Name: construction of cyclic cell-penetrating peptides for enhanced penetration of biological barriers
Uploaded: 2022-09-19T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Construction of Cyclic Cell-Penetrating Peptides for Enhanced Penetration of Biological Barriers at JoVE.com

यह काम चीन के प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (21708031), चीन पोस्टडॉक्टरल साइंस फाउंडेशन (बीएक्स 20180264, 2018 एम 643519), और केंद्रीय विश्वविद्यालयों के लिए मौलिक अनुसंधान निधि (2682021 जेडटीपीवाई075) द्वारा समर्थित है।

1. उपकरण तैयार करना
नोट: उपयुक्त व्यक्तिगत सुरक्षा उपकरण के साथ एक ऑपरेटिंग फ्यूम हुड में सभी प्रक्रियाओं को पूरा करें।
<ol><li>फ्यूम हुड में मैनुअल पेप्टाइड संश्लेषण तंत्र को इकट्ठा करें...

<ol>
	<li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain-targeted+dual+site-selective+functionalized+poly(&#946;-amino+esters)+delivery+platform+for+nerve+regeneration.">Brain-targeted dual site-selective functionalized poly(&#946;-amino esters) delivery platform for nerve regeneration.</a> Nano Letters. 21 (7), 3007-3015 (2021).</li><li>Park, T. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+BBB+permeability+of+osmotically+active+poly(mannitol-co-PEI)+modified+with+rabies+virus+glycoprotein+via+selective+stimulation+of+caveolar+endocytosis+for+RNAi+therapeutics+in+Alzheimer's+disease.">Enhanced BBB permeability of osmotically active poly(mannitol-co-PEI) modified with rabies virus glycoprotein via selective stimulation of caveolar endocytosis for RNAi therapeutics in Alzheimer's disease.</a> Biomaterials. 38, 61-71 (2015).</li><li>Bian, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+cell-based+intercellular+delivery+of+transcription+factor+GATA4+on+ischemic+cardiomyopathy.">Effect of cell-based intercellular delivery of transcription factor GATA4 on ischemic cardiomyopathy.</a> Circulation Research. 100 (11), 1626-1633 (2007).</li><li>He, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+low+molecular+weight+protamine+chemical+chimera+to+enhance+monomeric+insulin+intestinal+absorption.">The use of low molecular weight protamine chemical chimera to enhance monomeric insulin intestinal absorption.</a> Biomaterials. 34 (31), 7733-7743 (2013).</li><li>Kim, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+specific+STAT3-binding+peptide+exerts+antiproliferative+effects+and+antitumor+activity+by+inhibiting+STAT3+phosphorylation+and+signaling.">A specific STAT3-binding peptide exerts antiproliferative effects and antitumor activity by inhibiting STAT3 phosphorylation and signaling.</a> Cancer Research. 74 (8), 2144-2151 (2014).</li><li>Yang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PEGylated+liposomes+with+NGR+ligand+and+heat-activable+cell-penetrating+peptide-doxorubicin+conjugate+for+tumor-specific+therapy.">PEGylated liposomes with NGR ligand and heat-activable cell-penetrating peptide-doxorubicin conjugate for tumor-specific therapy.</a> Biomaterials. 35 (14), 4368-4381 (2014).</li><li>Wei, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracellular+paclitaxel+delivery+facilitated+by+a+dual-functional+CPP+with+a+hydrophobic+hairpin+tail.">Intracellular paclitaxel delivery facilitated by a dual-functional CPP with a hydrophobic hairpin tail.</a> ACS Applied Materials and Interfaces. 13 (4), 4853-4860 (2021).</li><li>Vasan, N., Baselga, J., Hyman, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+view+on+drug+resistance+in+cancer.">A view on drug resistance in cancer.</a> Nature. 575 (7782), 299-309 (2019).</li><li>Cong, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironment-induced+in+situ+self-assembly+of+polymer-peptide+conjugates+that+attack+solid+tumors+deeply.">Microenvironment-induced in situ self-assembly of polymer-peptide conjugates that attack solid tumors deeply.</a> Angewandte Chemie International Edition. 131 (14), 4680-4685 (2019).</li><li>Blanco, E., Shen, H., Ferrari, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+nanoparticle+design+for+overcoming+biological+barriers+to+drug+delivery.">Principles of nanoparticle design for overcoming biological barriers to drug delivery.</a> Nature Biotechnology. 33 (9), 941-951 (2015).</li><li>Tian, Y., Zhou, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+cell-penetrating+peptides+and+their+functionalization+of+polymeric+nanoplatforms+for+drug+delivery.">Advances in cell-penetrating peptides and their functionalization of polymeric nanoplatforms for drug delivery.</a> Wiley Interdisciplinary Reviews. Nanomedicine and Nanobiotechnology. 13 (2), 1-12 (2021).</li><li>Milletti, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-penetrating+peptides:+Classes,+origin,+and+current+landscape.">Cell-penetrating peptides: Classes, origin, and current landscape.</a> Drug Discovery Today. 17 (15-16), 850-860 (2012).</li><li>Turner, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-penetrating+peptide+conjugates+of+peptide+nucleic+acids+(PNA)+as+inhibitors+of+HIV-1+Tat-dependent+trans-activation+in+cells.">Cell-penetrating peptide conjugates of peptide nucleic acids (PNA) as inhibitors of HIV-1 Tat-dependent trans-activation in cells.</a> Nucleic Acids Research. 33 (21), 6837-6849 (2005).</li><li>Tunnemann, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live-cell+analysis+of+cell+penetration+ability+and+toxicity+of+oligo-arginines.">Live-cell analysis of cell penetration ability and toxicity of oligo-arginines.</a> Journal of Peptide Science. 14 (4), 469-476 (2008).</li><li>Shi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stapling+of+short+cell-penetrating+peptides+for+enhanced+tumor+cell-and-tissue+dual-penetration.">Stapling of short cell-penetrating peptides for enhanced tumor cell-and-tissue dual-penetration.</a> Chemical Communications. 58 (14), 2299-2302 (2022).</li><li>Komin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+peptide+for+transcellular+cargo+delivery:+Structure-function+relationship+and+mechanism+of+action.">A peptide for transcellular cargo delivery: Structure-function relationship and mechanism of action.</a> Journal of Controlled Release. 324, 633-643 (2020).</li><li>Dietrich, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+permeable+stapled+peptide+inhibitor+of+Wnt+signaling+that+targets+&#946;-catenin+protein-protein+interactions.">Cell permeable stapled peptide inhibitor of Wnt signaling that targets &#946;-catenin protein-protein interactions.</a> Cell Chemical Biology. 24 (8), 958-968 (2017).</li><li>Tian, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stapling+of+unprotected+helical+peptides+via+photo-induced+intramolecular+thiol-yne+hydrothiolation.">Stapling of unprotected helical peptides via photo-induced intramolecular thiol-yne hydrothiolation.</a> Chemical Science. 7 (5), 3325-3330 (2016).</li><li>De Araujo, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+&#945;-helicity+of+cyclic+pentapeptides+in+water.">Comparative &#945;-helicity of cyclic pentapeptides in water.</a> Angewandte Chemie International Edition. 53 (27), 6965-6969 (2014).</li><li>Chu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Towards+understanding+cell+penetration+by+stapled+peptides.">Towards understanding cell penetration by stapled peptides.</a> Medicinal Chemistry Communications. 6 (1), 111-119 (2015).</li><li>Bock, J. E., Gavenonis, J., Kritzer, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Getting+in+shape:+Controlling+peptide+bioactivity+and+bioavailability+using+conformational+constraints.">Getting in shape: Controlling peptide bioactivity and bioavailability using conformational constraints.</a> ACS Chemical Biology. 8 (3), 488-499 (2013).</li><li>Tian, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+stapling+architecture+on+physiochemical+properties+and+cell+permeability+of+stapled+&#945;-helical+peptides:+A+comparative+study.">Effect of stapling architecture on physiochemical properties and cell permeability of stapled &#945;-helical peptides: A comparative study.</a> ChemBioChem. 18 (21), 2087-2093 (2017).</li><li>White, C. J., Yudin, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contemporary+strategies+for+peptide+macrocyclization.">Contemporary strategies for peptide macrocyclization.</a> Nature Chemistry. 3 (7), 509-524 (2011).</li><li>Jain, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normalization+of+tumor+vasculature:+An+emerging+concept+in+antiangiogenic+therapy.">Normalization of tumor vasculature: An emerging concept in antiangiogenic therapy.</a> Science. 307 (5706), 58-62 (2005).</li><li>Patgiri, A., Menzenski, M. Z., Mahon, A. B., Arora, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solid-phase+synthesis+of+short+&#945;-helices+stabilized+by+the+hydrogen+bond+surrogate+approach.">Solid-phase synthesis of short &#945;-helices stabilized by the hydrogen bond surrogate approach.</a> Nature Protocols. 5 (11), 1857-1865 (2010).</li><li>Baek, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+of+the+stapled+p53+peptide+bound+to+Mdm2.">Structure of the stapled p53 peptide bound to Mdm2.</a> Journal of the American Chemical Society. 134 (1), 103-106 (2012).</li><li>Traboulsi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrocyclic+cell+penetrating+peptides:+A+study+of+structure-penetration+properties.">Macrocyclic cell penetrating peptides: A study of structure-penetration properties.</a> Bioconjugate Chemistry. 26 (3), 405-411 (2015).</li><li>Tian, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+proline-derived+transannular+N-cap+for+nucleation+of+short+&#945;-helical+peptides.">A proline-derived transannular N-cap for nucleation of short &#945;-helical peptides.</a> Chemical Communications. 52 (59), 9275-9278 (2016).</li><li>Muppidi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rational+design+of+proteolytically+stable,+cell-permeable+peptide-based+selective+Mcl-1+inhibitors.">Rational design of proteolytically stable, cell-permeable peptide-based selective Mcl-1 inhibitors.</a> Journal of the American Chemical Society. 134 (36), 14734-14737 (2012).</li><li>Wiradharma, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthetic+cationic+amphiphilic+&#945;-helical+peptides+as+antimicrobial+agents.">Synthetic cationic amphiphilic &#945;-helical peptides as antimicrobial agents.</a> Biomaterials. 32 (8), 2204-2212 (2011).</li><li>Jones, A. T., Sayers, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+entry+of+cell+penetrating+peptides:+Tales+of+tails+wagging+dogs.">Cell entry of cell penetrating peptides: Tales of tails wagging dogs.</a> Journal of Controlled Release. 161 (2), 582-591 (2012).</li></ol>

संवहन बाधाओं को शामिल करके पेप्टाइड्स का रासायनिक स्थिरीकरण पेप्टाइड26 की स्थिरता और सेल पारगम्यता में सुधार के लिए एक प्रभावी रणनीति साबित हुई है। इस प्रोटोकॉल में, सुगंधित क्रॉस-लिंक के सा?...

पिछले कुछ दशकों में दवा वितरण के लिए सेल-पेनिट्रेटिंग पेप्टाइड्स (सीपीपी) के विकास में तेजी से प्रगति देखी गई है। सीपीपी का व्यापक रूप से जीवन-धमकाने वाली बीमारियों की एक श्रृंखला के उपचार के लिए आणविक ट्रांसपोर्टरों के रूप में उपयोग किया गया है, जिसमें न्यूरोलॉजिकल विकार 1,2, हृदय रोग 3, मधुमेह4, डर्मेटोसिस5 और कैंसर 6,7 शामिल हैं। व्यापक अनुसंधान प्रयासों के बावजूद रुग्णता और मृत्यु दर की उच्च दर के साथ कैंसर एक वैश्विक स्वास्थ्य बोझ बना हुआहै। कैंसर के इलाज के लिए एक गंभीर बाधा शारीरिक बाधाओं जैसे कॉम्पैक्ट बाह्य मैट्रिक्स (ईसीएम), असामान्य ट्यूमर वाहिका, कई झिल्ली बाधाओं और उच्च अंतरालीय द्रव दबाव (आईएफपी) 9 के कारण गहरी ट्यूमर कोशिकाओं के लिए चिकित्सीय की सीमित पहुंच है। इस प्रकार, जैविक बाधाओं के पार कार्गो वितरित करने की बेहतर क्षमता के साथ नए सीपीपी विकसित करनाकैंसर के उपचार के लिए एक आवश्यक रणनीति माना जाता है।
सीपीपी को उनके भौतिक रासायनिक गुणों के संदर्भ में धनिक, एम्फीपैथिक और हाइड्रोफोबिक सीपीपी में वर्गीकृत किया जा सकताहै। इनमें से, सकारात्मक रूप से चार्ज किए गए एचआईवी-टीएटी पेप्टाइड और सिंथेटिक पॉलीआर्जिनिन बायोमेडिकल अनुसंधान में काफी महत्व रखते हैं और इंट्रासेल्युलर दवा वितरणकी सुविधा के लिए बड़े पैमाने पर अध्ययन किया गया है। टुनेमैन एट अल ने बताया कि सिंथेटिक पॉलीआर्जिनिन पेप्टाइड्स के कुशल सेल प्रवेश के लिए आठ आर्जिनिन की न्यूनतम लंबाई आवश्यक है, जो आर 3 से आर 12 पेप्टाइड्स14 का उपयोग करके किए गए सेल पारगम्यता अध्ययन पर आधारित है। हालांकि, इन सीपीपी में आमतौर पर विवो में उनके तेजी से हाइड्रोलिसिस के कारण कम प्लाज्मा आधा जीवन होता है। इसके अलावा, सीपीपी की रासायनिक संरचना के अनुकूलन के बारे में बहुत कम जाना जाता है ताकि उनकी ट्रांस-बैरियर क्षमता बढ़ सके क्योंकि कई कोशिका झिल्ली15 में प्रवेश करना चुनौतीपूर्ण है। इस प्रकार, जैविक बाधाओं को भेदने में सक्षम नए आणविक ट्रांसपोर्टरों का विकास दवा वितरण दक्षता को बढ़ाने के लिए दृढ़ता से वांछित है। 2020 में, कोमिन एट अल.16 ने सीएल पेप्टाइड नामक एक सीपीपी की खोज की, जिसमें उपकला मोनोलेयर को पार करने के लिए एक हेलिक्स मोटिफ (आरएलएलआरएलआर) और एक पॉलीआर्जिनिन पूंछ (आर 7) शामिल है। हेलिकल पैटर्न को बदलकर सीएल पेप्टाइड वेरिएंट का एक सेट भी संश्लेषित किया गया था। यह अन्वेषण जैविक बाधाओं के पार कार्गो के वितरण के लिए नए सीपीपी के विकास के लिए एक महत्वपूर्ण मार्गदर्शिका हो सकती है। इसके अलावा, डाइटरिच एट अल ने स्टैक्स पेप्टाइड की सेल पारगम्यता को अनुकूलित किया, पेप्टाइड्स17 की समग्र हाइड्रोफोबिसिटी को बढ़ाकर डब्ल्यूएनटी / β-कैटेनिन सिग्नलिंग मार्ग को रोक दिया।
साइक्लाइजेशन द्वारा असंरचित रैखिक पेप्टाइड्स का विरूपण प्रतिबंध उनकी प्रोटियोलिटिक स्थिरता और पारगम्यता 18,19,20 को बढ़ाने का एक प्रभावी तरीका है। संरचनात्मक सुदृढीकरण चक्रीय पेप्टाइड्स के प्रोटीज प्रतिरोध को बढ़ाता है, जिससे वे अपने रैखिक समकक्षों की तुलना में विवो में अधिक स्थिर हो जाते हैं। इसके अलावा, पेप्टाइड्स का साइक्लाइजेशन इंट्रामोलेक्यूलर हाइड्रोजन बॉन्डिंग को बढ़ावा देकर ध्रुवीय पेप्टाइड बैकबोन को संभावित रूप से मुखौटा कर सकता है, इस प्रकार पेप्टाइड्स21 की झिल्ली पारगम्यता को बढ़ा सकता है। पिछले दो दशकों में, केमोसेलेक्टिव साइक्लाइजेशन विधियां विभिन्न आर्किटेक्चर के साथ चक्रीय पेप्टाइड्स के निर्माण के लिए प्रभावी रणनीतिबन गई हैं, जैसे कि ऑल-हाइड्रोकार्बन, लैक्टम, ट्रायज़ोल, एम-जाइलीन, परफ्लोरोएरिल, और अन्य क्रॉस-लिंक22,23। परिष्कृत ट्यूमर माइक्रोएन्वायरमेंट द्वारा लगाए गए जैविक अवरोध ठोस ट्यूमर24 में दवाओं के प्रवेश को कम कर सकते हैं। हमने पहले पाया है कि चक्रीय सीपीपी ने अपने रैखिक समकक्षों20 पर एंजाइमेटिक पाचन के लिए बेहतर प्रतिरोध प्रदर्शित किया। इसके अलावा, पेप्टाइड्स की समग्र हाइड्रोफोबिसिटी उनकी बढ़ी हुई सेल पारगम्यता22 के लिए महत्वपूर्ण है। ऊपर चर्चा किए गए अध्ययनों के आधार पर, जैविक बाधाओं में सीपीपी की पारगम्यता को बढ़ाने के लिए सकारात्मक रूप से चार्ज किए गए पैटर्न, ऊंचा समग्र हाइड्रोफोबिसिटी और बढ़ी हुई प्रोटियोलिसिस स्थिरता के संयोजन की परिकल्पना की जा सकती है। हाल के एक अध्ययन में, हमने पदों I और i + 7 पर सुगंधित क्रॉसलिंक के साथ दो चक्रीय CPPs की पहचान की जो उनके रैखिक समकक्षों15 की तुलना में ट्यूमर कोशिकाओं और ऊतकों में बेहतर पारगम्यता प्रदर्शित करते हैं। यहां, फ्लोरोसेंटली लेबल चक्रीय सीपीपी के संश्लेषण के लिए एक संक्षिप्त सिंथेटिक प्रोटोकॉल और उनकी पारगम्यता की जांच करने के लिए महत्वपूर्ण कदम प्रस्तुत किए गए हैं।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1,2-ethanedithiol</td>
			<td>Aladdin</td>
			<td>K1722093</td>
			<td>stench</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-(7-Azobenzotriazole)-N,N,N&#39;,N&#39;-tetramethyluronium hexafluorophosphate (HATU)</td>
			<td>HEOWNS</td>
			<td>A-0443697</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4,4&#39;-bis(bromomethyl)biphenyl</td>
			<td>TCI</td>
			<td>B1921</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4T1 cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td></td>
			<td>4T1 cells were cultured in DMEM medium supplemented with 10% FBS (Hyclone) in a 37 &#176;C humidified incubator containing 5% CO2.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile&#160;</td>
			<td>Adamas</td>
			<td>1484971</td>
			<td>toxicity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloromethane</td>
			<td>Energy</td>
			<td>W330229</td>
			<td>skin harmful</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diethyl ether</td>
			<td>Aldrich</td>
			<td>673811</td>
			<td>flammable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>ST038</td>
			<td>skin harmful</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Modified Eagle Medium (DMEM)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrospray Ionization Mass Spectrometer</td>
			<td>Waters</td>
			<td>G2-S Tof</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethylene Diamine Tetraacetic Acid (EDTA)</td>
			<td>BioFroxx</td>
			<td>1340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>HyClone</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow cytometer</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>CytoFLEX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescein isothiocyanate isomer (FITC)</td>
			<td>Energy</td>
			<td>E0801812500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescent microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>Axio Observer 7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fmoc-Arg(Pbf)-OH</td>
			<td>HEOWNS</td>
			<td>F-81070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fmoc-Cys(Trt)-OH</td>
			<td>GL Biochem</td>
			<td>GLS201115-35202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fmoc-&#946;Ala-OH</td>
			<td>Adamas</td>
			<td>51341C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HeLa cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td></td>
			<td>HeLa cells were cultured in DMEM supplemented with 10% FBS (Hyclone) in a 37 &#176;C humidified incubator containing 5% CO2.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-Performance Liquid Chromatography</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>Agilent 1260</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-Performance Liquid Chromatography column</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>Poroshell EC-C18 120, 4.6 &#215; 150 mm (pore size 120 &#197;, particle size 4 &#956;m)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lyophilizer</td>
			<td>SP Scientific</td>
			<td>Vir Tis</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Aldrich</td>
			<td>9758</td>
			<td>toxicity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtiter plate</td>
			<td>Thermo &#956;drop plate</td>
			<td>N12391</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Morpholine</td>
			<td>HEOWNS</td>
			<td>M99040</td>
			<td>irritant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi-technology microplate reader</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>VARIOSKAN LUX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-Diisopropylethylamine</td>
			<td>HEOWNS</td>
			<td>E-81416</td>
			<td>irritant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-Dimethyl formamide</td>
			<td>Energy</td>
			<td>B020051</td>
			<td>harmful to skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-Prep column</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>7321010</td>
			<td>polypropylene chromatography columns</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rink Amide MBHA resin (0.572 mmol/g)</td>
			<td>GL Biochem</td>
			<td>GLS180301-49101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Three-way stopcocks</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>7328107</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture plate insert</td>
			<td>LABSELECT</td>
			<td>14211</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trifluoroacetic acid</td>
			<td>HEOWNS</td>
			<td>T63278</td>
			<td>corrosive</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triisopropylsilane</td>
			<td>HEOWNS</td>
			<td>T-0284475</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>BioFroxx</td>
			<td>1004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum manifold</td>
			<td>Promega</td>
			<td>A7231</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

construction of cyclic cell-penetrating peptides for enhanced penetration of biological barriers

कैंसर वैश्विक स्वास्थ्य में एक बड़ी चुनौती रहा है। हालांकि, जटिल ट्यूमर माइक्रोएन्वायरमेंट आम तौर पर गहरे ट्यूमर कोशिकाओं तक चिकित्सीय पहुंच को सीमित करता है, जिससे ट्यूमर पुनरावृत्ति होती है। जैविक बाधाओं के सीमित प्रवेश पर विजय प्राप्त करने के लिए, सेल-पेनिट्रेटिंग पेप्टाइड्स (सीपीपी) को उत्कृष्ट झिल्ली स्थानांतरण क्षमता के साथ खोजा गया है और कोशिकाओं में विभिन्न कार्गो पहुंचाने के लिए उपयोगी आणविक ट्रांसपोर्टरों के रूप में उभरे हैं। हालांकि, पारंपरिक रैखिक सीपीपी आम तौर पर प्रोटियोलिटिक स्थिरता से समझौता करते हैं, जो जैविक बाधाओं में उनकी पारगम्यता को सीमित करता है। इस प्रकार, नवीन आणविक ट्रांसपोर्टरों का विकास जो जैविक बाधाओं को भेद सकता है और बढ़ी हुई प्रोटियोलिटिक स्थिरता प्रदर्शित कर सकता है, बायोमेडिकल अनुप्रयोगों में दवा वितरण दक्षता को बढ़ावा देने के लिए अत्यधिक वांछित है। हमने पहले सुगंधित क्रॉसलिंक के साथ लघु चक्रीय सीपीपी के एक पैनल को संश्लेषित किया है, जिसने अपने रैखिक समकक्षों की तुलना में कैंसर कोशिकाओं और ऊतकों में बेहतर पारगम्यता प्रदर्शित की है। यहां, फ्लोरोसेंटली लेबल चक्रीय पॉलीआर्जिनिन आर 8 पेप्टाइड और इसके रैखिक समकक्ष के संश्लेषण के लिए एक संक्षिप्त प्रोटोकॉल का वर्णन किया गया है, साथ ही साथ उनकी सेल पारगम्यता की जांच के लिए महत्वपूर्ण कदम भी हैं।

इस प्रोटोकॉल में, रैखिक पॉलीआर्जिनिन आर 8 को इसके चक्रीय रूप में बाधित करने के लिए एक सिंथेटिक प्रक्रिया प्रस्तुत की गई थी। एसपीपीएस को एक सरल उपकरण (चित्रा 1) का उपयोग करके मैन्युअल रूप से आय?...

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Construction of Cyclic Cell-Penetrating Peptides for Enhanced Penetration of Biological Barriers

यह प्रोटोकॉल सुगंधित क्रॉस-लिंक के साथ चक्रीय सेल-पेनिट्रेटिंग पेप्टाइड्स के संश्लेषण और जैविक बाधाओं में उनकी पारगम्यता के मूल्यांकन का वर्णन करता है।

जैविक बाधाओं के बढ़े हुए प्रवेश के लिए चक्रीय सेल-पेनिट्रेटिंग पेप्टाइड्स का निर्माण

Cancer has been a grand challenge in global health. However, the complex tumor microenvironment generally limits the access of therapeutics to deeper ...

कैंसर के उपचार के लिए एक गंभीर बाधा शारीरिक बाधाओं के कारण गहरी ट्यूमर कोशिकाओं के लिए चिकित्सीय की सीमित पहुंच है। इस प्रकार, जैविक बाधाओं का इलाज करने में सक्षम नए आणविक ट्रांसपोर्टरों का विकास दवा वितरण दक्षता को बढ़ाने के लिए दृढ़ता से वांछित है। इस प्रक्रिया का उद्देश्य बढ़े हुए सेल-टू-सेल प्रवेश के लिए चक्रीय सेल-पेनिट्रेटिंग पेप्टाइड्स को संश्लेषित करना है।इस विधि का लाभ यह है कि पेप्टाइड साइक्लाइजेशन को किसी भी धातु उत्प्रेरक की आवश्यकता के बिना सिस्टीन और राल के साथ प्रतिस्थापन प्रतिक्रियाओं के माध्यम से आसानी से प्राप्त किया जा सकता है। सुगंधित क्रॉस-लिंक का समावेश हाइड्रोफिलिक लैक्टम या ट्रायज़ोल क्रॉस-लिंक की तुलना में पेप्टाइड्स की समग्र हाइड्रोफोबिसिटी में सुधार करता है, जिससे उनकी पारगम्यता बढ़ जाती है। शुरू करने के लिए, फ्यूम हुड में मैनुअल पेप्टाइड संश्लेषण तंत्र को इकट्ठा करें।वैक्यूम पर तीन-तरफा स्टॉपकॉक को कई गुना रखें और उन्हें नाइट्रोजन से कनेक्ट करें। अप्रयुक्त इनलेट्स को कैप करना सुनिश्चित करें। तीन-तरफा स्टॉपकॉक पर एक 10-मिलीलीटर पॉलीप्रोपाइलीन कॉलम संलग्न करें और रबर पिपेट बल्ब या अपशिष्ट जाल के माध्यम से वैक्यूम का उपयोग करके पॉलीप्रोपाइलीन कॉलम से प्रतिक्रिया मिश्रण या सॉल्वैंट्स को निकालें।पेप्टाइड संश्लेषण के लिए राल तैयार करने के लिए, राल की आवश्यक मात्रा में 4 से 5 मिलीलीटर डीएमएफ जोड़ें और राल को पर्याप्त रूप से सूजने के लिए 30 मिनट के लिए सौम्य नाइट्रोजन बुदबुदाहट के साथ पॉलीप्रोपाइलीन कॉलम में स्थानांतरित करें। डीएमएफ को छान लें और राल में 50% मोर्फोलिन / डीएमएफ के 4 से 5 मिलीलीटर जोड़ें। एन-टर्मिनल एफएमओसी समूह को हटाने के लिए 30 मिनट के लिए धीरे से नाइट्रोजन का बुलबुला करें, और फिर मिश्रण को सूखा दें।कॉलम में डीएमएफ के 4 से 5 मिलीलीटर जोड़कर राल को तीन बार अच्छी तरह से धोएं और हर बार कम से कम 1 मिनट के लिए नाइट्रोजन के साथ बुदबुदाएं। इसी तरह राल को डाइक्लोरोमीथेन से तीन बार और डीएमएफ से तीन बार धोएं। इसके बाद, सेंट्रीफ्यूज ट्यूब में 5 मिलीलीटर डीएमएफ में 648.8 मिलीग्राम एफएमओसी और पीबीएफ-संरक्षित आर्जिनिन और 372.6 मिलीग्राम एचएटीयू घोलें।युग्मन प्रतिक्रिया को सक्रिय करने के लिए डीआईपीईए के 348.4 माइक्रोलीटर जोड़ें, और प्रतिक्रिया मिश्रण को राल के साथ पॉलीप्रोपाइलीन कॉलम में स्थानांतरित करें। धीरे से मिश्रण को 1 से 2 घंटे के लिए नाइट्रोजन बुदबुदाहट के साथ उत्तेजित करें, और फिर युग्मन प्रतिक्रिया को एक बार दोहराएं। प्रतिक्रिया मिश्रण को छानलें और राल को डीएमएफ, डाइक्लोरोमेथेन और फिर डीएमएफ के साथ क्रमिक रूप से धोएं, प्रत्येक बार कम से कम 1 मिनट के लिए।एफएमओसी-सुरक्षा समूह को हटा दें और अगले एमिनो एसिड को जोड़ने से पहले पहले दिखाई गई प्रक्रिया का पालन करते हुए राल को धो लें। इसके बाद, एमिनो एसिड युग्मन के लिए दिखाए गए समान प्रक्रिया का उपयोग करके एफआईटीसी लेबलिंग के लिए एक स्पेसर के रूप में बीटा-एलानिन को जोड़ा जाए, और फिर राल पर पेप्टाइड्स के एफआईटीसी लेबलिंग करने के लिए अंधेरे में पॉलीप्रोपाइलीन कॉलम में एफआईटीसी, डीआईपीईए और डीएमएफ का मिश्रण जोड़ें। प्रतिक्रिया में लगभग 8 घंटे लगेंगे।रैखिक पेप्टाइड के चक्रीकरण को करने के लिए, सिस्टीन के ट्राइटिल-रक्षक समूह को चुनिंदा रूप से हटाने के लिए पॉलीप्रोपाइलीन कॉलम में 2 मिनट के लिए ट्राइफ्लोरोएसेटिक एसिड, ट्राइसोप्रोपिलसिलेन और डाइक्लोरोमेथेन का मिश्रण जोड़ें। मिश्रण को छान लें और प्रक्रिया को तब तक दोहराएं जब तक कि पीले रंग का घोल ट्रिटिल-प्रोटेक्टिंग समूह को पूरी तरह से हटाने के लिए रंगहीन न हो जाए। डीएमएफ और डाइक्लोरोमेथेन के साथ राल के अनुक्रमिक वॉश कम से कम तीन बार करें और डीआईपीईए के साथ डीएमएफ में 4, 4'बिस-ब्रोमोमिथाइल-बाइफिनाइल को भंग करें।कॉलम में समाधान जोड़ें और 4 घंटे के लिए प्रतिक्रिया करें। राल को 4 से 5 मिलीलीटर मेथनॉल के साथ पांच मिनट के लिए दो बार धोएं, और इसे नाइट्रोजन के निरंतर प्रवाह के साथ सुखाएं। सिस्टीन युक्त पेप्टाइड्स के लिए, राल को ट्राइफ्लोरोएसिटिक एसिड, ट्राइसोप्रोपिलसिलेन, और पानी या ट्राइफ्लोरोएसिटिक एसिड, ट्राइसोप्रोपिलसिलेन, 1, 2-एथेनडिथिओल और पानी के प्रभावी क्लीवेज कॉकटेल के साथ इलाज करें।पेप्टाइड को छोड़ने के लिए पेप्टाइड-बाध्य राल का 2 से 3 घंटे तक इलाज करें, और फिर नाइट्रोजन की धारा के साथ ट्राइफ्लोरोएसिटिक एसिड को सावधानीपूर्वक हटा दें। क्रूड पेप्टाइड्स प्राप्त करने के लिए, क्रूड पेप्टाइड्स को अवक्षेपित करने के लिए क्लीवर पेप्टाइड तैयारी में 4 से 5 मिलीलीटर डायथाइल ईथर जोड़ें, और 4 मिनट के लिए 10,000 x g पर सेंट्रीफ्यूज करें। सुपरनैटेंट को सावधानीपूर्वक छोड़ दें और पेप्टाइड को 3 मिनट के लिए एक प्रभावी फ्यूम हुड में हवा से सुखाएं।एसिटोनिट्राइल के 800 माइक्रोलीटर में छोटे पैमाने पर कच्चे पेप्टाइड को भंग करें, और फिर रिवर्स-चरण उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी और तरल क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री का उपयोग करके इसका विश्लेषण करें। एक टिशू कल्चर प्लेट डालने के साथ 12-वेल चैंबर में डीएमईएम के 2 मिलीलीटर में 100,000 हेला कोशिकाओं को टीका लगाएं, और 5% कार्बन डाइऑक्साइड वाले 37 डिग्री सेल्सियस ह्यूमिडिफाइड इनक्यूबेटर में 24 घंटे के लिए इनक्यूबेट करें। माध्यम को हटा दें और कक्षों में कोशिकाओं को 1 घंटे के लिए एफबीएस-मुक्त डीएमईएम में 10 माइक्रोमोलर एफआईटीसी-आर 8 या एफआईटीसी-एसआर 8-4 के 1 मिलीलीटर के साथ इनक्यूबेट करें।उसके बाद, पेप्टाइड्स युक्त माध्यम को हटा दें और 1 मिलीलीटर पीबीएस के साथ कोशिकाओं को तीन बार धोएं। कक्षों में ताजा एफबीएस-मुक्त डीएमईएम का 1 मिलीलीटर जोड़ें, और फिर ऊतक संस्कृति प्लेट डालने के साथ कक्ष में हेला कोशिकाओं को सह-इनक्यूबेट करें, जिसमें हेला कोशिकाओं को 2 घंटे के लिए नीचे गोल कवरलिप्स पर रखा जाए। हेला कोशिकाओं को 15 मिनट के लिए 2.5% ग्लूटारल्डिहाइड के साथ गोल कवरलिप्स पर ठीक करें, और फिर 15 मिनट के लिए डीएपीआई के साथ कोशिकाओं को दाग दें।अंत में, एक प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप के तहत कवरलिप्स पर हेला कोशिकाओं का निरीक्षण करें। एफआईटीसी-लेबल रैखिक आर 8 पेप्टाइड और एफआईटीसी-लेबल स्टेपल आर 8 पेप्टाइड के संश्लेषण का एक योजनाबद्ध आरेख यहां प्रस्तुत किया गया है। रैखिक आर 8 पेप्टाइड और स्टेपल आर 8 पेप्टाइड के एचपीएलसी और एमएस स्पेक्ट्रा इस आंकड़े में दिखाए गए हैं।स्टेपल पेप्टाइड का अवधारण समय रैखिक एनालॉग की तुलना में काफी लंबा था, जो हाइड्रोफोबिक क्रॉस-लिंक के साथ साइक्लाइजेशन के बाद पेप्टाइड की एक बढ़ी हुई समग्र हाइड्रोफोबिसिटी का संकेत देता है। यह ग्राफिकल छवि 25% एफबीएस की उपस्थिति में रैखिक पेप्टाइड और स्टेपल पेप्टाइड की स्थिरता का प्रतिनिधित्व करती है। 4 घंटे तक एफबीएस के साथ इनक्यूबेशन के बाद चक्रीय आर 8 77.3% बरकरार रहता है, जबकि इसका रैखिक समकक्ष ज्यादातर अवक्रमित हो गया था, जो चक्रीय आर 8 पेप्टाइड की बढ़ी हुई प्रोटियोलिटिक स्थिरता का सुझाव देता है।3 माइक्रोमोलर एफआईटीसी-लेबल रैखिक आर 8 पेप्टाइड और एफआईटीसी-लेबल स्टेपल आर 8 पेप्टाइड के साथ 1 घंटे के इनक्यूबेशन के बाद हेला कोशिकाओं और 4 टी 1 कोशिकाओं की लाइव-सेल फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी छवियां यहां दिखाई गई हैं। यह देखा जा सकता है कि सुगंधित क्रॉस-लिंक के साथ चक्रीय आर 8 के साथ इलाज की गई कोशिकाओं ने अपने रैखिक समकक्ष के साथ इलाज किए गए लोगों की तुलना में उच्च इंट्रासेल्युलर फ्लोरेसेंस का प्रदर्शन किया। इसी तरह के परिणाम प्रवाह साइटोमेट्री विश्लेषण के साथ प्राप्त किए गए थे।आगे की जांच करने के लिए कि क्या चक्रीय आर 8 सेल-टू-सेल प्रवेश को बढ़ाता है, ट्रांसवेल मॉडल का उपयोग पेप्टाइड्स की बाधा पारगम्यता को एक सेल परत से दूसरे में अनुकरण करने के लिए किया गया था। चक्रीय आर 8 ने स्पष्ट रूप से रैखिक आर 8 पेप्टाइड की तुलना में उच्च ट्रांस-बैरियर प्रवेश का प्रदर्शन किया, जैसा कि इंट्रासेल्युलर फ्लोरेसेंस में उल्लेखनीय वृद्धि से संकेत मिलता है। निम्नलिखित साइक्लाइजेशन चरण के लिए सिस्टीन और राल के ट्राइटिल समूह का पूर्ण विघटन महत्वपूर्ण है।इसके अलावा, साइक्लाइजेशन दक्षता स्टेरिक प्रभावों के कारण विशिष्ट अनुक्रमों और पेप्टाइड्स की लंबाई पर भी निर्भर करती है। ऐसे मामले में, कम लोडिंग क्षमता वाले राल का उपयोग करना या समाधान चरण में पतला सांद्रता के तहत पेप्टाइड्स का चक्रीकरण सहायक होगा। इन चक्रीय पेप्टाइड्स ने अपने रैखिक समकक्षों की तुलना में एक बढ़ी हुई सेल-टू-सेल पारगम्यता दिखाई।हमारा मानना है कि वे जैविक बाधाओं पर विजय प्राप्त करने के लिए महान वादा करते हैं और दवा वितरण के क्षेत्र में आगे के अनुप्रयोगों के लिए आणविक के लिए उपयोग किया जाएगा।

Research

JoVE Journal

Chemistry

Microwave-assisted Functionalization of Poly(ethylene glycol) and On-resin Peptides for Use in Chain Polymerizations and Hydrogel Formation

Microwave-assisted Functionalization of Polyethylene glycol and On-resin Peptides for Use in Chain Polymerizations and Hydrogel Formation

माइक्रोवेव की सहायता पाली के functionalization (इथाइलीन ग्लाइकॉल) और चैन Polymerizations और hydrogel संरचना में प्रयोग के लिए राल पेप्टाइड्स

One of the main benefits to using poly(ethylene glycol) (PEG) macromers in hydrogel formation is synthetic versatility. The ability to draw from a large ...

Formation of Ordered Biomolecular Structures by the Self-assembly of Short Peptides

लघु पेप्टाइड्स के आत्म विधानसभा के हिसाब से Biomolecular संरचनाओं के गठन

In nature, complex functional structures are formed by the self-assembly of biomolecules under mild conditions. Understanding the forces that control ...

Preparation of Hydrophobic Metal-Organic Frameworks via Plasma Enhanced Chemical Vapor Deposition of Perfluoroalkanes for the Removal of Ammonia

प्लाज्मा के माध्यम से हाइड्रोफोबिक धातु कार्बनिक चौखटे की तैयारी अमोनिया के लिए निकालना Perfluoroalkanes के रासायनिक वाष्प जमाव बढ़ी

Plasma enhanced chemical vapor deposition (PECVD) of perfluoroalkanes has long been studied for tuning the wetting properties of surfaces. For high ...

Preparation of Highly Porous Coordination Polymer Coatings on Macroporous Polymer Monoliths for Enhanced Enrichment of Phosphopeptides

Phosphopeptides की बढ़ी संवर्धन के लिए Macroporous पॉलिमर Monoliths पर अत्यंत झरझरा समन्वय बहुलक कोटिंग्स की तैयारी

We describe a protocol for the preparation of hybrid materials based on highly porous coordination polymer coatings on the internal surface of macroporous ...

A Filter-based Surface Enhanced Raman Spectroscopic Assay for Rapid Detection of Chemical Contaminants

एक फिल्टर आधारित सतह रासायनिक contaminants के तेजी से पता लगाने के लिए बढ़ी रमन स्पेक्ट्रोस्कोपी परख

We demonstrate a method to fabricate highly sensitive surface-enhanced Raman spectroscopic (SERS) substrates using a filter syringe system that can be ...

Construction of Models for Nondestructive Prediction of Ingredient Contents in Blueberries by Near-infrared Spectroscopy Based on HPLC Measurements

नियर-इन्फ्रारेड स्पेक्ट्रोस्कोपी द्वारा ब्लूबेरी में संघटक सामग्री की Nondestructive भविष्यवाणी के लिए मॉडल के निर्माण एचपीएलसी माप के आधार पर

Nondestructive prediction of ingredient contents of farm products is useful to ship and sell the products with guaranteed qualities. Here, near-infrared ...

Synthesis of Cyclic Polymers and Characterization of Their Diffusive Motion in the Melt State at the Single Molecule Level

चक्रीय पॉलिमर के संश्लेषण और पिघल राज्य में अपने वाचाल मोशन की विशेषता एकल अणु के स्तर पर

We demonstrate a method for the synthesis of cyclic polymers and a protocol for characterizing their diffusive motion in a melt state at the single ...

Insights into the Interactions of Amino Acids and Peptides with Inorganic Materials Using Single-Molecule Force Spectroscopy

एमिनो एसिड और पेप्टाइड्स अकार्बनिक सामग्री के साथ बातचीत में इनसाइट्स एकल अणु बल स्पेक्ट्रोस्कोपी का उपयोग

The interactions between proteins or peptides and inorganic materials lead to several interesting processes. For example, combining proteins with minerals ...

Observation and Analysis of Blinking Surface-enhanced Raman Scattering

अवलोकन और पलक सतह बढ़ाया रमन कैटरिंग का विश्लेषण

From a single molecule at a silver nanoaggregate junction, blinking surface-enhanced Raman scattering (SERS) is observed. Here, a protocol is presented on ...