Name: syngeneic mouse orthotopic allografts to model pancreatic cancer
Uploaded: 2022-10-04T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Syngeneic Mouse Orthotopic Allografts to Model Pancreatic Cancer at JoVE.com

We willen de TUM-dierenfaciliteit en de beeldvormingskernfaciliteit van de afdeling Nucleaire Geneeskunde, Klinikum rechts der Isar, bedanken voor de uitstekende technische ondersteuning. Deze studie werd ondersteund door het German Cancer Consortium (DKTK), Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG SA 1374/4-2, DFG SA 1374/6-1, SFB 1321 Project-ID 329628492 P06, P11 en S01) aan D.S., de Wilhelm Sander-Stiftung (2020.174.1 en 2017.091.2) aan D.S., en de European Research Council (ERC CoG No. 648521, to D.S.).

De dierproeven werden goedgekeurd door de institutionele dierverzorgings- en gebruikscommissies (IACUCs) van de lokale autoriteiten van de Technische Universiteit van München en Regierung von Oberbayern.
1. Informatie waarmee voorafgaand aan de procedure rekening moet worden gehouden
<ol><li>Zorg voor goedkeuring van het dierprotocol en personeel door de lokale autoriteiten voordat u met dierproeven begint.</li>
	<li>Selecteer ontvangermuizen.<ol><li>Selecteer muizen van ve...

<ol>
	<li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+statistics,+2020.">Cancer statistics, 2020.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 70 (1), 7-30 (2020).</li><li>Quaresma, M., Coleman, M. P., Rachet, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=40-year+trends+in+an+index+of+survival+for+all+cancers+combined+and+survival+adjusted+for+age+and+sex+for+each+cancer+in+England+and+Wales,+1971-2011:+A+population-based+study.">40-year trends in an index of survival for all cancers combined and survival adjusted for age and sex for each cancer in England and Wales, 1971-2011: A population-based study.</a> Lancet. 385 (9974), 1206-1218 (2015).</li><li>Rahib, L., Wehner, M. R., Matrisian, L. M., Nead, K. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimated+projection+of+US+cancer+incidence+and+death+to+2040.">Estimated projection of US cancer incidence and death to 2040.</a> JAMA Network Open. 4 (4), 214708 (2021).</li><li>Schneider, G., Schmidt-Supprian, M., Rad, R., Saur, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-specific+tumorigenesis:+Context+matters.">Tissue-specific tumorigenesis: Context matters.</a> Nature Reviews Cancer. 17 (4), 239-253 (2017).</li><li>Olive, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+Hedgehog+signaling+enhances+delivery+of+chemotherapy+in+a+mouse+model+of+pancreatic+cancer.">Inhibition of Hedgehog signaling enhances delivery of chemotherapy in a mouse model of pancreatic cancer.</a> Science. 324 (5933), 1457-1461 (2009).</li><li>Ruscetti, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Senescence-induced+vascular+remodeling+creates+therapeutic+vulnerabilities+in+pancreas+cancer.">Senescence-induced vascular remodeling creates therapeutic vulnerabilities in pancreas cancer.</a> Cell. 181 (2), 424-441 (2020).</li><li>Aung, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomics-driven+precision+medicine+for+advanced+pancreatic+cancer:+Early+results+from+the+COMPASS+trial.">Genomics-driven precision medicine for advanced pancreatic cancer: Early results from the COMPASS trial.</a> Clinical Cancer Research. 24 (6), 1344-1354 (2018).</li><li>Chan-Seng-Yue, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcription+phenotypes+of+pancreatic+cancer+are+driven+by+genomic+events+during+tumor+evolution.">Transcription phenotypes of pancreatic cancer are driven by genomic events during tumor evolution.</a> Nature Genetics. 52 (2), 231-240 (2020).</li><li>Kalimuthu, S. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+classification+of+pancreatic+ductal+adenocarcinoma+that+predicts+molecular+subtypes+and+correlates+with+clinical+outcome.">Morphological classification of pancreatic ductal adenocarcinoma that predicts molecular subtypes and correlates with clinical outcome.</a> Gut. 69 (2), 317-328 (2020).</li><li>Hayashi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+unifying+paradigm+for+transcriptional+heterogeneity+and+squamous+features+in+pancreatic+ductal+adenocarcinoma.">A unifying paradigm for transcriptional heterogeneity and squamous features in pancreatic ductal adenocarcinoma.</a> Nature Cancer. 1 (1), 59-74 (2020).</li><li>Mueller, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolutionary+routes+and+KRAS+dosage+define+pancreatic+cancer+phenotypes.">Evolutionary routes and KRAS dosage define pancreatic cancer phenotypes.</a> Nature. 554 (7690), 62-68 (2018).</li><li>Falcomata, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+multi-kinase+inhibition+sensitizes+mesenchymal+pancreatic+cancer+to+immune+checkpoint+blockade+by+remodeling+the+tumor+microenvironment.">Selective multi-kinase inhibition sensitizes mesenchymal pancreatic cancer to immune checkpoint blockade by remodeling the tumor microenvironment.</a> Nature Cancer. 3 (3), 318-336 (2022).</li><li>Erstad, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+and+heterotopic+murine+models+of+pancreatic+cancer+and+their+different+responses+to+FOLFIRINOX+chemotherapy.">Orthotopic and heterotopic murine models of pancreatic cancer and their different responses to FOLFIRINOX chemotherapy.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 11 (7), (2018).</li><li>von Burstin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=E-cadherin+regulates+metastasis+of+pancreatic+cancer+in+vivo+and+is+suppressed+by+a+SNAIL/HDAC1/HDAC2+repressor+complex.">E-cadherin regulates metastasis of pancreatic cancer in vivo and is suppressed by a SNAIL/HDAC1/HDAC2 repressor complex.</a> Gastroenterology. 137 (1), 361-371 (2009).</li><li>Mallya, K., Gautam, S. K., Aithal, A., Batra, S. K., Jain, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+pancreatic+cancer+in+mice+for+experimental+therapeutics.">Modeling pancreatic cancer in mice for experimental therapeutics.</a> Biochimica et Biophysica Acta - Reviews on Cancer. 1876 (1), 188554 (2021).</li></ol>

Syngenetische orthotopische allografts bij muizen vormen een robuust model voor preklinische studies vanwege hun kosteneffectiviteit, reproduceerbaarheid en relatief eenvoudige experimentele procedures13,15. Deze modellen maken niet alleen de studie van tumor-gastheerinteracties mogelijk, maar garanderen ook het behoud van de genetische heterogeniteit van de tumoren waaruit ze afkomstig zijn wanneer primaire muiscelculturen voor het experiment worden gebruikt.</p...

Onlangs werd PDAC de derde belangrijkste oorzaak van kankergerelateerde sterfgevallen in de westerse wereld1. Het veroorzaakt het hoogste sterftecijfer van alle kankers en een 10-jaars totale overlevingskans van ~ 1%, die al tientallen jaren niet is veranderd2. Vanwege het gebrek aan vooruitgang in de PDAC-behandeling, wordt verwacht dat deze ziekte de tweede belangrijkste oorzaak van kankergerelateerde sterfgevallen zal worden in het volgende decennium3.
PDAC-tumoren zijn complexe entiteiten die worden gekenmerkt door een diverse tumormicro-omgeving (TME) die bestaat uit een heterogene samenstelling van stroma-, vasculaire, immuun- en extracellulaire matrixcomponenten4. Verschillen in de samenstelling van de TME beïnvloeden de ziekteprognose en respons op therapie 4,5,6. Inderdaad, veel studies hebben aangetoond dat het basale, mesenchymale subtype van PDAC geassocieerd is met een zeer immunosuppressieve TME en een verminderde overleving en gebrek aan respons op therapieënvertoont 7,8,9,10,11,12. Daarom blijft een dieper begrip van de verschillen in TME-samenstelling en hoe deze kenmerken de tumorbiologie beïnvloeden een belangrijke factor voor de ontwikkeling van moleculair nauwkeurige therapieën. Om de biologie achter dit complexe fenotype beter te begrijpen en therapeutische strategieën te identificeren die in staat zijn om de barrière te overwinnen die de TME van PDAC vormt, zijn in vivo modellen onmisbaar.
Een belangrijk aspect voor elk preklinisch kankermodelsysteem is dat het menselijke fenotypen moet nabootsen, waarbij zowel de genetische heterogeniteit als het milieu de veelheid aan stromale en immuunpopulaties die deel uitmaken van de TME wordt samengevat. Daarom moet bij het kiezen van muismodellen voor preklinisch onderzoek rekening worden gehouden met verschillende aspecten. Om de tumor-immuuninteractie te onderzoeken, kunnen histocompatibele kankercellijnen worden geïnjecteerd in syngeneïsche immunocompetente muizen. In de meeste gevallen worden deze subcutaan geïnjecteerd in de flank van de muis, waardoor eenvoudige tumormonitoring door palpatie of visuele inspectie mogelijk is. De resulterende modellen bootsen echter niet de groei van tumorcellen in hun orgaan van oorsprong na. Daarom werden orthotopische transplantaties de gouden standaard voor allograftmodellen.
Orthotopische allografts bij muizen hebben verschillende voordelen: ze zijn kosteneffectief, kunnen worden gegenereerd met een relatief eenvoudige procedure en resulteren in modellen met bekende moleculaire make-up, evenals een reproduceerbare en voorspelbare tumorprogressie en fenotype. Inderdaad, terwijl patiënt-afgeleide xenograftmodellen het gedrag van menselijke PDAC-cellen nauwkeurig weergeven, beperkt de behoefte aan implantatie in immunodeficiënte muizen om transplantaatafstoting te voorkomen de analyse van de tumor-immuun- en tumor-stroma-interacties, waardoor onderzoekers slechts een gedeeltelijk beeld van de complexiteit van deze tumoren kunnen vastleggen. Syngenetische orthotopische allografts van PDAC hebben in dit opzicht ook een voordeel ten opzichte van genetisch gemanipuleerde muismodellen (GEMM's). GEMM's vatten de menselijke PDAC-tumorigenese en de heterogeniteit waargenomen bij PDAC-patiënten nauwkeurig samen. Vanwege deze kenmerken kunnen GEMM-tumoren echter een hoge variantie vertonen in hun genetische samenstelling, tumorprogressie, agressiviteit, histologische differentiatie en TME-samenstelling. Hoewel dit een voordeel kan zijn in bepaalde studies, beperkt het genotype-naar-fenotypestudies en het gerichte onderzoek van PDAC-fenotypen13. Daarom vormen orthotopische allografts van muizen een goede afweging en model om tumor-gastheer- en behandelingsstudies in vivo uit te voeren. Dit artikel schetst een protocol voor orthotopische transplantatie-experimenten van muizen PDAC-cellen in de muispancreas.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>27 G cannula</td>
			<td>B.Braun</td>
			<td>08915992</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atipamezole (Antisedan 5 mg/mL)</td>
			<td>Orion Corporation</td>
			<td>23554.00.00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Autoclip Stainless Steel Wound Clips, 9 mm</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>NC9334081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco`s Modified Eagle Medium&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D5796-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye cream (Bepanthen)</td>
			<td>Bayer Vital GmbH</td>
			<td>1578675</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S0615</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fentanyl (50 &#181;g/mL)</td>
			<td>Eurovet Animal Health BV</td>
			<td>9113473</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flumazenile (Flumazenil-hameln 0.1 mg/mL)</td>
			<td>Hameln pharma</td>
			<td>09611975</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medetomidine (Sedator 1 mg/mL)</td>
			<td>Eurovet Animal Health BV</td>
			<td>400926.00.00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam (Metacam 5 mg/mL)</td>
			<td>Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH</td>
			<td>3937902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microliter syringe</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>HT80908</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam (5 mg/mL)</td>
			<td>Hexal</td>
			<td>00886423</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>2737756</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Naloxone (Naloxon-hameln 0.4 mg/mL)</td>
			<td>hameln pharma</td>
			<td>04464535</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P7059-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P4333-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture (Ethilon)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>9999034</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TrypZean Solution 1x</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T3449</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

syngeneic mouse orthotopic allografts to model pancreatic cancer

Pancreas ductaal adenocarcinoom (PDAC) is een zeer complexe ziekte die wordt gekenmerkt door een heterogene tumormicro-omgeving die bestaat uit een divers stroma, immuuncellen, bloedvaten, zenuwen en extracellulaire matrixcomponenten. In de loop der jaren zijn verschillende muismodellen van PDAC ontwikkeld om de uitdagingen aan te pakken die worden gesteld door de progressie, het metastatische potentieel en de fenotypische heterogeniteit. Immunocompetente muis orthotopische allografts van PDAC zijn veelbelovend gebleken vanwege hun snelle en reproduceerbare tumorprogressie in vergelijking met genetisch gemanipuleerde muismodellen. Bovendien, in combinatie met hun vermogen om de biologische kenmerken na te bootsen die worden waargenomen in autochtone PDAC, maken op cellijn gebaseerde orthotopische allograftmuismodellen grootschalige in vivo experimenten mogelijk. Deze modellen worden dus veel gebruikt in preklinische studies voor snelle genotype-fenotype- en geneesmiddelresponsanalyses. Het doel van dit protocol is om een reproduceerbare en robuuste aanpak te bieden voor het succesvol injecteren van primaire muis PDAC-celculturen in de pancreas van syngenetische ontvangende muizen. Naast de technische details wordt belangrijke informatie gegeven die moet worden overwogen voordat deze experimenten worden uitgevoerd.

In het kader van een grootschalig geneesmiddelresponsonderzoek hebben we met succes meer dan 170 muizen geïmplanteerd (C75Bl6/J-ontvangende muizen, mannelijke en vrouwelijke muizengeslacht afgestemd op de geïnjecteerde PDAC-cellijnen) met behulp van het hierboven beschreven protocol, geïllustreerd in de belangrijkste stappen in figuur 112. In dit protocol hebben we orthotopisch drie KrasG12D-gedreven PDAC-cellijnen geïmplanteerd (PDAC 1 en 2: <...

Watch this Scientific Journal Video about Syngeneic Mouse Orthotopic Allografts to Model Pancreatic Cancer at JoVE.com

Syngeneic Mouse Orthotopic Allografts to Model Pancreatic Cancer

Syngenetische muis orthotopische allografts van pancreas ductaal adenocarcinoom (PDAC) recapituleren de biologie, fenotypen en therapeutische reacties van ziektesubtypen. Vanwege hun snelle, reproduceerbare tumorprogressie worden ze veel gebruikt in preklinische studies. Hier tonen we gemeenschappelijke praktijken om deze modellen te genereren, waarbij syngenetische murine PDAC-culturen in de alvleesklier worden geïnjecteerd.

Syngeneic Mouse Orthotopic Allografts om alvleesklierkanker te modelleren

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is a very complex disease characterized by a heterogeneous tumor microenvironment made up of a diverse stroma, ...

Dit protocol biedt reproduceerbare, immunocompetente PDAC in vivo modellen die geschikt zijn voor genotype, fenotype en geneesmiddelresponsstudies. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is het vermogen om tumorprogressie te helpen onderzoeken met een syngenetische biologische tumormicro-omgeving met behoud van de reproduceerbaarheid van het experiment. Stefanie Barthel en Chiara Falcomata, beiden komen uit ons laboratorium, zullen de procedure demonstreren.Begin met de bereiding van de tumorcellen door het ductale adenocarcinoom van de alvleesklier of PDAC-cellen te wassen, gekweekt in een T75-kweekkolf met fosfaat gebufferde zoutoplossing of PBS. Voeg vervolgens gedurende vijf tot 10 minuten 0,5 milliliter trypsine toe om los te komen van de kolf. Suspensie van de losgemaakte cellen opnieuw in 10 milliliter DMEM met 10% foetaal runderserum of FBS en 0,1% penicilline streptomycine voordat de celsuspensie wordt overgebracht naar een buis van 15 milliliter.Centrifugeer de celsuspensie op 200G gedurende vijf minuten en zuig het supernatant op. Suspensie van de celpellet in DMEM zonder toevoegingen, op basis van de vereiste eindconcentratie van de cellen voor injectie. Tel de cellen in 10 microliter celsuspensie met behulp van de Neubauer-kamer en bereken het aantal beschikbare cellen.Breng één milliliter van de verdunde suspensie, volgens de uiteindelijke vereiste concentratie, over in een buis van 1,5 milliliter. Plaats de buis op een rotator tot implantatie om celaggregatie te voorkomen. Voor orthotopische implantatie van PDAC-cellen, breng oogcrème aan op de geangosedateerde muis terwijl de muis slaapt.Controleer de voldoende analgosedatie voordat u de linker laterale buikflank van de geangosedeerde muis scheert. Plaats de muis, liggend aan de rechterkant, op een steriele verwarmingsmat en plak de poten op het oppervlak. Draag nieuwe handschoenen en desinfecteer ze.Knip met een chirurgische schaar ongeveer een centimeter van de huid en het onderhuidse vetweefsel in de lengterichting op de linkerflank waar de milt wordt geprojecteerd. Scheid met behulp van een schaar en een tang de huid van het peritoneum om gemakkelijker toegang te krijgen tot het peritoneum. Vervang de schaar voordat u het peritoneum opent op de plaats van de milt met een lengtesnede van één centimeter.Tijdens het mobiliseren van de milt en de aangehechte alvleesklier met behulp van een stompe, fijne tang, moet u ervoor zorgen dat de organen niet aan ander weefsel zijn bevestigd. Controleer ook op de toevoerende bloedvaten om te voorkomen dat de bloedvaten of het omliggende weefsel worden verwond bij het hanteren van de alvleesklier. Trek de alvleesklier voorzichtig uit de incisie om gemakkelijker toegang te krijgen tot de staart van het orgaan en observeer de milt die de alvleesklier volgt.Zorg ervoor dat het orgaan niet wordt gevouwen tijdens de injectie en dat de capsule van het orgaan onder spanning wordt gehouden op de naaldpenetratieplaats om morsen te voorkomen. Streef naar een stukje pancreasweefsel tussen de zichtbare bloedvaten om het risico op het doorboren of injecteren van het bloedvat te minimaliseren. Gebruik de dominante hand en peneer voorzichtig de capsule van het orgaan met een canule van 27 gauge en een spuit van 50 microliter langs de lengteas van het orgaan.Na het injecteren van de 20 microliter suspensie met 2.500 cellen in het staartgebied van de alvleesklier, houdt u de alvleesklier en de spuit ongeveer een minuut stil om te voorkomen dat de tumorcellen worden gemorst. Verwijder vervolgens de naald van de injectieplaats. Herschik vervolgens zorgvuldig de organen in de buik zonder het weefsel te verwonden om te voorkomen dat de cellen worden gemorst.Vermijd orgaanhechting door een milliliter 0,9% natriumchloride op de organen te gieten. Na het hechten van het peritoneum met behulp van de eenvoudige onderbroken hechttechniek, sluit u de huid met twee tot drie negen millimeter roestvrijstalen wondclips. Vervolgens antagoniseren van de analgosedatie met midazolam, medetomadine en fentanyl, of MMF, met een subcutane injectie van AFN volgens het lichaamsgewicht van de muis.Als u klaar bent, plaatst u de muis in een verwarmde kamer van 37 graden Celsius totdat deze wakker en volledig actief is. Plaats de actieve muis terug in de oorspronkelijke kooi en controleer de gezondheidsstatus van de muis door de vacht, huidskleur en activiteit te controleren en herhaal deze drie tot vier uur na de operatie. Bij MRI van geïmplanteerde muizen werd de engraftment van PDAC-cellen het vroegst abdominaal gepalpeerd ongeveer zeven dagen na de operatie, afhankelijk van het geïnjecteerde celaantal en de agressiviteit en groeikenmerken van de geënte cellijn.De overleving van de resulterende geïmplanteerde muizen varieerde afhankelijk van de intrinsieke kenmerken van de tumorcel van de cellijnen. Succesvolle intra-pancreasinjecties leidden tot volledige tumoren in de muizenalvleesklier. Daarentegen resulteerden mislukte implantaties in de afwezigheid van pancreastumoren vanwege injectie van niet-levensvatbare cellen, afstoting van de geïmplanteerde cellen of injectie van een onvoldoende aantal cellen.Vergeet niet om op te letten dat er geen cellen worden gemorst tijdens injecties en dat u geen omringend weefsel verwondt om te voorkomen dat cellen zich in de buik verspreiden. Na deze procedure kunnen in vivo studies, zoals preklinische geneesmiddelresponsstudies, worden uitgevoerd bij immunocompetente muizen, gevolgd door bijvoorbeeld feiten, sequencing of histologische analyse om interacties met tumorgastheer te onderzoeken.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Fluorescent Orthotopic Mouse Model of Pancreatic Cancer

Fluorescent Orthotopic Mouse Model of Pancreatic Cancer Video (Video) | JoVE

Fluorescerende orthotope Muis Model van pancreaskanker

Pancreatic cancer remains one of the cancers for which survival has not improved substantially in the last few decades. Only 7% of diagnosed patients will ...

A Syngeneic Mouse Model of Metastatic Renal Cell Carcinoma for Quantitative and Longitudinal Assessment of Preclinical Therapies

A Syngeneic Mouse Model of Metastatic Renal Cell Carcinoma for Quantitative and Longitudinal Assessment of Preclinical Therapies Video (Video) | JoVE

Een Syngenische muismodel van gemetastaseerd niercelcarcinoom voor Kwantitatieve en Longitudinale Evaluatie van de preklinische therapieën

Renal cell carcinoma (RCC) affects &#62; 60,000 people in the United States annually, and ~ 30% of RCC patients have multiple metastases at the time of ...

Isolation of Circulating Tumor Cells in an Orthotopic Mouse Model of Colorectal Cancer

Isolation of Circulating Tumor Cells in an Orthotopic Mouse Model of Colorectal Cancer Video (Video) | JoVE

Isolatie van circulerende tumorcellen in een orthotopische muismodel van colorectale kanker

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, subcutaneous mouse models have severe limitations and do not accurately simulate ...

A Syngeneic Pancreatic Cancer Mouse Model to Study the Effects of Irreversible Electroporation

Een muismodel van Syngeneic Pancreatic kanker te bestuderen van de gevolgen van onomkeerbaar Electroporation

Pancreatic cancer (PC), a disease which kills approximately 40,000 patients each year in the US, has successfully evaded several therapeutic approaches ...

A Bioluminescent and Fluorescent Orthotopic Syngeneic Murine Model of Androgen-dependent and Castration-resistant Prostate Cancer

Een bioluminescente en fluorescerende Orthotopic Syngeneic lymfkliertest Model van androgeen-afhankelijke en castratie-resistente prostaatkanker

Orthotopic tumor modeling is a valuable tool for pre-clinical prostate cancer research, as it has multiple advantages over both subcutaneous and ...

Immunophenotyping of Orthotopic Homograft (Syngeneic) of Murine Primary KPC Pancreatic Ductal Adenocarcinoma by Flow Cytometry

Immunophenotyping of Orthotopic Homograft Syngeneic of Murine Primary KPC Pancreatic Ductal Adenocarcinoma by Flow Cytometry

Immunophenotyping van Orthotopic Homograft (Syngeneic) van de alvleesklier ductaal adenocarcinoom lymfkliertest primaire KPC door Stroom Cytometry

Homograft (syngeneic) tumors are the workhorse of today&#39;s immuno-oncology (I/O) preclinical research. The tumor microenvironment (TME), particularly ...

Orthotopic Transplantation of Syngeneic Lung Adenocarcinoma Cells to Study PD-L1 Expression

Orthotopic transplantatie van Syngeneic Long adenocarcinoom cellen te bestuderen van PD-L1 expressie

The use of mouse models is indispensable for studying the pathophysiology of various diseases. With respect to lung cancer, several models are available, ...

A Syngeneic Mouse B-Cell Lymphoma Model for Pre-Clinical Evaluation of CD19 CAR T Cells

Een Syngeneic B-cel lymfoom muismodel voor pre-klinische evaluatie van CD19 auto T cellen

The astonishing clinical success of CD19 chimeric antigen receptor (CAR) T-cell therapy has led to the approval of two second generation chimeric antigen ...

Studying Triple Negative Breast Cancer Using Orthotopic Breast Cancer Model

Studeren Triple Negatieve Borstkanker met behulp van Orthotopische Borstkanker Model

Triple-negative breast cancer (TNBC) is an aggressive breast cancer subtype with limited therapeutic options. When compared to patients with less ...

Ultrasound-Guided Orthotopic Implantation of Murine Pancreatic Ductal Adenocarcinoma

Echografie-geleide Orthotopic implantatie van Murine pancreatic Ductal adenocarcinoom

The recent success of immune checkpoint blockade in melanoma and lung adenocarcinoma has galvanized the field of immuno-oncology as well as revealed the ...