Name: technical applications of microelectrode array and patch clamp recordings on human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes
Uploaded: 2022-08-04T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Technical Applications of Microelectrode Array and Patch Clamp Recordings on Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Cardiomyocytes at JoVE.com

हम पांडुलिपि को प्रूफरीडिंग करने के लिए ब्लेक वू को धन्यवाद देते हैं। इस काम को राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान (एनआईएच) आर01 एचएल113006, आर01 एचएल141371, आर01 एचएल163680, आर01 एचएल141851, यू01एफडी005978, और नासा एनएनएक्स16ए069ए (जेसीडब्ल्यू), और एएचए पोस्टडॉक्टरल फैलोशिप 872244 (जीएमपी) द्वारा समर्थित किया गया था।

1. मीडिया और समाधान की तैयारी
<ol><li>50x B27 पूरक की 10 mL बोतल और RPMI 1640 माध्यम की 500 mL बोतल को मिलाकर HIPSC-CM रखरखाव माध्यम तैयार करें। माध्यम को 4 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें और एक महीने के भीतर इसका उपयोग करें। उप?...

<ol>
	<li>Wouters, O. J., McKee, M., Luyten, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimated+research+and+development+investment+needed+to+bring+a+new+medicine+to+market,+2009-2018.">Estimated research and development investment needed to bring a new medicine to market, 2009-2018.</a> Journal of the American Medical Association. 323 (9), 844-853 (2020).</li><li>Pang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Workshop+report:+FDA+workshop+on+improving+cardiotoxicity+assessment+with+human-relevant+platforms.">Workshop report: FDA workshop on improving cardiotoxicity assessment with human-relevant platforms.</a> Circulation Research. 125 (9), 855-867 (2019).</li><li>Mamoshina, P., Rodriguez, B., Bueno-Orovio, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+a+broader+view+of+mechanisms+of+drug+cardiotoxicity.">Toward a broader view of mechanisms of drug cardiotoxicity.</a> Cell Reports Medicine. 2 (3), 100216 (2021).</li><li>Paik, D. T., Chandy, M., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patient+and+disease-specific+induced+pluripotent+stem+cells+for+discovery+of+personalized+cardiovascular+drugs+and+therapeutics.">Patient and disease-specific induced pluripotent stem cells for discovery of personalized cardiovascular drugs and therapeutics.</a> Pharmacological Reviews. 72 (1), 320-342 (2020).</li><li>Kaese, S., Verheule, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+electrophysiology+in+mice:+a+matter+of+size.">Cardiac electrophysiology in mice: a matter of size.</a> Frontiers in Physiology. 3, 345 (2012).</li><li>Clark, W. A., Chizzonite, R. A., Everett, A. W., Rabinowitz, M., Zak, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Species+correlations+between+cardiac+isomyosins.+A+comparison+of+electrophoretic+and+immunological+properties.">Species correlations between cardiac isomyosins. A comparison of electrophoretic and immunological properties.</a> Journal of Biological Chemistry. 257 (10), 5449-5454 (1982).</li><li>Werfel, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+circular+RNAs+in+human,+mouse,+and+rat+hearts.">Characterization of circular RNAs in human, mouse, and rat hearts.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 98, 103-107 (2016).</li><li>Burridge, P. 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N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+PDGFRA+signaling+contributes+to+filamin+C-related+arrhythmogenic+cardiomyopathy.">Activation of PDGFRA signaling contributes to filamin C-related arrhythmogenic cardiomyopathy.</a> Science Advances. 8 (8), (2022).</li><li>Sharma, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput+screening+of+tyrosine+kinase+inhibitor+cardiotoxicity+with+human+induced+pluripotent+stem+cells.">High-throughput screening of tyrosine kinase inhibitor cardiotoxicity with human induced pluripotent stem cells.</a> Science Translational Medicine. 9 (377), (2017).</li><li>Burridge, P. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+induced+pluripotent+stem+cell-derived+cardiomyocytes+recapitulate+the+predilection+of+breast+cancer+patients+to+doxorubicin-induced+cardiotoxicity.">Human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes recapitulate the predilection of breast cancer patients to doxorubicin-induced cardiotoxicity.</a> Nature Medicine. 22 (5), 547-556 (2016).</li><li>Kitani, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human-induced+pluripotent+stem+cell+model+of+trastuzumab-induced+cardiac+dysfunction+in+patients+with+breast+cancer.">Human-induced pluripotent stem cell model of trastuzumab-induced cardiac dysfunction in patients with breast cancer.</a> Circulation. 139 (21), 2451-2465 (2019).</li><li>Matsa, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptome+profiling+of+patient-specific+human+iPSC-cardiomyocytes+predicts+individual+drug+safety+and+efficacy+responses+in+vitro.">Transcriptome profiling of patient-specific human iPSC-cardiomyocytes predicts individual drug safety and efficacy responses in vitro.</a> Cell Stem Cell. 19 (3), 311-325 (2016).</li><li>Stillitano, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+susceptibility+to+drug-induced+long+QT+with+a+panel+of+subject-specific+induced+pluripotent+stem+cells.">Modeling susceptibility to drug-induced long QT with a panel of subject-specific induced pluripotent stem cells.</a> Elife. 6, (2017).</li><li>Zhang, J. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protocol+to+measure+contraction,+calcium,+and+action+potential+in+human-induced+pluripotent+stem+cell-derived+cardiomyocytes.">Protocol to measure contraction, calcium, and action potential in human-induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes.</a> STAR Protocols. 2 (4), 100859 (2021).</li><li>Blinova, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=International+multisite+study+of+human-induced+pluripotent+stem+cell-derived+cardiomyocytes+for+drug+proarrhythmic+potential+assessment.">International multisite study of human-induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes for drug proarrhythmic potential assessment.</a> Cell Reports. 24 (13), 3582-3592 (2018).</li><li>Greensmith, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ca+analysis:+an+Excel+based+program+for+the+analysis+of+intracellular+calcium+transients+including+multiple,+simultaneous+regression+analysis.">Ca analysis: an Excel based program for the analysis of intracellular calcium transients including multiple, simultaneous regression analysis.</a> Computer Methods and Programs in Biomedicine. 113 (1), 241-250 (2014).</li><li>Ma, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determining+the+pathogenicity+of+a+genomic+variant+of+uncertain+significance+using+CRISPR/Cas9+and+human-induced+pluripotent+stem+cells.">Determining the pathogenicity of a genomic variant of uncertain significance using CRISPR/Cas9 and human-induced pluripotent stem cells.</a> Circulation. 138 (23), 2666-2681 (2018).</li><li>Lam, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identifying+the+transcriptome+signatures+of+calcium+channel+blockers+in+human+induced+pluripotent+stem+cell-derived+cardiomyocytes.">Identifying the transcriptome signatures of calcium channel blockers in human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes.</a> Circulation Research. 125 (2), 212-222 (2019).</li><li>Seeger, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+premature+termination+codon+mutation+in+MYBPC3+causes+hypertrophic+cardiomyopathy+via+chronic+activation+of+nonsense-mediated+decay.">A premature termination codon mutation in MYBPC3 causes hypertrophic cardiomyopathy via chronic activation of nonsense-mediated decay.</a> Circulation. 139 (6), 799-811 (2019).</li><li>Zhang, J. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+cryopreservation+on+human+induced+pluripotent+stem+cell-derived+cardiomyocytes+for+assessing+drug+safety+response+profiles.">Effects of cryopreservation on human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes for assessing drug safety response profiles.</a> Stem Cell Reports. 16 (1), 168-181 (2021).</li><li>Yu, B., Zhao, S. R., Yan, C. D., Zhang, M., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deconvoluting+the+cells+of+the+human+heart+with+iPSC+technology:+cell+types,+protocols,+and+uses.">Deconvoluting the cells of the human heart with iPSC technology: cell types, protocols, and uses.</a> Current Cardiology Reports. 24 (5), 487-496 (2022).</li><li>Thomas, D., Cunningham, N. J., Shenoy, S., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human-induced+pluripotent+stem+cells+in+cardiovascular+research:+current+approaches+in+cardiac+differentiation,+maturation+strategies,+and+scalable+production.">Human-induced pluripotent stem cells in cardiovascular research: current approaches in cardiac differentiation, maturation strategies, and scalable production.</a> Cardiovascular Research. 118 (1), 20-36 (2022).</li><li>Zhu, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physical+developmental+cues+for+the+maturation+of+human+pluripotent+stem+cell-derived+cardiomyocytes.">Physical developmental cues for the maturation of human pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes.</a> Stem Cell Research &amp; Therapy. 5 (5), 117 (2014).</li><li>Feyen, D. A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+maturation+media+improve+physiological+function+of+human+iPSC-derived+cardiomyocytes.">Metabolic maturation media improve physiological function of human iPSC-derived cardiomyocytes.</a> Cell Reports. 32 (3), 107925 (2020).</li><li>Gintant, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+human+induced+pluripotent+stem+cell-derived+cardiomyocytes+in+preclinical+cancer+drug+cardiotoxicity+testing:+a+scientific+statement+from+the+American+Heart+Association.">Use of human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes in preclinical cancer drug cardiotoxicity testing: a scientific statement from the American Heart Association.</a> Circulation Research. 125 (10), 75-92 (2019).</li><li>Kussauer, S., David, R., Lemcke, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=hiPSCs+Derived+cardiac+cells+for+drug+and+toxicity+screening+and+disease+modeling:+what+micro-+electrode-array+analyses+can+tell+us.">hiPSCs Derived cardiac cells for drug and toxicity screening and disease modeling: what micro- electrode-array analyses can tell us.</a> Cells. 8 (11), (2019).</li><li>Ng, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput+phenotyping+of+heteromeric+human+ether-a-go-go-related+gene+potassium+channel+variants+can+discriminate+pathogenic+from+rare+benign+variants.">High-throughput phenotyping of heteromeric human ether-a-go-go-related gene potassium channel variants can discriminate pathogenic from rare benign variants.</a> Heart Rhythm. 17 (3), 492-500 (2020).</li><li>Obergrussberger, A., Friis, S., Bruggemann, A., Fertig, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+patch+clamp+in+drug+discovery:+major+breakthroughs+and+innovation+in+the+last+decade.">Automated patch clamp in drug discovery: major breakthroughs and innovation in the last decade.</a> Expert Opinion on Drug Discovery. 16 (1), 1-5 (2021).</li><li>Kozek, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput+discovery+of+trafficking-deficient+variants+in+the+cardiac+potassium+channel+KV11.1.">High-throughput discovery of trafficking-deficient variants in the cardiac potassium channel KV11.1.</a> Heart Rhythm. 17 (12), 2180-2189 (2020).</li><li>Heyne, H. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predicting+functional+effects+of+missense+variants+in+voltage-gated+sodium+and+calcium+channels.">Predicting functional effects of missense variants in voltage-gated sodium and calcium channels.</a> Science Translational Medicine. 12 (556), (2020).</li><li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+an+automated+patch-clamp+platform+for+electrophysiological+and+pharmacological+evaluation+of+hiPSC-CMs.">Establishment of an automated patch-clamp platform for electrophysiological and pharmacological evaluation of hiPSC-CMs.</a> Stem Cell Research. 41, 101662 (2019).</li><li>Li, W., Luo, X., Ulbricht, Y., Guan, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blebbistatin+protects+iPSC-CMs+from+hypercontraction+and+facilitates+automated+patch-clamp+based+electrophysiological+study.">Blebbistatin protects iPSC-CMs from hypercontraction and facilitates automated patch-clamp based electrophysiological study.</a> Stem Cell Research. 56, 102565 (2021).</li><li>Milligan, C. J., M&#246;ller, C., Gamper, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Ion Channels: Methods and Protocols. , 171-187 (2013).</li></ol>

मानव आईपीएससी प्रौद्योगिकी रोग मॉडलिंग और दवा स्क्रीनिंग के लिए एक शक्तिशाली मंच के रूप में उभरी है। यहां, हम HIPSC-CM अनुबंध, क्षेत्र क्षमता, कार्रवाई क्षमता और Ca2+ क्षणिक को मापने के लिए एक विस्तृत प्रो...

दवा विकास एक लंबी और महंगी प्रक्रिया है। 2009 और 2018 के बीच यूएस फूड एंड ड्रग एडमिनिस्ट्रेशन (एफडीए) द्वारा अनुमोदित नई चिकित्सीय दवाओं के एक अध्ययन ने बताया कि पूंजीकृत अनुसंधान और नैदानिक परीक्षणों की अनुमानित औसत लागत $ 985 मिलियन प्रति उत्पाद1 थी। दवा-प्रेरित कार्डियोटॉक्सिसिटीदवा एट्रिशन और बाजार से वापसी का प्रमुख कारण है। विशेष रूप से, कार्डियोटॉक्सिसिटी चिकित्सीय दवाओंके कई वर्गों के बीच रिपोर्ट की जाती है। इसलिए, दवा विकास प्रक्रिया के दौरान हृदय सुरक्षा मूल्यांकन एक महत्वपूर्ण घटक है। हृदय सुरक्षा मूल्यांकन के लिए वर्तमान प्रतिमान अभी भी पशु मॉडल पर अत्यधिक निर्भर है। हालांकि, पशु मॉडल के उपयोग से प्रजातियों के अंतर को मानव रोगियों में दवा-प्रेरित कार्डियोटॉक्सिसिटी के लिए गलत भविष्यवाणियों के प्राथमिक कारण के रूप में तेजी से मान्यता प्राप्तहै। उदाहरण के लिए, हृदय क्रिया क्षमता की आकृति विज्ञान विभिन्न पुनर्ध्रुवीकरण धाराओंके योगदान के कारण मनुष्यों और चूहों के बीच काफी भिन्न होता है। इसके अलावा, कार्डियक मायोसिन और सर्कुलर आरएनए के अंतर आइसोफॉर्म जो कार्डियक फिजियोलॉजी को प्रभावित कर सकते हैं, प्रजातियों 6,7 के बीच अच्छी तरह से प्रलेखित किए गए हैं। इन अंतरालों को पाटने के लिए, प्रीक्लिनिकल कार्डियक सुरक्षा मूल्यांकन के लिए एक विश्वसनीय, कुशल और मानव-आधारित मॉडल स्थापित करना अनिवार्य है।
प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम सेल (आईपीएससी) तकनीक के अभूतपूर्व आविष्कार ने अभूतपूर्व दवा स्क्रीनिंग और रोग मॉडलिंग प्लेटफॉर्म उत्पन्न किए हैं। पिछले एक दशक में, मानव-प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम सेल-व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट्स (HIPSC-CMs) उत्पन्न करने के तरीके अच्छी तरहसे स्थापित हो गए हैं। HIPSC-CM ने रोग मॉडलिंग, दवा-प्रेरित कार्डियोटॉक्सिसिटी स्क्रीनिंग और सटीक चिकित्सा में अपने संभावित अनुप्रयोगों में बहुत रुचि आकर्षित की है। उदाहरण के लिए, एचआईपीएससी-सीएम का उपयोग आनुवंशिक वंशानुक्रम के कारण हृदय रोगों के पैथोलॉजिकल फेनोटाइप को मॉडल करने के लिए किया गया है, जैसे कि लंबे क्यूटी सिंड्रोम10, हाइपरट्रॉफिक कार्डियोमायोपैथी 11,12, और पतला कार्डियोमायोपैथी 13,14,15। नतीजतन, हृदय रोगों के रोगजनन में निहित प्रमुख सिग्नलिंग मार्गों की पहचान की गई है, जो प्रभावी उपचार के लिए संभावित चिकित्सीय रणनीतियों पर प्रकाश डाल सकते हैं। इसके अलावा, एचआईपीएससी-सीएम का उपयोग एंटीकैंसर एजेंटों से जुड़े दवा-प्रेरित कार्डियोटॉक्सिसिटी को स्क्रीन करने के लिए किया गया है, जिसमें डॉक्सोर्यूबिसिन, ट्रास्टुज़ुमाब और टायरोसिन किनेज इनहिबिटर 16,17,18 शामिल हैं; परिणामी कार्डियोटॉक्सिसिटी को कम करने के लिए रणनीतियों की जांच की जा रही है। अंत में, एचआईपीएससी-सीएम में रखी गई आनुवंशिक जानकारी व्यक्तिगत और जनसंख्या स्तर19,20 दोनों पर दवा-प्रेरित कार्डियोटॉक्सिसिटी की स्क्रीनिंग और भविष्यवाणी की अनुमति देती है। सामूहिक रूप से, HIPSC-CM व्यक्तिगत हृदय सुरक्षा भविष्यवाणी के लिए एक अमूल्य उपकरण साबित हुए हैं।
इस प्रोटोकॉल का समग्र लक्ष्य एचआईपीएससी-सीएम की कार्यात्मक विशेषताओं की व्यापक और कुशलतापूर्वक जांच करने के लिए कार्यप्रणाली स्थापित करना है, जो रोग मॉडलिंग, दवा-प्रेरित कार्डियोटॉक्सिसिटी स्क्रीनिंग और सटीक चिकित्सा की ओर एचआईपीएससी-सीएम को लागू करने में बहुत महत्वपूर्ण हैं। यहां, हम HIPSC-CM के कार्यात्मक गुणों का आकलन करने के लिए कार्यात्मक परखों की एक सरणी का विस्तार करते हैं, जिसमें अनुबंध, क्षेत्र क्षमता, कार्रवाई क्षमता और कैल्शियम (Ca2+) हैंडलिंग (चित्रा 1) की माप शामिल है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>35 mm glass bottom dish with 20 mm micro-well #1.5 cover glass</td>
			<td>Cellvis</td>
			<td>D35-20-1.5-N</td>
			<td>Patch clamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50x B27 supplements</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>17504-044</td>
			<td>hiPSC-CM culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well culture plate</td>
			<td>E &#38; K Scientific</td>
			<td>EK-27160</td>
			<td>hiPSC-CM culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well flat clear bottom black polystyrene TC-treated microplates</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3603</td>
			<td>Contraction motion measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Accutase</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A6964</td>
			<td>Enzymatic dissociation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Axion&#39;s Integrated Studio (AxIS)</td>
			<td>Axion Biosystems</td>
			<td></td>
			<td>navigator software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Borosilicate glass capillaries</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>BF 100-50-10,</td>
			<td>Patch clamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2 1 M in H2O</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>21115</td>
			<td>Tyrode&#8217;s solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell counting chamber slides</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>C10228</td>
			<td>Cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CytoView 48-well MEA plates</td>
			<td>Axion Biosystems</td>
			<td>M768-tMEA-48B</td>
			<td>MEA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F12</td>
			<td>Gibco/Life Technologies</td>
			<td>12634028</td>
			<td>Extracellular matrix medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS, no calcium, no magnesium</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-190-250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGTA</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E3889</td>
			<td>Intracellular pipette solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EPC 10 USB&#160;patch clamp amplifier</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>89-5000</td>
			<td>Patch clamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fura-2, AM, cell permeant</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>F1221</td>
			<td>Ca2+ transient measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G8270</td>
			<td>Tyrode&#8217;s solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H3375</td>
			<td>Tyrode&#8217;s solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hiPSCs</td>
			<td>Stanford Cardiovascular Institute iPSC Biobank</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>529552</td>
			<td>Tyrode&#8217;s solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KnockOut Serum Replacement</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>10828-028</td>
			<td>hiPSC-CM seeding medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KOH 8&#160;M</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P4494</td>
			<td>Intracellular pipette solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lambda DG 4</td>
			<td>Sutter Instrument Company</td>
			<td></td>
			<td>Ca2+ transient measurement; ultra-high-speed wavelength switching light source</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luna-FL automated fluorescence cell counter</td>
			<td>WISBIOMED</td>
			<td>LB-L20001</td>
			<td>Cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Maestro Pro&#160;MEA system</td>
			<td>Axion Biosystems</td>
			<td></td>
			<td>MEA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel Growth Factor Reduced (GFR) Basement Membrane Matrix</td>
			<td>Corning</td>
			<td>356231</td>
			<td>Extracellular matrix medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgATP</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A9187</td>
			<td>Intracellular pipette solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M8266</td>
			<td>Tyrode&#8217;s solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S9888</td>
			<td>Tyrode&#8217;s solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH 10&#160;M</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>72068</td>
			<td>Tyrode&#8217;s solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NIS Elements AR</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pluronic F-127 (20% Solution in DMSO)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>P3000MP</td>
			<td>Ca2+ transient measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 medium</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>11875-119</td>
			<td>hiPSC-CM culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sony SI8000 Cell Motion Imaging System</td>
			<td>Sony Biotechnology</td>
			<td></td>
			<td>Contraction motion measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutter Micropipette puller</td>
			<td>Sutter Instruments</td>
			<td>P-97</td>
			<td>Patch clamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue stain</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>T10282</td>
			<td>Cell counting</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

technical applications of microelectrode array and patch clamp recordings on human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes

दवा-प्रेरित कार्डियोटॉक्सिसिटी दवा एट्रिशन और बाजार से वापसी का प्रमुख कारण है। इसलिए, दवा के विकास के दौरान उचित प्रीक्लिनिकल कार्डियक सुरक्षा मूल्यांकन मॉडल का उपयोग करना एक महत्वपूर्ण कदम है। वर्तमान में, हृदय सुरक्षा मूल्यांकन अभी भी पशु अध्ययन पर अत्यधिक निर्भर है। हालांकि, पशु मॉडल प्रजातियों-विशिष्ट मतभेदों के कारण मनुष्यों के लिए खराब ट्रांसलेशनल विशिष्टता से ग्रस्त हैं, विशेष रूप से कार्डियक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल विशेषताओं के संदर्भ में। इस प्रकार, प्रीक्लिनिकल कार्डियक सुरक्षा मूल्यांकन के लिए एक विश्वसनीय, कुशल और मानव-आधारित मॉडल विकसित करने की तत्काल आवश्यकता है। मानव-प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम सेल-व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट्स (एचआईपीएससी-सीएम) दवा-प्रेरित कार्डियोटॉक्सिसिटी स्क्रीनिंग और रोग मॉडलिंग के लिए एक अमूल्य इन विट्रो मॉडल के रूप में उभरे हैं। HIPSC-CM को विभिन्न आनुवंशिक पृष्ठभूमि और विभिन्न रोगग्रस्त स्थितियों वाले व्यक्तियों से प्राप्त किया जा सकता है, जिससे उन्हें व्यक्तिगत रूप से दवा-प्रेरित कार्डियोटॉक्सिसिटी का आकलन करने के लिए एक आदर्श सरोगेट बनाया जा सकता है। इसलिए, एचआईपीएससी-सीएम की कार्यात्मक विशेषताओं की व्यापक जांच करने के लिए कार्यप्रणाली स्थापित करने की आवश्यकता है। इस प्रोटोकॉल में, हम विभिन्न कार्यात्मक परखों का विस्तार करते हैं जिनका मूल्यांकन एचआईपीएससी-सीएम पर किया जा सकता है, जिसमें अनुबंध, क्षेत्र क्षमता, कार्रवाई क्षमता और कैल्शियम हैंडलिंग का माप शामिल है। कुल मिलाकर, प्रीक्लिनिकल कार्डियक सुरक्षा मूल्यांकन में एचआईपीएससी-सीएम को शामिल करने से दवा के विकास में क्रांति लाने की क्षमता है।

यह प्रोटोकॉल बताता है कि एचआईपीएससी-सीएम के संकुचन गति, क्षेत्र क्षमता, कार्रवाई क्षमता और सीए2 + क्षणिक को कैसे मापा जाए। एंजाइमेटिक पाचन, सेल सीडिंग, रखरखाव और कार्यात्मक परख चालन सहित एक योजनाबद?...

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Technical Applications of Microelectrode Array and Patch Clamp Recordings on Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Cardiomyocytes

मानव-प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम सेल-व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट्स (एचआईपीएससी-सीएम) दवा-प्रेरित कार्डियोटॉक्सिसिटी स्क्रीनिंग और रोग मॉडलिंग के लिए एक आशाजनक इन विट्रो मॉडल के रूप में उभरे हैं। यहां, हम एचआईपीएससी-सीएम की अनुबंध और इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी को मापने के लिए एक प्रोटोकॉल का विस्तार करते हैं।

मानव प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम सेल-व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट्स पर माइक्रोइलेक्ट्रोड सरणी और पैच क्लैंप रिकॉर्डिंग के तकनीकी अनुप्रयोग

Drug-induced cardiotoxicity is the leading cause of drug attrition and withdrawal from the market. Therefore, using appropriate preclinical cardiac safety ...

दवा विकास प्रक्रिया के दौरान कार्डियक सुरक्षा मूल्यांकन एक महत्वपूर्ण घटक है। मानव आईपीएससी व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट्स पूर्व-नैदानिक हृदय सुरक्षा मूल्यांकन के लिए एक विश्वसनीय, कुशल और मानव आधारित मॉडल साबित हुए हैं। हमने मानव आईपीएससी व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट्स की कार्यात्मक विशेषता की व्यापक जांच करने के लिए कार्यप्रणाली स्थापित की है, जो वास्तव में महत्वपूर्ण रोग मॉडलिंग, दवा प्रेरित कार्डियो विषाक्तता स्क्रीनिंग और सटीक चिकित्सा हैं।मानक पूर्व-नैदानिक सुरक्षा मूल्यांकन प्रक्रिया में मानव आईपीएससी व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट्स के बढ़ते समावेश में उम्मीदवार के यौगिकों की विषाक्तता की भविष्यवाणी की सटीकता में सुधार करने की क्षमता है। माप लेने से पहले कम से कम 10 दिनों के लिए मानव आईपीएससी व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट्स की खेती करके शुरू करें। तापमान नियंत्रक चालू करें और इसे 37 डिग्री सेल्सियस पर सेट करें।माइक्रोस्कोप, कैमरा और कार्बन डाइऑक्साइड की आपूर्ति चालू करें। प्लेट धारक के पानी के जैकेट को बाँझ विआयनीकृत पानी की उचित मात्रा से भरें। प्लेट धारक पर 96 वेल प्लेट रखें, और कोशिकाओं को कम से कम पांच मिनट के लिए इनक्यूबेट करें।दृश्य सॉफ़्टवेयर खोलें, फिर कैमरा फ्रेम दर को 75 फ्रेम प्रति सेकंड पर सेट करें, और वीडियो या छवि रिज़ॉल्यूशन 1024 x 1024 पिक्सेल पर। ऑटो फोकस और ऑटो ब्राइटनेस फ़ंक्शंस लागू करें, मानव आईपीएससी व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट्स के वीडियो और छवियों को रिकॉर्ड करें। 48 अच्छी तरह से माइक्रोइलेक्ट्रोड सरणी प्लेटों के प्रत्येक कुएं के रिकॉर्डिंग इलेक्ट्रोड क्षेत्र पर अतिरिक्त सेलुलर मैट्रिक्स कोटिंग समाधान की आठ माइक्रोलीटर बूंद सावधानीपूर्वक रखें।फिर कोटिंग समाधान वाष्पीकरण को रोकने के लिए कुओं के आसपास के क्षेत्र में तीन मिलीलीटर बाँझ विआयनीकृत पानी जोड़ें। 200 माइक्रोलीटर पिपेट टिप का उपयोग करके, इलेक्ट्रोड को छूने के बिना एक ही पंक्ति या कॉलम के भीतर अच्छी तरह से सतह से अधिकांश अतिरिक्त सेलुलर मैट्रिक्स माध्यम को हटा दें। रिकॉर्डिंग इलेक्ट्रोड क्षेत्र पर बीज माध्यम की आठ माइक्रोलीटर बूंद में बीज 50,000 कोशिकाएं प्रति कुएं।तब तक दोहराएं जब तक कि सभी कुओं को कोशिकाओं के साथ चढ़ाया न जाए। फिर एक ह्यूमिडिफाइड सेल कल्चर इनक्यूबेटर में माइक्रोइलेक्ट्रोड सरणी प्लेटों को इनक्यूबेट करें। धीरे-धीरे माइक्रोइलेक्ट्रोड सरणी प्लेटों के प्रत्येक कुएं में बीज माध्यम के 150 माइक्रोलीटर जोड़ें।चढ़ाना के 10 वें दिन, माइक्रोस्कोप के तहत मानव आईपीएससी सीएम मोनोलेयर को सहज रूप से पीटने के घनत्व की जांच करें। रिकॉर्डिंग उपकरण में 48 अच्छी तरह से माइक्रोइलेक्ट्रोड सरणी प्लेट रखें। सुनिश्चित करें कि तापमान 37 डिग्री सेल्सियस है और कार्बन डाइऑक्साइड 5% है नेविगेटर सॉफ्टवेयर खोलें।प्रायोगिक सेटअप विंडो में, कार्डियक रीयल टाइम कॉन्फ़िगरेशन और फ़ील्ड संभावित रिकॉर्डिंग का चयन करें। सहज या पेस्ट बीटिंग कॉन्फ़िगरेशन लागू करें। बीट डिटेक्शन पैरामीटर में, डिटेक्शन सीमा को 300 माइक्रो वोल्ट, न्यूनतम बीटिंग अवधि 250 मिलीसेकंड और अधिकतम बीटिंग अवधि को पांच सेकंड तक सेट करें।फ़ील्ड संभावित अवधि गणना के लिए बहुपद प्रतिगमन का चयन करें। जांचें कि क्या बेसलाइन विद्युत गतिविधि संकेत परिपक्व और स्थिर है, और एक से तीन मिनट के लिए बेसलाइन कार्डियक गतिविधियों को प्राप्त करें। प्लेटिंग के 10 दिनों के बाद रिकॉर्डिंग करें।मानव आईपीएससी सीएम रखरखाव माध्यम को टायरोड के समाधान के साथ बदलें, और कोशिकाओं को 15 मिनट के लिए अनुकूलित करने की अनुमति दें। कक्ष में तापमान सेंसर डालें, और 35 मिलीमीटर डिश को अंदर रखें। तापमान को 37 डिग्री सेल्सियस पर समायोजित करें।माइक्रो पिपेट पुलर का उपयोग करके बोरोसिलिकेट ग्लास केशिकाओं से माइक्रो पिपेट खींचें। इंट्रासेल्युलर समाधान के साथ माइक्रो पिपेट भरें, और उन्हें पैच क्लैंप एम्पलीफायर के हेड स्टेज से जुड़े धारक में डालें। अधिग्रहण सॉफ़्टवेयर खोलें, कार्रवाई संभावित रिकॉर्डिंग प्रोटोकॉल लोड करें, और वोल्टेज क्लैंप कॉन्फ़िगरेशन का चयन करें।स्नान समाधान में माइक्रो पिपेट डालें, और उपयुक्त एकल मानव आईपीएससी सीएम का चयन करें। माइक्रोमैनिपुलेटर का उपयोग करके चयनित सेल के बगल में माइक्रो पिपेट की स्थिति को समायोजित और कम करें। जब पिपेट टिप को स्नान समाधान में डाला जाता है, तो ऑसिलोस्कोप मॉनिटर पर पिपेट प्रतिरोध की जांच करें।पिपेट को सेल के करीब रखें, और बढ़ती सील प्रतिरोध को प्रतिबिंबित करने के लिए वर्तमान दालें थोड़ी कम हो जाएंगी। प्रतिरोध बढ़ाने के लिए नकारात्मक दबाव के साथ कोमल चूषण लागू करें। यह एक गीगासल का निर्माण करेगा।फिर सील फ़ंक्शन लागू करें। पूरे सेल रिकॉर्डिंग कॉन्फ़िगरेशन प्राप्त करने के लिए झिल्ली को तोड़ने के लिए अतिरिक्त सक्शन लागू करें। इस बिंदु पर, वोल्टेज क्लैंप मोड से वर्तमान क्लैंप मोड में स्विच करें, या एम्पलीफायर संवाद का उपयोग करके कोई वर्तमान इंजेक्शन नहीं।क्रिया संभावित रिकॉर्डिंग फ़ाइलों को जनरेट करने और सहेजने के लिए रिकॉर्ड बटन दबाएँ। चढ़ाना के कम से कम 10 दिनों के बाद कैल्शियम क्षणिक माप करें। ताजा टायरोड का समाधान और फुरा -2 एएम लोडिंग समाधान तैयार करें।मानव आईपीएससी सीएम रखरखाव माध्यम को एस्पिरेट करें, और टायरोड के घोल के साथ कक्षों को दो बार धोएं। फुरा -2 एएम लोडिंग समाधान के 100 माइक्रोलीटर लागू करें और कमरे के तापमान पर 10 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें। फुरा -2 एएम लोडिंग समाधान को टायरोड के समाधान के साथ बदलें और फुरा -2 एएम के पूर्ण डीस्टेरिफिकेशन के लिए कम से कम पांच मिनट के लिए इनक्यूबेट करें। उल्टे एपिफ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोप के 40x तेल विसर्जन उद्देश्य पर विसर्जन तेल की एक बूंद जोड़ें।सेल कक्ष को माइक्रोस्कोप के चरण एडाप्टर में रखें। स्नान कक्ष में तापमान नियंत्रक तार स्थापित करें, और इसे 37 डिग्री सेल्सियस पर सेट करें। विद्युत क्षेत्र उत्तेजना इलेक्ट्रोड स्थापित करें, और दालों को 20 मिलीसेकंड अवधि के साथ 0.5 हर्ट्ज पर सेट करें।अल्ट्रा हाई स्पीड वेवलेंथ स्विचिंग लाइट सोर्स को चालू करें, और इसे 340 नैनोमीटर और 380 नैनोमीटर फास्ट स्विचिंग मोड पर सेट करें। दोनों तरंग दैर्ध्य के लिए 20 मिलीसेकंड का एक्सपोजर समय और 20 सेकंड का रिकॉर्डिंग समय लागू करें। कैल्शियम क्षणिक के वास्तविक समय परिवर्तनों को दर्शाते हुए वीडियो रिकॉर्ड करें, विश्लेषण के लिए डेटा को स्प्रेडशीट पर निर्यात करें।मानव आईपीएससी व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट्स मोनोलेयर का उपयोग संकुचन गति माप के लिए किया गया था। विश्लेषक सॉफ्टवेयर का उपयोग करके संकुचन विश्राम गति के एक निशान के विश्लेषण ने संकुचन शुरू, संकुचन शिखर, संकुचन अंत, विश्राम शिखर और विश्राम अंत का पता लगाया। मानव आईपीएससी व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट्स मोनोलेयर का पूर्ण कवरेज माइक्रोइलेक्ट्रोड सरणी प्लेटों के भीतर सभी इलेक्ट्रोड पर देखा गया था।प्रत्येक इलेक्ट्रोड द्वारा दर्ज परिपक्व तरंगों ने पहचान योग्य विशेषताओं के साथ हृदय क्षेत्र क्षमता को प्रतिबिंबित किया। विश्लेषण के बाद, बीट अवधि, क्षेत्र संभावित अवधि और स्पाइक आयाम प्राप्त किए गए थे। वर्तमान क्लैंपिंग मोड में पूरे सेल पैच क्लैंप रिकॉर्डिंग ने एकल कार्डियोमायोसाइट्स की सहज कार्रवाई क्षमता को दर्ज किया।विश्लेषण के बाद, आयाम, अधिकतम डायस्टोलिक क्षमता और कार्रवाई संभावित अवधि सहित कई पैरामीटर प्राप्त किए गए थे। कैल्शियम इमेजिंग के विश्लेषण के बाद, समय के साथ एफ 380 अनुपात द्वारा एफ 340 प्राप्त किया गया था, और उत्तेजित कैल्शियम क्षणिकों के कच्चे निशान प्लॉट किए गए थे। इसके अलावा, आयाम, डायस्टोलिक कैल्शियम और कैल्शियम क्षय ताऊ जैसे पैरामीटर प्राप्त किए गए थे।मानव आईपीएससी व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट्स का उपयोग करना महत्वपूर्ण है जो अच्छी पिटाई की स्थिति में हैं, साथ ही साथ मानव आईपीएससी व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट्स की उच्च शुद्धता सुनिश्चित करने के लिए भी। इस प्रोटोकॉल में मानव आईपीएससी व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट कार्यक्षमता, अन्य विन्यास, या स्वचालित का अध्ययन करने के लिए चार विशिष्ट तकनीकें शामिल हैं कि कार्डियक आयनिक धाराओं का अध्ययन करना है जो कार्डियक में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं

Research

JoVE Journal

Medicine

Formation of Human Prostate Epithelium Using Tissue Recombination of Rodent Urogenital Sinus Mesenchyme and Human Stem Cells

कृंतक Urogenital साइनस mesenchyme और मानव स्टेम सेल के ऊतक पुनर्संयोजन का प्रयोग मानव प्रोस्टेट उपकला का गठन

Progress in prostate cancer research is severely  limited by the availability of human-derived and hormone-na&iuml;ve model systems,  which limit our ...

Isolation and Functional Characterization of Human Ventricular Cardiomyocytes from Fresh Surgical Samples

ताजा सर्जिकल नमूने से अलगाव और मानव निलय cardiomyocytes की कार्यात्मक विशेषता

Cardiomyocytes from diseased hearts are subjected to complex remodeling processes involving changes in cell structure, excitation contraction coupling and ...

Tissue-simulating Phantoms for Assessing Potential Near-infrared Fluorescence Imaging Applications in Breast Cancer Surgery

स्तन कैंसर सर्जरी में क्षमता के पास अवरक्त प्रतिदीप्ति इमेजिंग अनुप्रयोगों का आकलन के लिए Phantoms ऊतक का अनुकरण

Inaccuracies in intraoperative tumor localization and evaluation of surgical margin status result in suboptimal outcome of breast-conserving surgery ...

Multi-electrode Array Recordings of Human Epileptic Postoperative Cortical Tissue

मानव मिरगी पश्चात cortical ऊतक की बहु इलेक्ट्रोड सरणी रिकॉर्डिंग

Epilepsy, affecting about 1% of the population, comprises a group of neurological disorders characterized by the periodic occurrence of seizures, which ...

Generation of Induced Pluripotent Stem Cells from Muscular Dystrophy Patients: Efficient Integration-free Reprogramming of Urine Derived Cells

पेशी Dystrophy रोगियों से प्रेरित pluripotent स्टेम सेल की पीढ़ी: मूत्र ली गई कोशिकाओं के कुशल एकीकरण मुक्त Reprogramming

Dystrophic cardiomyopathy is a poorly understood consequence of muscular dystrophy. Generating induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs) from patients with ...

Rapid and Efficient Generation of Recombinant Human Pluripotent Stem Cells by Recombinase-mediated Cassette Exchange in the AAVS1 Locus

Rapid and Efficient Generation of Recombinant Human Pluripotent Stem Cells by Recombinase-mediated Cassette Exchange in the AAVS1 Locus

में Recombinase की मध्यस्थता कैसेट्स एक्सचेंज द्वारा पुनः संयोजक मानव स्टेम कोशिकाओं का तेजी से और कुशल उत्पादन<em&gt; AAVS1</em&gt; लोकस

Even with the revolution of gene-targeting technologies led by CRISPR-Cas9, genetic modification of human pluripotent stem cells&#160;(hPSCs)&#160;is ...

Targeted and Selective Treatment of Pluripotent Stem Cell-derived Teratomas Using External Beam Radiation in a Small-animal Model

Pluripotent स्टेम सेल के लक्षित और चयनात्मक उपचार एक छोटे जानवर मॉडल में बाहरी बीम विकिरण का उपयोग कर Teratomas व्युत्पंन

The growing number of victims of &#34;stem cell tourism,&#34; the unregulated transplantation of stem cells worldwide, has raised concerns about the ...

Sarcomere Shortening of Pluripotent Stem Cell-Derived Cardiomyocytes using Fluorescent-Tagged Sarcomere Proteins.

सारकोमेरे फ्लोरोसेंट-टैग किए गए सारकोमेरे प्रोटीन का उपयोग करके प्लुरिपोटेंट स्टेम सेल-व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट्स का छोटा होना।

Pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes (PSC-CMs) can be produced from both embryonic and induced pluripotent stem (ES/iPS) cells. These cells ...

Directed Induction of Retinal Organoids from Human Pluripotent Stem Cells

मानव प्लुरिपोटेंट स्टेम कोशिकाओं से रेटिना ऑर्गेनोइड्स का निर्देशित प्रेरण

Retinal cell transplantation is a promising therapeutic approach, which could restore the retinal architecture and stabilize or even improve the visual ...

Microelectrode Array Recording of Sinoatrial Node Firing Rate to Identify Intrinsic Cardiac Pacemaking Defects in Mice

चूहों में आंतरिक हृदय गतिमान दोषों की पहचान करने के लिए सिनोट्रायल नोड फायरिंग रेट की माइक्रोइलेक्ट्रोड सरणी रिकॉर्डिंग

The sinoatrial node (SAN), located in the right atrium, contains the pacemaker cells of the heart, and dysfunction of this region can cause tachycardia or ...