية بشكل مستقل عن مصدر الكربون ، ومن المحتمل أن تكون مفيدة لأي نسيج تقريبا ، في أي نموذج فأر ، وتحت أي اضطراب خارجي. هنا ، نركز على تحليل الأنسجة الدهنية البنية (BAT) بسبب مستوياتها العالية من DNL والأدوار الحاسمة في الحفاظ على التوازن الأيضي.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>4 mL Glass Vials</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-955-334</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.2 &#181;m filter</td>
			<td>Olympus Plastic</td>
			<td>25-244</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>26G needeled syringes</td>
			<td>BD</td>
			<td>309597</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Merck</td>
			<td>34850</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Merck</td>
			<td>900667</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blue GC screw cap with septa</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>5190-1599</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5424R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>366927</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deuterium oxide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>151882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Di-tert-butyl-4-methylphenol (BHT) 
			Select FAME Column</td>
			<td>Merck</td>
			<td>B1378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Di-tert-butyl-4-methylphenol (BHT) 
			Select FAME Column</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>CP7419</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA tube</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>411395105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Merck</td>
			<td>51976</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hexadecenoic-d31 Acid</td>
			<td>Larodan</td>
			<td>71-1631</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hexane</td>
			<td>Merck</td>
			<td>34859</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Merck</td>
			<td>34860</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge tube</td>
			<td>Olympus Plastic</td>
			<td>24-282</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse environmental chamber</td>
			<td>Caron</td>
			<td>Caron 7001-33</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potasium Chloride</td>
			<td>Fisher Bioreagents</td>
			<td>BP366-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potasium Phosphate</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>194727</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SafeLock microcentrifuge tubes</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>30120086</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Screw top amber GC vial</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>5182-0716</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Fisher Bioreagents</td>
			<td>BP358-212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Hydroxide</td>
			<td>Merck</td>
			<td>S5881</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Phosphate, dibasic</td>
			<td>Fisher Bioreagents</td>
			<td>BP332-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Sulfate</td>
			<td>Merck</td>
			<td>239313</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sulfuric Acid</td>
			<td>Merck</td>
			<td>258105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vial insert</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>5183-2088</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantitative determination of de novo fatty acid synthesis in brown adipose tissue using deuterium oxide

تخليق الأحماض الدهنية هو مسار أيضي معقد ويتطلب طاقة عالية مع أدوار وظيفية مهمة في السيطرة على التوازن الأيضي للجسم بالكامل والعمليات الفسيولوجية والمرضية الأخرى. على عكس المسارات الأيضية الرئيسية الأخرى ، مثل التخلص من الجلوكوز ، لا يتم تقييم تخليق الأحماض الدهنية وظيفيا بشكل روتيني ، مما يؤدي إلى تفسيرات غير كاملة لحالة التمثيل الغذائي. بالإضافة إلى ذلك ، هناك نقص في البروتوكولات التفصيلية المتاحة للجمهور والمناسبة للقادمين الجدد في هذا المجال. هنا ، نصف طريقة كمية غير مكلفة باستخدام أكسيد الديوتيريوم وقياس الطيف الكتلي اللوني للغاز (GCMS) لتحليل تخليق الأحماض الدهنية الكلية دي نوفو في الأنسجة الدهنية البنية في الجسم الحي. تقيس هذه الطريقة تخليق منتجات سينسيز الأحماض الدهنية بشكل مستقل عن مصدر الكربون ، ومن المحتمل أن تكون مفيدة لأي نسيج تقريبا ، في أي نموذج فأر ، وتحت أي اضطراب خارجي. وترد تفاصيل عن إعداد العينة لنظام GCMS والحسابات النهائية. نحن نركز على تحليل الدهون البنية بسبب مستوياتها العالية من تخليق الأحماض الدهنية دي نوفو والأدوار الحاسمة في الحفاظ على التوازن الأيضي.

استنادا إلى جرعات D 2 O الموصوفة في الخطوة 1 ، نجد عادة أن مياه الجسم غنية في حدود2.5٪ إلى 6٪ ، وأن مستوى خط الأساس لتخصيب الديوتيريوم في مياه الجسم يتحقق بسرعة في ساعة واحدة ويتم الحفاظ عليه طوال مدة الدراسة عن طريق مياه الشرب المخصبة بنسبة 8٪ (الشكل 1). التخصيب المستم?...

Watch this Scientific Journal Video about Quantitative Determination of De Novo Fatty Acid Synthesis in Brown Adipose Tissue Using Deuterium Oxide at JoVE.com

Quantitative Determination of De Novo Fatty Acid Synthesis in Brown Adipose Tissue Using Deuterium Oxide

هنا ، نقدم طريقة كمية غير مكلفة باستخدام أكسيد الديوتيريوم وقياس الطيف الكتلي اللوني للغاز (GCMS) لتحليل تكوين الدهون الكلي للأحماض الدهنية في الأنسجة الدهنية البنية في الجسم الحي.

التحديد الكمي لتخليق دي نوفو الأحماض الدهنية في الأنسجة الدهنية البنية باستخدام أكسيد الديوتيريوم

Fatty acid synthesis is a complex and highly energy demanding metabolic pathway with important functional roles in the control of whole-body metabolic ...

على عكس المسارات الأيضية الأخرى مثل التخلص من الجلوكوز ، لا يتم تقييم تخليق الأحماض الدهنية بشكل روتيني ، مما يؤدي إلى تفسيرات غير كاملة لحالة التمثيل الغذائي. تتمثل الفوائد الرئيسية لهذه الطريقة في أنها غير جراحية نسبيا ، ومن المحتمل أن تكون انعكاسا أفضل لتدفق تخليق الأحماض الدهنية من استخدام الجلوكوز المسمى بالنظائر حيث يمكن أن تؤثر التغييرات في معالجة الجلوكوز في المنبع على النتائج. هنا ، نركز على الأنسجة الدهنية البنية ، ولكن هذه الطريقة قد تكون مفيدة لدراسة أي نسيج في أي نموذج فأر.للبدء ، ضع العينات على الثلج الجاف. خذ أنبوب طرد مركزي دقيق المسمى مسبقا ، وضعه على ميزان تحليلي وكشف الميزان. ثم ضع ملاقط ومشرط أو شفرة حلاقة فولاذية على الثلج الجاف لمدة 10 إلى 20 ثانية لتبرد.استخدم الملقط لإخراج عينة الأنسجة المجمدة من الأنبوب ووضعها على قارب وزن بلاستيكي ، والذي يمكن وضعه على كتلة مسطحة من الثلج الجاف أو سطح آخر مبرد مسبقا. باستخدام المشرط أو شفرة الحلاقة الفولاذية ، قم بتشريح جزء صغير من الأنسجة يعادل وزن 5 إلى 15 ملليغرام ، وضعه في أنبوب الطرد المركزي الدقيق. سجل الوزن الدقيق وكرر لكل عينة.أضف ميكرولتر واحد لكل ملليغرام من حمض D31 سداسي الملي مولار ، متبوعا بثلاث حبات من الفولاذ المقاوم للصدأ خمسة ملليمترات لكل عينة. ثم أضف 250 ميكرولترا من الميثانول و 250 ميكرولترا من الماء و 500 ميكرولترا من الكلوروفورم إلى كل عينة بها خرز. ضع الأنابيب في كتلة مبردة مسبقا من مطحنة الطحن واخلط العينات بتردد اهتزازي يبلغ 25 هرتز لمدة خمس دقائق.قم بإزالة الخرزات باستخدام مغناطيس وأجهزة طرد مركزي للعينات عند 12،000 جم لمدة 10 دقائق عند أربع درجات مئوية. باستخدام ماصة صغيرة ، خذ حجما ثابتا من المرحلة السفلية لكل عينة في أنابيب الطرد المركزي الدقيقة ذات العلامات المقابلة. أضف 500 ميكرولتر من الكلوروفورم إلى العينة المتبقية وكرر هذه الخطوات.ضع الأنابيب مع المرحلة السفلية المدمجة تحت غاز النيتروجين أو في فراغ طرد مركزي مبرد مقاوم للكلوروفورم عند أربع درجات مئوية حتى يجف تماما. ماصة 98 ملليلتر من الميثانول اللامائي في زجاجة وسائط زجاجية. وأضف ببطء ملليلتر من حمض الكبريتيك اللامائي في غطاء الدخان لإنتاج 2٪ حمض الكبريتيك في الميثانول.تخلط عن طريق تحريك الزجاجة المغلقة. أضف 500 ميكرولتر من حمض الكبريتيك 2٪ في محلول الميثانول لكل عينة ودوامة لفترة وجيزة. احتضان العينات على الكتلة الحرارية عند 50 درجة مئوية لمدة ساعتين وإضافة 100 ميكرولتر من محلول كلوريد الصوديوم المشبع و 500 ميكرولتر من الهكسان لكل عينة.دوامة العينات بقوة في درجة حرارة الغرفة لمدة دقيقة واحدة وترك العينات للجلوس لمدة دقيقة واحدة. يجب أن تكون المرحلتان واضحتين بعد ذلك. اجمع المرحلة العليا في أنبوب طرد مركزي جديد.ثم كرر إضافة الهكسان. وبعد فصل الطور ، اجمع عينات المرحلة العليا الثانية في نفس الأنابيب الموسومة. جفف العينات في درجة حرارة الغرفة تحت غاز النيتروجين وأعد تعليق العينات في 20 ميكرولترا من الهكسان لكل ملليغرام من وزن الأنسجة الأصلي.انقل العينات على الفور إلى قارورة كروماتوغرافيا غاز زجاجية مع ملحق زجاجي. حقن العينات في مطياف كتلة كروماتوغرافيا غاز رباعي واحد لتحديد وفرة استرات ميثيل الأحماض الدهنية أو نظائر FAMEs. أدخل ميكرولترا واحدا من العينة في مدخل مقسم أو غير مقسم عند درجة حرارة مدخل 270 درجة سلزية باستخدام الهليوم كغاز حامل.في أنابيب الطرد المركزي الدقيقة ذات القفل الآمن ، اجمع بين 10 ميكرولتر من كل عينة بلازما أو أربعة ميكرولترات قياسية من 10 هيدروكسيد الصوديوم المولي وأربعة ميكرولتر من الأسيتون 5٪ في الأسيتونيتريل. نفذ ذلك في ثلاث نسخ لكل عينة. بعد احتضان العينات طوال الليل في درجة حرارة الغرفة ، أضف 450 إلى 550 ملليغرام من كبريتات الصوديوم إلى كل عينة ، وأضف 600 ميكرولتر من الكلوروفورم إلى كل أنبوب في غطاء الدخان ، ودوامة قوية لمدة 15 ثانية.أجهزة الطرد المركزي العينات في 300 غرام لمدة دقيقتين. خذ قوارير GCMS الزجاجية ذات العلامات مع إدخالات زجاجية وانقل ثلاث نسخ ثم 80 ميكرولتر من المادة الطافية من كل عينة إلى القنينات. قم بتغطية القوارير بإحكام لتحليل GCMS.النسبة المئوية لتخصيب D2O في بلازما الفئران خلال نقاط زمنية متعددة موضحة هنا. وقد وجد أن مياه الجسم غنية في حدود 2.5 إلى 6 ٪ أن مستوى خط الأساس لتخصيب الديوتيريوم في مياه الجسم يتم تحقيقه بسرعة في ساعة واحدة والحفاظ عليه طوال مدة الدراسة. يظهر هنا التوزيع النظائري الشامل للبالميتات في الأنسجة الدهنية البنية بعد ثلاثة أيام من إعطاء D2O في درجة حرارة الغرفة والحياد الحراري.تظهر هذه النتيجة إثراء أعلى للديوتيريوم M1 و M2 في درجة حرارة الغرفة. يتم عرض إثراء ضرس الأنسجة الدهنية البنية وإثراء البلازما لمجموعة من الأحماض الدهنية بعد ثلاثة أيام من إعطاء D2O في درجة حرارة الغرفة والحياد الحراري في هذا الشكل. تم العثور على تخصيب درجة الحرارة الباردة في مجموعة واسعة من الأحماض الدهنية في الأنسجة الدهنية البنية.والجدير بالذكر أن إثراء الأحماض الدهنية الكلي في البلازما لا يتبع نفس اتجاه الأنسجة الدهنية البنية ، ولكن بدلا من ذلك ، يتم زيادة إثراء الأحماض الدهنية مع الحياد الحراري. تمثل هذه الصور الوفرة الكلية والبالميتات التي تم تصنيعها من دي نوفو في الأنسجة الدهنية البنية بعد ثلاثة أيام من إعطاء D2O. تظهر النتيجة زيادة في تخليق بالميتات الكلي في درجة حرارة الغرفة.كن حذرا عند تشغيل الأحماض الدهنية على GCMS. تأكد من عدم تحميل بالميتات بشكل زائد لأنه يمكن أن يعطي قيم تخصيب نظائر عالية بشكل مصطنع. بالإضافة إلى ذلك ، عند تحليل الأسيتون على GCMS ، تأكد من عدم وجود ذروة الأسيتون في الخلفية قبل تشغيل العينات ، لذا قم بتشغيل الفراغات لإزالة أي أسيتون في النظام.تتناول هذه الطريقة إجمالي الأحماض الدهنية عبر فئات متعددة من الليبيدات، ولكن إذا كنت تريد أن تفهم كيف يؤثر تخليق الأحماض الدهنية على فئات معينة من الليبيدات، فيمكنك أولا فصل هذه الفئات من الليبيدات باستخدام الكروماتوغرافيا ثم استخراج الأحماض الدهنية من هذه الكسور. نظرا لأن تكوين الدهون هو مساهم رئيسي في التطور الطبيعي ، ولكن أيضا في العديد من الأمراض ، يمكن أن يكون هذا البروتوكول مفيدا في العديد من المجالات.

Research

JoVE Journal

Biology

Quantitative Determination of De Novo Fatty Acid Synthesis in Brown Adipose Tissue Using Deuterium Oxide

Quantitative Phosphoproteomics in Fatty Acid Stimulated Saccharomyces cerevisiae

Quantitative Phosphoproteomics in Fatty Acid Stimulated Saccharomyces cerevisiae

حفز Phosphoproteomics الكمية في الأحماض الدهنية السكيراء الجعوية</em

This protocol describes the growth and stimulation, with the fatty acid oleate, of isotopically heavy and light S. cerevisiae cells. Cells are ground ...

Protein WISDOM: A Workbench for In silico De novo Design of BioMolecules

Protein WISDOM: A Workbench for In silico De novo Design of BioMolecules

الحكمة البروتين: A منضدة لل<em&gt; في السيليكون</em&gt;<em&gt; دي نوفو</em&gt; تصميم الجزيئات الحيوية

The aim of de novo protein design is to find the amino acid sequences that will fold into a desired 3-dimensional structure with improvements in specific ...

Determination of Fatty Acid Oxidation and Lipogenesis in Mouse Primary Hepatocytes

تقرير من أكسدة الأحماض الدهنية وتكون الدهون في خلايا الكبد الفأر الابتدائية

Lipid metabolism in liver is complex. In addition to importing and exporting lipid via lipoproteins, hepatocytes can oxidize lipid via fatty acid ...

Methods for the Determination of Rates of Glucose and Fatty Acid Oxidation in the Isolated Working Rat Heart

طرق تقدير من معدلات الجلوكوز والأحماض الدهنية الأكسدة في عزل قلب الجرذ العمل

The mammalian heart is a major consumer of ATP and requires a constant supply of energy substrates for contraction. Not surprisingly, alterations of ...

De Novo Generation of Somatic Stem Cells by YAP/TAZ

De Novo Generation of Somatic Stem Cells by YAP/TAZ

دي نوفو جيل خلايا الجذعية الجسدية من ياب/طاز

Here we present protocols to isolate primary differentiated cells and turn them into stem/progenitor cells (SCs) of the same lineage by transient ...

Synthesis of 68Ga Core-doped Iron Oxide Nanoparticles for Dual Positron Emission Tomography /(T1)Magnetic Resonance Imaging

Synthesis of 68Ga Core-doped Iron Oxide Nanoparticles for Dual Positron Emission Tomography /T1Magnetic Resonance Imaging

التوليف من 68Ga جسيمات نانوية أكسيد الحديد يخدر الأساسية للتصوير المقطعي بانبعاث البوزيترون المزدوج/التصوير الرنين المغناطيسي (تي1)

Here, we describe a microwave synthesis to obtain iron oxide nanoparticles core-doped with 68Ga. Microwave technology enables fast and reproducible ...

Assessment of de novo Protein Synthesis Rates in Caenorhabditis elegans

Assessment of de novo Protein Synthesis Rates in Caenorhabditis elegans

تقييم معدلات تخليق البروتينات في Caenorhabditis elegans

Maintaining a healthy proteome is essential for cell and organismal homeostasis. Perturbation of the balance between protein translational control and ...

Exploring Adipose Tissue Structure by Methylsalicylate Clearing and 3D Imaging

استكشاف بنية الأنسجة الدهنية من ميثيل ساليسيلات المقاصة والتصوير ثلاثي الأبعاد

Obesity is a major worldwide public health issue that increases the risk to develop cardiovascular diseases, type-2 diabetes, and liver diseases. Obesity ...

Adipose Tissue-Derived Stem Cell Isolation and Characterization

Isolation and Identification of Mesenchymal Stem Cells Derived from Adipose Tissue of Sprague Dawley Rats

Isolation and Identification of Mesenchymal Stem Cells Derived from Adipose Tissue of Sprague Dawley Rats (Video) | JoVE 

عزل وتحديد الخلايا الجذعية الوسيطة المشتقة من الأنسجة الدهنية لفئران Sprague Dawley

Adult mesenchymal cells have revolutionized molecular and cell biology in recent decades. They can differentiate into different specialized cell types, in ...

Quantification of Skeletal Muscle Fatty Infiltration via Decellularization

Decellularization-Based Quantification of Skeletal Muscle Fatty Infiltration

Decellularization-Based Quantification of Skeletal Muscle Fatty Infiltration (Video) | JoVE 

القياس الكمي القائم على إزالة الخلايا للتسلل الدهني للعضلات الهيكلية

Fatty infiltration is the accumulation of adipocytes between myofibers in skeletal muscle and is a prominent feature of many myopathies, metabolic ...